多西他賽—是一種用于癌癥系統(tǒng)治療中比較有效的抗癌劑。這種化療藥物對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物和人體腫瘤模型的治療非常有效，如轉(zhuǎn)移性乳腺癌、非小細(xì)胞癌以及卵巢癌。多西他賽等紫杉醇類藥物對(duì)胃癌、胰腺癌、黑色素瘤以及頭頸部癌等也有一定療效。

像其他癌癥化療劑一樣，典型地，如紫杉醇、多西他賽等紫杉醇類化合物具有嚴(yán)重毒性。紫杉醇類化合物的主要不足是過敏性休克、骨髓抑制、神經(jīng)毒性，肌肉、關(guān)節(jié)痛等。

減少紫杉醇類化合物毒性的試驗(yàn)，包括聯(lián)合化療(wens等人,2016anti-cancerdrugs)、合成類似物,免疫療法和脂質(zhì)體包埋(reng等人，11/3/2016,drugdeliv.)。相對(duì)于游離形式的劑型，脂質(zhì)體內(nèi)包埋的紫杉醇類藥物的抗腫瘤劑，在保持抗腫瘤活性的同時(shí)，具有較低毒性。

但是，由于生物活性劑的水溶解度低，在水中幾乎不溶，以及低親油性，導(dǎo)致生物活性劑/脂類的比率低，所以難以在脂質(zhì)體或者脂類絡(luò)合物中有效地包載多西他賽。

包含多西他賽的脂質(zhì)體和脂類復(fù)合物還存在另一個(gè)問題——化合物的穩(wěn)定性。特別是在儲(chǔ)存過程中的脂質(zhì)體中生物活性劑效力的持久性和生物活性劑的保持力為公認(rèn)問題(freise等人，1982；gondal等人，1993；potkul等人，1991amjobstetgynecol.164(2):652-658；steerenberg等人，1988；sweiss等人，1993)。

發(fā)明概述

本發(fā)明描述的是一種新型的由脂類包埋的多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物及其制備方法。本發(fā)明描述的方法是形成這種新型多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物的新方法。

除了其他以外，本發(fā)明提供一種包括脂質(zhì)體或脂類復(fù)合物和多西他賽的組合物，所述脂質(zhì)體包含一種或者多種脂類，其中多西他賽與脂類的重量比率為1:250-1:20,或者1:175-1:30，或者1:100-1:40。一種或者多種脂類可以包括，例如55-100mol％dppc和0-45mol％膽固醇，又例如55-90mol％dppc和10-30mol％膽固醇.

同時(shí)本發(fā)明還提供一種多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物的制備方法，包括以下步驟：(a)多西 他賽及脂類材料溶解在包括無水乙醇的有機(jī)溶劑中；(b)將(a)混合溶液注入到含水介質(zhì)中混合；(c)在第一溫度下使二者形成混合物；和(d)隨后在比第一溫度低的第二溫度下形成進(jìn)一步混合物。其中步驟(c)和(d)對(duì)提高多西他賽的包封率是有效的。一般是通過加熱來實(shí)現(xiàn)步驟(c)，而一般是通過冷卻來實(shí)現(xiàn)步驟(d)。在作為選擇的實(shí)施例中，循環(huán)從冷卻步驟開始，轉(zhuǎn)換到加熱步驟，重復(fù)這樣兩個(gè)步驟。所述方法包括繼續(xù)使步驟(c)和(d)重復(fù)二或三或者更多個(gè)循環(huán)。可以通過將多西他賽和脂材溶解在包括無水乙醇的有機(jī)溶劑中形成多西他賽脂類溶液。在所有步驟(c)和(d)完成以后，多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物的制備方法可以進(jìn)一步包括：(e)通過穿過具有分子重量定點(diǎn)選擇能力的膜來進(jìn)行過濾，去除未包封的多西他賽，保留需要的脂質(zhì)體或者脂類復(fù)合物。

本發(fā)明進(jìn)一步提供了按照本發(fā)明方法制備的多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物和本發(fā)明組合物的藥劑配方。所述配方包括藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑,適于對(duì)病人進(jìn)行吸入或注射的給藥方式。

附圖說明

圖1顯示根據(jù)本發(fā)明的多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物在肺癌細(xì)胞中的抗癌活性。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明包括一種新型的脂類絡(luò)合物的多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物，其多西他賽與脂類比率非常高。本發(fā)明中多西他賽與脂類的重量比率是在1:15到1:70之間。最優(yōu)選地，多西他賽與脂類的重量比率是在1:20到1:60之間。

多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物的制備方法包括將多西他賽與脂類溶液混合以及使其混合物在兩種單獨(dú)的溫度下進(jìn)行一個(gè)或者多個(gè)循環(huán)。可以通過這個(gè)方法形成多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物。

本發(fā)明描述的肺部給藥吸入型多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物的制備方法如下：將多西他賽和脂材溶于乙醇、甲醇等與水互溶的有機(jī)溶劑中并在攪拌下注入預(yù)熱至脂材相變溫度以上的生理鹽水、等滲葡萄糖或pbs溶液得到脂質(zhì)體溶液；采用超濾、透析或過sephadex柱等方法除去游離多西他賽,得到多西他賽脂質(zhì)體溶液。

如常規(guī)試驗(yàn)?zāi)軌驔Q定的，在某些情況下，方法中采用的合適溫度可以隨方法中采用 的脂類混合物而變化。

制備的多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物具有高的藥物與脂材比率。配方可以適用于吸入或者注射。

為了公開目的，采用以下技術(shù)術(shù)語：

“溶液輸灌”是包括在少量、優(yōu)選微量的工藝相容溶劑中溶解藥物以及一種或者多種脂類來形成藥物脂類懸浮液或者溶液(優(yōu)選溶液)，然后將溶液注射到含水介質(zhì)中的方法。典型地，能夠在含水工藝，例如透析中洗凈工藝相容的溶劑。無水乙醇為優(yōu)選溶劑?！耙掖驾敼唷保环N溶液輸灌類型，是包括在少量、優(yōu)選微量的乙醇中溶解藥物以及一種或者多種脂類來形成藥物脂類溶液，然后將溶液注射到含水介質(zhì)中的方法?！吧倭俊比芤菏窃谳敼噙^程中與形成脂質(zhì)體或者脂類絡(luò)合物相容的數(shù)量。

“疏水基質(zhì)負(fù)載系統(tǒng)”是有上述溶液輸灌方法生產(chǎn)的脂類/溶液混合物。

用于本發(fā)明的脂類可以是合成的、半合成的或者天然存在的脂類，包括磷脂、維生素e、固醇、脂肪酸、糖脂、陰離子脂、陽離子脂。所述磷脂能夠包括卵磷脂(epc)、磷脂酰甘油(epg)、磷脂酰肌醇(epi)、磷脂酰絲氨酸(eps)、磷脂酰乙醇胺(epe)、和磷脂酸(epa)：大豆相應(yīng)物，大豆卵磷脂(spc)：spg、sps、spi、spe和spa：氫化的卵和大豆相應(yīng)物(例如hepc、hspc)，硬脂酸(sterically)修正的卵磷脂乙醇胺，膽固醇衍生物，類胡蘿卜素，其他通過脂鍵結(jié)構(gòu)成的卵磷脂，該酯由在2和3位上含有12-26個(gè)碳原子鏈的甘油和在1位上含有不同個(gè)包含膽堿、甘油、肌糖、絲氨酸、乙醇胺的主要基團(tuán)的甘油組成，以及相應(yīng)的卵磷脂酸。這些脂肪酸鏈可以是飽和或者不飽和的，磷脂可以由不同長(zhǎng)度和飽和度的脂肪酸構(gòu)成。特別地，配方的組合物可以包括dppc，自然存在的肺表面活性劑的主要成分。其他的例子包括肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(dmpc)和二肉豆蔻酰磷脂酰甘油(dmpg)和二棕櫚酸磷脂酰膽堿(dppc)和二棕櫚酸磷脂酰甘油(dppg)和二硬脂酰磷脂酰膽堿(dspc)和二硬脂酰磷脂酰甘油(dspg)，二油酰磷脂酰-膽堿(pspc)和棕櫚酰硬脂酰甘油(pspg)，三酰甘油，seranide、二酰甘油，鞘氨醇，鞘磷脂和如單-油酰-磷脂乙醇胺(mope)的單酰磷脂。

試驗(yàn)結(jié)果明顯地顯示出在脂質(zhì)體囊形成過程中對(duì)多西他賽進(jìn)行包封。結(jié)果進(jìn)一步顯示出，由于多西他賽濃度比溶解極限高很多，所以多西他賽的物理狀態(tài)為固態(tài)或者與脂質(zhì)材 料結(jié)合。結(jié)果進(jìn)一步顯示出過程中不需要冷凍混合物，但是冷卻到冰凍溫度之上的溫度可以產(chǎn)生更好的效果。結(jié)果進(jìn)一步顯示出3-4個(gè)冷卻和加熱循環(huán)的包埋效果和6個(gè)循環(huán)的包埋效果類似，其說明3-4個(gè)循環(huán)的溫度處理足以實(shí)現(xiàn)優(yōu)選級(jí)別的包載。

結(jié)果進(jìn)一步顯示了在提高多西他賽包封率的同時(shí)，可以將這個(gè)工藝放大。因此，本發(fā)明進(jìn)一步提供用來供應(yīng)適于整個(gè)給藥為200mls或更多、或者800ls或更多(適當(dāng)?shù)纳倭吭黾?的方法。所有其他的條件都相同的情況下，可以相信生產(chǎn)較大體積通常比小規(guī)模易達(dá)到增加的效果。如果這樣的體積適于給藥時(shí)，能夠減少體積來使其適于存儲(chǔ)。

結(jié)果進(jìn)一步顯示了，由于最小限度的泄漏，通過本發(fā)明方法制備的多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物能夠保持包埋在一年以上。配方獨(dú)特性進(jìn)一步證實(shí)顯示出多西他賽被包載在脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中并且不易泄漏。

實(shí)施例

實(shí)施例1

將20mg多西他賽、540mg二棕櫚酸磷脂酰膽堿(dppc)和180mg膽固醇溶于7.0ml無水乙醇中，分別預(yù)熱至65，并注射到預(yù)熱至65的20ml生理鹽水溶液中；緩慢降溫至5，再加熱升溫至65，重復(fù)降升溫3次，然后降溫至室溫，得到多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物。采用透析方法除去游離多西他賽即得多西他賽脂質(zhì)體復(fù)合物溶液。除去游離藥物前包封率為60％。

實(shí)施例2

將15mg多西他賽、500mg蛋黃卵磷脂(epc)和145mg膽固醇溶于5ml乙醇中，磁力攪拌下注入5ml37等滲葡萄糖溶液中；降溫至0，再緩慢加熱升溫至37，重復(fù)降升溫4次，降到室溫后得到脂質(zhì)體溶液。等滲葡萄糖溶液中透析除去游離多西他賽，即得多西他賽脂質(zhì)體溶液。除去游離藥物前包封率為55％。

實(shí)施例3

將30mg多西他賽、800mg氫化大豆卵磷脂(hspc)和250mg膽固醇溶于5ml乙醇中，磁力攪拌下注入5ml55ph7.4磷酸鹽溶液中；降溫至0，再緩慢加熱升溫至 55，重復(fù)降升溫4次，降到室溫后得到脂質(zhì)體溶液。ph7.4磷酸鹽溶液中透析除去游離多西他賽，即得多西他賽脂質(zhì)體溶液。除去游離藥物前包封率為58％。

雖然本發(fā)明只著重描述了優(yōu)選地實(shí)施例，但是，可以使用變化的優(yōu)選設(shè)備和方法，以及可以試圖使用與這里描述的方法不同的方法進(jìn)行，這對(duì)于本領(lǐng)域一般人員而言是顯而易見的。因此，本發(fā)明包括在下述權(quán)利要求的精神和范圍內(nèi)的所有修改。