相關(guān)申請本申請要求2011年12月15日提交的美國臨時(shí)申請?zhí)?1/576,233的權(quán)益。上述申請的全部教義以引用的方式并入本文中。發(fā)明背景阿片神經(jīng)肽系統(tǒng)在調(diào)節(jié)情緒障礙中起到重要的作用。[Machado-VieraR.等人；DepressionandAnxiety,28(4)2011,267-281]。阿片肽及其受體是用于開發(fā)新型的抗抑郁治療的潛在候選物。內(nèi)源性阿片和鴉片劑的作用受到偶合至不同的細(xì)胞內(nèi)效應(yīng)系統(tǒng)的三種受體類型(μ、δ和κ)的介導(dǎo)。[BerrocosoE.等人,CurrentPharmaceuticalDesign,15(14)2009,1612-22]。因此，可以選擇性且靈敏性調(diào)節(jié)一種或多種阿片受體類型的作用的藥劑對于治療受阿片系統(tǒng)調(diào)節(jié)的各種疾病和病癥是重要的。μ阿片系統(tǒng)對情緒狀態(tài)具有深遠(yuǎn)的影響并且在重度抑郁癥(MDD)和情緒狀態(tài)變化的情形下被調(diào)節(jié)。μ阿片受體存在并密集分布在對應(yīng)激物和情緒顯著刺激的調(diào)節(jié)和整合的響應(yīng)中所涉及的腦部區(qū)域中。這些包括皮層區(qū)域，其包括喙前扣帶回、前額葉皮層[Eisenberger,Science302,2003,290-2；KennedyArchGenPsychiatry63(11),2006,1199-208；Zubieta,Science,2932001,311-5；Zubieta,ArchGenPsychiatry,60(11),2003,1145-53]。在皮層下，已知μ阿片系統(tǒng)在對有益和非有益的顯著刺激的評估和響應(yīng)中所涉及的紋狀體蒼白球途徑(伏隔核、腹側(cè)蒼白球)和相關(guān)回路(例如，杏仁核、丘腦、島葉皮層)中具有突出的調(diào)節(jié)作用[AndersonAK和SobelN.Neuron39(4)2003,581-3；HorvitzJC.,BehavNeurosci.114(5),2000,934-9；Koob和LeAlcoholismClinical&ExperimentalResearch,200125(5增刊)2001,144S-151S；Napier和Mitrovic,AnnNYAcadSci.,1999,176-201；Price2000；Quirarte,BrainRes.,808(2),1998,134-40；Steiner和Gerfen,ExpBrainRes.,60-76,1998；Zubieta,Science,2932001,311-5]。μ阿片受體的活化使多巴胺增加，這可能有助于抗抑郁作用，包括增強(qiáng)快感度和知足感，但當(dāng)多巴胺的增加高于治療抑郁癥狀所需時(shí)還將導(dǎo)致濫用。在人中的正電子發(fā)射斷層掃描(PET)研究已顯示μ阿片系統(tǒng)在情緒調(diào)節(jié)中的功能作用。已發(fā)現(xiàn)體內(nèi)μ阿片受體在杏仁核下顳葉皮層中的可用性與這個(gè)區(qū)域?qū)ω?fù)面情緒激發(fā)的呈現(xiàn)的代謝反應(yīng)成反相關(guān)[Liberzon,ProcNatlAcadSci.99(10):2002,7084-9]。在后續(xù)PET研究中，顯示情緒激發(fā)在正常人受試者、SSRI反應(yīng)性MDD患者與難治性抑郁癥患者之間引起大腦μ活性的進(jìn)一步差異[Kennedy,Curr.PsychiatryRep.8(6),2006,437-44]。已經(jīng)假設(shè)了κ受體活化的阻斷在抑郁癥治療中將具有有益的治療作用。所述假設(shè)是基于過去二十年中主要產(chǎn)生的人和動(dòng)物證據(jù)。下面的討論是改編自Knoll和Carlezon,Jr.的最近評述[BrainRes.2010,56-73,2010]。μ阿片受體活化在人中導(dǎo)致情緒高漲，而κ阿片受體活化對情緒產(chǎn)生不良影響，包括煩躁不安和快感缺乏[Pfeiffer,HormMetabRes.,18(12):1986,842-8]。在解剖學(xué)上，κ阿片受體和強(qiáng)啡肽(主要的內(nèi)源性κ配體)在抑郁癥的病理生理學(xué)中所牽涉的整個(gè)邊緣腦區(qū)中表達(dá)。除煩躁不安和快感缺乏之外，κ活化的嫌惡作用的一些方面似乎涉及焦慮增加。κ阿片受體和強(qiáng)啡肽在恐懼和焦慮所涉及的整個(gè)腦區(qū)(包括杏仁核和杏仁核周邊區(qū)(extendedamygdala))內(nèi)表達(dá)(Alheid2003；Fallon和Leslie1986；Mansour,1995b]。κ阻斷在人中的作用尚未在人中測試；藥學(xué)上可接受的探針未能實(shí)現(xiàn)藥物化學(xué)的努力。難治性抑郁癥(TRD)是其中MDD患者對單胺再攝取抑制劑抗抑郁療法未達(dá)到充分反應(yīng)的一種普遍疾病。盡管近幾十年來出現(xiàn)了多種新型治療劑，但TRD仍然是一個(gè)嚴(yán)重的臨床和公共健康問題，其對患者、家庭和社會整體產(chǎn)生顯著的不良后果[Gibson,J.,Manag.Care,16:370-377,2010；Sackeim,JClinPsychiatry,62增刊16:10-17,2001]。在單胺氧化酶抑制劑(MAOI)和三環(huán)抗抑郁劑(TCA)出現(xiàn)之前，阿片是抑郁癥的主要治療模式。內(nèi)源性阿片系統(tǒng)的現(xiàn)代化表征已經(jīng)闡述了阿片能肽在應(yīng)激反應(yīng)行為與快感度的調(diào)節(jié)中的作用。已經(jīng)報(bào)道了丁丙諾啡(一種部分μ阿片激動(dòng)劑)可用于治療其他可用療法已經(jīng)失敗的患者中的抑郁癥。[Callaway,Soc.Biol.Psychiatry,39,1996,989-990；Emrich等人,Neuropharmacology,22,1983,385-388；Bodkin等人,J.Clin.Psychopharmacology,15,49-57,1995]。盡管阿片激動(dòng)劑具有抗抑郁作用，但它們一般不用于治療抑郁癥。完全μ阿片激動(dòng)劑的長期使用可能導(dǎo)致患者中發(fā)展阿片依賴性。另外，存在其他不期望的副作用，包括成癮可能性(additivepotential)、鎮(zhèn)靜、呼吸抑制、惡心和便秘，其將伴隨著短期和長期的阿片使用。丁丙諾啡是一種μ阿片部分激動(dòng)劑，其產(chǎn)生典型的μ阿片激動(dòng)劑作用和副作用，如成癮可能性和呼吸抑制，同時(shí)產(chǎn)生小于完全激動(dòng)劑如海洛因和美沙酮的作用的最大作用。丁丙諾啡產(chǎn)生充分的μ激動(dòng)劑作用以使得阿片成癮個(gè)體能夠停止阿片的誤用而不經(jīng)歷戒斷癥狀。盡管存在許多眾所周知的阿片受體結(jié)合化合物，但幾乎沒有證據(jù)來指導(dǎo)尚未對一個(gè)療程的抗抑郁劑有反應(yīng)的抑郁癥的管理。難治性抑郁癥是一個(gè)重要的公共健康問題并且需要大量務(wù)實(shí)的試驗(yàn)來教導(dǎo)臨床實(shí)踐。[Stimpson等人TheBritishJournalofPsychiatry,(2002)181:284-294]。仍然需要開發(fā)對于情緒障礙、特別是重度抑郁癥的有效治療。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明涉及一種包含丁丙諾啡和μ阿片受體拮抗劑的組合物，其中所述組合物的特征在于激動(dòng)劑:拮抗劑活性指數(shù)(AAnAI)介于約0.70與約2.2之間；其中；其中，EC50表示丁丙諾啡的半最大有效血清濃度，以nM表示；IC50表示μ阿片拮抗劑在人中的半最大抑制濃度，以nM表示；Cmax(BUP)表示丁丙諾啡和/或丁丙諾啡的μ阿片受體激動(dòng)劑代謝物的峰血清或血漿濃度，以nM表示；以及Cmax(拮抗劑)表示μ阿片拮抗劑和/或所述μ阿片拮抗劑的μ阿片受體拮抗劑代謝物的峰血清濃度，以nM表示。本發(fā)明進(jìn)一步涉及抑郁癥的治療，包括向有需要的受試者施用根據(jù)本發(fā)明的組合物。附圖簡述根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案的下列更具體描述，本發(fā)明的前述和其他目的、特征和優(yōu)點(diǎn)將變得顯而易見，如附圖中所說明，其中在不同的視圖中相同的參考符號是指相同的部件。附圖不一定按比例，而是將重點(diǎn)放在說明本發(fā)明的原理。圖1：在以0.001mg/kg、0.01mg/kg、0.1mg/kg和1mg/kg劑量皮下(SC)施用丁丙諾啡之后伏隔核殼中的多巴胺流出。圖2：在以遞增劑量(SC)施用丁丙諾啡之后的平均多巴胺流出。圖3：在丁丙諾啡(0.1mg/kg)下施用化合物-1、化合物-10、納曲酮(naltrexone)和納美芬(nalmefene)之后伏隔核殼中多巴胺流出的減少。圖4：在丁丙諾啡(0.1mg/kg)下關(guān)于化合物-1、化合物-10、納曲酮和納美芬的Log活性指數(shù)(LogAAnAI)對多巴胺流出的曲線。圖5：在用丁丙諾啡(0.1mg/kg)處理的WKY大鼠中在強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)中在遞增濃度的化合物-1之后的靜止增加。圖6：在用丁丙諾啡(0.1mg/kg)處理之后在經(jīng)歷強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)的WKY大鼠中化合物-1對多巴胺流出的影響。圖7：在用丁丙諾啡(0.1mg/kg)處理之后在經(jīng)歷強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)的WKY大鼠中化合物-1對5-羥基吲哚乙酸(5-HIAA)釋放的影響。發(fā)明詳述本發(fā)明涉及一種包含丁丙諾啡和另一種阿片受體結(jié)合化合物的組合物，其中所述阿片受體結(jié)合化合物為μ阿片受體拮抗劑，并且所述組合物具有介于約0.70與約2.2之間的激動(dòng)劑:拮抗劑活性指數(shù)(AAnAI)；其中；其中，EC50表示丁丙諾啡的半最大有效血清濃度，以nM表示；IC50表示μ阿片拮抗劑在人中的半最大抑制濃度，以nM表示；Cmax(BUP)表示丁丙諾啡和/或丁丙諾啡的μ阿片受體激動(dòng)劑代謝物的峰血清或血漿濃度，以nM表示；以及Cmax(拮抗劑)表示μ阿片拮抗劑和/或所述μ阿片拮抗劑的μ阿片受體拮抗劑代謝物的峰血清濃度，以nM表示。研究了丁丙諾啡(BUP)與不同量的阿片拮抗劑化合物-1組合。這項(xiàng)研究利用兩種比率的μ阿片受體拮抗劑化合物-1與丁丙諾啡，其中比率由所施用各藥物的量(mg)限定為a)1:8和b)1:1以評估在患者中的安全性和耐受性。1:8(化合物1-BUP)的確顯示抗抑郁作用，然而其相比于安慰劑的變化不具統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性。1:1比率不僅證實(shí)被更好耐受，而且在這個(gè)試驗(yàn)的持續(xù)時(shí)間內(nèi)出人意料地提供了抑郁癥的明顯改善(相對于安慰劑具統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著性和臨床意義)。雖然不希望受任何特定理論束縛，但已認(rèn)為在較低的比率(1:8)下，更大的μ激動(dòng)劑活性將產(chǎn)生抗抑郁作用的更大改善。出人意料地發(fā)現(xiàn)，如由較高比率(1:1)所例示的較小μ活性不僅足以發(fā)揮抗抑郁作用，而且所述作用大于在1:8比率下所觀察到的作用。盡管上述比率是基于所遞送藥物的質(zhì)量，但在分子藥理學(xué)下，評估所達(dá)到的全身濃度(隨預(yù)期途徑和清除率而變化的生物利用率的函數(shù))和激動(dòng)劑:拮抗劑活性的相對程度，顯然在1:8和1:1比率下都存在凈阿片激動(dòng)劑活性。這種方法允許針對抗抑郁表現(xiàn)確定激動(dòng)劑與拮抗劑活性之間的優(yōu)選平衡程度，同時(shí)消除不期望的作用，例如，與阿片成癮可能性相關(guān)的興奮。1:8比率的化合物-1:BUP不會導(dǎo)致抑郁癥中產(chǎn)生統(tǒng)計(jì)學(xué)或臨床上有意義的改善，并且在這個(gè)比率下患者仍報(bào)道為“興奮”和鎮(zhèn)靜；所計(jì)算的“激動(dòng)劑:拮抗劑活性指數(shù)”(AAnAI)為13.4。與之相比，1:1比率下的AAnAI為1.3。如本文所用，術(shù)語“成癮可能性”是指目前對于物質(zhì)依賴性的精神病癥的診斷與統(tǒng)計(jì)手冊(DiagnosticandStatisticalManualofMentalDisorders，DSM-IV)定義，定義為：化合物或物質(zhì)引起生理依賴性、耐受性或戒斷的證據(jù)的能力。不希望受任何特定理論約束，據(jù)認(rèn)為為了實(shí)現(xiàn)期望的抗抑郁作用，優(yōu)選的AAnAI介于約0.5與5.0的數(shù)值之間，優(yōu)選介于約0.7與約2.2的數(shù)值之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，AAnAI介于約0.6與4.0之間。在一個(gè)實(shí)施方案中，AAnAI介于約0.7與3.0之間。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，AAnAI介于約0.8與約2.1之間，優(yōu)選介于約1.0與約2.0之間，優(yōu)選介于約1.0與約1.8之間，優(yōu)選介于約1.1與約1.6之間，優(yōu)選介于約1.2與約1.4之間，最優(yōu)選為約1.3?？梢詼y定丁丙諾啡和任何被表征為μ受體拮抗劑的化合物的AAnAI。μ受體拮抗劑需要以下信息：1)基于GTPγS測定的IC50；和2)給藥之后的Cmax濃度。對于丁丙諾啡，需要以下：1)基于GTPγS測定的EC50；和2)給藥之后的Cmax濃度。還可使用基于cAMP或受體活化后的其他下游終點(diǎn)的其他功能測定。然而，GTPγS是優(yōu)選的方法。丁丙諾啡或μ阿片受體拮抗劑產(chǎn)生Cmax值的劑量可隨施用途徑而改變。因?yàn)锳AnAI是基于Cmax，所以其可以針對組合針對任何施用途徑進(jìn)行計(jì)算。因此AAnAI是如下所示的丁丙諾啡與μ受體拮抗劑的活性之間的比率：丁丙諾啡(BUP)的EC50值和化合物-1的IC50值示于下表1中。這些值是使用GTPγS功能測定而測定的。表1在不同的給藥范例之后的患者中測定丁丙諾啡和化合物-1的血漿濃度。(表2)下文報(bào)道各藥物的Cmax值。Cmax值通常以質(zhì)量/毫升報(bào)道。這些參數(shù)反映丁丙諾啡和μ阿片受體拮抗劑的效能。表2化合物-1的Cmax范圍為其抑制μ阿片受體的IC50值的3.7至77倍，而丁丙諾啡的Cmax范圍為其作為部分激動(dòng)劑的EC50的約57-99倍。在較低比率(1:8)下，部分μ激動(dòng)劑活性將占主導(dǎo)地位。而在較高比率(1:1)下，μ信號傳導(dǎo)將極大地減少。這與所觀察到的臨床數(shù)據(jù)充分一致。其還確定了任何μ拮抗劑與BUP組合用于治療抑郁癥并且同時(shí)消除“興奮”和依賴性發(fā)展所需的期望比率。對于針對μ受體顯示拮抗劑活性的任何藥物(包括化合物-1、納曲酮和納美芬)，本文定義為AAnAI的這個(gè)比率的期望范圍將為約0.5至約5。在這些比率下，μ信號傳導(dǎo)足以發(fā)揮抗抑郁作用，而患者未經(jīng)歷與阿片、特別是丁丙諾啡的成癮可能性相關(guān)的征象?？梢杂?jì)算任何μ阿片拮抗劑的AAnAI。納曲酮和納美芬是兩種常見的μ阿片拮抗劑。在下文實(shí)施例中，基于8mg的丁丙諾啡劑量，顯示了多個(gè)Cmax值下的納曲酮的AAnAI。因?yàn)榧{曲酮的功能IC50值為4.8nM，所以需要更高的Cmax值來實(shí)現(xiàn)與化合物-1相同的AAnAI。(表3)納曲酮的預(yù)計(jì)劑量范圍將介于350mg與1050mg之間以覆蓋介于1與2之間的“BUP激動(dòng)劑:拮抗劑活性”比率的比率。表3藥物Cmax(ng/ml)Cmax(nM)Cmax/IC50AAnAI納曲酮10296.116.65014630.53.310029361.01.715043991.51.12005861220.8除了拮抗劑的效能差異之外，化合物的ADME(吸收、分布、代謝和排泄)性質(zhì)說明了為什么基于所施用劑量的簡單的比率不能用于預(yù)測丁丙諾啡與阿片拮抗劑的組合治療抑郁癥的能力。再次使用納曲酮作為實(shí)例，說明了用50mg劑量的納曲酮所達(dá)到的血漿濃度。納曲酮的Cmax為約10ng/mL。納曲酮顯示出相當(dāng)?shù)呐c劑量成比例的藥物動(dòng)力學(xué)。因此，達(dá)到期望AAnAI所需的納曲酮的口服劑量將介于約350mg與750mg之間。重要的是，為了達(dá)到顯示丁丙諾啡-化合物-1組合具有明顯的臨床益處的相同AAnAI，所需的納曲酮?jiǎng)┝繉榧s625mg并且基于口服劑量的簡單比率將為幾乎80:1?？梢曰贗C50的公開文獻(xiàn)值(13nM)和經(jīng)口施用后所報(bào)道的血漿濃度對納美芬作出類似計(jì)算(表4)?；谶_(dá)到期望AAnAI的可用文獻(xiàn)，需要約210至400ng/mL的血漿濃度。表4藥物Cmax(ng/ml)Cmax(nM)Cmax/IC50AAnAI納美芬25745.717.810029522.74.520058945.32.230088468.01.5400117890.71.15001473113.30.9使用本文所述的方法測定納美芬的IC50并發(fā)現(xiàn)其比文獻(xiàn)中先前所述的更有效?；?.2nM的IC50的AAnAI值提供于下文表4A中。表4A藥物Cmax(ng/ml)Cmax(nM)Cmax/IC50AAnAI納美芬6.2518.58.412.012.53716.86.0257433.63.01002951340.752005892670.38在一些實(shí)施方案中，導(dǎo)致AAnAI介于約0.5至約5.0、優(yōu)選介于約0.7至2.2的拮抗劑的施用可調(diào)節(jié)多巴胺釋放。在一個(gè)實(shí)施方案中，丁丙諾啡與本發(fā)明拮抗劑的組合的施用導(dǎo)致相比于丁丙諾啡的單獨(dú)施用伏隔核中多巴胺的產(chǎn)生減少。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，具有介于約0.7與約2.2之間的活性指數(shù)的丁丙諾啡與化合物-1的組合的施用導(dǎo)致相比于丁丙諾啡的單獨(dú)施用多巴胺釋放減少。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，丁丙諾啡與本發(fā)明拮抗劑的組合導(dǎo)致平均多巴胺水平介于約1pg/樣品至約2pg/樣品，而丁丙諾啡(0.1mg/kg)的單獨(dú)施用在2小時(shí)后導(dǎo)致平均多巴胺水平為約3pg/樣品。在一個(gè)實(shí)施方案中，在受刺激多巴胺流出試驗(yàn)中，相比于丁丙諾啡的單獨(dú)施用，具有介于約0.7至約2.2的AAnAI的丁丙諾啡與本發(fā)明拮抗劑的組合導(dǎo)致多巴胺的釋放減少約25％至約75％。不希望受任何特定理論約束，假定多巴胺釋放的減少可用于減少藥物喜好和丁丙諾啡的成癮可能性，同時(shí)保持有助于抗抑郁作用的性質(zhì)。重要的是，通過實(shí)現(xiàn)AAnAI小于0.5使μ阿片信號傳導(dǎo)進(jìn)一步衰減將為不期望的，其伴有抗抑郁作用損失。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，μ阿片受體拮抗劑為式I的化合物：或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或前藥，其中；s為0、1或2；t為0、1、2、3、4、5、6或7；X為S或O；R1選自脂族基、被取代的脂族基、芳基、被取代的芳基、雜環(huán)基或被取代的雜環(huán)基；各R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8獨(dú)立地選自不存在、氫、鹵素、-OR20、-SR20、-NR20R21、-C(O)R20、-C(O)OR20、-C(O)NR20R21、-N(R20)C(O)R21、-CF3、-CN、-NO2、-N3、酰基、烷氧基、被取代的烷氧基、烷基氨基、被取代的烷基氨基、二烷基氨基、被取代的二烷基氨基、被取代或未被取代的烷硫基、被取代或未被取代的烷基磺酰基、任選被取代的脂族基、任選被取代的芳基、雜環(huán)基或被取代的雜環(huán)基；各R9和R10選自氫、脂族基、被取代的脂族基、芳基、被取代的芳基、雜環(huán)基或被取代的雜環(huán)基；可選地，R2、R3、R4、R5、R6、R7和R8中的兩者與其所連接的原子一起形成任選被取代的環(huán)；可選地，R2和R3與其所連接的碳一起形成C＝X基團(tuán)；其中各R20和R21獨(dú)立地選自不存在、氫、鹵素、-OH、-SH、-NH2、-CF3、-CN、-NO2、-N3、-C(O)OH、-C(O)NH2、?；?、烷氧基、被取代的烷氧基、烷基氨基、被取代的烷基氨基、二烷基氨基、被取代的二烷基氨基、被取代或未被取代的烷硫基、被取代或未被取代的烷基磺?；⒅寤?、被取代的脂族基、芳基或被取代的芳基；以及可選地，R9和R10與其所連接的原子一起形成任選被取代的環(huán)；可選地，兩個(gè)R5基團(tuán)或R5和R6基團(tuán)與其所連接的碳一起形成C＝X基團(tuán)。在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，μ受體拮抗劑為式II的化合物：或其藥學(xué)上可接受的鹽、酯或前藥，其中；X為S或O；R1為-(CH2)n-c-C3H5、-(CH2)n-c-C4H7、-(CH2)n-c-C5H9、-(CH2)n-CH＝CH2或-(CH2)n-CH＝C(CH3)2，其中n和m獨(dú)立地為0、1、2或3；R6和R7獨(dú)立地為H、-OH或R6與R7一起形成-O-或-S-基團(tuán)；以及R5和R11獨(dú)立地為H、-OH、OCH3或R5與R1一起形成＝O或＝CH2基團(tuán)。在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，μ受體拮抗劑選自：本發(fā)明進(jìn)一步涉及抑郁癥的治療，其包括向有需要的受試者施用根據(jù)本發(fā)明的組合物。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述抑郁癥選自重度抑郁癥、慢性抑郁癥、嚴(yán)重的單相復(fù)發(fā)性重度抑郁發(fā)作、輕郁癥、抑郁性神經(jīng)癥和神經(jīng)性抑郁癥、憂郁性抑郁癥、非典型性抑郁癥、反應(yīng)性抑郁癥、難治性抑郁癥、季節(jié)性情感障礙和小兒抑郁癥；經(jīng)前綜合征、經(jīng)前煩躁癥、潮熱、雙相障礙或躁狂抑郁癥、雙相I型障礙、雙相II型障礙以及循環(huán)性情感障礙。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，抑郁癥是重度抑郁癥。在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中，抑郁癥是難治性抑郁癥。本發(fā)明進(jìn)一步涉及強(qiáng)迫癥、神經(jīng)性貪食癥、恐慌癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙(PTSD)、經(jīng)前煩躁癥(PMDD)、社交焦慮癥和廣泛性焦慮癥(GAD)的治療。定義下文列出用于描述本發(fā)明的多種術(shù)語的定義。除非在具體情形中另外限制，否則這些定義適用于在整個(gè)說明書和權(quán)利要求書中單獨(dú)地或作為較大基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語。術(shù)語“脂族基團(tuán)”或“脂族基”是指可為飽和的(例如單鍵)或含有一個(gè)或多個(gè)不飽和單元(例如，雙鍵和/或三鍵)的非芳族部分。脂族基團(tuán)可為直鏈、支鏈或環(huán)狀的，含有碳、氫或任選地一個(gè)或多個(gè)雜原子并且可被取代或未被取代。除脂族烴基之外，脂族基團(tuán)包括例如聚烷氧基烷基，例如聚亞烷基二醇、聚胺和聚亞胺。這些脂族基團(tuán)可進(jìn)一步被取代。應(yīng)了解，脂族基團(tuán)可包括如本文所述的烷基、被取代的烷基、烯基、被取代的烯基、炔基、被取代的炔基、以及被取代或未被取代的環(huán)烷基。術(shù)語“?；笔侵副粴洹⑼榛?、部分飽和或完全飽和的環(huán)烷基、部分飽和或完全飽和的雜環(huán)、芳基或雜芳基取代的羰基。例如，?；ㄖT如以下基團(tuán)：(C1-C6)烷酰基(例如，甲酰基、乙酰基、丙酰基、丁?；?、戊酰基、己酰基、叔丁基乙?；?、(C3-C6)環(huán)烷基羰基(例如，環(huán)丙基羰基、環(huán)丁基羰基、環(huán)戊基羰基、環(huán)己基羰基等)、雜環(huán)羰基(例如，吡咯烷基羰基、吡咯烷-2-酮-5-羰基、哌啶基羰基、哌嗪基羰基、四氫呋喃基羰基等)、芳?；?例如，苯甲酰基)和雜芳?；?例如，噻吩基-2-羰基、噻吩基-3-羰基、呋喃基-2-羰基、呋喃基-3-羰基、1H-吡咯基-2-羰基、1H-吡咯基-3-羰基、苯并[b]噻吩基-2-羰基等)。另外，?；耐榛h(huán)烷基、雜環(huán)、芳基和雜芳基部分可為各自的定義中所述的基團(tuán)中的任一者。當(dāng)指示為“任選被取代”時(shí)，?；蔀槲幢蝗〈幕蛉芜x被一個(gè)或多個(gè)獨(dú)立地選自下文在“被取代的”定義中所列出的取代基群組的取代基(典型地，一個(gè)至三個(gè)取代基)取代，或酰基的烷基、環(huán)烷基、雜環(huán)、芳基和雜芳基部分可如上文在取代基的優(yōu)選和更優(yōu)選列表中分別所述被取代。術(shù)語“烷基”意欲包括具有指定碳數(shù)目的支鏈和直鏈、被取代或未被取代的飽和脂族烴基/基團(tuán)。優(yōu)選的烷基包含約1個(gè)至約24個(gè)碳原子(“C1-C24”)。其他優(yōu)選的烷基包含約1個(gè)至約8個(gè)碳原子(“C1-C8”)，例如約1個(gè)至約6個(gè)碳原子(“C1-C6”)、或例如約1個(gè)至約3個(gè)碳原子(“C1-C3”)。C1-C6烷基的實(shí)例包括(但不限于)甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、正戊基、新戊基和正己基。術(shù)語“烯基”是指具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵的直鏈或支鏈基團(tuán)。這些基團(tuán)優(yōu)選含有約兩個(gè)至約二十四個(gè)碳原子(“C2-C24”)。其他優(yōu)選的烯基為具有兩個(gè)至約十個(gè)碳原子(“C2-C10”)的“低級烯基”，例如乙烯基、烯丙基、丙烯基、丁烯基和4-甲基丁烯基。優(yōu)選的低級烯基包括2個(gè)至約6個(gè)碳原子(“C2-C6”)。術(shù)語“烯基”和“低級烯基”涵蓋具有“順式”和“反式”取向或可選地“E”和“Z”取向的基團(tuán)。術(shù)語“炔基”是指具有至少一個(gè)碳-碳三鍵的直鏈或支鏈基團(tuán)。這些基團(tuán)優(yōu)選含有約兩個(gè)至約二十四個(gè)碳原子(“C2-C24”)。其他優(yōu)選的炔基為具有兩個(gè)至約十個(gè)碳原子的“低級炔基”，例如炔丙基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-丁炔、2-丁炔基和1-戊炔基。優(yōu)選的低級炔基包括2個(gè)至約6個(gè)碳原子(“C2-C6”)。術(shù)語“環(huán)烷基”是指具有三個(gè)至約十二個(gè)碳原子(“C3-C12”)的飽和碳環(huán)基。術(shù)語“環(huán)烷基”涵蓋具有三個(gè)至約十二個(gè)碳原子的飽和碳環(huán)基。這些基團(tuán)的實(shí)例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。術(shù)語“環(huán)烯基”是指具有三個(gè)至十二個(gè)碳原子的部分不飽和碳環(huán)基。作為含有兩個(gè)雙鍵(其可能共軛或可能不共軛)的部分不飽和碳環(huán)基的環(huán)烯基可以被稱為“環(huán)烷基二烯基”。更優(yōu)選的環(huán)烯基為具有四個(gè)至約八個(gè)碳原子的“低級環(huán)烯基”。這些基團(tuán)的實(shí)例包括環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基。如本文所用的術(shù)語“亞烷基”是指衍生自具有指定碳原子數(shù)目的直鏈或支鏈飽和烴鏈的二價(jià)基團(tuán)。亞烷基的實(shí)例包括(但不限于)亞乙基、亞丙基、亞丁基、3-甲基-亞戊基和5-乙基-亞己基。如本文所用的術(shù)語“亞烯基”表示衍生自具有至少一個(gè)碳碳雙鍵的含指定碳原子數(shù)目的直鏈或支鏈烴部分的二價(jià)基團(tuán)。亞烯基包括(但不限于)例如亞乙烯基、2-亞丙烯基、2-亞丁烯基、1-甲基-2-亞丁烯-1-基等。如本文所用的術(shù)語“亞炔基”表示衍生自具有至少一個(gè)碳碳三鍵的含指定碳原子數(shù)目的直鏈或支鏈烴部分的二價(jià)基團(tuán)。代表性亞炔基包括(但不限于)例如亞丙炔基、1-亞丁炔基、2-甲基-3-亞己炔基等。術(shù)語“烷氧基”是指各具有含一個(gè)至約二十四個(gè)碳原子或優(yōu)選一個(gè)至約十二個(gè)碳原子的烷基部分的直鏈或支鏈含氧基團(tuán)。更優(yōu)選的烷氧基為具有一個(gè)至約十個(gè)碳原子并且更優(yōu)選具有一個(gè)至約八個(gè)碳原子的“低級烷氧基”。這些基團(tuán)的實(shí)例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基和叔丁氧基。術(shù)語“烷氧基烷基”是指具有連接至烷基的一個(gè)或多個(gè)烷氧基的烷基，即，形成單烷氧基烷基和二烷氧基烷基。單獨(dú)或組合的術(shù)語“芳基”意指含有一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)環(huán)的芳族系統(tǒng)，其中這些環(huán)可以側(cè)接方式連接在一起或可稠合。術(shù)語“芳基”涵蓋諸如苯基、萘基、四氫萘基、茚滿呋喃基、喹唑啉基、吡啶基和聯(lián)苯基的芳族基團(tuán)。術(shù)語“雜環(huán)基”、“雜環(huán)(heterocycle)”、“雜環(huán)狀”或“雜環(huán)(heterocyclo)”是指飽和、部分不飽和以及不飽和的含雜原子的環(huán)狀基團(tuán)，其還可以被相應(yīng)稱為“雜環(huán)基”、“雜環(huán)烯基”和“雜芳基”，其中所述雜原子可選自氮、硫和氧。飽和雜環(huán)基的實(shí)例包括含有1至4個(gè)氮原子的飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)(例如吡咯烷基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基等)；含有1至2個(gè)氧原子和1至3個(gè)氮原子的飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)(例如嗎啉基等)；含有1至2個(gè)硫原子和1至3個(gè)氮原子的飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)(例如，噻唑烷基等)。部分不飽和雜環(huán)基的實(shí)例包括二氫噻吩、二氫吡喃、二氫呋喃和二氫噻唑。雜環(huán)基可包括五價(jià)氮，例如在四唑鎓和吡啶鎓基團(tuán)中。術(shù)語“雜環(huán)”還涵蓋其中雜環(huán)基與芳基或環(huán)烷基稠合的基團(tuán)。這些稠合雙環(huán)基團(tuán)的實(shí)例包括苯并呋喃、苯并噻吩等。術(shù)語“雜芳基”是指不飽和芳族雜環(huán)基。雜芳基的實(shí)例包括含有1至4個(gè)氮原子的不飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)，例如，吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噠嗪基、三唑基(例如，4H-1,2,4-三唑基、1H-1,2,3-三唑基、2H-1,2,3-三唑基等)、四唑基(例如1H-四唑基、2H-四唑基等)等；含有1至5個(gè)氮原子的不飽和縮合雜環(huán)基，例如，吲哚基、異吲哚基、吲哚嗪基、苯并咪唑基、喹啉基、異喹啉基、吲唑基、苯并三唑基、四唑并噠嗪基(例如，四唑并[1,5-b]噠嗪基等)等；含有氧原子的不飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)，例如，吡喃基、呋喃基等；含有硫原子的不飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)，例如，噻吩基等；含有1至2個(gè)氧原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)，例如，噁唑基、異噁唑基、噁二唑基(例如，1,2,4-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基等)等；含有1至2個(gè)氧原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和縮合雜環(huán)基(例如苯并噁唑基、苯并噁二唑基等)；含有1至2個(gè)硫原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和3至6元雜單環(huán)基團(tuán)，例如，噻唑基、噻二唑基(例如，1,2,4-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基等)等；含有1至2個(gè)硫原子和1至3個(gè)氮原子的不飽和縮合雜環(huán)基(例如，苯并噻唑基、苯并噻二唑基等)等。術(shù)語“雜環(huán)烷基”是指被雜環(huán)取代的烷基。更優(yōu)選的雜環(huán)烷基是在雜環(huán)基中具有一個(gè)至六個(gè)碳原子的“低級雜環(huán)烷基”。術(shù)語“烷硫基”是指含有連接至二價(jià)硫原子的含一個(gè)至約十個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基的基團(tuán)。優(yōu)選的烷硫基具有含一個(gè)至約二十四個(gè)碳原子或優(yōu)選一個(gè)至約十二個(gè)碳原子的烷基。更優(yōu)選的烷硫基具有作為具有一個(gè)至約十個(gè)碳原子的“低級烷硫基”的烷基。最優(yōu)選的為具有含一個(gè)至約八個(gè)碳原子的低級烷基的烷硫基。這些低級烷硫基的實(shí)例包括甲硫基、乙硫基、丙硫基、丁硫基和己硫基。術(shù)語“芳烷基”或“芳基烷基”是指被芳基取代的烷基，例如芐基、二苯基甲基、三苯基甲基、苯基乙基和二苯基乙基。術(shù)語“芳氧基”是指通過氧原子連接至其他基團(tuán)的芳基。術(shù)語“芳烷氧基”或“芳基烷氧基”是指通過氧原子連接至其他基團(tuán)的芳烷基。術(shù)語“氨基烷基”是指被氨基取代的烷基。優(yōu)選的氨基烷基具有含約一個(gè)至約二十四個(gè)碳原子或優(yōu)選一個(gè)至約十二個(gè)碳原子的烷基。更優(yōu)選的氨基烷基為具有含一個(gè)至約十個(gè)碳原子的烷基的“低級氨基烷基”。最優(yōu)選者為具有含一個(gè)至八個(gè)碳原子的低級烷基的氨基烷基。這些基團(tuán)的實(shí)例包括氨基甲基、氨基乙基等。術(shù)語“烷基氨基”表示被一個(gè)或兩個(gè)烷基取代的氨基。優(yōu)選的烷基氨基具有含約一個(gè)至約二十個(gè)碳原子或優(yōu)選一個(gè)至約十二個(gè)碳原子的烷基。更優(yōu)選的烷基氨基是具有含一個(gè)至約十個(gè)碳原子的烷基的“低級烷基氨基”。最優(yōu)選者為具有含一個(gè)至約八個(gè)碳原子的低級烷基的烷基氨基。合適的低級烷基氨基可為單取代的N-烷基氨基或二取代的N,N-烷基氨基，例如N-甲基氨基、N-乙基氨基、N,N-二甲基氨基、N,N-二乙基氨基等。術(shù)語“被取代的”是指用指定取代基的基團(tuán)置換給定結(jié)構(gòu)中的一個(gè)或多個(gè)氫基，所述取代基包括(但不限于)：鹵基、烷基、烯基、炔基、芳基、雜環(huán)基、硫醇、烷硫基、芳硫基、烷硫基烷基、芳硫基烷基、烷基磺?；⑼榛酋；榛⒎蓟酋；榛⑼檠趸?、芳氧基、芳烷氧基、氨基羰基、烷基氨基羰基、芳基氨基羰基、烷氧基羰基、芳氧基羰基、鹵烷基、氨基、三氟甲基、氰基、硝基、烷基氨基、芳基氨基、烷基氨基烷基、芳基氨基烷基、氨基烷基氨基、羥基、烷氧基烷基、羧基烷基、烷氧基羰基烷基、氨基羰基烷基、酰基、芳烷氧基羰基、羧酸、磺酸、磺酰基、膦酸、芳基、雜芳基、雜環(huán)基和脂族基。應(yīng)了解，取代基可被進(jìn)一步取代。為簡單起見，在通篇中定義和提及的化學(xué)部分在本領(lǐng)域技術(shù)人員所了解的適當(dāng)結(jié)構(gòu)情形下可以為單價(jià)化學(xué)部分(例如，烷基、芳基等)或多價(jià)部分。例如，“烷基”部分可以被稱作單價(jià)基團(tuán)(例如CH3-CH2-)，或在其他情形下，二價(jià)連接部分可以為“烷基”，在所述情況下本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)了解，烷基為二價(jià)基團(tuán)(例如，-CH2-CH2-)，其等效于術(shù)語“亞烷基”。類似地，在其中需要二價(jià)部分并被稱為“烷氧基”、“烷基氨基”、“芳氧基”、“烷硫基”、“芳基”、“雜芳基”、“雜環(huán)基”、“烷基”、“烯基”、“炔基”、“脂族基”或“環(huán)烷基”的情形下，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)了解，術(shù)語“烷氧基”、“烷基氨基”、“芳氧基”、“烷硫基”、“芳基”、“雜芳基”、“雜環(huán)基”、“烷基”、“烯基”、“炔基”、“脂族基”或“環(huán)烷基”是指相應(yīng)的二價(jià)部分。如本文所用的術(shù)語“鹵素”或“鹵基”是指選自氟、氯、溴和碘的原子。如本文所用的術(shù)語“化合物”、“藥物”和“前藥”都包括具有如本文所述的式的化合物、藥物和前藥的藥學(xué)上可接受的鹽、共晶體、溶劑化物、水合物、多晶型物、對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、外消旋物等。指示為通過可變連接點(diǎn)連接的取代基可以連接至環(huán)結(jié)構(gòu)上的任何可用位置。如本文所用，關(guān)于主題治療方法的術(shù)語“有效量的主題化合物”是指一定量的主題化合物，其當(dāng)作為期望給藥方案的一部分遞送時(shí)使疾病或病癥的管理達(dá)到臨床上可接受的標(biāo)準(zhǔn)?！爸委煛笔侵赣糜谠诨颊咧蝎@得有益或期望的臨床結(jié)果的方法。就本發(fā)明的目的來說，有益或期望的臨床結(jié)果包括(但不限于)下列中的一種或多種：癥狀減輕、疾病程度降低、疾病狀態(tài)的穩(wěn)定化(即，未惡化)、預(yù)防疾病的發(fā)生或復(fù)發(fā)、延遲或減緩疾病進(jìn)程、疾病狀態(tài)改善、以及緩解(部分或完全)。如本文所用，使用術(shù)語“重度抑郁癥”(MDD)因?yàn)樵撔g(shù)語為本領(lǐng)域所理解，并且是指由精神病癥的診斷與統(tǒng)計(jì)手冊第四版(DSM-IV)或ICD-10或類似命名法中所列出的診斷標(biāo)準(zhǔn)所指導(dǎo)的診斷。罹患“難治性抑郁癥”的患者包括(1)對最少持續(xù)6周連續(xù)施用的標(biāo)準(zhǔn)劑量的抗抑郁劑(例如單胺氧化酶抑制劑(MAOI)、三環(huán)抗抑郁劑(TCA)、四環(huán)抗抑郁劑(TeCA)、選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)和5-羥色胺-去甲腎上腺素再攝取抑制劑(SNRI))沒有反應(yīng)(即，在雙盲研究中顯著優(yōu)于安慰劑)的患者，和(2)對最少持續(xù)12周連續(xù)施用的標(biāo)準(zhǔn)劑量的抗抑郁劑(例如單胺氧化酶抑制劑(MAOI)、三環(huán)抗抑郁劑(TCA)、四環(huán)抗抑郁劑(TeCA)、選擇性5-羥色胺再攝取抑制劑(SSRI)和5-羥色胺-去甲腎上腺素再攝取抑制劑(SNRI))(單一療法)沒有反應(yīng)的患者。用于測定患者的抑郁癥是否抵抗抗抑郁劑治療的一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)在于在6周、8周或12周試驗(yàn)結(jié)束時(shí)是否達(dá)到臨床總體印象-改善(CGI-I)評分為1(極大改善)或2(明顯改善)。CGI-I量表定義于Guy,W.(編):ECDEUAssessmentManualforPsychopharmacology,修訂版,DHEWPub.No.(ADM)76-338,Rockville,Md.,NationalInstituteofMentalHealth,1976中。實(shí)施例實(shí)施例1-進(jìn)行隨機(jī)化、雙盲、安慰劑對照研究來評估丁丙諾啡與化合物-1的組合的安全性和耐受性。在32名患有重度抑郁癥并對抗抑郁劑療法反應(yīng)不足的成人中進(jìn)行所述研究。在這項(xiàng)研究中，受試者接受每天一次舌下劑量的安慰劑或劑量比率為1:8或1:1的化合物-1-BUP，相應(yīng)遞增劑量分別為0.25:2mg/0.5:4mg和4:4mg/8:8mg，持續(xù)7天。最常見的不良事件包括頭暈、惡心、嘔吐和鎮(zhèn)靜(所有這些不良事件在1:8比率組(A組)的受試者中相對于1:1比率(B組)或安慰劑組的受試者中的報(bào)道頻率更大)。例如，A組中約28.5％報(bào)道鎮(zhèn)靜或嗜睡，而B組中僅7％報(bào)道鎮(zhèn)靜或嗜睡。頭暈發(fā)生率在A組(57％)相比于B組(29％)中也顯著較高。最常見不良事件(即，在任何處理組中由≥10％受試者所報(bào)道的不良事件)的概述提供于表A中：表A：安慰劑、A組和B組之間最常見不良事件(在任何組中>10％)的比較*來自各活動(dòng)組的一名受試者由于嘔吐而停止。A組：1:8比率的化合物1:丁丙諾啡(第1天至第3天為0.25mg:2mg以及第4天至第7天為0.5mg:4mg)B組：1:1比率的化合物1:丁丙諾啡(第1天至第3天為4mg:4mg以及第4天至第7天為8mg:8mg在17項(xiàng)漢密爾頓抑郁評定量表(17-itemHamiltonRatingScaleforDepression，HAM-D-17)和蒙哥馬利-艾森貝格抑郁評定量表(Montgomery-DepressionRatingScale，MADRS)中通過從基線至第7天的變化來測量功效。對于用1:8和1:1劑量比率的化合物-1-BUP或安慰劑處理的受試者，在HAM-D-17總評分中從基線至第7天的平均(標(biāo)準(zhǔn)偏差)變化分別為-5.0(6.1)、-6.7(3.4)和-1.0(4.2)(p＝0.032，1:1比率相對于安慰劑)，并且在MADRS總評分中從基線至第7天的平均(SD)變化分別為-8.5(.4)、-11.4(6.6)和-3.5(5.8)。參見表B和表C。表B：通過漢密爾頓抑郁評定量表-17(總評分)評估的安慰劑、A組和B組之間的治療功效的比較*來自精確威爾科克森(Wilcoxon)檢驗(yàn)的p值A(chǔ)組：1:8比率的化合物1:丁丙諾啡(第1天至第3天為0.25mg:2mg以及第4天至第7天為0.5mg:4mg)B組：1:1比率的化合物1:丁丙諾啡(第1天至第3天為4mg:4mg以及第4天至第7天為8mg:8mg表C：通過蒙哥馬利-艾森貝格抑郁評定量表(總評分)評估的安慰劑、A組和B組之間的治療功效的比較A組：1:8比率的化合物1:丁丙諾啡(第1天至第3天為0.25mg:2mg以及第4天至第7天為0.5mg:4mg)B組：1:1比率的化合物1:丁丙諾啡(第1天至第3天為4mg:4mg以及第4天至第7天為8mg:8mg使用視覺類比量表(VAS)來評估藥物喜好和其他主觀藥物作用。使用1:8比率的活性藥物的受試者相比于1:1比率經(jīng)歷更多的“感覺興奮”(表D)和“感覺鎮(zhèn)靜”(表E)的主觀經(jīng)歷。VAS結(jié)果報(bào)道為給藥前和給藥后評分，其顯示主觀經(jīng)歷的差異量值。例如，在第7天，“感覺興奮”的給藥前A組VAS評分為5.8并且給藥后評分為32.9，顯示給藥前與給藥后的評分差異為27.1。在B組的情況下，給藥前VAS評分為14.5并且給藥后為19.6，顯示僅增加5.1。兩組之間的比較顯示，相比于B組，A組在給藥后經(jīng)歷“感覺興奮”的顯著增加。表D：“感覺興奮”的視覺類比量表(VAS)結(jié)果表E：“感覺鎮(zhèn)靜”的視覺類比量表(VAS)結(jié)果用于測定化合物-1的Cmax的生物分析方法：一種方法被確認(rèn)用于測量人血漿(K2EDTA)中的化合物-1。使用50μL等分試樣體積和蛋白質(zhì)沉淀萃取程序以及接著液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法(LC/MS/MS)來分析樣品。使用納曲酮-d3作為內(nèi)標(biāo)物利用1/x2線性回歸在0.250至100ng/mL的濃度范圍內(nèi)計(jì)算化合物-1濃度。對于兩種分析物，在400ng/mL下成功地測試十倍稀釋物。在用于檢測通過電噴霧離子化形成的化合物-1、納曲酮-d3陽離子的優(yōu)化條件下在選擇反應(yīng)監(jiān)測(SelectedReactionMonitoring，SRM)模式中操作API5000。用于測定丁丙諾啡的Cmax的生物分析方法：一種方法被確認(rèn)用于測量人血漿(K2EDTA)中的丁丙諾啡。使用400μL等分試樣體積和固相萃取程序以及接著液相色譜/串聯(lián)質(zhì)譜法(LC/MS/MS)來分析樣品。利用1/x2線性回歸在0.250至100ng/mL的濃度范圍內(nèi)計(jì)算丁丙諾啡濃度。在用于檢測通過電噴霧離子化形成的丁丙諾啡和丁丙諾啡-d4陽離子的優(yōu)化條件下在選擇反應(yīng)監(jiān)測(SRM)模式中操作API5000。[35S]GTPγS測定通過定量在使用穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的研究中在激動(dòng)劑結(jié)合之后的G蛋白活化水平來測量化合物的功能性質(zhì)，并且被視為化合物功效的量度。將來自穩(wěn)定表達(dá)克隆的人μ阿片受體的CHO(中國倉鼠卵巢)細(xì)胞的膜用于實(shí)驗(yàn)中。在0.5mL的最終體積中，將12種不同濃度的化合物-1與7.5μg穩(wěn)定表達(dá)人μ阿片受體的CHO細(xì)胞膜一起溫育。測定緩沖液由50mMTris-HCl(pH7.4)、3mMMgCl2、0.2mMEGTA、3μMGDP和100mMNaCl組成。[35S]GTPγS的最終濃度為0.080nM。通過包括10μMGTPγS來測量非特異性結(jié)合。通過添加所述膜來起始結(jié)合。在30℃下溫育60分鐘后，通過Schleicher&Schuell32號玻璃纖維過濾器來過濾樣品。用冷50mMTris-HCl(pH7.5)洗滌過濾器三次，并且在2mLEcoscint閃爍液中計(jì)數(shù)。數(shù)據(jù)為平均Emax和EC50值±S.E.M。對于Emax值的計(jì)算，將基礎(chǔ)[35S]GTPγS結(jié)合設(shè)定為0％，并且將100％[35S]GTPγS結(jié)合水平設(shè)定為用DAMGO達(dá)到的最大結(jié)合。實(shí)施例2-在大鼠中進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來評估阿片拮抗劑在腦部的中腦邊緣區(qū)域的伏隔核殼(NAc-sh)區(qū)域中調(diào)節(jié)丁丙諾啡誘導(dǎo)的多巴胺流出的能力。將體重為300-400克的雄性大鼠用于所有研究。為了測量NAc-sh中多巴胺的流出，在自由移動(dòng)的大鼠中利用體內(nèi)微透析方法。這種方法允許從目標(biāo)特定腦區(qū)進(jìn)行細(xì)胞外腦脊髓液(CSF)取樣并且在利用HPLC-EC對所取樣的透析液進(jìn)行分析之后測量神經(jīng)遞質(zhì)濃度。對每只大鼠進(jìn)行微透析引導(dǎo)套管(CMA12，CMAMicrodialysis)的手術(shù)植入以便于稍后微透析探針的插入。用氯胺酮/賽拉嗪的混合物(80/6mg/kg腹膜內(nèi)(IP))將大鼠麻醉并放置在立體定位裝置中。使用前囟和顱骨作為參考點(diǎn)，通過大鼠腦立體定位圖譜(TheRatBraininStereotaxicCoordinates)(Paxinos和Watson,2006)測定伏隔核殼的最終坐標(biāo)(+1.7A/P、+-0.80M/L、-7.8D/V)，并且將引導(dǎo)套管垂直降至位置(距顱骨為D/V＝-5.8)中并用牙科用丙烯酸玻璃離子體固定至顱骨。用虛探針對引導(dǎo)套管封蓋直至微透析探針插入為止。在實(shí)驗(yàn)前的一天(手術(shù)后第3-4天)，對動(dòng)物進(jìn)行稱重以確定測試物品的適當(dāng)劑量。然后通過引導(dǎo)套管插入微透析探針(CMA12，2mm膜，CMAmicrodialysis)。將微透析探針連接至允許自由移動(dòng)的栓系系統(tǒng)并且經(jīng)由微量注射泵以0.25μL/分鐘的速率通過探針泵送無菌人工CSF(aCSF)(CMAmicrodialysis)整夜，在實(shí)驗(yàn)之前持續(xù)約16小時(shí)。在插入探針后第二天，使無菌aCSF灌注增加至2.0μl/分鐘并且在起始CSF的連續(xù)收集之前確定至少1.5小時(shí)的基線前平衡期。在平衡期之后，經(jīng)1.75小時(shí)測定每只動(dòng)物的基線神經(jīng)遞質(zhì)水平。在這個(gè)基線期之后，施用拮抗劑加丁丙諾啡(0.1mg/kg，皮下(SC))并且進(jìn)行微透析液的連續(xù)取樣再持續(xù)4.25小時(shí)。在連續(xù)收集的同時(shí)，在整個(gè)6.0小時(shí)收集期(1.75小時(shí)基線階段和4.25小時(shí)處理階段)內(nèi)使用冷卻的微級分收集器將CSF自動(dòng)分級成多個(gè)15分鐘時(shí)期。通過HPLC-EC分析每個(gè)樣品以基于六點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)曲線測定多巴胺的神經(jīng)遞質(zhì)濃度。在處理組之間在所有比較中使用在4.25小時(shí)處理階段內(nèi)每個(gè)樣品的平均多巴胺。在大鼠中，在0.01mg/kg和1mg/kg的劑量之間，丁丙諾啡導(dǎo)致NAc-sh多巴胺流出的劑量依賴性增加(圖1和圖2)。在0.1mg/kg和1.0mg/kg的劑量下，觀察到丁丙諾啡的行為作用，包括初始鎮(zhèn)靜、接著極度活躍。因此所有關(guān)于μ阿片拮抗劑的其他實(shí)驗(yàn)使用劑量為0.1mg/kg的丁丙諾啡，因?yàn)槠浔硎九c明確的行為作用相關(guān)的最低劑量。如圖3中所示，所評估的四種拮抗劑中的每種導(dǎo)致NAc-sh多巴胺流出的線性劑量依賴性降低。然而，明顯效能范圍是相當(dāng)大的?；贏AnAI概念，預(yù)期到這種結(jié)果，因?yàn)榧任纯紤]到針對μ阿片受體的效能差異，又未考慮到拮抗劑的藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)的差異。表F：在丁丙諾啡(0.1mg/kg)下化合物-1、化合物-10、納曲酮和納美芬的Cmax值實(shí)施例3-AAnAI概念適用于所得研究結(jié)果，其中NAc-sh多巴胺流出隨著四種μ阿片受體拮抗劑的劑量增加而衰減。由于與PK取樣相關(guān)的固有輕微應(yīng)力，以及神經(jīng)化學(xué)對于這種應(yīng)力的敏感性，因此需要不同組的動(dòng)物來確定在所評估的各劑量水平下的丁丙諾啡和拮抗劑的循環(huán)濃度。將體重介于300-400克(微透析研究中使用相同的體重范圍)的雄性大鼠用于這些PK實(shí)驗(yàn)。因?yàn)樗袆?dòng)物都接受固定劑量的丁丙諾啡，所以用無菌鹽水將丁丙諾啡的商業(yè)制劑(Buprenex(ReckittBenckiser))稀釋至0.1mg/ml，然后用作所需劑量的化合物1、化合物-10、納曲酮和納美芬的媒介物。這種方法確保在所研究的拮抗劑的每種劑量下，所伴隨的丁丙諾啡的劑量將為0.1mg/kg。通過皮下途徑在表G中所示的劑量下進(jìn)行所有注射。經(jīng)皮下給予測試制劑(拮抗劑與0.1mg/kg丁丙諾啡的組合)的無菌溶液(指定為時(shí)間0)。在給藥后5、15、30、60和120分鐘采集血液樣品。對于各血液采樣時(shí)間點(diǎn)，使用(3％)異氟烷麻醉將大鼠輕微麻醉，并且使用27.5號針從側(cè)尾靜脈抽取約200μl血液并放置在冷卻的K2EDTA管中。將采集管顛倒10-15次，然后在離心之前保持在冰上。通過在4℃下以14,000Xg(11,500RPM，使用Eppendorf5417R離心機(jī)轉(zhuǎn)子)將樣品離心2分鐘來獲得血漿。將收集到的血漿樣品冷凍在-80℃下直至測定丁丙諾啡和拮抗劑(化合物1、化合物10、納曲酮或納美芬)為止。在所評估的各劑量下每種拮抗劑的Cmax值示于表F中。在考慮到這些化合物之間的效能和PK性質(zhì)的差異的情況下，使用這些值來計(jì)算與NAc-shDA隨著所施用拮抗劑劑量增加而降低相關(guān)的AAnAI指數(shù)。如從圖3可見，通過考慮到體外效能和所達(dá)到的Cmax，基本上消除了表E中所示的NAc-sh多巴胺在不同拮抗劑(化合物1、化合物-10和納曲酮)之間的可變性。在丁丙諾啡誘導(dǎo)的NAc-sh多巴胺流出的衰減中，納美芬似乎更有效，這指示在大鼠中其他因素可能影響NAc-sh多巴胺對納美芬的反應(yīng)。表G：在丁丙諾啡(0.1mg/kg)下不同劑量的化合物-1、化合物-10、納曲酮和納美芬的AAnAI計(jì)算值實(shí)施例4-實(shí)現(xiàn)臨床抗抑郁作用的期望AAnAI范圍介于約0.5與5的數(shù)值之間并且優(yōu)選介于約0.7與2.2的數(shù)值之間。這些范圍考慮到了對于非臨床和臨床研究用于實(shí)驗(yàn)測定丁丙諾啡的EC50值和其在血漿中的濃度值以及阿片拮抗劑的IC50值和其在血漿中的濃度值的測定方法的固有可變性。如實(shí)施例1中所引用，在導(dǎo)致AAnAI值大于5的丁丙諾啡和化合物1的血漿Cmax值下，患者報(bào)道經(jīng)歷更多的興奮和鎮(zhèn)靜的主觀感覺；這是意欲用于治療抑郁癥的丁丙諾啡和阿片拮抗劑組合的不期望的特性。在“強(qiáng)迫游泳試驗(yàn)”(FST)中，連續(xù)兩天將大鼠放置在它們不能逃離的水槽中；第一天15分鐘，并且第二天5分鐘。盡管在水中它們會游泳，但試圖爬上容器壁或變得“靜止”而浮在水中。在第一天與第二天之間，大鼠靜止的總時(shí)間增加。第2天，在人中具有抗抑郁作用的藥物使靜止時(shí)間縮短，并且這種模型頻繁被用于評估藥物的潛在抗抑郁樣活性。大鼠品系也可影響總靜止時(shí)間，其中Wistar-Kyoto(WKY)品系顯示高靜止時(shí)間。所述WKY大鼠具有自發(fā)高血壓并顯示激素和抑郁樣行為異常。為了探索AAnAI范圍的下端，在FST范例中使用三組大鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在第一次暴露于游泳槽之后1小時(shí)、19小時(shí)和23小時(shí)，大鼠接受單獨(dú)的媒介物或丁丙諾啡(0.1mg/kg)與化合物-1(0.3或3.0mg/kg)的組合的三次獨(dú)立的皮下注射。在第一次游泳后24小時(shí)，再測試大鼠5分鐘。由對處理組不知情的評定者使用60秒?yún)^(qū)間的手動(dòng)秒表對視頻中的靜止時(shí)間(秒)進(jìn)行手動(dòng)評分。如果大鼠只作出保持其頭部高于水面所必需的動(dòng)作，則判定其為靜止的。這項(xiàng)研究的結(jié)果示于圖5中。在給予丁丙諾啡和0.3mg/kg化合物1的組合的大鼠中，靜止時(shí)間顯著較低(p<0.05)，指示抗抑郁樣作用。約2的AAnAI值與丁丙諾啡和化合物1的這個(gè)劑量組合相關(guān)。當(dāng)拮抗劑的劑量升至3.0mg/kg并且當(dāng)達(dá)到小于0.3的AAnAI時(shí)，所述組合的抗抑郁樣作用消失。這些數(shù)據(jù)連同實(shí)施例1中所示的臨床數(shù)據(jù)說明了AAnAI的上邊界和下邊界為了實(shí)現(xiàn)抗抑郁活性而無不期望副作用的重要性。圖6和圖7示出了對于NAc-sh多巴胺和5-HIAA，在最高劑量的化合物1下，丁丙諾啡作用完全衰減。這些數(shù)據(jù)進(jìn)一步說明，在期望的劑量組合下，丁丙諾啡的作用被化合物1調(diào)節(jié)，但未消除。盡管已參考本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案對本發(fā)明進(jìn)行了特定顯示和描述，但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)了解，可在不背離由所附權(quán)利要求書所涵蓋的本發(fā)明范圍的情況下在其中對形式和細(xì)節(jié)作出各種改變。當(dāng)前第1頁1 2 3