本發(fā)明涉及一種紫蘇葉注射液的制備方法。

背景技術(shù)：

口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的偶蹄類動(dòng)物疾病?？谔阋呤怯绊懶竽翗I(yè)發(fā)展的最重要的動(dòng)物傳染病，在世界動(dòng)物衛(wèi)生組織列為A類傳染病中的頭號傳染病，在我國，該病也列為一類動(dòng)物疫病。口蹄疫的爆發(fā)會(huì)給當(dāng)?shù)匦竽翗I(yè)造成嚴(yán)重的損失。2001年英國爆發(fā)口蹄疫瘦隋，撲殺700萬頭牲畜，造成85億英鎊的損失，同時(shí)，該疫情還波及法國、荷蘭、愛爾蘭等國，這些國家共撲殺多達(dá)36萬頭牲畜。在發(fā)展中國家，注射口蹄疫疫苗是預(yù)防口蹄疫最有效的措施之一。但由于口蹄疫病毒是RNA病毒，病毒的基因和病毒的抗原特性改變很快，因此，這顯著增加了研制高效的口蹄疫疫苗的難度。雖然發(fā)達(dá)國家采用動(dòng)物撲殺可以有效預(yù)防El蹄疫，但一旦爆發(fā)口蹄疫，大量沒有免疫的動(dòng)物面臨更大的感染風(fēng)險(xiǎn)口。因此，口蹄疫的防控依然是畜牧業(yè)中動(dòng)物疫控研究最重要的研究課題之一。采用有效的衛(wèi)生措施也是預(yù)防口蹄疫的技術(shù)措施之一?？谔阋卟《臼且环N對酸高度敏感的病毒。這是因?yàn)榭谔阋卟《驹谒嵝詶l件下脫下蛋白衣殼進(jìn)行繁殖；如果它還沒有侵染進(jìn)入動(dòng)物細(xì)胞，提前脫下蛋白衣殼將會(huì)影響病毒的繁殖而導(dǎo)致病毒的死亡。中草藥紅茶菌是一種利用紅茶菌發(fā)酵茶葉、羅漢果、甘草、野菊花等中草藥提取液的新型紅茶茵菌液。由于它保留了紅茶菌的產(chǎn)酸特性，因此中草藥紅茶菌制劑可以體外有效殺滅口蹄疫病毒。茶葉、羅漢果、甘草、野菊花是一些具有藥食兩用的中草藥植物，這些植物的提取液普遍具有提高動(dòng)物免疫力、拮抗病原細(xì)菌、病毒等方面的作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提出一種紫蘇葉注射液的制備方法。

一種紫蘇葉注射液的制備方法，包括以下步驟：

（1）取紫蘇葉放入烘箱中35℃烘干，用中草藥粉碎機(jī)進(jìn)行初步粉碎，最后過40目篩得到粗粉；

(2)精確稱取紫蘇葉粗粉400g置于圓底燒瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下熱水浸提4次，每次1h，每次之間用紗布進(jìn)行粗濾，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸干多余水分，即得紫蘇葉浸膏；

(3)在制備的紫蘇葉浸膏中加入60％的乙醇溶液，靜置24h；

（4）待沉淀穩(wěn)定析出后用濾紙過濾，利用水提醇沉原理除去部分雜質(zhì)，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收溶液中的乙醇；

（5）用18％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯層溶液無色為止；

（6）合并萃取液，旋轉(zhuǎn)蒸干乙酸乙酯，即得紫蘇葉迷迭香酸萃取物；

（7）在制備好的紫蘇葉迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化鈉注射液360ml溶解浸膏，并同時(shí)加入亞硫酸氫鈉0.1％、苯酚0.25％分別作為抗氧化劑和抑菌劑，在0．45微米的微孔濾膜抽濾，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6．0；

（8）以注射用水定容至l000ml，充分振蕩混勻，無菌分裝，在121℃環(huán)境下濕熱滅菌30min，后即得，封蠟避光保存。

優(yōu)選地，所述步驟步驟（5）中PH值調(diào)節(jié)為2.5。

本發(fā)明所述方法制備的紫蘇葉注射液，安全性好，刺激好，本發(fā)明所述方法降低了能耗，節(jié)省了成本，可實(shí)用性強(qiáng)，可工業(yè)化生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1。

一種紫蘇葉注射液的制備方法，包括以下步驟：

（1）取紫蘇葉放入烘箱中35℃烘干，用中草藥粉碎機(jī)進(jìn)行初步粉碎，最后過40目篩得到粗粉；

(2)精確稱取紫蘇葉粗粉400g置于圓底燒瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下熱水浸提4次，每次1h，每次之間用紗布進(jìn)行粗濾，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸干多余水分，即得紫蘇葉浸膏；

(3)在制備的紫蘇葉浸膏中加入60％的乙醇溶液，靜置24h；

（4）待沉淀穩(wěn)定析出后用濾紙過濾，利用水提醇沉原理除去部分雜質(zhì)，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收溶液中的乙醇；

（5）用18％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯層溶液無色為止；

（6）合并萃取液，旋轉(zhuǎn)蒸干乙酸乙酯，即得紫蘇葉迷迭香酸萃取物；

（7）在制備好的紫蘇葉迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化鈉注射液360ml溶解浸膏，并同時(shí)加入亞硫酸氫鈉0.1％、苯酚0.25％分別作為抗氧化劑和抑菌劑，在0．45微米的微孔濾膜抽濾，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6．0；

（8）以注射用水定容至l000ml，充分振蕩混勻，無菌分裝，在121℃環(huán)境下濕熱滅菌30min，后即得，封蠟避光保存。

實(shí)施例2。

一種紫蘇葉注射液的制備方法，包括以下步驟：

（1）取紫蘇葉放入烘箱中35℃烘干，用中草藥粉碎機(jī)進(jìn)行初步粉碎，最后過40目篩得到粗粉；

(2)精確稱取紫蘇葉粗粉400g置于圓底燒瓶中，按物料液比1：12(W／V)，于100℃下熱水浸提4次，每次1h，每次之間用紗布進(jìn)行粗濾，合并提取液，旋轉(zhuǎn)蒸干多余水分，即得紫蘇葉浸膏；

(3)在制備的紫蘇葉浸膏中加入60％的乙醇溶液，靜置24h；

（4）待沉淀穩(wěn)定析出后用濾紙過濾，利用水提醇沉原理除去部分雜質(zhì)，并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收溶液中的乙醇；

（5）用18％的鹽酸調(diào)節(jié)pH值至2.0～2.5，按照料液比5：3的比例，加入乙酸乙酯多次萃取，直到乙酸乙酯層溶液無色為止；

（6）合并萃取液，旋轉(zhuǎn)蒸干乙酸乙酯，即得紫蘇葉迷迭香酸萃取物；

（7）在制備好的紫蘇葉迷迭香酸萃取物中加入0.9％氯化鈉注射液360ml溶解浸膏，并同時(shí)加入亞硫酸氫鈉0.1％、苯酚0.25％分別作為抗氧化劑和抑菌劑，在0．45微米的微孔濾膜抽濾，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值至6.0；

（8）以注射用水定容至l000ml，充分振蕩混勻，無菌分裝，在121℃環(huán)境下濕熱滅菌30min，后即得，封蠟避光保存。

本實(shí)施例所述步驟步驟（5）中PH值調(diào)節(jié)為2.5。