本發(fā)明涉及中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種用于治療過(guò)敏性鼻炎的中藥配方顆粒劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

過(guò)敏性鼻炎又稱(chēng)變應(yīng)性鼻炎，是由 IgE介導(dǎo)的速發(fā)型超敏反應(yīng)，是鼻黏膜組織的一種非感染性炎癥，主要表現(xiàn)為鼻癢、噴嚏反復(fù)發(fā)作，鼻流清涕等癥狀。目前尚缺乏有效且副作用少的藥物。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為屬于中醫(yī)學(xué)“鼻鼽”、“鼽嚏”的范疇。肺金不清，霧氣瘀濁，不能化水，則凝郁于胸膈而痰生，熏蒸于鼻竅而涕化。痰涕之作，皆由于辛金之不降也。而肺氣之郁，總由土濕而胃逆，胃逆則濁氣填塞，肺無(wú)降路故也。因此，過(guò)敏性鼻炎的治療應(yīng)以清肺氣、降胃逆為主。中醫(yī)藥治療鼻炎療效可靠，毒副作用小，具有廣闊的前景，但現(xiàn)有技術(shù)中治療鼻炎的中藥療效不是很明顯，仍可提高。

發(fā)明目的：為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療過(guò)敏性鼻炎的中藥配方顆粒劑及其制備方法和應(yīng)用。

技術(shù)方案：本發(fā)明的目的是通過(guò)如下的方案實(shí)現(xiàn)的：

一種治療過(guò)敏性鼻炎的配方顆粒，所含的活性成分由下列重量份原料配比制備而成：紫菀18份、桔梗18份、半夏18份、干姜18份、玄參18份、苦杏仁18份、陳皮18份、茯苓18份、五味子6份、辛夷6份、甘草12份。

治療過(guò)敏性鼻炎的配方顆粒制備方法，它是將紫菀18份、桔梗18份、半夏18份、干姜18份、玄參18份、苦杏仁18份、陳皮18份、茯苓18份、五味子6份、辛夷6份、甘草12份，放入煎藥器具內(nèi)，加入飲用水提取2次，第一次加水量為藥材重量的10倍量，煎煮2小時(shí)；第二次加水量為藥材重量的8倍量，煎煮1小時(shí)；將兩次煎液合并，濃縮，冷凍干燥，即得顆粒。

所述中藥組合物在制備治療過(guò)敏性鼻炎藥物中的應(yīng)用。

本方中主要成分：

紫菀，菊科植物紫菀的根及根莖。性溫，味苦；溫肺，下氣，消痰，止咳；治風(fēng)寒咳嗽氣喘，虛勞咳吐膿血，喉痹，小便不利。（《中藥大辭典》3275-3277頁(yè)，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，第二版，2006）。

桔梗，為桔?？浦参锝酃５母?。 性苦辛、平。開(kāi)宣肺氣，祛痰排膿。（《中藥大辭典》 2526-2529頁(yè)，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，第二版，2006）。

半夏，為天南星科植物半夏的塊莖。性溫，味辛。燥濕化痰，降逆止嘔，消痞散結(jié)。治濕痰冷飲，嘔吐，反胃，咳喘痰多，胸膈脹滿，痰厥頭痛，頭暈不眠。（《中藥大辭典》1771-1775頁(yè)，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，第二版，2006）。

干姜，為姜科植物姜的干燥根莖。性熱，味辛。溫中逐寒，回陽(yáng)通脈。治心腹冷痛，吐瀉，肢冷脈微，寒次喘咳，風(fēng)寒濕痹，陽(yáng)虛吐、衄、下血。（《中藥大辭典》98-101頁(yè)，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社，第二版，2006）。

根據(jù)中藥配伍理論：紫菀和桔梗相須使用，共奏宣肺氣，降肺金之效。半夏畏生姜，生姜?dú)胂模吲湮槭褂眉纯山獍胂闹《?，又可相使共奏降逆化痰之效?/p>

采用上述技術(shù)方案的有益效果是：

本發(fā)明采用卵清蛋白(ovalbumin, OVA)混懸液腹腔注射及滴鼻造模法建立過(guò)敏性鼻炎豚鼠模型，用不同濃度的配方顆粒進(jìn)行治療。分別行為學(xué)評(píng)分考察模型制備及藥物治療情況、采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)各組IgE、組胺、IL-4、TNF-α水平及免疫印跡實(shí)驗(yàn)檢測(cè)COX-1、COX-2和MUC5AC蛋白表達(dá)評(píng)價(jià)配方顆粒對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠的治療效果。通過(guò)SPSS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)配方顆粒對(duì)OVA 所致過(guò)敏性鼻炎豚鼠具有明顯的保護(hù)效果且不影響COX-1蛋白表達(dá)。

過(guò)敏性鼻炎是一種常見(jiàn)的耳鼻咽喉科疾病，鼻癢、鼻塞、打噴嚏和流鼻涕等一系列的鼻炎臨床癥狀會(huì)嚴(yán)重影響到病人的生活質(zhì)量。現(xiàn)在有很多藥物包括抗組胺類(lèi)、皮質(zhì)激素類(lèi)、減充血?jiǎng)┖捅莾?nèi)抗膽堿類(lèi)藥物被用來(lái)治療過(guò)敏性鼻炎，但是這些藥物的副反應(yīng)和較低的臨床效果仍然存在。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)我國(guó)傳統(tǒng)中藥對(duì)該病具有較好的治療效果，如能公開(kāi)并授權(quán)，將再次彰顯我國(guó)傳統(tǒng)中藥的優(yōu)勢(shì)和獨(dú)特之處，為臨床治療過(guò)敏性鼻炎做出一定的貢獻(xiàn)。

附圖說(shuō)明

圖1為中藥顆粒劑對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠COX-1和COX-2的影響對(duì)比圖A。

圖2為中藥顆粒劑對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠COX-1和COX-2的影響對(duì)比圖B。

圖3為中藥顆粒劑對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠COX-1和COX-2的影響對(duì)比圖C。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)實(shí)施例進(jìn)行說(shuō)明，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實(shí)例，凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實(shí)現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。

一種治療過(guò)敏性鼻炎的配方顆粒，所含的活性成分由下列重量份原料配比制備而成：紫菀18份、桔梗18份、半夏18份、干姜18份、玄參18份、苦杏仁18份、陳皮18份、茯苓18份、五味子6份、辛夷6份、甘草12份。

治療過(guò)敏性鼻炎的配方顆粒制備方法，它是將紫菀18份、桔梗18份、半夏18份、干姜18份、玄參18份、苦杏仁18份、陳皮18份、茯苓18份、五味子6份、辛夷6份、甘草12份，放入煎藥器具內(nèi)，加入飲用水提取2次，第一次加水量為藥材重量的10倍量，煎煮2小時(shí)；第二次加水量為藥材重量的8倍量，煎煮1小時(shí)；將兩次煎液合并，濃縮，冷凍干燥，即得顆粒。

所述中藥組合物在制備治療過(guò)敏性鼻炎藥物中的應(yīng)用

經(jīng)實(shí)驗(yàn)應(yīng)用實(shí)例如下：

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、主要試劑和儀器

豚鼠購(gòu)自重慶醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心，動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(Yu)2012-0005；在符合清潔標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)室( T22~25℃, 濕度50~70% ) 飼養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)藥物夠自北京同仁堂藥房；OVA （Sigma, USA, 批號(hào)A5378）；IgE（201412）、組胺（201412）、IL-4（201503）、TNF-α（201503）ELISA試劑盒購(gòu)自購(gòu)自上海江萊生物科技有限公司。COX-1（ab695）和COX-2（ab52237）、抗體均購(gòu)自Abcam公司。DDY-10型三恒電泳儀（Bio-Rad, USA），半干轉(zhuǎn)印槽（Bio-Rad, USA），全自動(dòng)電泳凝膠成像分析系統(tǒng)（Bio-Rad, USA）。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

1、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組給藥：

每只豚鼠以O(shè)VA 0.3 mg作抗原，氫氧化鋁粉末30 mg作為佐劑，加生理鹽水1mL制成混懸液進(jìn)行腹腔注射，隔日1次，共7次，為基礎(chǔ)致敏。再以2 g/L OVA生理鹽水溶液滴鼻，每側(cè)10 μL，連續(xù)7 d。造模成功后，隔日給予OVA 2 g/L滴鼻以維持對(duì)鼻黏膜的刺激。根據(jù)行為學(xué)觀察確定造模成功以后，隨機(jī)分組如下：正常對(duì)照組、模型組、氯雷他定組、藥物治療組（低、中、高劑量組）。氯雷他定組（2 mg/kg）和藥物治療組（4、8、16 mg/kg）灌胃，每日1次，連續(xù)7天。正常組和模型組灌胃等體積生理鹽水。觀察豚鼠噴嚏、抓搔、流涕。在OVA滴鼻30 min內(nèi)觀察鼻炎癥狀，記錄撓鼻、噴嚏次數(shù)及清涕出現(xiàn)的輕重程度，每日觀察1次。

2、癥狀分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)：

每次攻擊后均觀察30 min，觀察項(xiàng)目包括鼻癢、鼻涕程度和噴嚏次數(shù)等，記錄豚鼠行為學(xué)得分，評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)見(jiàn)表1，總分超過(guò)5分為動(dòng)物模型成功。

表 1 豚鼠過(guò)敏性鼻炎癥狀分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

3、行為學(xué)觀察

隔天滴鼻激發(fā)，按表1的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)分。

4、檢測(cè)豚鼠血清中IgE、組胺、TNF-α和IL- 4的水平

取豚鼠血清，采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測(cè)血清OVA特異性IgE、組胺、IL-4、TNF-α。嚴(yán)格按照試劑盒操作。

5、Western blot檢測(cè)COX-1和COX-2蛋白表達(dá)

利用總蛋白提取試劑盒提取總蛋白后，BCA試劑盒測(cè)定蛋白濃度，加熱使之變性，20 μg蛋白上樣，采用12%SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白。電泳后將蛋白轉(zhuǎn)印至PVDF膜，5%脫脂奶粉封閉2 h后，加入一抗（COX-1，1:1 000；COX-2，1:1 000）4℃封閉過(guò)夜，TBST洗3次，加二抗（1:5 000）封閉液封閉1 h，采用ECL發(fā)光法，掃描記錄。

6、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示。各組間的兩兩比較采用單因素方差分析，方差齊用LSD檢驗(yàn)，P<0.05為有顯著意義。

（三）實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、中藥顆粒劑對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠鼻部癥狀的影響, n=10

注：與正常對(duì)照組比較，^*P<0.05; 與模型組比較，^#P<0.05

2、中藥顆粒劑對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠血清中組胺、IgE、TNF-α 和IL-4水平的影響, n=10

注：與正常對(duì)照組比較，^*P<0.05; 與模型組比較，^#P<0.05。

3、中藥顆粒劑對(duì)過(guò)敏性鼻炎豚鼠COX-1和COX-2的影響，如圖1、圖2、圖3所示。