本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及一種基于生物功能化納米銀裝載紫杉醇或其類似物的靶向遞送系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
癌癥已成為人類首要疾病死因和主要的公共健康問題，其中肺癌發(fā)病率和死亡率高居首位。在過去的幾十年里，癌癥已經(jīng)從“無法治愈的疾病”轉(zhuǎn)變?yōu)閾碛小霸絹碓蕉嗟幕煼桨负蛡€性化治療方案”。然而現(xiàn)有化療作為癌癥的主要治療手段效果并不理想，存在活性低、毒副作用嚴(yán)重和腫瘤多藥耐藥問題。尋找更有效的治療手段是目前研究的熱點之一。
自六十年代末發(fā)現(xiàn)順鉑有抗癌活性以來，金屬配合物引起廣泛關(guān)注，越來越多的研究者致力于高效、廣譜、低毒新型的金屬抗癌藥物的發(fā)現(xiàn)。金屬納米材料隨著合成技術(shù)的成熟逐漸成為研究的熱點，其中納米銀(AgNPs)因具有獨特的電子、光學(xué)、生物兼容性和表面易修飾特性，更有良好的抗菌性、抗炎、抗病毒、抗血小板活性生物活性，已被廣泛應(yīng)用在服裝、食品、醫(yī)療器械領(lǐng)域中。研究表明，低濃度AgNPs對人體無毒，這對于AgNPs在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用的拓展具有重要意義。AgNPs表面化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，極易控制，表面融合一些具有靶向作用的功能性分子團(tuán)，可作為靶向傳遞載體作用于癌細(xì)胞。AgNPs本身抗癌特性使其有可能成為抗腫瘤活性成分應(yīng)用于癌癥診療中。已有研究表明，AgNPs具有較好的體外抗腫瘤細(xì)胞活性，對肺癌A549細(xì)胞、乳腺癌MCF-7細(xì)胞、結(jié)腸癌HT29細(xì)胞多種腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用。AgNPs可通過內(nèi)吞作用攝入細(xì)胞內(nèi)，不可修復(fù)的殺死腫瘤細(xì)胞。本申請前期對納米銀抗非小細(xì)胞肺癌作用進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，首次發(fā)現(xiàn)AgNPs對SCID小鼠體內(nèi)非小細(xì)胞肺癌移植瘤具有很好的抑制作用，且毒性較小?？梢姡{米銀(AgNPs)既具有抗腫瘤活性可作為抗腫瘤活性成分，也因表面易修飾作為載體裝載各種功能分子，在癌癥診療靶向治療系統(tǒng)開發(fā)中具有很大的潛力。AgNPs有可能成為一種有效預(yù)防和治療癌癥的納米藥物及靶向傳遞載體。
紫杉醇(Paclitaxel，TAX)是一種微管蛋白抑制劑，于1992年經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)作為抗晚期癌癥新藥上市，可用于非小細(xì)胞性腫瘤的臨床治療。紫杉醇應(yīng)用中獲得性腫瘤細(xì)胞耐藥嚴(yán)重制約著其臨床應(yīng)用，目前被臨床認(rèn)可的耐藥機(jī)制是ABC家族蛋白相關(guān)機(jī)制，如P-糖蛋白(P-gp)過度表達(dá)和微管蛋白-同型表達(dá)的改變。
然而現(xiàn)有抗腫瘤藥物普遍存在健康器官毒副作用嚴(yán)重、腫瘤多藥耐藥和低溶解度三大問題。因此，需要研發(fā)一種療效好、毒副作用小的抗腫瘤藥物。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明提供了一種基于生物功能化納米銀裝載紫杉醇或其類似物的靶向遞送系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用。該靶向遞送系統(tǒng)能選擇性到達(dá)到腫瘤部位，提高治療效果，減少毒副作用，能有效治療癌癥。
為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明提供以下技術(shù)方案：
本發(fā)明提供了一種基于生物功能化納米銀裝載紫杉醇或其類似物的靶向遞送系統(tǒng)，包括抗腫瘤藥物組合物、靶向配體和生物可降解高分子聚合物，所述抗腫瘤藥物組合物由納米銀和紫杉醇或其類似物組成。
將藥物靶向輸運(yùn)到病灶部位的病態(tài)細(xì)胞內(nèi)，然后再控制釋放藥物，這樣才可以實現(xiàn)藥物的有效治療，同時降低藥物的副作用。納米藥物腫瘤靶向遞送系統(tǒng)在提高難溶性藥物溶解性和生物利用度、實現(xiàn)靶向性給藥、緩釋藥物、降低藥物的毒副作用方面均顯示出良好的應(yīng)用前景。多功能納米給藥系統(tǒng)通過模擬臨床腫瘤復(fù)雜性的治療方法，集多種功能于一身，并且可通過組合協(xié)調(diào)增效。納米載體通過將各種化學(xué)分子同時組裝到同一納米粒表面，表面修飾后可獲得可控的生物學(xué)性質(zhì)，同時執(zhí)行多種重要診療功能：或裝載藥物提高療效，或偶聯(lián)特異性靶點達(dá)到靶向、抗耐藥的目的。隨著藥物靶向載體研究的日益成熟并逐漸走向?qū)嶋H應(yīng)用，多功能集成的納米載體可會為未來的按需給藥和個性化藥物發(fā)展提供新的思路。
本專利發(fā)明人通過體內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)納米銀對肺癌和前列腺癌具有很好的抑制作用。同時本專利發(fā)明人正在開發(fā)一系列紫杉醇衍生物，具有較好的抗腫瘤活性。進(jìn)而在此基礎(chǔ)上，進(jìn)行了基于納米銀載藥(紫杉醇或紫杉醇衍生物或紫杉烷類衍生物)靶向遞送系統(tǒng)的研究。本專利涉及一種基于生物功能化的納米銀、裝載抗腫瘤藥物紫杉醇(PTX)或紫杉醇衍生物或紫杉烷類衍生物的多功能納米傳送系統(tǒng)。
本發(fā)明的靶向遞送系統(tǒng)由靶向配體聚合到生物可降解高分子聚合物納米系統(tǒng)(Polymer nano-system，PNS)外表面，以合成靶向配體-PNS聚合物為殼，紫杉醇或其類似物(紫杉醇或紫杉醇衍生物或紫杉烷類衍生物)與納米銀同時包封在PNS里面，制備包載活性成分的紫杉醇或紫杉醇衍生物或紫杉烷類衍生物納米銀靶向遞送系統(tǒng)。紫杉醇或紫杉醇衍生物或紫杉烷類衍生物與納米銀作為組合抗腫瘤藥物通過靶向遞送系統(tǒng)進(jìn)行給藥，用于癌癥的預(yù)防和治療。
作為優(yōu)選，紫杉醇的類似物為紫杉醇、去甲氧基紫杉醇、雙去甲氧基紫杉醇、二氫紫杉醇、四氫紫杉醇、六氫紫杉醇、三尖杉寧堿、巴卡?、蟆?0-脫乙?；涂ǘ、?10-DAB)、10-去乙?；仙即?10-DAT)、7-表-10-去乙?；仙即?、2-去乙酰氧基紫杉寧E、7-去乙酰氧基紫杉寧J、2-去乙酰氧基去肉桂?；仙紝?、賽法羅馬寧(cephalomannine)、巴寧亭酸、多西紫杉醇、卡巴他賽、新型芳基異噁唑類紫杉烷衍生物、新型喹啉類紫杉烷衍生物中的一種或幾種。
作為優(yōu)選，所述靶向配體為核酸適配體、維生素、蛋白質(zhì)類配體、糖類配體、整合素、小分子寡核苷酸片段、細(xì)胞膜穿透肽脂質(zhì)衍生物中的一種或幾種。
作為優(yōu)選，所述核酸適配體為MUC1核酸適配體、AS1411核酸適配體、A10核酸適配體、SZTI01核酸適配體、GMT8核酸適配體、ARC183核酸適配體、PBP2a核酸適配體、TBA核酸適配體、TBAA核酸適配體、ARS-3核酸適配體、HB5核酸適配體、MA3核酸適配體、EpDT3核酸適配體、BPA核酸適配體、STR1核酸適配體、B6b-M14核酸適配體、M13a核酸適配體、FB139核酸適配體、E1核酸適配體、E2核酸適配體、E10核酸適配體、E12核酸適配體、A07核酸適配體、P12FR2核酸適配體、TLS11a核酸適配體、Ⅲ.1核酸適配體、CH6核酸適配體、EP166核酸適配體、LXL-1-A核酸適配體、wy-5a核酸適配體、MA-33核酸適配體、TBA15核酸適配體、TBA29核酸適配體、CD16核酸適配體、A15核酸適配體、ATRP核酸適配體、RT1T49核酸適配體中的一種或幾種；
所述維生素為葉酸、維生素B12、維生素A、核黃素中的一種或幾種；
所述蛋白質(zhì)類配體為轉(zhuǎn)鐵蛋白、低密度脂蛋白、乳鐵蛋白、抗體、短肽、BH3蛋白中的一種或幾種；所述短肽為RGD肽或NGR肽；
所述糖類配體為半乳糖、甘露糖、透明質(zhì)酸、葡萄糖中的一種或幾種。
作為優(yōu)選，生物可降解高分子聚合物選自聚酯類高分子聚合物、化學(xué)改性纖維、多糖類高分子材料、蛋白類高分子材料、蠟類高分子材料、高分子脂肪酸類中的一種或多種：
聚酯類高分子聚合物選自：聚乳酸聚乙醇酸共聚物、聚乳酸、聚乙二醇、聚ε-己內(nèi)酯、甲氧基聚乙二醇、聚乙醇酸、脂肪族聚酯、聚丁二酸丁二醇酯、聚氨基酸、聚酸酐、聚羥基丁酸、聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸酯、聚丙烯、聚丁二烯、聚乙烯醇、聚天冬氨酸PAA、維生素E、氯乙烯-丙烯-醋酸乙烯酯共聚物、氯乙烯-醋酸乙烯酯共聚物、琥珀酸酯、多聚N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺HPMA、多聚核苷酸、聚原酸酯、聚碳酸酯、聚乙烯醇、聚乙烯醇縮丁醛、聚乙烯醇縮甲醛、聚苯乙烯、聚乙烯(基)乙縮醛二乙基氨基乙酸酯、聚醋酸乙烯酯、香豆酮-茚聚合物、聚對二氧六環(huán)酮、甘油二硬脂酸酯、α-氰基丙烯酸酯、2-甲基-5-乙烯基吡啶甲基丙烯酸酯-甲基丙烯酸共聚物、鄰苯二甲酸酯、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、二丁基氨基羥丙醚、聚羥基丁酯均聚物、生育酚聚乙二醇琥珀酸酯、聚磷酸酯、聚羥基丁酯戊酯共聚物；聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯嵌段共聚物、聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物、DL-乳酸-聚乙二醇共聚物、PEG-PCL、甲氧基聚乙二醇-聚乳酸兩親性嵌段共聚物、殼聚糖接枝聚乳酸(CS-g-PLA)共聚物、聚乳酸/聚乙醇酸-聚乙二醇共聚物、聚乳酸-聚乙醇酸-TPGS星狀共聚物、聚乙二醇-聚己內(nèi)酯-聚乙二醇嵌段聚合物、聚乙二醇單甲醚-b-聚(L-谷氨酸-co-γ-3-苯丙烯基-L-谷氨酸酯)嵌段共聚物；聚(L-谷氨酸-γ-3-苯丙烯基-L-谷氨酸酯)-b-聚乙二醇-b-聚(L-谷氨酸-co-γ-3-苯丙烯基-L-谷氨酸酯)三嵌段共聚物，聚乙二醇-b-聚谷氨酸嵌段共聚物和阿霉素/聚乙二醇-b-聚(炔丙基L-谷氨酸-g-巰基琥珀酸)嵌段共聚物，聚乙二醇-b-聚β-胺酯，谷氨酸-co-賴氨酸，聚乙二醇單甲醚-b-聚(L-賴氨酸-co-L-胱氨酸)嵌段聚合物，短鏈聚乙二醇單甲醚；
化學(xué)改性纖維選自：天然纖維素、再生纖維素、纖維素酯、醋酸纖維素、羥丙基甲基纖維素、醋酸纖維素丙酸酯、纖維素丙酸酯、纖維素戊酸酯、纖維素醚、乙基纖維素、纖維素縮醛化合物；
多糖類高分子材料選自：藻蛋白酸、淀粉、淀粉衍生物、甲殼質(zhì)、聚乙酰殼多糖、軟骨素、糊精、葡聚糖、肝素、微生物多糖、微生物聚酯、海藻酸鈉、殼聚糖、透明質(zhì)酸；
蛋白類高分子材料選自：抗體、牛血清白蛋白、乳鐵蛋白、明膠、白蛋白、酪蛋白、脂蛋白、硫酸角蛋白、纖維蛋白原、血紅蛋白、膠原蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白玉米蛋白乳鐵蛋白；
蠟類高分子材料選自牛脂、鯨蠟、蜂蠟、石蠟、蓖麻蠟；
高分子脂肪酸類選自肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸、山愈酸。
作為優(yōu)選，紫杉醇或其類似物與納米銀的質(zhì)量比為1：(0.01～10)；
作為優(yōu)選，生物可降解高分子聚合物與抗腫瘤藥物組合物的質(zhì)量比為(5～80)：1；
在本發(fā)明提供的一些實施例中，生物可降解高分子聚合物與抗腫瘤藥物組合物的質(zhì)量比為(5～60)：1；
作為優(yōu)選，生物可降解高分子聚合物與靶向配體的質(zhì)量比為1：(0.2～20)；
在本發(fā)明提供的一些實施例中，生物可降解高分子聚合物與靶向配體的質(zhì)量比為1：(0.5～20)。
本發(fā)明還提供了該靶向遞送系統(tǒng)的制備方法，包括如下步驟：
將靶向配體和可降解高分子聚合物進(jìn)行交聯(lián)，加入溶劑，得到靶向配體-高分子聚合物溶液；該溶劑為DMSO、三氯甲烷、丙酮或水；
將納米銀與所述靶向配體-高分子聚合物溶液混合，得到含靶向配體-高分子聚合物的納米銀溶液；
將紫杉醇或其類似物與所述含靶向配體-高分子聚合物的納米銀溶液混合，經(jīng)乳化得到初乳；
將所述初乳與乳化劑混合，經(jīng)乳化得到預(yù)復(fù)乳，攪拌，離心，所得沉淀即為所述靶向遞送系統(tǒng)。
在本發(fā)明提供的實施例中，該靶向遞送系統(tǒng)的制備方法包括：
(1)將靶向配體和可降解高分子聚合物按比例稱重，再加入過量交聯(lián)劑室溫孵育，再加入DMSO，攪拌，得到含靶向配體和可降解高分子聚合物的溶液；再提純和濃縮，將納米銀溶膠加入到上述含靶向配體和可降解高分子聚合物的溶液中，得到含靶向配體和可降解高分子聚合物的納米銀溶液；
(2)將上述溶液加入到紫杉醇或紫杉醇衍生物或紫杉烷類衍生物溶液中，乳化制得初乳；
(3)將初乳滴加到乳化劑中，乳化得到預(yù)復(fù)乳，攪拌，冷凍離心，棄去上清液，添加緩沖鹽洗滌，所得沉淀即為裝載紫杉醇或紫杉醇衍生物或紫杉烷衍生物納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
作為優(yōu)選，所述交聯(lián)采用的交聯(lián)劑為EDC/NHS、DCC/NHS、EDAC·HCl/NHS、醛類、京尼平中的一種或幾種的組合。交聯(lián)還可以采用紫外照射的方法。
作為優(yōu)選，所述乳化劑為聚乙烯醇(PVA)、硬脂酰乳酸鈉(SSL)、硬脂酰乳酸鈣(CSL)、雙乙酰酒石酸單甘油酯(datem)、蔗糖脂肪酯(SE)、蒸餾單甘酯(DMG)、液體單甘酯(即單油酸甘油酯)、大豆磷脂(有脫色和羥基化的磷脂)、吐溫系列產(chǎn)品、單辛酸(或辛癸酸)甘油酯、司盤(SPAN)、三聚甘油酯、丙二醇脂肪酸酯、蔗糖酯、大豆磷脂、月桂酸單甘油酯中的一種或幾種的組合；
所述乳化采用的方法為研缽法、振蕩法、攪拌法、注射器法、超聲波法中的一種或幾種。
本發(fā)明靶向遞送系統(tǒng)作為藥物傳輸系統(tǒng)的應(yīng)用形式為藥劑學(xué)上可接受的賦形劑。
本發(fā)明還提供了該靶向遞送系統(tǒng)在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供了一種基于生物功能化納米銀裝載紫杉醇或其類似物的靶向遞送系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用。該靶向遞送系統(tǒng)包括抗腫瘤藥物組合物、靶向配體和生物可降解高分子聚合物，所述抗腫瘤藥物組合物由納米銀和紫杉醇或其類似物組成。本發(fā)明至少具有如下優(yōu)勢之一：
(1)本發(fā)明針對腫瘤藥物或化合物毒副作用嚴(yán)重、腫瘤多藥耐藥和低溶解度，在體內(nèi)無法高效的到達(dá)病灶部位從而導(dǎo)致體內(nèi)治療失敗問題，采用靶向遞送系統(tǒng)，藥物或其他物質(zhì)偶聯(lián)于腫瘤細(xì)胞特異性“靶向配基”上，能選擇性到達(dá)到腫瘤部位，提高治療效果，減少毒副作用。
(2)紫杉醇或其類似物和納米銀具有良好的抗腫瘤活性作為組合抗腫瘤藥物，得到紫杉醇或其類似物納米銀靶向遞送系統(tǒng)。其中靶向遞送系統(tǒng)可以提高紫杉醇或其類似物的溶解性和生物利用度，使紫杉醇或其類似物與納米銀達(dá)到靶向性給藥、緩釋藥物的作用，用于癌癥的預(yù)防和治療，效果好。
附圖說明
圖1示實施例7的基于Ag@PLGA-PEG裝載PTX(紫杉醇)、BH3和AS1411靶向遞送系統(tǒng)作用機(jī)理。
具體實施方式
本發(fā)明公開了一種基于生物功能化納米銀裝載紫杉醇或其類似物的靶向遞送系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發(fā)明。本發(fā)明的方法及應(yīng)用已經(jīng)通過較佳實施例進(jìn)行了描述，相關(guān)人員明顯能在不脫離本發(fā)明內(nèi)容、精神和范圍內(nèi)對本文所述的方法和應(yīng)用進(jìn)行改動或適當(dāng)變更與組合，來實現(xiàn)和應(yīng)用本發(fā)明技術(shù)。
本發(fā)明提供的基于生物功能化納米銀裝載紫杉醇或其類似物的靶向遞送系統(tǒng)及其制備方法和應(yīng)用中所用原料或輔料均可由市場購得。
下面結(jié)合實施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明：
實施例1
以紫杉醇和納米銀按摩爾比1:0.01組成組合抗腫瘤藥物，紫杉醇和納米銀以聯(lián)合組分通過靶向系統(tǒng)方式給藥；組合抗腫瘤藥物與甲氧基聚乙二醇-聚乳酸兩親性嵌段共聚物(MPEG-PLA)按重量百分比1:5，甲氧基聚乙二醇-聚乳酸兩親性嵌段共聚物(MPEG-PLA)與MUC1核酸適體按重量百分比1:0.5，通過以下步驟得到紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)：
(1)MUC1核酸適配體與甲氧基聚乙二醇-聚乳酸兩親性嵌段共聚物(MPEG-PLA)的鍵合：核酸適配體和高分子聚合物用過量1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)和NHS室溫孵育，得到NHS活化鍵合得到MUC1核酸適配體-MPEG-PLA，即(MPEG-PLA-Apt)；
(2)按處方稱取MPEG-PLA-Apt溶于含有紫杉醇和納米銀組合抗腫瘤藥物溶液中，乳化制得初乳；
(3)將初乳滴加到PVA溶液中，超聲乳化得到預(yù)復(fù)乳，攪拌，冷凍離心，所得沉淀分散，即為裝載紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
實施例2
以四氫紫杉醇和納米銀按重量百分比1:0.5作為組合抗腫瘤藥物，四氫紫杉醇和納米銀通過靶向遞送系統(tǒng)進(jìn)行給藥；組合抗癌藥物與聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯嵌段共聚物(PLGA-PEG-PLGA)按重量百分比1:25，聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯嵌段共聚物(PLGA-PEG-PLGA)與MUC1核酸適體按重量百分比1:20，通過以下步驟得到四氫紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)：
(1)SZTI01核酸適配體與聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯嵌段共聚物(PLGA-PEG-PLGA)的鍵合：SZTI01核酸適配體和高分子聚合物用過量1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)和NHS室溫孵育，得到NHS活化鍵合得到SZTI01核酸適配體-PLGA-PEG-PLGA，即(PLGA-PEG-PLGA-PLA-Apt)；
(2)按處方稱取PLGA-PEG-PLGA-Apt溶于含有四氫紫杉醇和納米銀組合抗腫瘤藥物溶液中，乳化制得初乳；
(3)將初乳滴加到PVA溶液中，超聲乳化得到預(yù)復(fù)乳，攪拌，冷凍離心，所得沉淀分散，即為裝載四氫紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
實施例3
以六氫紫杉醇和納米銀按重量百分比1:0.25作為組合抗腫瘤藥物，六氫紫杉醇和納米銀通過靶向遞送系統(tǒng)進(jìn)行給藥；組合抗癌藥物與聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物(PEG-PLGA-PEG)按重量百分比1:30，聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物(PEG-PLGA-PEG)與A10核酸適體按重量百分比1:15，通過以下步驟得到六氫紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)：
(1)A10核酸適配體與聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物(PEG-PLGA-PEG)的鍵合：A10核酸適配體和高分子聚合物用過量1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)和NHS室溫孵育，得到NHS活化鍵合得到A10核酸適配體-PEG-PLGA-PEG，即(PEG-PLGA-PEG-Apt)；
(2)按處方稱取PEG-PLGA-PEG-Apt溶于含有四氫紫杉醇和納米銀組合抗腫瘤藥物溶液中，乳化制得初乳；
(3)將初乳滴加到PVA溶液中，超聲乳化得到預(yù)復(fù)乳，攪拌，冷凍離心，所得沉淀分散，即為裝載六氫紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
實施例4
以雙去甲氧基紫杉醇和納米銀按重量百分比1:0.4作為組合抗腫瘤藥物，雙去甲氧基紫杉醇和納米銀通過靶向遞送系統(tǒng)進(jìn)行給藥；組合抗癌藥物與聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物(PEG-PLGA-PEG)按重量百分比1:40，聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物(PEG-PLGA-PEG)與A10核酸適體按重量百分比1:1，通過以下步驟得到六氫紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)：
(1)A10核酸適配體與聚乙二醇-聚丙交酯-乙交酯-聚乙二醇嵌段共聚物(PEG-PLGA-PEG)的鍵合：A10核酸適配體和高分子聚合物用過量1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)和NHS室溫孵育，得到NHS活化鍵合得到A10核酸適配體-PEG-PLGA-PEG，即(PEG-PLGA-PEG-Apt)；
(2)按處方稱取PEG-PLGA-PEG-Apt溶于含有雙去甲氧基紫杉醇和納米銀組合抗腫瘤藥物溶液中，乳化制得初乳；
(3)將初乳滴加到PVA溶液中，超聲乳化得到預(yù)復(fù)乳。攪拌，冷凍離心，所得沉淀分散，即為裝載雙去甲氧基紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
實施例5
以紫杉醇和納米銀按重量百分比1:0.05組成組合抗腫瘤藥物，紫杉醇和納米銀通過靶向系統(tǒng)方式給藥；組合抗癌藥物與多聚N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺(HPMA)、聚乙醇酸(PGA)按重量百分比1:50，多聚N-(2-羥丙基)甲基丙烯酰胺(HPMA)、聚乙醇酸(PGA)與AS1411核酸適體按重量百分比1:0.5，通過以下步驟得到紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)：
(1)AS1411核酸適配體與HPMA、PGA的鍵合：核酸適配體和高分子聚合物用過量1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)和NHS室溫孵育，得到NHS活化鍵合得到AS1411核酸適配體-HPMA-PGA，即(HPMA-PGA-Apt)；
(2)按處方稱取HPMA-PGA-Apt溶于含有紫杉醇和納米銀組合抗腫瘤藥物溶液中，乳化制得初乳；
(3)將初乳滴加到PVA溶液中，超聲乳化得到預(yù)復(fù)乳，攪拌，冷凍離心，所得沉淀分散，即為裝載紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
實施例6
以去甲氧基紫杉醇和納米銀按重量百分比1:0.05組成組合抗腫瘤藥物，去甲氧基紫杉醇和納米銀通過靶向系統(tǒng)方式給藥；組合抗癌藥物與聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(TPGS)、聚天冬氨酸(PAA)、聚ε-己內(nèi)酯(PEG-PCL)按重量百分比1:50，聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(TPGS)、聚天冬氨酸(PAA)、聚ε-己內(nèi)酯(PEG-PCL)與GMT8、AS1411核酸適體按重量百分比1:12，通過以下步驟得到去甲氧基紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)：
(1)GMT8、AS1411核酸適配體與TPGS、PAA、PEG-PCL的鍵合：核酸適配體和高分子聚合物用過量1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺(EDC)和NHS室溫孵育，得到NHS活化鍵合得到GMT8、AS1411核酸適配體-TPGS-PAA-PEG-PCL，即(TPGS-PAA-PEG-PCL-Apt)；
(2)按處方稱取TPGS-PAA-PEG-PCL-Apt溶于含有去甲氧基紫杉醇和納米銀組合抗腫瘤藥物溶液中，乳化制得初乳；
(3)將初乳滴加到PVA溶液中，超聲乳化得到預(yù)復(fù)乳，攪拌，冷凍離心，所得沉淀分散，即為裝載去甲氧基紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
實施例7
以紫杉醇和納米銀按摩爾比1:10組成組合抗腫瘤藥物，紫杉醇和納米銀以聯(lián)合組分通過靶向系統(tǒng)方式給藥；組合抗腫瘤藥物與PEG-PCL按重量百分比1:50，PEG-PCL與BH3肽、AS1411按重量百分比1:0.5:2.0，具體步驟如下：
(1)將PEG-PCL聚合物和BH3肽溶于適量DMSO和DCM，加入縮合劑EDC.HCl和催化劑DMAP，室溫下攪拌48小時。除去雜質(zhì)，干燥，得到BH3-PNP聚合物。將AS1411-NHS的DMSO溶液緩慢加入到聚合物溶液中，加入0.02mLTEA，經(jīng)室溫反應(yīng)、水透析3天，冷凍干燥即得AS1411-PEG-PCL。將BH3-NP懸浮于去離子水中，用過量EDC和NHS室溫孵育，得到N-羥基琥珀酰亞胺活化PTX-PNP，加入5′-NH2Ap反應(yīng)生成Ap-BH3-NP生物共聚液，超濾洗滌，再懸浮在蒸餾水中，4℃保存待用。
(2)采用乳液/溶劑蒸發(fā)法制備PTX-BH3-NPs。首先，將BH3-PEG-PCL聚合物和紫杉醇、AgNPs溶解在二氯甲烷中，邊攪拌邊將形成的乳液中逐滴加入到膽酸鈉水溶液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除二氯甲烷。將得到的納米顆粒過凝膠柱，蒸餾水洗脫除去游離PTX。
(3)稱取AS1411/BH3-PEG-PCL溶于含有紫杉醇和AgNPs的四氫呋喃溶液中，冰浴下吸取PFP加入上述溶液中，超聲破碎儀上乳化2min，制得初乳。將此初乳滴加到0.3％PVA溶液中，再超聲乳化得到預(yù)復(fù)乳。用100mL生理鹽水稀釋，室溫攪拌過夜，8000rpm離心10min，取沉淀以10mL生理鹽水分散，即得紫杉醇納米銀納米乳。
實施例8
以多西紫杉醇和納米銀按摩爾比1:6組成組合抗腫瘤藥物，多西紫杉醇和納米銀以聯(lián)合組分通過靶向系統(tǒng)方式給藥；組合抗腫瘤藥物與殼聚糖接枝聚乳酸(CS-g-PLA)共聚物按重量百分比1:60，PEG-PLGA與MUC1核酸適體按重量百分比1:10，具體步驟如下：
將GMT8核酸適配體和殼聚糖接枝聚乳酸(CS-g-PLA)共聚物按比例稱重，再加入過量1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳二亞胺EDC和NHS室溫孵育，得到含GMT8核酸適配體和PEG-PLGA的溶液；
加入納米銀溶膠，得到含GMT8核酸適配體和殼聚糖接枝聚乳酸(CS-g-PLA)共聚物的納米銀溶液；加入2g/mL多西紫杉醇二氯甲烷溶液中，乳化制得初乳；
將初乳滴加到乳化劑中，超聲乳化15min得到預(yù)復(fù)乳，3000rpm攪拌2h，冷凍離心，棄去上清液，添加氯化鈉溶液洗滌三次，所得沉淀即為裝載多西紫杉醇納米銀靶向遞送系統(tǒng)。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也應(yīng)視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。