本發(fā)明涉及治療感冒的中藥組合物，具體涉及一種解熱抗炎的中藥組合物及其制備方法。
背景技術：
風熱感冒是風熱之邪犯表、肺氣失和所致。癥狀表現(xiàn)為發(fā)熱重、微惡風、頭脹痛、有汗、咽喉紅腫疼痛、咳嗽、痰黏或黃、鼻塞黃涕、口渴喜飲、舌尖邊紅、苔薄白微黃。風熱感冒多見于夏秋季，外感風熱所致。中醫(yī)認為，風熱感冒是感受風熱之邪所致的表證。證候：發(fā)熱無汗，或有汗不暢，微惡風寒，頭痛口渴，咳嗽咽痛，舌尖紅，苔薄白或薄黃，脈浮數(shù)。治則：風熱感冒的治療，主要以辛涼透表，清熱解毒為主。
復方金錢草清熱顆粒收載于國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準，標準編號為WS-5582(B-0582)-2014Z，其公開的復方金錢草清熱顆粒公開了如下信息：
【處方】山芝麻384g 葫蘆茶384g 馬蘭草384g 積雪草384g 狗肝菜256g 籬欄網256g 玉葉金花256g 地膽草256g 金錢草256g 布渣葉256g 甘草256g 崗梅572g
【制法】以上十二味藥，先將崗梅粉碎成細粉，其余十一味加水煎煮二次，每次2小時，煎液濾過，濾液合并，濃縮至相對密度為1.17-1.20(80℃)，與上述細粉和適量糊精混勻，只顆粒，干燥，制成1000g，即得。
由于十二味藥材中活性成分的性質各不相同，上述制備方法采用水提法，會導致一些活性成分無法提出，或提取率低，影響藥效的發(fā)揮。
因此，需要提供一種可以提高藥品的活性成分提取率，以提高藥品療效的制備方法。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種療效確切的解熱抗炎的中藥組合物。
本發(fā)明提供的一種解熱抗炎的中藥組合物，其活性成分的制備方法包括以下步驟：
(1)稱取以下重量份藥材：山芝麻350-400份、葫蘆茶350-400份、馬蘭草350-400份、積雪草350-400份、狗肝菜230-300份、籬欄網230-300份、玉葉金花230-300份、地膽草230-300份、金錢草230-300份、布渣葉230-300份、甘草230-300份、崗梅500-700份；
(2)取金錢草，加40-60％乙醇提取，過濾，濾液回收乙醇，得金錢草提取液，用已預處理的NKA-9型大孔樹脂吸附，用50-80％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得金錢草濃縮液；
(3)取葫蘆茶，加30-60％丙酮提取，過濾，濾液回收丙酮，得葫蘆茶提取液，用已預處理的D101大孔樹脂吸附，20-50％乙醇進行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得葫蘆茶濃縮液；
(4)取積雪草，加60-80％乙醇提取，過濾，濾液回收乙醇，得積雪草提取液，加3-5倍水，冷藏過夜，離心，取上清液，用2mol/L的鹽酸調節(jié)pH值，冷藏過夜，離心，取上清液，用已預處理的HPD-100大孔樹脂吸附，用40-60％乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮得積雪草濃縮液；
(5)取山芝麻、狗肝菜、籬欄網、玉葉金花、甘草，加水浸泡后，加熱提取，過濾，濾液濃縮，得水提濃縮液；
(6)取馬蘭草、積雪草、地膽草、布渣葉，加50-70％乙醇浸泡，超聲提取，過濾，回收乙醇，得醇提濃縮液；
(7)取崗梅，用超微粉碎機粉碎成最細粉；與步驟2)、3)4)、5)、6)所得濃縮液混合均勻，即得。
上面所述制備解熱抗炎中藥組合物步驟中：
所述步驟1)組合物優(yōu)選為：山芝麻384份、葫蘆茶384份、馬蘭草384份、積雪草384份、狗肝菜256份、籬欄網256份、玉葉金花256份、地膽草256份、金錢草256份、布渣葉256份、甘草256份、崗梅572份。
所述步驟2)金錢草濃縮液制備方法優(yōu)選為：取金錢草，加40-60％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的6-10倍，加熱提取2-3次，每次1-3小時，過濾，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得金錢草提取濃縮液，用已預處理的NKA-9型大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:9-1:15，上樣速度為1-3BV/h，50-80％乙醇洗脫，洗脫速度2-3BV/h，收集洗脫液3-5BV，洗脫液減壓濃縮，得金錢草濃縮液。
所述步驟2)金錢草濃縮液制備方法進一步優(yōu)選為：取金錢草，加50％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的8倍，加熱提取2次，每次2小時，過濾，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得金錢草提取濃縮液，用已預處理的NKA-9型大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:12，上樣速度為2BV/h，70％乙醇洗脫，洗脫速度2BV/h，收集洗脫液4BV，洗脫液減壓濃縮，得金錢草濃縮液；
所述步驟3)葫蘆茶濃縮液制備方法優(yōu)選為：取葫蘆茶，加30-60％丙酮提取，丙酮用量為藥材重量份的6-10倍，30℃提取1-3次，每次2-5小時，過濾，回收丙酮，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得葫蘆茶提取濃縮液，用已預處理的D101大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:8-1:12，上樣速度2-4BV/h，20-50％乙醇進行洗脫，洗脫速度1-3BV/h，收集洗脫液4-8BV，洗脫液減壓濃縮，得葫蘆茶濃縮液。
所述步驟3)葫蘆茶濃縮液制備方法進一步優(yōu)選為：取葫蘆茶，加50％丙酮提取，丙酮用量為藥材重量份的8倍，30℃提取2次，每次4小時，過濾，回收丙酮，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得葫蘆茶提取濃縮液，用已預處理的D101大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:10，上樣速度3BV/h，30％乙醇進行洗脫，洗脫速度2BV/h，收集洗脫液6BV，洗脫液減壓濃縮，得葫蘆茶濃縮液。
所述步驟4)積雪草濃縮液制備方法優(yōu)選為：取積雪草，加60-80％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的8-12倍，加熱提取2-4次，每次2-4小時，過濾，回收乙醇，濾液濃縮至生藥濃度為1.0g/ml，得積雪草提取濃縮液，加3-5倍水，邊加邊攪拌，冷藏過夜，離心，取上清液，用2mol/L的鹽酸調節(jié)pH值至2.0，4℃冷藏過夜，離心，取上清液，用已預處理的HPD-100大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:8-1:12，上樣速度為0.5-1.0BV/h，先用2BV水洗脫，再用40-60％乙醇洗脫，洗脫速度1-2BV/h，收集乙醇洗脫液6-10BV，洗脫液減壓濃縮，得積雪草濃縮液。
所述步驟4)積雪草濃縮液制備方法進一步優(yōu)選為：取積雪草，加70％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的10倍，加熱提取3次，每次3小時，過濾，回收乙醇，濾液濃縮至生藥濃度為1.0g/ml，得積雪草提取濃縮液，加4倍水，邊加邊攪拌，冷藏過夜，離心，取上清液，用2mol/L的鹽酸調節(jié)pH值至2.0，4℃冷藏過夜，離心，取上清液，用已預處理的HPD-100大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:10，上樣速度為0.5BV/h，先用2BV水洗脫，再用50％乙醇洗脫，洗脫速度1BV/h，收集乙醇洗脫液8BV，洗脫液減壓濃縮，得積雪草濃縮液。
所述步驟5)濃縮液制備方法優(yōu)選為：取山芝麻、狗肝菜、籬欄網、玉葉金花、甘草，加入藥材重量份8-20倍純化水浸泡1-2h后，超聲提取2-3次，超聲功率為150-200W，時間30-90min，溫度80-100℃，過濾，合并濾液，濃縮，得水提濃縮液。
所述步驟5)濃縮液制備方法進一步優(yōu)選為：取山芝麻、狗肝菜、籬欄網、玉葉金花、甘草，加入藥材重量份15倍純化水浸泡1h后，超聲提取3次，超聲功率為150W，時間60min，溫度90℃，過濾，合并濾液，濃縮，得水提濃縮液。
所述步驟6)濃縮液制備方法優(yōu)選為：取馬蘭草、地膽草、布渣葉，加入藥材重量份10-20倍50-70％乙醇，浸泡30-60min后，超聲提取2-3次，超聲功率為150-200W，時間30-60min，溫度60-80℃，過濾，合并濾液，回收乙醇，得醇提濃縮液。
所述步驟5)濃縮液制備方法進一步優(yōu)選為：取馬蘭草、地膽草、布渣葉，加入藥材重量份12倍60％乙醇，浸泡40min后，超聲提取2次，超聲功率為150W，時間45min，溫度60℃，過濾，合并濾液，回收乙醇，得醇提濃縮液。
本發(fā)明還提供了含上述中藥組合物的制劑，該制劑由中藥組合物單獨制成或由中藥組合物和藥學上可接受的載體組成。
所述制劑為固體制劑或液體制劑，固體制劑為片劑、膠囊劑或顆粒劑；液體制劑為合劑或口服液。
所述藥學上可接受的載體為乳糖、淀粉、糊精、甘露醇、蔗糖、羥丙甲基纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、低取代羥丙基纖維素、微晶纖維素、微粉硅膠、預膠化淀粉、山梨醇、硬脂酸鎂、滑石粉、羥丙甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、苯甲酸鈉、山梨酸鉀、蔗糖或阿斯巴甜中、味精、蜂蜜、甜橙香精的一種或幾種。
本發(fā)明中藥組合物制劑的制備方法，該方法可以采用常規(guī)制劑工藝制備為各種常見劑型。
本發(fā)明還提供了上述中藥組合物或制劑在制備解熱抗炎時提高治療效果的應用。
本發(fā)明所公開的中藥組合物有效成分是由山芝麻、葫蘆茶、馬蘭草、積雪草、狗肝菜、籬欄網、玉葉金花、地膽草、金錢草、布渣葉、甘草、崗梅、山芝麻、甘草等原料制備而成。發(fā)明人在多年的制劑研究過程中發(fā)現(xiàn)，相同的藥物用量，不同提取工藝制備所得的活性成分，其藥理作用也會存在較大的差異和側重點，為此，申請人對本發(fā)明的中藥組合物結合藥理實驗進行了一系列的工藝研究，總結出本發(fā)明的提取工藝方法，并且經實驗驗證這樣的改進帶來了藥效增效：所得的中藥組合物用于治療風熱感冒時，其解熱、抗炎、增強免疫作用遠遠優(yōu)于相同處方的現(xiàn)有提取技術，臨床療效顯示，本發(fā)明的提取物與現(xiàn)有技術相比，解熱、抗炎、增強免疫療效有顯著差異，具有顯著性進步。
由于每味中藥材均含有諸多的活性成分，至少尚未有任何一味中藥被完完全全地分析清楚所有成分，不同的中藥合并在一起用不同提取方式提取時，由于溶劑、溫度及不同成分之間的相互影響和作用，會產生極為復雜的化學反應。按現(xiàn)有技術對某味藥材僅檢測其中一、兩味有效成分是極其片面的，部分有效成分的變化指標無法真正判斷復方中成藥的療效變化。因此，目前通過藥效實驗來對比不同提取方式在某個治療用途方面的優(yōu)劣，是最能體現(xiàn)出提取方式合理與否的方法。
我們通過動物實驗對比不同提取方式治療咳嗽、哮喘、發(fā)熱、炎癥的療效。
發(fā)明人對本發(fā)明的各個藥材的提取方法與藥物優(yōu)效進行了大量系統(tǒng)性的研究實驗，通過把藥材拆分為多組，用不同的方法提取，最后得到了本發(fā)明的提取技術方案，使相同配方的藥材，發(fā)揮出治療目的更明確、療效更顯著的作用。
本發(fā)明提供的一種解熱抗炎的中藥組合物具有以下優(yōu)點：
1、本發(fā)明中藥組合物治療發(fā)熱、炎癥、咳嗽、哮喘作用明顯，具有解熱、抗炎、增強免疫等作用，對風熱感冒具有良好的治療及改善作用。
2、本發(fā)明與對比例比較，存在顯著性差異(P＜0.05)。藥效試驗結果表明，本發(fā)明提供的中藥組合物解熱、抗炎、增強免疫作用優(yōu)于現(xiàn)有技術。
具體實施方式
以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
如無特殊說明，本發(fā)明中的乙醇濃度均為體積百分比。
實施例1：
(1)稱取以下重量份藥材：山芝麻384份、葫蘆茶384份、馬蘭草384份、積雪草384份、狗肝菜256份、籬欄網256份、玉葉金花256份、地膽草256份、金錢草256份、布渣葉256份、甘草256份、崗梅572份；
(2)取金錢草，加50％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的8倍，加熱提取2次，每次2小時，過濾，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得金錢草提取濃縮液，用已預處理的NKA-9型大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:12，上樣速度為2BV/h，70％乙醇洗脫，洗脫速度2BV/h，收集洗脫液4BV，洗脫液減壓濃縮，得金錢草濃縮液；
(3)取葫蘆茶，加50％丙酮提取，丙酮用量為藥材重量份的8倍，30℃提取2次，每次4小時，過濾，回收丙酮，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得葫蘆茶提取濃縮液，用已預處理的D101大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:10，上樣速度3BV/h，30％乙醇進行洗脫，洗脫速度2BV/h，收集洗脫液6BV，洗脫液減壓濃縮，得葫蘆茶濃縮液；
(4)取積雪草，加70％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的10倍，加熱提取3次，每次3小時，過濾，回收乙醇，濾液濃縮至生藥濃度為1.0g/ml，得積雪草提取濃縮液，加4倍水，邊加邊攪拌，冷藏過夜，離心，取上清液，用2mol/L的鹽酸調節(jié)pH值至2.0，4℃冷藏過夜，離心，取上清液，用已預處理的HPD-100大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:10，上樣速度為0.5BV/h，先用2BV水洗脫，再用50％乙醇洗脫，洗脫速度1BV/h，收集乙醇洗脫液8BV，洗脫液減壓濃縮，得積雪草濃縮液；
(5)取山芝麻、狗肝菜、籬欄網、玉葉金花、甘草，加入藥材重量份15倍純化水浸泡1h后，超聲提取3次，超聲功率為150W，時間60min，溫度90℃，過濾，合并濾液，濃縮，得水提濃縮液。
(6)取馬蘭草、地膽草、布渣葉，加入藥材重量份12倍60％乙醇，浸泡40min后，超聲提取2次，超聲功率為150W，時間45min，溫度60℃，過濾，合并濾液，回收乙醇，得醇提濃縮液；
(7)取崗梅，用超微粉碎機粉碎成最細粉；與步驟2)、3)、4)、5)、6)所得濃縮液混合均勻，即得。
實施例2：
(1)稱取以下重量份藥材：山芝麻350g、葫蘆茶350g、馬蘭草350g、積雪草350g、狗肝菜230g、籬欄網230g、玉葉金花230g、地膽草230g、金錢草230g、布渣葉230g、甘草230g、崗梅500g；
(2)取金錢草，加40％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的6倍，加熱提取3次，提取時間分別為2h、2h、1.5h，過濾，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得金錢草提取濃縮液，用已預處理的NKA-9型大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:9，上樣速度為1BV/h，50％乙醇洗脫，洗脫速度3BV/h，收集洗脫液5BV，洗脫液減壓濃縮，得金錢草濃縮液；
(3)取葫蘆茶，加30％丙酮提取，丙酮用量為藥材重量份的6倍，30℃提取3次，提取時間分別為5h、4h、3h，過濾，回收丙酮，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得葫蘆茶提取濃縮液，用已預處理的D101大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:8，上樣速度2BV/h，20％乙醇進行洗脫，洗脫速度1BV/h，收集洗脫液4BV，洗脫液減壓濃縮，得葫蘆茶濃縮液；
(4)取積雪草，加60％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的8倍，加熱提取2次，提取時間分別為3h、2h，過濾，回收乙醇，濾液濃縮至生藥濃度為1.0g/ml，得積雪草提取濃縮液，加3倍水，邊加邊攪拌，冷藏過夜，離心，取上清液，用2mol/L的鹽酸調節(jié)pH值至2.0，4℃冷藏過夜，離心，取上清液，用已預處理的HPD-100大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:8，上樣速度為1.0BV/h，先用2BV水洗脫，再用40％乙醇洗脫，洗脫速度2BV/h，收集乙醇洗脫液6BV，洗脫液減壓濃縮，得積雪草濃縮液；
(5)取山芝麻、狗肝菜、籬欄網、玉葉金花、甘草，加入藥材重量份8倍純化水浸泡2h后，超聲提取2次，超聲功率為150W，時間30min，溫度80℃，過濾，合并濾液，濃縮，得水提濃縮液。
(6)取馬蘭草、地膽草、布渣葉，加入藥材重量份10倍50％乙醇，浸泡30min后，超聲提取3次，超聲功率為150W，時間30min，溫度70℃，過濾，合并濾液，回收乙醇，得醇提濃縮液；
(7)取崗梅，用超微粉碎機粉碎成最細粉；與步驟2)、3)、4)、5)、6)所得濃縮液混合均勻，即得。
實施例3：
(1)稱取以下重量份藥材：山芝麻400份、葫蘆茶400份、馬蘭草400份、積雪草400份、狗肝菜300份、籬欄網300份、玉葉金花300份、300份、金錢草300份、布渣葉300份、甘草300份、崗梅700份；
(2)取金錢草，加60％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的10倍，加熱提取2次，提取時間分別為2h、1.5h，過濾，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得金錢草提取濃縮液，用已預處理的NKA-9型大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:15，上樣速度為3BV/h，80％乙醇洗脫，洗脫速度2BV/h，收集洗脫液3BV，洗脫液減壓濃縮，得金錢草濃縮液；
(3)取葫蘆茶，加60％丙酮提取，丙酮用量為藥材重量份的10倍，30℃提取1次，提取時間為4h，過濾，回收丙酮，濾液濃縮至生藥濃度為0.5g/ml，得葫蘆茶提取濃縮液，用已預處理的D101大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:12，上樣速度4BV/h，50％乙醇進行洗脫，洗脫速度3BV/h，收集洗脫液8BV，洗脫液減壓濃縮，得葫蘆茶濃縮液；
(4)取積雪草，加80％乙醇提取，乙醇用量為藥材重量份的12倍，加熱提取4次，提取時間分別為3h、3h、2h、2h，過濾，回收乙醇，濾液濃縮至生藥濃度為1.0g/ml，得積雪草提取濃縮液，加5倍水，邊加邊攪拌，冷藏過夜，離心，取上清液，用2mol/L的鹽酸調節(jié)pH值至2.0，4℃冷藏過夜，離心，取上清液，用已預處理的HPD-100大孔樹脂吸附，樹脂柱柱徑高比為1:12，上樣速度為0.5BV/h，先用2BV水洗脫，再用60％乙醇洗脫，洗脫速度2BV/h，收集乙醇洗脫液10BV，洗脫液減壓濃縮，得積雪草濃縮液；
(5)取山芝麻、狗肝菜、籬欄網、玉葉金花、甘草，加入藥材重量份20倍純化水浸泡1h后，超聲提取3次，超聲功率為200W，時間90min，溫度100℃，過濾，合并濾液，濃縮，得水提濃縮液。
(6)取馬蘭草、地膽草、布渣葉，加入藥材重量份20倍70％乙醇，浸泡60min后，超聲提取2次，超聲功率為200W，時間60min，溫度80℃，過濾，合并濾液，回收乙醇，得醇提濃縮液；
(7)取崗梅，用超微粉碎機粉碎成最細粉；與步驟2)、3)、4)、5)、6)所得濃縮液混合均勻，即得。
對比例1：
參考復方金錢草清熱顆粒國家食品藥品監(jiān)督管理局國家藥品標準，標準編號為WS-5582(B-0582)-2014Z，其公開的復方金錢草清熱顆粒提取及制備方法，具體如下：
以上十二味藥，崗梅粉碎成細粉；其余山芝麻等十一味加水煎煮二次，每次2小時，煎液濾過，濾液合并，濃縮至相對密度為1.17-1.20(80℃)，與上述細粉和適量糊精混勻，只顆粒，干燥，制成1000g，即得。
對比例2：全水提
(1)稱取以下重量份藥材：山芝麻350g、葫蘆茶350g、馬蘭草350g、積雪草350g、狗肝菜230g、籬欄網230g、玉葉金花230g、地膽草230g、金錢草230g、布渣葉230g、甘草230g、崗梅500g；
(2)加入藥材總重量12倍的純化水，浸泡0.5h后，加熱，提取3次，提取時間分別1.5h、1h、1h，過濾，濾液濃縮至生藥濃度為1.5g/ml，得水提濃縮液。
對比例3：全醇提
(1)稱取以下重量份藥材：山芝麻350g、葫蘆茶350g、馬蘭草350g、積雪草350g、狗肝菜230g、籬欄網230g、玉葉金花230g、地膽草230g、金錢草230g、布渣葉230g、甘草230g、崗梅500g；
(2)加入藥材總重量12倍的60％乙醇，浸泡40min后，加熱提取2次，時間分別為2h、1.5h，溫度60℃，過濾，濾液回收乙醇至濃度為以生藥量計1～2mg/mL，得醇提濃縮液。
風熱感冒藥效實驗
1.實驗材料
1.1藥物與試劑
本發(fā)明實施例1-3、對比例1-3分別制成干膏粉(臨用前用0.5％CMC-Na研磨配制成所需濃度的均勻混懸液,1g干膏粉相當于5.04g生藥)；抗病毒顆粒(四川光大制藥有限公司，批號:150306規(guī)格：12g/袋,成人用量：72g/d)；阿司匹林腸溶片(南京白敬宇制藥有限責任公司，批號：141112，規(guī)格：25mg/片)；氨茶堿(南京白敬宇制藥有限責任公司，批號：150607，規(guī)格：100mg/片)；磷酸可待因(青海制藥廠有限公司，批號：141205，規(guī)格：15mg/片)；云芝胞內糖肽膠囊(南京老山藥業(yè)股份有限公司，批號：150603，規(guī)格：500mg/粒)；磷酸組胺(上海麗珠東風生物技術有限公司，批號：140709，規(guī)格：5g/瓶)；氯化乙酰膽堿(上海試劑三廠，批號：140509，規(guī)格：250g/瓶)；2，4－二硝基苯酚(上海試劑三廠，批號：150805，規(guī)格：25g/瓶)；羧甲基纖維素鈉(CMC-NA，國藥集團化學試劑有限公司，批號：140703，規(guī)格：500g/瓶)。
1.2儀器
T6紫外可見分光光度計(北京普析通用儀器有限責任公司)；8mm打孔器(江蘇麾村醫(yī)教儀器廠)；WM-2型無油氣體壓縮機(天津醫(yī)療器械二廠)。
1.3試驗動物
SPF小鼠，18-22g，雌雄各半，購自廣西醫(yī)科大學實驗動物中心；豚鼠，180-200g，雌雄各半，購自廣西醫(yī)科大學實驗動物中心；兔，體重1.8-2.2kg，雌雄各半，普通級，購自廣西醫(yī)科大學實驗動物中心。
2.方法與結果
2.1對氨水所致小鼠咳嗽的影響
取SPF小鼠90只，按體重隨機分為9組，每組10只，雌雄各半。實施例1-3、對比例1-3組給藥劑量10.4g生藥/kg(0.52g/ml)；陽性對照組1給予可待因12mg/kg(0.6mg/ml)；陽性對照組2給予抗病毒顆粒14.4g/kg(0.72g/ml)；模型對照組給予等體積的0.5％CMC-Na溶液。給藥容積均為0.4ml/20g。各組小鼠每日灌胃給藥1次，連續(xù)5天，于末次給藥后30min將小鼠置于500ml玻璃鐘罩內，通過氣體壓縮機連接玻璃噴霧頭，以400mmHg(1mmHg＝133.2Pa)恒壓將氨水(25％-28％氫氧化銨)均勻的噴入鐘罩內，噴霧5s，觀察和記錄各組小鼠咳嗽潛伏期和2min內咳嗽次數(shù)。將結果進行組間t檢驗，結果見表1。
表1 對氨水所致小鼠咳嗽的影響(x±s，n＝10)
注與模型對照組比較，**p＜0.01；與抗病毒顆粒組比較△△p＜0.01。
表1結果顯示，陽性對照組、實施例1-3、對比例1-3對氨水所致小鼠咳嗽均有較好的治療效果，與模型組比較潛伏期明顯增長、2min內咳嗽次數(shù)明顯減少，具有顯著性差異(p＜0.01)，且實施例1-3效果優(yōu)于對比例1-3。
2.2對氯化乙酰膽堿和磷酸組胺引起的豚鼠哮喘的影響
取幼年豚鼠，放入玻璃鐘罩(容積約為4L)內，通過氣體壓縮機連接玻璃噴霧頭，以400mmHg的壓力噴入2％氯化乙酰膽堿和0.1％磷酸組胺等容積混合液15s，觀察豚鼠的引喘潛伏期(即從噴霧開始到哮喘發(fā)作、呼吸極度困難，直至抽搐跌倒的時間)。一般觀察6min，不跌倒者引喘潛伏期以360s計算。取引喘潛伏期不超過120s的豚鼠72只，按引喘潛伏期隨機分為9組，每組8只，雌雄各半。實施例1-3、對比例1-3組給藥劑量3.4g/kg(0.68g/ml)，陽性對照組1給予氨茶堿40mg/kg(8mg/ml)，陽性對照組2給予抗病毒顆粒4.8g/kg(0.96g/ml)，給藥容積0.5ml/100g。模型對照組給予等體積的0.5％CMC-Na溶液。各組豚鼠每日灌胃給藥1次，連續(xù)5天，于末次給藥后30min再次測定引喘潛伏期，將測定結果進行組間t檢驗，結果見表2。
表2 對氯化乙酰膽堿和磷酸組胺引起的豚鼠哮喘的影響(x±s，n＝8)
注：與模型對照組比較，**p＜0.01
表2結果顯示，陽性對照組、實施例1-3、對比例1-3對氯化乙酰膽堿和磷酸組胺引起的豚鼠哮喘均有較好的治療效果，與模型組比較哮喘潛伏期明顯增長，具有顯著性差異(**p＜0.01)，且實施例1-3效果優(yōu)于對比例1-3。
2.3對內毒素所致家兔發(fā)熱的影響
取健康家兔，每日測體溫2次，連續(xù)3d，使家兔適應測體溫操作。實驗日每小時測1次，連續(xù)3次，以3次體溫平均值作為正常體溫(給藥前體溫)，選擇體溫范圍38.6-39.5℃，且體溫變動小于0.3℃的家兔72只，體重1.8-2.2kg，按體重隨機分為9組，每組8只，雌雄各半。模型對照組、阿司匹林組、抗病毒顆粒組、實施例1-3組、對比例1-3組分別灌胃給予0.5％CMC-Na、阿司匹林50mg/kg(25mg/ml)、抗病毒顆粒3.6g/kg(1.8g/ml)、實施例1-3 3.2g生藥/kg(1.6g/ml)、對比例1-3 3.2g生藥/kg，給藥容積為2ml/kg，各組動物每日給藥1次，連續(xù)灌胃5天。于末次給藥后30min每兔均從耳緣靜脈注射大腸埃希菌內毒素40EU/kg(0.27ml/kg，148EU/ml)，于內毒素攻擊后1、2、3、4及6h各測體溫1次，以給藥前體溫平均值為基數(shù)，計算各測定時間點體溫的升高值(△℃)，以各測定點體溫變化值作組間t檢驗，結果見表3。
表3 對內毒素所致家兔發(fā)熱的解熱作用(x±s，n＝8)
注：與模型對照組比較，**p＜0.01，*p＜0.05
表3結果顯示，實施例1-3、對比例1-3均可顯著抑制耳緣靜脈注射內毒素后所引起的家兔體溫升高(p＜0.01或p＜0.05)，且實施例1-3效果優(yōu)于對比例1-3。
2.4對小鼠特異性體液免疫試驗的影響(血清溶血素法)
2.4.1給藥小鼠隨機分為8組，每組10只，雌雄各半，實施例1-3、對比例1-3給藥劑量為10.4g生藥/kg(0.52g/ml)；陽性對照組給予云芝多糖(0.8g/kg)，模型對照組灌以0.5％CMC-Na。每日給藥1次，連續(xù)給藥7次。給藥體積為0.4ml/20g。
2.4.2免疫給藥3天后，小鼠腹腔注射20％小鼠羊紅細胞(SRBC)0.2ml/只，免疫后第4天摘眼球取血，分離血清，稀釋500倍后供測定。
2.4.3溶血反應反應管內依次加入經稀釋的血清1ml，5％SRBC0.5ml，10％補體1ml，置37℃水浴中保溫30min，然后移至冰浴中終止反應，1500r/min離心10min，取上清液1ml加都氏試劑3ml，搖勻放置10min，于540nm波長比色讀取吸光度。
2.4.4SRBC半溶血值取5％SRBC0.25ml加都氏試劑至4ml，比色讀取吸光度值，即為試驗中所用SRBC半數(shù)溶血時的吸光度值。
樣品管半數(shù)溶血值HC50按下式計算：
HC50＝樣品的吸光度值/SRBC半數(shù)溶血時的吸光度值×500
對小鼠特異性體液免疫實驗的影響試驗結果見表4
表4對小鼠特異性體液免疫實驗的影響(x±s，n＝10)
注：與模型對照組比較，**p＜0.01，*p＜0.05。
表4結果顯示，云芝多糖組、實施例1-3、對比例1-3均可顯著提高SRBS半數(shù)溶血時的吸光度值(HC50)，表明其可以顯著增強小鼠特異性體液免疫(p＜0.01或*p＜0.05)，且實施例1-3效果優(yōu)于對比例1-3。
2.5對二硝基氟苯(DNFB)所致小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應的影響
2.5.1DNFB溶液的配制稱取DNFB50mg，將稱取的藥物置一干凈小瓶中，將預先配制好的丙酮麻油溶液(丙酮－麻油＝1:1)倒入小瓶內，蓋好并用膠布封口，混勻后，用250ul的注射器通過瓶蓋取用即得到新鮮配制1％DNFB5ml。
2.5.2分組及給藥取90只小鼠，按體重隨機分為9組，每組10只，雌雄各半，實施例1-3、對比例1-3組給藥劑量為10.4g生藥/kg(0.52g/ml)；陽性對照組給予云芝多糖0.8g/kg(40mg/ml)；模型對照組和未致敏組(正常對照組)給予0.5％CMC-Na，給藥體積為0.4ml/20g，1次/d，連續(xù)給藥7次。
2.5.3致敏給藥后2天，除未致敏組外，每鼠腹部去毛，范圍約(3×3)cm2大小，并將1％DNFB溶液0.05ml涂抹于上。
2.5.4遲發(fā)型變態(tài)反應的產生與測定致敏后第5天，將1％的DNFB溶液10ul均勻涂抹于小鼠右耳(兩面)進行攻擊，未致敏組同樣涂耳。攻擊后24h，頸椎脫臼處死小鼠，用打孔器取下直徑8mm的耳片，稱重，左右耳片重量之差為腫脹度。結果見表5。
表5對DNFB誘發(fā)的小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應的影響(x±s，n＝10)
注：與模型對照組比較，**p＜0.01，*p＜0.05。
表5結果顯示，陽性對照組、實施例1-3、對比例1-3能顯著提高DNFB所致遲發(fā)型變態(tài)反應小鼠的耳廓腫脹度(p＜0.01或*p＜0.05)，具有增強小鼠特異性細胞免疫的作用，且實施例1-3效果優(yōu)于對比例1-3。
雖然，上文中已經用一般性說明、具體實施方式及試驗，對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎上，可以對之作一些修改或改進，這對本領域技術人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。