相關(guān)申請交叉參考本申請要求2006年8月2日提交的美國專利申請第60/821,190號的優(yōu)先權(quán)權(quán)益。該申請還與美國專利第5,874,500、6,063,061、6,066,325、6,166,130和6,458,889號相關(guān)。這些提交文件的內(nèi)容各自通過引用結(jié)合到本文中。對有關(guān)在聯(lián)邦政府資助下研究和開發(fā)產(chǎn)生的發(fā)明權(quán)力的聲明不適用關(guān)于緊致磁盤上提交的“序列表”、表格或計(jì)算機(jī)程序列表附錄不適用
背景技術(shù)：
：：在1992年11月10日頒布給Rhee等的美國專利第5,162,430號中，有關(guān)于通過使膠原蛋白與合成親水性聚合物例如聚乙二醇的各種衍生物共價連接制備的膠原蛋白-合成聚合物綴合物的論述。在1994年6月28日頒布給Rhee等的美國專利第5,324,775號中，有關(guān)于與合成的非免疫原性親水性聚乙二醇聚合物共價連接的各種嵌入天然生物相容性聚合物(例如多糖)的論述。在1994年7月12日頒布給Rhee等的美國專利第5,328,955號中，有關(guān)于各種活化形式的聚乙二醇和可用于產(chǎn)生具有一定范圍物理和化學(xué)性質(zhì)的膠原蛋白-合成聚合物綴合物的各種鍵的論述。在1995年3月14日提交的順序號08/403,358中，有關(guān)于用疏水性交聯(lián)劑或親水性和疏水性交聯(lián)劑的混合物制備的交聯(lián)生物材料組合物的論述。疏水性交聯(lián)劑可包括任何含有或可通過化學(xué)衍生化含有兩個或多個琥珀酰亞胺基的疏水性聚合物。在1996年12月3日頒布給Yeung等的美國專利第5,580,923號中，有關(guān)于可用于防止手術(shù)粘連的組合物的論述，該組合物含基體材料和防粘粘合劑，其中基體材料優(yōu)選含膠原蛋白，優(yōu)選該粘合劑含至少一個組織活性官能團(tuán)和至少一個基體活性官能團(tuán)。在1997年3月25日頒布給Rhee等的美國專利第5,614,587號中，有關(guān)于生物粘附性組合物的論述，該組合物含用多官能活化的合成親水性聚合物交聯(lián)的膠原蛋白，和用此類組合物完成第一表面和第二表面之間粘合的方法，其中第一和第二表面中的至少一個可為原生(native)組織表面。在日本專利公布號07090241中有關(guān)于用于透鏡材料短時粘合以支持和使該材料安裝在機(jī)械裝置的組合物的論述，該組合物含有平均分子量為1000-5000的聚乙二醇和平均分子量為30,000-200,000的聚N-乙烯基吡咯烷酮的混合物。West和Hubbell在Biomaterials(1995)16：1153-1156中論述了用光聚合的聚乙二醇-乳酸共聚物二丙烯酸酯水凝膠和物理交聯(lián)聚乙二醇-聚丙二醇共聚物水凝膠泊洛沙姆防止術(shù)后粘連。在美國專利第5,672,336和5,196,185號中有關(guān)于創(chuàng)傷敷料的論述，該敷料含有0.5-2.0μm粒度的微粒纖維膠原。該組合物主要包含水相，但不能形成本發(fā)明中所述水凝膠。在美國專利第5,698,213號中有關(guān)于可用作吸收性外科手術(shù)裝置和遞藥溶媒的交聯(lián)脂族聚酯水凝膠的論述。在美國專利第5,674,275號中有關(guān)于丙烯酸酯或異丁烯酸酯基水凝膠粘合劑的論述。在美國專利第5,306,501號中有關(guān)于可用作遞藥溶媒的聚氧化烯基熱致可逆的水凝膠的論述。在美國專利第4,925,677和5,041,292號中有關(guān)于含與多糖或粘多糖交聯(lián)的蛋白組分的可用作遞藥溶媒的水凝膠的論述。在美國專利第5,384,333號和Jeong等(1997)″Nature,″388：860-862中有關(guān)于可生物降解的注射給藥聚合物的論述。在美國專利第4,925,677號中有關(guān)于用于控釋遞藥的可生物降解水凝膠的論述。在美國專利第4,347,234和4,291,013號中有關(guān)于基于可再吸收膠原蛋白的遞藥系統(tǒng)的論述。在美國專利第5,300,494和4,946,870號中有關(guān)于用于遞藥的氨基多糖基生物相容性膜的論述。在美國專利第5,648,506號中有關(guān)于釋放紫杉醇的水溶性載體的論述。已有聚合物用作治療藥物的載體，實(shí)現(xiàn)局部釋放和緩釋(Langer，etal.，Rev.Macro.Chem.Phys.，C23(1)，61，1983；ControlledDrugDelivery，Vol.I和II，Bruck，S.D.，(ed.)，CRCPress，BocaRaton，F(xiàn)la.，1983；Leongetal.，Adv.DrugDeliveryReview，1：199，1987)。這些治療藥物釋放系統(tǒng)類似于輸注，提供增強(qiáng)療效和減少全身毒性的潛力。提出的用于控釋藥物釋放的其它類合成聚合物包括聚酯(Pitt，etal.，ControlledReleaseofBioactiveMaterials，R.Baker，Ed.，AcademicPress，NewYork，1980)；聚酰胺(Sidman，etal.，JournalofMembraneScience，7：227，1979)；聚氨酯(Maser，etal.，JournalofPolymerScience，PolymerSymposium，66：259，1979)；聚原酸酯(Heller，etal.，PolymerEngineeringScient，21：727，1981)；和聚酸酐(Leong，etal.，Biomaterials，7：364，1986)。在美國專利第5,428,024；5,352,715；和5,204,382號中有關(guān)于通過機(jī)械破壞發(fā)生物理性質(zhì)變化的含膠原蛋白的組合物的論述。這些專利主要涉及纖維和不溶性膠原。在美國專利第4,803,075號中有關(guān)于注射膠原蛋白組合物的論述。在美國專利第5,516,532號中有關(guān)于骨/軟骨注射組合物的論述。在WO96/39159中有關(guān)于含5μm-850μm粒度干燥粒子的膠原蛋白基釋放基質(zhì)的論述，其中干燥粒子可懸浮于水并具有特定表面電荷密度。在美國專利第5,196,185號中有關(guān)于粒度為1μm-50μm的膠原蛋白制劑的描述，該制劑可用作形成創(chuàng)傷敷料的氣溶膠噴霧劑。論述膠原蛋白組合物的其它專利包括美國專利第5,672,336和5,356,614號。在WO96/06883中有關(guān)于可交聯(lián)并可通過注射器注射的聚合物非易蝕性水凝膠的論述。轉(zhuǎn)讓給本發(fā)明受讓人的以下待審申請含相關(guān)主題內(nèi)容：1997年7月31日提交的美國專利申請順序號08/903,674；1997年6月18日提交的美國專利申請順序號60/050,437；1996年8月27日提交的美國專利申請順序號08/704,852；1996年6月19日提交的美國專利申請順序號08/673,710；1996年2月20日提交的美國專利申請順序號60/011,898；1996年11月7日提交的美國專利申請順序號60/006,321；1996年11月7日提交的美國專利申請順序號60/006,322；1996年11月7日提交的美國專利申請順序號60/006,324；和1995年6月7日提交的美國專利申請順序號08/481,712。這些申請各自通過引用全文結(jié)合到本文中。以上文獻(xiàn)和其中引用的刊物各自通過引用結(jié)合到本文中。有多種適用于生物粘合劑的材料，用于組織增加、預(yù)防外科手術(shù)粘連、在合成植入物表面涂層、用作遞藥基質(zhì)、眼科應(yīng)用等。另外，在許多情況下，這些材料的凝結(jié)時間可能小于最佳時間，但對于外科手術(shù)和其它醫(yī)療應(yīng)用，通常優(yōu)選快速起效材料。在其它情況下，目前可得到的材料可顯示某些外科手術(shù)應(yīng)用不期望的溶脹性質(zhì)。因此，需要快速起效材料，作為例如止血和/或傷口密封用的組織密封劑使用。還需要提供顯示最小溶脹性質(zhì)的材料。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供在體內(nèi)環(huán)境中實(shí)現(xiàn)止血或其它流體抑制的組合物。本發(fā)明組合物含第一種和第二種交聯(lián)性組分和至少一種水凝膠形成組分，此類組合物適合涂覆在脊椎動物上以促使流體抑制。組合物包括快速起效材料，用作例如用于止血和/或傷口密封應(yīng)用的組織密封劑。此類組合物顯示最小熔脹性質(zhì)。在第一個方面，本發(fā)明實(shí)施方案提供包含以下組分的組合物：第一種交聯(lián)性組分、在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分，和水凝膠形成組分。第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分交聯(lián)，形成具有空隙的多孔基質(zhì)，而水凝膠形成組分能夠水合形成水凝膠，以填充至少一些空隙。在某些方面，水凝膠形成組分的pH可影響形成密封劑基質(zhì)屏障的反應(yīng)時間。例如，在某些實(shí)施方案中，提供含pH6.75的水凝膠形成組分的組合物，該組合物的反應(yīng)時間比含pH9.5的水凝膠形成組分的組合物慢。第一種交聯(lián)性組分可包含多個親核性基團(tuán)，而第二種交聯(lián)性組分可包含多個親電基團(tuán)。在某些方面，第一種交聯(lián)性組分包含具有m個親核基團(tuán)的多-親核性聚環(huán)氧烷，第二種交聯(lián)性組分包含具有n個親電基團(tuán)的多-親電性聚環(huán)氧烷，其中m和n各自大于或等于2，且其中m+n大于或等于5。在某些方面，n為2，m大于或等于3?？蓪⒍?親核性聚環(huán)氧烷四官能活化。在某些方面，m為2，n大于或等于3?？蓪⒍?親電性聚環(huán)氧烷四官能活化。在某些情況下，多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷均四官能活化。多-親核性聚環(huán)氧烷可包含2個或多個親核基團(tuán)例如NH2、-SH、-H、-PH2和/或-CO-NH-NH2。在某些情況下，多-親核性聚環(huán)氧烷包含2個或多個伯氨基。在某些情況下，多-親核性聚環(huán)氧烷包含2個或多個硫醇基。多-親核性聚環(huán)氧烷可以為聚乙二醇或其衍生物。在某些情況下，聚乙二醇包含2個或多個親核基團(tuán)，它們可包括伯氨基和/或硫醇基。多-親電性聚環(huán)氧烷可包含2個或多個親電基團(tuán)例如-CO2N(COCH2)2、-CO2H、-CHO、-CHOCH2、-N＝C＝O、-SO2CH＝CH2、-N(COCH)2和/或-S-S-(C5H4N)。多-親電性聚環(huán)氧烷可包含2個或多個琥珀酰亞胺基。多-親電性聚環(huán)氧烷可包含2個或多個馬來酰亞胺基。在某些情況下，多-親電性聚環(huán)氧烷可為聚乙二醇或其衍生物。在某些方面，組合物包含多糖或蛋白。多糖可為葡糖胺多糖，例如透明質(zhì)酸、甲殼質(zhì)、硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素B、硫酸軟骨素C、硫酸角蛋白、硫酸角質(zhì)、肝素或其衍生物。蛋白可以為膠原蛋白或其衍生物。多-親核性聚環(huán)氧烷或多-親電性聚環(huán)氧烷，或多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷均可含連接基團(tuán)。在某些情況下，可通過下式給出多-親核性聚環(huán)氧烷：聚合物-Q1-Xm。可通過下式給出多-親電性聚環(huán)氧烷：聚合物-Q2-Yn。X可為親電基團(tuán)，Y可為親核基團(tuán)，m和n各自可為2-4，m+n可為≤5，Q1和Q2各自可為連接基團(tuán)例如-O-(CH2)n′-、-S-、-(CH2)n′-、-NH-(CH2)n′-、-O2C-NH-(CH2)n′-、-O2C-(CH2)n′-、-O2C-CR1H和/或-O-R2-CO-NH。在某些情況下，n′可為1-10，R1可為-H、-CH3或-C2H5，R2可為-CH2-或-CO-NH-CH2CH2-，Q1和Q2可相同或不同，或可不存在。在某些方面，Y可為-CO2N(COCH2)2或-CO2N(COCH2)2。在某些情況下，多-親核性聚環(huán)氧烷或多-親電性聚環(huán)氧烷，或多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷都還包含可生物降解基團(tuán)?？缮锝到饣鶊F(tuán)可為丙交酯、乙交酯、ε-己內(nèi)酯、聚(α-羥基酸)、聚(氨基酸)或聚(酐)。在某些方面，水凝膠形成組分能夠水化，形成包括明膠的生物相容性水凝膠片段，且當(dāng)釋放至濕組織靶部位時吸收水。水凝膠可包含完全水化時大小為約0.01mm-約5mm和約400％-約5000％的平衡溶脹的亞單位。在某些情況下，水凝膠體內(nèi)降解時間小于1年。在某些情況下，水凝膠至少部分被含水介質(zhì)水化并含活性劑，該活性劑可包括凝血藥例如凝血酶。在另一方面，本發(fā)明實(shí)施方案提供將活性劑釋放至患者的方法。該方法可包括給予患者靶部位一定量的本文中所述組合物。在某些方面，實(shí)施方案包括將密封劑釋放到患者的方法。該方法可包括給予出血靶部位足以抑制出血的量的本文中所述組合物。在某些方面，實(shí)施方案包括將凝血酶釋放到患者的方法。該方法可包括給予出血靶部位足以抑制出血的量的本文中所述組合物。在還另一方面，本發(fā)明實(shí)施方案包括含多-親核性聚環(huán)氧烷、多-親電性聚環(huán)氧烷和水凝膠形成組分的組合物。多-親核性聚環(huán)氧烷還可包含至少一個伯氨基和至少一個硫醇基。在能夠反應(yīng)的條件下，多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷能夠基本上立即交聯(lián)。實(shí)施方案包括組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷包含兩個或多個硫醇基，多-親電性聚環(huán)氧烷包含兩個或多個親電基團(tuán)例如琥珀酰亞胺基和/或馬來酰亞胺基。實(shí)施方案還包括組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷包含兩個或多個親核基團(tuán)例如伯氨基和/或硫醇基。多-親電性聚環(huán)氧烷可包含兩個或多個琥珀酰亞胺基。在某些情況下，實(shí)施方案包括含以下組分的組合物：具有兩個或多個硫醇基的第一種聚乙二醇、具有兩個或多個琥珀酰亞胺基或馬來酰亞胺基的第二種聚乙二醇，和水凝膠形成組分。硫醇基和琥珀酰亞胺基或馬來酰亞胺基的總數(shù)可至少為5，在能夠反應(yīng)的條件下，第一種聚乙二醇和第二種聚乙二醇可能夠基本上立即交聯(lián)。在某些情況下，第一種聚乙二醇含4個硫醇基，第二種聚乙二醇含4個琥珀酰亞胺基。在某些情況下，組合物含蛋白質(zhì)或多糖。多糖可以是葡糖胺多糖，例如透明質(zhì)酸、甲殼質(zhì)、硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素B、硫酸軟骨素C、硫酸角蛋白、硫酸角質(zhì)、肝素或其衍生物。蛋白質(zhì)可以是膠原蛋白或其衍生物。在另一個方面，本發(fā)明實(shí)施方案包括將組織道密封的方法。該方法可包括用組合物至少部分填充組織道，該組合物含第一種交聯(lián)性組分、在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分，和水凝膠形成組分。第一種和第二種交聯(lián)性組分可交聯(lián)形成具有空隙的多孔性基質(zhì)，而水凝膠形成組分可能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。在某些情況下，水凝膠含完全水化時大小約0.05mm-約5mm和平衡溶脹為約400％-約1300％的亞單位，它們在組織道中約1-約120天后降解。在某些情況下，第一種交聯(lián)性組分含多個親核基團(tuán)，第二種聚合物含多個親電基團(tuán)。在還另一個方面，本發(fā)明實(shí)施方案包括在患者身體中靶部位抑制出血的方法。該方法可包括將足以抑制出血的量的組合物釋放至靶部位，其中該組合物含第一種交聯(lián)性組分、在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分，和水凝膠形成組分。第一種和第二種交聯(lián)性組分可交聯(lián)形成具有空隙的多孔基質(zhì)，而水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。當(dāng)完全水化時，水凝膠可含大小約0.05mm-約5mm的亞單位，其平衡溶脹為約400％-約1300％，它們在組織道中約1-約120天后降解。第一種交聯(lián)性組分可包含多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分可包含多個親電基團(tuán)。在另一方面，本發(fā)明實(shí)施方案包括將生物活性物質(zhì)釋放至患者身體中靶部位的方法。該方法可包括將組合物和生物活性物質(zhì)聯(lián)合釋放至靶部位，其中組合物含第一種交聯(lián)性組分、在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分，和水凝膠形成組分。第一種和第二種交聯(lián)性組分可交聯(lián)形成具有空隙的多孔性基質(zhì)，而水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。當(dāng)完全水化時，水凝膠可含大小約0.05mm-約5mm的亞單位，平衡溶脹約400％-約1300％，它們可在組織道中約1-約120天后降解。在某些情況下，第一種交聯(lián)性組分包含多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分包含多個親電基團(tuán)。生物活性物質(zhì)可以是止血劑，例如凝血酶。在另一方面，本發(fā)明實(shí)施方案包括將可溶脹組合物釋放至組織中的靶部位的方法。該方法可包括將組合物涂覆在靶部位上，其中該組合物含第一種交聯(lián)性組分、在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分，和水凝膠形成組分。第一種和第二種交聯(lián)性組分可交聯(lián)形成具有空隙的多孔基質(zhì)，而水凝膠形成組分能水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。當(dāng)完全水化時，水凝膠可含大小約0.05mm-約5mm的亞單位，其平衡溶脹約400％-約1300％，它們在組織道中約1-約120天后降解。當(dāng)涂覆到其中其溶脹至平衡溶脹值的靶部位后，組合物可在小于其平衡溶脹下水化。在某些方面，第一種交聯(lián)性組分含多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分含多個親電基團(tuán)。在某些方面，靶部位可在以下組織中：肌肉、皮膚、上皮組織、平滑肌、骨骼肌或心肌、結(jié)締或支持組織、神經(jīng)組織、眼和其它感覺器官組織、血管和心組織、腸胃器官和組織、胸膜和其它肺組織、腎、內(nèi)分泌腺、雄性和雌性生殖器官、脂肪組織、肝、胰腺、淋巴腺、軟骨、骨、口腔組織和粘膜組織，以及脾和其它腹部器官。在某些方面，靶部位包括所選擇的組織中空隙區(qū)域，例如組織皮層(divot)、組織道、脊柱內(nèi)空間或體腔。在某些情況下，水凝膠在平衡溶脹時的水化度為水化50％-95％。在某些情況下，水凝膠含增塑劑例如聚乙二醇、山梨醇或甘油。以水凝膠組分的組合物計(jì)，增塑劑可以0.1％-30％重量存在。在某些情況下，水凝膠含交聯(lián)蛋白水凝膠。該蛋白可包括明膠、可溶性膠原蛋白、白蛋白、血紅蛋白、纖維蛋白原(fibrogen)、纖維蛋白、酪蛋白、纖連蛋白、彈性蛋白、角蛋白、層粘連蛋白及其衍生物和組合。在某些情況下，水凝膠含交聯(lián)多糖。多糖可含葡糖胺多糖、淀粉衍生物、纖維素衍生物、半纖維素衍生物、木聚糖、瓊脂糖、藻酸酯(鹽)，和殼聚糖及其組合。在某些情況下，水凝膠含交聯(lián)非生物聚合物。該交聯(lián)非生物聚合物可含聚丙烯酸酯、聚異丁烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚乙烯樹脂、聚丙交酯-乙交酯、聚己內(nèi)酯、聚氧乙烯及其組合。在某些情況下，水凝膠含至少兩種成分，它們選自交聯(lián)蛋白、交聯(lián)多糖和交聯(lián)非生物聚合物。水凝膠可包括水凝膠聚合物和水凝膠交聯(lián)劑。水凝膠聚合物和水凝膠交聯(lián)劑可在產(chǎn)生水凝膠聚合物分子交聯(lián)的條件下反應(yīng)。在某些情況下，水凝膠含分子交聯(lián)水凝膠聚合物，在產(chǎn)生水凝膠聚合物分子交聯(lián)的條件下通過輻照水凝膠制備該聚合物。在某些情況，水凝膠包含分子交聯(lián)水凝膠，通過在產(chǎn)生水凝膠聚合物分子交聯(lián)的條件下使單不飽和與多不飽和水凝膠單體反應(yīng)制備該分子交聯(lián)水凝膠。在再另一方面，本發(fā)明實(shí)施方案包括形成三維合成聚合物基質(zhì)的方法。該方法包括提供含m個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分和含n個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分。使親電基團(tuán)與親核基團(tuán)反應(yīng)，在基團(tuán)之間形成共價鍵，m和n各自大于或等于2，m+n大于或等于5。該方法還包括使第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分組合，將水凝膠形成組分加入到第一種交聯(lián)性組分和第二種交聯(lián)性組分，讓第一種交聯(lián)性組分和第二種交聯(lián)性組分互相交聯(lián)，形成三維基質(zhì)。該方法也可包括使第一組織表面和第二表面與第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分接觸。在某些情況下，第二表面是原生(native)組織表面。在某些情況下，第二表面是非原生組織表面，例如合成植入物。合成植入物可以為供體角膜、人造血管、心臟瓣膜、人造器官、粘合性假體、可移植微透鏡(implantablelenticule)、血管移植物、支架或支架/移植物組合。在某些情況下，將粉末形式的第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分各自涂覆在第一組織表面。在某些情況下，將第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分各自以單一合并混合的粉末制劑的粉末涂覆在第一組織表面?；旌戏勰┲苿┛珊鞍缀?或多糖。第一組織表面可在硬組織或軟組織之上或之中。第一組織表面可包括手術(shù)部位周圍或近鄰。該方法還可包括封閉手術(shù)部位。在某些情況下，混合粉末制劑含膠原蛋白。在某些情況下，混合粉末制劑含生物活性劑。在某些方面，本發(fā)明實(shí)施方案包括混合粉末組合物，該組合物含粉末形式的具有多個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分、粉末形式的具有多個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分，和粉末形式的水凝膠形成組分。在能夠反應(yīng)的條件下，第一種和第二種交聯(lián)性組分能夠基本上立即交聯(lián)。在相關(guān)方面，加入到第二種交聯(lián)性組分的第一種交聯(lián)性組分提供組合的交聯(lián)性組分組合物。以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第一種交聯(lián)性組分可以約0.5％-約20％重量的濃度存在。在某些情況下，以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第二種交聯(lián)性組分可以約0.5％-約20％重量的濃度存在。第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比可為約45％-約55％。相關(guān)的，第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比可為約50％。在某些情況下，第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分的重量比可為約28％-約42％w/w。相關(guān)的，第一種和第二種交聯(lián)性組分與水凝膠形成組分之間的重量比可為約20％-約30％w/w。在某些方面，以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第一種交聯(lián)性組分可以約0.5％-約20％重量的濃度存在。相關(guān)的，以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第二種交聯(lián)性組分可以約0.5％-約20％重量的濃度存在。第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比可為約45％-約55％。類似的，第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比可為約50％。在另一方面，本發(fā)明實(shí)施方案提供密封劑基質(zhì)組合物試劑盒。試劑盒可包含例如容器和置于該容器內(nèi)的混合粉末組合物。組合物可包含具有多個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分和具有多個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分。第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分或二者均可以為粉末形式。試劑盒也可含粉末形式的水凝膠形成組分。在能夠反應(yīng)的條件下，第一種和第二種交聯(lián)性組分能夠基本上立即交聯(lián)。在某些情況下，容器含注射器管和注射器柱塞。試劑盒也可含關(guān)于將混合粉末組合物涂覆在患者出血靶部位的書面說明書。在某些情況下，混合粉末含活性劑?；钚詣┛砂?。在另一方面，試劑盒可含膠原海綿或其它合適的支持物，和固定在該海棉或支持物的表面的混合粉末組合物。該組合物可含具有多個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分和具有多個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分。第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分或二者均可為粉末形式。試劑盒也可含粉末形式的水凝膠形成組分。在能夠反應(yīng)的條件下，第一種和第二種交聯(lián)性組分能夠基本上立即交聯(lián)。為更全面理解本發(fā)明性質(zhì)和優(yōu)點(diǎn)，應(yīng)結(jié)合附圖參考詳述部分。本發(fā)明包括但不限于：31.含以下組分的組合物：第一種交聯(lián)性組分；在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分；和水凝膠形成組分；其中第一種和第二種交聯(lián)性組分交聯(lián)形成具有空隙的多孔基質(zhì)，和其中水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。32.第31段的組合物，其中第一種交聯(lián)性組分含多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分含多個親電基團(tuán)。33.第31段的組合物，其中第一種交聯(lián)性組分含具有m個親核基團(tuán)的多-親核性聚環(huán)氧烷，第二種交聯(lián)性組分含具有n個親電基團(tuán)的多-親電性聚環(huán)氧烷，其中m和n各自大于或等于2，和其中m+n大于或等于5。34.第33段的組合物，其中n為2，和其中m大于或等于3。35.第34段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷被四官能活化。36.第33段的組合物，其中m為2，和其中n大于或等于3。37.第36段的組合物，其中多-親電性聚環(huán)氧烷被四官能活化。38.第33段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷均被四官能活化。39.第33段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含選自以下的2個或多個親核基團(tuán)：NH2、-SH、-H、-PH2和-CO-NH-NH2。40.第33段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含2個或多個伯氨基。41.第33段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含2個或多個硫醇基。42.第33段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷為聚乙二醇或其衍生物。43.第42段的組合物，其中聚乙二醇還含2個或多個親核基團(tuán)，該親核基團(tuán)選自伯氨基和硫醇基。44.第33段的組合物，其中多-親電性聚環(huán)氧烷還含選自以下的2個或多個親電基團(tuán)：CO2N(COCH2)2、-CO2H、-CHO、-CHOCH2、-N＝C＝O、-SO2CH＝CH2、N(COCH)2和-S-S-(C5H4N)。45.第33段的組合物，其中多-親電性聚環(huán)氧烷還含2個或多個琥珀酰亞胺基。46.第33段的組合物，其中多-親電性聚環(huán)氧烷還含2個或多個馬來酰亞胺基。47.第33段的組合物，其中多-親電性聚環(huán)氧烷是聚乙二醇或其衍生物。48.第33段的組合物，該組合物還包含多糖或蛋白。49.第33段的組合物，該組合物還包含多糖，其中多糖為葡糖胺多糖。50.第49段的組合物，其中葡糖胺多糖選自透明質(zhì)酸、甲殼質(zhì)、硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素B、硫酸軟骨素C、硫酸角蛋白、硫酸角質(zhì)、肝素及其衍生物。51.第33段的組合物，該組合物還包含蛋白，其中蛋白為膠原蛋白或其衍生物。52.第33段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷或多-親電性聚環(huán)氧烷，或多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷兩者還含連接基團(tuán)。53.第33段的組合物，其中通過下式給出多-親核性聚環(huán)氧烷：聚合物-Q1-Xm且其中通過下式給出多-親電性聚環(huán)氧烷：聚合物-Q2-Yn其中X為親電基團(tuán)，Y為親核基團(tuán)；其中m和n各自為2-4；其中m+n≤5；其中Q1和Q2各自為連接基團(tuán)，該連接基團(tuán)選自-O-(CH2)n′-、-S-、-(CH2)n′-、-NH-(CH2)n′-、-O2C-NH-(CH2)n′-、-O2C-(CH2)n′-、-O2C-CR1H和-O-R2-CO-NH；其中n′＝1-10；其中R1＝-H、-CH3或-C2H5；其中R2＝-CH2-或-CO-NH-CH2CH2-；和其中Q1和Q2可相同或不同，或可不存在。54.第53段的組合物，其中通過下式給出Y：-CO2N(COCH2)2。55.第53段的組合物，其中通過下式給出Y：-N(COCH)2。56.第33段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷或多-親電性聚環(huán)氧烷，或多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷兩者還含可生物降解基團(tuán)。57.第56段的組合物，其中可生物降解基團(tuán)選自丙交酯、乙交酯、ε-己內(nèi)酯、聚(α-羥基酸)、聚(氨基酸)和聚(酐)。58.第31段的組合物，其中水凝膠形成組分能夠水化，形成包括明膠的生物相容性水凝膠片段，當(dāng)釋放至濕組織靶部位時將吸收水，其中該水凝膠含當(dāng)完全水化時大小約0.01mm-約5mm的亞單位，其平衡溶脹為約400％-約5000％。59.第58段的組合物，其中水凝膠在體內(nèi)的降解時間小于1年。60.第58和59段中任一段的組合物，其中至少部分水凝膠被含活性劑的含水介質(zhì)水化。61.第60段的組合物，其中活性劑是凝血藥。62.第61段的組合物，其中凝血藥是凝血酶。63.將活性劑釋放至患者的方法，該方法包括給予患者靶部位一定量的第60段的組合物。64.將密封劑釋放至患者的方法，該方法包括給予出血靶部位足以抑制出血的量的第31段的組合物。65.將凝血酶釋放至患者的方法，該方法包括給予出血靶部位足以抑制出血的量的第62段的組合物。66.含多-親核性聚環(huán)氧烷、多-親電性聚環(huán)氧烷和水凝膠形成組分的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含至少一個伯氨基和至少一個硫醇基，且其中在能夠反應(yīng)的條件下，多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷能夠基本上立即交聯(lián)。67.含多-親核性聚環(huán)氧烷、多-親電性聚環(huán)氧烷和水凝膠形成組分的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含2個或多個硫醇基，多-親電性聚環(huán)氧烷還含2個或多個親電基團(tuán)，該親電基團(tuán)選自琥珀酰亞胺基和馬來酰亞胺基，且其中在能夠反應(yīng)的條件下，多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷能夠基本上立即交聯(lián)。68.一種組合物，該組合物含多-親核性聚環(huán)氧烷、多-親電性聚環(huán)氧烷和水凝膠形成組分，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含2個或多個親核基團(tuán)，該親核基團(tuán)選自伯氨基和硫醇基，且多-親電性聚環(huán)氧烷還含2個或多個琥珀酰亞胺基，其中在能夠反應(yīng)的條件下，多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷能夠基本上立即交聯(lián)。69.一種組合物，該組合物含具有2個或多個硫醇基的第一種聚乙二醇、具有2個或多個琥珀酰亞胺基或馬來酰亞胺基的第二種聚乙二醇，和水凝膠形成組分，其中硫醇基和琥珀酰亞胺基或馬來酰亞胺基的總數(shù)為至少5，且其中在能夠反應(yīng)的條件下，第一種聚乙二醇和第二種聚乙二醇能夠基本上立即交聯(lián)。70.第69段的組合物，其中第一種聚乙二醇還含4個硫醇基，第二種聚乙二醇還含4個琥珀酰亞胺基。71.第69段的組合物，該組合物還含蛋白或多糖。72.第69段的組合物，該組合物還含多糖，其中多糖為葡糖胺多糖。73.第72段的組合物，其中葡糖胺多糖選自透明質(zhì)酸、甲殼質(zhì)、硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素B、硫酸軟骨素C、硫酸角蛋白、硫酸角質(zhì)、肝素及其衍生物。74.第69段的組合物，該組合物還含蛋白，其中蛋白為膠原蛋白或其衍生物。75.將組織道密封的方法，該方法包括用組合物至少部分填充組織道，該組合物含：第一種交聯(lián)性組分；在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分；和水凝膠形成組分；其中第一種和第二種交聯(lián)性組分交聯(lián)形成具有空隙的多孔基質(zhì)，水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙，水凝膠含完全水化時具有大小約0.05mm-約5mm的亞單位，和平衡溶脹約400％-約1300％，此類水凝膠在組織道中約1-約120天后降解。76.第75段的方法，其中第一種交聯(lián)性組分含多個親核基團(tuán)，第二種聚合物含多個親電基團(tuán)。77.抑制患者身體中靶部位出血的方法，該方法包括將足以抑制出血的量的組合物釋放至靶部位，該組合物含：第一種交聯(lián)性組分；在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分；和水凝膠形成組分；其中第一種和第二種交聯(lián)性組分交聯(lián)形成具有空隙的多孔性基質(zhì)，水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙，水凝膠含完全水化時具有大小約0.05mm-約5mm的亞單位，和平衡溶脹約400％-約1300％，此類水凝膠在組織道中約1-約120天后降解。78.第77段的方法，其中第一種交聯(lián)性組分含多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分含多個親電基團(tuán)。79.將生物活性物質(zhì)釋放至患者身體中靶部位的方法，該方法包括將組合物和生物活性物質(zhì)聯(lián)合釋放至靶部位，該組合物含：第一種交聯(lián)性組分；在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分；和水凝膠形成組分；其中第一種和第二種交聯(lián)性組分交聯(lián)形成具有空隙的多孔性基質(zhì)，水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙，水凝膠含完全水化時具有大小約0.05mm-約5mm的亞單位，和平衡溶脹約400％-約1300％，此類水凝膠在組織道中約1-約120天后降解。80.第79段的方法，其中第一種交聯(lián)性組分含多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分含多個親電基團(tuán)。81.第79段的方法，其中生物活性物質(zhì)為止血藥。82.第79段的方法，其中生物活性物質(zhì)為凝血酶。83.將可溶脹組合物釋放至組織中靶部位的方法，所述方法包括將組合物涂覆到靶部位，該組合物含：第一種交聯(lián)性組分；在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分；和水凝膠形成組分；其中第一種和第二種交聯(lián)性組分交聯(lián)形成具有空隙的多孔性基質(zhì)，水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙，水凝膠含完全水化時具有大小約0.05mm-約5mm的亞單位，和平衡溶脹約400％-約1300％，此類水凝膠在組織道中約1-約120天后降解，當(dāng)涂覆在其中其膨脹至平衡溶脹值的靶部位后，組合物在小于其平衡溶脹時水化。84.第83段的方法，其中第一種交聯(lián)性組分含多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分含多個親電基團(tuán)。85.第83段的方法，其中靶部位位于選自以下的組織中：肌肉、皮膚、上皮組織、結(jié)締或支持組織、神經(jīng)組織、眼和其它感覺器官組織、血管和心組織、腸胃器官和組織、胸膜和其它肺組織、腎、內(nèi)分泌腺、雄性和雌性生殖器官、脂肪組織、肝、胰腺、淋巴腺、軟骨、骨、口腔組織和粘膜組織，以及脾和其它腹部器官。86.第85段的方法，其中靶部位是所選擇的組織中的空隙區(qū)域。87.第86段的方法，其中空隙區(qū)域選自組織皮層、組織道、脊柱內(nèi)空間和體腔。88.第83段的方法，其中平衡溶脹時水凝膠的水化度為水化50％-95％。89.第83段的方法，其中水凝膠含增塑劑。90.第89段的方法，其中增塑劑選自聚乙二醇、山梨醇和甘油。91.第89段的方法，其中以水凝膠組分的組合物計(jì)，增塑劑以0.1％-30％重量存在。92.第75-91段中任一段的方法，其中水凝膠含交聯(lián)蛋白水凝膠。93.第92段的方法，其中蛋白選自明膠、可溶性膠原蛋白、白蛋白、血紅蛋白、纖維蛋白原、纖維蛋白、酪蛋白、纖連蛋白、彈性蛋白、角蛋白、層粘連蛋白及其衍生物和組合。94.第75-91段中任一段的方法，其中水凝膠含交聯(lián)多糖。95.第94段的方法，其中多糖選自葡糖胺多糖、淀粉衍生物、纖維素衍生物、半纖維素衍生物、木聚糖、瓊脂糖、藻酸酯(鹽)，和殼聚糖及其組合。96.第75-91段中任一段的方法，其中水凝膠含交聯(lián)非生物聚合物。97.第96段的方法，其中交聯(lián)非生物聚合物選自聚丙烯酸酯、聚異丁烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚乙烯樹脂、聚丙交酯-乙交酯、聚己內(nèi)酯、聚氧乙烯及其組合。98.第75-91段中任一段的方法，其中水凝膠含至少兩種組分，這些組分選自交聯(lián)蛋白、交聯(lián)多糖和交聯(lián)非生物聚合物。99.第75-91段中任一段的方法，其中水凝膠含水凝膠聚合物和水凝膠交聯(lián)劑，其中使水凝膠聚合物和水凝膠交聯(lián)劑在產(chǎn)生水凝膠聚合物分子交聯(lián)的條件下反應(yīng)。100.第75-91段中任一段的方法，其中水凝膠含分子交聯(lián)水凝膠聚合物，通過在產(chǎn)生水凝膠聚合物分子交聯(lián)的條件下輻照水凝膠制備該分子交聯(lián)水凝膠聚合物。101.第75-91段中任一段的方法，其中水凝膠含分子交聯(lián)水凝膠，通過在產(chǎn)生水凝膠聚合物分子交聯(lián)的條件下使單不飽和與多不飽和水凝膠單體反應(yīng)制備該分子交聯(lián)水凝膠。102.形成三維合成聚合物基質(zhì)的方法，該方法包括以下步驟：提供含m個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分和含n個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分，其中親電基團(tuán)與親核基團(tuán)反應(yīng)，在它們之間形成共價鍵，其中m和n各自大于或等于2，且其中m+n大于或等于5；將第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分組合；將水凝膠形成組分加入到第一種交聯(lián)性組分和第二種交聯(lián)性組分中；讓第一種交聯(lián)性組分和第二種交聯(lián)性組分相互交聯(lián)，形成三維基質(zhì)。103.第102段的方法，該方法還包括使第一組織表面和第二表面與第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分接觸。104.第103段的方法，其中第二表面是原生組織表面。105.第103段的方法，其中第二表面是非原生組織表面。106.第105段的方法，其中非原生組織表面是合成植入物。107.第106段的方法，其中合成植入物選自供體角膜、人造血管、心臟瓣膜、人造器官、粘合性假體、可移植微透鏡、血管移植物、支架和支架/移植物組合。108.第102段的方法，其中將第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分各自以粉末形式涂覆在第一組織表面。109.第102段的方法，其中將第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分各自以單一合并混合的粉末制劑的粉末涂覆在第一組織表面。110.第109段的方法，其中混合粉末制劑還含蛋白或多糖。111.第102段的方法，其中第一組織表面在硬組織或軟組織上或其中。112.第102段的方法，其中第一組織表面包含、圍繞或與手術(shù)部位相鄰，且其中該方法還包括將手術(shù)部位封閉的步驟。113.第102段的方法，其中混合粉末制劑還含膠原蛋白。114.第102段的方法，其中混合粉末制劑還含生物活性劑。115.含以下組分的混合粉末組合物：含多個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分，第一種交聯(lián)性組分為粉末形式；含多個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分，第二種交聯(lián)性組分為粉末形式；和粉末形式的水凝膠形成組分；其中在能夠反應(yīng)的條件下，第一種和第二種交聯(lián)性組分能夠基本上立即交聯(lián)。116.第115段的混合粉末組合物，其中加入第二種交聯(lián)性組分中的第一種交聯(lián)性組分提供組合的交聯(lián)性組分組合物，且以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第一種交聯(lián)性組分以約0.5％-約20％重量的濃度存在。117.第115段的混合粉末組合物，其中加入第二種交聯(lián)性組分中的第一種交聯(lián)性組分提供組合的交聯(lián)性組分組合物，且以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第二種交聯(lián)性組分以約0.5％-約20％重量的濃度存在。118.第115段的混合粉末組合物，其中第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比為約45％-約55％。119.第115段的混合粉末組合物，其中第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比為約50％。120.第115段的混合粉末組合物，其中第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分之間的重量比為約28％-約42％w/w。121.第115段的混合粉末組合物，其中第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分之間的重量比為約20％-約30％w/w。122.第121段的混合粉末組合物，其中加入第二種交聯(lián)性組分中的第一種交聯(lián)性組分提供組合的交聯(lián)性組分組合物，且以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第一種交聯(lián)性組分以約0.5％-約20％重量的濃度存在。123.第121段的混合粉末組合物，其中加入第二種交聯(lián)性組分中的第一種交聯(lián)性組分提供組合的交聯(lián)性組分組合物，且以組合的交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第二種交聯(lián)性組分以約0.5％-約20％重量的濃度存在。124.第121段的混合粉末組合物，其中第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比為約45％-約55％。125.第121段的混合粉末組合物，其中第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比為約50％。126.一種試劑盒，該試劑盒含：容器；和置于該容器中的混合粉末組合物，該組合物含：含多個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分，第一種交聯(lián)性組分為粉末形式；含多個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分，第二種交聯(lián)性組分為粉末形式；和粉末形式的水凝膠形成組分；其中在能夠反應(yīng)的條件下，第一種和第二種交聯(lián)性組分能夠基本上立即交聯(lián)。127.第126段的試劑盒，其中容器中含有注射器管和注射器柱塞。128.第126段的試劑盒，該試劑盒還含有有關(guān)將混合粉末組合物涂覆在患者出血靶部位的書面說明書。129.第126段的試劑盒，其中混合粉末還含有活性劑。130.第129段的試劑盒，其中活性劑包括凝血酶。131.一種試劑盒，該試劑盒含有：膠原海綿；和固定在該海綿表面的混合粉末組合物，該混合粉末組合物含：含多個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分，第一種交聯(lián)性組分為粉末形式；含多個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分，第二種交聯(lián)性組分為粉末形式；和粉末形式的水凝膠形成組分；其中在能夠反應(yīng)的條件下，第一種和第二種交聯(lián)性組分能夠基本上立即交聯(lián)。132.一種用于制備藥物的組合物，該組合物含：第一種交聯(lián)性組分；在能夠反應(yīng)的條件下與第一種交聯(lián)性組分交聯(lián)的第二種交聯(lián)性組分；和水凝膠形成組分；其中第一種和第二種交聯(lián)性組分交聯(lián)，形成具有空隙的多孔基質(zhì)，且其中水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。133.第132段的組合物，其中第一種交聯(lián)性組分含有多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分含有多個親電基團(tuán)。134.第133段的組合物，其中第一種交聯(lián)性組分含有具有m個親核基團(tuán)的多-親核性聚環(huán)氧烷，第二種交聯(lián)性組分含有具有n個親電基團(tuán)的多-親電性聚環(huán)氧烷，其中m和n各自大于或等于2，且其中m+n大于或等于5。135.第134段的組合物，其中n為2，且其中m大于或等于3。136.第135段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷被四官能活化。137.第134段的組合物，其中m為2，且其中n大于或等于3。138.第137段的組合物，其中多-親電性聚環(huán)氧烷被四官能活化。139.第134段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷和多-親電性聚環(huán)氧烷均被四官能活化。140.第134段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含有2個或多個親核基團(tuán)，這些親核基團(tuán)選自NH2、-SH、-H、-PH2和-CO-NH-NH2。141.第134段的組合物，其中多-親核性聚環(huán)氧烷還含有2個或多個伯氨基。142.一種組合物，該組合物含：含原生膠原纖維的膠原海綿；和固定在海綿表面的混合粉末組合物，該混合粉末組合物含：含多個親核基團(tuán)的第一種交聯(lián)性組分，第一種交聯(lián)性組分為粉末形式并占混合粉末約10％；含多個親電基團(tuán)的第二種交聯(lián)性組分，第二種交聯(lián)性組分為粉末形式并占混合粉末約10％；和粉末形式的水凝膠形成組分，其占混合粉末約80％；其中在能夠反應(yīng)的條件下，第一種和第二種交聯(lián)性組分能夠基本上立即交聯(lián)，形成具有空隙的多孔基質(zhì)，水凝膠形成組分能夠水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。附圖說明圖1闡明本發(fā)明某些實(shí)施方案的第一種交聯(lián)性組分。圖2闡明本發(fā)明某些實(shí)施方案的第二種交聯(lián)性組分。圖3顯示由本發(fā)明某些實(shí)施方案的親水性聚合物形成交聯(lián)的基質(zhì)組合物。圖4顯示由本發(fā)明某些實(shí)施方案的疏水性聚合物形成交聯(lián)的基質(zhì)組合物。圖5闡明本發(fā)明某些實(shí)施方案的水凝膠形成組分亞單位。圖6闡明交聯(lián)的聚合物凝膠片段的溶脹百分率與固體百分率之間的相關(guān)性，該聚合物凝膠片段在本發(fā)明某些實(shí)施方案的密封劑組合物中可用作水凝膠形成組分。圖7A-E闡明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，施用密封劑基質(zhì)組合物來處理脾動脈穿刺。圖8A-E闡明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，施周密封劑基質(zhì)組合物來處理肝切除。圖9闡明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的密封劑基質(zhì)組合物的處理和包裝。圖10闡明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案的密封劑基質(zhì)組合物的處理和包裝。圖11闡明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，PEG濃度對凝膠強(qiáng)度的影響。圖12闡明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，PEG濃度對溶脹率的影響。圖13闡明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，PEG濃度對溶脹率的影響。圖14闡明根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施方案，PEG濃度對溶脹率的影響。具體實(shí)施方式按照某些實(shí)施方案，本發(fā)明提供干燥密封劑基質(zhì)組合物，該組合物通過密封組織裂口或缺損在體內(nèi)環(huán)境中實(shí)現(xiàn)止血或其它流體抑制。本發(fā)明某些實(shí)施方案的組合物包括適合涂覆在脊椎動物組織以促進(jìn)流體抑制的干燥組合物，該組合物含第一種和第二種交聯(lián)性組分和至少一種水凝膠形成組分。本發(fā)明組合物中的第一種和第二種組分在體內(nèi)環(huán)境下反應(yīng)形成交聯(lián)基質(zhì)，而水凝膠形成組分快速吸收到達(dá)組織裂口的生物液，并強(qiáng)化得到的由第一種和第二種組分交聯(lián)形成的物理性密封劑基質(zhì)屏障。本申請中所述“密封劑基質(zhì)組合物”可指涂覆在體內(nèi)組織部位前的本發(fā)明組合物，“密封劑基質(zhì)屏障”可指本發(fā)明組合物與生物液接觸后產(chǎn)生的基質(zhì)屏障，和第一種和第二種組分交聯(lián)形成含水凝膠的多孔交聯(lián)基質(zhì)。可制備多種形式的密封劑基質(zhì)組合物，包括粉末、餅狀物、墊狀物等。餅狀物實(shí)施方案包括通過加熱或烘干形成聚集體的密封劑基質(zhì)組合物粉末樣品。墊狀物實(shí)施方案包括置于海綿例如膠原海綿或其它支持物的密封劑基質(zhì)組合物粉末樣品，然后將該海綿或支持物烘干，形成熔合到海綿或支持物的固化粉末。盡管本發(fā)明可用于含有非血液生物液(例如淋巴或脊髓液)，但由本發(fā)明某些實(shí)施方案中的組合物形成的密封劑基質(zhì)也可稱為“止血基質(zhì)”，因?yàn)檫@是本文中所述主要用途。除提供快速止血和具有與周圍組織高粘著力的屏障外，本發(fā)明某些實(shí)施方案的密封劑基質(zhì)比已公開的用于止血材料有幾個優(yōu)點(diǎn)。首先，可在組織裂口的相當(dāng)潮濕環(huán)境(例如動脈出血的快速滲出或噴射，例如內(nèi)器官的摩擦或劇烈創(chuàng)傷)下，使用本發(fā)明某些實(shí)施方案的密封劑基質(zhì)。相比之下，目前已上市的許多用于止血的組合物需要相對干燥的部位，方可適當(dāng)?shù)恼持M合物和維持止血。例如，在某些情況下，可將某些PEG混合物置于快速出血部位，但有可能它們可被洗去。同樣，在某些情況下，某些明膠組合物可在快速出血部位水化，但可能難以使它們保留在該部位。有利的是，發(fā)現(xiàn)含第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分的制劑可提供甚至在能夠反應(yīng)的條件下保持固定不動的材料，該材料與大量出血形成機(jī)械穩(wěn)定的凝塊樣物質(zhì)，使血液停止流出。其次，本發(fā)明某些實(shí)施方案的密封劑基質(zhì)通過物理性密封組織裂口起作用，而不依賴脊椎動物的任何內(nèi)源性凝血能力。因此，密封劑基質(zhì)可用于它們的血液中具有低纖維蛋白原濃度的脊椎動物，或甚至可用于不含纖維蛋白原的血液替代品。例如，當(dāng)?shù)谝环N和第二種交聯(lián)性組分與水凝膠形成組分組合并涂覆在出血表面時，交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分可發(fā)生協(xié)同相互作用。按照某些實(shí)施方案，在水凝膠形成組分的存在下，第一種和第二種交聯(lián)性組分可在出血靶部位反應(yīng)并交聯(lián)，形成相對剛性結(jié)構(gòu)。相關(guān)的，水凝膠形成組分可填充在該相對剛性結(jié)構(gòu)中，介導(dǎo)物理性密封的形成。按照本發(fā)明某些實(shí)施方案，可在第一種和第二種交聯(lián)性組分不交聯(lián)的條件下(即缺乏水分、適當(dāng)pH、溫度等)，通過使第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分混合，制備密封劑基質(zhì)組合物。與生物液接觸后，或在其它能夠反應(yīng)的條件下，交聯(lián)性第一種和第二種組分交聯(lián)形成具有空隙的多孔基質(zhì)，而水凝膠形成組分水化形成水凝膠，填充至少一些空隙。任選，交聯(lián)性組分還可與水凝膠-形成組分和/或周圍組織交聯(lián)。I.密封劑基質(zhì)交聯(lián)性組分通常，第一種交聯(lián)性組分含兩個或多個親核基團(tuán)，第二種交聯(lián)性組分含能夠與第一種交聯(lián)性組分上的親核基團(tuán)共價結(jié)合的兩個或多個親電基團(tuán)。第一種和第二種組分可交聯(lián)形成多孔基質(zhì)。在美國專利號5,874,500；6,166,130；6,312,725；，6,328,229；和6,458,889中有關(guān)于示例性第一種和第二種組分和多孔基質(zhì)的描述，它們的內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。通常選擇非免疫原性的第一種和第二種組分，因此，在開始治療前可不需“皮試”。另外，可選擇這些組分和水凝膠形成組分阻止通過基體金屬蛋白酶(例如膠原酶)進(jìn)行酶切割，提供比現(xiàn)有膠原蛋白組合物更長體內(nèi)持續(xù)期。或者，可選擇在傷口愈合期間可消除或再吸收的第一種和第二種組分和水凝膠形成組分，以避免在體內(nèi)的密封劑基質(zhì)的周圍形成纖維組織。在一個實(shí)施方案中，第一種組分可以是含多個親核基團(tuán)(以下由″X″代表)的合成聚合物，該聚合物可與含多個親電基團(tuán)(以下由″Y″代表)的第二種組分合成聚合物反應(yīng)，得到如下共價結(jié)合聚合物網(wǎng)絡(luò)：聚合物-Xm+聚合物-Yn→聚合物-Z-聚合物其中m≥2，n≥2，且m+n≥5；X＝-NH2、-SH、-OH、-PH2、-CO-NH-NH2等，且可相同或不同；Y＝-CO2N(COCH2)2、-CO2H、-CHO、-CHOCH2、-N＝C＝O、SO2CH＝CH2、-N(COCH)2)、-S-S-(C5H4N)等，且可相同或不同；和Z＝由親核基團(tuán)(X)和親電基團(tuán)(Y)結(jié)合形成的官能團(tuán)如上所述，X和Y可相同或不同，即第一種組分可具有兩個不同親核基團(tuán)和/或第二種組分可具有兩個不同親電基團(tuán)。圖1說明示例性第一種組分聚合物或第一種交聯(lián)性組分。圖2說明示例性第二種組分聚合物或第二種交聯(lián)性組分。第一種和第二種組分聚合物的骨架可為環(huán)氧烷，尤其是環(huán)氧乙烷、環(huán)氧丙烷及其混合物。可由下式代表雙官能環(huán)氧烷的實(shí)例：X-聚合物-XY-聚合物-Y其中X和Y定義同上，術(shù)語“聚合物”代表-(CH2CH2O)n-或-(CH(CH3)CH2O)n-或-(CH2CH2O)n-(CH(CH3)CH2O)n-。官能團(tuán)X或Y通常通過連接基團(tuán)(以下由″Q″代表)與聚合物骨架偶聯(lián)，已知或可能存在多種此類連接基團(tuán)。盡管本發(fā)明組分具有兩個或多個官能團(tuán)，但為簡化緣故，以下實(shí)例顯示僅一個官能團(tuán)和得到的交聯(lián)。有多種方法制備各種官能化聚合物，以下列出它們中的一些：聚合物-Q1-X+聚合物-Q2-Y→聚合物-Q1-Z-Q2-聚合物其中在各情況下，n＝1-10；R1＝H、CH3、C2H5，...CpH2p+1；R2＝CH2、CO-NH-CH2CH2；Q1和Q2可相同或不同。例如，當(dāng)Q2＝OCH2CH2(在該情況下Q1不存在)；Y＝-CO2N(COCH2)2；和X＝-NH2、-SH或-OH，得到的反應(yīng)物和Z基團(tuán)如下所示：聚合物-NH2+聚合物-OCH2CH2CO2-N(COCH2)2→-NH-OCH2CH2CO-聚合物(酰胺)聚合物-SH+聚合物-OCH2CH2CO2-N(COCH2)2→-S-OCH2CH2CO-聚合物(硫代酸酯)聚合物-OH+聚合物-OCH2CH2CO2-N(COCH2)2→-O-OCH2CH2CO-聚合物(酯)可在聚合物和連接基團(tuán)之間插入由以下″D″代表的另一個基團(tuán)，使交聯(lián)聚合物組合物體內(nèi)降解增加，例如用于遞藥應(yīng)用：聚合物-D-Q-X+聚合物-D-Q-Y→聚合物-D-Q-Z-Q-D-聚合物-某些可用的可生物降解基團(tuán)″D″包括丙交酯、乙交酯、ε-己內(nèi)酯、聚(α-羥基酸)、聚(氨基酸)、聚(酐)，和各種二或三肽。A.具有聚合物骨架的第一種和第二種組分如上所述，為制備本發(fā)明組合物，提供含兩個或多個親核基團(tuán)例如伯氨基或硫醇基的第一種組分聚合物，和含能夠與第一種組分聚合物上的親核基團(tuán)共價結(jié)合的兩個或多個親電基團(tuán)的第二種組分聚合物是有用的。第一種和第二種組分聚合物可為合成物。與第一種和第二種組分聚合物使用有關(guān)的術(shù)語“聚合物”尤其是指聚烷基類；二-、三-、寡-和聚氨基酸；和三-、寡-或多糖。與第一種和第二種組分聚合物使用有關(guān)的術(shù)語“合成聚合物”包括非天然和通過化學(xué)合成制備的聚合物。因此，可不包括天然蛋白例如膠原蛋白和天然多糖例如透明質(zhì)酸。包括合成膠原蛋白和合成透明質(zhì)酸及其衍生物。含親核或親電基團(tuán)的合成聚合物包括“多官能活化的合成聚合物”。術(shù)語“多官能活化的”(或簡稱“活化”)可指具有或通過化學(xué)修飾后具有兩個或多個親核或親電基團(tuán)的合成聚合物，這些基團(tuán)能夠相互反應(yīng)(即親核基團(tuán)與親電基團(tuán)反應(yīng))形成共價鍵。多官能活化的合成聚合物的類型包括雙官能活化、四官能活化的和星形支化聚合物?？捎糜诒景l(fā)明的多官能活化的合成聚合物通常含至少2個或至少3個官能團(tuán)，以便與含多個親核基團(tuán)的合成聚合物(即“多-親核性聚合物”)形成3維交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)。換言之，它們通常是至少二官能、三官能或四官能活化的。如果第一種合成聚合物是雙官能活化合成聚合物，則第二種合成聚合物通常含3個或多個官能團(tuán)，以得到3維交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)。第一種和第二種組分聚合物均可含至少3個官能團(tuán)。B.第一種組分聚合物含多個親核基團(tuán)的第一種組分聚合物又指本文中統(tǒng)稱的“多-親核性聚合物”。為用于本發(fā)明，多親核性聚合物通常含至少2個或至少3個親核基團(tuán)。如果使用僅含兩個親核基團(tuán)的合成聚合物，則通常使用含3個或多個親電基團(tuán)的合成聚合物，以得到3維交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)。用于本發(fā)明組合物和方法的多-親核性聚合物包括合成聚合物，該聚合物含或通過修飾后含多個親核基團(tuán)例如伯氨基和硫醇基。此類多親核性聚合物可包括：(i)合成含兩個或多個伯氨基或硫醇基的合成多肽；和(ii)經(jīng)修飾含兩個或多個伯氨基或硫醇基的聚乙二醇。一般而言，硫醇基與親電基團(tuán)反應(yīng)速度傾向于比伯氨基與親電基團(tuán)反應(yīng)慢。多-親核性多肽可以是合成多肽，合成該多肽以加入含伯氨基的氨基酸(例如賴氨酸)和/或含硫醇基的氨基酸(例如半胱氨酸)。例如，第一種組分聚合物可以是二聚賴氨酸、三聚賴氨酸、四聚賴氨酸、五聚賴氨酸，或二聚半胱氨酸、三聚半胱氨酸、四聚半胱氨酸、五聚半胱氨酸，或含兩個或多個賴氨酸或半胱氨酸和其它氨基酸(例如甘氨酸、丙氨酸)，優(yōu)選含非疏水性氨基酸的低聚肽或多肽。通常使用合成制備的賴氨酸賴氨酸的聚合物-聚(賴氨酸)(145MW)。制備了在任何位置具有6-約4,000個伯氨基，相應(yīng)分子量約870-約580,000的聚(賴氨酸)?？蓮腜eninsulaLaboratories，Inc.(Belmont，Calif.)購得各種分子量的聚(賴氨酸)。可按照例如在Poly(ethyleneGlycol)Chemistry：BiotechnicalandBiomedicalApplications，第22章J.MiltonHarris，ed.，PlenumPress，N.Y.(1992)中提出的方法，將聚乙二醇化學(xué)修飾以使含多個伯氨基或硫醇基。修飾的含兩個或多個伯氨基的聚乙二醇在本文中稱為“多氨基PEGs”。修飾的含兩個或多個硫醇基的聚乙二醇在本文中稱為“多硫醇基PEGs”。本文中使用的術(shù)語“聚乙二醇”包括修飾和衍生化的聚乙二醇?？蓮腟hearwaterPolymers(Huntsville，Ala.)和TexacoChemicalCompany(Houston，Tex.)購得名為″Jeffamine″的各種形式的多氨基PEG?？捎糜诒景l(fā)明的多氨基PEGs包括Texaco′sJeffamine二胺(″D″系列)和三胺(″T″系列)，它們的每個分子分別含2和3個伯氨基。聚胺例如乙二胺(H2N-CH2CH2-NH2)、1，4-丁二胺(H2N-(CH2)4-NH2)、1，5-戊二胺(尸胺)(H2N-(CH2)5-NH2)、1，6-己二胺(H2N-(CH2)6-NH2)、雙(2-羥乙基)胺(HN-(CH2CH2OH)2)、雙(2)氨基乙基)胺(HN-(CH2CH2NH2)2)和三(2-氨基乙基)胺(N-(CH2CH2NH2)3)也可用作含多個親核基團(tuán)的第一種組分合成聚合物。C.第二種組分聚合物含多個親電基團(tuán)的第二種組分聚合物在本文中又稱為“多-親電性聚合物”。為用于本發(fā)明，多-親電性聚合物通常含至少2個或至少3個親電基團(tuán)，以便與多-親核性聚合物形成3維交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)。用于本發(fā)明組合物的多-親電性聚合物可以是含兩個或多個琥珀酰亞胺基的聚合物，該琥珀酰亞胺基能夠與其它分子上的親核基團(tuán)形成共價鍵。琥珀酰亞胺基與含伯氨基(-NH2)的物質(zhì)例如多氨基PEG、聚(賴氨酸)或膠原蛋白極易反應(yīng)。琥珀酰亞胺基有些不易與含硫醇基(-SH)的物質(zhì)例如多硫醇PEG或含多個半胱氨酸殘基的合成多肽反應(yīng)。本文中使用的術(shù)語“含兩個或多個琥珀酰亞胺基”將包括市售含兩個或多個琥珀酰亞胺基的聚合物和通過化學(xué)衍生化后含兩個或多個琥珀酰亞胺基的那些聚合物。本文中使用的術(shù)語“琥珀酰亞胺基”將包括磺基琥珀酰亞胺基和“上位”琥珀酰亞胺基的其它此類變化形式。磺基琥珀酰亞胺基上的亞硫酸鈉部分的存在用于增加聚合物的溶解性。D.用作第一種或第二種組分骨架的親水性聚合物按照本發(fā)明某些實(shí)施方案，親水性聚合物和尤其是各種聚乙二醇可用于第一種和第二種組分聚合物骨架。本文中使用的術(shù)語"PEG″包括具有重復(fù)結(jié)構(gòu)(OCH2CH2)n的聚合物。PEG的四官能活化的形式的結(jié)構(gòu)如圖3所示，它是通過使四官能活化的PEG與多氨基PEG反應(yīng)得到的普通反應(yīng)產(chǎn)物。如該圖所示，琥珀酰亞胺基是由-N(COCH2)2代表的5元環(huán)結(jié)構(gòu)。在圖3中，符號ΛΛΛ代表開放鍵。實(shí)施方案包括使本文中稱為SG-PEG的四官能活化的PEG琥珀酰亞胺基戊二酸酯與多氨基PEG反應(yīng)，從而得到反應(yīng)產(chǎn)物。PEG的另一種活化形式稱為PEG琥珀酰亞胺基丙酸酯(SE-PEG)。實(shí)施方案包括四官能活化的SE-PEG和通過使其與多氨基PEG反應(yīng)得到的產(chǎn)物。在某些實(shí)施方案中，在PEG的任一一端上有3個重復(fù)CH2基團(tuán)。進(jìn)一步的實(shí)施方案包括含不易水解的“醚”鍵的綴合物。該綴合物與圖3中所示其中提供酯鍵的綴合物截然不同。酯鍵在生理環(huán)境下水解。本發(fā)明實(shí)施方案考慮聚乙二醇的其它官能活化形式，如通過使四官能活化的PEGs與多氨基PEG反應(yīng)形成的綴合物。在某些實(shí)施方案中，綴合物含醚和酰胺鍵兩者。這些鍵在生理環(huán)境下穩(wěn)定。PEG的另一種官能活化形式稱為PEG琥珀酰亞胺基琥珀酰胺(succinimidylsuccinamide)(SSA-PEG)。實(shí)施方案包括該化合物的四官能活化的形式和通過使其與多氨基PEG反應(yīng)得到的反應(yīng)產(chǎn)物。這些化合物和相關(guān)化合物也可用于本發(fā)明實(shí)施方案中的組合物。實(shí)施方案還包括含“酰胺”鍵的綴合物，如同前述醚鍵，“酰胺”鍵不易水解，因此比酯鍵更穩(wěn)定。在稱為PEG琥珀酰亞胺基碳酸酯(SC-PEG)的化合物實(shí)施方案中，提供還另一種活化形式的PEG。實(shí)施方案包括四官能活化的SC-PEG和通過使其與多氨基PEG反應(yīng)形成的綴合物。如上所述，用于本發(fā)明實(shí)施方案的活化聚乙二醇衍生物可含作為活性基團(tuán)的琥珀酰亞胺基。但是，不同活化基團(tuán)可連接在沿PEG分子長度的部位。例如可將PEG衍生化，形成官能活化的PEG丙醛(propionaldehyde)(A-PEG)。實(shí)施方案包括四官能活化形式和由A-PEG與多氨基PEG反應(yīng)形成的綴合物。鍵可稱為-(CH2)m-NH-鍵，其中m＝1-10。再另一種形式的活化聚乙二醇是官能活化PEG縮水甘油醚(E-PEG)。實(shí)施方案包括四官能活化的化合物和由該化合物與多氨基PEG反應(yīng)形成的綴合物。聚乙二醇的另一種活化衍生物是官能活化PEG-異氰酸酯(I-PEG)。實(shí)施方案包括由這種化合物與多氨基PEG反應(yīng)形成的綴合物。聚乙二醇的另一種活化衍生物是官能活化PEG-乙烯砜(V-PEG)。實(shí)施方案包括由這種化合物與多氨基PEG反應(yīng)形成的綴合物。用于本發(fā)明組合物和其它實(shí)施方案的多官能活化聚乙二醇可包括含琥珀酰亞胺基的聚乙二醇例如SG-PEG和SE-PEG，它們可以是三官能或四官能活化的形式?，F(xiàn)可從ShearwaterPolymers，Huntsville，Ala.和UnionCarbide，SouthCharleston，W.Va.購得上述多種活化形式的聚乙二醇。E.將第一種和第二種組分聚合物衍生化以含官能團(tuán)可將某些聚合物例如多元酸衍生化，使其含2個或多個官能團(tuán)例如琥珀酰亞胺基。用于本發(fā)明的多元酸包括但不限于三羥甲基丙烷-基三羧酸、二(三羥甲基丙烷)-基四羧酸、庚二酸、辛二酸(辛二酸)和十六碳二酸(它普酸)?？蓮腄uPontChemicalCompany購得多種此類多酸。按照通用方法，可通過在N,N′-二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)的存在下與適當(dāng)摩爾量的N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)反應(yīng)，將多元酸化學(xué)衍生化，使其含2個或多個琥珀酰亞胺基?？捎妹绹鴮＠暾堩樞蛱?8/403,358中所述各種方法，將多元醇例如三羥甲基丙烷和二(三羥甲基丙烷)轉(zhuǎn)化為羧酸，然后在DCC的存在下通過與NHS反應(yīng)進(jìn)一步衍生化，分別得到三官能和四官能活化的聚合物。通過加入琥珀酰亞胺基將多元酸例如庚二酸(HOOC-(CH2)2-COOH)、辛二酸(HOOC-(CH2)2-COOH)和十六碳二酸(HOOC-(CH2)14-COOH)衍生化，得到二官能活化聚合物?？蓪⒍喟防缫叶?H2N-CH2CH2-NH2)、1，4-丁二胺(H2N-(CH2)4-NH2)、1，5-戊二胺(尸胺)(H2N-(CH2)5-NH2)、1，6-己二胺(H2N-(CH2)6-NH2)、二(2-羥乙基)胺(HN-(CH2CH2OH)2)、二(2)胺基乙基)胺(HN-(CH2CH2NH2)2)和三(2-胺基乙基)胺(N-(CH2CH2NH2)3)化學(xué)衍生化為多元酸，然后可按美國專利申請順序號08/403,358所述，在DCC的存在下通過與適當(dāng)摩爾量的N-羥基琥珀酰亞胺反應(yīng)，將其衍生化，以使含2個或多個琥珀酰亞胺基?？蓮腄uPontChemicalCompany購得多種此類多胺。在某些實(shí)施方案中，以總交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第一種交聯(lián)性組分(例如多氨基PEG)以約0.5-約20％重量的濃度存在，以總交聯(lián)性組分組合物計(jì)，第二種交聯(lián)性組分以約0.5-約20％重量的濃度存在。例如，具有總重1克(1000毫克)的最終交聯(lián)性組分組合物可含約5-約200毫克第一種交聯(lián)性組分(例如多氨基PEG)和約5-約200毫克第二種交聯(lián)性組分。在某些實(shí)施方案中，第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分的重量比為約20％-約80％。在有關(guān)實(shí)施方案中，該比例為約45％-約55％。在某些情況下，該比例為約50％。按照凝膠強(qiáng)度試驗(yàn)確定重量比。第一種交聯(lián)性組分和第二種交聯(lián)性組分的分子量可相同。II.用于密封劑基質(zhì)組合物的水凝膠形成組分用于本發(fā)明的水凝膠形成組分可包括美國專利號4,640,834；5,209,776；5,292,362；5,714,370；6,063,061；和6,066,325中所述可再吸收的生物相容性分子交聯(lián)凝膠和水凝膠，這些專利通過引用結(jié)合到本文中?？蓮腂axterHealthcareCorporation以商品名FLOSEAL購得通過這些專利所述技術(shù)制備的材料，這些材料和凝血酶溶液混合在一起置于試劑盒用作止血藥物?；蛘?，任何可水化的交聯(lián)聚合物可用作本發(fā)明中的水凝膠形成組分。例如，可使用藻酸鹽(酯)、瓊脂糖、明膠(例如SURGIFOAMTM粉末)或其它合成碳水化合物或蛋白基能水化的交聯(lián)聚合物。有用的水凝膠形成組分的主要特性是流體的生物相容性、快速吸收和滯留。因此，盡管聚丙烯酰胺可用作本發(fā)明中的水凝膠形成組分，但較少優(yōu)選它，因?yàn)樗谠S多內(nèi)部應(yīng)用中生物相容性差。通常，用作水凝膠形成組分的能水化的交聯(lián)聚合物具有粒度約70-約300微米和pH約6.8-約9.5。水凝膠形成組分可為第一種和第二種交聯(lián)性組分提供機(jī)械穩(wěn)定性，尤其當(dāng)對密封劑基質(zhì)施加力、壓力或稀釋時。在某些實(shí)施方案中，第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分之間的重量比例為約28％-約42％w/w。在某些情況下，組合物可含占組合物總質(zhì)量約5％-約75％濃度的混合的第一種和第二種交聯(lián)性組分，和占組合物總質(zhì)量約95％-約25％濃度的水凝膠形成組分。相關(guān)的，組合物可含占組合物總質(zhì)量約5％-約40％濃度的混合的第一種和第二種交聯(lián)性組分，和占組合物總質(zhì)量約95％-約60％濃度的水凝膠形成組分。類似的，組合物可含占組合物總質(zhì)量約10％-約30％濃度的混合的第一種和第二種交聯(lián)性組分，和占組合物總質(zhì)量約90％-約70％濃度的水凝膠形成組分。例如，組合物可含約20％混合的第一種和第二種交聯(lián)性組分和約80％水凝膠形成組分。在某些實(shí)施方案中，混合的第一種和第二種交聯(lián)性組分組合物可具有固定的重量比50∶50％，混合的第一種和第二種交聯(lián)性組分組合物與水凝膠形成組分的w/w比例可為約20％-約30％。可基于凝膠強(qiáng)度/粘著試驗(yàn)選擇混合的第一種和第二種交聯(lián)性組分組合物與水凝膠形成組分的w/w比例。水凝膠形成組分可用作吸收劑，以為第一種與第二種交聯(lián)性組分聚合提供半干燥表面。本發(fā)明實(shí)施方案包括干燥密封劑基質(zhì)組合物試劑盒，該試劑盒含這些比例量的交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分。按照某些實(shí)施方案，術(shù)語“生物相容性”是指符合由國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(NAMSA，Northwood，Ohio)公布的標(biāo)準(zhǔn)#ISO10993-1標(biāo)準(zhǔn)的材料。按照某些實(shí)施方案，術(shù)語“可再吸收”是指當(dāng)直接置于患者體內(nèi)的靶部位(且不受移植裝置例如乳腺移植物保護(hù))在小于1年通常1-120天期間降解或溶解的組合物。已知測量再吸收和降解的方法。按照某些實(shí)施方案，術(shù)語“分子交聯(lián)”是指含聚合物分子(即單條鏈)的材料，這些聚合物分子通過由元素、基團(tuán)或化合物組成的橋連接，其中聚合物分子的骨架原子通過一級化學(xué)鍵連接。如同以下更詳細(xì)的描述那樣，可通過多種方式實(shí)現(xiàn)交聯(lián)。按照某些實(shí)施方案，術(shù)語“水凝膠”包括含單相含水膠體的組合物，其中以下更詳細(xì)定義的生物或非生物性聚合物吸收水或水性緩沖液。水凝膠可含多個子網(wǎng)絡(luò)，其中各子網(wǎng)絡(luò)是分子交聯(lián)水凝膠，該水凝膠的大小取決于水化度，且在上述范圍內(nèi)。通常，這些水凝膠幾乎不含或不含游離水，即不能通過簡單過濾將水凝膠中的水除去。“溶脹百分率”可定義為濕重減去干重除以干重并乘以100，其中通過例如過濾將材料表面的濕潤劑盡可能完全除去后測量濕重，且其中在暴露于升高的溫度下在足以將濕潤劑蒸發(fā)的時間內(nèi)例如在120℃下2小時后測量干重?！捌胶馊苊洝笨啥x為當(dāng)可水化的交聯(lián)聚合物材料浸泡在濕潤劑中保持足以使水含量變恒定的時間通常18-24小時后達(dá)到平衡的溶脹百分率。“靶部位”通常是預(yù)定的將密封劑基質(zhì)組合物釋放的位置，通常為組織裂口或缺損。通常，靶部位為目標(biāo)組織位置，但在某些情況中例如當(dāng)材料原位溶脹覆蓋目標(biāo)位置時，可給予或?qū)⒚芊鈩┗|(zhì)組合物分配至目標(biāo)位置附近的位置?？捎缮锖头巧锞酆衔镄纬煽捎米髦辽倌承┍景l(fā)明實(shí)施方案中的水凝膠形成組分的可水化交聯(lián)聚合物。合適的生物聚合物含蛋白例如明膠、可溶性膠原蛋白、白蛋白、血紅蛋白、酪蛋白、纖維蛋白原、纖維蛋白、纖連蛋白、彈性蛋白、角蛋白、層粘連蛋白及其衍生物和組合?？扇苄苑抢w維膠原同樣合適。示例性明膠制劑列舉如下。其它合適的生物聚合物包括多糖例如葡糖胺多糖(例如透明質(zhì)酸和硫酸軟骨素)、淀粉衍生物、木聚糖、纖維素衍生物、半纖維素衍生物、瓊脂糖、藻酸鹽(酯)、殼聚糖及其衍生物和組合?？赏ㄟ^以下兩種機(jī)理中任一選擇可降解的合適的非生物聚合物：即(1)聚合物骨架斷裂，或(2)導(dǎo)致水溶性的側(cè)鏈降解。示例性非生物聚合物包括合成物，例如聚丙烯酸酯、聚異丁烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚乙烯樹脂、聚丙交酯-乙交酯、聚己內(nèi)酯、聚氧乙烯及其衍生物和組合?？砂催m合形成含水水凝膠的任何方式，使作為水凝膠形成組分使用的可水化交聯(lián)聚合物分子交聯(lián)。例如，可用雙或多官能交聯(lián)劑將這些聚合物分子交聯(lián)，交聯(lián)劑與兩個或多個聚合物分子鏈共價連接。示例性雙功能交聯(lián)劑包括醛、環(huán)氧化物、琥珀酰亞胺、碳二亞胺類、馬來酰亞胺、疊氮化物、碳酸酯、異氰酸酯、二乙烯砜、醇、胺、亞氨酸酯(imidates)、酸酐、鹵化物、硅烷、重氮基乙酸酯、氮丙啶等?；蛘?，可通過使用氧化劑和其它試劑例如高碘酸鹽完成交聯(lián)，氧化劑可將聚合物上的側(cè)鏈或部分活化，使它們可與其它側(cè)鏈或部分反應(yīng)形成交聯(lián)鍵。另一種交聯(lián)方法包括將聚合物暴露于輻射例如γ輻射，使側(cè)鏈聚合物活化，讓交聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行。脫氫熱交聯(lián)方法也合適。可通過將明膠在升高的溫度通常120℃下保持至少8小時，使明膠脫氫熱交聯(lián)。根據(jù)平衡溶脹百分率下降情況，證明可通過升高控制溫度、延長控制時間或二者的組合，增加交聯(lián)程度。減壓操作可加速交聯(lián)反應(yīng)。以下論述優(yōu)選的使明膠分子交聯(lián)的方法。水凝膠可包含增塑劑，以增加水凝膠的展性、彈性和降解速度。增塑劑可以是醇，例如聚乙二醇、山梨醇或甘油。通常，增塑劑應(yīng)為分子量約200-1000D或約400D的聚乙二醇。存在于水凝膠的增塑劑可占聚合物組合物重量約0.1％-約30％，優(yōu)選1％-5％(重量)。在具有高固體含量通常大于組合物重量10％(不含增塑劑)的水凝膠中，使用增塑劑可尤其有利。制備分子交聯(lián)明膠的示例性方法如下。取明膠，放入水性緩沖液，形成非交聯(lián)凝膠，通常，凝膠的固體含量為約1％-約70％(重量)，或約3％-約10％(重量)。通常通過暴露于戊二醛(例如0.01％-0.05％w/w，在0℃-15℃下，在水性緩沖液中過夜)、高碘酸鈉(例如0.05M，在0℃-8℃下保持48小時)或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(″EDC″)(例如0.5％-1.5％w/w，在室溫下過夜)，或通過暴露于約0.3-3兆拉德γ或電子束輻射，使明膠交聯(lián)?；蛘撸蓪⒚髂z粒子懸浮于醇例如甲醇或乙醇中，使固體含量約1％-約70％(重量)，或約3％-約10％(重量)，然后通過暴露于交聯(lián)劑，通常戊二醛(例如0.01％-0.1％w/w，在室溫下過夜)交聯(lián)。在醛的情況下，通常將pH保持在約6-約11，或約7-約10。當(dāng)與戊二醛交聯(lián)時，通過席夫堿形成交聯(lián)，通過隨后還原例如通過用硼氫化鈉處理，穩(wěn)定形成的交聯(lián)物。交聯(lián)后，可用水洗滌得到的顆粒，任選用醇沖洗，干燥，再懸浮于具有需要的緩沖劑和pH的含水介質(zhì)至得到需要的水化度。然后可將得到的水凝膠裝入下文中更詳述的本發(fā)明涂藥器中。或者，也可按下文中更詳述方法，在交聯(lián)之前或之后，通過機(jī)械方式破壞水凝膠。制備平衡溶脹百分率約400％-約1300％，或約600％-約950％的分子交聯(lián)明膠組合物的示例性方法如下。取明膠，放入含交聯(lián)劑溶液(通常戊二醛，通常在0.01％-0.1％w/w濃度下)的水性緩沖液(通常在pH約6-約17下，或在pH約7-約10下)中，形成凝膠，該凝膠固體含量通常為1％-70％(重量)，通常3％-10％(重量)。隨著交聯(lián)發(fā)生，將該凝膠充分?jǐn)嚢?，然后?-15℃下保持過夜。然后用去離子水沖洗3次，用醇(優(yōu)選甲醇、乙醇或異丙醇)沖洗2次，在室溫下干燥?？扇芜x用硼氫化鈉處理凝膠，進(jìn)一步穩(wěn)定交聯(lián)。在某些情況下，水凝膠形成組分可含具有例如大量甘氨酸殘基(例如每隔第3個殘基排列的3個中有1個)、脯氨酸殘基和4-羥基脯氨酸殘基的明膠。示例性明膠亞單位如圖5所示。明膠實(shí)施方案包括具有以下氨基酸組成的分子：甘氨酸21％、脯氨酸12％、羥脯氨酸12％、谷氨酸10％、丙氨酸9％、精氨酸8％、天冬氨酸6％、賴氨酸4％、絲氨酸4％、亮氨酸3％、纈氨酸2％、苯丙氨酸2％、蘇氨酸2％、異亮氨酸1％、羥賴氨酸1％、蛋氨酸和組氨酸＜1％和酪氨酸＜0.5％。圖6說明可用作密封劑組合物的水凝膠形成組分的交聯(lián)聚合物凝膠片段實(shí)施方案的溶脹百分率與固體百分率之間的相關(guān)性。在用作水凝膠形成組分之前，優(yōu)選按分批法，使分子交聯(lián)水凝膠機(jī)械性斷裂。該機(jī)械性斷裂步驟的主要目的是得到水凝膠的多個亞單位，這些亞單位的尺寸可強(qiáng)化填充和填塞它們被釋放的空間的能力。如果不發(fā)生機(jī)械性斷裂，分子交聯(lián)水凝膠將難以與所處理的不規(guī)則形成的靶空間相匹配和填充。通過使水凝膠斷裂為較小尺寸的亞單位，可非常有效地填充此類空間，同時保留交聯(lián)水凝膠的機(jī)械完整性和持久性?？稍谄錂C(jī)械性斷裂之前或之后，進(jìn)行水凝膠的聚合物鏈的分子交聯(lián)。只要水凝膠組合物斷裂為大小為上述0.01mm-5.0mm范圍之內(nèi)的亞單位，就可按間歇操作例如攪拌使水凝膠機(jī)械性斷裂。其它分批機(jī)械性斷裂法包括通過勻化器或攪拌器泵吸或通過泵，它們將水凝膠壓縮、拉伸或剪切至大于水凝膠的斷裂屈服應(yīng)力的水平。在某些情況下，聚合物組合物的擠出造成水凝膠從基本上連續(xù)網(wǎng)絡(luò)即跨越原始水凝膠團(tuán)的尺寸的網(wǎng)絡(luò)，轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂猩鲜龇秶某叽绲淖泳W(wǎng)絡(luò)或亞單位的集合。在目前優(yōu)選的實(shí)施方案中，可先制備(例如通過噴霧干燥)可水化的交聯(lián)聚合物和/或在交聯(lián)前使其機(jī)械性斷裂，通常在水化前形成水凝膠?？勺鳛槲⒎酃腆w或粉末狀干燥固體提供可水化的交聯(lián)聚合物，可通過進(jìn)一步粉碎使它們碎裂，得到具有需要的通常恰好控制在小范圍內(nèi)粒度的粒子。也可進(jìn)行其它粒度選擇和改進(jìn)步驟例如篩分、旋風(fēng)分類方法等。對于下文中所述示例性明膠材料，優(yōu)選干燥粒子尺寸的范圍為約0.01mm-約1.5mm，更優(yōu)選約0.05mm-約1.0mm。示例性粒度分布應(yīng)為大于約95％(重量)粒子的粒度為約0.05mm-約0.7mm。粉碎聚合物原料的方法包括勻化、研磨、凝聚、碾磨、噴射研磨等。也可通過噴霧干燥形成聚合物原料粉末?？赏ㄟ^常規(guī)技術(shù)例如篩分、聚集、再研磨等進(jìn)一步控制和提純粒度分布。然后可將干燥固體粉末懸浮于本文中其它地方所述水性緩沖液，并交聯(lián)。在其它情況下，可將可水化的交聯(lián)聚合物懸浮于水性緩沖液，交聯(lián)，然后干燥。然后可使該交聯(lián)干燥聚合物斷裂，然后將斷裂物質(zhì)再懸浮于水性緩沖液中。在所有情況下，得到的物質(zhì)含具有離散子網(wǎng)絡(luò)的交聯(lián)水凝膠，這些子網(wǎng)絡(luò)具有上述尺寸。機(jī)械性斷裂后，可用作水凝膠形成組分的可水化的交聯(lián)聚合物通?？杀辉傥?，即在首次涂覆后小于1年，通常1-120天，優(yōu)選1-90天，更優(yōu)選2-30天后，它們將在患者身體上生物降解。已知測量再吸收所需要的時間長度的技術(shù)。III.一組密封劑基質(zhì)組合物實(shí)施方案的制備和用途：多孔基質(zhì)和可水化交聯(lián)聚合物的組合本發(fā)明組合物含與第二種交聯(lián)性組分組合的第一種交聯(lián)性組分，它們能夠交聯(lián)形成具有空隙的多孔基質(zhì)，其與可水化的交聯(lián)聚合物組合，該交聯(lián)聚合物能夠水化形成水凝膠，以填充至少一些空隙?？烧J(rèn)識到，本發(fā)明組合物可用于各種生物醫(yī)療應(yīng)用，包括有關(guān)改變以下的上述各應(yīng)用：(1)第一種和第二種組分(即多孔基質(zhì))；和(2)可水化交聯(lián)聚合物。例如，此類組合物可通過形成血液的快速物理屏障起機(jī)械性密封劑作用，終止或抑制出血。因此，本發(fā)明某些實(shí)施方案可提供無直接“止血”作用(例如對凝血級聯(lián)的生物化學(xué)作用；涉及凝血起動因子)結(jié)果。水凝膠形成組分可用作吸收劑(例如用于血液和其它流體和組織)。通過吸收血液，水凝膠形成組分可確保在治療部位上保持較高濃度的第一種和第二種交聯(lián)性組分，并可確保為第一種和第二種交聯(lián)性組分相互交聯(lián)和與周圍組織交聯(lián)提供半干燥表面。在某些實(shí)施方案中，第一種和第二種組分可在水凝膠形成組分吸收血液的同時交聯(lián)。該吸收和交聯(lián)可在數(shù)秒種內(nèi)發(fā)生，得到的密封劑基質(zhì)屏障可在30分鐘-1小時達(dá)到完全強(qiáng)度。通常，盡管例如在水凝膠形成組分中可能存在極少量水分，但密封劑基質(zhì)組合物是“干燥”的。在某些情況下，可在涂覆前，將可水化交聯(lián)聚合物部分預(yù)水化，盡管這種方法可能必須在比生理pH更高的pH下，或在防止涂覆到靶部位前第一種和第二種組分交聯(lián)的其它條件下進(jìn)行。通常，密封劑基質(zhì)組合物為粉末或熔化餅狀形式。用于制備密封劑基質(zhì)組合物的第一種和第二種組分的濃度可因多種因素而異，這些因素包括所使用的具體交聯(lián)性組分的類型和分子量，和需要的最終用途。在某些實(shí)施方案中，第一種和第二種組分與水凝膠形成組分的重量比為10-50％w/w、15-45％w/w、20-42％w/w、30-40％w/w和28-約42％w/w。在某些實(shí)施方案中，第一種和第二種聚合物的粒度可為約50-約90微米。在某些實(shí)施方案中，可水化交聯(lián)聚合物的粒度可為約250-約400微米。在某些實(shí)施方案中，可按干燥微?；蚍勰┬问教峁┑谝环N和第二種組分?？蓪⒃撔问降牡谝环N和第二種組分混合在一起，可再與也為干燥微?；蚍勰┬问降乃z形成組分混合?？赏ㄟ^任何機(jī)械混合方式例如研磨葉片混合得到這些組分的混合物。然后可將得到的密封劑基質(zhì)組合物的干燥粉末裝入各種容器例如紙盒、信封、廣口瓶等?？稍跓o菌條件進(jìn)行混合和填充，或包裝后通過例如γ輻射將密封劑基質(zhì)組合物滅菌。然后本發(fā)明的干燥粉末實(shí)施方案準(zhǔn)備使用。第一種和第二種交聯(lián)性聚合物在生理環(huán)境(例如血液pH)可反應(yīng)而交聯(lián)，所以可將組合物中的3組分密封劑基質(zhì)組合物直接涂覆在干燥的需要部位，將組織缺損密封，條件是存在足夠水化體液。因此，可將密封劑基質(zhì)組合物粉末只是灑在組織缺損靶部位之上和倒入其中，保持在適當(dāng)位置(例如用紗布墊或外科手術(shù)手套)至密封劑基質(zhì)屏障形成。這在其中需要可用于各種大小的組織缺損的一次性產(chǎn)品的創(chuàng)傷情況下(例如在急診科或戰(zhàn)場)尤其有效和方便。在其它實(shí)施方案中，可將第一種和第二種組分和水凝膠形成組分固定在支持物或襯墊物上，形成“密封劑基質(zhì)墊”。在這些實(shí)施方案中，提供支持物例如膠原海綿，然后將密封劑基質(zhì)組合物固定在支持物上使用。因?yàn)槊芊鈩┗|(zhì)組合物易與組織、有機(jī)材料和合成材料結(jié)合，這些實(shí)施方案可能是最好的，因?yàn)榭捎靡子诓僮鞯闹С治锿扛裁芊鈩┗|(zhì)組合物。鑒于建立有效密封劑基質(zhì)屏障需要相對少量的密封劑基質(zhì)組合物的事實(shí)，可將相對薄層的密封劑基質(zhì)組合物固定在支持物上。例如，在下列實(shí)施例中，固定在表面上僅約0.5-1.0g密封劑基質(zhì)組合物形成具有極佳止血性質(zhì)的3cm×3cm的墊。如外科技術(shù)人員認(rèn)識到的那樣，在其中可預(yù)計(jì)組織缺損的大小和當(dāng)與粉末相比需要改善的操作特性的情況下，需要這些實(shí)施方案。如同干燥粉末實(shí)施方案，在密封劑基質(zhì)組合物的密封劑基質(zhì)墊實(shí)施方案中，可將密封劑基質(zhì)墊直接涂覆在組織缺損處，無需通過將墊的密封劑基質(zhì)組合物側(cè)面壓在組織缺損處直至交聯(lián)性組分發(fā)生交聯(lián)的進(jìn)一步準(zhǔn)備。本發(fā)明密封劑基質(zhì)墊實(shí)施方案中的支持物可以是任何生物相容性材料。盡管在本文中詳細(xì)闡述了膠原蛋白支持物，但可使用用作支持物的其它材料。例如，可使用生物相容性的其它蛋白或多糖支持材料。這些支持材料在體內(nèi)按與密封劑基質(zhì)屏障大致相同的速度降解，或可按與密封劑基質(zhì)屏障不同的速度降解。在外科領(lǐng)域中熟知膠原海綿及其制備方法、膠原蛋白的制備和操作詳述如下。同樣，可使用由纖維蛋白制備的海綿。也可使用基于碳水化合物的材料例如纖維素(外用)或殼聚糖。此外，還可使用可生物相容和可生物降解的合成聚合物。外科領(lǐng)域技術(shù)人員會認(rèn)識到，非海綿形式可用于本發(fā)明密封劑基質(zhì)墊實(shí)施方案中的支持物。例如，可使用膠原蛋白或其它材料的片或膜。另外，支持物還可采用任何可用形狀例如圓錐形、半球形、棒狀、楔形等，以便提供與組織缺損形狀大約更相近的墊。例如，用圓錐形膠原海綿作為支持物的密封劑基質(zhì)墊可用于治療槍傷。通常，此類支持物起結(jié)構(gòu)或機(jī)械組分的作用。支持物可具有某種程度的多孔性，讓血液或其它液體滲入支持物，增加與組合物的接觸。此類結(jié)構(gòu)可具有約1.3X-約1.5X的溶脹因子，因此可理想的用于外科應(yīng)用。例如，海綿支持的組合物可用于神經(jīng)外科，以密封硬膜，其中過度溶脹可對腦產(chǎn)生有害壓力。一般而言，支持物應(yīng)足夠柔軟以適應(yīng)典型的組織缺損，還應(yīng)在外科環(huán)境中具有良好操作性質(zhì)?？赏ㄟ^多種方法將密封劑基質(zhì)組合物固定在支持物上。在下述某些實(shí)施方案中，適度熱量足以將含4-臂PEG第一種和第二種組分和交聯(lián)明膠水凝膠形成組分的密封劑基質(zhì)組合物粉末固定。在這些實(shí)施方案中，將密封劑基質(zhì)組合物粉末放在膠原海綿上，然后加熱至60-70℃，保持約1-2分鐘。干燥粉末基質(zhì)在該熱量下略微熔化，使其固定在膠原海綿的表面。或者，可用粘合劑或藥劑領(lǐng)域中已知的其它賦形劑將密封劑基質(zhì)組合物固定至支持物。一般而言，用于將密封劑基質(zhì)組合物固定到支持物的技術(shù)須取決于密封劑基質(zhì)組合物中的第一種和第二種組分和水凝膠形成組分。用于使密封劑基質(zhì)組合物固定在支持物上的方法不應(yīng)明顯降低第一種和第二種組分暴露于生理環(huán)境交聯(lián)的能力，或水凝膠形成組分吸收生物流體的能力。在其它實(shí)施方案中，可使密封劑基質(zhì)組合物形成無支持物的片或膜。對于密封劑基質(zhì)墊實(shí)施方案來講，可用將密封劑基質(zhì)組合物固定到支持物的上述方法，完成密封劑基質(zhì)組合物的這種形成。IV.將其它組分加入密封劑基質(zhì)組合物在本發(fā)明的其它實(shí)施方案中，可將除第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分以外的其它組分加入本發(fā)明密封劑基質(zhì)組合物。一般而言，可將這些其它組分與第一種和第二種和干燥形式的水凝膠形成組分混合。其它組分可增加具有特殊用途的本發(fā)明密封劑基質(zhì)組合物的進(jìn)一步機(jī)械強(qiáng)度或改善的性能。例如，因?yàn)樗煌该髑艺承员确抢w維膠原弱，所以有時不優(yōu)選纖維膠原用于生物粘合組合物。但按美國專利第5,614,587號所述，纖維膠原或非纖維膠原和纖維膠原的混合物可優(yōu)選用于預(yù)定在體內(nèi)長期持續(xù)有效的粘合組合物。可按類似于上述用于膠原蛋白的方式，將各種脫乙?；?或脫硫酸酯化的葡糖胺多糖衍生物摻入組合物。可將天然蛋白例如膠原蛋白和各種天然多糖的衍生物例如葡糖胺多糖摻入本發(fā)明第一種和第二種組分在生理環(huán)境下反應(yīng)交聯(lián)形成的密封劑基質(zhì)屏障。當(dāng)這些其它組分還含與合成聚合物上的官能團(tuán)反應(yīng)的官能團(tuán)時，在第一種和第二種組分在靶部位交聯(lián)期間，它們的存在導(dǎo)致形成交聯(lián)合成聚合物-天然聚合物基質(zhì)。尤其是，當(dāng)天然聚合物(蛋白或多糖)也含親核基團(tuán)例如伯氨基時，第二種交聯(lián)性組分上的親電基團(tuán)將與這些組分上的伯氨基和第一種交聯(lián)性組分上的親核基團(tuán)反應(yīng)，致使這些其它組分變?yōu)槊芊鈩┗|(zhì)屏障上一部分。一般而言，通常通過脫乙?；?、脫硫酸酯化或二者將葡糖胺多糖化學(xué)衍生化，以使含可與第二種交聯(lián)性組分上的親電基團(tuán)反應(yīng)的伯氨基?？砂慈我磺笆龇椒ɑ蚨哐苌钠咸前范嗵前ㄒ韵拢和该髻|(zhì)酸、硫酸軟骨素A、硫酸軟骨素B(硫酸皮膚素)、硫酸軟骨素C、甲殼質(zhì)(可衍生化為殼聚糖)、硫酸角蛋白、硫酸角質(zhì)和肝素。通過脫乙?；?或脫硫酸酯化使葡糖胺多糖衍生化和使得到的葡糖胺多糖衍生物與合成親水性聚合物共價結(jié)合在普通轉(zhuǎn)讓許可的美國專利第5,510,418號中有更詳細(xì)的論述，其內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中。同樣，第二種交聯(lián)性組分上的親電基團(tuán)可與某些天然蛋白的賴氨酸殘基上的伯氨基或半胱氨酸殘基上的硫醇基反應(yīng)。富集賴氨酸的蛋白例如膠原蛋白及其衍生物尤其具有與合成聚合物上的親電基團(tuán)反應(yīng)的活性。本文中使用的術(shù)語“膠原蛋白”將包括任何來源的任何類型膠原蛋白，包括但不限于從組織中提取或重組制備的膠原蛋白、膠原蛋白類似物、膠原蛋白衍生物、修飾的膠原蛋白和變性膠原蛋白例如明膠。在1992年11月10日頒布給Rhee等的普通轉(zhuǎn)讓的美國專利第5,162,430號中有使膠原蛋白與合成親水性聚合物共價結(jié)合的論述。一般而言，任何來源的膠原蛋白可用于本發(fā)明組合物，例如可從人或其它哺乳動物源例如?；蜇i真皮和人胎盤提取和純化膠原蛋白，或可通過重組或其它方法制備。由牛皮制備純的基本上非抗原性膠原蛋白溶液的方法在本領(lǐng)域中熟知。在1995年6月27日頒布給Palefsky等的美國專利第5,428,022號中公開了從人胎盤提取和純化膠原蛋白的方法。美國專利第5,667,839號中公開了用包括轉(zhuǎn)基因母牛在內(nèi)的轉(zhuǎn)基因動物奶制備重組人膠原蛋白的方法。本文中使用的術(shù)語“膠原蛋白”或“膠原蛋白材料”是指所有形式的膠原蛋白，包括經(jīng)處理或修飾的那些膠原蛋白。盡管通常優(yōu)選I型，但任何類型的膠原蛋白均可用于本發(fā)明組合物，這些膠原蛋白包括但不限于I、II、III、IV型或其任何組合?？墒褂煤嵌穗幕蚨穗牡哪z原蛋白；但當(dāng)使用源自異種的膠原蛋白例如牛膠原蛋白時，通常優(yōu)選非端肽膠原蛋白，因?yàn)槠涿庖咴员群穗牡哪z原蛋白少。尚未通過方法例如加熱、輻射或化學(xué)交聯(lián)劑預(yù)先交聯(lián)的膠原蛋白可用于本發(fā)明組合物，也可使用預(yù)先交聯(lián)的膠原蛋白。CollagenCorporation(PaloAlto，Calif.)出售膠原蛋白濃度為35mg/ml和65mg/ml的非交聯(lián)非端肽纖維膠原，它們的商標(biāo)名分別為I膠原蛋白和ZydermII膠原蛋白。CollagenCorporation出售膠原蛋白濃度為35mg/ml的戊二醛交聯(lián)非端肽纖維膠原，其商標(biāo)名為膠原蛋白。用于本發(fā)明的膠原蛋白通常為凍干粉末形式。由于其粘稠度，非纖維膠原通常用于預(yù)定用作生物粘合劑的本發(fā)明組合物。術(shù)語“非纖維膠原”包括在pH7下基本上為非纖維形式的任何修飾或未修飾的膠原蛋白材料，其通過膠原蛋白的水性懸浮液的光學(xué)澄清度顯示。已為非纖維形式的膠原蛋白可用于本發(fā)明組合物。本文中使用的術(shù)語“非纖維膠原”將包括原生形式的非纖維的膠原蛋白類型和經(jīng)化學(xué)修飾后在或接近中性pH下為非纖維的膠原蛋白。原生形式的非纖維(或微纖維)的膠原蛋白類型包括IV、VI和VII型。在中性pH下為非纖維形式的化學(xué)修飾的膠原蛋白包括琥珀?；z原蛋白和甲基化膠原蛋白，可按照1979年8月14日頒布給Miyata等的美國專利第4,164,559號中所述制備這兩種膠原蛋白，該專利通過引用全文結(jié)合到本文中。按照美國專利第5,614,587號中公開所述，由于其固有粘性，甲基化膠原蛋白通常用于生物粘合劑組合物。用于本發(fā)明密封劑基質(zhì)組合物的膠原蛋白初始可為纖維形式，然后可通過加入一種或多種纖維分解劑使其變?yōu)榉抢w維。纖維分解劑通常以足以使膠原蛋白變?yōu)樯鲜鰌H7下基本上為非纖維的量存在。用于本發(fā)明的纖維分解劑包括但不限于各種生物相容性醇、氨基酸、無機(jī)鹽和碳水化合物，尤其優(yōu)選生物相容性醇。優(yōu)選的生物相容性醇包括甘油和丙二醇。在某些情況下，非生物相容性醇例如乙醇、甲醇和異丙醇可能不適合用于本發(fā)明第一種和第二種聚合物，因?yàn)樗鼈儗邮芩鼈兊幕颊呱眢w有潛在有害作用。氨基酸的實(shí)例包括精氨酸。無機(jī)鹽的實(shí)例包括氯化鈉和氯化鉀。盡管碳水化合物例如包括蔗糖在內(nèi)的各種糖可用于本發(fā)明實(shí)踐，但與其它類型的纖維分解劑一樣，它們不優(yōu)選，因?yàn)樗鼈兛赡茉隗w內(nèi)具有細(xì)胞毒作用。為用于組織粘著，除密封外，可能還需要將蛋白例如白蛋白、纖維蛋白或纖維蛋白原加入密封劑基質(zhì)組合物，以促使細(xì)胞附著。另外，引入水膠體例如羧甲基纖維素也可促使組織粘著和/或溶脹性。本發(fā)明密封劑基質(zhì)組合物也可含一種或多種其它生物活性劑或化合物。在一個實(shí)施方案中，可將生物活性劑例如紫杉醇衍生物加入密封劑基質(zhì)組合物，以防止在組織缺損部位粘合。在其它實(shí)施方案中，可將生物活性劑例如抗生素或抗微生物劑加入密封劑基質(zhì)，用于例如其中病原生物體可進(jìn)入組織缺損部位或傷口的外傷引起的傷口情況(例如刀或子彈傷口)。在其它實(shí)施方案中，可將組合物中的生物活性劑例如生長因子釋放至局部組織部位，以促使組織愈合和再生。在另外的實(shí)施方案中，可加入凝血劑例如凝血酶，以通過激活凝血級聯(lián)進(jìn)一步改善密封和組織再生。示例性生物活性組分包括但不限于蛋白、碳水化合物、核酸、無機(jī)及有機(jī)生物活性分子例如酶、抗生素、抗腫瘤藥、抑菌劑、抗粘著形成藥(例如紫杉醇衍生物)、殺菌劑、抗病毒藥、止血藥、局麻藥、消炎藥、激素、抗血管發(fā)生劑、抗體、神經(jīng)遞質(zhì)、精神作用藥物、對生殖器官起作用的藥物和寡核苷酸，例如反義寡核苷酸。本文中使用的術(shù)語“生物活性劑”或“活性劑”包括在體內(nèi)起生物作用的有機(jī)或無機(jī)分子?；钚詣┑膶?shí)例包括但不限于酶、受體拮抗劑或激動劑、激素、生長因子、自身骨髓、抗生素、抗粘著形成劑、抗微生物劑、其它藥物和抗體。術(shù)語“活性劑”也將包括以上定義的兩種或多種活性劑的組合或混合物。以組合物計(jì)，此類生物活性組分通常以相對低的濃度，通常低于10％(重量)，通常低于5％(重量)，通常低于1％(重量)的濃度存在。可將兩種或多種此類活性劑組合在單一組合物中和/或可用兩種或多種組合物釋放不同活性組分，其中所述組分可在遞藥部位相互作用。示例性止血藥包括凝血酶、纖維蛋白原和凝血因子。可按濃度例如約50-約10,000單位凝血酶/ml水凝膠，或約100-約1000單位凝血酶/ml水凝膠，加入止血藥如凝血酶。也可制備含各種顯影劑例如碘或硫酸鋇或氟的交聯(lián)的第一種和第二種聚合物組合物，以幫助給予后分別通過X-射線或19F-MRI使組合物顯影。用于本發(fā)明組合物的優(yōu)選的活性劑包括生長因子，例如轉(zhuǎn)化生長因子(TGFs)、成纖維細(xì)胞生長因子(FGFs)、血小板衍生的生長因子(PDGFs)、表皮生長因子(EGFs)、結(jié)締組織活化肽(CTAPs)、成骨因子和此類生長因子的生物活性類似物、片段和衍生物。尤其優(yōu)選轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)超基因家族成員，它們是多官能調(diào)節(jié)蛋白。TGF超基因家族成員包括β轉(zhuǎn)化生長因子(例如TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3)；骨形成蛋白(例如BMP-1、BMP-2、BMP-3、BMP-4、BMP-5、BMP-6、BMP-7、BMP-8、BMP-9)；肝素-結(jié)合生長因子(例如成纖維細(xì)胞生長因子(FGF)、表皮生長因子(EGF)、血小板衍生的生長因子(PDGF)、胰島素樣生長因子(IGF))；抑制素(例如抑制素A、抑制素B)；生長分化因子(例如GDF-1)；和活化素(例如活化素A、活化素B、活化素AB)?？蓮脑蛱烊粊碓蠢绮溉閯游锛?xì)胞分離生長因子，或可例如通過重組DNA技術(shù)或各種化學(xué)方法合成制備生長因子。另外，還可使用這些因子的類似物、片段或衍生物，條件是它們顯示出原生分子的至少一些生物活性。例如，可通過位點(diǎn)特異性誘變或其它基因工程技術(shù)改變基因表達(dá)制備類似物?？赏ㄟ^混合將生物活性劑摻入密封劑基質(zhì)組合物。在一個實(shí)施方案中，可將活性劑與干燥或凍干形式的密封劑基質(zhì)組合物粉末混合。在另一個實(shí)施方案中，可將該混合物固定在固體支持物例如上述用于密封劑基質(zhì)組合物的膠原蛋白上。在其它實(shí)施方案中，可通過使這些活性劑與第一種或第二種組分合成聚合物上的官能團(tuán)結(jié)合，使活性劑摻入上述密封劑基質(zhì)組合物。在1992年11月10日頒布給Rhee等的普通轉(zhuǎn)讓的美國專利第5,162,430號中，有關(guān)于用官能活化聚乙二醇使生物活性劑例如生長因子共價結(jié)合的方法論述。優(yōu)選此類組合物含可易生物降解的鍵，例如因酶降解導(dǎo)致活性劑釋放到靶組織，在該部位它可發(fā)揮需要的其療效。將含親核基團(tuán)的生物活性劑加入交聯(lián)聚合物組合物的簡單方法涉及在給藥前將活性劑與第一種組分、第二種組分和水凝膠形成組分以干燥狀態(tài)混合。當(dāng)將密封劑基質(zhì)組合物涂覆在組織缺損并與生物體液接觸后，生物活性劑將與第二種組分反應(yīng)，與第一種和第二種組分的多孔交聯(lián)基質(zhì)交聯(lián)，同時水凝膠形成組分吸收生物體液。該方法使活性劑與密封劑基質(zhì)屏障的交聯(lián)性組分聚合物基質(zhì)部分共價結(jié)合，得到高效緩釋組合物。除其它因素外，所用的活性劑的種類和量將取決于所治療的具體部位和病癥以及所選擇的活性劑的生物活性和藥代動力學(xué)。V.密封劑基質(zhì)組合物作為生物粘合劑的用途本發(fā)明密封劑基質(zhì)組合物通常具有粘性，因此與組織牢固結(jié)合，因?yàn)榈诙N交聯(lián)性組分的親電基團(tuán)與組織的靶部位中的膠原蛋白的親核基團(tuán)反應(yīng)。本發(fā)明某些多孔基質(zhì)組合物可具有非同尋常的高粘性。因此，除用作屏障基質(zhì)止血外，本發(fā)明密封劑基質(zhì)組合物還可用作在生理環(huán)境下與濕或潮濕組織結(jié)合的生物粘合劑。本文中使用的術(shù)語“生物粘合劑”、“生物粘合劑”和“外科手術(shù)粘合劑”可互換使用，它們包括能夠使兩個原生組織表面短暫或長久連接，或使原生組織表面與非原生組織表面或合成植入物的表面短暫或長久連接的生物相容性組合物。按照使第一表面與第二表面連接的通用方法，將密封劑基質(zhì)組合物(例如干燥粉末或片狀形式)涂覆在第一表面。然后使第一表面與第二表面接觸，優(yōu)選立即使兩個表面粘合。第一和第二表面中的至少一個表面優(yōu)選為原生組織表面。當(dāng)機(jī)械性穩(wěn)定水凝膠形成組分用于組合物時，例如用于實(shí)施例的交聯(lián)明膠時，與僅含第一種和第二種交聯(lián)性組分的組合物相反，得到的多孔基質(zhì)顯示增加的機(jī)械強(qiáng)度。因此，兩個組織表面之間的粘合強(qiáng)度也增加，因?yàn)榻M織之間的多孔基質(zhì)層在生理機(jī)械壓力下不太可能在內(nèi)部分離。可通過手工或用其他適當(dāng)方法將兩表面并在一起，同時讓交聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行至完成。交聯(lián)通常在涂覆密封劑基質(zhì)組合物后5-60分鐘內(nèi)完成。但是，完成交聯(lián)發(fā)生需要的時間取決于多種因素，包括第一種和第二種交聯(lián)性組分的類型和分子量，最尤其是兩種組分在靶部位中的有效濃度(即濃度越高，導(dǎo)致越快的交聯(lián)時間)。優(yōu)選第一和第二表面中的至少一個表面是原生組織表面。本文中使用的術(shù)語“原生組織”包括為所治療具體患者的身體本身的生物組織。本文中使用的術(shù)語“原生組織”包括從患者身體的一部分抬高的(elevated)或除去的用于移植到同一患者身體的另一部分的生物組織(例如骨自身移植物、皮片自身移植物等)。例如，在燒傷患者的情況中，可用本發(fā)明某些實(shí)施方案的組合物將患者身體的一部分的皮膚片粘合到身體的另一部分。其它表面可以是原生組織表面、非原生組織表面或合成植入物的表面。本文中使用的術(shù)語“非原生組織”包括從供體患者(該患者可與受體患者為同一種族或不同種族)的身體切除的用于移植到受體患者的身體的生物組織(例如組織和器官移植物)。例如，可用本發(fā)明交聯(lián)聚合物組合物將患者的異種移植心臟瓣膜固定在患者的心臟中并將心臟瓣膜周圍密封，防止?jié)B漏。本文中使用的術(shù)語“合成植入物”包括預(yù)定移植到患者身體中的任何生物相容性物質(zhì)，這些生物相容性物質(zhì)不包括在以上關(guān)于原生組織和非原生組織的定義中。合成植入物包括例如人造血管、心臟瓣膜、人工器官、骨假肢、可移植微透鏡、血管移植物、支架，和支架/移植物組合等。VI.密封劑基質(zhì)組合物阻止粘連的用途本發(fā)明密封劑組合物的另一個用途是將組織涂布，以阻止外科手術(shù)或內(nèi)組織或器官損傷后形成粘連。按照將組織涂布以阻止外科手術(shù)后形成粘連的通用方法，將第一種和第二種合成聚合物與可水化交聯(lián)聚合物混合或預(yù)混合，然后在第一種合成聚合物上的親核基團(tuán)與第二種合成聚合物上的親電基團(tuán)發(fā)生顯著交聯(lián)之前，將反應(yīng)混合物的薄層涂覆在組織上，這些組織包含、圍繞和/或與手術(shù)部位相鄰?？赏ㄟ^擠壓、噴撒、涂抹、用于組合物粉末的噴霧(同上述)；通過將密封劑基質(zhì)組合物的薄膜或片置于組織上或通過任何其它常規(guī)方法，將反應(yīng)混合物涂覆在組織部位。將反應(yīng)混合物涂覆在手術(shù)部位后，在手術(shù)切口閉合前，讓交聯(lián)原位繼續(xù)進(jìn)行。一旦交聯(lián)達(dá)到平衡，與被涂布組織接觸的組織不會與被涂布組織粘連。此時，可用常規(guī)方法(縫合等)將手術(shù)部位閉合。一般而言，優(yōu)選在相對短時間(即在第一種合成聚合物和第二種合成聚合物混合后5-15分鐘)內(nèi)完成完全交聯(lián)的組合物可用于防止外科手術(shù)粘連，以使手術(shù)結(jié)束后手術(shù)部位較快閉合。另外，優(yōu)選具有較高機(jī)械強(qiáng)度的可水化交聯(lián)聚合物用于組合物，例如實(shí)施例中使用的交聯(lián)明膠，以增加涂層的機(jī)械穩(wěn)定性。在以下實(shí)施例中，描述了第一種交聯(lián)性組分與第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分形成密封劑基質(zhì)組合物的制備和表征，提出它們以便為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員提供關(guān)于如何制備優(yōu)選的綴合物、組合物和裝置實(shí)施方案的完全公開和描述，而無意限定發(fā)明人認(rèn)為他們的發(fā)明范圍。己努力確保所用數(shù)量(例如量、溫度、分子量等)的準(zhǔn)確性，但應(yīng)說明可能存在某些實(shí)驗(yàn)誤差和偏差。除另有說明外，份為重量份，分子量為重均分子量，溫度為攝氏度，壓力為常壓或接近常壓。VII.實(shí)施例實(shí)施例1：用于密封劑基質(zhì)的第一種和第二種組分組合物：交聯(lián)多氨基PEG組合物的制備制備各種二氨基PEGs的以下儲備液：將10克JeffamineED-2001(得自TexacoChemicalCompany，Houston，Tex.)溶于9ml水。將10克JeffamineED-4000(也得自TexacoChemicalCompany)溶于9ml水。將0.1克二氨基PEG(3400MW，得自ShearwaterPolymers，Huntsville，Ala.)溶于300μl水。將以上制備的3種二氨基PEG溶液各自與三官能活化的SC-PEG含水溶液(TSC-PEG，5000MW，也得自ShearwaterPolymers)混合，見下表1所示。表1用注射器-注射器混合方法將二氨基PEG和TSC-PEG的溶液混合。將各材料從注射器中推出，在37℃下放置1小時。各材料形成凝膠。一般而言，凝膠隨水含量增加變更軟；含最少量含水溶劑(水或PBS)的凝膠最堅(jiān)硬。實(shí)施例2：用于密封劑基質(zhì)的第一種和第二種組分組合物：交聯(lián)聚(賴氨酸)組合物的制備將溶于0.1ml磷酸鹽緩沖液(0.2M，pH＝6.6)的10毫克聚L-賴氨酸氫溴酸鹽(8,000MW，得自PeninsulaLaboratories，Belmont，Calif.)與10mg四官能活化的SE-PEG(10,000MW，得自ShearwaterPolymers，Huntsville，Ala.)的0.1mlPBS溶液混合。該組合物幾乎立即形成軟凝膠。實(shí)施例3：用于密封劑基質(zhì)的第一種和第二種組分組合物：pH對四氨基PEG/四SE-PEG制劑的凝膠形成的影響在培養(yǎng)皿中制備含pH6、7和8的各濃度的四氨基PEG和四SE-PEG的凝膠。將四氨基PEG和四SE-PEG混合后，將各皿反復(fù)傾斜；將制劑停止流動點(diǎn)定為膠凝時間。在室溫下，pH對各種四氨基PEG/四SE-PEG制劑膠凝時間的影響見下表2所示。表2凝膠形成需要的時間隨pH增加并隨四氨基PEG和四SE-PEG濃度增加而減少。實(shí)施例4：水凝膠形成組分材料以及交聯(lián)和溶脹百分率測量方法的評價讓明膠粒子在含交聯(lián)劑(例如0.005-0.5％(重量)戊二醛)的含水緩沖液(例如0.2M磷酸鈉，pH9.2)中溶脹。將反應(yīng)混合物冷藏過夜，然后用去離子水洗滌3次、用乙醇洗滌2次，將其在環(huán)境溫度下干燥。在環(huán)境溫度下，以低固體濃度(2-3％)將干燥交聯(lián)明膠再懸浮于含水緩沖液，保持一定時間。緩沖液的濃度基本上大于平衡溶脹需要的濃度，存在兩相(水凝膠相和緩沖液)。然后通過在0.8μm標(biāo)稱截流濾膜(Millipore，Bedford，Mass.)上施加真空，將含濕水凝膠的懸浮液過濾。將外來緩沖液除去后，記錄截留的濕水凝膠和濕濾膜的總重。然后將水凝膠和膜在約120℃下干燥至少2小時，記錄干燥水凝膠殘留物和干燥濾膜的總重。也進(jìn)行不含水凝膠殘留物的濕濾膜和不含水凝膠的干燥濾膜樣品的幾次測量，用這些測量值推導(dǎo)出濕水凝膠和干燥水凝膠的凈重。然后按以下公式計(jì)算“溶脹百分率”：溶脹百分率＝100×[(水凝膠的濕重-水凝膠的干重)/水凝膠的干重]對于給出的明膠樣品，至少按一式三份測量溶脹，然后將測量值平均。將在測量濕重前樣品再懸浮于緩沖液18-24小時的溶脹百分率值定義為“平衡溶脹”。得到的交聯(lián)明膠材料顯示平衡溶脹值范圍為400％-1300％。平衡溶脹的程度取決于交聯(lián)的方法和程度。實(shí)施例5：用于密封劑基質(zhì)的水凝膠形成組分：由用EDC交聯(lián)的明膠組成的可水化交聯(lián)聚合產(chǎn)物片段在70℃下，將明膠(AtlanticGelatin，GeneralFoodsCorp.，Woburn，Mass.)溶于蒸餾水，固體含量為1-10％(w/w)(更優(yōu)選8％)。然后加入0.2％-3.5％(或0.2％-0.3％)1-乙基-3-(3二甲基氨基丙基)碳二亞胺(EDC)(Sigma，St.Louis，Mo.)。將形成的水凝膠產(chǎn)物在室溫下攪拌1小時。用Freezone12凍干系統(tǒng)(Labconco，Mo.)將水凝膠干燥，再用Waring攪拌機(jī)型號31BC91(VWR，Willard，Ohio)研細(xì)。然后將干燥聚合物組合物加入注射器，用緩沖液平衡。測得的平衡溶脹至少為1000％。結(jié)果見表3所示。表3實(shí)施例6：用于密封劑基質(zhì)的水凝膠形成組分：可水化交聯(lián)聚合產(chǎn)物片段，該聚合產(chǎn)物片段由用EDC交聯(lián)的明膠和聚(L)谷氨酸組成在70℃下，將明膠(AtlanticGelatin，GeneralFoodsCorp.，Woburn，Mass.)溶于蒸餾水，固體含量為1-10％(w/w)(更優(yōu)選6-8％)。然后加入0-10％(w/w)(更優(yōu)選2-5％)聚(L)谷氨酸(PLGA)(Sigma，St.Louis，Mo.)和0.2-3.5％(或0.2-0.4％)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺(EDC)(Sigma)。將形成的水凝膠產(chǎn)物在室溫下攪拌1小時。將水凝膠在過量鹽水中溶脹一定時間(例如20小時)。然后通過在濾膜(Millipore，Bedford，Mass.)上施加真空將水凝膠過濾。測得的平衡溶脹至少為1500％。結(jié)果見表4所示。表4實(shí)施例7：用于密封劑基質(zhì)的水凝膠形成組分：可水化交聯(lián)聚合水凝膠片段的制備在2℃-30℃(優(yōu)選22℃-30℃)下，將牛真皮(SpearsCo.PA)在氫氧化鈉(SpectrumChemicalCo.，CA)水溶液(0.1M-1.5M，或0.4-1.2M)中攪拌1-18小時(或1-4小時)。然后將該真皮漿用無機(jī)酸例如鹽酸、磷酸或硫酸(SpectrumChemicalCo.，CA.)中和，然后通過濾網(wǎng)過濾將中和的液相與不溶性真皮分離。然后將真皮用無熱原水和醇例如異丙醇(SpectrumChemicalCo.，CA.)洗滌。洗滌3-12次后，將真皮懸浮于無熱原水，然后可將真皮、水漿加熱至50℃-90℃，優(yōu)選60℃-80℃，以使真皮熱膠凝。在膠凝期間，將真皮、水漿的pH調(diào)控至pH3-pH11，或pH7-pH9。也可通過攪拌和/或勻化使?jié){狀物中不溶性真皮破裂。該破裂可發(fā)生在熱膠凝周期之前或之后。使熱膠凝進(jìn)行1-6小時。膠凝后，通過過濾使?jié){狀物澄清。通過在15℃-40℃，優(yōu)選20℃-35℃下通風(fēng)干燥，將明膠漿脫水。然后通過研磨使干燥明膠碎裂，其中干燥表示水分含量小于20％(重量)。將干燥明膠加入pH7-10的含0.0025％-0.075％(重量)戊二醛(AmrescoInc，OH.)的冷(5℃-15℃)含水溶液。該溶液中明膠濃度為1％-10％(重量)。讓戊二醛與明膠顆粒交聯(lián)1-18小時，然后通過過濾或沉降使明膠與水相分離。然后將明膠粒子加入含0.00833％-0.0667％(重量)硼氫化納(SpectrumChemicalCo.，CA.)含水溶液，明膠濃度又為1％-10％(重量)，pH為7-12，或7-9。1-6小時后，通過過濾或沉降使交聯(lián)明膠與水相分離。然后可將明膠再懸浮于無熱原水，明膠濃度為1％-10％(重量)，然后通過過濾或沉降與水相分離，將殘余交聯(lián)劑和還原劑除去。最后在濾網(wǎng)或篩上收集交聯(lián)明膠，最后將明膠用無熱原水洗滌。然后將濕交聯(lián)明膠置于干燥室，在15℃-40℃下干燥。從干燥室中取出干燥交聯(lián)明膠(即水分含量小于20％(重量)的交聯(lián)明膠)，然后用機(jī)械研磨機(jī)研磨，得到典型粒度分布為0.020mm-2.000mm的粉末。實(shí)施例8：速效干燥止血密封劑粉末通過使第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分混合，制備速效干燥止血密封劑粉末。第一種交聯(lián)聚合物(PEG-A)是PEG-琥珀酰亞胺基粉末，第二種交聯(lián)聚合物(PEG-B)是PEG-硫醇粉末，水凝膠形成組分是交聯(lián)明膠粉末。實(shí)施例9：速效干燥密封劑墊通過使第一種交聯(lián)性組分、第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分混合，制備速效干燥密封劑墊。將得到的組合物、密封劑基質(zhì)組合物粉末置于凍干膠原海綿上，加熱至60-70℃保持約1-2分鐘。干燥粉末基質(zhì)在該加熱下略微熔化，將其固定在膠原海綿的表面，從而形成密封劑基質(zhì)墊?；蛘撸捎谜澈蟿┗蛩巹╊I(lǐng)域中已知的其它賦形劑將密封劑基質(zhì)組合物固定到支持物上。一般而言，用于使密封劑基質(zhì)組合物固定到支持物的技術(shù)可取決于密封劑基質(zhì)組合物的第一種和第二種組分和水凝膠形成組分。本發(fā)明密封劑基質(zhì)墊實(shí)施方案提供便利形式，可通過該形式處理密封劑基質(zhì)組合物，然后通過海綿或其它合適的支持方式將密封劑基質(zhì)組合物釋放至手術(shù)部位。實(shí)施例10：密封劑粉末治療脾動脈穿刺圖7A-E說明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案，用密封劑基質(zhì)組合物治療脾動脈穿刺。將豬肝素化至約3倍基線。如圖7A所示，通過手術(shù)用18g針700引起豬脾動脈穿刺。穿刺后，動脈710出現(xiàn)大出血705。如圖7B和7C所示，通過注射器730將約700mg密封劑粉末基質(zhì)組合物720涂覆在穿刺部位，用帶手套的手指740輕壓或放置在該部位上保持2分鐘。發(fā)現(xiàn)密封劑粉末形成充分止血的凝固物750。涂覆后5分鐘，用如圖7D所示沖洗裝置760沖洗該部位，將過量粉末組合物洗去。當(dāng)用鑷子夾住凝固物時，它似乎與組織牢固粘合且具有良好完整性。如圖7E所示，在涂覆44分鐘后，通過用鉗子770剝離將凝固物750除去，重新出現(xiàn)出血715。實(shí)施例11：治療肝切除的密封劑粉末圖8A-E說明根據(jù)本發(fā)明實(shí)施方案，用密封劑基質(zhì)組合物治療肝切除。將豬肝素化至約3倍基線。如圖8A所示，用剪刀810將該豬的肝中葉805的尖端800或邊緣切除。切除后，該部位出現(xiàn)大出血815。如圖8B所示，將約6ml(2g)密封劑基質(zhì)組合物820涂覆在該部位，用注射器825的尖端保持在適當(dāng)位置2分鐘。如圖8C所示，可用帶手套的手指將粉末壓在或維持在缺損上。密封劑粉末形成凝固物835，觀察到該凝固物完全止住出血。涂覆8分鐘后，按圖8D所示用沖洗裝置840沖洗該部位。當(dāng)用鑷子夾住凝固物時，它似乎與組織緊密粘合且具有良好完整性。在涂覆28分鐘后，通過用鉗子845剝離將凝固物835除去，重新出現(xiàn)出血850。實(shí)施例12：治療脾損害的密封劑粉末用6mm活體解剖組織穿刺針，通過手術(shù)在豬體上形成脾損害，用剪刀除去組織芯。將豬肝素化至約2.5倍基線。組織穿刺后，脾出現(xiàn)大出血。將約700mg(2ml)密封劑基質(zhì)組合物粉末用12ml注射器的邊緣涂覆在穿刺部位。不用壓力保持材料在適當(dāng)?shù)奈恢谩Ｓ^察到密封劑粉末形成完全止血的凝固物。涂覆4分鐘后，沖洗該部位。當(dāng)用鑷子夾住凝固物時，它似乎與組織緊密粘合且具有良好完整性。在涂覆25分鐘后，通過剝離將凝固物除去，重新出現(xiàn)出血。實(shí)施例13：機(jī)械應(yīng)激試驗(yàn)通過使0.60-0.65g密封劑基質(zhì)組合粉末與1ml豬血漿在塑料模具中反應(yīng)，制備密封劑基質(zhì)屏障。將混合物在室溫下固化約30分鐘。將3×1×0.3cm凝膠塊的兩端周氰基丙烯酸酯膠帶粘住，形成用于斷開的咬合空間(1×1cm)。用預(yù)安裝的夾具將膠帶各端夾住。用ChatillonTCD2000試驗(yàn)裝置對矩形凝膠進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)激試驗(yàn)至凝膠形狀破裂，測定拉伸強(qiáng)度。持續(xù)加壓至凝膠破裂以測量最大力(N)和最大負(fù)荷時的撓度(mm)。凝膠的有效表面積為1×0.3cm，凝膠的原始有效長度為1cm。密封劑凝膠的拉伸強(qiáng)度為約15.3N/cm2。對含第一種交聯(lián)性組分和第二種交聯(lián)性組分但不含水凝膠形成組分的凝膠組合物進(jìn)行同樣試驗(yàn)，測得的拉伸強(qiáng)度為約5.1N/cm2。實(shí)施例14：剝離強(qiáng)度試驗(yàn)在某些實(shí)施方案中，混合的粉末含第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分，當(dāng)該粉末溶于生理液例如血液或其它體液時，粉末自動聚合。該材料可通過共價鍵牢固地與組織或其它涂覆部位粘合。可用機(jī)械夾將密封劑基質(zhì)從組織例如皮膚分離，檢驗(yàn)組織粘合的機(jī)械強(qiáng)度。在該實(shí)施例中，在密封劑基質(zhì)屏障形成后，進(jìn)行多次如下拉伸試驗(yàn)。通過將3種不同濃度(10％、20％和30％交聯(lián)性組分)的交聯(lián)性組分和交聯(lián)明膠混合，制備含第一種交聯(lián)性組分(季戊四醇聚(乙二醇)醚四琥珀酰亞胺基戊二酸酯)和第二種交聯(lián)性組分(季戊四醇聚(乙二醇)醚四硫醇)和交聯(lián)明膠(FloSealTM)的3組分粉末系列。在3×1×0.3cm塑料模具中，將約0.40g-約0.45g3組分粉末加到置于雞皮樣品頂部上的約0.6ml豬血漿，在室溫下固化約60分鐘。形成密封劑基質(zhì)屏障，該屏障與皮膚牢固粘合。將形成的密封劑基質(zhì)屏障粘貼在夾在ChatillonTCD200試驗(yàn)裝置上的板上。當(dāng)將皮膚與密封劑基質(zhì)屏障分離時，測量最大峰力(N)。觀察到，粘合強(qiáng)度增加與PEG混合物(第一種和第二種交聯(lián)性組分)濃度的增加幾乎線性相關(guān)。結(jié)果見表4A所示。實(shí)施例15：用于熔合墊中海綿襯墊的纖維膠原的制備如下制備第一種纖維膠原樣品。將40gNaOH在25℃下溶于450ccH2O。將約50g牛真皮切片加入NaOH溶液。將該真皮溶液攪拌80分鐘。將NAOH溶液輕輕倒出，將真皮用H2O洗滌。用2MHCl將真皮溶解，使pH至2.3-2.4。繼續(xù)攪拌18小時。在18℃下，用1MNaOH滴定1250ml濃膠原蛋白溶液(CIS)至pH7.25。10小時內(nèi)形成膠原纖維，過濾。使240ml在pH7.4下沉淀，然后在8℃下使其與33μl25％戊二醛(GA)溶液交聯(lián)23小時。通過規(guī)定循環(huán)(recipecycle)，用Virtis冷凍干燥機(jī)將纖維膠原凍干。如下制備第二種纖維膠原樣品。用240g粘性溶液(例如CIS)使纖維膠原交聯(lián)。通過加入60ccH2O將溶液稀釋。通過加入約1.8cc2MNaOH使pH升至9.2。將溶液溫度調(diào)至8℃，加入33μl25％GA。將溶液攪拌23小時，得到約54g沉淀纖維。用Virtis冷凍干燥機(jī)，通過規(guī)定循環(huán)將纖維膠原凍干。實(shí)施例16：使水凝膠形成組分去緩沖化在某些實(shí)施方案中，可能需要將水凝膠形成組分例如FloSealTM中的磷酸鹽除去，以使環(huán)境液體能易于影響水凝膠形成組分的pH。涂覆后，水凝膠形成組分原位交聯(lián)可幫助密封劑基質(zhì)化合物與組織粘著。在某些情況下，在某些pH值下粘著可更有效。例如，某些明膠基材料可在pH小于6或7下更容易粘著。按1∶50比例，將FloSealTM用H2O洗滌，用0.01MHCl或0.01MNaOH將漿狀物的pH調(diào)節(jié)或酸化至pH2-7。將濕明膠餅過濾，在通風(fēng)干燥箱中，將濾餅在32℃下干燥12-20小時，用研缽和槌輕度研磨。將干燥明膠粉末加入混合PEG溶液，以便原位交聯(lián)。將漿狀物攪拌30秒，然后立即涂在用pH7.4的25mM磷酸鹽緩沖液全飽和的稱量紙表面上。記錄聚合時間，結(jié)果見表5所示。表5實(shí)施例17：PEG餅狀物的制備在一個實(shí)施方案中，通過振搖將0.8gPEG-琥珀酰亞胺粉末和0.8gPEG-硫醇粉末充分混合，然后加入充滿N2的100ml圓底燒瓶。將混合粉末在40℃-50℃油浴中熔化，并且用手工緩緩攪拌30分鐘，然后冷卻。用刮刀將固體膜從燒瓶中取出。在另一個實(shí)施方案中，將PEG-琥珀酰亞胺和PEG-硫醇的混合粉末溶于膠原蛋白(例如0.3％)或明膠(例如2％)的酸性溶液，凍干。認(rèn)為纖維膠原或明膠可幫助基質(zhì)分散并對PEG餅的處理有改善作用。在對比組合物中，將1.2g膠原纖維溶于100ccpH2HCl，在35℃水浴中加熱1-2小時，用pH2HCl稀釋，得到0.3％CIS產(chǎn)物。將0.2gPEG-琥珀酰亞胺和0.2gPEG-硫醇溶于2cc0.3％CIS。將得到的混合物倒入盤中，通過22小時循環(huán)凍干，得到PEG餅。在還另一個實(shí)施方案中，在35℃水浴中，將2g明膠溶于100ccpH2HCl。將4g雙組分PEG粉末混合物溶于2cc明膠溶液，凍干，得到PEG餅。在相關(guān)實(shí)施方案中，通過將pH2.0的PEG-SG、PEG-SH和膠原蛋白的混合溶液凍干制備PEG餅。在肝素化的豬模型中的擦傷肝囊管上進(jìn)行動物研究。將2滴0.2M磷酸鹽緩沖液(pH9.0)加到正在緩慢出血的肝臟表面。將一塊餅置于該部位不施加壓力。在第5和10分鐘時，測試各PEG餅對該部位的粘合力。發(fā)現(xiàn)在制備期間，PEG-SG的活性不降低，PEG餅通過共價鍵與擦傷肝組織粘合。試驗(yàn)樣品的組合物和體內(nèi)性能歸納在表6中。實(shí)施例18：粉碎的PEG餅材料將400mg預(yù)混CoSealTM、1gFloSealTM(例如pH7.1-9.5；粒徑70-400μm)和2-3ccH2O混合為糊狀物，通過22小時循環(huán)下冷凍，形成餅狀物。如圖9所示，然后將餅狀物900打碎為910，粉碎，粉碎為粉末形式920，然后放入注射器930(例如5cc或10cc注射器)。用刀片除去注射器管尖端940，將混合物粉末920涂覆在損傷部位950，原位觀察密封劑活性。在實(shí)施例10-12中描述了示例性結(jié)果。在另一個實(shí)施方案中，由表7中所述3組分漿狀物制備餅狀物。某些實(shí)施方案的示例性制劑的試驗(yàn)結(jié)果顯示表8所示以下特性。實(shí)施例19：密封劑基質(zhì)組合物熔合墊的制備用熔化的CoSealTM預(yù)混物制備PEG墊。通過使不同pH值的FloSealTM粉末與預(yù)混CoSealTM(例如粉末形式的兩種PEG組分)按各種重量比例混合，制備3組分粉末。用凍干膠原海綿作備用支持墊，將熔化的3組分混合物固定在其上。在一個實(shí)施方案中，如圖10所示，將0.5-1g密封劑基質(zhì)組合物1000置于海綿1010的3×3cm2部分上部。將海綿和密封劑基質(zhì)放入烘箱，在60-70℃下烘1-2分鐘，然后放入干燥器中冷卻，隔絕或盡量少與空氣接觸。觀察到密封劑基質(zhì)粉末形成粗膜并與海綿粘連，形成熔合墊1020。在相關(guān)實(shí)施方案中，制備了幾個海綿，各自的尺寸為3×3×0.3cm3。在某些海綿上涂布第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分的3組分混合物。在某些海綿上僅涂布第一種和第二種交聯(lián)性組分的雙組分混合物。在肝損害部位上原位測試了所有熔合墊。結(jié)果見表9所示。在相關(guān)實(shí)施方案中，制備了幾種組合物粉末。某些組合物含第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分的3組分混合物。某些組合物僅含第一種和第二種交聯(lián)性組分的雙組分混合物。在肝損害部位上原位測試了所有組合物。結(jié)果見表10所示。實(shí)施例20：γ-輻射對體內(nèi)性能的影響制備密封劑基質(zhì)組合物粉末和固定在海綿上的密封劑基質(zhì)組合物，將其中的一些用γ射線輻照，以測定γ射線對體內(nèi)性能的影響。如表11所示，未觀察到任何影響。實(shí)施例21：pH對體內(nèi)性能的影響進(jìn)行體內(nèi)研究，以評價水凝膠形成組分的pH值、手工涂覆方法對原位交聯(lián)的影響。用第一種密封劑組合物中的pH6.75的FlosealTM和第二種密封劑組合物中的pH9.5的FloSealTM作對比。在某些情況下，用手工將密封劑基質(zhì)組合物維系在損害上，在其它情況下，將密封劑基質(zhì)組合物涂覆或放置在損害上，不用外力維系。含pH6.75FlosealTM的組合物的反應(yīng)時間似乎比含pH9.5的FlosealTM組合物慢約10-30秒。示例性研究結(jié)果見表12。因此認(rèn)為水凝膠形成組分的pH可在交聯(lián)反應(yīng)的早期起作用。水凝膠形成組分的pH可影響在潮濕環(huán)境(例如其中已發(fā)生出血)中凝膠形成速度。在某些情況下，如果交聯(lián)發(fā)生不夠塊，可將密封劑組合物從損害部位除去。實(shí)施例22：SURGIFOAMTM作為水凝膠形成組分的用途按1∶1∶2、1∶1∶4和1∶1∶8(重量)比例，將COH102(季戊四醇四-[1-(1′-氧代-5′-琥珀酰戊酸酯(pentate))-2-聚(氧乙烯)二醇]醚)粉末、COH206(季戊四醇四-[巰基乙基-聚(氧乙烯)二醇]醚)粉末和SURGIFOAMTM可吸收明膠粉末(Ethicon，Somerville，NJ)的混合物共混，然后填充至改進(jìn)的5mL注射器。得到的混合物為基本上干燥的自由流動的粉末。將2克各組合物涂覆在在豬肝臟上手術(shù)形成的損害(約1cm×1cm×0.3cm深)，并且輕度壓緊。對于各組合物，1分鐘后撤去壓緊。使各組合物中的COH102和COH206在損害的潮濕環(huán)境中互相反應(yīng)，形成摻入SURGIFOAMTM粉末并物理性密封損害部位的交聯(lián)水凝膠。未觀察到用該組合物治療的任何部位出血。涂覆5分鐘后，用鹽水溶液沖洗處理的損害，未出現(xiàn)再出血。2小時后檢查處理部位，也未發(fā)現(xiàn)出血。實(shí)施例23：含凝血劑的密封劑基質(zhì)組合物的體內(nèi)性能制備含4∶1重量比的FloSealTM和CoSealTM(預(yù)混)的密封劑基質(zhì)組合物粉末。在某些實(shí)施方案中，該比例提供有效達(dá)到需要的化學(xué)聚合水平和使組合物與組織粘合的交聯(lián)度。將凝血酶粉末加入各濃度的密封劑基質(zhì)組合物粉末中。在動物研究試驗(yàn)中測試得到的混合物，該動物研究試驗(yàn)涉及測量肝臟正方形中的出血計(jì)分和將得到的混合物與不含凝血酶的密封劑基質(zhì)組合物的止血效率作對比。試驗(yàn)材料包括0.1g季戊四醇四[巰基乙基-聚(氧乙烯)]醚、0.1g季戊四醇四[1-1′-氧代-5′-琥珀酰亞胺基戊酸酯)-2-聚(氧乙烯)二醇]醚、0.8g交聯(lián)明膠粒子(FloSealTM)和各種濃度(5k、2.5k、1.25k和0.625kμ/g)凝血酶。在混合試驗(yàn)中，將得到的混合物的4組分用轉(zhuǎn)筒式混合機(jī)混合。在重新組成試驗(yàn)中，將4ml凝血酶溶液(1250μ/ml)與0.8gFloSeal混合，然后凍干22小時。然后周轉(zhuǎn)筒式混合機(jī)將干燥混合物與CoSealTM粉末混合。不受任何特定理論的限制，認(rèn)為重新組成凝血酶制劑含滲入FloSealTM基質(zhì)的凝血酶分子，以使凝血酶可保留在密封劑基質(zhì)屏障以提高止血效率。在墊實(shí)驗(yàn)中，通過將得到的4組分混合物(密封劑基質(zhì)組合物+凝血酶)固定在明膠海綿(Gelfoam)海綿上部，將混合物熔化，冷卻，固化，制備墊。將烘箱溫度設(shè)為約60℃-約65℃，保持約1分鐘。在體內(nèi)試驗(yàn)中，將動物肝素化使凝血時間激活，達(dá)到基線的3-5倍以上。檢驗(yàn)制劑對通過手術(shù)制備的豬肝方塊(1cm×1cm×0.2cm)的出血范圍的作用。5分鐘計(jì)時后，立即沖洗損害，將過量粉末除去。在1、5、10和30分鐘時，給處理的損害區(qū)域評分。與血液接觸后，材料發(fā)生聚合，然后與損害牢固粘合。密封劑基質(zhì)屏障機(jī)械性密封出血區(qū)域，通過與組織結(jié)合起機(jī)械性密封劑的作用。在體內(nèi)試驗(yàn)中，將凝血酶在約60℃下加熱5分鐘，發(fā)現(xiàn)完全有活性。在制備的明膠海綿墊中，發(fā)現(xiàn)凝血酶活性喪失。表13中提供急性體內(nèi)作用評價結(jié)果。損害出血的評分為″0″代表未出血，″4″代表嚴(yán)重出血。根據(jù)此處觀察到的出血評分，測試的所有樣品均未顯示出血。將凝血酶加入密封劑基質(zhì)組合物后，未發(fā)現(xiàn)顯著優(yōu)點(diǎn)。凝血酶的使用未在初級止血中顯示任何益處，盡管它可能加強(qiáng)次級止血/凝血形成和傷口愈合。實(shí)施例24：PEG濃度對凝膠強(qiáng)度的影響根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施方案，PEG濃度對凝膠強(qiáng)度的影響如表14和圖11所示。凝膠形成后，進(jìn)行拉伸試驗(yàn)。通過使3組分粉末(例如含第一種和第二種交聯(lián)性組分和水凝膠形成組分的密封劑基質(zhì)組合物)在塑料模具(3×1×0.3cm)中反應(yīng)，制備凝膠。將豬血漿(1ml，Baxter動物編號S-264)加入密封劑基質(zhì)組合物粉末(0.60-0.65g)，起動凝膠形成，然后在室溫下固化約30分鐘。用氰基丙烯酸酯膠使透明膠紙與凝膠兩端粘合，制成用于拉扯開的嚙合空間(1×1cm)。通過拉伸試驗(yàn)，測量將凝膠拉伸至斷裂時的最大力(N)和在最大負(fù)荷下的撓度(cm)。1×0.3cm為有效表面積。凝膠的原始有效長度為1.0cm。通過ChatillonTCD200試驗(yàn)裝置將標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)力施加在矩形凝膠上至其破裂是拉伸強(qiáng)度的決定因素。試驗(yàn)結(jié)果表明較高濃度的聚合物可增加密封劑基質(zhì)組合物凝膠的強(qiáng)度。實(shí)施例25：PEG濃度對溶脹率的影響根據(jù)本發(fā)明的一個實(shí)施方案，PEG濃度對溶脹率的影響如圖12、13和14所示。進(jìn)行溶脹研究，以表征密封劑基質(zhì)組合物凝膠。當(dāng)與水性環(huán)境接觸時，親水性聚合物溶脹，形成水凝膠。一旦凝膠形成，水分子便自由擴(kuò)散到由溶脹的FloSealTM粒子形成的相當(dāng)疏松的網(wǎng)絡(luò)。再加入水后，COH102-COH206接點(diǎn)斷裂，單獨(dú)的聚合物分子溶于水。通過將4種不同濃度(5％、10％、20％和30％w/w)聚合物CoSealTM和FloSealTM混合并使它們與等量豬血漿(1.7ml/g粉末)反應(yīng)，制備密封劑基質(zhì)組合物凝膠。在室溫下，將凝膠固化30分鐘，然后使其在鹽水中溶脹。每隔一定時間，吸出緩沖液，測定剩余凝膠的重量。監(jiān)測凝膠的重量變化。由以下方程計(jì)算溶脹率Q：Q＝W*/W其中W*是濕重，W是初始重量。溶脹率隨聚合物濃度增加而增加。不受任何特定理論的限制，溶脹率的表觀下降可解釋為當(dāng)凝膠緩慢侵蝕時凝膠物質(zhì)的損失。將實(shí)驗(yàn)的終點(diǎn)作為在凝膠崩解為幾個小塊或變得太粘糊和松弱以致無法將游離的緩沖劑從凝膠中輕輕倒出時的時間計(jì)分。水繼續(xù)向芯滲透，最后凝膠轉(zhuǎn)化為PEG和明膠粒子的粘性溶液。所有材料崩解需約2-3周(圖14)。似乎CoSealTM在密封劑基質(zhì)組合物粉末中的百分率對密封劑基質(zhì)組合物凝膠的穩(wěn)定性有重要影響。密封劑基質(zhì)組合物凝膠的溶出速度因聚合物的交聯(lián)度而異。結(jié)果顯示較高濃度的CoSealTM可造成較強(qiáng)凝膠穩(wěn)定性，也可造成更大溶脹。預(yù)計(jì)這種凝膠的體外相對持續(xù)性與體內(nèi)情況相似。以上實(shí)施例提供本發(fā)明組合物可以是有效密封劑的充分說明。這些組合物可原位與生理液或血液聚合，因此可非常牢固地密封組織或與其粘著。盡管為了理解清楚的目的，通過闡述和實(shí)施例詳細(xì)的描述了前述發(fā)明，但在權(quán)利要求的范圍內(nèi)可進(jìn)行一定變化和改進(jìn)將是顯而易見的。本文中描述的所有專利、刊物、文章、書籍和其它參考資料均通過引用結(jié)合到本文中。實(shí)施例26：評價一些制劑在動物模型中的止血性質(zhì)制劑編號334-77將1gPEG-A粉末(季戊四醇四[巰基乙基-聚氧乙烯]醚，MW10,000)、1gPEG-B粉末(季戊四醇四[1-1′-氧代-5′-琥珀酰亞胺基戊酸酯-2-聚氧乙烯二醇]醚，MW10,000)和8gFloSealTM放入混合瓶(50ml容積)，將瓶安裝在Inversina轉(zhuǎn)筒式混合機(jī)上，混合。將3組分混合物共混10分鐘至完全混合。在6支注射器(5ml容積)中填充約1.5g該混合物。制劑編號334-77-1將1.5g制劑編號334-77樣品固定在一片明膠海綿(3×4cm2，壓縮的明膠海綿，Upjohn制備，NDC0009-0353-01)上。將上部有樣品的明膠海綿放入真空箱中，在60-65℃下烘1分鐘至樣品開始熔化。然后將材料冷卻，固化。將在明膠海綿上得到的兩塊餅狀物放入插入干燥劑的小袋，密封。制劑編號334-77-4將制劑編號334-77樣品放在一塊膠原海綿上并烘烤。通過戊二醛溶液(5kppm)使膠原纖維輕度交聯(lián)和通過用VirTisGenesis冷凍干燥機(jī)將膠原蛋白溶液(1.0％)凍干，制備海綿。將膠原蛋白墊(3×4cm2)小心分成具有1.5g制劑編號334-77樣品的層，然后放入真空干燥箱中，在60-65℃下加熱1分鐘至樣品開始熔化。然后讓該材料冷卻，固化。將得到的各膠原蛋白墊放入插入干燥劑的小袋，密封。方法：外科手術(shù)方法：在肝部分切除前，將動物(NZW兔，雌性，體重約3kg)麻醉，使其靜脈內(nèi)接受4.000IU/kg劑量的肝素化30分鐘。肝臟切除模型：通過中央剖腹手術(shù)，使肝臟左葉暴露并夾緊。將部分左側(cè)肝葉切除。通過涂覆試驗(yàn)藥物控制滲出。將涂覆和固定時間標(biāo)準(zhǔn)化，使不超過300秒。當(dāng)預(yù)計(jì)完成基本止血時間5分鐘后，撤除止血鉗。肝擦傷模型：通過中央剖腹手術(shù)，使肝臟左葉暴露。在肝葉表面上磨出直徑2cm，深度2mm的淺環(huán)形損害。用帶砂輪附件的打孔機(jī)(鉆孔研磨機(jī)PROXXONFBS230/E；粗砂粒度P40，轉(zhuǎn)速5.000/分鐘)完成該磨損。用這些制劑中的一種治療得到的小血管或毛細(xì)管出血或因此產(chǎn)生的滲出。15分鐘觀察期后，將左肝葉重新放回腹腔的原始位置。如果達(dá)到止血，將腹部閉合，切除網(wǎng)膜(2/0)。按2水平方式，用作為斷紋縫合線的2/0將肌肉和皮膚切口分別縫合。24小時后，通過過量戊巴比妥鈉(約320mgi.v./動物)將動物麻醉處死。無痛處死后，進(jìn)行尸體解剖。目視檢查腹部是否存在由重新出血產(chǎn)生的血液和/或血液凝塊。如果存在，用預(yù)稱量的手術(shù)抹布吸收血液和/或血液凝塊，測定重量。如果未達(dá)到止血，通過過量戊巴比妥鈉(約320mgi.v./動物)將動物處死，只評價初始終點(diǎn)。結(jié)果：本研究的目的是評價制劑#334-77、#334-77-1和#334-77-4止血性質(zhì))。使用兩種極端止血模型：(1)高肝素化的兔肝臟切除和(2)肝表面模型。將制劑#334-77粉末涂覆在出血傷口上后，發(fā)現(xiàn)將制劑壓在傷口表面有助于止血。難以用干燥外科乳膠手套施加該壓力，因?yàn)榉勰┡c手套的粘性比與傷口的更強(qiáng)。但較易用濕手套施加壓力。當(dāng)與血液的水分接觸后，制劑形成密封膜。涂覆后，在多種情況下，可達(dá)到止血效果，甚至在該實(shí)施例中使用的極端模型中。如果首次涂覆后未達(dá)到完全止血且在形成層下有血液滲出，通過簡單涂覆更多制劑#334-77難以完全止血。將制劑涂覆范圍限制在僅需要止血的地方可能比較困難，因?yàn)槿绮灰鹱銐蛑匾?，制劑粉末可墮入腹腔并粘著在腹腔上。因此，適當(dāng)涂覆制劑#334-77是有幫助的。相反，可容易將制劑#344-77-4涂覆在大面積組織上使其成為恒定厚度層，并允許施加足夠壓力以達(dá)到止血。涂覆后，具有原生膠原蛋白墊背襯的制劑#344-77-4保持與肝葉粘著，起止血劑和膠的作用，使墊粘合在傷口和肝囊管上。這種可生物降解的背襯可提高粉末組合物的止血效率?？缮锝到獾谋骋r還可賦予制劑柔韌性，在涂覆期間，讓制劑在切除面的邊緣上收縮。用該制劑治療兩只動物，一只為表面模型，另一只為切除模型。在兩種模型中均達(dá)到快速止血。僅治療的表面模型動物存活，術(shù)后24h未出血。24h后，羊毛狀膠原蛋白仍在涂覆部位。治療的切除模型動物整夜出血至死亡且羊毛狀物脫落。兩種實(shí)驗(yàn)的區(qū)別是，在第一種動物模型中，將干燥狀態(tài)的羊毛狀膠原蛋白壓在傷口上，在第二種動物模型中，用濕紗布抹布施加壓力。結(jié)果見表15所示。當(dāng)前第1頁1 2 3 當(dāng)前第1頁1 2 3