本發(fā)明涉及一種中藥復方制劑及其制備方法，特別是治療2型糖尿病中藥復方制劑及其制備方法，屬于中醫(yī)治療糖尿病技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
糖尿病是一組由于胰島素分泌和（或）作用缺陷所引起的以慢性高血糖為特征的代謝性疾病。國際糖尿病聯(lián)盟（IDF）于2013年11月14日——聯(lián)合國糖尿病日公布第六版《國際糖尿病聯(lián)盟糖尿病地圖》顯示，2013年全球約有3.82億成年人患有糖尿病，約510萬人死亡，平均每6秒鐘就有1人死于糖尿病，并預計到2035年，該病患者人數(shù)會上升至5.92億，成為危害人類健康的主要疾病，其中，2型糖尿?。═2DM）占糖尿病總?cè)藬?shù)的90%～95%。迫于嚴峻的流行形勢，世界各國及國際組織對T2DM的研究均給予高度關(guān)注。
T2DM發(fā)病機制非常復雜，西藥針對不同的患病機制，其作用靶點比較清楚，效應(yīng)較強。但是，2型糖尿病患者是一個有機聯(lián)系的整體，糖尿病患者機體的許多代謝環(huán)節(jié)同時存在失調(diào)，單純作用于某一靶點藥物難以發(fā)揮最佳治療效果，帶來副作用也相對明顯，原發(fā)性失效、繼發(fā)性失效問題也較嚴重。如果我們在2型糖尿病早期就應(yīng)用具有整體調(diào)節(jié)及多靶點治療藥物勢必提高治療效果、控制病情發(fā)展及減少并發(fā)癥的發(fā)生。因此，研究整體調(diào)節(jié)、多靶點治療及副作用低的中藥藥物已成為2型糖尿病藥物研究的一個方向。
目前市場上治療糖尿病的藥物繁多，經(jīng)檢索，中國專利公開了以下治療糖尿病有關(guān)的中藥制劑的報道，現(xiàn)摘錄如下：
l、中國專利<申請?zhí)?gt;00108421<發(fā)明名稱>一種治療糖尿病的藥物及其制備方法<申請人>韓萬明劉萍，山西省陽泉市李家莊第一人民醫(yī)院分院<文摘>本發(fā)明公開了一種新的治療糖尿病的藥物，它是以生黃芪、生地、丹參、生山藥、荔枝核、元參、蒼術(shù)、枸杞子、烏梅、玉米須、五味子、天花粉、瓜蒂、肉桂、蠶蛹、鬼箭羽，海蛤殼、雞內(nèi)金、葛根、桑葉、黃精為原料，根據(jù)每味中藥不同的特性分別經(jīng)過凍干、曬干、煅燒、除塵、粉碎，按比例配制，再經(jīng)熟化，滅菌后制成散劑。
2、中國專利<申請?zhí)?gt;99120424<發(fā)明名稱>一種治療糖尿病的藥物及其制備方法<申請人>邵玉君<文摘>本發(fā)明公開了一種治療糖尿病的中成藥及其制備方法，這種中成藥將松花粉、雞內(nèi)金、黃芪、太子參、黃柏、玉米須、知母、地黃、黃精、桑白皮、山藥、荔枝核、丹參、山茱萸、大黃和五味子16味中藥料，根據(jù)其有效成分和理化性質(zhì)分為四組，分別采用水煎、水煎醇沉、乙醇提取和粉碎后直接入藥的工藝，制備成膠囊，治療糖尿病。
現(xiàn)有技術(shù)存在的問題為反彈性高，藥物組成繁雜，成本過高，成分不易控制，副作用較大等諸多不足。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種治療2型糖尿病的中藥復方制劑及其制備方法，藥物組方合理、使用安全、療效顯著、副作用小、價格適中、制作方便、藥源豐富、服用方便，具有降低2型糖尿病患者的血糖、血脂、血液粘度的作用，解決背景技術(shù)存在的上述問題。
本發(fā)明目的通過以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：
一種治療2型糖尿病的中藥復方制劑，該中藥復方制劑是由下述重量份的原料藥物制成：
姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，匙羹藤5～30份。
一種治療2型糖尿病的中藥復方制劑的制備方法，該方法是水提法，包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，匙羹藤5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏；
b．干燥，粉碎成細粉作為活性成分；
c．將步驟b所述的活性成分與藥學上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
一種治療2型糖尿病的中藥復方制劑的制備方法，該方法是水提法，包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，匙羹藤5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏，作為活性成分；
b．將步驟a所述的活性成分與藥學上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
我們在多年的T2DM研究中發(fā)現(xiàn)，該病多中年后發(fā)病，且肥胖者居多，以過食肥甘、久坐少動等為誘因，且符合“元氣不勝谷氣其人肥而不壽”觀點及肥甘厚味不得化氣而生痰濕脂濁壅積體內(nèi)的基本特點?；诖宋覀冋J為脂濁壅積、郁久化熱為2型糖尿病的主要病理機制，故擬定以清熱、泄?jié)?、化瘀為主要功效的降糖復方，全方由姜黃、大黃、女貞子、匙羹藤、澤瀉、葡萄籽組成，諸藥合用使肺之郁熱得以疏解,又可通降清竅之濁邪，臨床應(yīng)用中獲得了較好的降糖效果。
在醫(yī)學研究中，從中醫(yī)藥理論出發(fā)，經(jīng)過基礎(chǔ)實驗并結(jié)合臨床經(jīng)驗，認為消渴病常見病機為：脂濁壅積、郁久化熱，病久兼有血瘀（瘀血）。根據(jù)糖尿病患者臨床表現(xiàn)為多飲、多食、多尿、消瘦、神疲乏力等癥狀，創(chuàng)立了清熱、泄?jié)?、化瘀的治療法則，在該治療法則的指導下加以組方。
本發(fā)明的每一味原料藥物的功效及其在處方中的作用闡述如下：
1、姜黃：【來源】本品為姜科植物姜黃Curcuma longa L.的干燥根莖。【性味】辛、苦，溫。【歸經(jīng)】歸脾、肝經(jīng)?！净瘜W成分】姜黃含揮發(fā)油4.5％、6％。揮發(fā)油中含姜黃酮58％、姜油烯25％、水芹烯1％、1，8-桉葉素1％、香檜烯0.5％、龍腦0.5％、去氫姜黃酮等。還含姜黃素0.3％、1.1％、4.8％及阿拉伯糖1.1％，果糖12％、葡萄糖28％，脂肪油、淀粉、草酸鹽等?！竟δ苤髦巍科蒲袣?，通經(jīng)止痛。用于胸脅剌痛，閉經(jīng)，癓瘕，風濕肩臂疼痛，跌撲腫痛。
2、大黃：【來源】本品為蓼科植物掌葉大黃Rheum palmatum L。 唐古特大黃Rheum tanguticum Maxim。 ex Balf?；蛩幱么簏SRheum officinale Baill。的干燥根及根莖?！拘晕丁靠啵??！練w經(jīng)】歸脾、胃、大腸、肝、心包經(jīng)。【化學成分】掌葉大黃、大黃及雞爪大黃的根狀莖和根中含有蒽醌類化合物約3%，包括游離和結(jié)合狀態(tài)的大黃酚（chrysophanol）、大黃酸（rhein）、蘆薈大黃素（aloe-emodin）、大黃素（emodin）、蜈蚣苔素（parietin，C22H22O10）、大黃素甲醚（emodinmonomethyl ether），其主要的瀉下成分為結(jié)合性大黃酸蒽酮-番瀉甙A. B. C（sennoside A. B. C）其中番瀉甙A（sennoside A）為主要有效成分。此外，尚含鞣質(zhì)約5%以及游離沒食子酸、桂皮酸及其脂類等。葉含槲皮甙，惟掌葉大黃的葉以金絲桃甙（hyperoside）含量最多?！竟δ苤髦巍繛a熱通腸，涼血解毒，逐瘀通經(jīng)。用于實熱便秘，積滯腹痛，瀉痢不爽，濕熱黃疸，血熱吐衄，目赤，咽腫，腸癰腹痛，癰腫疔瘡，瘀血經(jīng)閉，跌打損傷，外治水火燙傷；上消化道出血。酒大黃善清上焦血分熱毒。用于目赤咽腫，齒齦腫痛。熟大黃瀉下力緩，瀉火解毒。用于火毒瘡瘍。大黃炭涼血化瘀止血。用于血熱有瘀出血癥。
3、澤瀉：【來源】本品為澤瀉科植物澤瀉Alisma orientalis （Sam.）Juzep.的干燥塊莖?！拘晕丁扛剩??！練w經(jīng)】歸腎、膀胱經(jīng)?！净瘜W成分】【化學成分】塊莖中分出五種三萜類化合物：澤瀉醇A、澤瀉醇B，乙酸澤瀉醇A酯、乙酸澤瀉醇B酯和表澤瀉醇A；另含揮發(fā)油（內(nèi)含糠醛）、小量生物堿、天門冬素、一種植物甾醇、一種植物甾醇甙、脂肪酸（棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸）；還含樹脂、蛋白質(zhì)和多量淀粉（23％）。【功能主治】利小便，清濕熱。用于小便不利，水腫脹滿，泄瀉尿少，痰飲眩暈，熱淋澀痛；高血脂。
4、女貞子: 【來源】 本品為木犀科植物女貞Ligustrum lucidum Ait. 的干燥成熟果實?！拘晕丁?甘、苦，涼。【歸經(jīng)】 歸肝、腎經(jīng)?！净瘜W成份】 含女貞子甙（nuzhenide）、洋橄欖苦甙（oleuropein）、齊墩果酸（oleanolic acid）、4-羥基-B-苯乙基-B-D-葡萄糖甙、樺木醇（betulin）等?！竟δ苤髦巍?滋補肝腎，明目烏發(fā)。用于眩暈耳鳴，腰膝酸軟，須發(fā)早白，目暗不明。
5、葡萄籽：【來源】本品為葡萄科植物葡萄Vitis vinifera L.的種子?！拘晕丁课陡饰⑺幔云??！練w經(jīng)】入肝、腎、肺經(jīng)?！净瘜W成份】多酚類：葡萄籽中含有多酚類物質(zhì)(GPS),主要有兒茶素類和原花青素類。兒茶素類化合物包括兒茶素、表兒茶素及其沒食子酸酯，是葡萄籽中主要的單聚體，也是原花青素寡聚體和多聚體的構(gòu)成單位。油脂類：葡萄籽中含有豐富的油脂，約占其重量的12%～15%，油中含有大量的不飽和脂肪酸，其中亞油酸的含量在58%～78%之間。揮發(fā)成分：葡萄籽中還含有少量的揮發(fā)性成分，這些物質(zhì)大多屬于醇、酚、萜類物質(zhì)，都具有較高的生物活性。其它成分：葡萄籽中除了含有上述多種物質(zhì)外，還含有粗蛋白、氨基酸和維生素A、E、D、K、P及多種微量元素，如鈣、鋅、鐵、鎂、銅、鉀、鈉、錳、鈷等。【功能主治】具有補肝腎、益氣血、養(yǎng)胃生津、利小便之功效。
6、匙羹藤：【來源】蘿藦科匙羹藤屬植物匙羹藤Gymnema sylvestre （Retz.）Schult.[G. alterniflorum （Lour.）Merr.]，以根及全株入藥?！拘晕丁靠?，平。【歸經(jīng)】肝、腎二經(jīng)。【化學成分】匙羹藤酸（Gymnemic acid 簡稱 GA），是匙羹藤（GS）主要降血糖活性成分，在植物中含量為3.9%～9.6%?！竟δ苤髦巍壳鍩峤舛荆铒L止痛。用于風濕關(guān)節(jié)痛，癰癤腫毒，毒蛇咬傷。匙羹藤提取物膠囊具祛風涼血，消腫止痛，健胃利尿之功效。用于風寒濕痹，脈管炎等。
本發(fā)明的上述組合藥物可以作為中醫(yī)治療消渴?。ㄌ悄虿。┑呐浞?，其方解與功能主治：本方中姜黃為君藥，氣味辛苦，大寒無毒，行氣散郁，能入心脾二經(jīng)建功辟疫，活血化瘀，行氣疏肝，通經(jīng)止痛，具有抗炎、抗氧化的活性；大黃為臣藥，味苦，大寒無毒，上下通行，蓋亢甚之陽，非此莫抑，苦能瀉火，苦能補虛，一舉而兩得之。姜黃、大黃，降陰中之濁陰。一升一降，內(nèi)外通和，而雜氣之流毒頓消矣。匙羹藤清熱解毒，女貞子補腎滋陰，養(yǎng)肝明目，安五臟，二藥合用清熱而不傷陰，解內(nèi)熱之消渴共為佐藥。澤瀉、葡萄籽健脾益氣，潤燥，利水道，使?jié)駶崽碉嫃男”愠?，共為使藥。諸藥合用使肺之郁熱得以疏解,又可通降清竅之濁邪。
本發(fā)明的中藥制劑供2型糖尿病患者煎湯服用，更適合現(xiàn)代制藥企業(yè)提取有效成分，制成顆粒劑、膠囊劑、口服液等藥劑學上的任何劑型，由于黃酮苷類易溶于水，具有很強降血糖作用，生物堿易溶于水具有顯著降血糖作用；多糖類易溶于水，具有較強的降血糖作用，苷類一般溶于水，皂苷易溶于熱水，能促進胰島素釋放，調(diào)節(jié)血糖代謝；多肽類一般可溶于水。
本發(fā)明具有如下特點：①本發(fā)明在中醫(yī)藥理論指導下，經(jīng)動物實驗證明后，優(yōu)選上述中藥，加以科學配伍、制作，使各藥物相互配合，取長補短，協(xié)同作用，諸藥合用，標本兼治，增強療效。②本發(fā)明所用原料毒性小，克服了其它降糖藥物特別是西藥的毒副作用，及其長期使用西藥后對肝腎的損害的缺點。按日劑量和療程使用本發(fā)明產(chǎn)品是安全的。本產(chǎn)品與二甲雙胍進行比較，其降糖作用與二甲雙胍效果相當，與西藥相比沒有毒副作用。③經(jīng)動物實驗和臨床驗證本發(fā)明產(chǎn)品能使2型糖尿病患者空腹血糖和餐后2小時血糖降低，而且維持時間較長，同時也使高血脂者膽固醇和甘油三酯降低，療效顯著。④組方科學，原料易得，生成工藝先進，簡便易行，可操作性強，產(chǎn)品價格適中，適合工業(yè)化制備。⑤制備過程中根據(jù)各中藥的有效成份、性質(zhì)及制劑要求，采用水提法、物理滅菌方法，因而產(chǎn)品有效成分含量高，穩(wěn)定，不易變質(zhì)，有利于長期保存。
本發(fā)明有益效果：藥物組方合理、使用安全、療效顯著、副作用小、價格適中、制作方便、藥源豐富、服用方便，原料易得，生成工藝先進，可操作性強。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步的描述。
一種治療2型糖尿病的中藥復方制劑，該中藥復方制劑是由下述重量份的原料藥物制成：
姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，匙羹藤5～30份。
一種治療2型糖尿病的中藥復方制劑的制備方法，該方法是水提法，有兩種制備方法：
第一種制備方法包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，匙羹藤5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏；
b．干燥，粉碎成細粉作為活性成分；
c．將步驟b所述的活性成分與藥學上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
第二種制備方法包括下述步驟：
a．按照重量份稱取原料藥物：姜黃10～40份，大黃10～40份，澤瀉5～30份，女貞子5～30份，葡萄籽5～30份，匙羹藤5～30份；加水煎煮兩次，按重量份計，每次煎煮水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏；
b．將步驟a所述的活性成分與藥學上接受的載體或賦形劑一起制成各種劑型。
具體實施例：
實施例l：顆粒劑的制備
按照下列重量份稱取原料藥物：姜黃20份，大黃20份，澤瀉15份，女貞子15份，葡萄籽15份，匙羹藤15份。
將上述原料藥物混合加水煎煮兩次，水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時，煎煮液過濾，濾液合并，靜置十二小時，取上清液濃縮至相對密度為1. 20-1.30 (50-70℃)，與上述200目極細粉混勻為浸膏粉，取浸膏粉：糊精：淀粉：微晶纖維素一5：1：2：2，混勻，制粒，干燥，制成顆粒，即得產(chǎn)品名稱為降糖顆粒。
實施例2：顆粒劑的制備
按照下列重量份稱取原料藥物：姜黃20份，大黃20份，澤瀉15份，女貞子15份，葡萄籽15份，匙羹藤15份。
將上述原料藥物混合加水煎煮兩次，水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時，將煎煮液過濾．合并濾液，濃縮至浸膏，干燥，粉碎成200目細粉；加入適量的輔料淀粉，混勻，制得產(chǎn)品名稱為降糖顆粒。
實施例3：膠囊劑的制備
按照下列重量份稱取原料藥物：姜黃20份，大黃20份，澤瀉15份，女貞子15份，葡萄籽15份，匙羹藤15份。
將上述原料藥物混合加水煎煮兩次，水的加入量是原料藥物總重量份的8倍，每次煎煮2小時，過濾，濾液合并，靜置十二小時，取上清液濃縮至適量干燥，裝入膠囊，即得產(chǎn)品名稱為降糖膠囊。
實施例4：口服液的制備
按照重量計（每重量份為l公斤）稱取原料藥物：姜黃20公斤，大黃20公斤，澤瀉15公斤，女貞子15公斤，葡萄籽15公斤，匙羹藤15公斤。
將原料藥物混合加水煎煮兩次，每次加8倍量水，每次煎煮加水的重量是原料藥物總重量的8倍，每次煎煮2小時，過濾，合并濾液，靜置十二小時，取上清液濃縮至適量，與上述極細粉混合，再加入調(diào)味劑、防腐劑適量，混勻，制成產(chǎn)品名稱為降糖口服液。
實施例5：丸劑的制備
按照重量計（每重量份為l公斤）稱取原料藥物：姜黃20公斤，大黃20公斤，澤瀉15公斤，女貞子15公斤，葡萄籽15公斤，匙羹藤15公斤。
將原料藥物混合加水煎煮兩次，每次煎煮加水的重量是原料藥物總重量的8倍。每次煎煮2小時，過濾，合并濾液，濃縮至浸膏，干燥，粉碎成細粉；加入適量的諸入淀粉等輔料，混勻，水泛為丸，用百草霜包衣，撞光，干燥，即得產(chǎn)品名稱為降糖丸。
本發(fā)明制備方法中的賦形劑、輔料的加入量，依據(jù)制備過程中的具體情況，靈活掌握，也就是文中所述的“適量”。
服用方法：顆粒劑，每天3次，每次一袋，每袋10克；膠囊劑，每天3次，每次3粒，每粒0. 35克；口服液，每天3次，每次l0ml；丸劑：每天3次，每次30粒，每粒0.1克。飯前或飯后服用。注意：兒童或低血糖者不用或慎用。
本發(fā)明經(jīng)華北理工大學中醫(yī)學院中心實驗室急性毒性實驗證明，本品急性經(jīng)口毒性實驗顯示無明顯毒性。
本發(fā)明藥理實驗如下：
降糖顆粒對2型糖尿病大鼠血糖的影響
（一）材料與方法
(1)陽性對照藥雙益降糖顆粒：由魯南厚普制藥有限公司提供。(批準文號：國藥≯隹字210950075)
(2)動物 wistar大鼠，購于中國醫(yī)學科學院中國協(xié)和醫(yī)科大學實驗動物研究所，SPF級，動物合格證號：SCXK<京>2009-0004，體重120±209。
均為雄性。
(3)試劑 鏈脲佐菌素由Sigma提供。
(4)方法 取70只wistar大鼠，隨機分為7組，即空白對照組（鹽水），模型組，西藥對照組，中藥對照組，本藥高劑量組，中劑量組，低劑量組。每周稱體重1次，并相應(yīng)調(diào)整投藥量，連用4周，對照組單給鹽水并隨時觀察大鼠活動情況，于給藥4周，從尾尖采血測定每組大鼠的血糖等，于4周處死給藥組對照組全部動物，并剖取主要臟器，送病理組織室檢查。
（二）結(jié)果
(1)對動物一般情況的影響 給藥組大鼠與空白對照組相比，一般情況無明顯異常。
(2)血糖檢查結(jié)果本發(fā)明藥物與模型組相比餐后血糖及空腹血糖顯著降低（P<0.05）,與二甲雙胍組、雙益降糖顆粒組相比較餐后血糖及空腹血糖無顯著性差異(P>0.05)(表1)。
表1 對治療4周后STZ誘導糖尿病大鼠模型血糖的影響
本發(fā)明中各原料藥物的測試影響：
1、本發(fā)明中的 姜黃素對2型糖尿病大鼠腎臟和肝臟病理改變的影響
方法：將100只雄性Wistar大鼠隨機分為兩組:10只大鼠為空白對照組,90只大鼠為T2DM造模組,采用小劑量鏈脲佐菌素(30mg/kg BW)聯(lián)合高糖高脂飼料誘導T2DM模型組。模型誘導成功后,符合T2DM標準的大鼠39只,隨機分為4組:T2DM模型對照組、姜黃素低劑量組(50 mg/kg BW)、姜黃素中劑量組(150 mg/kg BW)和姜黃素高劑量組(250 mg/kg BW),給予干預。45天后,從各組大鼠中隨機選取4只進行病理檢測,觀察T2DM大鼠腎臟和肝臟的病變進展情況。結(jié)果與對照組相比,T2DM模型組的大鼠血糖、血脂均明顯升高(P<0.05)。與T2DM模型對照組比較,姜黃素干預各組T2DM大鼠腎臟和肝臟的病理改變均有不同程度的改善。結(jié)論姜黃素能夠改善T2DM大鼠肝、腎組織的病理變化。
2、姜黃素對糖尿病大鼠脊髓背角 TNF-α表達的影響
方法：30只SD雄性大鼠隨機分為對照組(Con)、糖尿病組(DM)和姜黃素治療組(DM+Cur),每組10只;利用腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)制備大鼠糖尿病模型,DM+Cur組為糖尿病模型制備成功后給予姜黃素治療,同時Con組和DM組給予等量的生理鹽水。利用ELISA方法檢測各組大鼠脊髓背角TNF-α分子的含量,利用RT-PCR方法比較各組大鼠脊髓背角TNF-αmRNA的表達。結(jié)果:成功制備Ⅰ型糖尿病(TIDM)大鼠模型,該模型具有高血糖、質(zhì)量減輕、多飲、多食、多尿等特點,ELISA檢測結(jié)果顯示Con組、DM組和DM+Cur組大鼠脊髓背角TNF-α分子含量分別為:21±6 pg/mL、145±11 pg/mL以及80±7pg/mL,DM組TNF-α分子含量明顯高于Con組(P<0.05),給予姜黃素治療后,DM+Cur組TNF-α顯著下降,但仍高于Con組(P<0.05)。RT-PCR檢測結(jié)果顯示DM組大鼠脊髓背角TNF-αmRNA高于Con組,給予姜黃素治療后,DM+Cur組TNF-αmRNA較DM組有所降低,這一趨勢與ELISA結(jié)果相一致。結(jié)論:STZ誘導的TIDM大鼠脊髓背角TNF-α表達增加,中藥姜黃素可以降低TIDM大鼠髓背角TNF-α的表達。
3、大黃對糖尿病大鼠血管病變保護機制的實驗研究
方法:制備糖尿病大鼠模型,并給予大黃干預,8周后,取血測定一氧化氮(NO)及內(nèi)皮素-1(ET-1)。取胸主動脈環(huán)觀察不同累積濃度的乙酰膽堿(Ach)對去甲腎上腺素(NE)引起的血管收縮的抑制率。另留取一段胸主動脈制備病理切片,SP法免疫組化染色,觀察細胞間黏附分子-1(ICAM-1)及血管細胞間黏附分子-1(VCAM-1)的陽性表達。結(jié)果:大黃組與模型組相比能明顯抑制升高的血漿ET-1(P<0.05);升高NO的水平(P<0.05);但均達不到正常組的水平(P<0.05)。模型組血管環(huán)對NE的收縮反應(yīng)明顯強于正常對照組及大黃組(P<0.05),且大黃組對NE的收縮反應(yīng)亦強于正常對照組(P<0.05)。在相同Ach濃度下,模型組及大黃組胸主動脈環(huán)對Ach的舒張作用明顯弱于正常組(P<0.05),而大黃組強于模型組(P<0.05)。大黃組能明顯抑制糖尿病大鼠胸主動脈ICAM-1及VCAM-1表達(P<0.05)。結(jié)論:大黃具有降低大鼠ET-1及升高NO的作用,能夠保護糖尿病大鼠內(nèi)皮依賴的血管舒張功能,且能夠抑制ICAM-1及VCAM-1的表達,具有抗動脈硬化作用。
4、大黃酚對糖尿病腦病大鼠海馬中BDNF、iNOS和氧化應(yīng)激的影響
方法:應(yīng)用水迷宮實驗檢測大黃酚對糖尿病大鼠模型學習記憶的影響;應(yīng)用試劑盒法檢測不同實驗組海馬中膽堿酯酶(AChE),膽堿乙?；D(zhuǎn)移酶(ChAT),腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF),誘導型一氧化氮合酶(iNOS)和氧化應(yīng)激相關(guān)指標(CAT、SOD、GSH)的活性。結(jié)果大黃酚改善了糖尿病大鼠模型的學習記憶能力,增強了糖尿病大鼠模型組海馬中AChE和BDNF的活性,抑制了模型組海馬中ChAT、iNOS、CAT、SOD和GSH的活性。結(jié)論大黃酚可能通過增強BDNF的活性,下調(diào)iNOS的功能及抗氧化途徑從而對糖尿病腦病產(chǎn)生保護作用,其可能成為臨床上治療糖尿病腦病的新型藥物。
5、大黃素對2型糖尿病小鼠血糖、胰島素水平的影響
方法:血糖均均≥13.9 mmol/L的SPF級KKAy小鼠40只,隨機分為模型組(灌服無菌水)、低、中、高劑量大黃素治療組[分別予12.5、25、50 mg/(kg.d)大黃素灌胃]和吡格列酮治療組[予1.95 mg/(kg.d)灌胃],連續(xù)給藥8周。8周后測定各組小鼠空腹血糖(FPG)、空腹胰島素(FINS),并計算胰島素敏感指數(shù)(ISI);用RT-PCR法測定小鼠骨骼肌和脂肪組織中PI3-K及GluT4的mRNA。結(jié)果與模型組比較,低、中、高劑量大黃素治療組和吡格列酮治療組小鼠的FPG、FINS、ISI均明顯降低(P均<0.05),且呈劑量依賴性。高劑量大黃素治療組組FINS、ISI均高于吡格列酮治療組(P均<0.05)。與模型組相比,低、中、高劑量大黃素治療組及吡格列酮治療組小鼠PI3-K、GluT4的mRNA明顯增高(P均<0.05)。結(jié)論大黃素具有良好的降血糖、降低胰島素水平和提高胰島素敏感度作用,其機制可能與PI3-K、GluT4基因有關(guān)。
6、澤瀉提取物對鏈脲佐菌素高血糖小鼠的治療和保護作用
方法：①給小鼠腹腔注射STZ 15 0mg?kg-1造成糖尿病動物模型。igRAE 1.5、3.0g?kg-1,分別于給藥前和給藥后 1、2和 5h測定血糖 ;連續(xù)治療 15d后測血糖和血脂。②連續(xù)igRAE 1.5、3.0g?kg-13d ,再ipSTZ 10 5mg?kg-1,并繼續(xù)治療 3d ,用放免法測血清胰島素 ,取胰腺在光鏡下觀察胰島組織學變化。結(jié)果 RAE治療給藥可明顯降低STZ糖尿病小鼠的血糖和甘油三酯。防治給藥可明顯對抗STZ誘發(fā)的血糖升高及胰島組織學改變 ,并能升高血清胰島素水平。結(jié)論 RAE對STZ糖尿病小鼠有明顯的治療和保護作用。
7、澤瀉提取物對正常及四氧嘧啶小鼠糖尿病模型的影響
方法 :給小鼠尾靜脈注射四氧嘧啶 90mg?kg- 1 ,造成糖尿病模型。測定血糖 (Glu)、甘油三酯 (Trig)、膽固醇 (Chol)、胰淀粉酶 (Amy)和血清胰島素 (Ins)。光鏡下觀察胰腺和胰島的組織學變化。結(jié)果 :RAE可使正常小鼠血糖明顯降低。治療 7天可使四氧嘧啶小鼠Glu和Trig降低。光鏡下觀察RAE治療后的四氧嘧啶小鼠 ,胰島保持正常組織學形態(tài)。RAE還可升高血清Ins水平及對抗四氧嘧啶誘發(fā)的Amy降低。
8、女貞子降血糖作用
用女貞子水煎劑15,30g/kg給小鼠灌胃10日,可以降低正常小鼠的血糖,對四氧嘧啶引起的小鼠糖尿病有預防及治療作用,并可對抗腎上腺素或葡萄糖引起的血糖升高。
女貞子中齊墩果酸抗糖尿病效果
女貞子是我國傳統(tǒng)的中藥，通常用來治療癌癥、肝炎等疾病，在降血糖方面雖有報道，但缺乏系統(tǒng)深入的研究。
8、葡萄籽多酚抗糖尿病大鼠非酶糖基化實驗研究
觀察葡萄籽多酚(GSPE)對糖尿病大鼠體內(nèi)非酶糖基化反應(yīng)的影響,評價其對糖尿病慢性并發(fā)癥(DCC)的干預效果。方法Wistar大鼠腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)60mg/kg造成糖尿病模型,隨機分為空白對照組、氨基胍(150mg?kg-1?d-1)治療組、GSPE低、中、高3個劑量(50、150、450mg?kg-1?d-1)治療組,每組12只,另12只設(shè)為正常對照組。常規(guī)喂養(yǎng)12周后取大鼠血清及臟器,比較各組腎重/體重比值,用熒光法比較各組腎皮質(zhì)非酶糖基化終產(chǎn)物(AGEs),全自動生化儀檢測血糖、總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)。結(jié)果與空白對照組比較,GSPE可以顯著降低糖尿病大鼠腎重/體重比值(P<001),減少腎皮質(zhì)AGEs(P<001),GSPE中、高劑量組與氨基胍治療組作用相似;GSPE對血糖、TG無顯著影響,僅GSPE中劑量組TC與正常對照組比較差異有顯著性(P<001)。結(jié)論GSPE能夠抑制體內(nèi)非酶糖基化反應(yīng),是其防治DCC的主要作用機制之一。
9、葡萄籽提取物原花青素對糖尿病小鼠的抗氧化作用
方法:以四氧嘧啶小鼠制備糖尿病模型,將造模成功后的小鼠,分為模型組、GSEP低、中、高3個劑量(50、100、150 mg/kg)組,另設(shè)正常對照組。連續(xù)給藥28 d后,空腹12 h后,取全血和肝臟,測定全血和肝組織中超氧歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)活力以及丙二醛(MDA)含量。結(jié)果經(jīng)口給予小鼠GSEP 28 d后,高劑量組小鼠全血和肝組織中SOD和GSH-Px活性均明顯高于模型組(P<0.05),中、高劑量組小鼠全血和肝組織中丙二醛(MDA)含量均明顯低于模型組(均P<0.05)。結(jié)論 GSEP對糖尿病小鼠具有明顯的抗氧化保護作用。
10、匙羹藤莖降血糖作用
方法:采用四氧嘧啶性糖尿病大鼠模型,用放射免疫分析和免疫組化SP染色等方法進行研究。結(jié)果:GSEE可使四氧嘧啶性糖尿病大鼠的血糖值降低、血清胰島素水平升高,還能升高SOD活性、降低MDA含量,提高肝糖原含量,明顯升高胸腺和胰腺的重量指數(shù),抵抗四氧嘧啶引起的胸腺、胰腺萎縮。大鼠胰腺的HE染色和免疫組織化學染色可見,GSEE各劑量組胰島β細胞形態(tài)、結(jié)構(gòu)與模型對照組比較,有不同程度的改善。GSEE對四氧嘧啶性糖尿病大鼠體重和TC、TG無明顯影響。結(jié)論:GSEE對四氧嘧啶性糖尿病大鼠具有顯著的降血糖作用,其降糖機制可能與GSEE促進四氧嘧啶所致糖尿病大鼠胰島β細胞損傷的修復,促進胰島素分泌和降低胰島素分解速度,促進肝細胞糖原合成等類胰島素樣作用和清除自由基及抗脂質(zhì)過氧化過程有關(guān)。
11、匙羹藤有效成分牛彌菜醇A急性毒性及降糖作用研究
方法:牛彌菜醇A按100,200,400 mg.kg-1連續(xù)灌胃14d后,觀察其對糖尿病小鼠血糖和正常小鼠的體質(zhì)量、血糖、糖耐量的影響。結(jié)果牛彌菜醇A能明顯降低四氧嘧啶性糖尿病小鼠和腎上腺素性糖尿病小鼠的血糖值(P<0.01);較高劑量對正常小鼠的血糖和體重有一定的影響(P<0.05);能增強正常小鼠的葡萄糖耐受能力,耐受時間在1h左右;牛彌菜醇A的MTD大于750 mg.kg-1,相當于臨床成人日用藥的430.29倍。結(jié)論牛彌菜醇A對高血糖小鼠有顯著的降血糖作用。