本發(fā)明涉及一種含有降壓藥、羥甲戊二酰輔酶A(HMG-CoA)還原酶抑制劑、阿司匹林和葉酸的藥物組合物及其用途。本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
心血管疾病是人類死亡的主要原因之一，其中包括冠心病(心肌梗塞)和腦卒中(俗稱中風(fēng))。我國心血管疾病的發(fā)病率和病死率近20年呈逐漸上升趨勢(shì)，其重要原因是發(fā)病危險(xiǎn)因素在不斷增多。這些危險(xiǎn)因素包括高血壓、血脂異常、動(dòng)脈粥樣硬化、吸煙、飲酒等。因此，采取有效干預(yù)措施、減少各種可控危險(xiǎn)因素的危害是預(yù)防冠心病、腦卒中等心血管疾病事件發(fā)生的關(guān)鍵。
在引起腦卒中的危險(xiǎn)因素中，高血壓是最重要和最常見的原因。收縮壓每下降5～10mmHg或舒張壓每下降2～5mmHg，腦卒中危險(xiǎn)降低30％～40％。除高血壓外，血脂異常、高同型半胱氨酸血癥也是較常見的共存心血管疾病危險(xiǎn)因子，有資料顯示，超過50％的高血壓患者伴隨有血脂異常，基線血壓和血清膽固醇升高可以急劇增加心血管疾病的發(fā)生率。大量臨床研究表明，降壓藥和降脂藥的聯(lián)合應(yīng)用可以減少心血管疾病的發(fā)病和死亡。美國輝瑞藥廠2004年推出復(fù)方新藥“Caduet”，它即是由抗高血壓藥氨氯地平與降血脂藥阿托伐他汀組合而成，臨床研究證明Caduet可以明顯降低血壓和血膽固醇水平，使80％以上患者達(dá)到目標(biāo)血壓和目標(biāo)膽固醇水平，可顯著降低冠心病風(fēng)險(xiǎn)。
85％的冠心病是由于冠狀動(dòng)脈粥樣硬化引起的，而動(dòng)脈粥樣硬化又與血脂異常(脂質(zhì)代謝障礙)直接相關(guān)，因此有效降低血脂可延緩甚或逆轉(zhuǎn)動(dòng)脈粥樣硬化。血脂異常表現(xiàn)為血液中甘油三脂(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)中的一種或幾種水平升高或者高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)水平降低(HDL-C降低是冠心病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素之一)。臨床研究表明，用辛伐他汀或普伐他汀降低血清TC及LDL-C水平，不僅可降低冠心病事件發(fā)生率達(dá)30％～40％，而且降低總病死率達(dá)22％～30％，并減少做冠狀動(dòng)脈腔內(nèi)形成術(shù)以及腦卒中的發(fā)生率。
長(zhǎng)期的高血脂狀態(tài)還會(huì)對(duì)血管壁細(xì)胞膜和血細(xì)胞膜產(chǎn)生硬化作用，使紅細(xì)胞膜的流動(dòng)性降低，紅細(xì)胞變形能力下降，從而微循環(huán)瘀血、血流變慢、血液粘稠度增大(血液流變學(xué)異常)，易于形成血栓，使栓塞性心腦血管事件發(fā)生的危險(xiǎn)性增加。此外，粥樣斑塊中脂質(zhì)成分及含量也影響斑塊的穩(wěn)定性，脂質(zhì)還影響凝血因子和纖維蛋白溶解系統(tǒng)。因此，應(yīng)用抑制血小板聚集或其它改善血液流變學(xué)的措施有利于進(jìn)一步有效預(yù)防心肌梗塞、腦卒中等栓塞性病癥的發(fā)生。
阿托伐他汀、普伐他汀、辛伐他汀等他汀類降血脂藥物屬于HMG-CoA還原酶抑制劑，口服吸收后的水解產(chǎn)物在體內(nèi)競(jìng)爭(zhēng)性地抑制膽固醇合成過程中的限速酶羥甲戊二酰輔酶A還原酶，使膽固醇的合成減少，也使低密度脂蛋白受體合成增加，主要作用部位在肝臟，結(jié)果使血TC和LDL-C水平降低，中度降低血TG水平和增高HDL-C水平，臨床上用于治療高膽固醇血癥和混合型高脂血癥，也用于冠心病的預(yù)防。HMG-CoA還原酶抑制劑類藥物還可以減少斑塊中的LDL－C，恢復(fù)內(nèi)皮細(xì)胞功能，增進(jìn)粥樣斑塊的穩(wěn)定性，故其治療的益處不僅見于膽固醇升高患者，也見于膽固醇正常的冠心病患者。
阿司匹林具有抑制血小板聚集、從而抑制血栓形成的藥理作用。它通過不可逆地抑制血小板的環(huán)氧酶、減少前列腺素的生成而發(fā)揮這一作用。但阿司匹林對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的環(huán)氧化酶作用弱，對(duì)前列環(huán)素I2(PGI2)的生成幾乎沒有影響。這是由于血小板本身不能合成環(huán)氧酶，當(dāng)環(huán)氧酶活性受到抑制時(shí)，必須待新生的血小板進(jìn)入循環(huán)血液中才能繼續(xù)合成血栓素A2，而血管內(nèi)皮細(xì)胞具有合成環(huán)氧化酶的能力，所以應(yīng)用低劑量的阿司匹林只抑制血小板內(nèi)環(huán)氧化酶的活性，臨床上可用于心絞痛、心肌梗死等疾病的預(yù)防和治療。阿司匹林用于冠心病的二級(jí)預(yù)防時(shí)，推薦劑量在50mg～325mg范圍內(nèi)，其中又以50～150mg較為常用。一項(xiàng)對(duì)已公開發(fā)布的數(shù)據(jù)進(jìn)行meta分析的結(jié)果表明，阿司匹林與普伐他汀在心血管疾病的二級(jí)預(yù)防中具有互補(bǔ)放大效應(yīng)。研究人員發(fā)現(xiàn)上述兩種藥物的聯(lián)合應(yīng)用與單獨(dú)應(yīng)用阿司匹林和單獨(dú)應(yīng)用普伐他汀相比，心肌梗死的危險(xiǎn)性分別降低31％和26％，缺血性卒中的危險(xiǎn)性相應(yīng)地分別降低29％和31％。
葉酸屬B族維生素，是合成核酸、細(xì)胞生長(zhǎng)和組織修復(fù)所必需的元素。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，它通過減少血液中同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)而降低心血管事件發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)。本研發(fā)團(tuán)隊(duì)于2007年在“The Lancet(柳葉刀)”雜志發(fā)表了一項(xiàng)薈萃分析(Wang X,et al.Efficacy of folic acid supplementation in stroke prevention:a meta-analysis.Lancet,2007,369:1876)。結(jié)果顯示，補(bǔ)充葉酸能夠降低腦卒中風(fēng)險(xiǎn)18％(p<0.05)。當(dāng)用于一級(jí)預(yù)防時(shí)，葉酸降低腦卒中風(fēng)險(xiǎn)25％；當(dāng)應(yīng)用于未接受食品中添加葉酸的人群時(shí)，補(bǔ)充葉酸降低腦卒中風(fēng)險(xiǎn)25％；當(dāng)補(bǔ)充葉酸能夠?qū)⒀獫{Hcy降低20％以上時(shí)，其降低腦卒中風(fēng)險(xiǎn)達(dá)到23％；而當(dāng)補(bǔ)充葉酸療效超過3年時(shí)，其降低腦卒中風(fēng)險(xiǎn)達(dá)到29％。
目前在針對(duì)多種心血管危險(xiǎn)因素的復(fù)方藥物開發(fā)研究中，大多是降壓、降脂等常見的治療、干預(yù)藥物組合，而忽略了對(duì)其它一些危險(xiǎn)因素的處理，而這些不多見的危險(xiǎn)因素可能在誘發(fā)血管性事件中發(fā)揮重要病理作用。為克服這一類傳統(tǒng)組合物的缺陷，本發(fā)明加入對(duì)血小板的抑制及對(duì)高Hcy血癥這一新型危險(xiǎn)因素的干預(yù)處理，實(shí)驗(yàn)也顯示這一組合物有意想不到的心血管防治效果。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是克服針對(duì)高血壓伴血脂異常等情況時(shí)臨床用藥存在的不足，提供一種預(yù)防心血管事件效果更好的藥物組合物，這種效果體現(xiàn)在預(yù)防或延緩動(dòng)脈粥樣硬化、降低腦卒中等血管事件風(fēng)險(xiǎn)方面。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：
一種藥物組合物，包括：
(1)藥用含量的降壓藥的一種，降壓藥選自血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑(ACEI)、血管緊張素受體阻斷劑(ARB)、鈣通道阻滯劑(CCB)、利尿劑、β-腎上腺素受體阻滯劑(β受體阻滯劑)；
(2)藥用含量的HMG-CoA還原酶抑制劑中的一種；
(3)藥用含量的阿司匹林；
(4)藥用含量的葉酸或5-甲基四氫葉酸；和
(5)藥劑學(xué)上可接受的載體。
其中“藥用含量”是指具有協(xié)同、預(yù)防或治療的藥理作用的量。
進(jìn)一步，優(yōu)選
(1)1.25mg～300mg的降壓藥的一種，降壓藥選自ACEI、ARB、CCB、利
尿劑或β受體阻滯劑；
(2)0.1mg～100mg的HMG-CoA還原酶抑制劑中的一種；
(3)50mg～325mg的阿司匹林；
(4)0.1mg～2.0mg的葉酸或5-甲基四氫葉酸；和
(5)藥劑學(xué)上可接受的載體。
更加優(yōu)選
(1)2.5mg～100mg的降壓藥的一種，降壓藥選自ACEI、ARB、CCB、利尿劑或β受體阻滯劑；
(2)1mg～80mg的HMG-CoA還原酶抑制劑中的一種；
(3)50mg～150mg的阿司匹林；
(4)0.2mg～2.0mg的葉酸或5-甲基四氫葉酸；和
(5)藥劑學(xué)上可接受的載體。
在發(fā)明中，HMG-CoA還原酶抑制劑藥物是指(但不限于)阿托伐他汀(atorvastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、西立伐他汀(cerivastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)、伊伐他汀(itavastatin)、尼伐他汀(nisvastatin)、柏伐他汀(bervastatin)、美伐他汀(mevastatin)中的一種。
在本發(fā)明中，阿托伐他汀含量為5mg～80mg、辛伐他汀含量為5mg～80mg、匹伐他汀含量為1mg～4mg、洛伐他汀含量為5mg～80mg、氟伐他汀含量為5mg～80mg、普伐他汀含量為5mg～80mg、瑞舒伐他汀含量為5mg～80mg，上述物質(zhì)的活性代謝產(chǎn)物或鹽類含量與相應(yīng)的上述物質(zhì)含量等同。
在本發(fā)明中，降壓藥選自ARB、ACEI、CCB、β-受體拮抗劑和利尿劑，其中ARB包括但不限于：氯沙坦(losartan)、纈沙坦(valsartan)、伊貝沙坦(irbesartan)、替米沙坦(telmisartan)、坎地沙坦(candesartan)；ACEI包括但不限于：卡托普利(captopril)、依那普利(enalapril)、貝那普利(benazepril)、賴諾普利(lisinopril)、雷米普利(ramipril)、福辛普利(fosinopril)、西拉普利(cilazapril)、培哚普利(perindopril)；β-受體拮抗劑包括但不限于：普萘洛爾(propranolol)、美托洛爾(metoprolol)、阿替洛爾(atenolol)、倍他洛爾(betaxolol)、比索洛爾(bisoprolol)、卡維洛爾(carvedilol)、拉貝洛爾(labetalol)；利尿劑包括但不限于：氫氯噻嗪(hydrochlorothiazide)、氯噻嗪(chlorothiazide)、螺內(nèi)酯(spirolactone)、氨苯蝶啶(triamterene)、阿米洛利(amiloride)、呋塞米(furosemide)、吲達(dá)帕胺(indapamide)；CCB包括但不限于：硝苯地平(nifedipine)、尼卡地平(nicardipine)、尼群地平(nitrendipine)、非洛地平(felodipine)、氨氯地平(amlodipine)、拉西地平(lacidipine)、樂卡地平(lercanidipine)、維拉帕米(verapamil)、地爾硫卓(diltiazem)。
在本發(fā)明中，氯沙坦含量為50～100mg、纈沙坦含量為80～160mg、伊貝沙坦含量為150～300mg、卡托普利含量為12.5～50mg、依那普利含量為10～20mg、貝那普利含量為10～20mg、賴諾普利含量為10～20mg、普萘洛爾含量為10～20mg、美托洛爾含量為25～50mg、阿替洛爾含量為50～100mg、倍他洛爾含量為10～20mg、氫氯噻嗪含量為12.5mg、氯噻嗪含量為25～50mg、螺內(nèi)酯含量為25～40mg、阿米洛利含量為5～10mg、硝苯地平含量為5～10mg、尼卡地平含量為40mg、尼群地平含量為10mg、氨氯地平含量為5～10mg、拉西地平含量為4～6mg、樂卡地平含量為10～20mg，上述物質(zhì)的活性代謝產(chǎn)物或鹽類含量與相應(yīng)的上述物質(zhì)含量等同。
在本發(fā)明中，葉酸或5-甲基四氫葉酸的含量?jī)?yōu)選為：葉酸0.4mg～1.6mg，或5-甲基四氫葉酸0.4mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是阿托伐他汀，含量為5mg～80mg；降壓藥為氯沙坦，含量為50～100mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是阿托伐他汀，含量為5mg～80mg；降壓藥為纈沙坦，含量為80～160mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是阿托伐他汀，含量為5mg～80mg；降壓藥為卡托普利，含量為12.5～50mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是阿托伐他汀，含量為5mg～80mg；降壓藥為依那普利，含量為10～20mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是匹伐他汀，含量為1mg～4mg；降壓藥為普萘洛爾，含量為10～20mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是匹伐他汀，含量為1mg～4mg；降壓藥為美托洛爾，含量為25～50mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是匹伐他汀，含量為1mg～4mg；降壓藥為氫氯噻嗪，含量為12.5mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是匹伐他汀，含量為1mg～4mg；降壓藥為氯噻嗪，含量為25～50mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是辛伐他汀，含量為5mg～80mg；降壓藥為硝苯地平，含量為5～10mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是辛伐他汀，含量為5mg～80mg；降壓藥為氨氯地平，含量為5～10mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物中，所述HMG-CoA還原酶抑制劑是辛伐他汀，含量為5mg～80mg；降壓藥為拉西地平，含量為4～6mg；阿司匹林含量為50mg～325mg；葉酸含量為0.1mg～2.0mg。
本發(fā)明提供的藥物組合物具有降血壓、降血脂、抑制血小板聚集和降Hcy作用。
本發(fā)明提供的藥物組合物具有防治動(dòng)脈粥樣硬化的作用，這種動(dòng)脈粥樣硬化可引起心、腦、腎、眼等器官的繼發(fā)性損害，包括冠心病、心絞痛、心肌梗死、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、腦卒中、小動(dòng)脈性腎硬化癥、外周動(dòng)脈疾病、視網(wǎng)膜動(dòng)脈硬化等。
本發(fā)明還提供上述藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓伴血脂異常引起的靶器官損害的藥物中的用途。高血壓伴血脂異常引起的靶器官損害，是指由于高血壓和/或血脂異常引起的心、腦、腎、眼等器官的繼發(fā)性損害，包括腦卒中、動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、左室肥厚、心絞痛、心肌梗死、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心功能減退、良性小動(dòng)脈性腎硬化癥、心力衰竭、心律失常、原發(fā)性心臟驟停、腎功能減退、惡性小動(dòng)脈性腎硬化癥、外周動(dòng)脈疾病、視網(wǎng)膜動(dòng)脈硬化或高血壓眼底病變。
本發(fā)明提供的藥物組合物還具有降低心腦血管事件風(fēng)險(xiǎn)的作用，其中降低心腦血管事件風(fēng)險(xiǎn)是指降低急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心絞痛、心肌梗死、腦卒中等病癥或冠心病高危的發(fā)生率。
該藥物組合物的劑型包括但不限于普通片劑、雙層片劑、多層片劑、緩釋片劑、單室控釋片劑、雙室控釋片劑、微孔型控釋片劑、舌下含片、口腔速崩片、分散片、腸溶片、顆粒劑、丸劑、腸溶膠囊、延遲釋放片、定時(shí)/位釋放片、普通膠囊、緩釋膠囊、控釋膠囊、含有微丸或小片的膠囊、含有微丸或小片的pH依賴型膠囊、顆粒劑、口服液、膜劑或貼劑等劑型。
該藥物組合物中還含有藥劑學(xué)可接受的載體，可制成普通口服制劑，包括普通片劑、普通膠囊、顆粒劑等，制成片劑時(shí)所述藥學(xué)上可接受的載體包括有助于將活性化合物配制成藥用制劑的賦形劑和輔藥，如淀粉、微晶纖維素、無機(jī)鹽類、蔗糖、糊精、乳糖、糖粉、葡萄糖、氯化鈉、半胱氨酸、檸檬酸和亞硫酸鈉等的一種或幾種物質(zhì)的組合物，屬于本領(lǐng)域常識(shí)。
本發(fā)明的有益效果是：
本發(fā)明提供的HMG-CoA還原酶抑制劑/降壓藥物/阿司匹林/葉酸四聯(lián)藥物組合物具有明顯的藥理、藥效學(xué)上的協(xié)同作用——降血壓、降血脂、防治動(dòng)脈粥樣硬化、降低心腦血管事件發(fā)生的危險(xiǎn)性。上述藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，HMG-CoA還原酶抑制劑/降壓藥物/阿司匹林/葉酸聯(lián)合用藥時(shí)，其降血壓、降血脂、抑制血小板聚集及改善血液流變學(xué)作用優(yōu)于單用HMG-CoA還原酶抑制劑藥物；HMG-CoA還原酶抑制劑/降壓藥物/阿司匹林/葉酸四聯(lián)藥物組合物在抗動(dòng)脈粥樣硬化、保護(hù)血管內(nèi)皮、降低腦卒中發(fā)生率方面，其作用效果顯著。因此，本發(fā)明對(duì)于現(xiàn)有藥物治療技術(shù)有顯著的改善意義。
本發(fā)明還提供上述藥物組合物在制備用于預(yù)防、治療或延緩高血壓伴血脂異常引起的靶器官損害的藥物中的用途。高血壓伴血脂異常引起的靶器官損害，是指由于高血壓和/或血脂異常引起的心、腦、腎、眼等器官的繼發(fā)性損害，包括腦卒中、動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、左室肥厚、心絞痛、心肌梗死、急性冠狀動(dòng)脈綜合征、心功能減退、良性小動(dòng)脈性腎硬化癥、心力衰竭、心律失常、原發(fā)性心臟驟停、腎功能減退、惡性小動(dòng)脈性腎硬化癥、外周動(dòng)脈疾病、視網(wǎng)膜動(dòng)脈硬化或高血壓眼底病變。
心腦血管事件危險(xiǎn)性是指一個(gè)患者個(gè)體相對(duì)于整個(gè)人群的發(fā)生心腦血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。近十多年，在心腦血管疾病研究領(lǐng)域，“降低心腦血管事件危險(xiǎn)性”愈來愈成為衡量藥物療效或治療方案的主要指標(biāo)，國際上一些大型臨床試驗(yàn)都是選擇這類指標(biāo)作為臨床終點(diǎn)的。本發(fā)明提供的藥用劑量的他汀類降脂藥物、藥用劑量降壓藥物、藥用劑量阿司匹林和藥用劑量的葉酸類化合物組成的藥物組合物在降低腦卒中發(fā)生率方面具有明顯協(xié)同作用，且其效果顯著強(qiáng)于這些藥物單獨(dú)應(yīng)用的效果。
鑒于上述協(xié)同效應(yīng)在臨床中的有益作用，本發(fā)明還提供了上述藥用劑量的HMG-CoA還原酶抑制劑、降壓藥物、阿司匹林及葉酸的藥物組合物在制備用于降血壓、防治動(dòng)脈粥樣硬化的藥物中的應(yīng)用；本發(fā)明還提供上述藥物組合物在制備用于降低心腦血管事件風(fēng)險(xiǎn)的藥物中的應(yīng)用。另外，通過本發(fā)明的實(shí)施，提供給患者這種特定用途的藥物組合物，可以提高患者依從性，使患者服藥方便，降低醫(yī)療費(fèi)用，因此具有較好市場(chǎng)前景。
下面的具體實(shí)施方式是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1：復(fù)方阿托伐他汀/普萘洛爾/阿司匹林/葉酸片劑制備
處方如下(1000片)：
阿托伐他汀 10g
普萘洛爾 10g
阿司匹林 75g
葉酸 0.4g
羧甲基淀粉鈉 20g
磷酸氫鈣 170g
10％聚維酮水溶液適量
硬脂酸鎂 1％
制備方法：將原輔料粉碎過80目篩，干燥備用。取阿托伐他汀10g、普萘洛爾10g、阿司匹林75g和葉酸0.4g按照等量遞增法混合均勻，加入羧甲基淀粉鈉20g、磷酸氫鈣170g，按照等量遞增法均勻混合，將葉酸溶解于粘合劑10％聚維酮水溶液中，加入粘合劑適量制軟材，30目制粒，40～45℃干燥3h；30目整粒，加入適量硬脂酸鎂混勻，含量測(cè)定后用8號(hào)沖頭，壓片，即得。制備過程中注意避光，成品檢驗(yàn)合格后，鋁塑泡罩包裝，避光保存。制成的復(fù)方片劑中每片含阿托伐他汀10mg、普萘洛爾10mg、阿司匹林75mg、葉酸0.4mg。
實(shí)施例2：制備復(fù)方片劑
制備方法：同實(shí)施例1。
14種復(fù)方的組成成分及含量見表11。
表1 15種復(fù)方活性藥物配方組成
實(shí)施例3：復(fù)方阿托伐他汀/依那普利/阿司匹林/葉酸膠囊制備
處方如下(1000粒)：
制備方法：將原輔料粉碎過80目篩，干燥備用。取阿托伐他汀10g、依那普利20g、阿司匹林75g和葉酸0.4g按照等量遞增法混合均勻，加入100～200g乳糖、15～25g羧甲基淀粉鈉(輔料確切用量按照活性藥物用量調(diào)整)，按照等量遞增法均勻混合，用10％聚維酮乙醇溶液制成軟材，20目篩制粒，60℃干燥約2h，20目篩整粒，控制顆粒的含水量為2-3％，將干燥后的顆粒與處方量硬脂酸鎂混合均勻，半成品進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定含量，裝入空心膠囊，即得1000粒膠囊。制備過程中注意避光。成品檢驗(yàn)合格后鋁塑泡罩包裝，避光保存。制成的復(fù)方膠囊中每粒含阿托伐他汀10mg、依那普利20mg、阿司匹林75mg、葉酸0.4mg。
實(shí)施例4：制備復(fù)方膠囊
制備方法：同實(shí)施例3。14種復(fù)方的組成成分及含量見表1。
實(shí)施例5：復(fù)方瑞舒伐他汀/纈沙坦/阿司匹林/葉酸顆粒劑制備
處方如下(1000袋)：
制備方法：將原輔料粉碎過80目篩，干燥備用。取瑞舒伐他汀10g、纈沙坦80g、阿司匹林100g和葉酸0.8g按照等量遞增法混合均勻，加入750～850g乳糖、10～20g羧甲基淀粉鈉(輔料確切用量按照活性藥物用量調(diào)整)，按照等量遞增法均勻混合，用10％聚維酮乙醇溶液制成軟材，18目篩制粒，60℃干燥約2h，16目篩整粒，控制顆粒的含水量為2％以下，將干燥后的顆粒與處方量甜橙香精、阿斯巴甜、硬脂酸鎂混合均勻，半成品進(jìn)行檢測(cè)，測(cè)定含量，裝入鋁袋即得1000袋。制備過程中注意避光。制成的復(fù)方顆粒劑中每袋含瑞舒伐他汀10mg、纈沙坦80mg、阿司匹林100mg和葉酸0.8mg
實(shí)施例6：制備復(fù)方顆粒劑
制備方法：同實(shí)施例5。14種復(fù)方的組成成分及含量見表1。
實(shí)施例7；阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠的降血脂、降血壓、抗血小板聚集作用
1、造模：SHR大鼠70只，WKY大鼠10只，5-6周齡，雌雄各半，體重130～160g，10只WKY大鼠作正常組，喂普通飼料，其余大鼠每天喂高脂高蛋氨酸飼料(配方：膽固醇1.25％，丙基硫氧嘧啶0.2％，膽酸鈉0.5％，豬油12.0％，蛋氨酸3％，普通飼料83.05％)。4周后，對(duì)所有大鼠進(jìn)行血壓檢測(cè)，并采血測(cè)血脂及HCY，以證實(shí)高血壓高血脂高HCY模型造模成功。
2、分組及給藥：取上述造模成功大鼠60只，隨機(jī)分為6組(每組10只)，按給藥不同分為模型組、阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸(0.5+4+3.75+0.04)mg/kg組、阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸(1+8+7.5+0.08)mg/kg組、阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸(2+16+15+0.16)mg/kg組、阿托伐他汀+阿司匹林+葉酸(1+7.5+0.08)mg/kg組、阿司匹林+葉酸(7.5+0.08)mg/kg組，另有正常組，共7組。當(dāng)其它組灌胃給藥時(shí)，正常組和模型組大鼠給予相應(yīng)體積溶媒灌胃。實(shí)驗(yàn)過程中，除正常組大鼠喂普通飼料外，其余各組大鼠繼續(xù)喂高脂高蛋氨酸飼料。各組每周稱重一次，根據(jù)體重調(diào)整給藥量，連續(xù)給藥12周。
3、檢測(cè)指標(biāo)：(1)血脂測(cè)定12周后取血，按照試劑盒說明書測(cè)定測(cè)血清總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)；(2)血壓測(cè)定給藥12周后檢測(cè)大鼠血壓；(3)血小板聚集率、血液流變學(xué)測(cè)定用血小板聚集儀以ADP為血小板聚集誘導(dǎo)劑(比濁法)測(cè)定血小板最大聚集率(PARmax)，用全自動(dòng)血液流變學(xué)儀測(cè)定全血黏度、血漿黏度等參數(shù)；
4、統(tǒng)計(jì)方法：計(jì)量資料用表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包，兩均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。
5、結(jié)果：
(1)阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠血脂的影響第12周末，與正常組大鼠比較，模型組大鼠TC、TG、LDL-C顯著升高；與模型組比較，阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸各不同劑量配比組、阿托伐他汀+阿司匹林+葉酸組大鼠TC、TG、LDL-C均顯著降低，尤其當(dāng)阿托伐他汀高劑量(2mg/kg)時(shí)降低更顯著，且高中低劑量組間有明顯量效關(guān)系，且效果均優(yōu)于阿托伐他汀+阿司匹林+葉酸組；而阿司匹林+葉酸組大鼠TC、TG、LDL-C水平?jīng)]有顯著變化。見表2。
表2阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠血脂的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
(2)阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠血壓的影響第12周末，與模型組比較，阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸各不同劑量配比組大鼠血壓均顯著降低，當(dāng)與阿托伐他汀及阿司匹林合用時(shí)降低更顯著；而阿托伐他汀+阿司匹林+葉酸組、阿司匹林+葉酸組大鼠血壓水平?jīng)]有顯著變化。見表3。
表3阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠血壓的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
(3)阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠血小板聚集、血液流變學(xué)的影響與正常組大鼠比較，模型組大鼠全血粘度、血漿粘度均顯著升高，表明：高血脂大鼠呈現(xiàn)血液流變性降低的改變。與模型組比較，阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸各不同劑量配比組、阿托伐他汀+阿司匹林+葉酸組、阿司匹林+葉酸組、大鼠全血及血漿粘度均有不同程度降低(見表3)，提示阿托伐他汀、纈沙坦和阿司匹林均有改善血液流變學(xué)作用，三者合用時(shí)效應(yīng)增強(qiáng)。另一方面，與正常組大鼠比較，模型組大鼠血小板聚集率增加；與模型組比較，阿托伐他汀+阿司匹林+葉酸各不同劑量配比組、阿托伐他汀+阿司匹林+葉酸組、阿司匹林+葉酸組大鼠血小板聚集率均不同程度降低，尤其當(dāng)阿司匹林高劑量(15mg/kg)時(shí)這一抗血小板聚集作用更顯著，見表4。
表4阿托伐他汀+纈沙坦+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠血液流變學(xué)、血小板聚集率的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
實(shí)施例8：瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠靶器官的保護(hù)作用
1、造模：SD大鼠100只，5-6周齡，全雄性，體重140～160g，選擇10只大鼠作假手術(shù)組，喂普通飼料，其余大鼠進(jìn)行2K1C手術(shù)后一周，每天喂高脂高蛋氨酸飼料(配方：膽固醇1.25％，丙基硫氧嘧啶0.2％，膽酸鈉0.5％，豬油12.0％，蛋氨酸3％，普通飼料83.05％)。4周后，對(duì)所有大鼠進(jìn)行血壓檢測(cè)，并采血測(cè)血脂及HCY，以證實(shí)高血壓高血脂高HCY模型造模成功。
2、分組及給藥：取上述造模成功大鼠60只，隨機(jī)分為8組(每組10只)，按給藥不同分為模型組、瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸(0.5+0.125+3.75+0.04)mg/kg組、瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸(1+0.25+7.5+0.08)mg/kg組、瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸(2+0.5+15+0.16)mg/kg組、瑞舒伐他汀+阿司匹林+葉酸(1+7.5+0.08)mg/kg組、瑞舒伐他汀+阿司匹林(1+7.5)mg/kg組，另有假手術(shù)組，共7組。當(dāng)其它組灌胃給藥時(shí)，假手術(shù)組和模型組大鼠給予相應(yīng)體積溶媒灌胃。實(shí)驗(yàn)過程中，除假手術(shù)組大鼠喂普通飼料外，其余各組大鼠繼續(xù)喂高脂高蛋氨酸飼料。各組每周稱重一次，根據(jù)體重調(diào)整給藥量，連續(xù)給藥12周。
3、檢測(cè)指標(biāo)：(1)血壓測(cè)定給藥12周后檢測(cè)大鼠血壓；(2)腎臟指標(biāo)測(cè)定給藥12周后，取血測(cè)定α1-微球蛋白(α1-MG)、尿微量白蛋白(MALB)及血肌酐、尿肌酐、肌酐清除率；(3)血清HCY測(cè)定給藥12周后取血，按照試劑盒說明書測(cè)定血清HCY水平。
4、統(tǒng)計(jì)方法：計(jì)量資料用表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件包，兩均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。
5、結(jié)果：
(1)瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠血壓的影響第12周末，與模型組比較，瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸各不同劑量配比組大鼠血壓均顯著降低，氨氯地平與阿托伐他汀及阿司匹林合用時(shí)降低更顯著，且量效關(guān)系明顯；而瑞舒伐他汀+阿司匹林+葉酸組、瑞舒伐他汀+阿司匹林組大鼠血壓水平?jīng)]有顯著變化。見表5。
表5瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠血壓的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
(2)瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠腎功能的影響與假手術(shù)組比較，模型組α1微球蛋白及尿微量白蛋白明顯升高，與模型組相比，瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸各匹配劑量組α1微球蛋白及尿微量白蛋白降低，而瑞舒伐他汀+阿司匹林+葉酸組、瑞舒伐他汀+阿司匹林組與模型組無顯著差異，見表6；模型組肌酐清除率顯著下降，瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸各匹配劑量組肌酐清除率有所升高，而瑞舒伐他汀+阿司匹林+葉酸組、瑞舒伐他汀+阿司匹林組與模型組無顯著差異，見表7。
表6瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠腎功能的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
表7瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠腎功能的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
(2)瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠血清HCY的影響與假手術(shù)組比較，模型組HCY明顯升高，與模型組相比，瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸各匹配劑量組、瑞舒伐他汀+阿司匹林+葉酸組HCY明顯降低，而瑞舒伐他汀+阿司匹林組無顯著差異，表明葉酸有明顯的降低HCY作用，且存在一定的量效相關(guān)性，見表8。
表8瑞舒伐他汀+氨氯地平+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠血清HCY的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
實(shí)施例9：瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠內(nèi)皮保護(hù)作用的影響
1、造模：SHR大鼠70只，WKY大鼠10只，5-6周齡，雌雄各半，體重130～160g，10只WKY大鼠作正常組，喂普通飼料，其余大鼠每天喂高脂高蛋氨酸飼料(配方：膽固醇1％，丙基硫氧嘧啶0.2％，膽酸鈉0.5％，豬油12.0％，蛋氨酸3％，普通飼料83.3％)。4周后，對(duì)所有大鼠進(jìn)行血壓檢測(cè)，并采血測(cè)血脂及HCY，以證實(shí)高血壓高血脂高HCY模型造模成功。
2、分組及給藥：取上述造模成功大鼠60只，隨機(jī)分為6組(每組10只)，按給藥不同分為模型組、瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸(0.5+0.5+7.5+0.08)mg/kg組、瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸(1+1+7.5+0.08)mg/kg組、瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸(2+2+7.5+0.08)mg/kg組、瑞舒伐他汀+依那普利+葉酸(1+1+0.08)mg/kg組、阿司匹林+葉酸(7.5+0.08mg/kg)組，另有正常組，共7組。當(dāng)其它組灌胃給藥時(shí)，正常組和模型組大鼠給予相應(yīng)體積溶媒灌胃。實(shí)驗(yàn)過程中，除正常組大鼠喂普通飼料外，其余各組大鼠繼續(xù)喂高脂高蛋氨酸飼料。各組每周稱重一次，根據(jù)體重調(diào)整給藥量，連續(xù)給藥12周。
3、檢測(cè)指標(biāo)：(1)血壓測(cè)定給藥12周后檢測(cè)大鼠血壓；(2)內(nèi)皮保護(hù)指標(biāo)測(cè)定，給藥12周后，取血測(cè)定內(nèi)皮素(ET-1)、一氧化氮(NO)、血栓素(TXB2)、6-酮前列腺素(6-k-PGF1a)。
4、統(tǒng)計(jì)方法：計(jì)量資料用表示，數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包，兩均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析。
結(jié)果：
(1)瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠血壓的影響第12周末，與模型組比較，瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸各不同劑量配比組、瑞舒伐他汀+依那普利+葉酸組大鼠血壓均顯著降低，依那普利與瑞舒伐他汀及阿司匹林合用時(shí)降低更顯著；而阿司匹林+葉酸組大鼠血壓水平?jīng)]有顯著變化。見表9。
表9瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠血壓的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
(2)瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸對(duì)大鼠內(nèi)皮保護(hù)功能的影響給藥12周，與正常組比較，模型組大鼠血清NO水平顯著降低，ET-1水平顯著升高。與模型組比較，瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸各不同劑量配比組、瑞舒伐他汀+依那普利+葉酸組均能顯著性升高大鼠血清NO水平和降低ET-1水平。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：高血壓合并高血脂大鼠出現(xiàn)顯著的內(nèi)皮細(xì)胞功能降低，瑞舒伐他汀、依那普利、阿司匹林、葉酸對(duì)大鼠內(nèi)皮細(xì)胞功能具有保護(hù)作用，幾者的復(fù)方制劑對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用顯著增強(qiáng)。見表10、表11。
表10瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠內(nèi)皮保護(hù)功能的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。
表11瑞舒伐他汀+依那普利+阿司匹林+葉酸對(duì)高血壓伴高血脂大鼠內(nèi)皮保護(hù)功能的影響(n＝10)
模型組與正常組比較，#P<0.05，##P<0.01；給藥組與模型組比較，*P<0.05；**P<0.01；四聯(lián)復(fù)方組與三聯(lián)復(fù)方組比較，△P<0.05,△△P<0.01；與二聯(lián)復(fù)方組比較，☆P<0.05,☆☆P<0.01。