本發(fā)明涉及一種具有補血功效的酵素及其制備方法，屬于醫(yī)藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：血虛屬于中醫(yī)病證范疇，是指血液不足、血的營養(yǎng)和滋潤功能減退，以致臟腑經(jīng)絡(luò)、形體器官等失養(yǎng)的病理狀態(tài)，臨床上以面色淡白或萎黃、毛發(fā)不澤、唇舌爪甲淡白、頭暈、視物昏花、怔仲、心悸、健忘、失眠、乏力等為主要表現(xiàn)。血虛證在西醫(yī)病種分布上，不僅見于貧血，還可見于其他疾病，如冠心病、神經(jīng)官能癥、病毒性心肌炎等等?，F(xiàn)代研究證實，血虛可導(dǎo)致骨髓造血功能及外周血紅細胞含量和功能的減退、免疫功能下降、機體清除自由基能力降低，甚至出現(xiàn)多種激素分泌的紊亂、影響生育能力等嚴重后果，危害極大(郭平等.血虛證病理研究進展[J].山東中醫(yī)雜志，2006，25(9)：643～645)。由于血虛的發(fā)病機制復(fù)雜，常伴隨多個系統(tǒng)、器官的病理變化，現(xiàn)有治療手段大多效果不佳，有的藥物還具有明顯的不良反應(yīng)。比如，對于缺鐵性貧血，目前臨床上常給予鐵制劑進行治療；然而，人體攝入的鐵大部分難以得到充分利用，只有少量能被機體吸收并發(fā)揮生理功效，再加上鐵制劑往往具有腸胃道刺激作用，更加阻礙了藥物的吸收，治療貧血效果甚微。因此，提供一種具有顯著的補血功效，且無明顯毒副作用的藥物、保健品或食品，成為了一個亟待解決的問題。酵素指以一種或多種新鮮蔬菜、水果、菌菇、中草藥等為原料，經(jīng)多種有益菌發(fā)酵而產(chǎn)生的，含有豐富的維生素、酶、礦物質(zhì)和次生代謝產(chǎn)物等營養(yǎng)成分的功能性微生物發(fā)酵產(chǎn)品。酵素不但保存了發(fā)酵原料中所固有的營養(yǎng)物質(zhì)，而且可以改善發(fā)酵原料原有的一些不良風(fēng)味，更重要的是在發(fā)酵過程中產(chǎn)生了一些新的功能成分，對人體有效好的保健效果。然而，微生物發(fā)酵是一個復(fù)雜的過程，影響酵素產(chǎn)品質(zhì)量的因素較多，比如，發(fā)酵菌種、接種量等工藝參數(shù)對酵素質(zhì)量的影響尤為明顯，確定適宜的發(fā)酵條件，從而得到一種風(fēng)味良好且功能性成分含量較高的酵素產(chǎn)品對技術(shù)人員來說十分困難。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種具有補血功效的酵素及其制備方法。本發(fā)明提供了一種具有補血功效的酵素，它是由下述重量配比的原料和微生物經(jīng)發(fā)酵制備而成：龍眼肉240～360份、桑椹160～240份、枸杞子160～240份、覆盆子160～240份、酵母菌0.04～0.16份、乳酸菌1.4～5.4份。優(yōu)選的，它是由下述重量配比的原料和微生物經(jīng)發(fā)酵制備而成：龍眼肉300份、桑椹200份、枸杞子200份、覆盆子200份、酵母菌0.1份、乳酸菌3份。進一步優(yōu)選的，所述的乳酸菌選自保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌、青春雙歧桿菌中的一種或幾種。本發(fā)明提供了一種所述酵素的制備方法，包括如下步驟：a、稱取各重量配比的原料，破碎打漿，果膠酶酶解，分離得到酶解液，滅酶，滅菌，冷卻；b、酶解液經(jīng)酵母菌發(fā)酵，分離得到上清液，備用；c、上清液中接種乳酸菌，第二次發(fā)酵，發(fā)酵液備用；d、發(fā)酵液離心，取上清液，即得酵素原液。進一步的，所述果膠酶酶解的條件為：調(diào)節(jié)pH至3～4，在45～50℃條件下，按重量比加入0.2～0.5％的果膠酶，酶解2～4小時。進一步的，所述酵母菌發(fā)酵的條件為：發(fā)酵溫度為20～30℃，發(fā)酵24～72小時。進一步的，所述第二次發(fā)酵的條件為：發(fā)酵溫度為30～35℃，發(fā)酵12～36小時。本發(fā)明提供了所述酵素在制備具有補血功效的藥物、食品或保健品中的用途。進一步的，所述的藥物、保健品或食品具有治療和/或預(yù)防血虛的功效。進一步的，所述的藥物、保健品或食品具有治療和/或預(yù)防失血性血虛、化學(xué)性血虛的功效。本發(fā)明提供了一種具有補血功效的酵素。該酵素原材料配方合理，重用甘溫的龍眼肉為君，補益心脾，養(yǎng)血安神，用于氣血不足，心悸怔忡，健忘失眠，血虛萎黃；臣以桑椹，甘酸性寒，入肝腎經(jīng)，滋陰養(yǎng)血，生津，潤腸。主肝腎不足和血虛精虧的頭暈?zāi)垦?、腰酸耳鳴、須發(fā)早白、失眠多夢、津傷口渴、消渴、腸燥便秘。龍眼肉大補氣血，桑椹滋陰養(yǎng)血，二藥合用，旨在氣血陰陽同補；且一溫一寒，久服既不燥熱、又無虛寒之弊。佐以甘平的枸杞子，滋補肝腎，益精明目；佐以甘酸，溫的覆盆子，益腎，固精，縮尿。四味合用，既補先天之腎，又補后天之脾；既補心、肝之血，又補肝腎之陰，且寒熱平調(diào)，氣血陰陽兼顧，且補益同時兼顧固澀，加強了補益的力量。功效實驗表明，龍眼肉、桑椹、枸杞子和覆盆子四味原料在本發(fā)明特定用量配比下可發(fā)揮協(xié)同增效作用，具有顯著的補血功效。另外，本發(fā)明將上述四種藥食同源的原料制備成具有補血功效的酵素，與原材料相比，口感更好，服用更方便，胞外多糖、乳酸菌等有益成分顯著增加，并且增加了SOD活性，具有更好的保健作用。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術(shù)思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。具體實施方式本發(fā)明具體實施方式中使用的原料、設(shè)備均為已知產(chǎn)品，通過購買市售產(chǎn)品獲得。實施例1本發(fā)明酵素的制備方法稱取龍眼肉150g、桑椹100g、枸杞子100g、覆盆子100g，除去雜質(zhì)，洗凈，加入2～4倍量煮沸滅菌后冷卻的純凈水，浸泡30分鐘，破碎打漿；調(diào)節(jié)pH至3～4，在45～50℃條件下，按重量比加入0.2～0.5％的果膠酶，酶解2～4小時，分離取汁，煮沸10分鐘，滅菌，冷卻至室溫；在上述酶解液中，加入酵母菌0.05g，維持發(fā)酵溫度20～30℃，發(fā)酵24～72小時，分離上清液，備用；在上述上清液中，接種乳酸菌(保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌、嗜酸乳桿菌、青春雙歧桿菌中一種或數(shù)種混合菌)1.5g，維持發(fā)酵溫度30～35℃，發(fā)酵12～36小時，備用；離心，取上清液，灌裝，于4℃條件下保存，即得本發(fā)明的酵素原液。以下通過實驗例證明本發(fā)明的有益效果。實驗例1本發(fā)明原料的補血效果1、試驗用溶液的制備補血方提取物：取龍眼肉30g、桑椹20g、枸杞子20g、覆盆子20g，加2倍體積量水浸泡30分鐘，每次用6倍體積量水，煎煮2次，每次30分鐘，合并煎液，濾過，減壓濃縮每1ml含1g生藥量的濃度。龍眼肉提取物：取龍眼肉90g,同上方法制備，即可。桑椹提取物：取龍眼肉90g,同上方法制備，即可。枸杞子提取物：取枸杞子90g,同上方法制備，即可。覆盆子提取物：取覆盆子90g,同上方法制備，即可。2、對失血性血虛小鼠影響的研究取小鼠(昆明種，一級，雌雄各半，體重18～22g)56只，雌雄各半，隨機分為7組，分別灌服補血方提取物(1.35g/kg)、龍眼肉提取物(1.35g/kg)、桑椹提取物(1.35g/kg)、枸杞子提取物(1.35g/kg)、覆盆子提取物(1.35g/kg)或同體積生理鹽水，連續(xù)7天,于給藥的第7日眼眶后靜脈放血約0.6ml，造成小鼠失血模型，正常對照組不放血。失血后繼續(xù)給藥7天，末次給藥1.5h后，眼眶取血，肝素抗凝，用自動血細胞分析儀測定小鼠RBC、Hb值。測定結(jié)果見表1。表1本發(fā)明組合物對失血性血虛小鼠影響的研究結(jié)果(n＝8)組別RBC(1012/L)Hb(g/L)補血方提取物8.72±0.73**151.05±9.03*龍眼肉提取物8.14±0.75**148.03±9.82桑椹提取物8.25±0.86**147.88±12.86*枸杞子提取物5.33±0.88130.84±11.28覆盆子提取物5.22±0.87137.02±13.08正常對照9.27±0.51**151.23±9.02*模型對照5.28±0.87132.26±17.21注：與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01實驗結(jié)果：小鼠放血造模后出現(xiàn)行動遲緩，喘促，毛蓬豎而少光澤，眼耳、尾蒼白等血虛癥狀；與正常組比較，模型組紅細胞數(shù)量和血紅蛋白含量均顯著下降，提示造模成功。本發(fā)明補血方組小鼠行動敏捷，毛色正常，與正常組小鼠無明顯區(qū)別；與模型組比較，本發(fā)明補血方組紅細胞數(shù)量和血紅蛋白含量均顯著提高，表明本發(fā)明組合物對失血性血虛有明顯的治療作用。另外，與模型組相比，單用枸杞子提取物或覆盆子提取物并不能有效提高小鼠紅細胞數(shù)量或血紅蛋白含量；單用龍眼肉提取物或桑椹提取物，小鼠紅細胞數(shù)量或血紅蛋白含量也低于本發(fā)明補血方組。以上結(jié)果表明，本發(fā)明四味原料發(fā)揮了協(xié)同增效作用，具有顯著的治療失血性血虛的功效。3、對化學(xué)性血虛小鼠影響的研究取小鼠(昆明種，一級，雌雄各半，體重18～22g)56只，雌雄各半，隨機分為7組，同上給藥，于給藥的第3日、第6日皮下注射乙酰苯肼20mg/kg、40mg/kg，從第3日起每日腹腔注射環(huán)磷酰胺40mg/kg連續(xù)5日，于末次給藥1.5h后，眼眶取血，肝素抗凝，用自動血細胞分析儀測定WBC、RBC、Hb、HCT值。取血后處死小鼠，稱定脾臟重量。測定結(jié)果見表2。表2本發(fā)明組合物對化學(xué)性血虛小鼠影響的研究結(jié)果(n＝8)注：與模型對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01實驗結(jié)果：小鼠經(jīng)乙酰苯肼、環(huán)磷酰胺聯(lián)合造模后，第4日開始出現(xiàn)行動遲緩、喘促、毛蓬豎而少光澤，眼、耳、尾蒼白等血虛癥狀，本發(fā)明補血方組小鼠變化不大，行動敏捷，毛色正常，與正常組小鼠無明顯區(qū)別。各實驗組動物均無死亡。模型組與正常組比較，紅細胞數(shù)、白細胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細胞比容和脾臟重量均顯著下降。與模型組比較，本發(fā)明補血方組紅細胞數(shù)、白細胞數(shù)、血紅蛋白含量、紅細胞比容和脾臟重量均顯著提高，表明本發(fā)明有對抗環(huán)磷酰胺所致的骨髓抑制、促進造血機能的作用。另外，與單用枸杞子提取物、覆盆子提取物、龍眼肉提取物或桑椹提取物相比，本發(fā)明補血方組小鼠上述各項指標(biāo)均處于最佳水平，表明四味原料發(fā)揮了協(xié)同增效作用，具有顯著的治療化學(xué)性血虛的功效。實驗例2本發(fā)明酵素的質(zhì)量評價將根據(jù)實施例1制備的本發(fā)明酵素進行質(zhì)量評價，結(jié)果見表3。表3本發(fā)明酵素質(zhì)量評價結(jié)果*注：％指g/100ml。測定結(jié)果表明，本發(fā)明酵素與原料相比，口感更好，服用更方便，胞外多糖、乳酸菌等有益成分顯著增加，并且增加了SOD活性。當(dāng)前第1頁1 2 3