本發(fā)明涉及脂肪組織制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
由于外傷、痤瘡、燒傷等原因，使皮膚產(chǎn)生創(chuàng)面，皮膚創(chuàng)傷愈合是皮膚組織受到損傷后的修復(fù)過程，修復(fù)過程包括炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增生和新生組織重塑等。對(duì)于較大面積的創(chuàng)傷，傳統(tǒng)的皮瓣移植技術(shù)存在著供區(qū)選擇與損傷的問題，而且最終所能達(dá)到的修復(fù)效果并不能令人滿意，移植的皮膚顏色往往與周圍皮膚相差較大，加之術(shù)后容易發(fā)生攣縮，牽拉周圍組織器官變形或引發(fā)功能障礙。自體脂肪移植技術(shù)的誕生在很大程度上解決了以上的問題，而且在很多方面具有許多無可比擬的優(yōu)勢，如供區(qū)廣、操作簡便、塑性效果好等；然而，在脂肪移植術(shù)后組織存活成為技術(shù)難題，存在存活率低、容易被機(jī)體吸收等缺點(diǎn)，不能滿足實(shí)際需要。
透明質(zhì)酸又名玻尿酸，是一種酸性黏多糖，在與水分子結(jié)合后可以形成具有黏彈性的物質(zhì)。在人體內(nèi)主要存在于皮膚和結(jié)締組織中，可以作為一種提供細(xì)胞埋入的細(xì)胞基質(zhì)物質(zhì)，除了為體內(nèi)細(xì)胞提供一定體積的外基質(zhì)外，還可以影響組織的穩(wěn)定性、結(jié)合力和粘彈性。所有天然透明質(zhì)酸的分子結(jié)構(gòu)都是一樣的，幾乎沒有物質(zhì)之間和組織特異性的差異，所以純的透明質(zhì)酸沒有免疫原性。
纖連蛋白也稱纖維連接蛋白(Fibronectin，F(xiàn)N)，是1974年國外研究發(fā)現(xiàn)的一種高分子糖蛋白，具有多種生物學(xué)功能。FN廣泛存在于動(dòng)物組織和組織液中，具有多種生物活性。大量國內(nèi)外的研究結(jié)果證明，F(xiàn)N分子在進(jìn)化過程中保守性很強(qiáng)，各種動(dòng)物體液中的FN具有非常相近的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)和生物學(xué)功能，因而不同來源的FN可以相互替代使用。FN主要功能是介導(dǎo)細(xì)胞粘著，純化的纖連蛋白可增強(qiáng)細(xì)胞間粘連及細(xì)胞與基質(zhì)的粘連。通過粘著，纖連蛋白可以通過細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞的形狀和細(xì)胞骨架的組織，促進(jìn)細(xì)胞鋪展。在胚胎發(fā)生過程中，纖連蛋白對(duì)于許多類型細(xì)胞的遷移和分化是必需的。在創(chuàng)傷修復(fù)中，纖連蛋白亦是重要的。在血凝塊形成過程中，纖連蛋白促進(jìn)血小板附著于血管受損部位。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，提供一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，不僅對(duì)脂肪組織有較大的保護(hù)作用，且能對(duì)創(chuàng)面的愈合有較好的促進(jìn)作用，對(duì)瘢痕的形成有較好的控制作用。
本發(fā)明還提供一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑的制備方法。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)該目的：
一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括包括以下濃度的組分：
作為優(yōu)選的，所述脂肪組織的用量為1～5mL。
作為優(yōu)選的，所脂肪組織顆粒的大小為0.2～0.3cm3。
一種促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑的制備方法，包括以下步驟：
1)脂肪組織抽?。涸诟共拷】灯つw下無菌抽取一定量的脂肪置于離心管中；
2)脂肪組織處理：在無菌操作條件下用D-Hank’s液離心清洗，然后用眼科剪刀剪成0.2～0.3cm3的小塊，再加D-Hank’s液清洗，待用；
3)燈盞花素稀釋：利用生理鹽水溶解稀釋燈盞花素的濃度至25mg/mL，待用；
4)按照各組分的濃度量取一定體積的透明質(zhì)酸、燈盞花素以及纖連蛋白加入到制備的脂肪組織顆粒組織中，混合均勻，制得促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑。
其中，制得的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑于4℃的條件下儲(chǔ)存。
相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：本發(fā)明的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，采用脂肪組織作為基礎(chǔ)成分，并向其中添加透明質(zhì)酸、燈盞花素以及纖連蛋白，不僅對(duì)脂肪組織有較大的保護(hù)作用，且能對(duì)創(chuàng)面的愈合有較好的促進(jìn)作用，加速傷口愈合，對(duì)瘢痕的形成有較好的控制作用，有利于減少疤痕結(jié)痂的形成、淡化瘢痕顏色，提高愈合質(zhì)量。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)描述。
實(shí)施例1。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑的制備方法，包括以下步驟：
1、脂肪組織抽?。涸诟共拷】灯つw下無菌抽取5ml脂肪至于15ml離心管；
2、在無菌操作條件下用D-Hank’s液離心清洗3遍，用眼科剪刀剪成0.2-0.3cm3的小塊，再加D-Hank’s液清洗2遍，待用；
3、用0.9％氯化鈉注射液稀釋燈盞花素至25.0mg/ml，待用；
4、以透明質(zhì)酸2.0mg/ml，纖連蛋白0.5μg/ml，燈盞花素2.0mg/ml的濃度加入已經(jīng)制備好的脂肪顆粒組織中，混勻，制劑制備完成，轉(zhuǎn)移至3支2ml的注射器中備用。
實(shí)施例2。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例3。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例4。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例5。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
實(shí)施例6。
本實(shí)施例的促進(jìn)傷口愈合的脂肪組織制劑，包括以下濃度的組分：
本實(shí)施例的制備方法參考實(shí)施例1，在此不再進(jìn)行贅述。
效果驗(yàn)證試驗(yàn)：以裸鼠為試驗(yàn)對(duì)象
選取周歲相同重量為150g左右的健康雌雄裸鼠9只，隨機(jī)分為三組，一組為實(shí)驗(yàn)組，一組為對(duì)照組、一組為空白組，鑷子通過酒精燈加熱，分別灼傷各裸鼠背部皮膚，創(chuàng)面大小為邊長約4.0cm的正方形；實(shí)驗(yàn)組裸鼠使用以上實(shí)施例制備的制劑，對(duì)照組使用只含脂肪顆粒組織的制劑，空白組使用0.9％氯化鈉注射液。無菌條件下，消毒好創(chuàng)面周圍的皮膚，圍繞創(chuàng)面皮下均勻點(diǎn)狀肌注以上準(zhǔn)備的制劑2ml，1h內(nèi)完成肌注；連續(xù)定時(shí)觀察10天創(chuàng)面愈合情況，做好創(chuàng)面的記錄，如表1所示。
表1各組裸鼠創(chuàng)面面積
由上表試驗(yàn)結(jié)果可知：實(shí)驗(yàn)組裸鼠創(chuàng)面在第1天已經(jīng)開始縮小，至第5天時(shí)基本恢復(fù)完 成，且沒有產(chǎn)生瘢痕；對(duì)照組裸鼠創(chuàng)面在第3天開始灰度至第10天恢復(fù)完成，有一定的瘢痕形成；空白組裸鼠創(chuàng)面在第5天開始恢復(fù)，第10天時(shí)創(chuàng)面大小約4.00cm2，恢復(fù)創(chuàng)面有瘢痕形成。
以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。