本發(fā)明屬于美容護膚技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品及其制備方法。
背景技術(shù)：
皮膚被細分為表淺較薄的表皮、含更多纖維的真皮及皮下組織。表皮由覆蓋于胚胎表面的外胚層分化而來，由多層鱗狀上皮構(gòu)成，從厚厚的頭皮到全身最薄的眼瞼皮膚，其厚度各有所不同。表皮又可以細分為角朊細胞、樹枝狀細胞和麥克爾細胞；真皮主要由中胚層發(fā)育而來，位于表皮之下，與表皮之間靠一層基底膜帶分開。真皮主要由結(jié)締組織構(gòu)成，也包括了血管、神經(jīng)、肌肉、淋巴、汗腺和皮脂腺，淺在較薄的被稱為乳頭層，而深層較厚的則被稱為網(wǎng)狀層。真皮的主要成分是膠原，膠原纖維在乳頭層含量很少且排列不規(guī)則，但在網(wǎng)絡層則呈束狀平行于表面排列；皮下組織或稱脂膜，是體表的淺筋膜，由疏松結(jié)締組織和脂肪組織構(gòu)成。真皮向皮下組織內(nèi)伸出許多大小不等的膠原纖維束，使皮膚與皮下組織牢固連接，兩者之間無明顯界限。
干細胞是一類具有自我復制能力的多潛能細胞。在一定條件下，它可以分化成多種功能細胞。根據(jù)干細胞所處的發(fā)育階段分為胚胎干細胞和成體干細胞。根據(jù)干細胞的發(fā)育潛能分為三類：全能干細胞、多能干細胞和單能干細胞(專能干細胞)。干細胞是一種未充分分化，尚不成熟的細胞，具有再生各種組織器官和人體的潛在功能，醫(yī)學界稱為“萬用細胞”。有科學研究表明，有兩種成體干細胞被確認存在于人體皮膚，一種是表皮干細胞，它存在于表皮的基底層，它的主要功能是補充表皮細胞維持皮膚細胞的平衡以及修復受損組織；另一種是存在于真皮乳突真皮干細胞，具有較強的自我更新的能力，能誘導毛囊的形成并遷移進入跨毛囊真皮層，它們增殖和分化成纖維母細胞(纖維母細胞能分泌細胞外基質(zhì)的成分)，主要功能是讓皮膚充滿彈性，減淡皺紋。然而隨著年齡的增長，皮膚更新變得緩慢，干細胞的活性及數(shù)量逐漸降低；紫外線會在皮膚上產(chǎn)生毒素和活性氧，這些均會損害最敏感的干細胞；同時，低溫、低濕度和環(huán)境的突變損害皮膚的屏障功能。上述內(nèi)在或外在的環(huán)境因素都會影響干細胞的功能。
現(xiàn)有的美容產(chǎn)品比較高端的是干細胞原液，但都是植物干細胞原液屬于異源因子和蛋白，容易過敏。人源干細胞原液最近幾年也相繼出現(xiàn)，但是基本是成人脂肪來源或者神經(jīng)干細胞原液，因為都是成體干細胞，干性不足，分化潛能不足。并且干細胞提取液作用原理決定了其作用于皮膚細胞的代謝周期，見效比較慢。還有就是干細胞原液中的細胞生長因子的半衰期比較短，要使其能夠持續(xù)的發(fā)揮作用，必須要有一個保存細胞生長因子且能保持其活性的介質(zhì)存在。還有一種護膚產(chǎn)品是膠原蛋白，但是現(xiàn)有的膠原蛋白大部分是動物源性的，容易感染，過敏，且容易降解等弊端，同時膠原蛋白是消耗性的，對于皮膚的支撐作用是短期的，無持續(xù)效果。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種干細胞活性成分的活性延續(xù)期長、不易過敏、不易降解且人干細胞活性成分與類人膠原蛋白產(chǎn)生協(xié)同作用的生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品。
本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的采用的技術(shù)方案是：一種生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品，含有人干細胞活性成分及類人膠原蛋白，所述人干細胞活性成分含量為0.001-49％，所述類人膠原蛋白含量為0.001-49％；
進一步地，所述人干細胞活性成分的制備方法如下：
(1)制備人原代干細胞；
(2)對人原代干細胞進行培養(yǎng)，每1-5天更換一次細胞培養(yǎng)液；
(3)待人原代干細胞生長到60-80％融合度時，消化傳代，按1:3-1:10比例進行傳代培養(yǎng)；
(4)低速離心收集傳代后的細胞培養(yǎng)液，采用超濾濃縮、冷凍干燥或萃取的方式得到干細胞活性成分；
進一步地，所述人原代干細胞為臍帶血干細胞、臍帶間充質(zhì)干細胞、人羊膜間充質(zhì)干細胞、骨髓間充質(zhì)干細胞、脂肪干細胞、神經(jīng)干細胞、胚胎干細胞中的任一種或幾種；
進一步地，所述人干細胞活性成分含量為0.001-20％，所述類人膠原蛋白含量為0.005-30％；
進一步地，所述生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品含有如下按質(zhì)量百分比計的成分：
人干細胞活性成分含量為0.001％-5％
類人膠原蛋白含量為0.005％-10％
甘油三(乙基己酸)酯5.0-9.0％
棕櫚酸異丙酯3.5-5.5％
PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯4.0-6.0％
甘油硬脂酸酯2.0-5.0％
羥乙基纖維素1.0-3.0％
透明質(zhì)酸鈉1.0-3.0％
卡波姆0.8-2.5％
三乙醇胺0.5-2.0％
EDTA二鈉0.3-1.5％
甘油10-20％
三乙氧基辛基硅烷4.0-6.0％
生育酚乙酸酯2.0-5.0％
羥苯甲酯0.5-1.0％
余量為水；
進一步地，所述人干細胞活性成分含量為0.003％-0.03％、類人膠原蛋白含量為0.006％-0.06％；
進一步地，所屬生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品的形態(tài)為膏體、乳液、啫喱或膠體。
本發(fā)明還公開了上述生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品的制備方法，具體步驟如下：在不超過50℃的溫度下，添加進入按重量百分比計算得到的人干細胞活性成分及類人膠原蛋白得到所述生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品；
進一步地，具體步驟如下：
(1)將按重量百分比計算得到的EDTA二鈉、加入水中攪拌，同時加熱升溫至70-90℃后保溫0.5-1小時；
(2)向步驟(1)得到的混合物中依次加入按重量百分比計算得到的透明質(zhì)酸鈉、卡波姆、甘油三(乙基己酸)酯、棕櫚酸異丙酯、PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、羥乙基纖維素并攪拌至完全溶解；
(3)降溫至50-60℃時加入甘油、三乙氧基辛基硅烷、生育酚乙酸酯、羥苯甲酯并攪拌至完全溶解；
(4)降溫至40-50℃時加入按重量百分比計算得到的人干細胞活性成分及類人膠原蛋白并攪拌至完全溶解后，加入按重量百分比計算得到的三乙醇胺并攪拌1-3小時得到生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品；
進一步地，步驟(4)降溫溫度為40-45℃。
本發(fā)明所使用的人干細胞活性成分，主要成分是臍帶MSCs旁分泌的細胞因子，包括FGF、EGF、VEGF、PDGF等在內(nèi)的100多種有效活性成分，還包括調(diào)控細胞生長周期的調(diào)控蛋白質(zhì)，能作用于皮膚細胞，促進成纖維細胞分泌更多自體膠原蛋白。本發(fā)明所使用的類人膠原蛋白購自美國Novus Biologicals公司。
綜上所述，由于采用了上述技術(shù)方案，本發(fā)明的有益效果是：
(1)選擇類人膠原蛋白作為干細胞原液的補充，類人膠原蛋白不同于普通的膠原蛋白，是人源性的，不會有動物源性的膠原蛋白的危害。類人膠原蛋白作為細胞外基質(zhì)的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)，如支架和“彈簧”支撐著皮膚，填充在皮膚基質(zhì)層之間，從而使皮膚豐滿、皺紋舒展，同時提高皮膚密度，產(chǎn)生張力，增加皮膚彈性，使用起始就能使皮膚光滑、年輕、有彈性。同時干細胞提取液的細胞因子和蛋白都有效成分持續(xù)的作用于皮膚細胞的代謝周期，根本上保證內(nèi)源膠原蛋白的量，保證了美容養(yǎng)顏產(chǎn)品的持久有效性。故而此款生物養(yǎng)顏美容產(chǎn)品對急于見效和要求持久改善的顧客都適用；
(2)類人膠原蛋白可以作為生長因子的介質(zhì)，延長細胞生長因子的活性期，使其能持續(xù)的作用于皮膚細胞的代謝周期；
(3)類人膠原蛋白和干細胞原液之間是協(xié)同作用，類人膠原蛋白為細胞生長因子的介質(zhì)，作為生長因子的存在環(huán)境，延長細胞生長因子的活性。同時細胞生長因子不斷作用于皮膚細胞，促使成纖維細胞分泌更多的膠原蛋白。兩者相輔相成，達到最優(yōu)的美膚護膚的效果。
具體實施方式
下面將結(jié)合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述?；诒景l(fā)明中的實施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。
實施例1
一種生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品，按重量份比包含以下組份：
人干細胞活性成分含量為0.005％
類人膠原蛋白含量為0.01％
甘油三(乙基己酸)酯9.0％
棕櫚酸異丙酯3.5％
PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯6.0％
甘油硬脂酸酯2.0％
羥乙基纖維素3.0％
透明質(zhì)酸鈉1.0％
卡波姆2.5％
三乙醇胺0.5％
EDTA二鈉1.5％
甘油10％
三乙氧基辛基硅烷6.0％
生育酚乙酸酯2.0％
羥苯甲酯0.5％
余量為水。
其制備方法包括以下步驟：
(1)將按重量百分比計算得到的EDTA二鈉、加入水中攪拌，同時加熱升溫至70℃后保溫1小時；
(2)向步驟(1)得到的混合物中依次加入按重量百分比計算得到的透明質(zhì)酸鈉、卡波姆、甘油三(乙基己酸)酯、棕櫚酸異丙酯、PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、羥乙基纖維素并攪拌至完全溶解；
(3)降溫至50℃時加入甘油、三乙氧基辛基硅烷、生育酚乙酸酯、羥苯甲酯并攪拌至完全溶解；
(4)降溫至40℃時加入按重量百分比計算得到的人干細胞活性成分及類人膠原蛋白并攪拌至完全溶解后，加入按重量百分比計算得到的三乙醇胺并攪拌3小時得到生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品。
實施例2
一種生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品，按重量份比包含以下組份：
人干細胞活性成分含量為0.01％
類人膠原蛋白含量為0.02％
甘油三(乙基己酸)酯5.0％
棕櫚酸異丙酯5.5％
PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯4.0％
甘油硬脂酸酯5.0％
羥乙基纖維素1.0％
透明質(zhì)酸鈉3.0％
卡波姆0.8％
三乙醇胺1.0％
EDTA二鈉1.5％
甘油15％
三乙氧基辛基硅烷6.0％
生育酚乙酸酯5.0％
羥苯甲酯0.5％
余量為水。
其制備方法包括以下步驟：
(1)將按重量百分比計算得到的EDTA二鈉、加入水中攪拌，同時加熱升溫至90℃后保溫0.5小時；
(2)向步驟(1)得到的混合物中依次加入按重量百分比計算得到的透明質(zhì)酸鈉、卡波姆、甘油三(乙基己酸)酯、棕櫚酸異丙酯、PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、羥乙基纖維素并攪拌至完全溶解；
(3)降溫至60℃時加入甘油、三乙氧基辛基硅烷、生育酚乙酸酯、羥苯甲酯并攪拌至完全溶解；
(4)降溫至50℃時加入按重量百分比計算得到的人干細胞活性成分及類人膠原蛋白并攪拌至完全溶解后，加入按重量百分比計算得到的三乙醇胺并攪拌1小時得到生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品。
對比例1
一種生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品，按重量份比包含以下組份：
人干細胞活性成分含量為0.02％
甘油三(乙基己酸)酯5.0％
棕櫚酸異丙酯5.5％
PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯4.0％
甘油硬脂酸酯5.0％
羥乙基纖維素1.0％
透明質(zhì)酸鈉3.0％
卡波姆0.8％
三乙醇胺1.0％
EDTA二鈉1.5％
甘油15％
三乙氧基辛基硅烷6.0％
生育酚乙酸酯5.0％
羥苯甲酯0.5％
余量為水。
其制備方法包括以下步驟：
(1)將按重量百分比計算得到的EDTA二鈉、加入水中攪拌，同時加熱升溫至90℃后保溫0.5小時；
(2)向步驟(1)得到的混合物中依次加入按重量百分比計算得到的透明質(zhì)酸鈉、卡波姆、甘油三(乙基己酸)酯、棕櫚酸異丙酯、PEG-20失水山梨醇異硬脂酸酯、甘油硬脂酸酯、羥乙基纖維素并攪拌至完全溶解；
(3)降溫至60℃時加入甘油、三乙氧基辛基硅烷、生育酚乙酸酯、羥苯甲酯并攪拌至完全溶解；
(4)降溫至50℃時加入按重量百分比計算得到的人干細胞活性成分并攪拌至完全溶解后，加入按重量百分比計算得到的三乙醇胺并攪拌1小時得到生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品。
實施例1-2的生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品與對比例1的生物護膚養(yǎng)顏產(chǎn)品的各項性能對比試驗如下表。
表1各項性能對比試驗
上述實施例只是為了說明本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思及特點，其目的是在于讓本領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員能夠了解本發(fā)明的內(nèi)容并據(jù)以實施，并不能以此限制本發(fā)明的保護范圍。凡是根據(jù)本發(fā)明內(nèi)容的實質(zhì)所作出的等效的變化或修飾，都應涵蓋在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。