本發(fā)明屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種治療膀胱癌的藥物組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：膀胱癌是泌尿外科最為常見(jiàn)的腫瘤之一，占全身癌癥發(fā)病率5﹪，惡性程度較高預(yù)后較差。多中心性發(fā)生和高發(fā)病率是該疾病的主要病程特征，治療后如果復(fù)發(fā)則呈逐級(jí)升高態(tài)勢(shì)。其病因尚不明確，與多種因素有關(guān)并且呈多階段性的發(fā)病。因此，探討膀胱癌的病因、發(fā)生、發(fā)展、治療是我們臨床工作者的重要任務(wù)，而各種腫瘤的發(fā)生發(fā)展都和免疫系統(tǒng)功能有關(guān)，現(xiàn)在治療理念基本是研發(fā)的合成西藥或者干擾素等。本研究側(cè)重于從免疫學(xué)方面深入研究，目的是能夠發(fā)現(xiàn)機(jī)體的免疫功能及狀態(tài)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后密切相關(guān)性。目前針對(duì)惡性腫瘤治療，由于化療后出現(xiàn)毒副作用，致使腫瘤治療失敗。因此，研究中藥對(duì)巨噬細(xì)胞的激活作用，提高機(jī)體免疫力，以整合醫(yī)學(xué)為指導(dǎo)，配合化療藥物治療膀胱癌有望為惡性腫瘤的治療提供一條新的有效方法，為解決臨床實(shí)際問(wèn)題提供理論依據(jù)，推動(dòng)祖國(guó)傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論以及應(yīng)用技術(shù)的發(fā)展，并為調(diào)控腫瘤免疫提供新的思路，具有潛在的應(yīng)用前景。省沽油：本品為棕櫚科黃藤屬植物黃藤Daemonoropsmargaritae（Hance）Becc.[CalamusmargaritaeHance］的莖。全年均可采，切段，曬干?！拘晕丁课犊啵恍云?。【功能主治】驅(qū)蟲(chóng)；通淋；驅(qū)風(fēng)止痛。主蛔蟲(chóng)；蟯蟲(chóng)；絳蟲(chóng)??；小便淋痛；齒痛?！驹参镄螒B(tài)】黃藤，有刺大藤本。莖初時(shí)直立，后攀援狀。葉羽狀全裂，全長(zhǎng)2-3m，葉軸頂端延伸成具爪狀刺的纖鞭；裂片近對(duì)生，50-75對(duì)，條狀披針形，長(zhǎng)25-45cm，寬l-2cm，先端漸尖，葉軸背面有大小不等下彎或勁直的刺；葉鞘無(wú)纖鞭但有扁平的刺。肉穗花序開(kāi)花前為佛焰苞包著，呈紡錘形，長(zhǎng)25-30cm，朱端尾狀漸尖，外面1枚密被褐色、扁平的直刺，里面的佛焰苞少刺或無(wú)刺，開(kāi)花結(jié)果后佛焰苞脫落。雄花序上的小穗軸密集，長(zhǎng)約3cm，花密集，雄花長(zhǎng)圓狀卵形，長(zhǎng)5mm；花萼杯狀，淺3齒；花冠3裂，約2倍長(zhǎng)于花萼；雄蕊6，長(zhǎng)約3.5mm，總苞淺杯狀。雌花：花萼短筒形，先端3齒裂；花瓣披針形，長(zhǎng)約為花萼的2倍；子房卵形，柱頭3枚。果實(shí)球形，直徑1.8-2cm，有18-20行縱列的鱗片，鱗片在每1列上有10-20個(gè)，黃色而光亮，有槽紋。種子腎狀球形?；ㄆ?月，果期6-10月。收載于中藥大辭典。鵝蛋殼：本品為為鴨科雁屬動(dòng)物家鵝AnsercygnoidesdomesticaBrisson.的卵殼。食用鵝蛋時(shí)，收集蛋殼，洗凈，曬干或烘干?！拘晕丁扛剩坏?；平?！練w經(jīng)】肺經(jīng)?！竟δ苤髦巍堪味九拍?；理氣止痛。主癰疽膿成難潰；疝氣；難產(chǎn)?！拘誀睢慷喑尸F(xiàn)碎片狀，外表面白色稍粗糙，易破裂；內(nèi)表面光滑，質(zhì)脆易碎。氣微，味淡。收載于中藥大辭典。藤黃雙黃酮（Morelloflavone）：CAS號(hào)16851-21-1，分子式C30H20O11，分子量556.48。【藥理作用】抗腫瘤。【成分來(lái)源】山竹子Garciniamultiflora，藤黃Garciniamorella。環(huán)木菠蘿烷醇（Cycloartanol）：CAS號(hào)4657-58-3，分子式C30H52O，分子量428.75?！舅幚碜饔谩烤哂锌寡鬃饔谩！境煞謥?lái)源】豆油，枸杞子，火秧簕，水龍骨。2個(gè)原料藥化學(xué)結(jié)構(gòu)：藤黃雙黃酮（Morelloflavone）環(huán)木菠蘿烷醇（Cycloartanol）。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是克服
背景技術(shù)：
的不足，提供一種有效治療膀胱癌的藥物組合物及其制備方法。本發(fā)明是采用如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：制成該治療膀胱癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：省沽油562-568重量份鵝蛋殼436-440重量份環(huán)木菠蘿烷醇42-48重量份藤黃雙黃酮32-38重量份。優(yōu)選的用于治療膀胱癌的藥物組合物，是由如下重量份的原料藥組成：省沽油565重量份鵝蛋殼438重量份環(huán)木菠蘿烷醇46重量份藤黃雙黃酮35重量份。一種治療膀胱癌的藥物組合物，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。一種治療膀胱癌的藥物組合物，其特征在于藥物組合物與化學(xué)藥或中藥組成的治療膀胱癌藥物。一種治療膀胱癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：原料藥的組成和重量份為：省沽油562-568重量份鵝蛋殼436-440重量份環(huán)木菠蘿烷醇42-48重量份藤黃雙黃酮32-38重量份；制備方法：（1）按原料藥配比取省沽油、鵝蛋殼、環(huán)木菠蘿烷醇、藤黃雙黃酮，混勻，用重量百分比濃度17%乙醇作為溶劑，在29℃溫浸提取，提取次數(shù)為27次，每次提取時(shí)間為0.5小時(shí)，每次溶劑用量為原料藥總重量的31倍，濾過(guò)，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.15，濾過(guò)，藥液通過(guò)FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度44%乙醇溶液洗脫FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度44%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度69%乙醇作為溶劑，加熱回流提取24次，每次提取時(shí)間為0.4小時(shí)，每次溶劑用量為藥渣A重量的23倍，濾過(guò)，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.12，濾過(guò)，藥液通過(guò)DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。優(yōu)選的一種治療膀胱癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于按如下步驟制備：原料藥的組成和重量份為：省沽油565重量份鵝蛋殼438重量份環(huán)木菠蘿烷醇46重量份藤黃雙黃酮35重量份；制備方法：（1）按原料藥配比取省沽油、鵝蛋殼、環(huán)木菠蘿烷醇、藤黃雙黃酮，混勻，用重量百分比濃度17%乙醇作為溶劑，在29℃溫浸提取，提取次數(shù)為27次，每次提取時(shí)間為0.5小時(shí)，每次溶劑用量為原料藥總重量的31倍，濾過(guò)，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.15，濾過(guò)，藥液通過(guò)FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度44%乙醇溶液洗脫FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度44%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度69%乙醇作為溶劑，加熱回流提取24次，每次提取時(shí)間為0.4小時(shí)，每次溶劑用量為藥渣A重量的23倍，濾過(guò)，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.12，濾過(guò)，藥液通過(guò)DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。一種治療膀胱癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物可以采用制劑學(xué)的常規(guī)方法制備成片劑或膠囊劑或滴丸。一種治療膀胱癌的藥物組合物的制備方法，其特征在于藥物組合物與化學(xué)藥或中藥組成治療膀胱癌藥物。藥物組合物治療膀胱癌療效顯著。具體實(shí)施方式實(shí)施例1：治療膀胱癌的藥物組合物及其制備方法治療膀胱癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：省沽油565g鵝蛋殼438g環(huán)木菠蘿烷醇46g藤黃雙黃酮35g；制備方法：（1）按原料藥配比取省沽油、鵝蛋殼、環(huán)木菠蘿烷醇、藤黃雙黃酮，混勻，用重量百分比濃度17%乙醇作為溶劑，在29℃溫浸提取，提取次數(shù)為27次，每次提取時(shí)間為0.5小時(shí)，每次溶劑用量為原料藥總重量的31倍，濾過(guò)，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.15，濾過(guò)，藥液通過(guò)FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度44%乙醇溶液洗脫FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度44%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度69%乙醇作為溶劑，加熱回流提取24次，每次提取時(shí)間為0.4小時(shí)，每次溶劑用量為藥渣A重量的23倍，濾過(guò)，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.12，濾過(guò)，藥液通過(guò)DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。實(shí)施例2：治療膀胱癌的藥物組合物及其制備方法治療膀胱癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：省沽油562g鵝蛋殼440g環(huán)木菠蘿烷醇42g藤黃雙黃酮38g；制備方法：（1）按原料藥配比取省沽油、鵝蛋殼、環(huán)木菠蘿烷醇、藤黃雙黃酮，混勻，用重量百分比濃度17%乙醇作為溶劑，在29℃溫浸提取，提取次數(shù)為27次，每次提取時(shí)間為0.5小時(shí)，每次溶劑用量為原料藥總重量的31倍，濾過(guò)，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.15，濾過(guò)，藥液通過(guò)FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度44%乙醇溶液洗脫FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度44%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度69%乙醇作為溶劑，加熱回流提取24次，每次提取時(shí)間為0.4小時(shí)，每次溶劑用量為藥渣A重量的23倍，濾過(guò)，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.12，濾過(guò)，藥液通過(guò)DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。實(shí)施例3：治療膀胱癌的藥物組合物及其制備方法治療膀胱癌的藥物組合物的原料藥的組成和重量份為：省沽油568g鵝蛋殼436g環(huán)木菠蘿烷醇48g藤黃雙黃酮32g；制備方法：（1）按原料藥配比取省沽油、鵝蛋殼、環(huán)木菠蘿烷醇、藤黃雙黃酮，混勻，用重量百分比濃度17%乙醇作為溶劑，在29℃溫浸提取，提取次數(shù)為27次，每次提取時(shí)間為0.5小時(shí)，每次溶劑用量為原料藥總重量的31倍，濾過(guò)，得藥渣A和提取液A，提取液A回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.15，濾過(guò)，藥液通過(guò)FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度44%乙醇溶液洗脫FU-08大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度44%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物A；（2）取步驟（1）藥渣A，用重量百分比濃度69%乙醇作為溶劑，加熱回流提取24次，每次提取時(shí)間為0.4小時(shí)，每次溶劑用量為藥渣A重量的23倍，濾過(guò)，得藥渣B和提取液B，提取液B回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1.12，濾過(guò)，藥液通過(guò)DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫，再用重量百分比濃度79%乙醇溶液洗脫DM134大孔吸附樹(shù)脂柱，收集重量百分比濃度79%乙醇洗脫液，回收乙醇，濃縮干燥，即得提取物B；（3）將提取物A和提取物B混勻，即得藥物組合物。實(shí)施例4：片劑的制備取實(shí)施例1藥物組合物220g，加入淀粉285g，混勻，制粒，干燥，加微晶纖維素76g，硬脂酸鎂9g，混勻，壓制成1600片，即得藥物組合物片劑。實(shí)施例5：膠囊的制備取實(shí)施例2藥物組合物274g，加入淀粉293g，混勻，制粒，干燥，整粒，加入適量硬脂酸鎂，混勻，裝膠囊1200粒，即得藥物組合物膠囊。實(shí)施例6：滴丸的制備稱(chēng)取聚乙二醇6000256g水浴(80℃)加熱煮熔，加入實(shí)施例3藥物組合物13g，充分?jǐn)嚢杈鶆颍砸后w石蠟為冷卻劑，置玻璃管（4*80cm）中，冷卻溫度為3℃，滴口內(nèi)外徑為7.0/1.5(mm/mm)，滴口距液面為1.9cm，滴速以每分53滴為最佳條件，用棉布吸干滴丸表面的冷凝劑，即得藥物組合物滴丸。實(shí)驗(yàn)例1：治療膀胱癌作用試驗(yàn)研究1資料與方法1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組清潔級(jí)雌性Fisher344大鼠30只，雌雄各半，由山東中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供。實(shí)驗(yàn)分為3組，每組10只，即空白對(duì)照組、藥物組合物組、豬苓多糖組。1.2主要試劑藥物組合物為實(shí)施例1藥物組合物（批號(hào)20150405）、BBN試劑由山東中醫(yī)藥大學(xué)購(gòu)進(jìn)。IL-2、VEGF、AQP1、AQP3、β-actin測(cè)定試劑盒(哈爾濱海霞試劑有限公司)。1.3主要儀器電子天平；電熱恒溫水浴鍋(華夏儀器制造廠(chǎng))；微量移液器(上海易友儀器有限公司)；TD5M-WS型臺(tái)式低速離心機(jī)；全自動(dòng)酶標(biāo)儀-WD-2102A酶標(biāo)儀；PCR擴(kuò)增儀(PTC-100TMMJResearch公司)；數(shù)碼凝膠成像分析系統(tǒng)等。1.4造模及給藥方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)分為3組，每組10只，即空白對(duì)照組、豬苓多糖100mg/kg組、藥物組合物100mg/kg組，大鼠飲用含有0.05%BBN，持續(xù)8周，第9周給予含5％糖精的飲用水和相應(yīng)實(shí)驗(yàn)組注射干預(yù)藥物均為至第20周截止。大鼠采血后，把大鼠麻醉于手術(shù)臺(tái)上分離膀胱組織。1.5指標(biāo)測(cè)定ELISA法測(cè)血清中VEGF、IL-2含量；RT-PCR法測(cè)AQP1和AQP3表達(dá)情況。1.6數(shù)據(jù)處理所得數(shù)據(jù)采用方差分析兩均數(shù)間t檢驗(yàn)，SPSS18.0軟件分析，各組數(shù)據(jù)由x±s表示，P<0.05為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果藥物組合物對(duì)膀胱癌大鼠腫瘤抑制效果顯著，其可以提高血清中IL-2含量，減少VEGF含量水平，同時(shí)下調(diào)AQP1和AQP3基因表達(dá)，具體結(jié)果見(jiàn)表1，表2。表1藥物組合物對(duì)大鼠外周血清中IL-2、VEGF(x±s)組別例數(shù)劑量/(mg/kg.d)IL-2/(μg/mL)VEGF/(μg/mL)空白對(duì)照組109.55±0.234.73±0.24豬苓多糖組1010011.78±0.432.70±0.51藥物組合物組1010012.65±0.52*2.87±0.54*注：*與豬苓多糖組比P<0.01。表2藥物組合物對(duì)大鼠膀胱組織中AQP1和AQP3表達(dá)的影響(x±s)組別例數(shù)劑量/(mg/kg.d)AQP1/β-actinAQP3/β-actin空白對(duì)照組105.33±0.168.66±0.56豬苓多糖組101004.34±0.176.53±0.32藥物組合物組101003.89±0.15*5.11±0.14*注：*與空白對(duì)照組比P<0.01。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3