本發(fā)明涉及醫(yī)用止血輔料
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體而言涉及一種殼聚糖止血粉及其制備方法及應用。
背景技術(shù)：
：止血是醫(yī)療救治的一個重要步驟，病人肝、脾等組織器官的損傷和手術(shù)都需要充分止血、日常生活中出現(xiàn)突發(fā)性創(chuàng)傷時，也需進行快速止血，在惡劣的戰(zhàn)爭環(huán)境和復雜突發(fā)事件中的創(chuàng)傷急救治療，實現(xiàn)快速有效的止血尤為重要。目前市場上的止血材料主要有纖維蛋白膠、膠原蛋白(如明膠海綿)、多微孔類無機材料等。但這些材料也具有一些缺點，如：成本高，組織粘附性差，止血效果有限；而多孔材料在吸收血液水分后會釋放大量熱能，進而導致傷口炎癥。此外，絕大多數(shù)的止血材料無法在創(chuàng)面降解，拆除時易產(chǎn)生二次創(chuàng)傷或瘢痕。粉體止血材料，不受創(chuàng)面大小及部位的限制，有其獨到的優(yōu)點。美國的阿利斯泰止血粉，原料是改性馬鈴薯淀粉交聯(lián)多孔微粒。其多孔性和高比表面的特性，能夠快速吸收血液中的水分，濃縮凝血因子和血小板，促進血液的凝結(jié)，具有優(yōu)異的止血效果。并且，由于改性淀粉是生物相容的可降解材料，該止血粉在體內(nèi)能夠被快速的降解為人體可吸收的多糖，不需要另外取出，因此該止血粉也被廣泛的用于體內(nèi)的止血。但是這種止血粉也有其缺點。由于其粒徑小，質(zhì)量輕，它的止血原理是快速吸水，濃縮凝血因子和血小板，產(chǎn)生凝血。本身并不能和出血部位的組織產(chǎn)生相互作用。因此，此類止血材料只能使用于創(chuàng)面滲血的狀況。需要有外力壓迫止血粉在創(chuàng)面上，才能保證止血效果。并且對于流動性的出血，止血效果欠佳。此外淀粉容易變性，團聚，不利于長期保存。殼聚糖(CS)是從蝦/蟹等甲殼類動物的外殼中提取的幾丁質(zhì)(chitin)經(jīng)脫乙?；蠖?。殼聚糖已被證實具有無毒性、無刺激性、無免疫源性、無熱源反應、不溶血、無致突變效應、可自然降解及良好的組織相容性等特點，故廣泛用于制造人工皮膚、可吸收縫合線、防粘連劑和藥物載體等。1983年MaletteWG等發(fā)表了關(guān)于殼聚糖止血功能的研究，國內(nèi)外學者開始嘗試用殼聚糖開發(fā)研制止血敷料。2002年11月，HemCon止血繃帶獲美國FDA(FoodandDrugAdministration)認可。以殼聚糖為主要成分的止血繃帶具有良好的生物相容性和生物可降解性，具有抗菌、消炎、止血、減少創(chuàng)面滲出和促進創(chuàng)傷組織再生、修復、愈合的作用。近年來，國內(nèi)也陸續(xù)報道對殼聚糖止血敷料的研究，例如有幾丁糖/海藻酸敷料、幾丁糖膜、殼聚糖無紡布敷料等，在動物的皮膚切割傷止血實驗中表現(xiàn)出一定的止血效果。如，崔永紅等制備了一種明膠-聚乙烯醇-殼聚糖凍干膜，發(fā)現(xiàn)這種材料對動物的創(chuàng)傷滲血具有很好的止血效果，膜止血時間短，出血量少，止血效果可靠(牙體牙髓牙周病學雜志，2005，15(3)：148－151)。但是殼聚糖材料的親水性比較差，溶解性也比較差，因此在止血材料中用量不能太高，從而影響了其止血效果。以殼聚糖為基材的粉體材料，也有較多的報道。一般均需要采用和其它材料復合，并使用交聯(lián)劑，固定殼聚糖粉體的形狀和大小。為保證所得微粒的大小均一，一般需要采用反向乳液的方法制備殼聚糖止血粉。如中國專利CN101574538A公開了一種復方粉體的止血材料。采用交聯(lián)微孔淀粉，殼聚糖和海藻酸的復合物，采用乳化，凍干，粉碎，交聯(lián)，再凍干的工藝制備止血粉體材料。原料多，工藝復雜。中國專利CN100367933C公開了一種可生物降解的止血粉，其主要原料為羧甲基殼聚糖，海藻酸鈉和氯化鈣。采用反向乳液法制備，以液體石蠟為分散相，制備止血粉。制備過程，使用較多的有機相，且后處理過程復雜，容易殘留有機溶劑。中國專利CN105056283A公開了一種羧甲基殼聚糖和羧甲基纖維素鈉復合止血粉的制備方法。需要將上述兩種物質(zhì)加入到淀粉溶液中，進行乳化交聯(lián)，干燥得到止血粉。上述技術(shù)均需要采用繁瑣、費時的反相乳液法制備殼聚糖止血粉，并且需要加入不同的交聯(lián)劑對止血粉進行交聯(lián)固化。而《中國組織工程研究》2012年第16期16卷(2917頁)報道了一種采用噴霧干燥法制備殼聚糖-明膠微米顆粒的方法。該方法操作簡單，產(chǎn)率高，環(huán)境污染小。所得殼聚糖顆?？梢杂米餮鄄拷o藥的藥物載體。因此發(fā)展一種制備過程簡單，可以方便快速的制備殼聚糖止血粉的技術(shù)，具有巨大的市場前景。技術(shù)實現(xiàn)要素：針對現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明目的是，旨在提供一種殼聚糖止血材料及其制備方法，采用這種方法，可以方便的制備殼聚糖粉體材料。該材料具有多種凝血機制，顯示了優(yōu)異的凝血性能，并且該止血粉具有一定的自身抗菌作用，降低了傷口并發(fā)炎癥的風險，顯著的縮短了傷口的愈合時間。本發(fā)明的制備方法簡單快捷，操作簡單，收率高。本發(fā)明技術(shù)方案是，一種全降解殼聚糖止血粉，所述的止血粉為殼聚糖，或者殼聚糖或/和其它物質(zhì)組成；其中殼聚糖為止血粉的主要成分，其它成分為聚乙烯醇(PVP)，透明質(zhì)酸,氧化淀粉中的一種或幾種；殼聚糖止血粉的粒徑在20微米到2毫米(95wt％以上的止血粉均分布在此粒徑的范圍內(nèi))之間。是一種多孔微球。所述的止血粉中的殼聚糖，包括殼聚糖，羧甲基殼聚糖。在止血粉中的含量為70-100wt％，殼聚糖的分子量為50000-1000000，脫乙酰度為50％-100％；羧甲基殼聚糖：分子量為50000-1000000，脫乙酰度為50％-100％，羧基取代度為0.5-1.5之間；其它組分是聚乙烯醇(PVP)，聚乙烯醇的分子量為5000-200000,或者是透明質(zhì)酸分子量為5000-200000.或者是氧化淀粉，分子量10000-200000.上述組分在止血粉中的含量為0-30wt％。所述的殼聚糖止血粉，采用噴霧干燥法制備(見示意圖1),步驟如下：配制殼聚糖或者羧甲基殼聚糖溶液，其質(zhì)量分數(shù)為5-10g/L,溶液pH值為4.0-7.4之間；采用溶劑為蒸餾水或者醋酸溶液(質(zhì)量分數(shù)10g/L)。將配置的殼聚糖溶液進行噴霧干燥，噴嘴口徑為0.2-2mm，入口溫度160-180℃，出口溫度100-105℃，噴料速度為3-10mL/min,壓縮空氣速度為5-12L/min。收集粉末產(chǎn)品。所述的多組分殼聚糖止血粉，其制備方法特征如下：配置殼聚糖或者羧甲基殼聚糖溶液，其質(zhì)量分數(shù)為5-10g/L,溶液pH值為4.0-7.4之間；采用溶劑為蒸餾水或者醋酸溶液(質(zhì)量分數(shù)10g/L)；配置聚乙烯醇水溶液，其質(zhì)量分數(shù)為1-5g/L；透明質(zhì)酸溶液，其質(zhì)量分數(shù)為0.5-5g/L；氧化淀粉水溶液，其質(zhì)量分數(shù)為1-5g/L；將上述的殼聚糖組分和其它組分中的一種或多種，按照不同比例混合，配置成混合溶液，其中殼聚糖比例為70-99.5wt％(重量百分比)，其它組分為0.5-30wt％。將所得溶液行噴霧干燥，噴嘴口徑為0.2-2mm，入口溫度160-180℃，出口溫度100-105℃，噴料速度為3-10mL/min,壓縮空氣速度為5-12L/min；收集粉末產(chǎn)品。所述的粉末材料，需要進行表面酸性改性，才能具有良好止血性能的。所述的表面酸性改性，及將酸性溶液進行霧化，噴灑在所得分體材料的表面，使得所得粉體材料的pH值為4.0-5.5之間。用來改性的酸為冰醋酸、乙酸、乳酸、檸檬酸、乙醇酸中的一種或多種。得到的止血粉，是一種多孔狀的止血粉，在于該止血粉可以裝載在止血粉容器中，用于微創(chuàng)手術(shù)的止血；也可用于皮膚損傷等難愈合創(chuàng)面的止血和修復再生。所得殼聚糖止血粉，其止血機制包括如下幾個因素：(1)所得止血粉為多孔材料，當其接觸血液后，高的比表面使其能夠快速吸收血液中的水分，使血液快速凝結(jié)；(2)殼聚糖止血粉中的殼聚糖帶有正電荷，可以和血液中的血小板結(jié)合，促使血小板聚集，促進紅細胞，凝血因子在傷口的聚集，促進凝血；(3)殼聚糖止血粉遇血液，部分溶解，在創(chuàng)面形成薄膜，與組織黏連，封閉創(chuàng)面止血。本發(fā)明提出的殼聚糖止血粉，包括單一組分的殼聚糖止血和多組分的殼聚糖復合止血粉，均采用噴霧干燥的方法制備.將上述過程制備的粉體材料表面進行酸性改性。使用醫(yī)用霧化器將酸性溶液霧化，將霧化后的酸性溶液噴灑在粉體材料表面?？刂品垠w材料的pH值為4-5.5之間，獲得酸性改性的止血材料。此種止血材料是一種多孔狀的止血粉，可以在裝載在止血粉容器中，用于微創(chuàng)手術(shù)的止血；也可用于皮膚損傷等難愈合創(chuàng)面的止血和修復再生。有益效果，本發(fā)明的一種殼聚糖止血材料及其制備方法，采用這種方法，可以方便的制備殼聚糖粉體材料，且是一種多孔微球。具有多種凝血機制，且該止血粉具有一定的自身抗菌作用，降低了傷口并發(fā)炎癥的風險，顯著的縮短了傷口的愈合時間。本發(fā)明的制備方法簡單快捷，操作簡單，收率高。附圖說明圖1本發(fā)明所采用的噴霧干燥設(shè)備的工作機理圖；圖2為本發(fā)明采用噴霧干燥技術(shù)獲得殼聚糖止血粉的燒面電鏡圖，其中A、B、C三圖分別表示三種不同的放大比例。具體實施方式為了更好的了解本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容，通過具體實施例并配合附圖加以說明。本發(fā)明所制備的殼聚糖止血粉為多孔微球，其中殼聚糖的含量為70-100％，圖2是所得殼聚糖多空微球的掃描電鏡圖。我們采用采用噴霧干燥法制備該多孔微球。圖1是噴霧干燥設(shè)備示意圖。空氣過濾器1、空氣加熱器2、熱風分配器3、塔頂4、干燥室5、噴槍6、下料閥7、隔膜泵8、旋風分離器9、風機10、濕法除塵器11、電器柜12、受粉箱13。配好的殼聚糖溶液或者殼聚糖混合溶液從加料倉加入隔膜泵8，經(jīng)隔膜泵送入干燥室5干燥成粒后，進入下料閥7然后經(jīng)分離后，得到殼聚糖粉體，再進行表面酸性改性、消毒后，即可得到殼聚糖止血粉。下面舉不同的實施例對本發(fā)明的殼聚糖止血粉的成分和制備方法進行說明。以下實施例，進一步的詳細說明本發(fā)明的具體技術(shù)方案，以便于本領(lǐng)域的技術(shù)人員進一步的理解本發(fā)明，而不構(gòu)成對其權(quán)利的限制。實施例1，一種可吸收單一組分殼聚糖血粉的制備方法如下：(1)秤取7克殼聚糖，溶解于1L，10g/L的醋酸溶液中，配置成7g/L的殼聚糖溶液。溶液pH值為4.5。(2)將上述配置的殼聚糖溶液進行噴霧干燥，采用瑞士buchi公司的B-290噴霧干燥儀，噴嘴口徑為0.5mm，入口溫度180℃，出口溫度105℃，噴料速度為5mL/min,壓縮空氣速度為10L/min。收集粉末產(chǎn)品，產(chǎn)率80％(3)配置1％檸檬酸溶液，在醫(yī)用霧化器霧化后，均勻噴灑在將上述粉末產(chǎn)品表面。取0.1g改性后的粉末樣品，分散于5mL的蒸餾水中，測定pH值。pH值在4-5.5之間，改性完成。將止血份消毒后保存。實施例2，一種可吸收單一組分殼聚糖血粉的制備方法如下：(1)秤取6克羧甲基殼聚糖，溶解于1L，1g/L的醋酸溶液中，配置成6g/L的殼聚糖溶液。溶液pH值為5.0。(2)將上述配置的羧甲基殼聚糖溶液進行噴霧干燥，采用瑞士buchi公司的B-290噴霧干燥儀，噴嘴口徑為1mm，入口溫度160℃，出口溫度105℃，噴料速度為7mL/min,壓縮空氣速度為12L/min。收集粉末產(chǎn)品，產(chǎn)率82％(3)配置1％檸檬酸溶液，在醫(yī)用霧化器霧化后，均勻噴灑在將上述粉末產(chǎn)品表面。取0.1g改性后的粉末樣品，分散于5mL的蒸餾水中，測定pH值。pH值在4-5.5之間，改性完成。將止血份消毒后保存。實施例3，一種可吸收多組分殼聚糖血粉的制備方法如下：(1)秤取7克殼聚糖，溶解于1L，10g/L的醋酸溶液中，配置成7g/L的殼聚糖溶液。溶液pH值為4.5。(2)配置聚乙烯醇水溶液，其質(zhì)量分數(shù)為1g/L。將上述的殼聚糖溶液和聚乙烯醇水溶液配置成混合溶液，體積比：殼聚糖溶液：聚乙烯醇溶液為1:1(體積比)。(3)將上述配置的混合殼聚糖溶液進行噴霧干燥，采用瑞士buchi公司的B-290噴霧干燥儀，噴嘴口徑為1mm，入口溫度160℃，出口溫度105℃，噴料速度為10mL/min,壓縮空氣速度為12L/min。收集粉末產(chǎn)品，產(chǎn)率90％(4)配置1％乳酸溶液，在醫(yī)用霧化器霧化后，均勻噴灑在將上述粉末產(chǎn)品表面。取0.1g改性后的粉末樣品，分散于5mL的蒸餾水中，測定pH值。pH值在4-5.5之間，改性完成。將止血份消毒后保存。本發(fā)明是根據(jù)特定實施例進行描述的，但本領(lǐng)域的技術(shù)人員應明白在不脫離本發(fā)明范圍時，可進行各種變化或等同替換。此外，為適應本發(fā)明技術(shù)的特定場合或材料，可對本發(fā)明進行諸多修改而不脫離其保護范圍。因此，本發(fā)明并不限于在此公開的特定實施例，而包括所有落入權(quán)利要求保護范圍的實施例。止血粉的吸水性研究：因為粉狀止血粉止血的機理之一就是其快速的吸水性。因此我們將上述實施例中所得的止血粉進行吸水性測試。稱取0.1g樣品(W0)加入10.0g左右蒸餾水(W1)中，待復合止血粉溶脹10min左右.通過過濾的方法收集剩余的水分(W2).濾紙(0.25微米孔徑)預先用蒸餾水飽和浸潤。取商用止血粉Arista為對照組。吸水率＝(W1-W2)/W0X100％表1實施例及對照組的吸水率實驗結(jié)果上述結(jié)果表明，所得止血粉具有良好的吸水性，但是其吸水能力低于商用止血粉Arista。上述樣品止血性能的評價采用實施例中制備的止血粉進行兔子肝出血試驗，具體操作過程如下：兔子肝出血試驗：采用20只新西蘭兔為實驗動物，分成四組，每組5只兔子：實施例1組，實施例2組，實施例3組，Arista止血粉作為試驗對照組。在新西蘭兔子腹腔制作肝臟滲血創(chuàng)面模型，切除部分右葉，形成長15mm、深2mm創(chuàng)面，出血創(chuàng)面立即噴灑復合止血粉，然后在創(chuàng)面上平鋪紗布，按壓1min后揭開紗布觀察出血情況，以后每隔30s觀察1次，記錄止血時間。通過與對照組Arista止血粉進行比較，評價復合止血粉的止血效果(結(jié)果見表2)。表2殼聚糖止血粉粉新西蘭兔肝出血模型止血試驗材料止血時間實施例11128.7±26.3實施例2145.6±33.2實施例3113.1±26.7對照組Arista止血粉162.4±19.2和對照組Arista止血粉相比，止血效果有明顯的提升。說明殼聚糖止血粉可以快速的止住肝損傷創(chuàng)面出血，減少創(chuàng)面的出血時間，具有良好的止血效果。因為殼聚糖止血粉的吸水能力弱于Arista止血粉。我們認為，可能是因為殼聚糖分子鏈上胺基的正電性，增強了殼聚糖止血粉的止血能力。當前第1頁1 2 3