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茜草素和/或大葉茜草素的新用途的制作方法

文檔序號:11185122閱讀:1213來源:國知局

本發(fā)明涉及醫(yī)藥和/或保健品技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及茜草素和/或大葉茜草素的新用途,如,其能夠促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖的吸收。



背景技術(shù):

茜草是茜草科茜草屬植物茜草的干燥根及根莖,其性寒、味苦,是行血、涼血的良藥,主要含有蒽醌、萘醌、環(huán)己肽、多糖、萜類等化學(xué)成分。茜草素是茜草中的蒽醌類成分,大葉茜草素是茜草中的萘醌類成分。

近年來,對茜草的研究主要集中在改善血瘀模型、抗氧化、抗炎、免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、保肝等方面,目前尚未見到有關(guān)其能促進(jìn)脂肪細(xì)胞對糖吸收的相關(guān)報道。



技術(shù)實現(xiàn)要素:

本發(fā)明目的在于提供一種茜草素和/或大葉茜草素的新用途,其可用作制備促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖吸收的藥物和/或保健品。

為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用如下技術(shù)方案:

茜草素和/或大葉茜草素用作制備促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖吸收的藥物和/或保健品,即茜草素和/或大葉茜草素在制備促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖吸收的藥物和/或保健品方面的應(yīng)用。

進(jìn)一步的,茜草素和/或大葉茜草素與本領(lǐng)域常規(guī)輔料復(fù)配制成具有促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖吸收的復(fù)方制劑。

所述的復(fù)方制劑,其劑型可以為片劑、顆粒劑、膠囊劑、丸劑或注射劑等。

茜草素,分子式c14h8o4,結(jié)構(gòu)如下所示:

。

大葉茜草素,分子式c17h16o4,其結(jié)構(gòu)如下所示:

茜草素和大葉茜草素可以直接從茜草科茜草屬植物茜草中提取獲得,也可以購買普通市售產(chǎn)品,如可以購買:成都普菲德生物技術(shù)有限公司、成都吉歐特生物科技有限公司、浙江天草生物制品有限公司等廠家的市售產(chǎn)品。

本發(fā)明是以脂肪細(xì)胞為研究對象,探討了茜草素、大葉茜草素對脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的吸收作用。經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn):茜草素和大葉茜草素能夠有效促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖的吸收,可以用作制備促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖吸收的藥物和/或保健品,為茜草素和大葉茜草素的應(yīng)用開辟了一條新途徑。

具體實施方式

以下結(jié)合實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)一步地詳細(xì)介紹,但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此。

以大鼠附睪和腎周脂肪細(xì)胞為細(xì)胞模型,培養(yǎng)液中加入茜草素或大葉茜草素培養(yǎng),考察茜草素或大葉茜草素對脂肪細(xì)胞外液上清中葡萄糖的影響。

應(yīng)用試驗1茜草素促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖的吸收。

儀器材料:lrh-150恒溫培養(yǎng)箱(上海一恒科技有限公司);電熱恒溫震蕩水槽(上海一恒科技有限公司,dkz-2系列);超凈工作臺(吳江市凈化設(shè)備總廠);tgl-16gr型高速冷凍離心機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠);powergen125組織勻漿機(jī)(fisherscientific);multiskango全波長酶標(biāo)儀(thermofisherscientificoyratastie2,f1-01620vantaa,finland);cs-h1型混合器(北京博勵陽科技公司);葡萄糖測定試劑盒(上海榮盛生物藥業(yè)有限公司,20150804147);glu標(biāo)準(zhǔn)品(南京建成生物工程研究所);hanks平衡鹽溶液(maccgene,e11r1090);ⅰ型膠原蛋白酶(csa號:9007-34-5);胰島素(cas號:11070-73-8);胎牛血清(浙江天航科技股份有限公司,20150514);d-葡萄糖(北京希凱創(chuàng)新科技有限公司,2265c297);茜草素(河南大學(xué)中藥研究所提供)、大葉茜草素(河南大學(xué)中藥研究所提供);腎上腺素、青霉素鏈霉素混合液(solarbio,20151029)。

實驗動物:spf級的sd大鼠,雄性,體重:180g±20g,由河南省動物中心提供,許可證號:scxk(豫)2015-0004。

實驗方法:大鼠脫頸處死,乙醇浴5min,無菌開腹取附睪及腎周脂肪組織。于含有青鏈霉素(100u/ml、鏈霉素100μg/ml,下同)的hanks平衡鹽溶液中剔除附帶血管,青霉素并漂洗脂肪組織2次。剪碎,8000r/min研磨組織3min,加入1.5倍體積的0.1%ⅰ型膠原蛋白酶于37℃電熱恒溫震蕩水槽中水浴消化1.5h。然后加入2—3倍體積的胎牛血清終止消化,1200g離心10min,棄下層、留上層。上層脂肪細(xì)胞洗滌2次(轉(zhuǎn)速1200g,時間10min)。加入3ml含青鏈霉素的hanks平衡鹽溶液,過0.075mm細(xì)胞篩,調(diào)細(xì)胞濃度:2×107。脂肪細(xì)胞分為三組:空白組、陽性對照組、給藥組。設(shè)4u胰島素作為茜草素和大葉茜草素的陽性對照組。以含0.5%dmso的hanks平衡鹽溶液作為茜草素的溶劑。以含10%dmso的hanks平衡鹽溶液作為大葉茜草素的溶劑。以含0.5%dmso的hanks平衡鹽溶液作為茜草素的空白組。以含10%dmso的hanks平衡鹽溶液作為大葉茜草素的空白組。

96孔培養(yǎng)板中,加入40μl的樣品溶液、100μl細(xì)胞懸液、30μl1mg/mld-葡萄糖溶液和30μl胎牛血清建成200μl反應(yīng)體系,每組設(shè)6個復(fù)孔。37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30min,加入10-5mol/l腎上腺素50μl繼續(xù)培養(yǎng)3h,冰浴終止反應(yīng)。取上清2μl用葡萄糖測定試劑盒測定葡萄糖含量。結(jié)果見表1。

葡萄糖吸收度=空白組葡萄糖濃度—給藥組/陽性對照組葡萄糖濃度。

數(shù)據(jù)處理:結(jié)果采用均值±sd值表示,數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用spss19.0軟件單因素方差分析法(one-wayanova)比較其顯著性差異。

表1、茜草素對脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的影響

注:與空白組相比,***p<0.001,0.001<**p<0.01,*p<0.05

由表1可知,4u胰島素能夠降低脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的含量,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001)。各給藥組茜草素均能夠降低脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的含量,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001)。說明各給藥組茜草素均能夠降低脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的含量。由葡萄糖吸收度可知,各給藥組茜草素均能促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖的吸收,由此說明:茜草素可用作制備促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖吸收的藥物和/或保健品。

應(yīng)用試驗2大葉茜草素促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖的吸收

實驗方法:脂肪細(xì)胞制備和給藥方法同應(yīng)用試驗1,結(jié)果見表2。

表2、大葉茜草素對脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的影響

注:與空白組相比,***p<0.001,0.001<**p<0.01,*p<0.05

由表2可知,4u胰島素能夠降低脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的含量,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.001)。各給藥組大葉茜草素均能夠降低脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的含量,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01)。說明各給藥組大葉茜草素均能夠降低脂肪細(xì)胞外液葡萄糖的含量。由葡萄糖轉(zhuǎn)移度可知,各給藥組大葉茜草素均能促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖的吸收。由此說明:大葉茜草素可用作制備促進(jìn)脂肪細(xì)胞對葡萄糖吸收的藥物和/或保健品。

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