本發(fā)明涉及一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑及其制備方法，屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

子宮內(nèi)膜異位癥是指具有生長功能的子宮內(nèi)膜，覆蓋于子宮腔以外的身體其他部位，同時出現(xiàn)反復(fù)周期性出血的一種婦科疾病。異位內(nèi)膜在功能上會隨著雌激素水平的變化，也會產(chǎn)生明顯的變化，不但有內(nèi)膜的腺體，也有內(nèi)膜間質(zhì)的圍繞。子宮內(nèi)膜異位癥主要發(fā)生在盆腔器官，宮頸、陰道、會陰和腹部切口也可能會出現(xiàn)，有很強(qiáng)的轉(zhuǎn)變和成長能力，為婦科常見病癥。內(nèi)異癥多常見于育齡婦女，且其發(fā)病率近幾年上升趨勢較快，其中育齡婦女占到10％以上，且復(fù)發(fā)率極高。內(nèi)異癥的臨床表現(xiàn)有時與病變的程度不一定具有很強(qiáng)的相關(guān)性，當(dāng)患者的病變程度較輕的或局部的，其臨床表現(xiàn)可能會很嚴(yán)重，而當(dāng)患者的病變范圍較大甚至出現(xiàn)盆腔解剖結(jié)構(gòu)嚴(yán)重變形，它的臨床表現(xiàn)反而較輕。據(jù)統(tǒng)計，約有70％的子宮內(nèi)膜異位癥患者有典型的繼發(fā)性痛經(jīng)，月經(jīng)改變，性交不快和不孕等臨床表現(xiàn)。當(dāng)內(nèi)異癥發(fā)生于其它特殊部位時，其產(chǎn)生的臨床表現(xiàn)可能與該病癥不相符。而大多數(shù)患者主要癥狀為繼發(fā)性痛經(jīng)，常伴有下腹部及背部的進(jìn)行性疼痛，可放射至腿部。通常在月經(jīng)前兩天開始疼痛。當(dāng)異位內(nèi)膜出血時，月經(jīng)達(dá)到最高峰。大多數(shù)患者在行經(jīng)期的疼痛得到緩解。但在晚期患者中，尤其是盆腔內(nèi)有廣泛性的粘連，其疼痛會繼續(xù)存在。典型的繼發(fā)性痛經(jīng)患者年齡基本在30～45歲之間。其病灶會導(dǎo)致患者的子宮后傾?；颊叩幕疾r間越長，其性感不快、性交痛，性交困難等癥狀就越明顯，且子宮內(nèi)膜異位癥與約三分之一不明原因的不孕有關(guān)。該病癥患者的不孕率也高達(dá)40％。解剖結(jié)構(gòu)的改變可能是晚期重度患者不孕的原因之一。輕度患者不孕的原因與腹腔內(nèi)微環(huán)境因素、卵巢功能異常等有很大的聯(lián)系。

中醫(yī)學(xué)古文獻(xiàn)中無“子宮內(nèi)膜異位癥”病名的記載，但根據(jù)內(nèi)異癥主要臨床表現(xiàn)，可歸屬在“痛經(jīng)”、“癓瘕”、“月經(jīng)不調(diào)”、“不孕”等病之中。據(jù)近幾十年來中醫(yī)婦科學(xué)對內(nèi)異癥較多系統(tǒng)的研究，可認(rèn)為“瘀血阻滯胞宮、沖仼”是其發(fā)生的基本病機(jī)，而臟腑功能及血?dú)獾氖д{(diào)，外邪入侵等因素與瘀之形成相關(guān)。中醫(yī)學(xué)對“內(nèi)異癥”的診斷治療是以辨證論治為其根本特色，中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，“內(nèi)異癥”的主證為血瘀證，且貫穿于疾病整個過程。疾病初期以實證為主，病久傷正，因?qū)嵵绿?，少見純虛證，主表現(xiàn)為虛實夾雜癥。屬實者，經(jīng)前痛經(jīng)，經(jīng)期疼痛劇烈，拒按。虛實夾雜者，經(jīng)期痛經(jīng)，經(jīng)后痛勢稍緩。因寒而瘀者，為冷痛，絞痛，得熱痛減；因熱致瘀者，為灼痛，得熱痛增；因氣滯者，脹墜作痛；血瘀甚者，為刺痛。因氣滯或寒凝致瘀者，經(jīng)量少，色紫暗，有血塊。因熱或濕熱而瘀者，經(jīng)量多，色深紅，質(zhì)稠有血塊。氣虛血瘀者，經(jīng)量亦多亦少，色淡黯，質(zhì)稀夾血塊。通過中醫(yī)對此癥的辯證，一般分為氣滯血瘀證、寒凝血瘀證、腎虛血瘀證、濕熱血瘀證等類型。

中醫(yī)藥在治療子宮內(nèi)膜異位癥上有其獨(dú)到的優(yōu)勢，特別是近幾十年間現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對子宮內(nèi)膜異位癥研究步伐加快，中醫(yī)藥對子宮內(nèi)膜異位癥的認(rèn)識及探索也已逐步深化，不僅僅是在癥狀上觀察單一療效，近年來更同時從微觀指標(biāo)觀察中藥對子宮內(nèi)膜異位癥效應(yīng)的作用效果，從而更客觀的篩選有效和適當(dāng)?shù)闹兴幹委煼椒āＶ嗅t(yī)藥對子宮內(nèi)膜異位癥不僅僅是發(fā)揮其治療作用，同時也能較好的調(diào)節(jié)機(jī)體的內(nèi)分泌及免疫等多個方面。因此選用中醫(yī)藥，采取現(xiàn)代優(yōu)選的提取工藝與制備工藝，制得藥品，將為子宮內(nèi)膜異位癥的治療提供一個確有療效的中藥新品種，為該病患者提供新的治療藥物。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑及其制備方法。本發(fā)明提供的治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑具有良好的治療子宮內(nèi)膜異位癥的作用，制備工藝簡單、可行、穩(wěn)定。

為了實現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案：

一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，按重量份數(shù)計，由以下原料藥制成：龍血竭53～198份、大黃99～495份、山茱萸198～396份、當(dāng)歸198～396份、牡丹皮198～396份、木香99～330份、延胡索99～330份、赤芍198～396份、茯苓293～495份、莪術(shù)173～297份、杠板歸105～990份、桂枝99～330份和三棱165～330份。

進(jìn)一步地，治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑按重量份數(shù)計，由以下原料藥制成：龍血竭103份、大黃412份、山茱萸343份、當(dāng)歸275份、牡丹皮275份、木香175份、延胡索257份、赤芍223份、茯苓343份、莪術(shù)223份、杠板歸155份、桂枝223份和三棱223份。

前述制劑是以可溶性淀粉作賦形劑、0.2％阿司帕坦作矯味劑、90％乙醇作潤濕劑制成的顆粒劑。

治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑的制備方法，包括以下步驟：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，加乙醇，回流提取，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，加水，煎煮提取，過濾，得水提液，經(jīng)減壓濃縮，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，靜置，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，減壓濃縮，得濃縮液，濃縮液真空干燥，得浸膏提取物，粉碎過篩，得到藥粉，再加入輔料制成各種藥物制劑。

具體地，前述治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑的制備方法，包括以下步驟：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，加6～10倍量60％～80％乙醇，回流提取1～3次，每次1～2h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，加6～10倍量水，煎煮提取1～3次，每次1～2h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為40％～60％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液60℃～80℃真空干燥72～42h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到藥粉，再加入輔料制成各種藥物制劑。

優(yōu)選地，前述治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑的制備方法，包括以下步驟：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，分別加9倍量、8倍量80％乙醇，回流提取2次，每次1h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，分別加7倍量、6倍量水，煎煮提取2次，每次1h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為60％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液70℃真空干燥60h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到藥粉，再加入輔料制成各種藥物制劑。

進(jìn)一步地，前述治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑的制備方法，是按1:1的質(zhì)量比例向藥粉中加入可溶性淀粉，以用量占藥粉總質(zhì)量0.2％的阿司帕坦作矯味劑，90％乙醇作潤濕劑制粒，顆粒于60℃～80℃干燥，二次制粒，過篩除大顆粒并除細(xì)粉，即得顆粒劑。

更具體地，前述治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑的制備方法，是按1:1的質(zhì)量比例向藥粉中加入可溶性淀粉，以用量占藥粉總質(zhì)量0.2％的阿司帕坦作矯味劑，90％乙醇作潤濕劑制粒，顆粒在60℃～80℃逐漸升溫中干燥，二次制粒，過1號篩除大顆粒，過5號篩除細(xì)粉，即得顆粒劑。

本發(fā)明的治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，以杠板歸和龍血竭為君藥，牡丹皮、延胡索和赤芍為臣藥，大黃、山茱萸、木香、莪術(shù)和三棱為佐藥，當(dāng)歸、桂枝和茯苓為使藥。

為了確保本發(fā)明方案的科學(xué)、合理、可行，通過進(jìn)行一系列試驗研究和考察，從而確定本發(fā)明的方案。

一、本發(fā)明中原料藥的選用：

1、龍血竭性味甘，咸平，無毒，具有活血散瘀、止痛、止血、生肌斂瘡的功效。其中含樹脂約57.5％，為黃酮類的衍生物。近年來對其的化學(xué)成分研究較多。對其脂溶性成分研究中分離并鑒定了6個脂溶性化合物。其具有活血化瘀和止血收斂雙向調(diào)節(jié)、抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌等作用。

2、三棱味苦、性平，入肝、脾經(jīng)，具有破血行氣、消積止痛等功效，是常用的活血化瘀中藥。揮發(fā)油類、有機(jī)酸類、甾體類、黃酮類、苯丙素類等是其主要化學(xué)成分。具有抗血小板凝集和抗血栓、對血液流變性的影響、鎮(zhèn)痛等作用。

3、杠板歸，為蓼科植物杠板歸的地上部分，又名貫葉蓼、蛇倒退、蛇不過、老虎刺、犁尖草等，全草入藥，為多年生蔓性草本，全國各地均有分布，資源豐富。始載于《萬病回春》，現(xiàn)收載《中華人民共和國藥典》一部(2010年版)。性酸、苦、平，具有清熱解毒、殺蟲止癢、祛風(fēng)止咳、利水消腫之功效，民間廣泛用于治療水腫，黃疸，瘧疾，痢疾，百日咳，潰瘍，丹毒，濕疹，皰疹，疥癬及毒蛇咬傷等，療效確切。杠板歸根中分離鑒定出β-谷甾醇、反式-對羥基肉桂酸甲酯、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖甙、大黃素、大黃素甲醚和蘆薈大黃素等化合物。含有酚類、有機(jī)酸、生物堿、氨基酸、鞣質(zhì)、黃酮、蒽醌、甙類、糖類、植物甾醇及三萜類等化學(xué)成分。杠板歸藥材鑒定了山萘酚、槲皮素、蓄苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯、槲皮素-3-β-D-葡萄糖醛酸正丁酯、山萘酚-3-O-蕓香糖苷、蘆丁等黃酮類化合物。杠板歸具有抗炎抑菌、止咳祛痰、抗病毒等作用。

4、大黃為蓼科植物掌葉大黃(Rheum palmatum L.)、唐古特大黃(Rheum tanguticumMaxim.ex Balf.)或藥用大黃(Rheum officinale Baill.)的干燥根及根莖。中藥大黃是中國特產(chǎn)藥之一，味苦，性寒，歸胃、脾、大腸、肝、心包經(jīng)，具有瀉熱通腸、涼血解毒、逐瘀通經(jīng)等功效?！渡褶r(nóng)本草經(jīng)》曰：“下瘀血，血閉寒熱，破癥瘕積聚，留飲宿食，蕩滌腸胃，推陳致新，通利水谷，調(diào)中化食，安和五臟”。《本草綱目》：“下痢赤白，里急腹痛，小便淋瀝，實熱燥結(jié)，潮熱澹語，黃疽，諸火瘡”。蒽醌類衍生物是大黃中主要的活性成分。蒽醌類衍生物包括蒽酮類大黃素(Emodin)、大黃酸(Rhein)、大黃酚(Chrysophano1)、大黃素甲醚(Physcion)、蘆薈大黃素(Aloe-emodin)和土大黃素(Chrysaron)等有效成分；大黃還含有大黃蒽醌類衍生物與葡萄糖結(jié)合成的苷類和蒽酮類，如番瀉苷(Sennoside)A，B，C，D，E、F等，及其他苷類、鞣質(zhì)、多糖化合物、有機(jī)化合物和無機(jī)物等。大黃具有對血液和代謝系統(tǒng)的影響、止血、降血脂、瀉下、清熱解毒、抗菌消炎、保肝利膽作用。

5、當(dāng)歸具有補(bǔ)血和血、調(diào)經(jīng)止血、潤腸滑腸之功效，為常用中藥材?？捎糜谘撐S、眩暈心悸、月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、虛寒腹痛、腸燥便秘、風(fēng)濕痹痛等的治療。研究表明，其包含揮發(fā)油、多糖等多種藥效成分。

6、莪術(shù)為常用中藥，其性溫味辛，具有行氣破血、消積止痛之功效。用于瘀血經(jīng)閉、食積腹脹等。研究表明具有較好的抗腫瘤、抗血栓、抗炎、抗病毒、抗早孕、抗菌、保肝、抗纖維組織增生等作用。是臨床上較為常用的活血化瘀藥物。其活性成分為揮發(fā)油，現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，其具有較好的抗腫瘤、抗血栓、抗炎、抗病毒、抗早孕、抗菌、保肝、抗銀屑病、抗纖維組織增生等多種藥理作用。

7、茯苓是一種真菌類中藥。味甘、淡平。歸心、肺、腎經(jīng)。有利水滲濕、健脾、安神的功效現(xiàn)代藥理研究證明，其具有利尿、調(diào)節(jié)免疫、鎮(zhèn)靜、抗腫瘤、保肝等作用，臨床用于水腫尿少、痰飲眩悸、脾虛食少、便溏泄瀉、心神不安等證的治療，應(yīng)用廣泛。

8、桂枝最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，出自《新修本草》，藥性溫，味辛甘，通行十二經(jīng)。歸心、肺、膀胱經(jīng)，具有發(fā)汗解表、助陽化氣、發(fā)汗解表的功效，其內(nèi)含有揮發(fā)油，還含甲酸芐酯、乙酸肉酯、香豆精、菖蒲烯等。具有抗病毒、抗菌、解熱鎮(zhèn)痛、抗炎、抗過敏等作用。

9、牡丹皮系毛莨科芍藥屬植物牡丹(Paenoina SuffruticosaAndr)的根皮。性微寒，味苦，辛。歸心、肝、腎經(jīng)。牡丹皮中分成份較多，主要成分為酚及酚苷類、單萜及其苷類，還有三萜、甾醇及其苷類、黃酮、有機(jī)酸、香豆素等。牡丹皮中酚及酚苷類是含量較高的一類化合物，從中分離的酚及酚苷類化合物有:丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷、丹皮酚新。其具有抗動脈粥樣硬化、降血壓、降血糖、抗驚厥、泌尿系統(tǒng)調(diào)節(jié)、調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞、抗菌消炎作用。

10、山茱萸具有補(bǔ)益肝腎、澀精固脫等功效，常用于眩暈，耳鳴，腰膝酸痛，陽痿，遺精，遺尿，尿頻，白帶出血，大汗虛脫，內(nèi)熱消渴等癥。環(huán)烯醚萜苷類、五環(huán)三萜酸及其酯類、鞣質(zhì)類、多糖類為其主要的化學(xué)成分。具有降血糖、抗菌、抗炎，并可影響免疫系統(tǒng)調(diào)節(jié)。

11、延胡索味辛、苦，性溫，歸肝，脾經(jīng)；具有活血、利氣、止痛之功效。主要化學(xué)成分為異喹啉型生物堿，按在水中的溶解性分為兩種，叔胺堿幾乎不溶或難溶于水；季胺堿較易溶于水。迄今為止，從中分離并經(jīng)結(jié)構(gòu)鑒定的已有40多種，分屬原小檗堿類、阿樸菲類、原阿片堿類、異喹啉芐咪唑類、異喹啉苯并菲啶類、雙芐基異哇琳類等。具有活血化瘀、行氣止痛之功效，現(xiàn)代實驗證明其具有很好的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、降壓和抗心律失常作用。具有活血、行氣、止痛的作用；對于幽門結(jié)扎及阿司匹林誘發(fā)的胃潰瘍，有明顯的保護(hù)作用，且能有效抑制對胃液分泌；其總生物堿對缺血性心肌也具有保護(hù)作用。

12、赤芍為芍藥科植物芍藥(Paeonia Lacti floraPall.)或川赤芍(P.veit chii Lynch)的干燥根，性味苦，微寒，歸肝經(jīng)，具有清熱涼血、散瘀止痛之功效。用于溫毒發(fā)斑，吐血衄血，目赤腫痛，肝郁脅痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕腹痛，跌撲損傷，癰腫瘡瘍。赤芍的主要有效成分主要是以芍藥苷為代表的苷類成分，包括芍藥甙(paeoniflorin)，氧化芍藥甙(oxy-paeoniflorin)等。又含右旋兒茶精(catechin)及揮發(fā)油。苯甲酸(benzoic acid)是揮發(fā)油主要成分，牡丹酚(paeonol)及其他醇類和酚類成分共33個。具抗血栓形成、抗血小板聚集、降血脂和抗動脈硬化作用。

13、木香歸脾；胃；肝；肺經(jīng)辛味辛；苦；性溫。具有理氣調(diào)中，燥濕化痰行氣止痛；調(diào)中導(dǎo)滯。主胞脅脹滿足；脘腹脹痛；哎吐泄瀉；痢疾后重。用于胸脘脹痛、瀉痢后重、食積不消、不思飲食，具有抗菌作用。其辛溫香散，能升能降，通理三焦之氣，尤其善行胃腸之氣而止痛，兼有健脾消食之功，常用于凡脾胃大腸氣滯所致諸證。

二、制備工藝的確定

1飲片來源

所用的飲片均購自貴州濟(jì)仁堂藥業(yè)有限公司，經(jīng)鑒定符合《中國藥典》2010年版一部及《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版各藥材(飲片)項下相關(guān)規(guī)定。

2工藝路線確定、優(yōu)選

2.1提取方法的確定

治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑提取方法是依據(jù)處方中各藥味的化學(xué)成分性質(zhì)和現(xiàn)代藥理學(xué)研究，并結(jié)合工業(yè)化生產(chǎn)實際等因素設(shè)計的。

龍血竭中含有十分復(fù)雜的化學(xué)成分。根據(jù)酚類化合物的結(jié)構(gòu)，可大致分為查耳酮，2-氫查耳酮，黃烷酮，黃酮，黃酮類，色酮類，黃酮類化合物和其它酚類化合物的聚合物。目前已分離到甾體、三萜類物質(zhì)21種。其中包括酚類、甾體皂苷等化合物外，還存在其它結(jié)構(gòu)類型的化合物，如：烷烴、酸類、酯類等。從目前關(guān)于其化學(xué)成分的研究概況可得，龍血竭主要成分為酚性化合物，其中以黃酮類化合物為主要地位。根據(jù)本方功能主治，取其水提醇沉部分成分。

三棱中的化學(xué)成分主要是揮發(fā)油類、有機(jī)酸類、甾體類、黃酮類、苯丙素類等。近年來，不斷有新成分、新活性被發(fā)現(xiàn)。目前，已證明其總黃酮具有抗血小板聚集、抗血栓、鎮(zhèn)痛作用?？捎盟岽汲撂崛　?/p>

杠板歸化學(xué)成分有酚類、有機(jī)酸、生物堿、氨基酸、鞣質(zhì)、黃酮、蒽醌、甙類、糖類、植物甾醇及三萜類等。根中分離鑒定出β-谷甾醇、反式-對羥基肉桂酸甲酯、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖甙、大黃素、大黃素甲醚和蘆薈大黃素等化合物。藥材鑒定了山萘酚、槲皮素、蓄苷、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯、槲皮素-3-β-D-葡萄糖醛酸正丁酯、山萘酚-3-O-蕓香糖苷、蘆丁等黃酮類化合物。用乙醇提取可以將有效成分最大限度地提出。

大黃中主要的活性成分為蒽醌類衍生物。蒽醌類衍生物包括蒽酮類大黃素、大黃酸、大黃酚、大黃素甲醚、蘆薈大黃素和土大黃素等；大黃還含有大黃蒽醌類衍生物與葡萄糖結(jié)合成的苷類和蒽酮類，如番瀉苷A，B，C，D，E、F等，及其他苷類、鞣質(zhì)、多糖化合物、有機(jī)化合物和無機(jī)物等。用乙醇提取可以將有效成分最大限度地提出。

當(dāng)歸中主要的藥理活性成分為揮發(fā)油、多糖等。還含有蔗糖、果糖、葡萄糖；維生素A、維生素B12、維生素E；17種氨基酸以及鈉、鉀、鈣、鎂等20余種無機(jī)元素。根據(jù)本方功能主治，取其水提醇沉部分成分。

莪術(shù)的活性成分為揮發(fā)油，含量在1.9％～2.5％。近幾年對揮發(fā)油中的成分進(jìn)行了研究，油中主要化學(xué)成分為多種倍半萜類物質(zhì)。還含有鋅、鐵、鎳、錳、鎂、鎘、銅、鉬、鈷、釩、磷、鈣、鎵等多種微量元素?？捎盟岽汲撂崛?。

茯苓主要成分為多糖，約占干重的9.3％，除此之外還含有三萜類化合物。亦含脂肪酸，如辛酸、十一酸、月桂酸、十二酸和棕櫚酸。此外，還有麥角甾醇、樹膠、甲殼質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪、甾醇、卵磷脂、右旋葡萄糖、腺嘌呤、組胺酸、膽堿、、脂肪酶、蛋白酶等。根據(jù)本方功能主治，取其水提醇沉部分成分。

桂枝主要活性成分為揮發(fā)油，揮發(fā)油含量達(dá)0.6％，此外還含甲酸芐酯、乙酸肉酯、香豆精、菖蒲烯等?？捎盟岽汲撂崛?。

牡丹皮中分離到的成份較復(fù)雜，但主要以酚及酚苷類、單萜及其苷類，其他還有三萜、甾醇及其苷類、黃酮、有機(jī)酸、香豆素等。酚及酚苷類酚及酚苷類化合物在牡丹皮中含量較高，從牡丹皮中分離到的酚及酚苷類化合物有:丹皮酚、丹皮酚苷、丹皮酚原苷、丹皮酚新?？捎盟岽汲撂崛?。

山茱萸的主要化學(xué)成分為環(huán)烯醚萜苷類、五環(huán)三萜酸及其酯類、鞣質(zhì)類、多糖類。其揮發(fā)性成分主要有：棕櫚酸、異丁醇、異戊醇、欖香素、糠醛、甲基丁香油酚、異細(xì)辛腦、β-苯乙醇等。糖甙類及甙元包括：馬鞭草甙、莫諾甙、獐芽菜甙、馬錢子甙、環(huán)烯醚萜類、葡萄糖、果糖和蔗糖。用乙醇提取可以將有效成分最大限度地提出。

延胡索的主要化學(xué)成分為異喹啉型生物堿，按照其在水中的溶解性可分為兩種，叔胺堿幾乎不溶或難溶于水者；較易溶于水者屬季胺堿。到目前為止，從中分離出并經(jīng)過結(jié)構(gòu)鑒定的已有40多種，其類型又分別屬于原小檗堿類、阿樸菲類、原阿片堿類、異喹啉芐咪唑類、異喹啉苯并菲啶類、雙芐基異哇琳類等。用乙醇提取可以將有效成分最大限度地提出。

赤芍的主要有效成分為以芍藥苷為代表的苷類成分含芍藥甙，氧化芍藥甙等。又含右旋兒茶精及揮發(fā)油。揮發(fā)油主要含苯甲酸，牡丹酚及其他醇類和酚類成分共33個?？捎盟岽汲练ㄌ崛。椒ㄝ^成熟。

木香根油主含內(nèi)酯類化學(xué)成分，含量達(dá)50％?？捎盟岽汲撂崛?。

2.2工藝路線確定

依據(jù)處方中各藥味的化學(xué)成分性質(zhì)，結(jié)合處方功能主治以及上述提取方法分析結(jié)果，擬對處方中杠板歸、山茱萸、延胡索、大黃藥材加乙醇提取，過濾，得醇提液，備用。處方中其余9味藥加水提取，過濾，得水提液，濃縮，得濃縮水提液，再加入適量乙醇醇沉，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用。醇提液與醇沉上清液混合濃縮得濃縮液(回收乙醇)。濃縮液干燥，得浸膏提取物，粉碎過篩。加入輔料制粒，整粒，即得。擬定工藝路線如圖1所示。

2.3醇提工藝條件優(yōu)選

2.3.1藥材吸醇率的考察

按一個處方比例量稱取藥材三份，杠板歸4.5g、山茱萸10g、延胡索7.5g和大黃12g，共計34g，加5倍量的乙醇浸泡，每隔30min觀察一次浸泡情況，直至浸透藥芯為止，按下式求得濕重結(jié)果，結(jié)果如表1所示：

表1 藥材吸醇率的考察

由表1可知，首次加醇提取時，應(yīng)補(bǔ)足藥材108％的吸醇量，為方便生產(chǎn)計算，首次加醇提取時，以全部醇提藥材多加一倍量乙醇，與理論吸醇量所要加的乙醇相差不大，因此首次醇提時多加一倍量的乙醇是比較合理的。

2.3.2乙醇濃度及其他因素的優(yōu)選

(1)乙醇濃度的優(yōu)選根據(jù)杠板歸中槲皮素成分而選擇乙醇的濃度分別為：80％、70％、60％來進(jìn)行考察篩選。

(2)提取時間的優(yōu)選考慮大生產(chǎn)時如果提取時間太短，有效成分較難于提取完全，而提取時間過長又會提高成本，且浪費(fèi)時間，故提取時間選擇為1h、1.5h、2h三種水平考察。

(3)提取次數(shù)的優(yōu)選按常規(guī)方法，選擇提取次數(shù)分別為一次、兩次、三次考察。

(4)溶劑量優(yōu)選稱取4味藥材飲片，加入5倍量的溶劑就可浸沒藥材，而加溶劑量太大不但浪費(fèi)溶媒，且造成成本增加，再結(jié)合考慮藥材的吸醇率，故選擇溶劑量為6倍、8倍、10倍量考察。

2.3.3方法與結(jié)果

(1)方法為尋求杠板歸、延胡索等4味藥材的乙醇提取的最佳工藝條件，擬以正交試驗表L9(3⁴)進(jìn)行正交試驗，從而確定最佳乙醇提取條件。正交實驗表如表2所示。

表2 L9(3⁴)正交試驗因素及水平

樣品溶液的制備取半個處方量的藥材共17g，選擇正交表按正交表設(shè)計的試驗方案進(jìn)行，所得的醇提液經(jīng)濾過、濃縮至100mL，即得。

指標(biāo)成分的選定以杠板歸中槲皮素和出膏率為指標(biāo)成分，優(yōu)選醇提最佳提取工藝。

對照品溶液制備精密稱取槲皮素對照品適量，加甲醇制成每1mL含槲皮素0.09mg的溶液，即得。

供試品溶液制備精密量取“樣品溶液的制備”項下樣品10mL，置燒杯中揮干，精密加入50mL甲醇:鹽酸＝4:1溶液，稱定重量，90℃水浴回流提取1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

干膏率測定精密量取50mL“樣品溶液的制備”項下樣品溶液，濃縮至一定密度，置恒重的蒸發(fā)皿中水浴蒸干，105℃干燥3h至恒重，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定其質(zhì)量，計算得干膏率。

W50mL:50mL樣品溶液的浸膏重量

V總:樣品總體積

W藥材:藥材重量

(2)槲皮素含量測定結(jié)果

色譜條件Agela promosil C18(250mm×4.6，5μm)；以甲醇-0.4％磷酸水溶液＝50:50為流動相；檢測波長為360nm；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；以槲皮素理論塔板數(shù)計不低于3000。如圖2、圖3和圖4所示。

標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取槲皮素對照品適量，加甲醇溶解制成質(zhì)量濃度為90μg/mL的對照品溶液，按擬定的色譜條件注入HPLC測定。槲皮素進(jìn)樣量分別為0.1μL、0.3μL、0.5μL、1μL、2μL。以峰面積對進(jìn)樣質(zhì)量進(jìn)行線性回歸，得各被測成分的回歸方程、相關(guān)系數(shù)及線性范圍。結(jié)果如表3和圖5所示：槲皮素質(zhì)量濃度在0.009～0.180μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

表3

(3)正交試驗設(shè)計及結(jié)果

按處方稱取半個處方量的藥材共17g，按L9(3⁴)正交試驗條件分別提取，濾過，初步濃縮至一定量，得供試液。以槲皮素含量、收膏率為指標(biāo)，采用綜合評價(綜合評價＝槲皮素含量/槲皮素最大含量×80-收膏率/最大收膏率×20)為指標(biāo)，得最佳工藝。結(jié)果如表4、表5和表6所示。

表4 正交試驗結(jié)果

表5 正交試驗方差分析

表6 正交實驗綜合評分結(jié)果

從表中正交實驗結(jié)果可知，各因素影響醇提取工藝的順序為提取次數(shù)>乙醇濃度>乙醇用量>提取時間，其中提取次數(shù)C、乙醇濃度A有顯著性(P<0.05)影響，因此，根據(jù)正交試驗結(jié)果，提取次數(shù)C最佳選C2、乙醇濃度A最佳選A3；而乙醇用量B、提取時間D無顯著性差異，結(jié)合大生產(chǎn)，優(yōu)選最佳工藝條件為A3B2C2D1。即加8倍量80％的乙醇溶液提取2次，每次1h。

2.3.4驗證試驗

稱取半個處方量的藥材共17g，按最佳方案A3B2C2D1進(jìn)行驗證試驗，如表7所示，結(jié)果與正交試驗結(jié)果吻合。說明該工藝穩(wěn)定可行。因此確定醇提工藝為：8倍量80％的乙醇溶液回流提取2次，每次1h。

表7 醇提工藝驗證結(jié)果

2.4水提條件工藝優(yōu)選

2.4.1藥材吸水率的考察

按處方比例量稱取藥材三份，牡丹皮8g、茯苓10g、桂枝6.5g、當(dāng)歸8g、三棱6.5g、莪術(shù)6.5g、赤芍6.5g、木香8g和龍血竭3g，共計63g，加7倍量的水浸泡，每隔30min觀察一次浸泡情況，直至浸透藥芯為止，按下式求得濕重結(jié)果，結(jié)果如表8所示：

表8 藥材吸水率的考察

由表8可知，首次加水提取時，應(yīng)補(bǔ)足藥材102％的吸水量，為方便生產(chǎn)計算，首次加水提取時，以全部水提藥材多加一倍量水，與理論吸水量所要加的水相差不大，因此首次水提時多加一倍量的水是比較合理的。

2.4.2水提因素水平的優(yōu)選

(1)加水量選擇稱取9味藥材飲片，加入5倍量的水就可浸沒藥材，結(jié)合考慮藥材的吸水率，故選擇加水量為6倍、8倍、10倍量考察。

(2)提取時間的優(yōu)選考慮大生產(chǎn)時如果提取時間太短，有效成分較難于提取完全，而提取時間過長又會提高成本，且浪費(fèi)時間，故提取時間選擇為1h、1.5h、2h三種水平考察。

(3)提取次數(shù)的優(yōu)選按常規(guī)方法，選擇提取次數(shù)分別為一次、兩次、三次考察。

2.4.3方法與結(jié)果

(1)方法為尋求龍血竭、桂枝等9味藥材的水提取的最佳工藝條件，擬以正交試驗表L9(3⁴)進(jìn)行正交試驗，從而確定最佳水提取條件，如表9所示。

表9 L9(3⁴)正交試驗因素及水平

樣品溶液的制備取半個處方量的藥材共31.5g，選擇正交表按正交表設(shè)計的試驗方案進(jìn)行，所得的水提液經(jīng)濾過、濃縮至100mL，即得。

指標(biāo)成分的選定以赤芍中芍藥苷和出膏率為指標(biāo)，優(yōu)選水提最佳提取工藝。

對照品溶液制備精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇分別制成每1ml含芍藥苷257μg的溶液，即得。

供試品溶液制備精密量取“樣品溶液的制備”項下樣品10mL，置燒杯中揮干，精密加入25mL甲醇溶液，稱定重量，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

干膏率測定精密量取50mL“樣品溶液的制備”項下樣品溶液，濃縮至一定密度，置恒重的蒸發(fā)皿中水浴蒸干，105℃干燥3h至恒重，置干燥器中冷卻30min，迅速精密稱定其重質(zhì)量，計算得干膏率。

W50mL:50mL樣品溶液的浸膏重量

V總:樣品總體積

W藥材:藥材重量

(2)芍藥苷含量測定結(jié)果

芍藥苷色譜條件Agela promosil C18(250mm×4.6，5μm)；以甲醇-0.5mol/L磷酸二氫鉀溶液＝40:65為流動相；檢測波長為230nm；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；以芍藥苷理論塔板數(shù)計不低于3000。如圖6、圖7和圖8所示。

標(biāo)準(zhǔn)曲線精密稱取芍藥苷對照品適量，加甲醇溶解制成質(zhì)量濃度分別257μg/ml的對照品溶液，按擬定的色譜條件注入HPLC測定。芍藥苷進(jìn)樣量分別為2.5μL、5μL、12.5μL、20μL、25μL。以峰面積對進(jìn)樣質(zhì)量進(jìn)行線性回歸，得各被測成分的回歸方程、相關(guān)系數(shù)及線性范圍。結(jié)果如表10和圖9所示：芍藥苷質(zhì)量濃度在0.64～6.42μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。

表10

正交試驗設(shè)計及結(jié)果

按處方稱取半個處方量的藥材共31.5g，按L9(3⁴)正交試驗條件分別提取，濾過，初步濃縮至一定量，得供試液。以芍藥苷含量和干膏率為指標(biāo)，采用綜合評價(綜合評價＝芍藥苷含量/最大芍藥苷含量×80-干膏率/最大干膏率×20)為指標(biāo)，得最佳工藝。結(jié)果如表11～表13所示。

表11 正交實驗結(jié)果

表12 正交實驗方差分析

表13 正交實驗綜合評分結(jié)果

從表中正交實驗結(jié)果可知，各因素影響水提取工藝中的順序為提取次數(shù)>加水量>提取時間，其中提取次數(shù)A有顯著性(P<0.05)影響，因此根據(jù)正交試驗結(jié)果，提取次數(shù)A最佳選A2；而乙醇用量B、提取時間C無顯著性差異，結(jié)合大生產(chǎn)需求，優(yōu)選最佳工藝條件為A2B1C1。即加6倍量水提取2次，每次1h。

2.4.4驗證試驗

稱取半個處方量的藥材共31.5g，按最佳方案A2B1C1進(jìn)行驗證試驗，結(jié)果如表14所示。結(jié)果與正交試驗結(jié)果吻合。說明該工藝穩(wěn)定可行。因此確定水提工加藝為6倍量水提取2次，每次1h。

表14 水提工藝驗證結(jié)果

2.5水提液除雜工藝優(yōu)選

中藥材在水提后，其液體中常含有淀粉、多糖、蛋白質(zhì)、果膠等，造成最終制得的固體制劑服用劑量過大，所以一般應(yīng)對提取液進(jìn)行純化，降低制劑中無關(guān)成分的含量，減少服用劑量。生產(chǎn)中多采用一定濃度的醇進(jìn)行醇沉除雜工藝。

2.5.1不同醇沉濃度優(yōu)選

分別稱取3份一個處方量的藥材63g，加入6倍量水提取二次，每次1小時，得水提液濃縮，再加入一定量的乙醇，分別控制料液乙醇濃度為40％、50％、60％醇沉，靜置12小時后得醇沉液，再濃縮減壓干燥分別得3份干膏，結(jié)果如表15所示。

表15 水提醇沉乙醇濃度比較結(jié)果

由結(jié)果發(fā)現(xiàn)40％、50％的純化效果較60％的料液乙醇濃度差，最終的服藥量還是較大。60％的料液乙醇濃度純化效果較好，有效降低了服藥量，且料液的乙醇濃度低于65％，能有效保存處方的多糖等有效成分，醇沉濃度的改變對芍藥苷含量的影響不大，故確定水提液醇沉純化的料液乙醇濃度為60％。

2.6濃縮及干燥工藝優(yōu)選

中藥提取液中藥物的成分和性質(zhì)較為復(fù)雜，在濃縮、干燥過程中，由于受熱時間較長，其所含某些有效成分可能會不同程度地被破壞，而使其有效成分含量降低，影響了制劑的臨床療效。濃縮干燥為中藥制劑生產(chǎn)的重要環(huán)節(jié)，選擇不同的濃縮干燥方式，將影響成品的有效成分含量、含濕量、外觀、色澤、粒度、溶解性及其衛(wèi)生要求等，而且必須結(jié)合其生產(chǎn)規(guī)模及生產(chǎn)能力綜合考慮濃縮干燥工藝。目前常用的濃縮干燥方法分為四種，有常壓濃縮干燥法，減壓濃縮干燥法，噴霧干燥法和微波干燥法等多種形式。減壓濃縮具有防止有效成分分解，效益高，耗時短，節(jié)約能耗等的優(yōu)點(diǎn)，結(jié)合以后大生產(chǎn)的考慮，故本工藝選擇減壓濃縮。以槲皮素、丹皮酚及芍藥苷的轉(zhuǎn)移率為評價指標(biāo)，對常壓及真空干燥和在不同溫度條件下的干燥工藝進(jìn)行了考察。

2.6.1不同干燥方式優(yōu)選

稱取半個處方量的藥材共48.5g，按最佳方案分別進(jìn)行醇提及水提，再混合提取液減壓濃縮到一定密度，比較常壓干燥，減壓干燥不同干燥方式，通過考察槲皮素、丹皮酚及芍藥苷的含量干燥前后的對比，松脆度，顏色，干燥時間等因素，確定最佳干燥方式。結(jié)果如表16所示。

表16 不同干燥方式的影響

由表16可知，綜合考慮槲皮素、丹皮酚及芍藥苷的干燥前后含量對比，松脆度，顏色，干燥時間的基礎(chǔ)上，選擇真空干燥為最佳干燥方式。

2.6.2不同溫度對真空干燥的影響

稱取半個處方量的藥材共48.5g，按最佳方案分別進(jìn)行醇提及水提，再混合提取液減壓濃縮到一定密度，比較真空干燥80℃，70℃，60℃的干燥溫度。結(jié)果如表17所示。

表17 不同真空干燥時間的影響

由表17可知，考慮干燥效率，槲皮素、丹皮酚、芍藥苷的轉(zhuǎn)移率隨溫度升高而降低。雖然80℃的干燥時間較短，但含量有較大差異。60℃和70℃的含量差異較小，但60℃干燥效率較70℃低，從大生產(chǎn)的效率考慮，確定真空70℃進(jìn)行干燥。

在前期預(yù)實驗中經(jīng)測定計算(按2010年版《中國藥典》要求)，試驗中赤芍藥材芍藥苷含量為19mg/g，杠板歸藥材槲皮素含量為1.55mg/g。通過對制劑的提取、純化、濃縮及干燥工藝考察優(yōu)選，最終得到制劑的干膏藥粉。在制劑選定的目標(biāo)成分中，經(jīng)測定計算赤芍中芍藥苷及杠板歸中的槲皮素的轉(zhuǎn)移率分別達(dá)到76％和61％，說明選定的提取、純化、濃縮及干燥工藝穩(wěn)定、可行。

2.7成型工藝確定

2.7.1劑型優(yōu)選

治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑處方量為97g，在臨床上曾用湯劑，療效顯著。為了增加其臨床適應(yīng)性，將該處方在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，運(yùn)用現(xiàn)代化的理論、技術(shù)、方法按照處方量加工成一定的劑型。根據(jù)各藥材所含成分的理化性質(zhì)和現(xiàn)代藥理研究結(jié)果及各劑型的特點(diǎn)，認(rèn)為若制成液體制劑，則制劑的穩(wěn)定性差，貯藏、運(yùn)輸不方便。本發(fā)明曾經(jīng)考慮將該處方制成膠囊劑，但根據(jù)其臨床運(yùn)用的處方量為97g，根據(jù)其水提醇沉及醇提后總得膏率一般為15％，裝0號膠囊，每粒0.5g，不加輔料的情況下，每天需要服用30粒，這樣就增加了患者的服藥負(fù)擔(dān)。故考慮將該處方制成顆粒劑，增加患者服用的適應(yīng)性，顆粒劑在人體腸胃道中崩解迅速，吸收快，且便于運(yùn)輸、攜帶和服用，在保證該處方的療效的情況下，增加了穩(wěn)定性，實現(xiàn)該處方的現(xiàn)代化和經(jīng)濟(jì)社會價值。

2.7.2制顆粒的方法優(yōu)選

制顆粒根據(jù)不同原料的制粒方法可分為干浸膏制粒和稠膏制粒。本實驗考慮將醇提溶液和水提溶液濃縮至相對密度1.30～1.35，加入輔料量為浸膏的3～5倍制粒，導(dǎo)致了藥物的服用量增加，故本實驗選擇干膏制粒。

2.7.3輔料的優(yōu)選

(1)抗吸潮劑和賦形劑因治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥顆粒劑的干膏粉在保存過程中極易吸潮，故考慮選擇合適的輔料作為抗吸潮劑和賦形劑。本發(fā)明擬選擇糊精、可溶性淀粉、乳糖作為賦形劑，預(yù)實驗中可溶性淀粉做抗吸潮劑和賦形劑時，軟材的黏度低，顆粒的成型和流動性都較好，抗吸潮能力強(qiáng)，而且可溶性淀粉不溶于水和乙醇，在空氣中很穩(wěn)定，吸濕而不潮解?？扇苄缘矸鄣幕瘜W(xué)性質(zhì)也很穩(wěn)定，與大多數(shù)的藥物不起作用，價格低廉。

(2)矯味劑的選擇由于治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥顆粒劑經(jīng)醇提和水提得干膏粉后，其味苦澀，較難于直接口服，故考慮加入一定的矯味劑改善其不良?xì)馕??？紤]加入的矯味劑有0.2％阿司帕坦、0.5％甜蜜素或直接用蔗糖代替部分可溶性淀粉作為輔料。預(yù)實驗表明加入0.2％阿司帕坦可有效改善其苦澀的味道。

2.7.4賦形劑與藥粉比例

藥粉與可溶性淀粉按不同的質(zhì)量比例3:4、1:1、4:3、2:1制粒，觀察其制粒效果、吸濕性和外觀，結(jié)果見表18：

表18 可溶性淀粉與藥粉比例考察結(jié)果

由表18可見，當(dāng)藥粉與可溶性淀粉的質(zhì)量比例為1:1時，顆粒不吸潮、效果最好，成型率高，故確定藥粉與可溶性淀粉的最佳質(zhì)量比例為1:1。

2.7.5潤濕劑的優(yōu)選

為了更好地保證制劑的穩(wěn)定性和其成型率，本實驗擬用80％、85％、90％、95％的乙醇進(jìn)行制粒研究，結(jié)果見表19：

表19 不同潤濕劑制粒情況

上述結(jié)果表明，以90％乙醇為潤濕劑制粒，制軟材黏度適中，易于制粒，所得顆粒均勻適中，成型效果好，故選擇用90％的乙醇作潤濕劑。

2.7.6顆粒的性能指標(biāo)

(1)堆密度測定稱取2g藥粉(過四號篩)，裝入10mL量筒中，以一定高度落下數(shù)次(盡量保持條件一致)，使松緊適宜，以重量及容量計算堆密度，堆密度＝重量(g)/容積(mL)。結(jié)果見表20：

表20 三批樣品堆密度測定結(jié)果

(2)休止角測定將漏斗圈定于水平放置的繪圖紙上，漏斗下口距繪圖紙的距離為H，把顆粒倒入漏斗直至漏斗的出口與圓罐尖端接觸，量取圓錐體底部直徑(2R)及圓錐高(H)，根據(jù)tanθ＝H/R計算出θ。結(jié)果見表21：

表21 三批樣品休止角測定結(jié)果

結(jié)果表明顆粒的平均休止角為28.17度，說明顆粒的流動性較好。

2.7.7顆粒的臨界相對濕度

臨界相對濕度是藥物吸濕與否的臨界值，同時也可以根據(jù)它確定生產(chǎn)時的環(huán)境濕度。分別配制不同濃度的硫酸或不同鹽的飽和溶液，分別置于恒溫(25℃)干燥器中96h，使其內(nèi)部濕度平衡構(gòu)成不同相對濕度的環(huán)境，結(jié)果見表22：

表22 不同濃度的硫酸或不同鹽的過飽和溶液在25℃時的相對濕度

將制備好的粉末干燥至恒重后，在已恒重的稱量瓶底部放入厚約2mm的顆粒，準(zhǔn)確稱量后置于上表所列的分別盛有6種不同濃度的硫酸或不同鹽的過飽和溶液的干燥器(稱量瓶蓋打開)，于25℃恒溫培養(yǎng)箱中吸濕至恒重，精密稱量，計算其吸濕百分率。結(jié)果見表22。

以相對濕度為橫坐標(biāo)，吸濕率為縱坐標(biāo)，繪制吸濕曲線，見圖10。將吸濕曲線直線兩端做該曲線切線，兩曲線交點(diǎn)橫坐標(biāo)即為臨界相對濕度(CRH)，臨界相對濕度為60％，因此在粉碎、制粒、包裝及貯存的環(huán)境應(yīng)控制相對濕度小于60％，并采用防潮好的包裝。

三、中試生產(chǎn)

按1000個制劑單位量倍原料投料，按上述最佳工藝制備，試制三批次中試成品，并按質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及藥顆粒劑項下的要求進(jìn)行檢測，結(jié)果見表23、24。

表23 1000個制劑處方量的原料投入量

表24 中試成品檢測數(shù)據(jù)

由表中中試生產(chǎn)研究結(jié)果可知，采用優(yōu)化的成型工藝，其成型率可達(dá)90％，且三批成品的成型率基本一致，同時檢測了成品的多項指標(biāo)，經(jīng)計算赤芍中芍藥苷及杠板歸中槲皮素的轉(zhuǎn)移率分別達(dá)到71％和52％，表明該工藝簡單、可行、穩(wěn)定。

四、本制劑處方用于臨床試驗研究，其研究如下：

4.1、臨床資料

4.1.1、一般資料

126例患者，平均年齡(33.5±6.3)歲。

4.1.2、診斷標(biāo)準(zhǔn)

參照中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會婦產(chǎn)科專業(yè)委員會第三屆學(xué)術(shù)會議修訂標(biāo)準(zhǔn)。全部病例均結(jié)合臨床婦科檢查、B型超聲波檢查診斷，部分病例結(jié)合CT、MRI、CA125值、腹腔鏡檢查及手術(shù)后病理檢查診斷為子宮內(nèi)膜異位癥。

主要臨床癥狀及體征126例患者中腰骶部疼痛、痛經(jīng)86例，月經(jīng)不調(diào)43例，不孕15例。婦科檢查有明顯痛性結(jié)節(jié)71例，B超提示子宮肌腺瘤41例，卵巢巧克力囊腫34例，其中雙側(cè)者16例，囊腫最大直徑為8.7cm。

4.2、治療與觀察方法

4.2.1、治療方法

(1)治療

觀察臨床療效時，采用湯劑。復(fù)方龍丹湯藥用：龍血竭3g、大黃12g、山茱萸10g、當(dāng)歸8g、牡丹皮8g、木香8g、延胡索8g、赤芍6g、茯苓10g、莪術(shù)6g、杠板歸5g、桂枝5g和三棱5g，每日1劑。為便于服用，將10劑藥物同煎3次，所得藥液濃縮成1000mL，4℃冰箱保存，每日2次，每次50mL，服時加溫口服。

(2)療程以6個月為1個療程。

4.2.2、觀察指標(biāo)及方法

(1)主要臨床癥狀及體征:將腰骶部疼痛、痛經(jīng)、月經(jīng)不調(diào)等癥狀按輕重程度打分，無癥狀者0分；輕癥1分；中等癥2分；重癥3分。根據(jù)婦科雙合診、三合診，結(jié)合B超檢查所得到的痛性結(jié)節(jié)、內(nèi)膜囊腫及盆腔粘連等體征將病變分為輕、中、重度。無明顯體征者0分；輕度1分；中度2分；重度3分。服藥過程中每4周婦科檢查1次，每8周B超檢查1次，動態(tài)觀察2組病例臨床癥狀及體征的改善度。

(2)觀察藥物副作用情況，隨訪妊娠和復(fù)發(fā)情況。

4.3、治療結(jié)果

4.3.1、療效標(biāo)準(zhǔn)

根據(jù)中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會婦產(chǎn)科專業(yè)委員會第三屆學(xué)術(shù)會議制定的療效標(biāo)準(zhǔn)，①痊愈:癥狀全部消失，盆腔包塊等局部體征基本消失，不孕癥患者在3年內(nèi)妊娠或生育；②顯效:癥狀基本消失，盆腔包塊縮小，或雖局部體征存在，但不孕患者得以受孕；③有效:癥狀減輕，盆腔包塊無增大或略縮小，停藥3個月內(nèi)癥狀不加重；④無效:主要癥狀無變化或惡化，局部病變有加重趨勢。

4.3.2、結(jié)果

126例非手術(shù)治療內(nèi)異癥的臨床資料統(tǒng)計，其總有效率為90.48％，其中痊愈35例(29.36％)，顯效48例(38.09％)，有效31例(24.60％)。

本發(fā)明的有益之處在于：本發(fā)明的治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，具有活血化瘀，補(bǔ)腎固脫，消癓散結(jié)，通絡(luò)止痛之功效。用于婦人宿用癓塊，腎虛淤阻，或氣滯血瘀所致的月經(jīng)紊亂，經(jīng)前下腹脹痛，經(jīng)行痛劇，痛引腰骶，拒按，陰部空墜，或經(jīng)行不暢，經(jīng)量少或淋漓不盡，血色暗，挾有血塊，塊下痛減，或伴有乳房脹痛，頭痛失眠，性欲低下，舌質(zhì)紫黯，或邊有瘀斑，苔薄，脈沉細(xì)或弦等諸證；子宮內(nèi)膜異位，子宮肌瘤見上述諸證者。其治療效果顯著，126例非手術(shù)治療內(nèi)異癥的臨床資料統(tǒng)計，其總有效率為90.48％，其中痊愈35例(29.36％)，顯效48例(38.09％)，有效31例(24.60％)。本發(fā)明的治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑具有良好的治療子宮內(nèi)膜異位癥的作用。本發(fā)明的組成藥物，均為藥典和地標(biāo)所載的常用藥，其資源豐富。本發(fā)明的治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑優(yōu)選為顆粒劑，方便患者服用，真正意義的做到“三小五便”，實現(xiàn)中藥現(xiàn)代化。通過對本制劑的提取、制備工藝研究，優(yōu)選出了較為合理的提取工藝條件及制備工藝條件。本發(fā)明的制備工藝簡單、可行、穩(wěn)定，制備條件溫和易控制，操作簡單，易于大規(guī)模生產(chǎn)。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的工藝流程圖；

圖2是醇提優(yōu)選工藝中醇提液樣品色譜圖；

圖3是醇提優(yōu)選工藝中缺杠板歸陰性樣品色譜圖；

圖4是醇提優(yōu)選工藝中槲皮素對照品色譜圖；

圖5是醇提優(yōu)選工藝中槲皮素標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；

圖6是水提優(yōu)選工藝中水提液樣品色譜圖；

圖7是水提優(yōu)選工藝中缺赤芍陰性樣品色譜圖；

圖8是水提優(yōu)選工藝中芍藥苷對照品色譜圖；

圖9是水提優(yōu)選工藝中芍藥苷標(biāo)準(zhǔn)曲線圖；

圖10是治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥顆粒劑的中間體吸濕曲線。

具體實施方式

以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的介紹。

實施例1

一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，由以下原料藥制成：龍血竭53g、大黃99g、山茱萸198g、當(dāng)歸198g、牡丹皮198g、木香99g、延胡索99g、赤芍198g、茯苓293g、莪術(shù)173g、杠板歸105g、桂枝99g和三棱165g。按照以下步驟制備：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，加6～10倍量60％～80％乙醇，回流提取1～3次，每次1～2h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，加6～10倍量水，煎煮提取1～3次，每次1～2h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為40％～60％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液60℃～80℃真空干燥42～72h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到粉末，再加入輔料制成各種藥物制劑。

實施例2

一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，由以下原料藥制成：龍血竭198g、大黃495g、山茱萸396g、當(dāng)歸396g、牡丹皮396g、木香330g、延胡索330g、赤芍396g、茯苓495g、莪術(shù)297g、杠板歸990g、桂枝330g和三棱330g。按照以下步驟制備：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，加6倍量60％乙醇，回流提取1次，每次2h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，先加8倍量水煎煮提取1次，再以7倍量水煎煮提取2次，每次1.5h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為40％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液60℃真空干燥57h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到藥粉，按1:1的質(zhì)量比例向藥粉中加入可溶性淀粉，以用量占藥粉總質(zhì)量0.2％的阿司帕坦作矯味劑，以90％的乙醇作潤濕劑制粒，顆粒于60℃～80℃中干燥，二次制粒，過1號篩除大顆粒，過5號篩除細(xì)粉，即得顆粒劑。本制劑開水沖服。一次兩袋，一日三次。每袋裝5g。

實施例3

一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，由以下原料藥制成：龍血竭103g、大黃412g、山茱萸343g、當(dāng)歸275g、牡丹皮275g、木香175g、延胡索257g、赤芍223g、茯苓343g、莪術(shù)223g、杠板歸155g、桂枝223g和三棱223g。按照以下步驟制備：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，分別加9倍量、8倍量80％乙醇，回流提取2次，每次1h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，分別加7倍量、6倍量水，煎煮提取2次，每次1h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為60％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液70℃真空干燥60h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到藥粉，按1:1的質(zhì)量比例向藥粉中加入可溶性淀粉，以用量占藥粉總質(zhì)量0.2％的阿司帕坦作矯味劑，90％的乙醇作潤濕劑制粒，顆粒在60℃～80℃逐漸升溫中干燥，二次制粒，過1號篩除大顆粒，過5號篩除細(xì)粉，即得顆粒劑。本制劑開水沖服。一次兩袋，一日三次。每袋裝5g。

實施例4

一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，由以下原料藥制成：龍血竭150g、大黃350g、山茱萸220g、當(dāng)歸230g、牡丹皮300g、木香250g、延胡索240g、赤芍260g、茯苓310g、莪術(shù)200g、杠板歸800g、桂枝260g和三棱210g。按照以下步驟制備：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，先加10倍量70％乙醇回流提取1次，再加9倍量70％乙醇回流提取2次，每次1.5h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，加10倍量水，煎煮提取1次，每次2h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為50％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液80℃真空干燥42h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到藥粉，按1:1的質(zhì)量比例向藥粉中加入可溶性淀粉，以用量占藥粉總質(zhì)量0.2％的阿司帕坦作矯味劑，90％的乙醇作潤濕劑制粒，顆粒于60℃～80℃干燥，二次制粒，過1號篩除大顆粒，過5號篩除細(xì)粉，即得顆粒劑。本制劑開水沖服。一次兩袋，一日三次。每袋裝5g。

實施例5

一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，由以下原料藥制成：龍血竭80g、大黃150g、山茱萸330g、當(dāng)歸305g、牡丹皮350g、木香180g、延胡索120g、赤芍360g、茯苓390g、莪術(shù)210g、杠板歸500g、桂枝120g和三棱300g。按照以下步驟制備：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，分別加8倍量、7倍量75％乙醇，回流提取2次，每次1.5h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，分別加9倍量、8倍量水，煎煮提取2次，每次2h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為60％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液60℃真空干燥72h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到藥粉，按1:1的質(zhì)量比例向藥粉中加入可溶性淀粉，以用量占藥粉總質(zhì)量0.2％的阿司帕坦作矯味劑，90％的乙醇作潤濕劑制粒，顆粒在60℃～80℃逐漸升溫中干燥，二次制粒，過1號篩除大顆粒，過5號篩除細(xì)粉，即得顆粒劑。本制劑開水沖服。一次兩袋，一日三次。每袋裝5g。

實施例6

一種治療子宮內(nèi)膜異位癥的中藥制劑，由以下原料藥制成：龍血竭135g、大黃480g、山茱萸270g、當(dāng)歸380g、牡丹皮225g、木香210g、延胡索300g、赤芍300g、茯苓370g、莪術(shù)190g、杠板歸200g、桂枝190g和三棱180g。按照以下步驟制備：按量稱取杠板歸、山茱萸、延胡索和大黃藥材，先加9倍量65％乙醇回流提取1次，再加8倍量65％乙醇回流提取2次，每次2h，過濾，得醇提液，備用；按量稱取龍血竭、當(dāng)歸、牡丹皮、木香、赤芍、茯苓、莪術(shù)、桂枝和三棱，先加7倍量水煎煮1次，再加6倍量水煎煮提取2次，每次1h，過濾，得水提液，經(jīng)75℃減壓濃縮至密度為1.05，得濃縮水提液，再加入乙醇，攪拌均勻，控制料液中乙醇濃度為40％～60％，靜置12h，棄去沉淀，得醇沉上清液，備用；醇提液與醇沉上清液混合，75℃減壓濃縮至密度為1.25，得濃縮液，濃縮液70℃真空干燥72h，得浸膏提取物，粉碎過5號篩，得到藥粉，按1:1的質(zhì)量比例向藥粉中加入可溶性淀粉，以用量占藥粉總質(zhì)量0.2％的阿司帕坦作矯味劑，90％的乙醇作潤濕劑制粒，顆粒在60℃～80℃逐漸升溫中干燥，二次制粒，過1號篩除大顆粒，過5號篩除細(xì)粉，即得顆粒劑。本制劑開水沖服。一次兩袋，一日三次。每袋裝5g。