本發(fā)明涉及藥物制劑領(lǐng)域，特別是涉及一種局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

疼痛是困擾人類(lèi)的重大健康問(wèn)題，世界范圍內(nèi)疼痛的患病率高達(dá)80％。術(shù)后疼痛屬急性疼痛范疇。術(shù)后疼痛給患者帶來(lái)一系列的生理、心理反應(yīng)，導(dǎo)致胃腸道功能、心肺功能、凝血功能、內(nèi)分泌代謝等出現(xiàn)異常，并引起各種并發(fā)癥，嚴(yán)重影響了患者的術(shù)后康復(fù)。術(shù)后疼痛通?？沙掷m(xù)48～72h。

局部麻醉藥是一類(lèi)能在用藥局部可逆性地阻斷感覺(jué)神經(jīng)沖動(dòng)發(fā)生與傳導(dǎo)的藥物。目前臨床上常將其用于控制和減輕疼痛。但其作用時(shí)間通常小于6～12小時(shí)，單次用藥難以滿足長(zhǎng)時(shí)間鎮(zhèn)痛的需要。因此就需要多次給藥，而多次給藥患者順應(yīng)性差，并延長(zhǎng)患者在醫(yī)院的滯留時(shí)間、增加治療費(fèi)用。其次，容易引起血藥濃度的峰谷效應(yīng)，進(jìn)而產(chǎn)生一系列的毒副作用。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者嘗試通過(guò)各種方法，增加局麻藥作用時(shí)間，如埋植硬膜外導(dǎo)管間斷多次給藥、采用微量泵輸注藥物等。但仍存在用藥量偏大、花費(fèi)高、病人依從性差以及感染、敗血癥、神經(jīng)損傷等缺點(diǎn)。增加局部麻醉藥在術(shù)后鎮(zhèn)痛領(lǐng)域的作用時(shí)間成為亟待解決的問(wèn)題。

目前，上市的局麻藥長(zhǎng)效制劑有鹽酸布比卡因多囊脂質(zhì)體制劑(商品名：)。多囊脂質(zhì)體(MVL)可以實(shí)現(xiàn)水溶性藥物的高包封率和低滲漏率，因而比傳統(tǒng)的脂質(zhì)體具有更好的應(yīng)用優(yōu)勢(shì)。盡管如此，其仍具有不足之處。首先，MVL處方復(fù)雜，MVL中非同心囊泡的形成，需要中性脂質(zhì)(如三酰甘油等)的存在，否則就形成單室脂質(zhì)體或多室脂質(zhì)體。其次，MVL只能通過(guò)2次乳化法來(lái)制備，制備過(guò)程復(fù)雜，工業(yè)化生產(chǎn)難度大。最后，MVL產(chǎn)品均為混懸液，貯存過(guò)程中仍出現(xiàn)囊泡的破裂以及沉降和聚集，不利于貯存和運(yùn)輸。

在研的鹽酸布比卡因長(zhǎng)效制劑還有PLGA微球制劑。但由于PLGA微球制備工藝復(fù)雜，載藥量低，以及降解產(chǎn)物乳酸和羥基乙酸會(huì)引起注射部位pH的變化，從而引發(fā)炎癥反應(yīng)。這些不足限制了PLGA微球在局麻藥長(zhǎng)效制劑領(lǐng)域的應(yīng)用。

因此，有必要針對(duì)局部麻醉藥作用時(shí)間過(guò)短的問(wèn)題，研究新型的局部麻醉藥長(zhǎng)效制劑。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于此，本發(fā)明提供了一種局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑，該注射劑能夠?qū)崿F(xiàn)72小時(shí)以上的長(zhǎng)效緩釋效果。

具體技術(shù)方案如下：

一種局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑，由局部麻醉藥、液晶材料、有機(jī)溶劑和釋放調(diào)節(jié)劑制備而成；所述局部麻醉藥為酰胺類(lèi)局部麻醉藥，所述局部麻醉藥的質(zhì)量濃度為0.1～8w/w％；所述有機(jī)溶劑為可與水互溶的有機(jī)溶劑，所述液晶材料為單油酸甘油脂，所述液晶材料與有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為1～9:1；所述釋放調(diào)節(jié)劑選自中鏈甘油三酸酯、油酸、生育酚和生育酚醋酸酯中的至少一種，所述釋放調(diào)節(jié)劑的質(zhì)量濃度為0～30w/w％。

在其中一些實(shí)施例中，所述局部麻醉藥的質(zhì)量濃度為1～6w/w％；及/或所述液晶材料與有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為1.5～5:1。

在其中一些實(shí)施例中，所述液晶材料與有機(jī)溶劑的質(zhì)量比為3.5～4.5:1。

在其中一些實(shí)施例中，所述釋放調(diào)節(jié)劑的質(zhì)量濃度為15～20w/w％。

在其中一些實(shí)施例中，所述酰胺類(lèi)局部麻醉藥選自布比卡因及其水溶液性鹽、利多卡因及其水溶液性鹽以及羅哌卡因及其水溶液性鹽中的至少一種。

在其中一些實(shí)施例中，所述酰胺類(lèi)局部麻醉藥為鹽酸布比卡因。

在其中一些實(shí)施例中，所述有機(jī)溶劑選自無(wú)水乙醇、N-甲基吡咯烷酮、2-吡咯烷酮和N,N-二甲基乙酰胺中的至少一種。

在其中一些實(shí)施例中，所述有機(jī)溶劑為無(wú)水乙醇。

在其中一些實(shí)施例中，所述局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑由鹽酸布比卡因、單油酸甘油脂和無(wú)水乙醇制備而成，所述鹽酸布比卡因的質(zhì)量濃度為4.5～5.5w/w％，所述單油酸甘油脂和無(wú)水乙醇的質(zhì)量比為3.5～4.5:1。

本發(fā)明還提供了上述局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑的制備方法。

具體技術(shù)方案如下：

一種上述的局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑的制備方法，包括以下步驟：將液晶材料于40～50℃加熱至熔融，加入有機(jī)溶劑和/或釋放調(diào)節(jié)劑，渦旋混勻，得到原位凝膠前體溶液；將局部麻醉藥加入到所述原位凝膠前體溶液中，渦旋混勻，超聲分散，即得局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑。

本發(fā)明的局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法具有以下優(yōu)點(diǎn)和有益效果：

發(fā)明人通過(guò)長(zhǎng)期的經(jīng)驗(yàn)積累以及實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)：可以將局部麻醉藥制備成立方液晶原位凝膠注射劑以延長(zhǎng)局部麻醉藥的釋放時(shí)長(zhǎng)，延長(zhǎng)鎮(zhèn)痛作用時(shí)間，為局部麻醉藥提供了一種新型長(zhǎng)效制劑。發(fā)明人通過(guò)大量創(chuàng)造性實(shí)驗(yàn)研究選用了特定種類(lèi)的液晶材料(單油酸甘油脂)與特定種類(lèi)的有機(jī)溶劑以特定的配比與局部麻醉藥制備成立方液晶前體溶液(局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑)，該前體溶液具有良好的流動(dòng)性，粘度低，滿足注射劑的粘度要求，經(jīng)注射后與體液接觸，發(fā)生溶劑交換反應(yīng)，轉(zhuǎn)變?yōu)楦哒扯鹊牧⒎揭壕г荒z，形成藥物儲(chǔ)庫(kù)，使局部麻醉藥從原位凝膠中釋放的速度可滿足長(zhǎng)效止痛的要求(72小時(shí)以上)。即本發(fā)明的局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑具有很好的長(zhǎng)效緩釋效果，且突釋率低，能夠降低給藥次數(shù)、順應(yīng)性好，而且可避免峰谷現(xiàn)象、不良反應(yīng)小。

通過(guò)在原料處方中進(jìn)一步加入一定量的釋放調(diào)節(jié)劑可以進(jìn)一步調(diào)節(jié)本發(fā)明的局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑的釋放速度，獲得更好的緩釋效果。

本發(fā)明的局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑，其中所用的液晶材料為FDA批準(zhǔn)的藥用輔料，降解產(chǎn)物(甘油等)為內(nèi)源性物質(zhì)，生物相容性好。且該注射劑含有少量的有機(jī)溶劑，不含水分，可以有效抑制微生物的滋生繁衍，有利于制劑的穩(wěn)定和貯藏。

本發(fā)明的局部麻醉藥的立方液晶原位凝膠注射劑通過(guò)簡(jiǎn)單的熔融、渦旋混合、超聲分散的步驟即可制備得到，相比于現(xiàn)有局部麻醉藥的長(zhǎng)效制劑，制備方法簡(jiǎn)便易行，有利于工業(yè)化生產(chǎn)。

附圖說(shuō)明

圖1為實(shí)施例1制備得到的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑以及形成凝膠后的狀態(tài)；

圖2為實(shí)施例1制備得到的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑形成凝膠過(guò)程中不同時(shí)刻的偏光圖案；

圖3為實(shí)施例2制備得到的含有不同比例液晶材料與有機(jī)溶劑的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑的體外釋放曲線圖；

圖4為實(shí)施例3制備得到的含有不同比例釋放調(diào)節(jié)劑的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑的體外釋放曲線圖；

圖5為實(shí)施例4制備得到的鹽酸利多卡因立方液晶原位凝膠注射劑的體外釋放曲線圖；

圖6為實(shí)施例1、對(duì)比例1和對(duì)比例2制備得到的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑的體外釋放曲線圖；

圖7為實(shí)施例1、對(duì)比例1和對(duì)比例2制備得到的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑以及市售的鹽酸布比卡因注射液對(duì)新西蘭兔皮膚的刺激性實(shí)驗(yàn)結(jié)果；

圖8為實(shí)施例1制備得到的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑在新西蘭兔體內(nèi)的釋放曲線圖。

具體實(shí)施方式

以下將結(jié)合具體實(shí)施例和附圖對(duì)本發(fā)明的局部麻醉藥制備成立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法做進(jìn)一步的說(shuō)明，但絕不是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。

實(shí)施例1

本實(shí)施例提供一種鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法，其制備方法包括以下步驟：

1)將一定質(zhì)量的單油酸甘油酯(GMO)于45℃水浴加熱至熔融，加入一定量的無(wú)水乙醇，使得GMO和無(wú)水乙醇的質(zhì)量比為8:2，渦旋混勻，得到原位凝膠前體溶液；

2)稱(chēng)取一定質(zhì)量的鹽酸布比卡因加入到步驟1)所得的原位凝膠前體溶液中，使得鹽酸布比卡因的質(zhì)量濃度為5％(w/w)，渦旋混勻，超聲分散，得到含有5w/w％鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑。

對(duì)本實(shí)施例的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)：

(1)體外膠凝試驗(yàn)：向制備得到的鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑中加入少量水后形成凝膠。對(duì)鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑以及形成的凝膠進(jìn)行拍照記錄(圖1)。

試驗(yàn)結(jié)果：所制備的鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑具有很好的流動(dòng)性，無(wú)論倒立還是傾斜放置均能流動(dòng)。形成凝膠后粘度較大，流動(dòng)性差。

(2)對(duì)凝膠形成過(guò)程中的偏光情況進(jìn)行觀察：采用熱臺(tái)偏光顯微鏡對(duì)凝膠形成過(guò)程中不同時(shí)間點(diǎn)的偏光情況進(jìn)行觀察、拍照。分別對(duì)鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑以及鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑加水形成凝膠后1h、2h、4h的偏光情況進(jìn)行拍照。放大倍數(shù)均為50倍。結(jié)果分別如圖2的A(注射劑)、B(凝膠后1h)、C(凝膠后2h)、D(凝膠后4h)所示。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑的偏光圖案為十字花紋圖案，表明鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑的晶相結(jié)構(gòu)為層狀液晶；而加水之后，1小時(shí)的偏光圖案為扇形圖案，表明此時(shí)凝膠的結(jié)構(gòu)為六角液晶；2小時(shí)的時(shí)候，扇形圖案慢慢減弱；至4小時(shí)的時(shí)候，扇形圖案完全消失，偏光視野為全黑圖案，表明立方液晶的形成。因此，鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑在形成原位凝膠的過(guò)程中，經(jīng)歷了從層狀液晶到六角液晶，最后到立方液晶的相轉(zhuǎn)變。

實(shí)施例2

本實(shí)施例提供了由不同質(zhì)量比的GMO和無(wú)水乙醇制備的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑，其制備方法包括以下步驟：

1)將一定質(zhì)量的單油酸甘油酯(GMO)于45℃水浴加熱至熔融，加入一定量的無(wú)水乙醇，使得GMO和無(wú)水乙醇的質(zhì)量比分別為6:4、7:3、8:2，渦旋混勻，得到相對(duì)應(yīng)的原位凝膠前體溶液；

2)稱(chēng)取一定質(zhì)量的鹽酸布比卡因分別加入到步驟1)所得的原位凝膠前體溶液中，使得鹽酸布比卡因的濃度為5％(w/w)，渦旋混勻，超聲分散，分別得到含有5w/w％鹽酸布比卡因的原位凝膠注射劑。

分別取本實(shí)施例制備的三種鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑，用馬爾文流變儀測(cè)定粘度，粘度分別為50.68mPa·s(GMO-乙醇質(zhì)量比8:2)，38.26mPa·s(GMO-乙醇質(zhì)量比7:3)，22.53mPa·s(GMO-乙醇質(zhì)量比6:4)，均滿足注射劑的注射要求。

分別取本實(shí)施例制備的三種鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑，用滴管滴入37℃的PBS緩沖液中，記錄注射劑前體溶液形成凝膠的時(shí)間，結(jié)果如下表所示。

將本實(shí)施例制備的三種鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑進(jìn)行藥物的體外釋放實(shí)驗(yàn)。方法如下：分別稱(chēng)量0.3g上述不同的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑滴加到裝有10毫升PBS緩沖鹽的離心管中，將離心管置于100rpm、37℃的搖床中。分別在1、2、4、8、12、24、36、48、72h取出釋放介質(zhì)進(jìn)行測(cè)定，并補(bǔ)充等量的新鮮釋放介質(zhì)。測(cè)定不同時(shí)間點(diǎn)的藥物濃度，采用高效液相色譜法測(cè)定藥物濃度。得到藥物的體外釋放曲線，結(jié)果如圖3所示。

色譜條件：

流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀1.94g，磷酸氫二鉀2.48g，加水稀釋到1000mL，磷酸調(diào)節(jié)pH到6.8)：乙睛＝35:65，檢測(cè)波長(zhǎng)263nm，流速：1mL/min，進(jìn)樣量：20μL，柱溫：40℃。

結(jié)果顯示：通過(guò)改變GMO和有機(jī)溶劑(無(wú)水乙醇)的質(zhì)量比可以調(diào)節(jié)藥物的體外釋放速率。增加GMO的比例可以加速凝膠的形成，延緩藥物的釋放，并且可以降低突釋?zhuān)瑴p少毒副作用。但是，GMO的比例過(guò)高會(huì)導(dǎo)致前體溶液的粘度過(guò)高，不能滿足作為注射劑的要求，而且GMO的比例過(guò)高時(shí)注射劑不穩(wěn)定，GMO容易析出，綜合考慮各因素，優(yōu)選GMO和有機(jī)溶劑(無(wú)水乙醇)的質(zhì)量比為8:2。

實(shí)施例3

本實(shí)施例提供的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法，其制備方法包括以下步驟：

1)將一定質(zhì)量的單油酸甘油酯(GMO)于45℃水浴加熱至熔融，加入一定量的無(wú)水乙醇，使得GMO和無(wú)水乙醇的質(zhì)量比為8:2，渦旋混勻，得到相對(duì)應(yīng)的原位凝膠前體溶液A；

2)分別向原位凝膠前體溶液中加入生育酚醋酸酯，使其質(zhì)量濃度分別為10％、20％、30％，得到不同生育酚醋酸酯含量的原位凝膠前體溶液B。

3)稱(chēng)取一定質(zhì)量的鹽酸布比卡因分別加入到步驟2)所得的原位凝膠前體溶液B中，使得鹽酸布比卡因的濃度為5％(w/w)，渦旋混勻，超聲分散，分別得到含有不同生育酚醋酸酯含量的鹽酸布比卡因原位凝膠注射劑。

將本實(shí)施例以及實(shí)施例1的鹽酸布比卡因原位凝膠注射劑進(jìn)行藥物的體外釋放實(shí)驗(yàn)，操作方法如實(shí)施例2(將實(shí)施例2中的釋放介質(zhì)PBS緩沖鹽替換為水，其它操作同實(shí)施例2)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖4所示。

結(jié)果顯示：加入一定量的釋放調(diào)節(jié)劑可調(diào)節(jié)鹽酸布比卡因原位凝膠注射劑的藥物釋放速率，使鹽酸布比卡因原位凝膠注射劑具有更好的緩釋效果。其原理為釋放調(diào)節(jié)劑可以改變所形成凝膠的臨界堆積參數(shù)(CPP),進(jìn)而改變凝膠的晶格結(jié)構(gòu)，調(diào)節(jié)藥物釋放速率。

實(shí)施例4

本實(shí)施例提供一種鹽酸利多卡因立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法，其制備方法包括以下步驟：

1)將一定質(zhì)量的單油酸甘油酯(GMO)于45℃水浴加熱至熔融，加入一定量的無(wú)水乙醇，使得GMO和無(wú)水乙醇的質(zhì)量比為8:2，渦旋混勻，得到原位凝膠前體溶液；

2)稱(chēng)取一定質(zhì)量的鹽酸利多卡因加入到步驟1)所得的原位凝膠前體溶液中，使得鹽酸利多卡因的質(zhì)量濃度為5％(w/w)，渦旋混勻，超聲分散，得到含有5w/w％鹽酸利多卡因的原位凝膠注射劑。

將本實(shí)施例的鹽酸利多卡因原位凝膠注射劑進(jìn)行藥物的體外釋放實(shí)驗(yàn)，操作方法如實(shí)施例2，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5所示。

對(duì)比例1

本對(duì)比例提供一種鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法，其制備方法基本同實(shí)施例1，不同之處在于：所用液晶材料為植烷三醇(PYT)，替換實(shí)施例1中的單油酸甘油酯(GMO)。

對(duì)比例2

本對(duì)比例提供一種鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑及其制備方法，其制備方法基本同實(shí)施例1，不同之處在于：所用有機(jī)溶劑為二甲基亞砜，替換實(shí)施例1中的無(wú)水乙醇。

實(shí)施例5

(1)測(cè)試實(shí)施例1、對(duì)比例1-2制備的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑的粘度，結(jié)果分別為：50.68mPa·s(實(shí)施例1)、123.800mPa·s(對(duì)比例1)、81.49mPa·s(對(duì)比例2)。實(shí)施例1的粘度明顯低于對(duì)比例1和對(duì)比例2，流動(dòng)性好，符合注射要求。

(2)對(duì)實(shí)施例1、對(duì)比例1-2制備的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑進(jìn)行體外釋放實(shí)驗(yàn)。操作方法如實(shí)施例2。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖6所示。

結(jié)果顯示：對(duì)比例1的藥物前期釋放太快，突釋明顯，容易產(chǎn)生毒副作用。對(duì)比例2中藥物的釋放速率太慢，后期釋放趨于平穩(wěn)，釋放不完全。相比之下，實(shí)施例1的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑的緩釋效果明顯優(yōu)于對(duì)比例1-2，即以單油酸甘油酯(GMO)作為液晶材料、以無(wú)水乙醇為有機(jī)溶劑時(shí)，具有更理想的緩釋效果。

(3)采用動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)考查實(shí)施例1以及對(duì)比例1-2制備的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑的組織刺激性。

分別取實(shí)施例1(實(shí)驗(yàn)組1)以及對(duì)比例1-2(實(shí)驗(yàn)組2、實(shí)驗(yàn)組3)制備的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑對(duì)雌性新西蘭兔進(jìn)行皮下注射(n＝6)，對(duì)照組采用市售的鹽酸布比卡因注射液，給藥量均為15mg/kg。在給藥后的第3天、7天、14天分別用肉眼觀察注射部位的皮膚，再取注射部位的皮膚用4％多聚甲醛固定，制備石蠟切片，進(jìn)行HE染色。顯微鏡下對(duì)組織切片進(jìn)行觀察，觀察結(jié)果如圖7所示。

肉眼觀察結(jié)果：肉眼觀察注射部位的皮膚，實(shí)驗(yàn)組1與對(duì)照組均無(wú)明顯變化，實(shí)驗(yàn)組2與實(shí)驗(yàn)組3注射部位皮膚可見(jiàn)輕微皮膚脫落現(xiàn)象。

顯微鏡觀察結(jié)果：實(shí)驗(yàn)組1在第3天的時(shí)候，注射部位的皮膚有炎癥浸潤(rùn)，此后隨著時(shí)間的流逝(第7天)，炎癥反應(yīng)逐漸減弱，到第14天的時(shí)候已經(jīng)基本恢復(fù)成正常皮膚。而對(duì)照組第3天的時(shí)候，皮膚也出現(xiàn)輕微的炎癥反應(yīng)。到第7天已經(jīng)基本恢復(fù)正常。實(shí)驗(yàn)組2與實(shí)驗(yàn)組3在第14天的時(shí)候仍可見(jiàn)較多的巨噬細(xì)胞存在。說(shuō)明市售的鹽酸布比卡因注射劑和本發(fā)明實(shí)施例1的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑均對(duì)皮膚有輕微刺激性，但都是可逆的，在短時(shí)間內(nèi)均可自行恢復(fù)，其刺激性在可接受的范圍內(nèi)。但是，實(shí)驗(yàn)組2與實(shí)驗(yàn)組3對(duì)注射部位會(huì)帶來(lái)比較嚴(yán)重的皮膚刺激性反應(yīng)。

實(shí)施例6

采用動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)考查實(shí)施例1的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑緩釋效果。

取實(shí)施例1中制備得到的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑對(duì)雌性新西蘭兔進(jìn)行皮下注射(n＝6)，對(duì)照組采用市售的鹽酸布比卡因注射液，給藥量均為15mg/kg。分別在給藥后10min、20min、30min、1h、2h、4h、8h、12h、24h、36h、48h、72h通過(guò)耳緣靜脈取血(對(duì)照組只取到24h的血樣)，采用LC-MS的檢測(cè)方法測(cè)定血漿中鹽酸布比卡因的含量，考查制劑的緩釋效果。

色譜條件：

色譜柱C₁₈色譜柱(2.1mm×150mm，5μm，菲羅門(mén)，美國(guó))；流動(dòng)相：甲醇：0.1％甲酸水溶液＝70:30(V/V)；流速：0.2mL/min；柱溫：35℃；進(jìn)樣量：10μL。

質(zhì)譜條件：

離子源：正離子電噴霧離子源(ESI⁺)；噴霧壓力：4kV；鞘氣壓力50V；輔助氣壓力10V；毛細(xì)管溫度為350℃；檢測(cè)模式為多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)；檢測(cè)離子：m/z 289.169→m/z 140.312(藥物鹽酸布比卡因)，m/z 289.168→m/z98.337(藥物鹽酸布比卡因)，m/z 235.283→m/z 86.060(內(nèi)標(biāo)鹽酸利多卡因)；碰撞氣為高純氬氣，脫溶劑氣為高純氮?dú)狻?/p>

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖8和表1所示，結(jié)果顯示：市售鹽酸布比卡因注射液約20min達(dá)到最大血藥濃度，此后迅速消除，血藥濃度降低。實(shí)施例1的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑能夠緩慢達(dá)到最大血藥濃度(約10小時(shí))，而且C_max(0.49μg/mL)遠(yuǎn)低于市售鹽酸布比卡因注射液(2.79μg/mL)。表明本發(fā)明的鹽酸布比卡因立方液晶原位凝膠注射劑具有很好的緩釋、控釋效果，能夠降低給藥次數(shù)、順應(yīng)性好，而且避免了峰谷現(xiàn)象、不良反應(yīng)小，具有很好的應(yīng)用前景。

表1市售鹽酸布比卡因注射液與本發(fā)明的立方液晶原位凝膠注射劑的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)

注：t_1/2為消除半衰期，t_max為達(dá)峰時(shí)間，C_max為達(dá)峰濃度，AUC_0-t為t小時(shí)的藥時(shí)曲線下面積，AUC_0-∞為∞時(shí)的藥時(shí)曲線下面積，MRT為平均滯留時(shí)間。

以上所述實(shí)施例的各技術(shù)特征可以進(jìn)行任意的組合，為使描述簡(jiǎn)潔，未對(duì)上述實(shí)施例中的各個(gè)技術(shù)特征所有可能的組合都進(jìn)行描述，然而，只要這些技術(shù)特征的組合不存在矛盾，都應(yīng)當(dāng)認(rèn)為是本說(shuō)明書(shū)記載的范圍。

以上所述實(shí)施例僅表達(dá)了本發(fā)明的幾種實(shí)施方式，其描述較為具體和詳細(xì)，但并不能因此而理解為對(duì)發(fā)明專(zhuān)利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的是，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干變形和改進(jìn)，這些都屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。因此，本發(fā)明專(zhuān)利的保護(hù)范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。