本發(fā)明屬于化妝品天然防腐技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有強效、廣譜抑菌活性的天然防腐組合物的制備及復配。
背景技術(shù)：
化妝品在生產(chǎn)、儲藏以及使用過程中很容易受微生物的污染而變質(zhì)，而且隨著化妝品功能性多樣化的增加，營養(yǎng)物質(zhì)的添加會使微生物極易在產(chǎn)品中生長繁殖，而添加防腐劑會抑制這些微生物的滋生，防止產(chǎn)品的腐敗變質(zhì)，減少因產(chǎn)品變質(zhì)給皮膚帶來的危害，在此層面防腐劑是化妝品中必不可少的成分。
但隨著近年來人們對防腐劑安全性的認識和對于合成型防腐劑的“談虎色變”，經(jīng)過長期研究發(fā)現(xiàn)，化學合成的防腐劑是化妝品配方中導致人體皮膚刺激、過敏、發(fā)炎以及潛在安全風險的重要因素之一。除此之外，此類防腐劑的使用還會對人體造成累積性的慢性危害，例如：形成不健全的角質(zhì)層、加速皮膚老化等。因此，尋求一種天然的綠色防腐劑成為了化妝品生產(chǎn)中的一種趨勢。
天然抑菌提取物主要以植物多酚、黃酮、皂苷、生物堿、有機酸等物質(zhì)來達到抑菌的效果。但單一的植物提取物往往存在抑菌效果較差、抑菌譜窄等不足，因此，通過將具有不同抑菌活性的植物提取物進行適當?shù)膹团?，得到抑菌效果好，并且廣譜的天然防腐體系，是目前化妝品天然防腐的可行方案之一。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是為了替代或降低化學防腐劑的用量，并克服單一植物抑菌提取物抑菌活性差的缺陷，提供一種含有若干種植物提取物的防腐組合物，通過充分發(fā)揮組合物之間的協(xié)同增效作用，大大提高防腐組合物的抑菌效果和抑菌譜。而且天然來源，對人體更溫和、安全、無刺激。
為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種用于化妝品的強效廣譜天然防腐組合物，其特征在于由2～8種抗細菌和真菌的植物提取物復配組成，每種提取物的重量百分比為10～80％。
作為本發(fā)明所述的天然防腐組合物的一種優(yōu)選方案，其中：所述組合物由抑制細菌的植物提取物：透骨草、紫蘇、厚樸、毛竹、荷葉、桑葉、紫花地丁、蒲公英、鐵皮石斛、牛蒡子、金銀花和魚腥草中的一種或幾種組成。
作為本發(fā)明所述的天然防腐組合物的一種優(yōu)選方案，其中：所述組合物由抑制真菌的植物提取物：肉桂、石菖蒲、決明子、苦參、大黃、紅花、銀杏葉和青蒿中的一種或幾種組成。
作為本發(fā)明所述的天然防腐組合物的一種優(yōu)選方案，其中：天然防腐組合物中不同植物提取物對細菌和真菌的作用部位不同，可分別作用于細胞壁、細胞膜、核酸以及酶蛋白部位，并通過協(xié)同作用，提高組合物的抑菌能力。
作為本發(fā)明所述的天然防腐組合物的一種優(yōu)選方案，其中：天然防腐組合物的制備方法為將各原料粉碎后分別用水、乙醇、丙酮和石油醚浸提，然后按不同比例復配，即得到廣譜、強效的天然防腐組合物。
作為本發(fā)明所述的天然防腐組合物的一種優(yōu)選方案，其中：植物浸提時間為1～4h，浸提溫度為40～80℃，料液比為10～40倍。
作為本發(fā)明所述的天然防腐組合物的一種優(yōu)選方案，其中：天然防腐組合物具有抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、綠膿桿菌、白色念珠菌以及黑曲霉菌的作用。
本發(fā)明的天然防腐組合物，能安全、有效的應用于面膜、膏霜、乳液、香波、洗面奶、沐浴乳等化妝品體系。
本發(fā)明的有益效果：
(1)提供化妝品用的天然防腐組合物，用以替代化學防腐劑或降低化學防腐劑的用量，避免化學防腐劑對人體安全的潛在風險；(2)該組合物能抑制革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌以及霉菌，具有較寬的抑菌譜，且充分體現(xiàn)組合物協(xié)同增效的作用，具有比單一提取物更高效的抑菌效果；(3)另外，植物提取物還具有抗炎、抗氧化、抗紫外線、抗衰老以及美白等護膚功效，這是化學合成防腐劑所不能相比的。
具體實施方式
以下通過具體實施例來對本發(fā)明作進一步的說明，但這些實施例只是為了說明，不是對本發(fā)明的限制。
實施例1 天然防腐組合物
實施例2 天然防腐組合物抑菌效果評價
1.樣品溶液的制備
分別稱取等量的厚樸提取物、毛竹葉提取物、透骨草提取物以及肉桂提取物，用乙醇水溶液配成200mg/mL的樣品溶液，按照實施例1中的配比進行組合，備用。
2.菌懸液的配制
1)試驗菌株：金黃色葡萄球菌(ATCC6538)、大腸桿菌(ATCC11229)、白色假絲酵母(ATCC10231)、黑曲霉菌(ATCC16404)。
2)培養(yǎng)基：
牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基(細菌用)：牛肉浸膏3g，胰蛋白胨10g，氯化鈉5g，加水至1000mL，調(diào)節(jié)pH7.2～7.4，高壓濕熱滅菌(103.4kPa，121℃，20min)，備用。配制固體培養(yǎng)基時加入20g瓊脂。
麥芽汁培養(yǎng)基(酵母菌用)：將發(fā)酵啤酒的原料(未加酒花)，稀釋至10柏林，高壓濕熱滅，備用。配制固體培養(yǎng)基時加入20g瓊脂。
馬鈴薯培養(yǎng)基(霉菌用)：將去皮馬鈴薯200g切成小塊，加水煮沸20min，用三層紗布過濾，加入20g葡萄糖，將濾液補足1000mL，高壓濕熱滅菌，備用。配制固體培養(yǎng)基時加入20g瓊脂。
3)活化菌種并配制菌懸液：用接種環(huán)挑取一環(huán)菌株(細菌和酵母菌)于滅菌的液體培養(yǎng)基中，霉菌用接種環(huán)挑取孢子在斜面培養(yǎng)基上劃線接種，傳代培養(yǎng)2～3代活化菌種。將活化好的菌懸液(孢子懸液)調(diào)節(jié)至1×108CFU/mL，通過對數(shù)稀釋法稀釋至所需濃度。
3.紙片法測定抑菌效果
根據(jù)試驗菌所需營養(yǎng)物質(zhì)配制相應的固體培養(yǎng)基，當培養(yǎng)基溫度在45～50℃時取20mL于直徑為90mm的培養(yǎng)皿中，待培養(yǎng)基冷卻凝固后置于37℃的培養(yǎng)箱中干燥20～25min。吸取1×106CFU/mL的菌懸液(孢子懸液)100μL接種于培養(yǎng)皿中，涂布均勻。待培養(yǎng)基表面水分完全吸收后，用無菌鑷子取直徑6mm的濾紙片貼于培養(yǎng)基表面，再從紙片中心緩慢滴加10μL 200mg/mL的植物提取液。在接種后15min內(nèi)完成以上操作，每皿2～3張紙片(以抑菌圈明顯，且無重疊為準)，重復3皿。將培養(yǎng)皿倒置于生化培養(yǎng)箱中，細菌在37℃下孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃下孵育48h，用游標卡尺十字交叉法量取抑菌圈直徑。
以上工作均在超凈臺上完成。
4.試驗結(jié)果
抑菌實驗結(jié)果見表1。
表1
由表1可知，厚樸提取物、毛竹葉提取物具有較廣譜的抑菌活性，但抑菌能力較弱；透骨草提取物對細菌的抑制效果較好，而對真菌的抑制作用較差；肉桂提取物對細菌的抑制效果較差，對酵母菌和霉菌的抑制效果突出。天然防腐組合物具有更為廣譜的抑菌活性，且抑菌效果增加。
實施例3 天然防腐組合物的最小抑菌濃度(MIC)以及最小殺菌濃度(MBC)的測定
1.最小抑菌濃度(MIC)
最小抑菌濃度的測定采用常量肉湯稀釋法。將植物提取物用二甲亞砜(DMSO)溶解成1000mg/mL作為原液，再連續(xù)倍比稀釋至一系列濃度。取若干滅菌試管，每支試管加入1.8mL液體培養(yǎng)基，0.1mL1×107CFU/mL的菌懸液(孢子懸液)以及0.1mL植物提取液。細菌在37℃的恒溫水浴震蕩器(200r/min)中孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃的水浴搖床中孵育48h，然后觀察每支試管中是否有菌生長，以抑制菌體生長的最低濃度作為MIC。每個樣品重復3次。
2.最小殺菌濃度(MBC)
最小殺菌濃度定義為99.9％的菌體被抗菌物質(zhì)殺死時的最低濃度。取等于和低于MIC處理的菌液100μL于含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿表面，涂布均勻。將培養(yǎng)皿置于生化培養(yǎng)箱中，細菌在37℃下孵育24h，酵母菌和霉菌在28℃下孵育48h，小于0.01％的菌落生長時抑菌物質(zhì)的濃度為MBC。
3.MIC和MBC結(jié)果
MIC的結(jié)果見表2，MBC的結(jié)果見表3。
表2
注：---表示未能在實驗濃度范圍內(nèi)檢測到最小抑菌濃度
表3
注：---表示未能在實驗濃度范圍內(nèi)檢測到最小殺菌濃度
由表2和表3可知，單一植物提取物相比，天然防腐組合物具有高效、廣譜的抑菌活性。單一植物提取物的MBC均大于或等于各自的MIC值，說明單一植物提取物在最小抑菌濃度下殺菌效率較差，而天然防腐組合物的MBC與MIC值相等，這也從側(cè)面說明在天然防腐組合物的最小抑菌濃度下具有很好的殺菌效果，在實際應用中可以適當降低添加量的情況下滿足防腐要求。
以上對本發(fā)明的具體實施例進行了詳細描述，僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施例而已，并不限制本發(fā)明。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，本發(fā)明可以有各種更改和變化。因此，在不脫離本發(fā)明精神和范圍下所作的變化、修改以及改進，均應包含在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。