本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，具體涉及一種具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物及其應用。
背景技術：
2014年年底，中國的老年人口數(shù)量達到2.12億人，成為世界上第一個老年人口破2億的國家，人口老齡化問題日漸嚴重。隨著我國的工業(yè)化進程加快，不良的生活方式以及環(huán)境污染等問題，人體的健康受到威脅，專家指出，我國的亞健康人群約占70％，伴隨而來的問題就是適應力減弱，免疫水平低下，皮膚健康問題日益顯著。因此，尋求抗衰老、增強機體免疫力的活性物質(zhì)，對過多的老齡化人口以及人類的健康具有非常重要的作用。
衰老是生命過程的必然規(guī)律，可分兩大類：一是生理性衰老,指人體達到成熟后所出現(xiàn)的生理退化現(xiàn)象；二是病理性衰老,即在生理變化的基礎上，因患某些疾病或受外界因素的影響，而加速衰老的過程?，F(xiàn)代研究較多的是衰老的自由基學說和免疫學說，生物體的衰老過程是機體的組織細胞不斷產(chǎn)生的自由基積累結(jié)果，自由基可以引起DNA損傷從而導致突變，誘發(fā)腫瘤形成。自由基是正常代謝的中間產(chǎn)物，其反應能力很強，可使細胞中的多種物質(zhì)發(fā)生氧化，損害生物膜。還能夠使蛋白質(zhì)、核酸等大分子交聯(lián)，影響其正常功能。衰老的免疫學說可以分為兩種觀點：第一，免疫功能的衰老是造成機體衰老的原因；第二，自身免疫學說，認為與自身抗體有關的自身免疫在導致衰老的過程中起著決定性的作用。衰老并非是細胞死亡和脫落的被動過程，而是最為積極地自身破壞過程。
近年來研究表明，益生菌具有潛在的抗衰老作用。益生菌可以通過調(diào)節(jié)宿主免疫系統(tǒng)而起到一定的抗衰老作用，包括腸道黏膜免疫系統(tǒng)、體液免疫系統(tǒng)及細胞免疫系統(tǒng)。在衰老過程中機體的氧化應激明顯增強，氧化應激不僅會造成大分子物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核酸等氧化損傷，還會對免疫系統(tǒng)產(chǎn)生有害的影響；益生菌的抗氧化作用可能有利于維持機體免疫系統(tǒng)的平衡，提高免疫調(diào)控能力從而延長壽命。從免疫學角度看，益生菌在宿主體內(nèi)定殖，通過產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物或菌體本身來調(diào)節(jié)機體的免疫系統(tǒng)，表現(xiàn)為刺激淋巴細胞增殖，激活細胞的吞噬活性等。免疫功能的改善可以減少衰老疾病的發(fā)生率，從而起到一定的延長壽命的效果。從抗氧化的角度看，益生菌的抗衰老作用可能是通過誘導SOD、GSH-Px等具有抗衰老功能的活性酶的合成，使衰老特征產(chǎn)物如MDA、LPO的含量降低，從而提高機體的抗氧化能力，抑制機體、組織、細胞的過氧化過程而起到延緩衰老的作用。益生元的添加有利于人體腸道內(nèi)有益菌的生長，同時抑制有害菌的繁殖，從而達到調(diào)節(jié)腸道菌群平衡的功效，間接的促進益生菌的抗氧化及增強免疫力的功能。
2010年，Takashi Kuda等人對日本傳統(tǒng)發(fā)酵食品中分離的菌株Lactobacillus plantarum(植物乳桿菌)的抗氧化能力進行了研究，發(fā)現(xiàn)其可有效清除氧自由基。孟和畢力格等研究了酸馬奶中L.acidophilusMG2-1的抗氧化作用，發(fā)現(xiàn)活菌制劑灌服大鼠至28d后能夠使大鼠肝臟組織勻漿中SOD活力和GSH-Px活力均明顯提高，并顯著地降低大鼠血液和肝臟組織勻漿中MDA含量。許多研究表明益生菌在清除體內(nèi)自由基、提高SOD活力以及降低MDA含量方面發(fā)揮重要作用。
中醫(yī)衰老學說和現(xiàn)代衰老理論,分別從不同的角度對衰老理論進行研究?！端貑枴ど瞎盘煺嬲摗肪驮敿氄撌隽伺右云?、男子以八為基數(shù)遞進的生長、發(fā)育、衰老的腎氣盛衰曲線，明確指出機體的生、長、壯、老、已，受腎中精氣的調(diào)節(jié)，總結(jié)衰老的內(nèi)因是“腎”起主導作用?，F(xiàn)代衰老理論自由基學說,免疫衰弱學說,以及脂褐質(zhì)積累學說等,其抗衰老的本質(zhì)主要表現(xiàn)為：調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)功能、促進免疫力、修復DNA、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌功能、清除自由基、促進物質(zhì)代謝等方面,從分子水平對衰老機制進行了闡述。利用現(xiàn)代科技提取中藥的有效成分,如黃酮類化合物、多糖、苷類、萜內(nèi)酯類、香豆素、揮發(fā)油及生物堿等,經(jīng)過分離、純化，進行動物實驗，結(jié)果表明，藥物的有效成分在動物壽命實驗、免疫功能實驗、抗氧化、抗動脈粥樣硬化以及血流變有效降低體內(nèi)過氧化脂質(zhì)等方面具有良好的抗衰老的作用。
目前市場上延緩衰老的主要產(chǎn)品為單一的益生菌粉或黃酮類提取物如大豆異黃酮等，或人類自的自體物質(zhì)如維生素類、氨基酸等，較少有益生菌粉和中藥提取物復合的產(chǎn)品，本發(fā)明的目的在于提供一種具有延緩衰老美容養(yǎng)顏功能的益生菌組合物，能加和單獨的益生菌或中藥提取物的抗氧化功能，從而達到延緩衰老養(yǎng)顏美容的效果。
技術實現(xiàn)要素：
有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物。該組合物安全有效，能夠有效增強人體免疫力，提高機體的抗氧化能力，從而達到延緩衰老美容養(yǎng)顏的效果。
為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術方案為：
具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物，由益生菌與具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的藥食同源中藥協(xié)同組合而成；所述益生菌由植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126組成。
植物乳桿菌BL-WHSYM9，是一種嗜甘草的植物乳桿菌，所述嗜甘草的植物乳桿菌是在乳桿菌發(fā)酵甘草過程中獲得的，其在以甘草為唯一營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基環(huán)境中能夠旺盛繁殖，該菌株命名為Lactobacillus plantarum BL-WHSYM9，WHSYM9，已于2013年09月26日保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏編號為：CCTCC NO：M 2013449。
植物乳桿菌BLCC2-0015，是一株具高抗氧化活性的植物乳桿菌，該乳酸菌命名為植物乳桿菌BLCC2-0015(Lactobacillus plantarumBLCC2-0015)，保藏編號為CCTCC NO:M2015126，保藏日期為2015年3月18日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心。該植物乳桿菌具高抗氧化活性，還可以具有良好的耐酸耐膽鹽特性，將該乳酸菌制備成菌粉后制成機體抗氧化食品或保健品，直接食用或沖服飲用，使用方便，可增強機體免疫力。
植物乳桿菌BLCC2-0126，保藏編號CCTCC NO：M2015128是一株具有吸附或降解腸毒素功能的乳酸菌，所述乳酸菌具有吸附或降解腸毒素功能，且有較好的耐酸、耐膽鹽及耐人工胃液、腸液效果。具體體現(xiàn)在：可吸附或降解腸毒素，具有較好的清除腸毒素能力；能夠抑制常見病原菌的生長；能夠耐酸、耐膽鹽可在消化道內(nèi)存活。不僅具高清腸毒素能力，還具有良好的性能，可用于人體保健。保藏編號CCTCC NO：M2015128，保藏日期為2015年3月18日，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心。
進一步，所述組合物還包括益生元、麥芽糊精和輔料填充物。
作為一種優(yōu)選，所述輔料填充物包括檸檬酸、果粉、糖醇等。
進一步，所述組合物按質(zhì)量百分比計，包括以下組分：益生菌2-10％、藥食同源中藥提取物20-30％、益生元50-60％、麥芽糊精和輔料填充物5-10％。
作為一種優(yōu)選，所述組合物按質(zhì)量百分比計，包括以下組分：益生菌5％、藥食同源中藥提取物30％、益生元55％、麥芽糊精和輔料填充物10％。
進一步，其特征在于，所述益生菌的含量為8.0×109-4.0×1010cfu/g。
作為一種優(yōu)選，所述益生菌的含量為8.0×109cfu/g。
進一步，其特征在于，所述植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126的質(zhì)量比為1:1:1。
作為一種優(yōu)選，所述益生菌為益生菌的凍干粉。
所述益生菌的凍干粉的具體的制備方法包括以下步驟：
1)按上述重量份分別將三株植物乳桿菌經(jīng)培養(yǎng)基活化后，接種于發(fā)酵培養(yǎng)液中，37℃恒溫靜置培養(yǎng)，使菌體濃度達到對數(shù)生長期4.0×109-8.0×109cfu/ml；
2)將步驟1)中各種發(fā)酵液分別離心，棄上清，得到菌泥；
3)配制凍干保護劑；
4)將菌泥和凍干保護劑混合均勻，將混合物預凍，再真空冷凍干燥，制成具有包埋層的活性益生菌組合物的凍干粉。
進一步，所述藥食同源中藥由沙棘、枸杞、山藥、桂圓和紅棗組成。
近年來關于中藥的有效成分如黃酮類、多糖、皂苷類、萜內(nèi)酯類等在機體抗衰老、抗氧化方面的研究越來越多。本發(fā)明中中藥提取物的各組分主要有效成分為多糖，有研究表明，具有生物活性的天然產(chǎn)物多糖類物質(zhì)，有清除氧自由基的作用。當體內(nèi)氧自由基積累過多時，將對人體造成毒害，導致癌變、衰老、炎癥、免疫功能紊亂等疾病。
本發(fā)明的中藥提取物其中組分之一枸杞含有大量的枸杞多糖(LBP)，給一定濃度范圍的LBP，能劑量依賴性地增加細胞的增殖活性，增加細胞內(nèi)SOD活性、減少MDA含量；同時LBP能有效清除DPPH自由基，降低蛋白質(zhì)氧化損傷而發(fā)揮抗衰老的作用。沙棘中含有維生素類、糖類、氨基酸類、不飽和脂肪酸、多酚類、黃酮類、SOD、5-羥色胺以及各種微量元素等，具有抗氧化、抗衰老、提高免疫等多種作用。茯苓多糖能不同程度增加血清中T-SOD和Cu-SOD活性，降低MDA含量，茯苓多糖具有較好的抗衰老作用。覆盆子中的有效成分如黃酮類、苷類及其糖蛋白均具有很好的抗氧化能力，能夠很好的的清除DPPH和ABTS，具有很好的還原能力。山藥具有補脾養(yǎng)胃、生津益肺、補腎澀精之功效；玫瑰花能夠行氣解郁、和血止痛；桂圓具有補益心脾、養(yǎng)血安神之功效；紅棗補中益氣、養(yǎng)血安神，各種中藥均能發(fā)揮其作用，且中藥提取物的制備是已有技術，各個成分均能在本發(fā)明中實施應用并能發(fā)揮有益作用，綜合評價，該中藥提取物的各有效成分具有較好的延緩衰老養(yǎng)顏美容的功效。
進一步，所述藥食同源中藥按重量份計，由以下組分組成：沙棘3-9份，枸杞6-12份，山藥15-30份，桂圓9-15份，紅棗6-15份。
進一步，所述益生元包括低聚異麥芽糖、低聚果糖和低聚木糖；所述低聚異麥芽糖、低聚果糖和低聚木糖的質(zhì)量比為5:3:1。
所述藥食同源中藥提取物制備方法包括以下步驟：
取上述重量份的沙棘，枸杞，山藥，桂圓，紅棗置于10倍水中浸泡30-60min，煎煮，水開后繼續(xù)煎煮20-40min，過濾得到第一濾液；藥渣用8倍水進行二次煎煮，水開后繼續(xù)煎煮20-40min，過濾得到第二濾液與第一濾液混合均勻，通過真空減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮中藥液，至固形物含量為30％以上，進噴霧干燥器，進風溫度控制140℃，出風溫度90℃，霧化器轉(zhuǎn)速45轉(zhuǎn)/分鐘，進料速度為5ml/分鐘，得噴霧干燥粉，粉碎，過100目以上篩子即得藥食同源中藥提取物。
本發(fā)明的具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物的制備方法包括選料、過篩、配料、混合，具體包括以下步驟：
將制備好的益生菌的凍干粉和藥食同源中藥提取物分別過100目以上篩子，并稱量備用；所述各組分的質(zhì)量百分比為益生菌干粉2-10％(8.0×109-4.0×1010cfu/g)，中藥提取物20-30％，益生元50-60％，麥芽糊精、檸檬酸、果粉、糖醇等輔料填充物5-10％。將以上各物質(zhì)在混合機中充分混勻至色澤均勻，無色差，即得到具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物。
本發(fā)明的目的之二在于提供一種所述的具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物在制備延緩衰老和美容養(yǎng)顏產(chǎn)品中的應用。
本發(fā)明的目的還在于提供一種具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的益生菌組合物，所述益生菌組合物由植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126組成。所述益生菌組合物能應用在制備延緩衰老和美容養(yǎng)顏產(chǎn)品中。
根據(jù)上述提到的植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126的特點和活性，也能以單獨益生菌組合物作用實現(xiàn)延緩衰老和美容養(yǎng)顏的功能。
作為一優(yōu)選，所述益生菌組合物的益生菌總數(shù)量為8.0×109-4.0×1010cfu/g。
作為一優(yōu)選，所述植物乳桿菌BL-WHSYM9、植物乳桿菌BLCC2-0015和植物乳桿菌BLCC2-0126的質(zhì)量比為1:1:1。
所述延緩衰老和美容養(yǎng)顏產(chǎn)品包括食品和保健品，具體可制成粉劑、片劑、膠囊劑、顆粒、沖劑等。
本發(fā)明的有益效果在于：
1)本發(fā)明提供的本發(fā)明所提供的具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物其優(yōu)勢在于益生菌和中藥提取物科學復配，按照重量科學配比而成，安全有效，較目前市場現(xiàn)有的產(chǎn)品單純的益生菌產(chǎn)品或單純的中藥產(chǎn)品有更加明顯的效果。
2)該組合物制備工藝簡單，中藥中的各個有效成分損失較少，安全性高，保證了產(chǎn)品批次之間的穩(wěn)定性。
3)益生菌和中藥提取物完美結(jié)合，中藥提取物具有明顯的增菌作用，益生菌能夠?qū)⒅兴幪崛∥锔玫姆纸獬尚》肿游镔|(zhì)，有利于腸道的吸收，中藥和益生菌合理配伍，經(jīng)試驗驗證，效果優(yōu)于任何一種單一的原料，各種有效成分協(xié)同作用。
具體實施方式
以下將對本發(fā)明的優(yōu)選實施例進行詳細描述。優(yōu)選實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，所舉實施例是為了更好地對本發(fā)明的內(nèi)容進行說明，但并不是本發(fā)明的內(nèi)容僅限于所舉實施例。所以熟悉本領域的技術人員根據(jù)上述發(fā)明內(nèi)容對實施方案進行非本質(zhì)的改進和調(diào)整，和任何未背離本發(fā)明的精神實質(zhì)與原理下所做的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等效的置換方式仍屬于本發(fā)明的保護范圍。
實施例1益生菌的凍干粉的制備
1)分別將三株植物乳桿菌經(jīng)培養(yǎng)基活化后，接種于發(fā)酵培養(yǎng)液中，37℃恒溫靜置培養(yǎng)，使菌體濃度達到對數(shù)生長期4.0×109-8.0×109cfu/ml；
乳桿菌種子液的制備：取出菌種保藏管，用乳酸菌斜面固體培養(yǎng)基分別劃線進行復蘇，37度培養(yǎng)24-36h。挑取斜面培養(yǎng)基上的菌落結(jié)晶紫染色鏡檢，為短桿菌或長桿菌。挑取菌落接種100mL乳酸菌培養(yǎng)基中，在37度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。種子采用2-5％的接種量，接種至3L大三角瓶中，37度培養(yǎng)24-36h，檢測其菌液濃度，菌含量超過20億/毫升，即可作為乳桿菌液體菌種接種。其中所述的MRS培養(yǎng)基：葡萄糖2.0％、檸檬酸銨0.2％、乙酸鈉0.5％、磷酸氫二鉀0.5％、硫酸錳0.02％、硫酸鎂0.05％、蛋白胨1.0％、牛肉膏1.0％、酵母膏0.5％、吐溫80 0.1％，調(diào)節(jié)pH至6.0；固體培養(yǎng)基加1.5％瓊脂粉。培養(yǎng)基滅菌條件為：0.10-0.15MPa，121℃滅菌20min。
2)將步驟1)中各種發(fā)酵液分別離心，棄上清，得到菌泥；
3)配制凍干保護劑；其中凍干保護劑的配方組成為：脫脂奶粉25g、蔗糖8g、食用甘油1g、蒸餾水100mL。
4)將菌泥和凍干保護劑混合均勻，將混合物預凍，再真空冷凍干燥，制成具有包埋層的活性益生菌的凍干粉。
實施例2中藥提取物的制備
1)按照重量份：沙棘5g，枸杞10g，山藥15g，桂圓12，紅棗15g；
2)將混合物置于10倍水中浸泡40min，煎煮，水開后繼續(xù)煎煮30min，過濾得到第一濾液；藥渣用8倍水進行二次煎煮，水開后繼續(xù)煎煮30min，過濾得到第二濾液與第一濾液混合均勻，通過真空減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮中藥液，至固形物含量為30％以上，進噴霧干燥器，進風溫度控制140℃，出風溫度90℃，霧化器轉(zhuǎn)速45轉(zhuǎn)/分鐘，進料速度為5ml/分鐘，得噴霧干燥粉，粉碎，過100目以上篩子即得中藥提取物。
實施例3中藥提取物的制備
1)按照重量份：沙棘9g，枸杞10g，山藥28g，桂圓14g，紅棗13g；
2)將混合物置于10倍水中浸泡50min，煎煮，水開后繼續(xù)煎煮40min，過濾得到第一濾液；藥渣用8倍水進行二次煎煮，水開后繼續(xù)煎煮40min，過濾得到第二濾液與第一濾液混合均勻，通過真空減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮中藥液，至固形物含量為30％以上，進噴霧干燥器，進風溫度控制140℃，出風溫度90℃，霧化器轉(zhuǎn)速45轉(zhuǎn)/分鐘，進料速度為5ml/分鐘，得噴霧干燥粉，粉碎，過100目以上篩子即得中藥提取物。
實施例4益生菌的凍干粉與中藥提取物等的復配
將制備好的益生菌的凍干粉和中藥提取物分別過100目以上篩子，并稱量備用；所述各組分的質(zhì)量百分比為益生菌干粉8％，中藥提取物30％，益生元55％，麥芽糊精、檸檬酸、果粉、糖醇等輔料填充物7％。將以上各物質(zhì)在混合機中充分混勻至色澤均勻，無色差，即得到具有延緩衰老養(yǎng)顏美容的益生菌混合物。
實施例5益生菌的凍干粉與中藥提取物等的復配
將制備好的益生菌的凍干粉和中藥提取物分別過100目以上篩子，并稱量備用；所述各組分的質(zhì)量百分比為益生菌干粉10％，中藥提取物25％，益生元58％，麥芽糊精、檸檬酸、果粉、糖醇等輔料填充物7％。將以上各物質(zhì)在混合機中充分混勻至色澤均勻，無色差，即得到具有延緩衰老養(yǎng)顏美容的益生菌混合物。
實施例6具有延緩衰老和美容養(yǎng)顏功能的組合物對自然衰老小鼠的延緩作用
1)具有延緩衰老養(yǎng)顏美容對的益生菌組合物對衰老小鼠各內(nèi)臟指標的影響
優(yōu)選的益生菌組合物比例：益生菌干粉5％(8.0×109cfu/g)，中藥提取物30％，益生元55％，麥芽糊精等其它輔料填充物10％，將以上物料充分混勻，按照不同的劑量灌服小鼠。
選取8月齡以上的衰老小鼠，隨機分為6組，每組10只，即高劑量組(0.55g/只)，中劑量組(0.055g/只)，低劑量組(0.0275g/只)，益生菌組(5.0×107cfu/只)，陽性組(原花青素+維生素C)，對照組(純水)，各個分組的小鼠每天進行灌胃操作，連續(xù)灌胃30d。
停藥次日，小鼠稱重，取血清并處死，解剖后分別取脾臟、肝臟、腎臟、胸腺稱重，保留肝臟制備肝臟組織懸液。
表1益生菌組合物對小鼠內(nèi)臟指數(shù)的益生功能(x±s，n＝10)
注：a，b，c表示差異顯著(0.01<P<0.05)。
結(jié)果顯示：以上數(shù)據(jù)表明產(chǎn)品組尤其是中、低劑量組均能提高各內(nèi)臟指標，其中脾臟、胸腺指數(shù)低劑量組較對照組分別提高10.2％、6.7％，對免疫器官脾臟、胸腺均有一定的益生功能，可能會相應的提高免疫器官的免疫水平，從而增加機體的免疫力，達到延緩衰老保健的效果。
2)具有延緩衰老養(yǎng)顏美容對的益生菌組合物對衰老小鼠各抗氧化指標的影響
根據(jù)保健食品抗氧化功能評價方法需要脂質(zhì)氧化物、蛋白質(zhì)氧化產(chǎn)物、抗氧化酶、抗氧化物質(zhì)四項指標。根據(jù)需要本發(fā)明分別檢測小鼠血清中的T-SOD(總超氧化物歧化酶)、MDA(丙二醛)，以及肝臟組織懸液中蛋白質(zhì)羰基、GSH(谷胱甘肽)的含量，通過以上抗氧化指標判定益生菌組合物對衰老小鼠的抗氧化能力，結(jié)果判定動物實驗中以上四項指標中三項陽性，可判定受試樣品抗氧化功能結(jié)果為陽性。
表2益生菌組合物對各個抗氧化指標的影響
注：a，b，c表示差異顯著(0.01<P<0.05)。
實驗結(jié)果顯示：高劑量組SOD水平較對照組提高14.4％；MDA的水平各個組較對照組均有減少，但是益生菌組和陽性組較對照組有顯著差異，MDA減少約18.3％；蛋白質(zhì)羰基檢測水平各組較對照組均有顯著性差異，減少率分別為33.3％、33.1％、35.3％、43.0％、38.9％，綜合以上數(shù)據(jù)，益生菌組效果較好，產(chǎn)品組也有一定的效果，說明產(chǎn)品和益生菌均能對小鼠的抗氧化能力有明顯的提高。
3)具有延緩衰老養(yǎng)顏美容對的益生菌組合物對過氧化氫造成的氧化損傷的保護作用
取10％的肝臟勻漿上清液0.8mL，分別加入0.1mL 0.5、0.05、0.03g/mL的益生菌組合物以及0.04g/mL的原花青素和維生素C，過氧化氫對照與陰性對照均加入等體積的0.9％的生理鹽水，37℃水浴，30min；陰性對照加0.1mL0.9％的生理鹽水，其余各組均加入0.1mL的50mmol/L H2O2，再37℃水浴50min；冰浴15min終止反應，最后4℃，3000rmp離心20min，取上清液，檢測丙二醛(MDA)的含量。
表3益生菌組合物對H2O2引起的氧化損傷的保護效果
注：a，b，c表示差異顯著(0.01<P<0.05)。
實驗結(jié)果顯示：H2O2對照組與其它各組有顯著差異性，說明H2O2對組織液有很好的氧化應激作用；陽性組較其他組均有極顯著差異，說明0PC+VC對H2O2的氧化損傷刺激有較好的保護效果；從比較結(jié)果來看，1、2、3組和H2O2比較差異顯著，說明產(chǎn)品組能較好中和H2O2對組織上清的刺激作用，所以產(chǎn)品對H2O2引起的氧化應激有一定的保護效果。
最后說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術方案而非限制，盡管參照較佳實施例對本發(fā)明進行了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的宗旨和范圍，其均應涵蓋在本發(fā)明的權利要求范圍當中。