本發(fā)明本屬于制劑制備領(lǐng)域，特別涉及一種丁卡因醇質(zhì)體的制備工藝。

背景技術(shù)：

研究表明，含有高濃度短鏈醇的的脂質(zhì)體-醇質(zhì)體不僅具有可變形性、包封率高、載藥量大、穩(wěn)定性好等藥劑學(xué)特性，而且在不添加任何表面活性劑的條件下其經(jīng)皮滲透性也非常顯著。此外，醇質(zhì)體具有與生物膜相似的空間構(gòu)象，相較于普通脂質(zhì)體和膏劑具有皮膚角質(zhì)層藥物透過(guò)量大和藥物的生物利用度高的優(yōu)點(diǎn)。動(dòng)物皮膚刺激性實(shí)驗(yàn)表明，醇質(zhì)體不僅本身無(wú)毒性，而且無(wú)明顯皮膚刺激性。

丁卡因作為傳統(tǒng)的長(zhǎng)效酯類局部麻醉藥，具有脂溶性高、起效快、持續(xù)長(zhǎng)、作用強(qiáng)等特點(diǎn)。不僅如此，丁卡因同其它局麻藥相比還具有更強(qiáng)的組織滲透性、擴(kuò)散性和安全性，被廣泛用于臨床實(shí)踐。但是由于傳統(tǒng)丁卡因藥物制劑存在經(jīng)皮速率慢的缺點(diǎn)，其使用受到了限制。因此如何制備一種新的丁卡因制劑，提高丁卡因藥劑臨床使用效果具有十分重要的意義。本發(fā)明采用醇質(zhì)體作為丁卡因的經(jīng)皮載體，制備5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體，使其成為具有滲透速率高，穩(wěn)定持久的新型藥劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種在組分和配比方面能夠保證有較高包封率、較好穩(wěn)定性且具備較好經(jīng)皮滲透性的丁卡因醇質(zhì)體。同時(shí)，本發(fā)明還提供了一種制備丁卡因醇質(zhì)體的制備方法。

本發(fā)明所述的制備方法按照如下步驟進(jìn)行：

1)將蛋黃卵磷脂、丁卡因堿基加入無(wú)水乙醇中，制成醇相；

2)將醇相注入水相中，攪拌均勻；

3)超聲處理后，過(guò)濾即得丁卡因醇質(zhì)體。

本發(fā)明的有益效果是：

1)本發(fā)明方案制備的丁卡因醇質(zhì)體，不僅具備粒徑小、滲透效高、包封率高等優(yōu)點(diǎn)，而且皮膚滲透速率高，穩(wěn)定性良好；

2)本發(fā)明的制備工藝簡(jiǎn)單、快速、環(huán)保，易于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。

附圖說(shuō)明

圖1本發(fā)明制備的5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體的外觀；

圖2本發(fā)明制備的5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體的透射電鏡圖(a和b)；

圖3本發(fā)明制備的5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體的粒徑分布圖；

圖4本發(fā)明制備的5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體與酊劑的單位面積累積透過(guò)量(a和b)；

圖5不同乙醇體積分?jǐn)?shù)的5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體制備初外觀(a和b)；

圖6不同乙醇體積分?jǐn)?shù)的5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體制備1月后外觀(a和b)；

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不局限于此。

實(shí)施例1乙醇含量對(duì)丁卡因醇質(zhì)體穩(wěn)定性的影響

在蛋黃卵磷脂濃度為4％(w/v，g/mL)，丁卡因含量5％(w/v，g/mL)的條件下，分別制備乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)為20％，30％，40％，50％，60％，70％丁卡因醇質(zhì)體，觀察制備初和制備1月后丁卡因醇質(zhì)體外觀，確定乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)范圍。

制備初：20％、30％乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)的丁卡因醇質(zhì)體為乳白色液體；而40％、50％、60％、70％乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)的丁卡因醇質(zhì)體為澄清液體，見(jiàn)圖5。

制備1月后：20％乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)的丁卡因醇質(zhì)體為淡白色液體；30％乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)的丁卡因醇質(zhì)體為淡白色液體并有少許沉淀；40％乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)的丁卡因醇質(zhì)體為澄清液體并有明顯沉淀；50％、60％、70％乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)的丁卡因醇質(zhì)體仍為澄清液體，見(jiàn)圖6。

實(shí)施例2丁卡因醇質(zhì)體的制備

1)載藥率的測(cè)定

將50μL待測(cè)樣品置于10mL容量瓶中，加乙腈適量完全溶解后定容，超聲處理10min后進(jìn)行HPLC檢測(cè)，以測(cè)定樣品的載藥率。

載藥率(Loading Efficacy，LE)的計(jì)算方法為：

公式中：ρ_測(cè)為HPLC測(cè)得的藥物濃度，ρ_總為總的藥物濃度。所有實(shí)驗(yàn)都是平行進(jìn)行了3次，3次測(cè)定結(jié)果的平均值為最終測(cè)定結(jié)果。

2)包封率的測(cè)定

采用透析袋平衡透析法測(cè)定丁卡因醇質(zhì)體的包封率。將透析袋預(yù)先剪成長(zhǎng)約10cm的小段，置于沸水中浸泡10min后將透析袋清洗干凈，封閉透析袋的一端并檢查透析袋是否滲漏，加入2mL待測(cè)樣品后封閉另一端，將透析袋置于250mL無(wú)水乙醇含量為2％的醇水溶液中，在恒溫磁力攪拌器上持續(xù)攪拌(60rpm，25℃)，平衡9h后通過(guò)HPLC測(cè)定透析袋外液中游離丁卡因的含量。

包封率(Entrapment Efficacy，EE)的計(jì)算方法為：

公式中ρ_總為總的藥物濃度，ρ_游為游離的藥物濃度，LE％為載藥率。所有實(shí)驗(yàn)都是平行進(jìn)行3次，3次測(cè)定結(jié)果的平均值為最終測(cè)定結(jié)果。

3)粒徑分布的測(cè)定

將2mL丁卡因堿基醇質(zhì)體倒入測(cè)試杯中，無(wú)進(jìn)一步稀釋或濃縮處理，采用動(dòng)態(tài)光散射以90度散射角測(cè)量顆粒和分子粒度，采用Zetasizer Nano S90測(cè)定丁卡因醇質(zhì)體的粒徑及分散系數(shù)。

4)丁卡因醇質(zhì)體的制備

在乙醇體積分?jǐn)?shù)(v/v，mL/mL)為50％～60％的基礎(chǔ)上，制備5％(w/v，g/mL)的丁卡因醇質(zhì)體10mL。其制備步驟如下：

1)將蛋黃卵磷脂、丁卡因堿基加入乙醇中，制成醇相；

2)將醇相注入水相中，攪拌均勻；

3)超聲處理后，過(guò)濾即得丁卡因醇質(zhì)體。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)如表1所示：

表1試驗(yàn)結(jié)果

表1中實(shí)驗(yàn)組編號(hào)5的實(shí)驗(yàn)條件為優(yōu)選實(shí)驗(yàn)條件：蛋黃卵磷脂質(zhì)量體積比為10％，乙醇體積分?jǐn)?shù)為50％，超聲功率為104W。根據(jù)上述條件制備5％(w/v，g/mL)丁卡因醇質(zhì)體。將得到的丁卡因醇質(zhì)體進(jìn)行測(cè)定，其包封率85.326±0.04，載藥率為97.22±1.66％，分散系數(shù)0.147±0.027，粒徑為17.60±1.22nm(圖3)，外觀及電鏡結(jié)構(gòu)如圖1、2所示。

實(shí)施例3丁卡因醇質(zhì)體滲透率和穩(wěn)定性試驗(yàn)

采取以下方法檢測(cè)制備的丁卡因醇質(zhì)體的平均滲透速率：保持在37±1℃水浴條件下，將鼠皮固定在接受池和供給池之間，角質(zhì)層面朝向供給池，有效滲透面積為2.92cm²，接受池中注滿接受液，防止產(chǎn)生氣泡，接受池容積為7mL，將5％丁卡因醇質(zhì)體和5％酊劑各1mL分別置于供應(yīng)室側(cè)鼠皮上，為防止水分蒸發(fā)，供應(yīng)室上放蓋玻片。電磁攪拌器以100r·min^-1，轉(zhuǎn)速攪拌，分別于0.5，1，2，4，6，8，10，12h各取出接受液0.5mL(取樣后補(bǔ)充等體積接受液)，將接受溶液以15000r·min^-1高速離心10min后取上清液進(jìn)行HPLC分析。

得到的結(jié)果為24.72±0.38μg·h^-1·cm^-2，該數(shù)值顯著高于丁卡因酊劑的平均滲透速率13.72±0.36μg·h^-1·cm^-2(圖4)。因此，有本發(fā)明方案制備的丁卡因醇質(zhì)體具有較高皮膚滲透速率。

進(jìn)一步，將制備的丁卡因醇質(zhì)體放置三個(gè)月后再檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其包封率和外觀形態(tài)、粒徑均與放置前無(wú)明顯變化，穩(wěn)定性良好。