本發(fā)明涉及一種用于治療外周神經(jīng)損傷的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體及其應(yīng)用，特別涉及裝載堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子與神經(jīng)生長(zhǎng)因子的緩釋團(tuán)聚體及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

退行性疾病是一種嚴(yán)重的疾病，并且可致殘疾，而引起外周神經(jīng)損傷的原因主要來(lái)自于車禍?zhǔn)鹿?、腫瘤、先天性畸形、壓縮或挫傷。神經(jīng)損傷表現(xiàn)為部分或全部的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)和感覺(jué)神經(jīng)以及自主神經(jīng)功能的喪失，其難愈的原因之一為生長(zhǎng)因子的合成與分泌減少。修復(fù)神經(jīng)損傷的方法有很多種，常見(jiàn)的有自體移植修復(fù)技術(shù)和基因工程管道技術(shù)。在臨床上，自體神經(jīng)移植技術(shù)被廣泛應(yīng)用于外周神經(jīng)缺陷的橋接。但它受制于宿主的免疫排斥從而使神經(jīng)功能不能完全的恢復(fù)。自體移植修復(fù)技術(shù)的不足促使科學(xué)家們?yōu)橹委熗庵苌窠?jīng)疾病尋找新的方法。

神經(jīng)病理性疼痛是神經(jīng)損傷后最常見(jiàn)的表現(xiàn)癥狀，其疼痛的難忍性嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。病因主要為受損神經(jīng)細(xì)胞的胞膜上Na⁺離子通道和電壓門控Ca²⁺離子通道開(kāi)放增加，形成離子流并釋放疼痛物質(zhì)(如P物質(zhì)，乙酰膽堿)，導(dǎo)致神經(jīng)的興奮性增高并引起感覺(jué)功能的異常。但將治療疼痛性藥物加入神經(jīng)修復(fù)材料中，雖可緩解疼痛的發(fā)展，但同時(shí)抑制軸突的再生，不利于外周神經(jīng)的修復(fù)。

神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子是一類由神經(jīng)所支配的組織和膠質(zhì)細(xì)胞分泌和產(chǎn)生并促進(jìn)神經(jīng)元生長(zhǎng)與存活的蛋白類物質(zhì)。包括堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、腦源性生長(zhǎng)因子(BDNF),神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因-3,4,5(NT-3，-4，-5),神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)因子(GDNF)，膠質(zhì)生長(zhǎng)因子(GCF)，酸性成纖維生長(zhǎng)因子(aFGF)等。它們具有促進(jìn)神經(jīng)周圍血管的生成和營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)的雙重作用并廣泛用于神經(jīng)損傷的治療。

近年來(lái),生物工程材料的飛速發(fā)展為外周神經(jīng)損傷的治療帶來(lái)福音。常見(jiàn)的用于治療外周神經(jīng)損傷的高分子生物材料包括：聚乙醇酸、聚乳酸、聚羥基丁酸鹽、硅膠、聚四氟乙烯、聚吡咯、殼聚糖等。雖然此類材料制成的神經(jīng)導(dǎo)管對(duì)實(shí)驗(yàn)性鋸齒類動(dòng)物外周神經(jīng)損傷的治療存在一定的治療效果，但其存在的不可降解性或組織不相容性，限制其臨床應(yīng)用。

另外，臨床上對(duì)于由牽拉導(dǎo)致神經(jīng)斷裂的修復(fù)主要依靠直接縫合術(shù)來(lái)實(shí)現(xiàn)，但是對(duì)于缺損較長(zhǎng)的神經(jīng)，此法不適用。另外，運(yùn)用生物膜包裹雪旺細(xì)胞組成的細(xì)胞型生物蛋白膠復(fù)合體，能夠促進(jìn)軸突的再生，可修復(fù)10mm的神經(jīng)缺損傷；但是由于操作的復(fù)雜性及結(jié)果的不穩(wěn)定性，甚至產(chǎn)生的免疫排斥，導(dǎo)致其臨床應(yīng)用受限。此外，以膠原為基質(zhì)的導(dǎo)管或支架，容易引起排異反應(yīng)，并且無(wú)法發(fā)揮神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)功能。已有的高分子聚合材料無(wú)法同時(shí)滿足良好的組織相容性和生物有效性。

近年來(lái)，不少國(guó)家的科研機(jī)構(gòu)和企業(yè)投入了大量的人力、物力與財(cái)力對(duì)神經(jīng)修復(fù)材料進(jìn)行探索。但是對(duì)于尋找或合成一種理想的神經(jīng)修復(fù)材料：即具有良好的力學(xué)性能和空間結(jié)構(gòu)，為神經(jīng)再生提供最佳的理化和生物學(xué)微環(huán)境，且能實(shí)現(xiàn)神經(jīng)吻合操作的快捷、簡(jiǎn)便、安全和預(yù)后好的多重目的,仍存在一定的差距。因此，制備一種理想的神經(jīng)缺損區(qū)的修復(fù)材料勢(shì)在必行。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有藥物或技術(shù)的缺陷，提供一種新型治療外周神經(jīng)損傷的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體，該緩釋團(tuán)聚體具有良好的促進(jìn)損傷神經(jīng)軸突的再生且制備簡(jiǎn)單，安全無(wú)副作用，僅需一次注射便可達(dá)到長(zhǎng)期的治療效果，保證手術(shù)操作簡(jiǎn)便快捷的完成。

本發(fā)明人通過(guò)大量的動(dòng)物試驗(yàn)和資料查閱發(fā)現(xiàn)，外周神經(jīng)損傷治愈的效果不理想，其主要難題之一是現(xiàn)階段沒(méi)有一種生物材料可同時(shí)保證外周神經(jīng)修復(fù)所需的所有最佳條件。發(fā)明人通過(guò)大量的試驗(yàn)，發(fā)明出一種新型治療外周神經(jīng)損傷的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體，可滿足理想的神經(jīng)再生和修復(fù)的需要。

本發(fā)明的一種治療外周神經(jīng)損傷的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體，其原料組成包含聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油醛、粘多糖和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，通過(guò)改變各組分間的不同配比或神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子種類，緩控藥物的釋放并保證其在組織內(nèi)的可控降解。

聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油醛(PEAD)是由天冬氨酸和精氨酸以及甘油二酯為原料經(jīng)縮合反應(yīng)制備的一種聚合陽(yáng)離子。試驗(yàn)表明，PEAD具有良好的組織相容性，安全無(wú)毒副作用，可生物降解，適合作為人工神經(jīng)修復(fù)材料用于外周神經(jīng)損傷的治療。

上述的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體，其各組分的質(zhì)量比為：聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油醛4～8，粘多糖0.5～3，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子0.0001～0.2。進(jìn)一步優(yōu)選地，其各組分的質(zhì)量比為聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油醛5，粘多糖1～3，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子0.001～0.1。

上述的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類包含包含堿性成纖維生長(zhǎng)因子(bFGF)、神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、腦源性生長(zhǎng)因子(BDNF),神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因-3,4,5(NT-3，-4，-5)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞神經(jīng)因子(GDNF)、血小板衍生因子(PDGF)、酸性成纖維生長(zhǎng)因子(aFGF)的一種或幾種組合。

上述的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體通過(guò)進(jìn)一步加入各類藥用輔料的一種或幾種組合，可進(jìn)一步制成的劑型包括凍干粉、膠漿、軟膏或輸液劑。

上述的藥用輔料包括硬脂酸類物質(zhì)和羧甲基纖維素類物質(zhì)或它們的混合物。

本發(fā)明還提供了一種制備上述的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體的制備方法，該方法包括以下步驟：

①取粘多糖，用生理鹽水溶解，配制成1～20mg/mL的溶液；

②取聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油醛，用生理鹽水溶解，配制成1～20mg/mL的溶液；

③將神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子加入步驟①配制的粘多糖溶液中，20～35℃的條件下靜置25-40分鐘；

④將步驟②配制的聚乙烯精氨酸天冬氨酸甘油醛溶液加入步驟③得到的溶液中，在20～35℃的條件下攪拌3～12小時(shí)。

上述的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體主要應(yīng)用于治療外周神經(jīng)損傷，包括擠壓傷，橫斷傷和缺損傷，此外還可用于創(chuàng)面愈合、心肌缺血的輔助治療。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制備的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體的優(yōu)點(diǎn)在于其內(nèi)部特殊的空間結(jié)構(gòu)，能發(fā)揮各種修復(fù)材料的優(yōu)勢(shì)并彌補(bǔ)其不足，滿足理想的修復(fù)外周神經(jīng)損傷生物材料的要求，其特點(diǎn)主要體現(xiàn)在：①帶正電荷的PEAD和神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子與帶負(fù)電荷的粘多糖通過(guò)靜電離子的相互作用將三者結(jié)合，從而使神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子緊密結(jié)合粘多糖的同時(shí)又與PEAD存在一定的斥力，保證團(tuán)聚體連續(xù)緩釋神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的目的；②裝載神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的種類豐富，質(zhì)量較大并可實(shí)現(xiàn)多種類型神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子的不同組合；③作為該緩釋微球組份之一的PEAD，其合成所需的條件、設(shè)備及制備過(guò)程均簡(jiǎn)易，原料來(lái)源廣泛廉價(jià)；④該緩釋團(tuán)聚體穩(wěn)定性好，包封率高，粒徑均勻，安全無(wú)副作用且具有較好的組織相容性和生物活性，對(duì)外周神經(jīng)損傷的治療效果顯著。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體的結(jié)構(gòu)(a:PEAD、粘多糖、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子三者結(jié)合的模式圖；b:緩釋團(tuán)聚體的掃面電鏡圖)；

圖2為本發(fā)明神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體同時(shí)裝載堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子和神經(jīng)生長(zhǎng)因子在不同時(shí)間點(diǎn)所繪制的釋放曲線；

圖3為本發(fā)明神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體裝載堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子治療外周神經(jīng)損傷時(shí)測(cè)試的腳步印跡(a:各組在第四周拍攝的腳印；b:各組大鼠在每周統(tǒng)計(jì)的SFI)；

圖4為本發(fā)明神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體裝載堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子治療外周神經(jīng)損傷時(shí)拍攝的透射電鏡圖(a:各組大鼠坐骨神經(jīng)拍攝的投射電鏡圖；b.各組大鼠髓鞘厚度的統(tǒng)計(jì)；c.各組大鼠軸突直徑統(tǒng)計(jì)的結(jié)果)。

具體實(shí)施方式

下面通過(guò)具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。但本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。另外，實(shí)施例中未注明具體技術(shù)操作步驟或條件者，均按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說(shuō)明書進(jìn)行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過(guò)市購(gòu)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

實(shí)施例1.外周神經(jīng)損傷動(dòng)物模型的建立

a.大鼠坐骨神經(jīng)擠壓傷模型

選用SPF級(jí)Wistar大鼠，在學(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心分籠飼養(yǎng)，保持室溫22℃，自然光照，自由攝食。將大鼠依次用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，在其右腿坐骨神經(jīng)切記處切開(kāi)，用玻璃分針?lè)蛛x坐骨神經(jīng)，距梨狀肌下緣遠(yuǎn)側(cè)約1.5cm用靜脈夾夾持2min,造成中度挫傷，采用無(wú)創(chuàng)細(xì)線(5/0)縫合肌肉和皮膚并用碘伏消毒。假手術(shù)組只需要切開(kāi)縫合即可。整個(gè)手術(shù)過(guò)程中溫度維持在37℃以防止低溫導(dǎo)致造模Wistar大鼠死亡。

b.大鼠坐骨神經(jīng)橫斷傷模型

選用SPF級(jí)Wistar大鼠，在學(xué)校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心分籠飼養(yǎng)，保持室溫22℃，自然光照，自由攝食。將大鼠依次用10％水合氯醛腹腔注射麻醉，在其右腿坐骨神經(jīng)切記處切開(kāi)，玻璃分針?lè)蛛x坐骨神經(jīng)并運(yùn)用手術(shù)刀片在距神經(jīng)分叉的1.5cm處將其切斷，在體式顯微鏡下對(duì)合斷端并運(yùn)用10-0無(wú)創(chuàng)縫合線進(jìn)行端端縫合，肌肉復(fù)位，縫合切口用碘伏消毒。假手術(shù)組只需要暴露坐骨神經(jīng)并縫合肌肉和皮膚即可。整個(gè)手術(shù)過(guò)程中溫度維持在37℃以防止低溫導(dǎo)致造模的Wistar大鼠死亡。

實(shí)施例2.神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體的制備

a.PEAD的合成：

首先將稱量的乙二醇二環(huán)氧甘油醚(EGDE)1000mg，叔丁氧羰基(t-BOC)保護(hù)的天冬氨酸(ASP)1340mg和叔基溴化銨(TBAB)50mg放入10mL的微波反應(yīng)瓶并在其加入0.6mL的二甲基甲酰胺(DMF)充分混勻后，于120℃的微波反應(yīng)器加熱20min，獲得一種粘稠的橙色液體；然后分別加入5mL的三氟乙酸(TFA)和20mL的二氯甲烷(DCM)室溫?cái)嚢?h萃取中間體聚乙烯-天冬氨酸甘油酯(PED)；隨后將770mg的ASP，323mg的N-hydrosuccinimide(NHS)，753mg的二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)加入至35mL的DMF溶液并在手套箱中攪拌2h得到一種有沉淀的乳橙色液體，將此液體吸入至50mL的離心管并在12000rpm/min的高速離心機(jī)離心10min，吸取上清，減壓蒸發(fā)得到分子量為73,750Da的PEAD，并在¹H核磁共振波譜中觀察到1.7和1.9ppm對(duì)應(yīng)精氨酸基團(tuán)的質(zhì)子并在4.1ppm為天冬氨酸的氫。

b.不同配比的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體的制備

按照表1各組分投料配比不同制備的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體，具體操作為：

①粘多糖溶液的配制：取粘多糖，用生理鹽水溶解，配制成10mg/mL的溶液；

②PEAD溶液的配制：取PEAD，用生理鹽水溶解，配制成10mg/mL的溶液；

③神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子溶液的配制：取神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子，用生理鹽水溶解，配制成10mg/mL的溶液；

④在反應(yīng)器皿將步驟③配制的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子溶液加入步驟①配制的粘多糖溶液，充分?jǐn)嚢杈鶆蚝螅?0～35℃的條件下靜置30分鐘；

⑤將步驟②配制的PEAD溶液加入步驟④配制的溶液，在30～35℃的條件下攪拌6小時(shí)；同時(shí)可添加藥用輔料的一種或多種混合，制備凍干粉、膠漿、軟膏或輸液劑。其中，圖1為實(shí)驗(yàn)組2C制備的神經(jīng)生長(zhǎng)因子緩釋團(tuán)聚體的結(jié)構(gòu)(a:PEAD、粘多糖、神經(jīng)生長(zhǎng)因子三者結(jié)合的模式圖；b:緩釋團(tuán)聚體的掃面電鏡圖)；圖2為實(shí)驗(yàn)組3C制備的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體同時(shí)裝載堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子和神經(jīng)生長(zhǎng)因子時(shí)，在不同時(shí)間點(diǎn)所繪制的釋放曲線；圖3為實(shí)驗(yàn)組1C制備的堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子緩釋團(tuán)聚體與對(duì)照組3、4、5在治療大鼠坐骨神經(jīng)擠壓傷模型所測(cè)試的腳步印跡，由3a的結(jié)果可知，對(duì)照組5(Model)和對(duì)照組3(Vehicle)在治療的第28天，爬行的腳印模糊，輪廓不清，而對(duì)照組4(Free bFGF)大鼠爬行的腳印輪廓較清晰，各腳趾伸展較開(kāi)，但不及實(shí)驗(yàn)組1C(bFGF-Coacervate)，由各組腳印統(tǒng)計(jì)SFI(神經(jīng)功能指數(shù))的分析結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組1C隨治療天數(shù)的推移，其SFI值不斷變大，說(shuō)明大鼠運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)不斷改善，由此，實(shí)驗(yàn)組1C對(duì)外周神經(jīng)損傷大鼠的運(yùn)動(dòng)功能的恢復(fù)效果最佳；圖4為實(shí)驗(yàn)組1C制備的堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子緩釋團(tuán)聚體與對(duì)照組3、4、5在治療大鼠坐骨神經(jīng)擠壓傷所模型拍攝的透射電鏡圖，由4a的電鏡結(jié)果，對(duì)照組5和對(duì)照組3神經(jīng)數(shù)目稀疏，排列紊亂，髓鞘厚度較薄并出現(xiàn)不同程度的腫脹，而對(duì)照組4這樣的現(xiàn)象有所改善，實(shí)驗(yàn)組1C神經(jīng)內(nèi)部結(jié)構(gòu)改善的最明顯，接近正常，圖4b和圖4c分別對(duì)各組大鼠髓鞘的厚度和軸突的直徑進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，由統(tǒng)計(jì)的結(jié)果，對(duì)照組4與對(duì)照組3、5在髓鞘的厚度和軸突的直徑存在統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.001)，而實(shí)驗(yàn)組1C與對(duì)照組4也存在一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)，說(shuō)明實(shí)驗(yàn)組1C對(duì)增加坐骨神經(jīng)損傷大鼠的髓鞘厚度和軸突直徑，效果最佳，由此，裝載10μg堿性成細(xì)胞生長(zhǎng)因子緩釋團(tuán)聚體對(duì)改善損傷神經(jīng)內(nèi)部的病理結(jié)構(gòu)，效果最佳。

表1各組神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋微球的組成

注：“-”代表此項(xiàng)不添加物質(zhì)。

實(shí)施例3.動(dòng)物給藥與療效評(píng)價(jià)

將坐骨神經(jīng)擠壓傷或橫斷傷模型的Wistar大鼠在縫合肌肉和皮膚后，將表1中各實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組制備的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體通過(guò)30G針頭及時(shí)遞送入損傷的坐骨神經(jīng)區(qū)域。

神經(jīng)修復(fù)的效果評(píng)價(jià)指標(biāo)如下：

a.行為學(xué)：分別運(yùn)用腳步印跡及熱板試驗(yàn)對(duì)坐骨神經(jīng)損傷后的Wistar大鼠進(jìn)行運(yùn)動(dòng)功能和感覺(jué)功能恢復(fù)測(cè)試，時(shí)間為給藥后的第1、2、3、4周；

b.組織形態(tài)學(xué)：給藥治療1個(gè)月后，處死各組大鼠，收集損傷的坐骨神經(jīng)，制作病理切片并進(jìn)行HE染色，Massion染色及透射電鏡；

c.結(jié)構(gòu)和功能蛋白的表達(dá)水平：收集損傷的坐骨神經(jīng)，運(yùn)用Western Blot法檢測(cè)各組損傷神經(jīng)內(nèi)GAP-43、MAP-2、MBP、S-100β及NF-200的表達(dá)水平。

表2：實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組療效評(píng)價(jià)

各試驗(yàn)組從行為學(xué)、組織形態(tài)學(xué)、結(jié)構(gòu)和功能蛋白水平三方面進(jìn)行綜合評(píng)分，對(duì)照未經(jīng)任何處理的神經(jīng)損傷同時(shí)期的情況，將各指標(biāo)分級(jí)，“-”表示無(wú)效，“+”表示三項(xiàng)指標(biāo)均有改善或升高，其中，行為學(xué)中的“+”表示運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)持續(xù)改善，組織形態(tài)學(xué)中的“+”表示再生神經(jīng)纖維數(shù)目增多，排列規(guī)整，軸突再生和再髓鞘化情況有所改善，結(jié)構(gòu)和功能蛋白水平中的“+”表示此類蛋白的表達(dá)升高，“+”越多表示各指標(biāo)改善越明顯或表達(dá)越高，即神經(jīng)功能恢復(fù)的速度和效果越佳。

從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子類緩釋團(tuán)聚體能顯著提高損傷后坐骨神經(jīng)的運(yùn)動(dòng)和感覺(jué)的恢復(fù)，具有良好的促進(jìn)損傷區(qū)軸突和髓鞘的再生，并大量合成和分泌相應(yīng)的結(jié)構(gòu)和功能蛋白，使其完整的外周神經(jīng)結(jié)構(gòu)快速生成，明顯好于已有報(bào)道的修復(fù)材料和非本發(fā)明的材料組合，差異結(jié)果具有顯著性。另外，外周神經(jīng)損傷恢復(fù)的效果與本發(fā)明中神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子種類的選擇，組合及其含量有密切聯(lián)系。

上述詳細(xì)說(shuō)明是針對(duì)發(fā)明的可行實(shí)施例的具體說(shuō)明，該實(shí)施例并非用以限制本發(fā)明的專利范圍，凡未脫離本發(fā)明的等效實(shí)施或變更，均應(yīng)當(dāng)包含于本發(fā)明的專利范圍內(nèi)。

另外，本領(lǐng)域技術(shù)人員還可在本發(fā)明權(quán)利要求公開(kāi)的范圍和精神內(nèi)做其它形式和細(xì)節(jié)上的各種修改、添加和替換。當(dāng)然，這些依據(jù)本發(fā)明精神所做的各種修改、添加和替換等變化，都應(yīng)包含在本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍之內(nèi)。