免疫增強劑,是一類通過非特異性途徑提高機體對抗原或微生物特異性反應的物質,如增強巨噬細胞活性,增強抗原物質的免疫原性和穩(wěn)定性,促進抗體的合成與分泌等,從而增強動物機體非特異性和特異性免疫的物質。
本發(fā)明涉及禽用中藥免疫增強劑,在禽類飼養(yǎng)中應用,禽飲用后增加機體脾淋巴細胞的增殖、抗體的合成、細胞因子的分泌和免疫器官指數(shù),提高機體的免疫力。而且,該免疫增強劑是由多種中藥按一定比例提取而成,無毒副作用。
技術背景
畜禽疾病特別是病毒性疾病仍然是阻礙養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的瓶頸,疫苗是防治疾病最有效的方法。但是,近年來由于免疫抑制性病毒的普遍存在,預防工作變得異常艱難,畜禽傳染病的防制迫切需要高效、低毒的新型免疫增強劑,國內外學者一直致力于研究提高疫苗的特異性和非特異性免疫增強作用。中藥是我國傳統(tǒng)文化的結晶,是中華民族的文化瑰寶,在畜禽疾病的防治中具有重要的作用。中藥免疫增強劑對機體的細胞免疫和體液免疫功能具有增強或調節(jié)作用,可提高機體的抗病力和抵抗力,顯示了顯著增強機體免疫的作用。
現(xiàn)代醫(yī)學研究表明,許多中藥具有免疫增強作用,能刺激免疫系統(tǒng),提高免疫系統(tǒng)組織細胞活性,增加機體免疫細胞的生長及抗體的合成。本研究通過禽用中藥免疫增強劑對普通雞和免疫抑制雞免疫增強效果的研究,不但探索中藥的免疫增強作用,而且為免疫增強劑的研究建立實驗模型具有重要作用。
技術實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的,是克服以上所述的缺陷,提供一種療效顯著、成本低廉、毒副作用小的禽用中藥免疫增強劑及制備方法。
本發(fā)明是通過以下技術途徑來實現(xiàn)的:
本發(fā)明的禽用中藥免疫增強劑的藥物組合物,按質量份數(shù)組成:黃芪30-50、黨參18-22、銀杏果肉18-22、淫羊藿8-12和甘草8-12;其制備方法是:將上述5種材料黃芪30-50、黨參18-22、銀杏果肉18-22、淫羊藿8-12和甘草8-12的總質量10倍的三蒸水浸泡24 h,煮沸2 h 后過濾,收集濾液,將濾渣加5 倍量的三蒸水煮沸2 h后過濾,收集濾液,再將兩次濾液合并,離心,取上清液。上清液旋轉蒸發(fā)濃縮,至含中藥0.8-1.2 g/mL。
用法與用量:在自由飲水中添加中藥提取物,按普通雞2%或免疫抑制雞8%的濃度添加。
本發(fā)明所用的中草藥原料均可從中醫(yī)藥店購得,其規(guī)格符合國家醫(yī)藥標準。
本發(fā)明的上述藥物組合物加入適宜附加劑(常用的有矯味劑、抑菌劑、抗氧化劑、著色劑等),溶解混勻,濾過澄清,制備成一種常用的口服制劑,例如口服液等。
本發(fā)明的效益
1.克服抗生素和化學藥物長期使用產生的公共衛(wèi)生問題
本發(fā)明藥物組合物基于中醫(yī)提高機體免疫功能的辨病與辨證相結合原則,標本兼治,篩選出益氣養(yǎng)元,扶正祛邪,健脾利濕,補腎壯陽,祛風除濕,和中緩急,解毒,調和諸藥的天然植物藥,根據(jù)中醫(yī)理論組方,按照一定的質量配比制備而成。而且,該免疫增強劑是由多種中藥按一定比例提取而成,無毒副作用。本發(fā)明藥物組合物生產成本低,便于推廣使用。
2.提高動物機體的免疫力
本發(fā)明藥物組合物突出特點是組合物中有黃芪、黨參、銀杏果肉、淫羊藿和甘草。黃芪經(jīng)水提取后,主要成分多糖以葡萄糖為主,經(jīng)α-型糖苷鍵連接而成,單糖組成為鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖;黃芪多糖能增加禽類脾臟及胸腺指數(shù),促進法氏囊和脾臟的發(fā)育,能夠糾正細胞因子的免疫失衡狀態(tài)。銀杏果肉經(jīng)水提取后,主要成分多糖由葡萄糖、半乳糖、果糖和鼠李糖組成,為α-苷鍵肽多糖,對禽類細胞免疫和體液免疫功能低下狀態(tài)有顯著調節(jié)作用。黨參經(jīng)水提取后,主要成分黨參多糖由單糖和單糖衍生物組成,其中單糖主要是木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、果糖等,單糖衍生物主要是甘露醇、半乳糖醛酸等;黨參多糖能對抗免疫抑制禽類所致脾臟和胸腺萎縮,同時能提高免疫抑制禽類血清溶血素抗體水平。淫羊藿經(jīng)水提取后,主要成分淫羊藿苷能提高禽類脾臟、胸腺的質量,增加機體的體液免疫功能。甘草經(jīng)水提取后,主要成分甘草多糖是葡萄糖醛酸以及葡萄糖,甘草多糖能有效刺激T淋巴細胞增殖,達到增強抵抗力的效果;同時,還具有促進免疫球蛋白產生,抑制補體活性的效用。
5種中藥原料按質量份數(shù)組成經(jīng)水提、蒸發(fā)濃縮后形成的藥物組合物,具有益氣固表,健脾養(yǎng)血,補虛扶正,祛濕化痰,緩和藥性、清熱解毒等功效,禽飲用后可以增加禽類脾淋巴細胞的增殖、抗體的合成、細胞因子的分泌和免疫器官指數(shù),提高禽類機體的免疫力,具體作用如下。
(1)提高免疫系統(tǒng)組織細胞活性
本發(fā)明的禽用中藥免疫增強劑,能引起正?;蛎庖邫C能低下的禽細胞浸潤,出現(xiàn)淋巴細胞聚集,促進這些細胞增殖。
(2)增加機體免疫細胞的生長及抗體的合成
本發(fā)明的禽用中藥免疫增強劑,能促進正常或免疫機能低下的禽抗體生成,增加抗體生成細胞數(shù)和抗體效價,血清抗體上升且持續(xù)時間長。
(3)促進禽免疫器官的發(fā)育
本發(fā)明的禽用中藥免疫增強劑,能促進正?;蛎庖邫C能低下的禽免疫器官的發(fā)育,增加免疫器官胸腺、法氏囊的重量,從而提高了機體的免疫力。
(4)誘導脾淋巴細胞因子分泌
細胞因子是機體內免疫細胞或非免疫細胞產生的一組具有廣泛生物學活性的異質性調節(jié)因子,在體內能激活和調節(jié)免疫活性細胞,對免疫應答的產生和調節(jié)具有重要作用。本發(fā)明的禽用中藥免疫增強劑,具有促進正常或免疫機能低下的禽細胞因子IL-4、IFN-γ的分泌作用。
具體實施方式:
以下通過實施例來進一步描述本發(fā)明,應該理解的是,這些實施例僅用于例證的目的,決不限制本發(fā)明的范圍。
[試驗例]本發(fā)明禽用中藥免疫增強劑對普通飼養(yǎng)雞群,或對雞群中免疫抑制狀態(tài)臨床療效觀察試驗。
一、試驗對象的一般資料
采用本發(fā)明禽用中藥免疫增強劑共治療20個雞場,5000套海蘭褐商品蛋雞。
二、治療方法
用法與用量:采用本發(fā)明禽用中藥免疫增強劑,其用法與用量如下:在自由飲水中添加禽用中藥免疫增強劑,普通飼養(yǎng)雞群按2%的濃度添加,免疫抑制狀態(tài)的雞群按8%的濃度添加。
療程:連續(xù)使用9周。
三、療效評定標準
1.對普通飼養(yǎng)的雞群
顯效:2%禽用中藥免疫增強劑與空白對照組、陽性對照組比較,脾臟刺激指數(shù)差異顯著,NDV HI 抗體滴度差異顯著,脾淋巴細胞因子分泌差異顯著,胸腺、法氏囊重量差異顯著。
有效:2%禽用中藥免疫增強劑與空白對照組、陽性對照組比較,脾臟刺激指數(shù)差異不顯著,NDV HI 抗體滴度差異顯著,脾淋巴細胞因子分泌差異顯著,胸腺、法氏囊重量差異不顯著。
無效:2%禽用中藥免疫增強劑與空白對照組、陽性對照組比較,脾臟刺激指數(shù)差異不顯著,NDV HI 抗體滴度差異不顯著,脾淋巴細胞因子分泌差異不顯著,胸腺、法氏囊重量差異不顯著。
2.對免疫抑制雞群
顯效:8%禽用中藥免疫增強劑與空白對照組、陽性對照組比較,脾臟刺激指數(shù)差異顯著,NDV HI 抗體滴度差異顯著,脾淋巴細胞因子分泌差異顯著,胸腺、法氏囊重量差異顯著。
有效:8%禽用中藥免疫增強劑與空白對照組、陽性對照組比較,脾臟刺激指數(shù)差異不顯著,NDV HI 抗體滴度差異顯著,脾淋巴細胞因子分泌差異顯著,胸腺、法氏囊重量差異不顯著。
無效:8%禽用中藥免疫增強劑與空白對照組、陽性對照組比較,脾臟刺激指數(shù)差異不顯著,NDV HI 抗體滴度差異不顯著,脾淋巴細胞因子分泌差異不顯著,胸腺、法氏囊重量差異不顯著。
普通飼養(yǎng)雞群:
實施例1:禽用中藥免疫增強劑對脾淋巴細胞刺激指數(shù)的影響
2%禽用中藥免疫增強劑對普通飼養(yǎng)雞脾淋巴細胞刺激指數(shù)的影響,見表1。2%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組和左旋咪唑組,表明2%禽用中藥免疫增強劑能夠促進脾淋巴細胞的增殖。
實施例2:禽用中藥免疫增強劑對雞新城疫抗體的影響
2%禽用中藥免疫增強劑對普通飼養(yǎng)雞新城疫抗體的影響,見表2。2%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組和左旋咪唑組,表明2%禽用中藥免疫增強劑能提高雞的體液免疫功能。
實施例3:禽用中藥免疫增強劑對脾淋巴細胞分泌細胞因子的影響
2%禽用中藥免疫增強劑對普通飼養(yǎng)雞脾淋巴細胞分泌IL-4的影響,見表3。2%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組和左旋咪唑組,表明2%禽用中藥免疫增強劑能提高雞脾淋巴細胞IL-4的分泌。
2%禽用中藥免疫增強劑對普通飼養(yǎng)雞脾淋巴細胞分泌IFN-γ的影響,見表4。2%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組和左旋咪唑組,表明2%禽用中藥免疫增強劑能提高雞脾淋巴細胞IFN-γ的分泌。
實施例4:禽用中藥免疫增強劑對免疫器官指數(shù)的影響
2%禽用中藥免疫增強劑對普通飼養(yǎng)雞胸腺指數(shù)的影響,見表5。2%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組和左旋咪唑組,表明2%禽用中藥免疫增強劑能增加雞胸腺指數(shù),具有免疫增強作用。
2%禽用中藥免疫增強劑對普通飼養(yǎng)雞法氏囊指數(shù)的影響,見表6。2%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組和左旋咪唑組,表明2%禽用中藥免疫增強劑能增加雞法氏囊指數(shù),具有免疫增強作用。
免疫抑制雞群:
1日齡海蘭褐公雞,設空白對照組(Ⅰ)、病毒組(Ⅱ)、病毒+馬立克氏疫苗組(Ⅲ)、病毒+馬立克氏疫苗+8%中藥提取物組(Ⅳ),每只雞腹腔接種0.5 mL MDV,相當于3 000 PFU/只,7 日齡除Ⅰ組外其余3組免疫NDV 滅活疫苗、Lasota疫苗,使用方法按說明書進行;1 日齡Ⅲ、Ⅳ組分別注射馬立克疫苗;1日齡除Ⅰ、Ⅱ組外,Ⅲ、Ⅳ組在自由飲水中添加中藥提取物,按8%的濃度添加。
實施例5:禽用中藥免疫增強劑對脾淋巴細胞刺激指數(shù)的影響
33日齡檢測8%禽用中藥免疫增強劑對免疫抑制雞脾指數(shù)的影響,見表7。8%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組、病毒組和病毒+馬立克氏疫苗組,表明8%禽用中藥免疫增強劑能夠促進免疫抑制雞淋巴細胞的增殖。
實施例6:禽用中藥免疫增強劑對雞新城疫抗體的影響
28、35和42日齡檢測8%禽用中藥免疫增強劑對免疫抑制雞新城疫抗體的影響,見表8。8%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組、病毒組和病毒+馬立克氏疫苗組,表明8%禽用中藥免疫增強劑能提高免疫抑制雞的體液免疫功能。
實施例7:禽用中藥免疫增強劑對脾淋巴細胞分泌細胞因子的影響
28日齡檢測8%禽用中藥免疫增強劑對免疫抑制雞脾淋巴細胞分泌IL-4的影響,見表9。8%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組、病毒組和病毒+馬立克氏疫苗組,表明8%禽用中藥免疫增強劑能提高免疫抑制雞脾淋巴細胞IL-4的分泌。
28日齡檢測8%禽用中藥免疫增強劑對免疫抑制雞脾淋巴細胞分泌IFN-γ的影響,見表10。8%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組、病毒組和病毒+馬立克氏疫苗組,表明8%禽用中藥免疫增強劑能提高免疫抑制雞脾淋巴細胞IFN-γ的分泌。
實施例8:禽用中藥免疫增強劑對免疫器官指數(shù)的影響
33日齡檢測8%禽用中藥免疫增強劑對免疫抑制雞胸腺指數(shù)的影響,見表11。8%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組、病毒組和病毒+馬立克氏疫苗組,表明8%禽用中藥免疫增強劑能提高免疫抑制雞胸腺指數(shù)。
33日齡檢測8%禽用中藥免疫增強劑對免疫抑制雞法氏囊指數(shù)的影響,見表12。8%禽用中藥免疫增強劑均極顯著(P<0.01)高于空白對照組、病毒組和病毒+馬立克氏疫苗組,表明8%禽用中藥免疫增強劑能提高免疫抑制雞法氏囊指數(shù)。