本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及吲哚-3-甲醇、二吲哚甲烷及其衍生物在制備治療紅斑狼瘡藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：盤(pán)狀紅斑狼瘡：主要侵犯皮膚，是紅斑狼瘡中最輕的類型。少數(shù)可有輕度內(nèi)臟損害，少數(shù)病例可轉(zhuǎn)變?yōu)橄到y(tǒng)性紅斑狼瘡。皮膚損害初起時(shí)為一片或數(shù)片鮮紅色斑，綠豆至黃豆大，表面有粘著性鱗屑，以后逐漸擴(kuò)大，呈圓形或不規(guī)則形，邊緣色素明顯加深，略高于中心。中央色淡，可萎縮、低洼，整個(gè)皮損呈盤(pán)狀（故名盤(pán)狀紅斑狼瘡）。損害主要分布于日光照射部位，如面部、耳輪及頭皮，少數(shù)可累及上胸、手背、前臂、口唇及口腔黏膜也可受累。多數(shù)患者皮損無(wú)自覺(jué)癥狀，但很難完全消退。新?lián)p害可逐漸增多或多年不變，損害疏散對(duì)稱分布，也可互相融合成片，面中部的損害可融合成蝶形。盤(pán)狀皮損在日光暴曬或勞累后加重。頭皮上的損害可引起永久性脫發(fā)。陳舊性損害偶爾可發(fā)展成皮膚鱗狀細(xì)胞癌。亞急性皮膚型紅斑狼瘡，臨床上較少見(jiàn)，是一種特殊的中間類型。皮膚損害有兩種，一種是環(huán)狀紅斑型，為單個(gè)或多個(gè)散在的紅斑，呈環(huán)狀、半環(huán)狀或多環(huán)狀，暗紅色邊緣稍水腫隆起，外緣有紅暈，中央消退后留有色素沉著和毛細(xì)血管擴(kuò)張，好發(fā)于面部及軀干；另一個(gè)類型是丘疹鱗屑型，皮損表現(xiàn)類似銀屑病，為紅斑、丘疹及斑片。表面有明顯鱗屑，主要分布于軀干上肢和面部。兩種皮損多數(shù)病例單獨(dú)存在，少數(shù)可同時(shí)存在。皮損常反復(fù)發(fā)作，絕大多數(shù)患者均有內(nèi)臟損害，但嚴(yán)重者很少，主要癥狀為關(guān)節(jié)痛、肌肉痛、反復(fù)低熱，少數(shù)有腎炎、血液系統(tǒng)改變。系統(tǒng)性紅斑狼瘡是紅斑狼瘡各類型中最為嚴(yán)重的一型。絕大多數(shù)患者發(fā)病時(shí)即有多系統(tǒng)損害表現(xiàn)，少數(shù)病人由其他類型的紅斑狼瘡發(fā)展而來(lái)。部分病人還同時(shí)伴有其他的結(jié)締組織病，如硬皮病、皮肌炎、干燥綜合征等，形成各種重疊綜合征。系統(tǒng)性紅斑狼瘡臨床表現(xiàn)多樣，錯(cuò)綜復(fù)雜，且多較嚴(yán)重，可由于狼瘡腎炎、狼瘡腦病及長(zhǎng)期大量使用藥物的副作用而危及患者生命。深部紅斑狼瘡又稱狼瘡性脂膜炎，同樣是中間類型的紅斑狼瘡。皮膚損害為結(jié)節(jié)或斑塊，位于真皮深層或皮下脂肪組織，其大小、數(shù)目不定，表面膚色正?；虻t色，質(zhì)地堅(jiān)實(shí)，無(wú)移動(dòng)性。損害可發(fā)生于任何部位，最常見(jiàn)于頰部、臀部、臂部，其次為小腿和胸部。經(jīng)過(guò)慢性，可持續(xù)數(shù)月至數(shù)年，治愈后遺留皮膚萎縮和凹陷。深部紅斑狼瘡性質(zhì)不穩(wěn)定，可單獨(dú)存在，以后即可轉(zhuǎn)化為盤(pán)狀紅斑狼瘡，也可轉(zhuǎn)化為系統(tǒng)性紅斑狼瘡，或與它們同時(shí)存在。發(fā)明人的研究表明，DIM和I3C可通過(guò)提高細(xì)胞內(nèi)抗自由基的特定基因的表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞主動(dòng)清除自由基的能力，減輕自由基對(duì)細(xì)胞和組織的傷害。故能夠用于排斥反應(yīng)中的藥物使用，可謂其候選藥物分子。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種能夠有效降低紅斑狼瘡的發(fā)病癥狀，可作為治療紅斑狼瘡的候選藥物分子即吲哚-3-甲醇、二吲哚甲烷及其衍生物在制備治療紅斑狼瘡藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的具有結(jié)構(gòu)式(I)的吲哚-3-甲醇及其衍生物在制備紅斑狼瘡藥物中的應(yīng)用，輔料是β-谷甾醇和兒茶素，結(jié)構(gòu)式(I)中，R1、R2、R4、R5、R6、R7各自為H、鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基。優(yōu)選的，所述結(jié)構(gòu)式(I)中，當(dāng)R1、R2、R4、R5、R6、R7均為氫時(shí)，該結(jié)構(gòu)式所示的化合物即為吲哚-3-甲醇；當(dāng)R5為鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基，R1、R2、R4、R6、R7均為氫；當(dāng)R1為鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基，R2、R4、R5、R6、R7均為氫；當(dāng)R2為鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基，R1、R4、R5、R6、R7均為氫；本發(fā)明的具有結(jié)構(gòu)式(II)的二吲哚甲烷及其衍生物在制備治療器官移植排斥藥物中的應(yīng)用，輔料是β-谷甾醇和兒茶素，其中，R1、R2、R4、R5、R6、R7、R1’、R2’、R4’、R5’、R6’、R7’各自為氫或鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基。優(yōu)選的，所述結(jié)構(gòu)式(II)中，當(dāng)R1、R2、R4、R5、R6、R7、R1’、R2’、R4’、R5’、R6’、R7’均為氫時(shí)，此時(shí)該結(jié)構(gòu)式所示的化合物即為二吲哚甲烷；當(dāng)R5和R5’同時(shí)為鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基，R1、R2、R4、R6、R7、R1’、R2’、R4’、R6’、R7’均為氫。當(dāng)R1和R1’同時(shí)為鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基，R2、R4、R5、R6、R7、R2’、R4’、R5’、R6’、R7’均為氫當(dāng)R2和R2’同時(shí)為鹵素取代基、磺酸基或C1-C10烷氧基，R1、R4、R5、R6、R7、R1’、R4’、R5’、R6’、R7’均為氫。本發(fā)明的吲哚-3-甲醇、二吲哚甲烷及其衍生物在制備治療紅斑狼瘡藥物中的應(yīng)用，單一的化合物吲哚-3-甲醇或二吲哚甲烷或其衍生物的一種的使用能夠治療紅斑狼瘡反應(yīng)，那么顯然，上述化合物的各種形式的混配亦能夠達(dá)到一定的治療效果。采用本發(fā)明的吲哚-3-甲醇(I3C)、二吲哚甲烷(DIM)及其衍生物，與多種藥學(xué)上可以接受的載體相結(jié)合，通過(guò)如口腔、靜脈、鼻腔、直腸或其他任何可以輸送有效劑量的活性物質(zhì)的給藥方式，可以制備成各種液體制劑如注射劑、口服液制劑等，也可以制備成各種有效且易于給藥的固體制劑如膠囊劑、栓劑等。其中，用于注射或口服用的液體制劑，其所需的載體可以為無(wú)菌水、無(wú)菌鹽水或者水溶性有機(jī)載體如環(huán)糊精、玉米油、橄欖油、油酸乙酯、二醇類等醫(yī)學(xué)上可接受的載體；固體給藥制劑在制備中可加入固體制劑常用的輔料如賦形劑葡萄糖、乳糖、纖維素等，還可加入潤(rùn)滑劑聚乙二醇、硬脂酸鎂等，以及粘結(jié)劑、矯味劑等固體制劑所需的輔料成分，再通過(guò)混合、制粒等工序成型。上述這些制劑中的活性物質(zhì)的有效量是能使排斥反應(yīng)癥狀明顯降低的量，具有常規(guī)技術(shù)的研究人員將能夠確定本項(xiàng)發(fā)明所提供的試劑的最有效的給藥劑量和時(shí)間考慮給藥方式，藥物代謝，以及其他一些藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)例如藥物分布，清除率等。本發(fā)明提出了吲哚-3-甲醇、二吲哚甲烷及其衍生化合物在制備治療紅斑狼瘡藥物中的應(yīng)用，該藥物可通過(guò)提高細(xì)胞內(nèi)抗自由基的特定基因的表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞主動(dòng)清除自由基的能力，減輕自由基對(duì)細(xì)胞和組織的傷害，能夠起到排斥反應(yīng)阻止效果。同時(shí)，本發(fā)明所使用的小分子藥物易于獲取，價(jià)格低廉，性質(zhì)穩(wěn)定，便于保存和運(yùn)輸，具有廣闊的應(yīng)用前景。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步描述：實(shí)施例1(5-氯吲哚-3-甲醇及5，5’-二氯二吲哚甲烷的制備)將0.86ml磷酰氯緩慢加入到2.9ml預(yù)先冷卻至0℃的二甲基甲酰胺中。將8.6mmol5-氯吲哚(購(gòu)于南京銳馬精細(xì)化工有限公司)溶解于1.0ml的二甲基甲酰胺中，然后緩慢加入前述預(yù)冷的磷酰氯溶液中，所形成的懸浮液在37℃加熱60分鐘，直至澄清的黃色溶液變成淡黃色的糊狀物質(zhì)。然后向此糊狀物質(zhì)中加入1ml的冰水，再緩慢加入10ml含有3.75克KOH的水溶液。將此混合物加熱至煮沸后冷卻，過(guò)濾，水洗，空氣中干燥即可獲得5-氯吲哚-3-乙醛。將1.0克5-氯吲哚-3-乙醛溶于5.0ml甲醇，持續(xù)加入固體硼氫化鈉，直至過(guò)量。然后向反應(yīng)物中加入50ml水，冷卻至0℃，過(guò)濾，避光真空干燥獲得5-氯吲哚-3-甲醇，得率約90％。將1.0克5-氯吲哚-3-甲醇加入到pH為5.5的磷酸緩沖液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，反應(yīng)過(guò)程通過(guò)薄層層析(TLC)加以監(jiān)測(cè)。反應(yīng)產(chǎn)物過(guò)濾，避光真空干燥即獲得5，5’-二氯二吲哚甲烷，得率約85％。實(shí)施例2(5-硝基吲哚-3-甲醇及5，5’-二硝基二吲哚甲烷的制備)5-硝基吲哚可以通過(guò)商業(yè)購(gòu)買獲得(南京銳馬精細(xì)化工有限公司)。將0.92ml磷酰氯緩慢加入到2.9ml預(yù)先冷卻至0℃的二甲基甲酰胺中。將8.2mmol5-硝基吲哚溶解于1.0ml的二甲基甲酰胺中，然后緩慢加入前述預(yù)冷的磷酰氯溶液中，所形成的懸浮液在42℃加熱90分鐘，直至澄清的黃色溶液變成淡黃色的糊狀物質(zhì)。然后向此糊狀物質(zhì)中加入1ml的冰水，再緩慢加入10ml含有3.75克KOH的水溶液。將此混合物加熱至煮沸后冷卻，過(guò)濾，水洗，空氣中干燥即可獲得5-硝基吲哚-3-乙醛。將1.0克5-硝基吲哚-3-乙醛溶于5.0ml甲醇，持續(xù)加入固體硼氫化鈉，直至過(guò)量。然后向反應(yīng)物中加入50ml水，冷卻至0℃，過(guò)濾，避光真空干燥獲得5-硝基吲哚-3-甲醇，得率約87％。將1.0克5-硝基吲哚-3-甲醇加入到pH為5.5的磷酸緩沖液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，反應(yīng)過(guò)程通過(guò)薄層層析(TLC)加以監(jiān)測(cè)。反應(yīng)產(chǎn)物過(guò)濾，避光真空干燥即獲得5，5’-二硝基雙吲哚甲烷，得率約80％。實(shí)施例3(5-戊基吲哚-3-甲醇及5，5’-二戊基-二吲哚甲烷的制備)5-戊基吲哚可以通過(guò)商業(yè)購(gòu)買獲得(南京銳馬精細(xì)化工有限公司)。將0.82ml磷酰氯緩慢加入到2.9ml預(yù)先冷卻至0℃的二甲基甲酰胺中。將9.2mmol5-戊基吲哚溶解于1.0ml的二甲基甲酰胺中，然后緩慢加入前述預(yù)冷的磷酰氯溶液中，所形成的懸浮液在37℃加熱40-60分鐘，直至澄清的黃色溶液變成淡黃色的糊狀物質(zhì)。然后向此糊狀物質(zhì)中加入1ml的冰水，再緩慢加入10ml含有3.75克KOH的水溶液。將此混合物加熱至煮沸后冷卻，過(guò)濾，水洗，空氣中干燥即可獲得5-戊基吲哚-3-乙醛。將1.0克5-戊基吲哚-3-乙醛溶于5.0ml甲醇，持續(xù)加入固體硼氫化鈉，直至過(guò)量。然后向反應(yīng)物中加入50ml水，冷卻至0℃，過(guò)濾，避光真空干燥獲得5-戊基吲哚-3-甲醇，得率約85％。將1.0克5-戊基吲哚-3-甲醇加入到pH為5.5的磷酸緩沖液中，室溫?cái)嚢?0小時(shí)，反應(yīng)過(guò)程通過(guò)薄層層析(TLC)加以監(jiān)測(cè)。反應(yīng)產(chǎn)物過(guò)濾，避光真空干燥即獲得5，5’-二戊基雙吲哚甲烷，得率約70％。實(shí)施例4(N-甲氧基吲哚-3-甲醇及N，N’-二甲氧基-二吲哚甲烷的制備)N-甲氧基吲哚可以通過(guò)商業(yè)購(gòu)買獲得(南京銳馬精細(xì)化工有限公司)。將0.86ml磷酰氯緩慢加入到2.9ml預(yù)先冷卻至0℃的二甲基甲酰胺中。將8.9mmolN-甲氧基吲哚溶解于1.0ml的二甲基甲酰胺中，然后緩慢加入前述預(yù)冷的磷酰氯溶液中，所形成的懸浮液在40℃加熱60-90分鐘，直至澄清的黃色溶液變成淡黃色的糊狀物質(zhì)。然后向此糊狀物質(zhì)中加入1ml的冰水，再緩慢加入10ml含有3.75克KOH的水溶液。將此混合物加熱至煮沸后冷卻，過(guò)濾，水洗，空氣中干燥即可獲得N-甲氧基吲哚-3-乙醛。將1.0克N-甲氧基吲哚-3-乙醛溶于5.0ml甲醇，持續(xù)加入固體硼氫化鈉，直至過(guò)量。然后向反應(yīng)物中加入50ml水，冷卻至0℃，過(guò)濾，避光真空干燥獲得N-甲氧基吲哚-3-甲醇，得率約80％。將1.0克N-甲氧基吲哚-3-甲醇加入到pH為5.5的磷酸緩沖液中，室溫?cái)嚢?2小時(shí)，反應(yīng)過(guò)程通過(guò)薄層層析(TLC)加以監(jiān)測(cè)。反應(yīng)產(chǎn)物過(guò)濾，避光真空干燥即獲得N，N’-二甲氧基雙吲哚甲烷，得率約70％。實(shí)施例5(1-丁基-2-甲基吲哚-3-甲醇及1，1’-二丁基-2，2’-二甲基二吲哚甲烷的制備)1-丁基-2-甲基吲哚可以通過(guò)商業(yè)購(gòu)買獲得(南京銳馬精細(xì)化工有限公司)。將0.82ml磷酰氯緩慢加入到2.9ml預(yù)先冷卻至0℃的二甲基甲酰胺中。將8.2mmol1-丁基-2-甲基吲哚溶解于1.0ml的二甲基甲酰胺中，然后緩慢加入前述預(yù)冷的磷酰氯溶液中，所形成的懸浮液在42℃加熱90分鐘，直至澄清的黃色溶液變成淡黃色的糊狀物質(zhì)。然后向此糊狀物質(zhì)中加入1ml的冰水，再緩慢加入10ml含有3.8克KOH的水溶液。將此混合物加熱至煮沸后冷卻，過(guò)濾，水洗，空氣中干燥即可獲得1-丁基-2-甲基吲哚-3-乙醛。將1.0克1-丁基-2-甲基吲哚-3-乙醛溶于5.0ml甲醇，持續(xù)加入固體硼氫化鈉，直至過(guò)量。然后向反應(yīng)物中加入50ml水，冷卻至0℃，過(guò)濾，避光真空干燥獲得1-丁基-2-甲基吲哚-3-甲醇，得率約85％。將1.0克1-丁基-2-甲基吲哚-3-甲醇加入到pH為5.5的磷酸緩沖液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，反應(yīng)過(guò)程通過(guò)薄層層析(TLC)加以監(jiān)測(cè)。反應(yīng)產(chǎn)物過(guò)濾，避光真空干燥即獲得1，1’-二丁基-2，2’-二甲基雙吲哚甲烷，得率約80％。實(shí)施例6(4-溴吲哚-3-甲醇及4，4’-二溴二吲哚甲烷的制備)將0.86ml磷酰氯緩慢加入到2.9ml預(yù)先冷卻至0℃的二甲基甲酰胺中。將8.6mmol4-溴吲哚(購(gòu)于南京銳馬精細(xì)化工有限公司)溶解于1.0ml的二甲基甲酰胺中，然后緩慢加入前述預(yù)冷的磷酰氯溶液中，所形成的懸浮液在37℃加熱60分鐘，直至澄清的黃色溶液變成淡黃色的糊狀物質(zhì)。然后向此糊狀物質(zhì)中加入1ml的冰水，再緩慢加入10ml含有3.75克KOH的水溶液。將此混合物加熱至煮沸后冷卻，過(guò)濾，水洗，空氣中干燥即可獲得4-溴吲哚-3-乙醛。將1.0克4-溴吲哚-3-乙醛溶于5.0ml甲醇，持續(xù)加入固體硼氫化鈉，直至過(guò)量。然后向反應(yīng)物中加入50ml水，冷卻至0℃，過(guò)濾，避光真空干燥獲得4-溴吲哚-3-甲醇，得率約90％。將1.0克4-溴吲哚-3-甲醇加入到pH為5.5的磷酸緩沖液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，反應(yīng)過(guò)程通過(guò)薄層層析(TLC)加以監(jiān)測(cè)。反應(yīng)產(chǎn)物過(guò)濾，避光真空干燥即獲得4，4’-二溴二吲哚甲烷，得率約85％。材料分別將實(shí)施例1-實(shí)施例6的產(chǎn)品用玉米油溶解配成5.0mg/ml口服儲(chǔ)液備用，每次1袋，每日3次，1個(gè)月為1療程。觀察項(xiàng)目臨床癥狀變化情況觀面部紅斑、口腔潰瘍、關(guān)節(jié)炎、發(fā)熱、血管炎等5項(xiàng)臨床癥狀變化，分別在治療前和治療后各觀察記錄一次。實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)血常規(guī)：白細(xì)胞、血紅蛋白、血小板；血沉；抗核抗體；免疫學(xué)指標(biāo)：免疫球蛋白G(IgG)；補(bǔ)體C3、C4；蛋白尿指標(biāo)：24h尿蛋白定量。分別在治療前和治療后各觀察記錄1次。療效評(píng)定臨床緩解：治療后主癥消失，主要化驗(yàn)指標(biāo)恢復(fù)正常；顯效：治療后主癥好轉(zhuǎn)，主要化驗(yàn)指標(biāo)趨于正常；有效：治療后主癥有所改善，主要化驗(yàn)指標(biāo)數(shù)值有所下降；無(wú)效：未達(dá)到有效標(biāo)準(zhǔn)。治療結(jié)果60例紅斑性狼瘡患者分成6組分別采用實(shí)施例1-6的產(chǎn)品治療2-3個(gè)療程，臨床緩解47例，顯效4例、有效7例，無(wú)效2例?？傆行蕿?6.9％。治療情況如下：藥物臨床緩解顯效有效無(wú)效實(shí)施例18110實(shí)施例29100實(shí)施例38020實(shí)施例47111實(shí)施例5811實(shí)施例67021本發(fā)明產(chǎn)品在治療紅斑狼瘡具有顯著療效，能夠降低紅斑狼瘡面積。因此，吲哚-3-甲醇、二吲哚甲烷及其衍生化合物在制備治療紅斑狼瘡藥物中的新的應(yīng)用。以上所述僅為本發(fā)明的一實(shí)施例，并不限制本發(fā)明，凡采用等同替換或等效變換的方式所獲得的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3