本發(fā)明涉及生物制劑領(lǐng)域，特別涉及一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
目前，隨著微生物耐藥性的日趨嚴(yán)峻，耐藥菌及其耐藥譜的快速遞增，多重耐藥菌及超級耐藥菌成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中的一個棘手問題，尋找新的有效且無毒副作用的抗菌制劑成為治療微生物感染性疾病迫切需要解決的問題。
噬菌體是感染細(xì)菌、真菌、放線菌、螺旋體等微生物的病毒，對宿主菌具有高度的專一性。根據(jù)其侵染宿主菌后的狀態(tài)和結(jié)果，噬菌體分為兩種類型，其中一種能在宿主菌細(xì)胞內(nèi)復(fù)制增殖，產(chǎn)生許多子代噬菌體，并最終裂解細(xì)菌，稱為烈性或毒性噬菌體。毒性噬菌體侵染細(xì)菌后，能在細(xì)菌中增殖并殺死細(xì)菌，而對動植物沒有毒性。因此，毒性噬菌體以其特有的自然特征，被期待成為較好的抗菌藥。然而，裸露的噬菌體很容易被胃液等機體抗性因子滅活，而被宿主菌保護(hù)的噬菌體，因為噬菌體已經(jīng)侵入宿主菌，必需首先破壞細(xì)菌，方能進(jìn)一步破壞噬菌體。因此，受宿主菌保護(hù)的噬菌體比單純噬菌體抵抗力更強。只有有效的保持噬菌體的抗菌活性，減少機體抵抗力對噬菌體抗菌效力的削減，才能使噬菌體真正走向臨床應(yīng)用。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于，提供一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑及其制備方法，所述微生物制劑中的噬菌體突破機體免疫屏障，可以預(yù)防和治療機體內(nèi)相應(yīng)原核和真核細(xì)胞型微生物所致的感染性腸道疾病。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題還在于，提供一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑及其制備方法，可以預(yù)防和治療過敏性腹瀉。
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題還在于，提供一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑及其制備方法，能減緩動物源性耐藥菌的產(chǎn)生。
為達(dá)到上述技術(shù)效果，本發(fā)明提供了一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑，其由下述以重量份計的原料制成：蒙脫石預(yù)處理物2-6份、嗜酸乳桿菌粉0.5-5份、糞鏈球菌粉0.1-3份，甘草粉1-3份，石榴皮粉0.1-2份，
其中，蒙脫石預(yù)處理物由下述方法制得：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入15-25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為0.5-1:1-2，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于12%；最后將混合物磨成粉末狀。
優(yōu)選地，微生物制劑由下述以重量份計的原料制成：蒙脫石預(yù)處理物3-5份、嗜酸乳桿菌粉1-4份、糞鏈球菌粉0.5-2份，甘草粉1.5-2.5份，石榴皮粉0.5-1.5份。
優(yōu)選地，微生物制劑由下述以重量份計的原料制成：蒙脫石預(yù)處理物4份、嗜酸乳桿菌粉2份、糞鏈球菌粉1份，甘草粉2份，石榴皮粉1份。
優(yōu)選地，所述蒙脫石預(yù)處理物由下述方法制得：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入20-25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為0.8-1:1.5-2，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀。
優(yōu)選地，所述蒙脫石預(yù)處理物由下述方法制得：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入20%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為1:1.8，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀。
優(yōu)選地，微生物制劑還包括黃連素，所述黃連素的添加量為2-5份。
優(yōu)選地，微生物制劑還包括鈣劑，所述鈣劑的添加量為0.1-3份。
優(yōu)選地，所述嗜酸乳桿菌粉由下述方法制得：
分離培養(yǎng)篩選嗜酸乳桿菌菌種，選用液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的嗜酸乳桿菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下進(jìn)行高速離心，取沉淀物冷凍干燥，得到嗜酸乳桿菌粉；
或者，分離培養(yǎng)篩選嗜酸乳桿菌菌種，選用固體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的嗜酸乳桿菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下攪拌粉碎，得到嗜酸乳桿菌粉。
優(yōu)選地，所述糞鏈球菌粉由下述方法制得：
分離培養(yǎng)篩選糞鏈球菌菌種，選用液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的糞鏈球菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下進(jìn)行高速離心，取沉淀物冷凍干燥，得到糞鏈球菌粉；
或者，分離培養(yǎng)篩選糞鏈球菌菌種，選用固體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的糞鏈球菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下攪拌粉碎，得到糞鏈球菌粉。
相應(yīng)的，本發(fā)明還提供一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑的制備方法，包括：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入15-25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為0.5-1:1-2，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于12%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻，即成成品。
實施本發(fā)明具有如下有益效果：
本發(fā)明提供一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑，包括蒙脫石預(yù)處理物2-6份、嗜酸乳桿菌粉0.5-5份、糞鏈球菌粉0.1-3份，甘草粉1-3份，石榴皮粉0.1-2份。其中，蒙脫石預(yù)處理物是由蒙脫石納米粉、噬菌體液制成，本復(fù)合物自身具有良好的防治腸道敏感等導(dǎo)致的水樣急性腹瀉的功效，且通過蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草和石榴皮粉的協(xié)同作用，尚可達(dá)到在培養(yǎng)液中富集噬菌體和在機體內(nèi)保護(hù)噬菌體通過胃酸屏障的功效，所述噬菌體突破機體免疫屏障，可以預(yù)防和治療機體內(nèi)相應(yīng)原核和真核細(xì)胞型微生物所致的感染性疾病，且能減少動物抗菌藥物的使用，降低動物產(chǎn)品抗菌藥物殘留，減緩動物源性耐藥菌的產(chǎn)生，避免耐藥性細(xì)菌在動物間或動物與人之間傳播。
本發(fā)明還提供一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑的制備方法，所述制備方法過程簡單，工藝簡單，操作簡單，成本低，生產(chǎn)效率高，可以廣泛應(yīng)用。
具體實施方式
為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將對本發(fā)明作進(jìn)一步地詳細(xì)描述。
本發(fā)明提供了一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑，其由下述以重量份計的原料制成：蒙脫石預(yù)處理物2-6份、嗜酸乳桿菌粉0.5-5份、糞鏈球菌粉0.1-3份，甘草粉1-3份，石榴皮粉0.1-2份，其中，蒙脫石預(yù)處理物由下述方法制得：將過濾得到的純化噬菌體液里加入15-25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為0.5-1:1-2，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于12%；最后將混合物磨成粉末狀。
優(yōu)選地，微生物制劑由下述以重量份計的原料制成：蒙脫石預(yù)處理物3-5份、嗜酸乳桿菌粉1-4份、糞鏈球菌粉0.5-2份，甘草粉1.5-2.5份，石榴皮粉0.5-1.5份。所述蒙脫石預(yù)處理物由下述方法制得：將過濾得到的純化噬菌體液里加入20-25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為0.8-1:1.5-2，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀。
更佳地，微生物制劑由下述以重量份計的原料制成：蒙脫石預(yù)處理物4份、嗜酸乳桿菌粉2份、糞鏈球菌粉1份，甘草粉2份，石榴皮粉1份。所述蒙脫石預(yù)處理物由下述方法制得：將過濾得到的純化噬菌體液里加入20%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為1:1.8，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀。
本發(fā)明的蒙脫石預(yù)處理物是由蒙脫石納米粉、噬菌體液制成，蒙脫石納米粉（montmorillonite）又名微晶高嶺石或膠嶺石，是一種硅鋁酸鹽，其主要成分為八面體蒙脫石納米粉微粒。蒙脫石納米粉既有輔助抗腹瀉作用，又可以幫助制劑中的活性微生物保持活性通過胃酸屏障。具體的，蒙脫石納米粉直接吸附其他益生菌，包括蠟樣芽胞桿菌、雙歧桿菌、保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌，這樣雙雙具有增效作用，蒙脫石納米粉吸附并保護(hù)益生菌，幫助其通過胃液屏障。噬菌體具有特異性殺菌作用，由于噬菌體具有自我擴(kuò)增循環(huán)放大特異性抗菌殺菌的功效，對正常菌群及正常細(xì)胞沒有殺滅作用，只要有少量的活性噬菌體進(jìn)入體內(nèi)，噬菌體即可主動追蹤相應(yīng)病原菌，直至徹底清除。因此，本預(yù)處理物自身具有良好的防治腸道敏感等導(dǎo)致的水樣急性腹瀉的功效。
上述蒙脫石預(yù)處理物配合嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草和石榴皮粉，其中，甘草味甜，可以改善口感，且具有抗炎，抗過敏作用，對腸道過敏性腹瀉有一定的緩解作用；石榴皮具有收斂、抗菌、抗病毒和驅(qū)蟲作用，對腸道多種原因?qū)е碌母篂a有一定的療效；糞鏈球菌（Enterococcus faecalis）是革蘭氏陽性，過氧化氫陰性球菌，是人和動物腸道內(nèi)主要菌群之一 ，其能產(chǎn)生天然抗生素，有利于機體健康 ；同時還能產(chǎn)生細(xì)菌素等抑菌物質(zhì)，抑制大腸桿菌和沙門氏菌等病原菌的生長，改善腸道微環(huán)境；還能抑制腸道內(nèi)產(chǎn)尿素酶細(xì)菌和腐敗菌的繁殖，減少腸道尿素酶和內(nèi)毒素的含量，使血液中氨和內(nèi)毒素的含量下降。嗜酸乳桿菌屬于乳桿菌屬，革蘭氏陽性桿菌，能調(diào)整腸道菌群平衡，抑制腸道不良微生物的增殖。嗜酸乳桿菌能分泌抗生物素類物質(zhì)(嗜酸乳菌素(acidolin)、嗜酸桿菌素(acidophilin)、乳酸菌素(1aetocidon)), 對腸道致病菌產(chǎn)生的拮抗作用。
通過上述蒙脫石納米粉、甘草、石榴皮、噬菌體、嗜酸乳桿菌粉和糞鏈球菌粉的協(xié)同作用，本發(fā)明微生物制劑可以有效防御和治療多種動物的腹瀉，包括豬、牛、羊、驢、貓、狗、兔子、青蛙、魚、章魚、海參、龜、海膽。且能減少動物抗菌藥物的使用，降低動物產(chǎn)品抗菌藥物殘留，減緩動物源性耐藥菌的產(chǎn)生，避免耐藥性細(xì)菌在動物間或動物與人之間傳播。
需要說明的是，純化噬菌體液是指特異性裂解腸道病原菌，包括致病性大腸桿菌、痢疾桿菌、沙門氏菌、霍亂弧菌、艱難梭菌、葡萄球菌。
進(jìn)一步，所述嗜酸乳桿菌粉為市售或自制乳酸桿菌活菌干粉：嗜酸乳桿菌為腸道益生菌，單獨和協(xié)同使用，均有改善腸道微生態(tài)環(huán)境，使腸道不利于病原菌生長的功效。
優(yōu)選地，所述嗜酸乳桿菌粉由下述方法制得：
分離培養(yǎng)篩選嗜酸乳桿菌菌種，選用液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的嗜酸乳桿菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下進(jìn)行高速離心，取沉淀物冷凍干燥，得到嗜酸乳桿菌粉；
或者，分離培養(yǎng)篩選嗜酸乳桿菌菌種，選用固體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的嗜酸乳桿菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下攪拌粉碎，得到嗜酸乳桿菌粉。
更佳地，所述嗜酸乳桿菌粉由下述方法制得：
分離培養(yǎng)篩選嗜酸乳桿菌菌種，選用液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的嗜酸乳桿菌菌種，然后在40-50℃溫度條件下進(jìn)行高速離心，取沉淀物冷凍干燥，得到嗜酸乳桿菌粉；
或者，分離培養(yǎng)篩選嗜酸乳桿菌菌種，選用固體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的嗜酸乳桿菌菌種，然后在40-50℃溫度條件下攪拌粉碎，得到嗜酸乳桿菌粉。
所述糞鏈球菌粉為市售或自制糞鏈球菌活菌干粉：糞鏈球菌同為腸道益生菌，且具有良好的抗腹瀉功效。單獨和協(xié)同使用，也有改善腸道微生態(tài)環(huán)境，使腸道不利于病原菌生長的功效。
優(yōu)選地，所述糞鏈球菌粉由下述方法制得：
分離培養(yǎng)篩選糞鏈球菌菌種，選用液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的糞鏈球菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下進(jìn)行高速離心，取沉淀物冷凍干燥，得到糞鏈球菌粉；
或者，分離培養(yǎng)篩選糞鏈球菌菌種，選用固體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的糞鏈球菌菌種，然后在低于50℃溫度條件下攪拌粉碎，得到糞鏈球菌粉。
更佳地，所述糞鏈球菌粉由下述方法制得：
分離培養(yǎng)篩選糞鏈球菌菌種，選用液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的糞鏈球菌菌種，然后在40-50℃溫度條件下進(jìn)行高速離心，取沉淀物冷凍干燥，得到糞鏈球菌粉；
或者，分離培養(yǎng)篩選糞鏈球菌菌種，選用固體培養(yǎng)基純培養(yǎng)篩選出的糞鏈球菌菌種，然后在40-50℃溫度條件下攪拌粉碎，得到糞鏈球菌粉。
糞鏈球菌和嗜酸乳桿菌的有效成分為5×105—9×105pfu/mL，才可以協(xié)同蒙脫石納米粉、甘草、石榴皮、噬菌體，從而有效防御和治療多種動物的腹瀉，包括豬、牛、羊、驢、貓、狗、兔子、青蛙、魚、章魚、海參、龜、海膽。且能減少動物抗菌藥物的使用，降低動物產(chǎn)品抗菌藥物殘留，減緩動物源性耐藥菌的產(chǎn)生，避免耐藥性細(xì)菌在動物間或動物與人之間傳播。
作為本發(fā)明更佳的實施例，微生物制劑還包括黃連素和/或鈣劑，所述黃連素的添加量為2-5份，所述鈣劑的添加量為0.1-3份。
本發(fā)明添加鈣劑，具有以下優(yōu)點：1、鈣可以中和胃酸，保護(hù)該組方中的活性微生物免受胃酸破壞，順利通過胃部到達(dá)腸道，發(fā)揮作用，達(dá)到預(yù)期效果。2、鈣可以為服用者補充鈣質(zhì)，防治骨質(zhì)疏松。
本發(fā)明添加黃連素，所述黃連素能對抗病原微生物，對多種細(xì)菌如痢疾桿菌、結(jié)核桿菌、肺炎球菌、傷寒桿菌及白喉桿菌等都有抑制作用，可以治療腹瀉。但是，黃連素同時對益生菌有抑制作用。為了保證本發(fā)明微生物制劑產(chǎn)生較理想的功效，保護(hù)益生菌不受影響，所述黃連素的添加量需控制在2-5份。若黃連素的添加量大于5份，則對制劑本身的益生菌有抑制作用；若黃連素的添加量小于2份，則可減少對制劑本身益生菌的影響，而對腸道病原菌保留有效的抗菌效果。
相應(yīng)的，本發(fā)明還提供一種抗耐藥性的止瀉微生物制劑的制備方法，包括：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入15-25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為0.5-1:1-2，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于12%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻，即成成品。
優(yōu)選地，所述制備方法包括：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入15-25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，蒙脫石納米粉與噬菌體液的用量比例為0.5-1:1-2，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1-2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于12%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻；
加入黃連素和/或鈣劑，混合均勻，即成成品。
下面以具體實施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明
實施例1
（一）配方：蒙脫石預(yù)處理物2份、嗜酸乳桿菌粉0.5份、糞鏈球菌粉0.1份，甘草粉1份，石榴皮粉0.1份，其中，蒙脫石預(yù)處理物包括蒙脫石納米粉與噬菌體液，蒙脫石納米粉：噬菌體液=0.5:1。
（二）制備方法：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入15%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于12%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻，即成成品。
實施例2
（一）配方：蒙脫石預(yù)處理物3份、嗜酸乳桿菌粉2份、糞鏈球菌粉1份，甘草粉2份，石榴皮粉1份，其中，蒙脫石預(yù)處理物包括蒙脫石納米粉與噬菌體液，蒙脫石納米粉：噬菌體液=1:1。
（二）制備方法：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入20%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為1.5小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻，即成成品。
實施例3
（一）配方：蒙脫石預(yù)處理物4份、嗜酸乳桿菌粉3份、糞鏈球菌粉2份，甘草粉2份，石榴皮粉1份，其中，蒙脫石預(yù)處理物包括蒙脫石納米粉與噬菌體液，蒙脫石納米粉：噬菌體液=1:1.5。
（二）制備方法：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入25%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻，即成成品。
實施例4
（一）配方：蒙脫石預(yù)處理物5份、嗜酸乳桿菌粉4份、糞鏈球菌粉2份，甘草粉3份，石榴皮粉2份，黃連素3份，鈣劑1份，其中，蒙脫石預(yù)處理物包括蒙脫石納米粉與噬菌體液，蒙脫石納米粉：噬菌體液=1:1。
（二）制備方法：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入22%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻；
加入黃連素和/或鈣劑，混合均勻，即成成品。
實施例5
（一）配方：蒙脫石預(yù)處理物6份、嗜酸乳桿菌粉5份、糞鏈球菌粉3份，甘草粉3份，石榴皮粉2份，黃連素5份，鈣劑3份，其中，蒙脫石預(yù)處理物包括蒙脫石納米粉與噬菌體液，蒙脫石納米粉：噬菌體液=1: 2。
（二）制備方法：
將過濾得到的純化噬菌體液里加入20%甘油鹽水，充分搖勻；再添加蒙脫石納米粉，攪拌均勻成糊狀，攪拌時間為2小時，使蒙脫石充分吸附噬菌體；然后將混合物在35℃以下干燥，干燥后的混合物的水分含量低于10%；最后將混合物磨成粉末狀，得到蒙脫石預(yù)處理物；
將所述蒙脫石預(yù)處理物、嗜酸乳桿菌粉、糞鏈球菌粉、甘草粉和石榴皮粉混合，攪拌均勻；
加入黃連素和/或鈣劑，混合均勻，即成成品。
將實施例1-5所得的微生物制劑做技術(shù)檢測，結(jié)果如下：
一、試驗方法：
將微生物制劑混入到各動物平時的膳食中，每天一次，每次30ml。
二、實驗結(jié)果：
1、腹瀉頻率（單位：大便次數(shù)/天）
。
2、腹瀉指數(shù)
依照糞便的表觀形狀將腹瀉指數(shù)分為：
嚴(yán)重腹瀉：糞便為液態(tài)、不成形、水分含量高
中度腹瀉：糞便為粘稠狀、不成形、水分含量高
輕微腹瀉：糞便為軟狀、稍微成形
正常：糞便為圓條狀
。
3、腹瀉期間的體重變化情況（單位：KG）
。
綜上所述，本發(fā)明通過蒙脫石納米粉、甘草、石榴皮、噬菌體、嗜酸乳桿菌粉和糞鏈球菌粉的協(xié)同作用，可以有效防御和治療多種動物的腹瀉，包括豬、牛、羊、驢、貓、狗、兔子、青蛙、魚、章魚、海參、龜、海膽。且能減少動物抗菌藥物的使用，降低動物產(chǎn)品抗菌藥物殘留，減緩動物源性耐藥菌的產(chǎn)生，避免耐藥性細(xì)菌在動物間或動物與人之間傳播。
以上所述是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以做出若干改進(jìn)和潤飾，這些改進(jìn)和潤飾也視為本發(fā)明的保護(hù)范圍。