本發(fā)明涉及水果中有效成分提取的技術(shù)，更加具體地，涉及一種梨成熟果總酚提取方法。
背景技術(shù)：
植物/水果多酚是廣泛存在于植物/水果體內(nèi)的重要次生代謝產(chǎn)物，具有抗氧化、抗腫瘤、保護(hù)肝臟等多種生理功能。植物/水果多酚在糧食、蔬菜中含量較少，但在水果及谷物皮層中含量較高。
梨是我國(guó)第三大水果，據(jù)古農(nóng)書和古藥典的記載，梨果具有幫助消化、潤(rùn)肺清心、消痰止咳、退熱、解瘡毒的功能。幾千年來，中醫(yī)一直把梨作為生津、潤(rùn)燥、清熱和化痰的良藥。梨果特有的這些醫(yī)藥保健功能及易褐變的特點(diǎn)和果實(shí)中的多酚等次生代謝物質(zhì)有關(guān)，因此，高效地提取梨果中總酚，是進(jìn)一步研究其內(nèi)在成分的重要基礎(chǔ)。
為此，本發(fā)明提供了一種梨成熟果總酚提取方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在提供一種梨成熟果總酚提取方法，以便高效地提取梨成熟果總酚。
根據(jù)本發(fā)明的一方面，提供了一種梨成熟果總酚提取方法，包括以下步驟：
(1)將梨成熟果去皮后切成薄條，用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機(jī)粉碎；
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比為1:10-30的比例加入第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣，其中，超聲溫度為30-60℃，超聲時(shí)間為5-40min，超聲功率為150W；
(3)用所得濾渣，按照料液比為1:10-30的比例加入第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為30-60℃，超聲時(shí)間為5-40min，超聲功率為150W；
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色30-120min后，在765nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，得到梨成熟果總酚的提取率。
根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，所述第一提取溶劑采用濃度為80-100％的甲醇，所述第二提取溶劑為乙酸乙酯。
根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，步驟(2)中，按照料液比為1:15的比例加入第一提取溶劑，其中，超聲溫度為50℃，超聲時(shí)間為5min。
根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，步驟(3)中，按照料液比為1:10的比例加入第二提取溶劑，其中，超聲溫度為40℃，超聲時(shí)間為10min。
根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例，步驟(4)中，顯色時(shí)間為30min。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，根據(jù)本發(fā)明實(shí)施例的梨成熟果總酚提取方法，利用超聲方法，并使用兩種不同的提取溶液提取梨成熟果總酚，使得梨成熟果總酚的提取率顯著提升。
具體實(shí)施方式
為使本發(fā)明技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，通過以下幾個(gè)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。顯然，所描述的實(shí)施例是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。
實(shí)施例1：
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，一種梨成熟果總酚提取方法包括以下步驟：
(1)以梨成熟果為材料，將梨成熟果去皮后切成薄條，迅速用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機(jī)粉碎。
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉與提取溶劑的重量比)為1:15的比例加入濃度為100％的甲醇作為第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾后、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣；其中，超聲溫度為50℃，超聲時(shí)間為5min，超聲功率為150W。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲波的占空比為0.6-0.8。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲操作時(shí)的氣壓為6-8Mpa。
(3)用步驟(2)中的濾渣，按照料液比為1:10的比例加入乙酸乙酯作為第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為40℃，超聲時(shí)間為10min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲波的占空比為0.4-0.55。
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲操作時(shí)的氣壓為3-5Mpa。
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑(即，福林酚試劑)和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色30min后，在765nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，得到梨成熟果總酚的提取率為20.7％。
實(shí)施例2：
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，一種梨成熟果總酚提取方法包括以下步驟：
(1)以梨成熟果為材料，將梨成熟果去皮后切成薄條，迅速用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機(jī)粉碎。
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉與提取溶劑的重量比)為1:20的比例加入濃度為90％的甲醇作為第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣；其中，超聲溫度為50℃，超聲時(shí)間為20min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲波的占空比為0.6-0.8。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲操作時(shí)的氣壓為6-8Mpa。
(3)用步驟(2)中濾渣，按照料液比為1:15的比例加入乙酸乙酯作為第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為40℃，超聲時(shí)間為30min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲波的占空比為0.4-0.55。
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲操作時(shí)的氣壓為3-5Mpa。
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色60min后，在765nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，得到梨成熟果總酚的提取率為17.5％。
實(shí)施例3：
根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例，一種梨成熟果總酚提取方法包括以下步驟：
(1)以梨成熟果為材料，將梨成熟果去皮后切成薄塊，迅速用液氮冷凍，然后經(jīng)粉碎機(jī)粉碎。
(2)稱取粉碎后的果肉5克，按照料液比(即果肉與提取溶劑的重量比)為1:30的比例加入濃度為80％的甲醇作為第一提取溶劑，經(jīng)過超聲、過濾、旋蒸后，得到第一次提取物以及濾渣；其中，超聲溫度為60℃，超聲時(shí)間為35min，超聲功率為150W。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲波的占空比為0.6-0.8。
優(yōu)選地，在此步驟(2)中，超聲操作時(shí)的氣壓為6-8Mpa。
(3)用步驟(2)中的濾渣，按照料液比為1:20的比例加入乙酸乙酯作為第二提取溶劑，經(jīng)超聲、過濾、旋蒸后，得到第二次提取物，把兩次旋蒸得到的提取物用純甲醇定容至10毫升，得到總酚提取溶液；其中，超聲溫度為50℃，超聲時(shí)間為40min，超聲功率為150W；
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲波的占空比為0.4-0.55。
優(yōu)選地，在此步驟(3)中，超聲操作時(shí)的氣壓為3-5Mpa。
(4)取1毫升總酚提取溶液，依次加入1毫升FC顯色劑和3毫升濃度為7.5％的碳酸鈉溶液，搖勻，顯色90min后，在765nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，此時(shí)，測(cè)量的梨成熟果總酚的提取率為15.8％。
需要說明的是，第一提取溶劑和第二提取溶劑的比例可以是相同的，例如，第一提取溶劑、第二提取溶劑與果肉的料液比均為1:15。
以上所述的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和有益效果進(jìn)行了進(jìn)一步詳細(xì)說明，所應(yīng)理解的是，以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方式而已，并不用于限定本發(fā)明的保護(hù)范圍，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。