本發(fā)明屬于獸藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及臭氧化油單獨或聯(lián)合用藥用于奶畜養(yǎng)殖中預(yù)防和治療疾病。具體涉及臭氧化油通過乳房和子宮灌注等的給藥途徑預(yù)防和治療奶畜子宮內(nèi)膜炎、乳房炎、胎衣不下。
背景技術(shù)：
：VelioBocci在《臭氧治療學(xué)》一書中概述了使用低劑量的臭氧氣體能夠發(fā)揮許多有益功能，且無副作用，即臭氧療法（見VelioBocci撰寫的《Oxygen-OzoneTherapy》，北京大學(xué)醫(yī)學(xué)出版社，2004）。臭氧療法可以通過多種給藥途徑來實現(xiàn)，并針對不同疾病產(chǎn)生不同的功效。臭氧化油外用作為抗菌劑、除臭劑用于褥瘡和潰瘍等皮膚病的治療藥物。因此，現(xiàn)已知臭氧具有氧化和抗菌作用。將臭氧化油直接灌胃用于幽門螺旋桿菌引起的胃炎的治療。肌肉或皮下注射臭氧氣體來治療慢性病毒肝炎和血管性疾病。陰道直接通入臭氧氣體能夠治愈炎癥和細菌感染。將臭氧氣體直接與一定體積的血液在體外混合，再回輸給患者被稱為自體血療法，能夠調(diào)理人體內(nèi)環(huán)境，降低機體的敏感性和增強機體免疫力。直腸直接吹臭氧氣體能夠改善帕金森病的癥狀（見LambertoRe，MohamedN.Mawsouf，SilviaMenendez，OlgaS.Leon，GregorioM.Sanchez，andFrankHernandez撰寫的《OzoneTherapy:ClinicalandBasicEvidenceofItsTherapeuticPotential》，ArchivesofMedicalResearch，2008，39:17-26）。腹腔給臭氧氣體能夠保護心臟免受急性心肌梗塞的損傷（ClaraDiFilippo，MargheritaLuongo，RaffaeleMarfella，F(xiàn)rancaFerraraccio，BiagioLettieri，AnnalisaCapuano，F(xiàn)rancescoRossi，MicheleD'Amico撰寫的《Oxygen/ozoneprotectstheheartfromacutemyocardialinfarctionthroughlocalincreaseofeNOSactivityandendothelialprogenitorcellsrecruitment》，Naunyn-SchmiedArchPharmacol，2010，382:287–291）。從結(jié)構(gòu)上看，盡管臭氧化油和臭氧氣體（:O-O-O）并不是同一物質(zhì)，但臭氧化油是通過對油的加成臭氧得到，故在其分子中具有臭氧化物結(jié)構(gòu)，與臭氧氣體的功能相似。以上各種給藥途徑均表明臭氧能夠以氣體的方式直接被機體吸收并發(fā)揮功能。臭氧氣體的功能可能通過以下三個途徑來實現(xiàn)：（1）、臭氧在體內(nèi)通過生物化學(xué)反應(yīng)，生成類似活性氧的物質(zhì)（羥基自由基OH-、超氧陰離子O2-等），廣泛影響著機體氧化還原系統(tǒng)；（2）、臭氧能夠引起內(nèi)皮祖細胞聚集和促進一氧化氮（NO）的生成，起到舒張血管的作用；（3）、臭氧能夠誘導(dǎo)骨髓干細胞到血管損傷部位，促進損傷血管修復(fù)重建，但具體機制尚不明確。上述給藥途徑存在諸多缺陷：沿途與太多物質(zhì)接觸，難以保證氣體進入機體的有效濃度。若給予過量極易誘發(fā)機體產(chǎn)生不適反應(yīng)，且操作過程繁瑣，再加上療程較長，患者難以接受。尤其是自體血療法，每周2～3次，連續(xù)10周為一療程。本發(fā)明以油與臭氧加成的方式，得到臭氧化油。在常態(tài)下亦可長期穩(wěn)定保存；還能定量控制臭氧化油進入機體，從而避免通過其它給藥方式給藥，人為造成藥量不當(dāng)。在臭氧化油產(chǎn)品中，臭氧化橄欖油、葵花油、大豆油作為抗菌劑、除臭劑用于褥瘡和潰瘍等皮膚病的治療的外用藥品已經(jīng)上市。但將臭氧化油通過子宮和乳房灌注的形式給藥而產(chǎn)生功效，目前尚無報道。在本發(fā)明中，臭氧化油通過腹腔注射、靜脈注射、皮下注射、肌肉注射和栓劑的方式，也能夠產(chǎn)生藥物作用。臭氧廣泛存在于常見的大氣中，具有多種生物活性，如：心血管保護作用、抗氧化作用、抗紫外及抗輻射作用、抗誘變及抗癌作用、抗菌作用、抗病毒作用、免疫調(diào)節(jié)作用等。在醫(yī)藥化工和食品等領(lǐng)域都具有廣泛的應(yīng)用。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是利用臭氧化油來預(yù)防和治療奶畜子宮內(nèi)膜炎、乳房炎、胎衣不下，制備簡便、成本低廉。經(jīng)臨床應(yīng)用驗證，本發(fā)明具有療效顯著，劑量低，無毒副作用，有效率高等優(yōu)點。在本發(fā)明中，之所以選擇權(quán)利要求1、2所述的各種油中的一種、兩種和兩種以上，是因為這些油不飽和脂肪酸含量較高，其中核桃油的不飽和脂肪酸高達92%以上，在不飽和脂肪酸結(jié)構(gòu)中至少有一個烯烴類雙鍵。若將權(quán)利要求1、2中的一種、兩種和兩種以上含不飽和脂肪酸高的油與權(quán)利要求3～7中的一種、兩種和兩種以上的表面活性劑混合，亦能與臭氧發(fā)生加成反應(yīng)?？梢娭灰映晌锏慕Y(jié)構(gòu)中存在烯烴不飽和鍵即可與臭氧發(fā)生加成反應(yīng)，不飽和鍵數(shù)目越多，反應(yīng)越容易發(fā)生，且與臭氧加成的量越多，加成物能夠攜帶臭氧分子的數(shù)目也越多。為達到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案將結(jié)合下面的制作流程和實施方式進行簡單的說明。1、制備臭氧氣體。2、制備臭氧化油。3、制備臭氧化橄欖油。4、制備含表面活性劑的臭氧化油。5、臭氧化橄欖油治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的臨床效果。6、臭氧化橄欖油治療奶牛乳房炎的臨床效果。7、臭氧化橄欖油治療奶山羊臨床型乳房炎的臨床效果。8、臭氧化橄欖油治療奶牛胎衣不下的臨床效果。具體實施方式下列非限制性實施例用于說明本發(fā)明。實施例1臭氧化橄欖油的制備1、制備臭氧氣體。本發(fā)明采用醫(yī)用氧氣通過臭氧發(fā)生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術(shù)有限責(zé)任公司設(shè)計生產(chǎn)的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油的整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發(fā)生熱解反應(yīng)。3、橄欖油3kg置入反應(yīng)釜中；臭氧以150m3/h流速加入，總反應(yīng)時間為20小時。反應(yīng)結(jié)束后，余氣滅活。4、得到臭氧化橄欖油濃度為40mg/L，25℃可穩(wěn)定保存十個月。實施例2臭氧化橄欖油、大豆油和花生油混合油的制備1、制備臭氧氣體。本發(fā)明采用醫(yī)用氧氣通過臭氧發(fā)生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術(shù)有限責(zé)任公司設(shè)計生產(chǎn)的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發(fā)生熱解反應(yīng)。3、橄欖油1kg，大豆油1kg和花生油1kg置入反應(yīng)釜中；臭氧以150m3/h流速加入，總反應(yīng)時間為20小時。反應(yīng)結(jié)束后，余氣滅活。4、得到臭氧化混合油濃度為40mg/L，25℃可穩(wěn)定保存十個月。實施例3含表面活性劑的臭氧化橄欖油的制備1、制備臭氧氣體。本發(fā)明采用醫(yī)用氧氣通過臭氧發(fā)生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術(shù)有限責(zé)任公司設(shè)計生產(chǎn)的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發(fā)生熱解反應(yīng)。3、橄欖油3kg置入反應(yīng)釜中，緩慢加入失水山梨醇單油酸酯聚氧乙烯醚（吐溫80）20mL，混勻，臭氧以150m3/h流速加入，總反應(yīng)時間為20小時。反應(yīng)結(jié)束后，余氣滅活。4、得到臭氧化橄欖油濃度為40mg/L，25℃可穩(wěn)定保存十個月。實施例4含表面活性劑和助表面活性劑的臭氧化橄欖油制備1、制備臭氧氣體。本發(fā)明采用醫(yī)用氧氣通過臭氧發(fā)生器來制備臭氧氣體。選自西安德潤生物技術(shù)有限責(zé)任公司設(shè)計生產(chǎn)的DRO3-A型臭氧機（功率≦55W）。2、制備臭氧化油整個過程須要在20～25℃進行，確保臭氧化油不會發(fā)生熱解反應(yīng)。3、橄欖油3kg置入反應(yīng)釜中，緩慢加入失水山梨醇單油酸酯聚氧乙烯醚（吐溫80）20mL和純乙醇20mL，混勻，臭氧以150m3/h流速加入，總反應(yīng)時間為20小時。反應(yīng)結(jié)束后，余氣滅活。4、得到臭氧化橄欖油濃度為40mg/L，25℃可穩(wěn)定保存十個月。實施例5臭氧化橄欖油治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的臨床效果:試驗動物楊陵某奶牛養(yǎng)殖場3～5齡，3～5胎經(jīng)產(chǎn)奶牛，體重約700～850kg，經(jīng)過臨床診斷為患奶牛子宮內(nèi)膜炎奶牛50頭。實驗用藥本發(fā)明實施例1中得到的臭氧化橄欖油；土霉素購自天津軒耀生物科技有限公司。用藥量40mL-50mL，候溫子宮灌注，每天1次，3d為一療程。診斷標準陰道有中等程度炎癥、充血，有少量絮狀物或膿性分泌物，宮頸陰道部腫脹、充血。直腸檢查，可觸及子宮角增粗、子宮壁厚薄不均，宮腔內(nèi)積液且有波動感。治療效果判定標準:治愈:連續(xù)給藥3次后，子宮內(nèi)積液基本排除，子宮恢復(fù)正常，頸液由混濁變?yōu)橥该髑覠o臭味;陰道檢查時，可見陰道、及宮頸口處無炎性分泌物;非發(fā)情時，宮頸口關(guān)閉且呈粉紅色。直腸檢查子宮收縮、大小及質(zhì)地恢復(fù)正常；停止治療后30天內(nèi)恢復(fù)正常發(fā)情可人工授精。有效:連續(xù)給藥3次后，陰門無粘性或粘膿性分泌物排出，檢查陰道無及宮頸口無炎性分泌物;直腸檢查子宮收縮、大小及質(zhì)地基本恢復(fù)正常;停止治療后30天內(nèi)，未恢復(fù)正常發(fā)情，或恢復(fù)發(fā)情但頸液仍不夠清亮或韌性差，不能進行人工授精。無效:連續(xù)給藥3次后，臨床癥狀沒有改善，觸診疼痛及腫脹明顯，子宮內(nèi)積液未排出，且頸液依舊混濁。結(jié)果:表1臭氧化橄欖油治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的臨床效果組別患病牛（頭）治愈頭數(shù)（%）有效頭數(shù)（%）無效頭數(shù)（%）總有效率頭（%）臭氧化橄欖油2520（80%）4（16%）1（4%）96%土霉素2515（60%）6（24%）4（16%）84%結(jié)果表明:與土霉素組相比，臭氧化橄欖油灌注劑可有效治療奶牛子宮內(nèi)膜炎，治療有效率達到96%，治愈率可達80%，效果優(yōu)于土霉素組。以上實驗結(jié)果表明，本治療奶牛子宮內(nèi)膜炎的臭氧化橄欖油灌注液具有抗菌消炎、調(diào)整子宮機能、改善局部血液循環(huán)、調(diào)整子宮內(nèi)環(huán)境、增加藥物在子宮內(nèi)擴散、滲透和吸收作用、無刺激性、提高免疫力等特點。實施例6臭氧化橄欖油治療奶牛乳房炎的臨床效果臨床藥效試驗:1試驗方法1.1試驗?zāi)膛?試驗治療楊陵周邊奶牛場發(fā)生急性、亞急性和隱性乳房炎的120個病例(以患病乳區(qū)為例)，急性、亞急性乳房炎患病乳區(qū)出現(xiàn)不同程度的紅腫熱痛，乳汁清稀、發(fā)黃、出現(xiàn)凝塊或膿汁，產(chǎn)奶量明顯下降。采用“美國加州乳房炎試驗(CMT)”法進行檢測，將檢測結(jié)果為“++”或以上的患牛列入隱性乳房炎試驗。1.2治療方法:120個病例，分為試驗組和對照組，用消毒液清洗乳房，將病乳擠凈，用75%的酒精棉消毒乳頭，通過乳頭管注入藥物，按摩乳區(qū)片刻，3天一個療程，觀察治療效果。試驗組90例，使用實施例1的臭氧化橄欖油灌注乳房，每天1次，每次lOml;對照組30例，使用泌乳靈注入劑(氨節(jié)西林鈉、氯唑西林鈉乳房注入劑，英國NORBROOK公司生產(chǎn))，每天2次，每次5.Og。1.3療效判斷:治療前后進行細菌學(xué)檢查，治療過程中詳細記錄患病奶牛病理表現(xiàn)，并按下述標準判斷藥物療效:痊愈:乳房紅、腫、熱、痛消失，乳汁肉眼觀察正常，乳產(chǎn)量回升，病原菌轉(zhuǎn)陰。臨床治愈:乳房紅、腫、熱、痛消失，乳汁肉眼觀察正常，乳產(chǎn)量回升，但病原菌未完全轉(zhuǎn)陰。有效:乳房紅、腫、熱、痛減輕，肉眼觀察乳汁性狀改觀或趨于正常，乳產(chǎn)量有所回升。無效:乳房紅、腫、熱、痛沒有明顯改觀或更加嚴重，乳汁異常，乳產(chǎn)量下降。隱性乳房炎判斷治愈標準:強陽性(+++)或陽性(++)轉(zhuǎn)為陰性(-)或可疑(±)。有效:強陽性(+++)或陽性(++)轉(zhuǎn)為弱陽性(+)。無效:用藥后無變化。2治療結(jié)果表1試驗組與對照組臨床藥效試驗試驗結(jié)果實施例1的乳房灌注劑泌乳靈治療病例9030痊愈(例)8010臨床治愈(例)89有效(例)25無效(例)06痊愈率(%)89%33%總臨床治愈率(%)98%63%表1的臨床療效試驗結(jié)果顯示，本發(fā)明實施例1制備的臭氧化橄欖油灌注乳房與對照藥物泌乳靈比較，臨床總治愈率和有效率明顯較高。3結(jié)論藥效試驗結(jié)果說明，本發(fā)明實施例1制備的臭氧化橄欖油灌注乳房治療革蘭氏陰性和陽性菌引起的急性、亞急性和隱性乳房炎效果顯著，治愈率高，使用方便又安全，具有較好的臨床應(yīng)用價值。實施例7臭氧化橄欖油治療奶山羊乳房炎的臨床效果用于治療奶山羊臨床型乳房炎的試驗試驗方法:陜西富平某羊場，選取50只臨床型乳房炎的奶山羊進行試驗，實驗組25頭，對照組25頭。實驗組采用本發(fā)明實施例1制備的臭氧化橄欖油灌注乳房1次/天，每次5mL，連續(xù)用藥1-10天。對照組采用恩諾沙星按羊體重給予劑量，2次/天。判斷治愈標準:乳房紅、腫、熱、痛癥狀消失，乳汁肉眼觀察正常，奶產(chǎn)量恢復(fù)，精神、食欲正常；有效:乳房紅、腫、熱、痛癥狀減輕，乳汁絮狀物基本消失或明顯減少，產(chǎn)奶量回升;無效:乳房紅、腫、熱、痛癥狀無明顯減輕，乳汁清稀或發(fā)黃，絮片較明顯，產(chǎn)奶量沒有回升，全身狀態(tài)未見改善。試驗效果:用藥后實驗組25頭病羊治愈22頭，有效2頭，治愈率為88%，有效率為96%;對照組25頭病羊治愈14個，有效為5頭，治愈率為56%，有效率為80%;可見，本發(fā)明對奶山羊臨床型乳房炎具有很好的治療作用。實施例8臭氧化橄欖油治療奶牛胎衣不下的臨床效果臨床藥效試驗1、試驗動物以楊陵某養(yǎng)牛場2年來發(fā)生奶牛胎衣不下的21例病牛為研究對象，試驗前對病牛進行臨床檢查，確定被確診為奶牛胎衣不下病。2、試驗分組分別將21例病牛分為3組，每組7頭。按本發(fā)明實施例1得到的臭氧化橄欖油，候溫子宮灌注，每天1次，3d為1療程。本發(fā)明低劑量組用藥量20mL；本發(fā)明中劑量組用藥量40mL;本發(fā)明高劑量組用藥量60mL。觀察各組病情治療情況，并進行記錄。3、試驗結(jié)果通過對各試驗小組進行觀察后，結(jié)果如下:低劑量組:通過對流產(chǎn)后胎衣不下的奶牛進行低劑量藥物治療，48小時后7頭奶牛都將胎衣排出。中劑量組:通過對流產(chǎn)后胎衣不下的奶牛進行中劑量藥物治療后，48小時后7頭奶牛都將胎衣排出。高劑量組:通過對流產(chǎn)后胎衣不下的奶牛進行高劑量藥物治療后，48小時后7頭奶牛胎衣全部排出。4、結(jié)論與分析本發(fā)明實施例1制備的臭氧化橄欖油，可以達到臨床治療奶牛胎衣不下病的效果。本發(fā)明安全可靠。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁1 2 3