本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥及其制備方法。

背景技術(shù)：

結(jié)直腸癌（Colorectal cancer，CRC）是消化道常見的惡性腫瘤之一。近年來，隨著人們物質(zhì)生活條件的改善，壽命的延長(zhǎng)和環(huán)境污染等因素，結(jié)直腸癌的發(fā)病率和死亡率逐年增加，發(fā)病亦趨向年輕化。結(jié)直腸癌發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，早期診斷困難，往往到了中后期才被發(fā)現(xiàn)。目前，臨床上用于結(jié)直腸癌的方法多以手術(shù)為主的綜合治療,且確診為結(jié)直腸癌的患者約50%-60%會(huì)發(fā)生轉(zhuǎn)移,無法性根治性切除術(shù),姑息化療是轉(zhuǎn)移性結(jié)直腸癌綜合治療的主要手段之一.然化療相關(guān)的毒性反應(yīng)限制了治療的強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間,另大部分患者難以完成足夠的周期化療治療。

大量臨床實(shí)踐證明,對(duì)中晚期病人進(jìn)行大劑量放、化療,或?qū)Ξa(chǎn)生耐藥的患者再次進(jìn)行化療只能導(dǎo)致虛弱的生命更加垂危,加速了患者死亡。臨床常常可以見到,患者死因不是因?yàn)榘┌Y本身造成,而是由于不科學(xué)、不恰當(dāng)?shù)臍灾委熕?。中醫(yī)治療可以彌補(bǔ)手術(shù)治療、放射治療、化學(xué)治療的不足,既能鞏固放療、化療的效果,又能消除放化療的毒副作用,延長(zhǎng)患者的生命。

提高及飲食結(jié)構(gòu)的改變，結(jié)腸癌比例亦逐漸增多。大腸癌的治療以手術(shù)切除癌腫為首選，輔之以放射治療、化療藥物治療及中醫(yī)藥治療等。

臨床上目前治療結(jié)直腸癌的藥物主要是化學(xué)藥品，但由于化療藥物毒性大，在殺死腫瘤細(xì)胞的同時(shí)也無選擇性的殺死白細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等人體自身免疫細(xì)胞，導(dǎo)致病人常常由于因自身免疫能力低下并發(fā)感染，患者使用不良反應(yīng)大，且療程長(zhǎng)，費(fèi)用高，在臨床使用中有較大的局限性。

中醫(yī)藥在治療腫瘤方面具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，以中藥為代表的天然類藥物具有毒副作用小、作用靶點(diǎn)多樣、耐受性好等特點(diǎn)，在治療腫瘤方面愈來愈受到重視。但是目前報(bào)道的抗結(jié)直腸癌藥物用藥量較大，成分較多，起效較慢。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中存在的問題而提供的一種抗腫瘤效果好，用藥量少，對(duì)結(jié)直腸癌術(shù)后恢復(fù)具有很好的效果，并且不良反應(yīng)低的用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥及其制備方法。

本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，其特征在于，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子10-40份，當(dāng)歸5-30份，桔梗5-25份，何首烏10-40份，五味子2-10份，仙人掌10-40份。

一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，其特征在于，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子25-30份，當(dāng)歸15-18份，桔梗12-15份，何首烏20-24份，五味子5-8份，仙人掌20-25份。

一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，其特征在于，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27份，當(dāng)歸16份，桔梗14份，何首烏22份，五味子7份，仙人掌23份。

一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法，其特征在于，其制備方法如下：

步驟1）、按照所述原料的重量份數(shù)取苦豆子、當(dāng)歸、桔梗、何首烏、五味子、仙人掌按原料和水的比例為1:8 -1:10的比例加水，文火煎煮2h，過濾后得到上清液1，備用；

步驟2）、向步驟1中過濾后的原料中按原料和水的比例為1:4-1:6的比例補(bǔ)加水，文火煎煮1h，過濾后獲得上清液2，備用；

步驟3）、將上清液1和上清液2混合，并攪拌均勻，在55℃的條件下，將混合液進(jìn)行濃縮，濃縮相對(duì)密度為1.00-1.20，然后向濃縮后的藥液中加入總量5%的濃度為1%的殼聚糖溶液，室溫條件下沉淀12h，獲得藥液3，備用；

步驟4）、將藥液3進(jìn)行濃縮，在55℃的條件下，濃縮至相對(duì)密度為1.00-1.20，所獲得的藥液即為用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥。

所述步驟4）制得的中藥干燥后可以制成散劑，顆粒劑，或裝入膠囊得膠囊劑，或壓制成片劑。

所述的水均為純化水。

本發(fā)明的藥物組合物抑制腫瘤細(xì)胞的作用明顯，主要有效成分清晰明確，質(zhì)量穩(wěn)定可控。療效與現(xiàn)有市售劑型相比效果確切，毒副作用小，具有顯著的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

本發(fā)明無毒副作用，所采用的配方中的藥物藥理為：

苦豆子：味苦、性寒，有毒。歸胃、大腸經(jīng)。清熱燥濕，止痛，殺蟲?？喽棺游稑O苦、性寒有毒，具有清熱解毒，抗菌消炎、止痛殺蟲等作用。用于藥物開發(fā)的主要有8種生物堿：苦參堿（matrine MT），氧化苦參堿（oxymatrinel OMT），槐果堿（sophocarpine sc），氧化槐果堿一（oxysophocarpine OSC），槐胺堿（sophoramine SA）槐定堿（sophoridine SRI），萊曼堿（1ehmannine LEH），苦豆堿（alopefine ALO）?？喽棺由飰A的藥理作用：①對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用，體現(xiàn)在鎮(zhèn)靜催眠、鎮(zhèn)痛及降溫；②對(duì)心血管系統(tǒng)的作用，體現(xiàn)在抗心律失常、正性肌力作用，降壓和降低心率作用，對(duì)心肌缺血和梗塞的保護(hù)作用，降血脂作用；③抗病毒、抗炎及免疫抑制作用，苦參總堿能抑制多種病毒繁殖．增強(qiáng)免疫調(diào)節(jié)功能和免疫促進(jìn)作用；④抗腫瘤作用，對(duì)肝癌細(xì)胞抑制作用明顯，對(duì)宮頸癌、淋巴肉瘤、肺癌也有抑制作用；⑤對(duì)平滑肌的作用，總堿和一些單體生物堿均能對(duì)抗由炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)的離體回腸收縮，對(duì)支氣管平滑肌具有松弛作用，對(duì)整體模型也有作用：⑥臨床應(yīng)用苦豆子浸膏片、苦豆堿治療急性菌痢，槐果堿片治療支氣管哮喘，苦參堿治療婦科炎癥、苦參素注射液治療慢性乙型病毒性肝炎均取得很好的療效。

當(dāng)歸：味甘、辛，性溫。歸肝、心、脾經(jīng)。用于血虛萎黃，眩暈心悸，月經(jīng)不調(diào)，經(jīng)閉痛經(jīng)，虛寒腹痛，風(fēng)濕痹痛，跌撲損傷，癰疽瘡瘍，腸燥便秘。酒當(dāng)歸活血通經(jīng)。用于經(jīng)閉痛經(jīng)，風(fēng)濕痹痛，跌撲損傷?！侗静菡x》記載：“歸身主守，補(bǔ)固有功，歸尾主通，逐瘀自驗(yàn)，而歸頭秉上行之性，便血溺血，崩中淋帶等之陰隨陽陷者，升之固宜，若吐血衄血之氣火升浮者，助以溫升，豈不為虎傅翼？是止血二字之所當(dāng)因癥而施，固不可拘守其止之一字而誤謂其無所不可也。且凡失血之癥，氣火沖激，擾動(dòng)血絡(luò)，而循行不守故道者，實(shí)居多數(shù)，當(dāng)歸之氣味俱厚，行則有余，守則不足，亦不可過信歸所當(dāng)歸一語，而有循名失實(shí)之咎。”

桔梗：味苦、辛，性平。歸肺經(jīng)。宣肺，利咽，祛痰，排膿。用于咳嗽痰多，胸悶不暢，咽痛音啞，肺癰吐膿。《別錄》記載：“利五臟腸胃，補(bǔ)血?dú)猓疅犸L(fēng)痹，溫中消谷，療喉咽痛，下蠱毒?！?/p>

何首烏：味甘，性溫，無毒。歸肝、腎經(jīng)。《本草綱目》記載：此物氣溫味苦澀，苦補(bǔ)腎，溫補(bǔ)肝，能收斂精氣，所以能養(yǎng)血益肝，固精益腎，健筋骨，烏發(fā)，為滋補(bǔ)良藥，不寒不燥，功在地黃、天門冬諸藥之上。氣血太和，則風(fēng)虛、癰腫、瘰疬諸疾可知（除）矣。

五味子：味酸、甘，性溫。歸肺、心、腎經(jīng)。收斂固澀，益氣生津，補(bǔ)腎寧心。用于久嗽虛喘，夢(mèng)遺滑精，遺尿尿頻，久瀉不止，自汗盜汗，津傷口渴，內(nèi)熱消渴，心悸失眠?！侗静輨e錄》記載：養(yǎng)五臟，除熱，生陰中肌者，五味子專補(bǔ)腎，兼補(bǔ)五臟，腎藏精，精盛則陰強(qiáng)，收攝則真氣歸元，而丹田暖，腐熟水谷，蒸糟粕而化精微，則精自生，精生則陰長(zhǎng)，故主如上諸疾也。

仙人掌：味苦，性寒。歸胃、肺、大腸經(jīng)。行氣活血，解毒消腫，涼血止血。用于胃痛，瘤塊，痢疾，喉痛，肺熱咳嗽，肺癆咯血，吐血，痔血，瘡瘍疔毒，乳痛，痄腮，癬疾，蛇蟲咬傷，燙傷，凍傷。仙人掌在中國(guó)做為藥用首載于中國(guó)清代趙學(xué)敏所著的《本草綱目拾遺》。據(jù)該書記載，仙人掌味淡性寒，功能行氣活血，清熱解毒，消腫止痛，潤(rùn)腸止血，健脾止瀉，安神利尿，可內(nèi)服外用治療多種疾病，清代劉善術(shù)著的《草木便方》中記載，仙人掌苦澀性寒，五痔瀉血治不難，小兒白禿麻油擦，蟲瘡疥癩洗安然?！侗静萸笤份d：寒，消諸痞初起，洗痔?！蛾懘ū静荨酚涊d有消炎解毒，排膿生肌的作用，用于瘡癰癤腫咳嗽的治療。《嶺南采藥錄》記載：“仙人掌焙熱熨之，用于治療乳癰初起結(jié)核。《閩南民間草藥》中說，用仙人掌鮮全草適量，共搗敷患處，治透掌疔?！稄V西中草藥》載：仙人掌止瀉，治腸炎腹瀉。《閩東本草》載：能去痰，解腸毒，健胃，止痛，滋補(bǔ)，舒筋活絡(luò)，涼血止痛，療傷止血。治腸風(fēng)痔漏下血、肺癰、胃病，跌打損傷?！逗纤幬镏尽酚涊d：仙人掌消腫止痛，行氣活血，祛濕退熱生肌?！吨袊?guó)藥植圖鑒》記載：仙人掌外皮搗爛，可敷火傷，急性乳腺炎并治足胝。煎水服，可治痢疾。《分類草藥性》載：專治氣痛，消腫毒，惡瘡?！顿F州民間方藥集》載：仙人掌為健胃滋養(yǎng)強(qiáng)壯劑，又可補(bǔ)脾、鎮(zhèn)咳、安神。治心胃氣痛、蛇傷、浮腫。《圖經(jīng)本草》記載:仙人掌無毒，與甘草浸酒服，治腸痔、瀉血。從資料記載可以看出，仙人掌治療疔瘡腫毒的作用顯著.現(xiàn)有報(bào)道除用于痢疾、哮喘、胃痛、腸痔瀉血外，還用于腎炎、糖尿病、心悸失眠、動(dòng)脈硬化、高血壓、心臟病、肥胖癥及肝病的輔助治療。

本發(fā)明的諸藥配合合理，對(duì)抑制腫瘤細(xì)胞的作用明顯，主要有效成分清晰明確，質(zhì)量穩(wěn)定可控。療效與現(xiàn)有市售劑型相比效果確切，毒副作用小，具有顯著的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

附圖說明

圖1為用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥對(duì)HCT-116細(xì)胞株增殖、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和Hoechst 33258熒光染色的影響。

圖2 為用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥對(duì)HCT-116細(xì)胞克隆的形成、實(shí)體瘤生長(zhǎng)曲線和對(duì)實(shí)體瘤的抑制作用的影響。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

如上所述用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法如下：

一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法，其制備方法如下：

步驟1）、按照所述原料的重量份數(shù)取苦豆子、當(dāng)歸、桔梗、何首烏、五味子、仙人掌按原料和水的比例為1:8 -1:10的比例加水，文火煎煮2h，過濾后得到上清液1，備用；

步驟2）、向步驟1中過濾后的原料中按原料和水的比例為1:4-1:6的比例補(bǔ)加水，文火煎煮1h，過濾后獲得上清液2，備用；

步驟3）、將上清液1和上清液2混合，并攪拌均勻，在55℃的條件下，將混合液進(jìn)行濃縮，濃縮相對(duì)密度為1.00-1.20，然后向濃縮后的藥液中加入總量5%的濃度為1%的殼聚糖溶液，室溫條件下沉淀12h，獲得藥液3，備用；

步驟4）、將藥液3進(jìn)行濃縮，在55℃的條件下，濃縮至相對(duì)密度為1.00-1.20，所獲得的藥液即為用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥。

所述步驟4）制得的中藥干燥后可以制成散劑，顆粒劑，或裝入膠囊得膠囊劑，或壓制成片劑。

所述的水均為純化水。

實(shí)施例2、一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

如上所述用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法如下：

一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法，其制備方法如下：

步驟1）、按照所述原料的重量份數(shù)取苦豆子、當(dāng)歸、桔梗、何首烏、五味子、仙人掌按原料和水的比例為1:8 -1:10的比例加水，文火煎煮2h，過濾后得到上清液1，備用；

步驟2）、向步驟1中過濾后的原料中按原料和水的比例為1:4-1:6的比例補(bǔ)加水，文火煎煮1h，過濾后獲得上清液2，備用；

步驟3）、將上清液1和上清液2混合，并攪拌均勻，在55℃的條件下，將混合液進(jìn)行濃縮，濃縮相對(duì)密度為1.00-1.20，然后向濃縮后的藥液中加入總量5%的濃度為1%的殼聚糖溶液，室溫條件下沉淀12h，獲得藥液3，備用；

步驟4）、將藥液3進(jìn)行濃縮，在55℃的條件下，濃縮至相對(duì)密度為1.00-1.20，所獲得的藥液即為用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥。

得到的中藥，加入50g木糖醇，純化水定容至1000ml，過濾，灌裝，滅菌。即制得本發(fā)明專利口服液。

實(shí)施例3、一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

如上所述用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法如下：

一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法，其制備方法如下：

步驟1）、按照所述原料的重量份數(shù)取苦豆子、當(dāng)歸、桔梗、何首烏、五味子、仙人掌按原料和水的比例為1:8 -1:10的比例加水，文火煎煮2h，過濾后得到上清液1，備用；

步驟2）、向步驟1中過濾后的原料中按原料和水的比例為1:4-1:6的比例補(bǔ)加水，文火煎煮1h，過濾后獲得上清液2，備用；

步驟3）、將上清液1和上清液2混合，并攪拌均勻，在55℃的條件下，將混合液進(jìn)行濃縮，濃縮相對(duì)密度為1.00-1.20，然后向濃縮后的藥液中加入總量5%的濃度為1%的殼聚糖溶液，室溫條件下沉淀12h，獲得藥液3，備用；

步驟4）、將藥液3進(jìn)行濃縮，在55℃的條件下，濃縮至相對(duì)密度為1.00-1.20，所獲得的藥液即為用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥。

然后取用麥芽糊精300g，口服葡萄糖500g混合粉碎，過80目篩。加入中藥成份。用60%乙醇溶液做潤(rùn)濕劑，制粒。

制得濕粒置鼓風(fēng)干燥箱中干燥，45℃條件下2小時(shí)，60℃條件下4小時(shí)。

整粒，分裝，即制得本發(fā)明專利顆粒劑。

實(shí)施例4、本發(fā)明體外對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞HCT-116及小鼠CT26移植瘤的抑制作用實(shí)驗(yàn)

結(jié)直腸癌細(xì)胞株HCT-116、CT26購自江蘇凱基生物科技有限公司，DMEM高糖培養(yǎng)基購自Invitrogen公司，胎牛血清由蘭州明海生物技術(shù)有限公司提供，1%青霉素-鏈霉素雙抗、胰酶、MTT購自Sigma-Aldrich公司，氟尿嘧啶（5-Fu）購自上海旭東海普藥業(yè)有限公司,本發(fā)明制劑（口服液）。

試驗(yàn)方法：

1.1 細(xì)胞培養(yǎng)

將HCT-116、CT26細(xì)胞置于DMEM高糖培養(yǎng)基中培養(yǎng)，內(nèi)含12%胎牛血清和1%青鏈霉素雙抗，在37℃，5% CO2的培養(yǎng)箱中常規(guī)培養(yǎng)，2-3天更換一次培養(yǎng)液，細(xì)胞生長(zhǎng)至80-90%融合時(shí)，胰酶消化傳代。

1.2 MTT法檢測(cè)HCT-116細(xì)胞增殖率

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HCT-116細(xì)胞胰酶消化，光鏡下細(xì)胞計(jì)數(shù)，按每孔5000個(gè)細(xì)胞接種于96孔板中。待24 h細(xì)胞貼壁后，分別加入終濃度為3、6、12、24、48、96、192 mg/L的本發(fā)明制劑，繼續(xù)孵育48 h后，每孔加入20 μl 的MTT溶液(5mg/mL)。孵育4 h后，小心棄掉上清，每孔加入150 μl的DMSO。避光緩慢振蕩10min，充分溶解紫色結(jié)晶，置于酶標(biāo)儀內(nèi)570nm波長(zhǎng)處檢測(cè)各孔吸光度(OD)值，同時(shí)計(jì)算IC50。

1.3 HCT-116細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的分析

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HCT-116細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度，以10000個(gè)／ml／孔分于7個(gè)24 孔板，待24h后細(xì)胞完全貼壁，加入各劑量組藥物（分別為100、50、25 mg/L本發(fā)明制劑組，100mg/L 5-Fu陽性對(duì)照組及陰性對(duì)照組)，每組設(shè)3個(gè)復(fù)孔。于加藥后每隔24h取一培養(yǎng)板，對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化、臺(tái)盼藍(lán)計(jì)數(shù)處理，連續(xù)計(jì)數(shù)7天，繪制生長(zhǎng)曲線。

1.4 HCT-116細(xì)胞平板集落形成實(shí)驗(yàn)

以不同濃度的本發(fā)明制劑（100, 50, and 25 mg/L）處理HCT-116 細(xì)胞24h后，藥物處理組及陰性對(duì)照組接種在6孔板中，每孔200個(gè)細(xì)胞，持續(xù)培養(yǎng)14天。經(jīng)甲醇固定后Giemsa染色，鏡下計(jì)數(shù)每孔集落數(shù)（≥50個(gè)細(xì)胞計(jì)為一個(gè)集落），并計(jì)算集落形成抑制率。集落形成抑制率=（1-藥物處理組集落數(shù)/陰性對(duì)照組集落數(shù)）×100%。

1.5 Hoechst 33258熒光染色實(shí)驗(yàn)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期HCT-116細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞濃度，以每孔5000個(gè)細(xì)胞接種到24孔板中。待24h細(xì)胞貼壁后，加入不同濃度的本發(fā)明制劑（100、50、25 mg/L），繼續(xù)培養(yǎng)48h，棄去上清，PBS洗3次，4%中性多聚甲醛固定30min，PBS洗3次，加入2mg/L Hoechst 33258室溫染色30min，再用PBS洗3次，倒置熒光顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，并計(jì)數(shù)正常細(xì)胞和凋亡細(xì)胞數(shù)。凋亡率（%）=凋亡細(xì)胞數(shù)/(正常細(xì)胞數(shù)+凋亡細(xì)胞數(shù)) ×100%。

1.6 小鼠CT26結(jié)直腸癌細(xì)胞移植瘤實(shí)驗(yàn)

取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞株CT26，經(jīng)胰酶消化、離心沉淀后制成約細(xì)胞懸液(1×106個(gè)細(xì)胞/0.1 ml)。將細(xì)胞懸液注入雄性ICR小鼠（18~22g）左側(cè)腋窩皮下，每只大約0.1 ml（即1×106個(gè)細(xì)胞），建立結(jié)直腸癌荷瘤小鼠模型。接種后后用游標(biāo)卡尺測(cè)量腫塊，種瘤10 d后隨機(jī)分為陰性對(duì)照組（NS）、5-Fu組（30 mg/kg）及本發(fā)明制劑組（300、150、75 mg/kg）。腹腔注射給藥，每日1次，共兩周，隔一天測(cè)瘤體積1次（腫瘤體積的計(jì)算公式為：V=l /2×a×b2，其中a、b分別表示腫塊長(zhǎng)度和寬度）。末次給藥后24小鼠，頸椎脫臼處死小鼠，將瘤組織剝離稱重。

1.7 統(tǒng)計(jì)處理

實(shí)驗(yàn)結(jié)果均用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料都以 ±SD表示，組間的顯著性差異采用單因素方差分析(ANOVA)。p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

1.1 本發(fā)明制劑對(duì)結(jié)直腸癌HCT-116細(xì)胞株增殖的影響

本發(fā)明制劑對(duì)HCT-116有直接抑制作用，并呈一定的劑量依賴性，如圖1B所示。同時(shí)經(jīng)計(jì)算本發(fā)明制劑對(duì)HCT-116 48h IC50 = 59.28 mg/L。

1.2 本發(fā)明制劑對(duì)HCT-116細(xì)胞生長(zhǎng)曲線的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，在所加藥物濃度為25、50、100mg/L時(shí)，培養(yǎng)48h后HCT-116細(xì)胞的生長(zhǎng)開始呈現(xiàn)抑制現(xiàn)象，隨著所用藥物濃度的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)，藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用增強(qiáng)，并具有一定的量效和時(shí)效關(guān)系，如圖1C所示。

1.3 本發(fā)明制劑對(duì)HCT-116細(xì)胞Hoechst 33258熒光染色的影響

陰性對(duì)照組細(xì)胞細(xì)胞核呈均勻藍(lán)色熒光，到本發(fā)明制劑劑量達(dá)100 mg/L時(shí)，大部分細(xì)胞核出現(xiàn)固縮，染色質(zhì)高度凝聚、邊緣呈致密顆粒狀強(qiáng)熒光，亦可見細(xì)胞核裂解為碎顆粒狀，產(chǎn)生凋亡小體，如圖1D所述。本發(fā)明制劑處理組（25、50、100 mg/L）凋亡率分別為46.37%、65.71%和87.62%，如圖1E所示。

1.4本發(fā)明制劑對(duì)HCT-116細(xì)胞克隆形成的影響

與陰性對(duì)照組比較，本發(fā)明制劑25、50、100mg/L使HCT-116細(xì)胞克隆形成數(shù)量明顯減少，抑制率從51.1% (25 mg/L) 到 93.9% (100 mg/L) ，如圖2A、圖2B所示。

1.5 本發(fā)明制劑對(duì)結(jié)直腸癌CT26實(shí)體瘤生長(zhǎng)曲線的影響

與陰性對(duì)照組比較，本發(fā)明制劑各劑量組實(shí)體瘤組織體積增長(zhǎng)緩慢，且呈一定的量效關(guān)系，如圖2C所示。

1.6 本發(fā)明制劑對(duì)結(jié)直腸癌CT26實(shí)體瘤的抑制作用

與陰性對(duì)照組比較，本發(fā)明制劑50、100mg/L劑量組可明顯抑制實(shí)體瘤重量如圖2D、圖2E所示。

實(shí)施例5：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌21克。

以下實(shí)施例中用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥的制備方法與實(shí)施例1相同，不再贅述。

實(shí)施例6：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子10克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例7：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸5克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例8：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗5克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例9：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏10克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例10：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子2克，仙人掌23克。

實(shí)施例11：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌10克。

實(shí)施例12：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子40克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例13：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸30克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例14：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗25克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例15：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏40克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例16：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子10克，仙人掌23克。

實(shí)施例17：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌40克。

實(shí)施例18：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子25克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例19：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸15克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例20：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗12克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例21：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏20克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例22：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例23：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子5克，仙人掌23克。

實(shí)施例24：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌20克。

實(shí)施例25：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子30克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例26：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸18克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例27：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗15克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例28：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏24克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例29：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子8克，仙人掌23克。

實(shí)施例30：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌25克。

實(shí)施例31：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子25克，當(dāng)歸15克，桔梗14克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例32：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸15克，桔梗12克，何首烏22克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例33：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗12克，何首烏20克，五味子7克，仙人掌23克。

實(shí)施例34：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏20克，五味子5克，仙人掌23克。

實(shí)施例35：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子27克，當(dāng)歸16克，桔梗14克，何首烏22克，五味子5克，仙人掌20克。

實(shí)施例36：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子250克，當(dāng)歸160克，桔梗150克，何首烏200克，五味子50克，仙人掌200克。

實(shí)施例37：一種用于結(jié)直腸癌術(shù)后治療的中藥，它是由下述重量份數(shù)的原料配制而成：苦豆子220克，當(dāng)歸180克，桔梗150克，何首烏220克，五味子50克，仙人掌200克。