本發(fā)明涉及組織工程及再生醫(yī)學(xué)材料
技術(shù)領(lǐng)域：
，尤其涉及一種用于硬腦膜缺損部位的修復(fù)手術(shù)，包括幕上、大腦半球手術(shù)，幕下、后顱窩手術(shù)，顱底微創(chuàng)手術(shù)、鎖孔手術(shù)和腦脊液漏的修補(bǔ)手術(shù)的復(fù)層可吸收生物膜的制備方法。
背景技術(shù)：
：硬腦膜是腦組織表面一層重要的組織結(jié)構(gòu)，是保護(hù)腦組織的一道重要屏障。硬腦膜的完整性對(duì)于顱腦手術(shù)患者十分重要，腦膜修補(bǔ)材料對(duì)于重建硬腦膜完整性，保護(hù)腦組織，防止腦脊液漏，顱內(nèi)感染，腦膨出，癲癇等并發(fā)癥具有重要意義。創(chuàng)傷、腫瘤侵蝕及手術(shù)過(guò)程本身等因素均可造成硬腦膜的缺損，故需要其他代替材料來(lái)修補(bǔ)缺損的硬腦膜，以使其保持解剖結(jié)構(gòu)的完整。目前，根據(jù)材料來(lái)源，臨床上所用到的人工硬腦膜補(bǔ)片主要分為4類(lèi)，分別是自體組織修補(bǔ)材料、同種異體修補(bǔ)材料、異種天然生物膜和人工合成材料。自體組織修補(bǔ)材料主要為肌筋膜、膜狀腱膜、脂肪等。這些材料具有很好的生物相容性和安全性，不發(fā)生排異反應(yīng)、免疫反應(yīng)，但其二次損傷、步驟繁瑣、容易粘連以及加重病人痛苦等缺點(diǎn)，在臨床上應(yīng)用越來(lái)越少；同種異體修補(bǔ)材料主要為凍干的人體硬腦膜。這些材料有正常人體腦膜的超微結(jié)構(gòu)，從結(jié)構(gòu)上看是最好的。然而這種材料存在病毒、傳染病等風(fēng)險(xiǎn)，而且供體來(lái)源有限，已經(jīng)被禁用；異種天然生物膜主要為豬腹膜、羊腹膜、牛心包等。這些材料與硬膜結(jié)構(gòu)相似，有助于恢復(fù)正常的生理解剖結(jié)構(gòu)，且具有一定的強(qiáng)度。但是這些材料存在細(xì)胞殘留、抗原抗體反應(yīng)，病毒、感染及毒性反應(yīng)，保存及使用步驟繁瑣等缺點(diǎn)；人工合成材料主要為聚乙醇酸、聚乳酸、聚已內(nèi)酯等高分子材料。這些材料取材方便，成本低，無(wú)潛在病毒感染，但其降解速率較慢、生物學(xué)性能差等缺點(diǎn)限制了其應(yīng)用；除了以上四種材料，以膠原蛋白為原材料制備人工硬腦膜越來(lái)越受到大家的關(guān)注。i型膠原蛋白是硬腦膜最主要的細(xì)胞外基質(zhì)成分，獨(dú)特的三維孔隙結(jié)構(gòu)，為受損硬腦膜的再生和重建提供最佳的介質(zhì)和支架。既避免了動(dòng)物源性的潛在危險(xiǎn)，又比合成材料具有更好的生物相容性。i型膠原蛋白是由兩條α1肽鏈和一條α2肽鏈組成，三條肽鏈以鏈間的氫鍵緊密地結(jié)合在一起，形成穩(wěn)定的三股螺旋膠原單體結(jié)構(gòu)。膠原有刺激細(xì)胞增殖的作用，尤其是成纖維細(xì)胞及上皮細(xì)胞。人體內(nèi)的細(xì)胞絕大多數(shù)屬于貼附依賴(lài)性細(xì)胞，只有在一定的基質(zhì)上貼附鋪展，才能使細(xì)胞增殖周期運(yùn)行，而膠原是細(xì)胞貼附的最重要的基質(zhì)成分。由于人體的硬腦膜組織屬不規(guī)則致密結(jié)締組織，主要由成纖維細(xì)胞和i型膠原蛋白組成。因此，i型膠原蛋白對(duì)硬腦膜的再生和修復(fù)起著至關(guān)作用，但是，現(xiàn)有技術(shù)在力學(xué)性能、是否縫合、降解速率等方面還有不足，需要進(jìn)一步改進(jìn)和優(yōu)化。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：有鑒于此，本發(fā)明提供一種復(fù)層可吸收生物膜的制備方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題?；谏鲜瞿康模景l(fā)明提供的一種復(fù)層可吸收生物膜的制備方法包括以下步驟：配置硫酸軟骨素乙酸溶液和膠原乙酸溶脹液；在膠原乙酸溶脹液中加入硫酸軟骨素乙酸溶液，得到膠原-硫酸軟骨素漿液，在配置的過(guò)程中溶液均勻攪拌并抽真空；將膠原硫酸軟骨素溶液進(jìn)行第一次真空冷凍干燥，得到具有三維結(jié)構(gòu)的膠原膜；將膠原膜壓制成致密膠原膜；將膠原硫酸軟骨素溶液倒在鋪有致密膠原膜的凍干盤(pán)中或直接通過(guò)膠原-硫酸軟骨素漿液將膠原致密層和膠原膜粘附在一起，進(jìn)行第二次真空冷凍干燥，得到具有疏松層和致密層的復(fù)合膠原膜；復(fù)合膠原膜進(jìn)行交聯(lián)；將交聯(lián)后的復(fù)合膠原膜進(jìn)行滅菌，得到復(fù)層可吸收生物膜。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述硫酸軟骨素乙酸溶液由如下方法配置：將2-4克硫酸軟骨素加入到500毫升濃度為0.4-0.6％乙酸溶液中，在0-10℃溫度條件下，溶解，過(guò)濾得到。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述膠原乙酸溶脹液由如下方法配置：將3-5克i型膠原蛋白加入到500毫升濃度為0.3-0.6％乙酸溶液中，混合攪拌，攪拌速度為15000-20000轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為1-2小時(shí)。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述i型膠原蛋白為牛跟腱中提取的高純度膠原蛋白，其中i型膠原蛋白占總蛋白含量不小于99％，羥脯氨酸的含量不小于10％。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述在膠原乙酸溶脹液中加入硫酸軟骨素乙酸溶液，得到膠原-硫酸軟骨素漿液，在配置的過(guò)程中溶液均勻攪拌并抽真空包括：將200-500毫升硫酸軟骨素乙酸水溶液緩慢加入到膠原乙酸溶脹液中，攪拌速度為15000-20000轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為1-2小時(shí)，將溶液抽真空，得到膠原-硫酸軟骨素漿液。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述將膠原硫酸軟骨素溶液進(jìn)行第一次真空冷凍干燥的方法為：將膠原-硫酸軟骨素漿液倒到不銹鋼凍干盤(pán)中，輕搖使其分布均勻，控制其厚度在2-5毫米；在溫度為–50-30℃，壓力≤0.2兆帕條件下進(jìn)行真空冷凍干燥，生成孔隙為30-250微米的膠原膜。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述將膠原膜壓制成致密膠原膜包括：用壓膠原機(jī)的壓力均勻地分散到膠原膜上，所述壓膠原機(jī)的所采用的壓力為5-15兆帕，時(shí)間為1-3分鐘，使膠原膜表面平整，膠原膜的壓制厚度為1-2毫米，孔隙≤100微米，達(dá)到致密膠原層的要求。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述第二次真空冷凍干燥的方法為：將致密膠原層鋪在不銹鋼凍干盤(pán)中，將膠原硫酸軟骨素溶液倒在致密膠原膜上或在膠原致密層上刷一層均勻膠原-硫酸軟骨素漿液，將膠原膜平整地放在膠原致密層上，控制其總厚度在3-6毫米；在溫度為–50-30℃，真空度≤0.2bar的條件下進(jìn)行真空冷凍干燥，上層的膠原硫酸軟骨素溶液生成孔隙為30-250微米的膠原膜，形成上層為膠原膜，下層為致密膠原層的復(fù)合膠原膜。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述真空冷凍干燥包括緩凍干燥和速凍干燥兩種冷卻干燥方式進(jìn)行冷卻干燥。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述緩凍干燥包括以下步驟：預(yù)凍階段，溫度：3-5℃，時(shí)間：120-180分鐘；冷凍階段，溫度：-35--45℃，時(shí)間：310-360分鐘；抽空干燥階段，溫度：-8--10℃，時(shí)間：740-920分鐘，真空度：0.2bar；第一干燥階段，溫度：-10.5--13.5℃，時(shí)間：380-460分鐘，真空度：0.2bar；第二干燥階段，溫度：-5℃，時(shí)間：350-420分鐘，真空度：0.2bar；第三干燥階段，溫度：0℃，時(shí)間：80-90分鐘，真空度：0.2bar；第四干燥階段，溫度：20-30℃，時(shí)間：70-100分鐘，真空度：0.2bar。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述速凍干燥包括以下步驟：冷凍階段，溫度：-38℃，時(shí)間：40分鐘；抽空干燥階段，溫度：-18℃，時(shí)間：720分鐘，真空度：0.2bar；第一干燥階段，溫度：-8℃，時(shí)間：420分鐘，真空度：0.2bar；第二干燥階段，溫度：0℃，時(shí)間：180分鐘，真空度：0.2bar；第三干燥階段，溫度：10℃，時(shí)間：180分鐘，真空度：0.2bar；第四干燥階段，溫度：24℃，時(shí)間：95分鐘，真空度：0.2bar。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述復(fù)合膠原膜進(jìn)行交聯(lián)包括：首先進(jìn)行高溫真空交聯(lián)，對(duì)膠原膜先進(jìn)行高溫真空的物理交聯(lián)，交聯(lián)條件為：溫度為90-110℃，時(shí)間為24-36小時(shí)；然后使用低濃度的戊二醛作為交聯(lián)劑，對(duì)膠原膜進(jìn)行化學(xué)交聯(lián)，交聯(lián)條件為：戊二醛的濃度為0.001％-0.01％，溫度為0-15℃，時(shí)間為10-36小時(shí)。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述將交聯(lián)后的復(fù)合膠原膜進(jìn)行滅菌為使用環(huán)氧乙烷、co60輻照、紫外輻照中的至少一種方法進(jìn)行滅菌。在基于上述復(fù)層可吸收生物膜的制備方法的另一個(gè)實(shí)施例中，所述使用環(huán)氧乙烷滅菌包括：環(huán)氧乙烷占環(huán)氧乙烷和二氧化碳混合氣體的比例為40％-60％，溫度為50-60℃,濕度為20％-50％rh，時(shí)間為2-5小時(shí),換氣次數(shù)為4-7次。由上面所述可以得出，本發(fā)明的有益效果為：(1)以高純度i型膠原蛋白為原料，制備了由疏松層和致密層組成的復(fù)層可吸收生物膜，具有良好的生物相容性、無(wú)毒、無(wú)抗原反應(yīng)。(2)采用兩次特殊冷凍干燥的方式制備的復(fù)層可吸收生物膜，具有良好的力學(xué)性能?？筛鶕?jù)手術(shù)要求進(jìn)行縫合，在某些情況下可免縫合，節(jié)省手術(shù)時(shí)間防止縫線(xiàn)帶來(lái)癲癇的危險(xiǎn)。(3)應(yīng)用于硬腦膜缺損的修復(fù)手術(shù)，其三維多孔結(jié)構(gòu)有利于成纖維細(xì)胞、毛管細(xì)胞長(zhǎng)入，復(fù)層可吸收生物膜的再生和支架的降解同步進(jìn)行，可有效防止腦脊液滲漏，防粘連，減少瘢痕的產(chǎn)生。具體實(shí)施方式為使本發(fā)明實(shí)施例的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚，下面將對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。本發(fā)明提供的復(fù)層可吸收生物膜的制備方法包括以下步驟：步驟1：配置硫酸軟骨素乙酸溶液和膠原乙酸溶脹液；步驟2：在膠原乙酸溶脹液中加入硫酸軟骨素乙酸溶液，得到膠原-硫酸軟骨素漿液，在配置的過(guò)程中溶液均勻攪拌并抽真空；步驟3：將膠原硫酸軟骨素溶液進(jìn)行第一次真空冷凍干燥，得到具有三維結(jié)構(gòu)的膠原膜；步驟4：將膠原膜壓制成致密膠原膜；步驟5：將膠原硫酸軟骨素溶液倒在鋪有致密膠原膜的凍干盤(pán)中或在膠原致密層上刷一層均勻膠原-硫酸軟骨素漿液，將膠原膜平整地放在膠原致密層上，進(jìn)行第二次真空冷凍干燥，得到具有疏松層和致密層的復(fù)合膠原膜；步驟6：復(fù)合膠原膜進(jìn)行交聯(lián)；步驟7：將交聯(lián)后的復(fù)合膠原膜進(jìn)行滅菌，得到復(fù)層可吸收生物膜。步驟1中所述硫酸軟骨素乙酸溶液由如下方法配置：將2-4克硫酸軟骨素加入到500毫升濃度為0.4-0.6％乙酸溶液中，在0-10℃溫度條件下，溶解，過(guò)濾得到。步驟1中所述膠原乙酸溶脹液由如下方法配置：將3-5克i型膠原蛋白加入到500毫升濃度為0.3-0.6％乙酸溶液中，混合攪拌，攪拌速度為15000-20000轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為1-2小時(shí)。所述i型膠原蛋白為牛跟腱中提取的高純度膠原蛋白，其中i型膠原蛋白占總蛋白含量不小于99％，羥脯氨酸的含量不小于10％。步驟2中所述在膠原乙酸溶脹液中加入硫酸軟骨素乙酸溶液，得到膠原-硫酸軟骨素漿液，在配置的過(guò)程中溶液均勻攪拌并抽真空包括：將200-500毫升硫酸軟骨素乙酸水溶液緩慢加入到膠原乙酸溶脹液中，攪拌速度為15000-20000轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為1-2小時(shí)，將溶液抽真空，得到膠原-硫酸軟骨素漿液。步驟3中所述將膠原硫酸軟骨素溶液進(jìn)行第一次真空冷凍干燥的方法為：將膠原-硫酸軟骨素漿液倒到不銹鋼凍干盤(pán)中，輕搖使其分布均勻，控制其厚度在2-5毫米；在溫度為–50-30℃，壓力≤0.2兆帕條件下進(jìn)行真空冷凍干燥，生成孔隙為30-250微米的膠原膜。步驟4中所述將膠原膜壓制成致密膠原膜包括：用壓膠原機(jī)的壓力均勻地分散到膠原膜上，所述壓膠原機(jī)的所采用的壓力為5-15兆帕，時(shí)間為1-3分鐘，使膠原膜表面平整，膠原膜的壓制厚度為1-2毫米，孔隙≤100微米，達(dá)到致密膠原層的要求。步驟5中所述第二次真空冷凍干燥的方法為：將致密膠原層鋪在不銹鋼凍干盤(pán)中，將膠原硫酸軟骨素溶液倒在致密膠原膜上或在膠原致密層上刷一層均勻膠原-硫酸軟骨素漿液，將膠原膜平整地放在膠原致密層上，控制其總厚度在3-6毫米；在溫度為–50-30℃，真空度≤0.2bar的條件下進(jìn)行真空冷凍干燥，上層的膠原硫酸軟骨素溶液生成孔隙為30-250微米的膠原膜，形成上層為膠原膜，下層為致密膠原層的復(fù)合膠原膜。步驟3和步驟5中所述真空冷凍干燥包括緩凍干燥和速凍干燥兩種冷卻干燥方式進(jìn)行冷卻干燥。所述緩凍干燥包括以下步驟：預(yù)凍階段，溫度：3-5℃，時(shí)間：120-180分鐘；冷凍階段，溫度：-35--45℃，時(shí)間：310-360分鐘；抽空干燥階段，溫度：-8--10℃，時(shí)間：740-920分鐘，真空度：0.2bar；第一干燥階段，溫度：-10.5--13.5℃，時(shí)間：380-460分鐘，真空度：0.2bar；第二干燥階段，溫度：-5℃，時(shí)間：350-420分鐘，真空度：0.2bar；第三干燥階段，溫度：0℃，時(shí)間：80-90分鐘，真空度：0.2bar；第四干燥階段，溫度：20-30℃，時(shí)間：70-100分鐘，真空度：0.2bar。所述速凍干燥包括以下步驟：冷凍階段，溫度：-38℃，時(shí)間：40分鐘；抽空干燥階段，溫度：-18℃，時(shí)間：720分鐘，真空度：0.2bar；第一干燥階段，溫度：-8℃，時(shí)間：420分鐘，真空度：0.2bar；第二干燥階段，溫度：0℃，時(shí)間：180分鐘，真空度：0.2bar；第三干燥階段，溫度：10℃，時(shí)間：180分鐘，真空度：0.2bar；第四干燥階段，溫度：24℃，時(shí)間：95分鐘，真空度：0.2bar。步驟6中所述復(fù)合膠原膜進(jìn)行交聯(lián)包括：首先進(jìn)行高溫真空交聯(lián)，對(duì)膠原膜先進(jìn)行高溫真空的物理交聯(lián)，交聯(lián)條件為：溫度為90-110℃，時(shí)間為24-36小時(shí)；然后使用低濃度的戊二醛作為交聯(lián)劑，對(duì)膠原膜進(jìn)行化學(xué)交聯(lián)，交聯(lián)條件為：戊二醛的濃度為0.001％-0.01％，溫度為0-15℃，時(shí)間為10-36小時(shí)。步驟7中，所述將交聯(lián)后的復(fù)合膠原膜進(jìn)行滅菌為使用環(huán)氧乙烷、co60輻照、紫外輻照中的至少一種方法進(jìn)行滅菌。所述使用環(huán)氧乙烷滅菌包括：環(huán)氧乙烷占環(huán)氧乙烷和二氧化碳混合氣體的比例為40％-60％，溫度為50-60℃,濕度為20％-50％rh，時(shí)間為2-5小時(shí),換氣次數(shù)為4-7次。實(shí)施例1i型膠原溶脹液的制備將從牛跟腱中提取的高純度i型膠原蛋白解凍，取3克膠原蛋白溶解于500毫升濃度為0.5％乙酸溶液中，攪拌1-2小時(shí)，得到膠原乙酸溶脹液。膠原-硫酸軟骨素漿液的制備將400毫升濃度為0.4％的硫酸軟骨素乙酸水溶液緩慢加入到上述膠原乙酸溶脹液中，攪拌速度為15000-20000轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為1-2小時(shí)，抽真空去泡，得到膠原-硫酸軟骨素漿液。致密膠原膜的制備將150毫升上述膠原-硫酸軟骨素漿液倒入到不銹鋼凍干盤(pán)中，倒入后的厚度為4±2毫米，通過(guò)特殊的梯度冷卻干燥的方法進(jìn)行冷凍干燥，得到膠原膜。通過(guò)壓膠原機(jī)將膠原膜壓制成厚度為1-2毫米的致密膠原層。復(fù)層可吸收生物膜的制備將致密膠原膜平鋪在不銹鋼凍干盤(pán)中，將100毫升的膠原–硫酸軟骨素漿液均勻地倒在致密膠原膜上，控制其總厚度在3-6毫米，通過(guò)緩凍干燥的方法進(jìn)行冷凍干燥，得到具有疏松層和致密層的復(fù)層可吸收生物膜，具體的冷凍干燥程序如表1所示：表1：步驟號(hào)階段設(shè)定溫度(℃)時(shí)間(分)真空度(bar)1預(yù)凍3-5120-180—2冷凍–35-–45310-360—3抽空干燥–8-–10740-9200.24干燥–10.5-–13.5380-4600.25干燥5350-4200.26干燥080-900.27干燥24-3070-1000.2通過(guò)此過(guò)程得到的孔隙范圍為微米。復(fù)層可吸收生物膜的交聯(lián)首先進(jìn)行高溫真空交聯(lián)，將復(fù)層可吸收生物膜放置于真空干燥箱中進(jìn)行高溫真空交聯(lián)，條件為：溫度為100℃，時(shí)間為12小時(shí)。其次，低濃度的戊二醛作為交聯(lián)劑，其中，戊二醛的濃度為0.001％，溫度為5℃，時(shí)間為24小時(shí)。復(fù)層可吸收生物膜的滅菌將復(fù)合膠原膜切割成不同規(guī)格，雙層包裝，利用環(huán)氧乙烷滅菌。實(shí)施例2i型膠原溶脹液的制備將從牛跟腱中提取的高純度i型膠原蛋白解凍，取4克膠原蛋白溶解于600毫升濃度為0.5％乙酸溶液中，攪拌1-2小時(shí)，得到膠原乙酸溶脹液。膠原-硫酸軟骨素漿液的制備將500毫升濃度為0.4％的硫酸軟骨素乙酸水溶液緩慢加入到上述膠原乙酸溶脹液中，攪拌速度為15000-20000轉(zhuǎn)/分，攪拌時(shí)間為1-2小時(shí)，抽真空去泡，得到膠原-硫酸軟骨素漿液。致密膠原膜的制備將150毫升的膠原-硫酸軟骨素漿液倒入到不銹鋼凍干盤(pán)中，倒入后的厚度為4±2毫米，通過(guò)梯度冷卻干燥的方法進(jìn)行冷凍干燥，得到膠原膜。通過(guò)壓膠原機(jī)將膠原膜i型壓制成厚度為1-2毫米的致密膠原層。復(fù)層可吸收生物膜的制備將致密膠原膜平鋪在不銹鋼凍干盤(pán)中，在膠原致密膜上刷一層均勻膠原-硫酸軟骨素漿液，將膠原膜平整地放在膠原致密層上，控制其總厚度在3-6毫米，通過(guò)速凍干燥的方法進(jìn)行冷凍干燥，得到具有疏松層和致密層的復(fù)層可吸收生物膜，具體的冷凍干燥程序如表2所示：表2：步驟號(hào)階段設(shè)定溫度(℃)保持時(shí)間(分)真空度(bar)1冷凍–3840—2抽空干燥–187200.24干燥–84200.25干燥01800.26干燥101800.27干燥24950.2通過(guò)此過(guò)程得到的孔隙范圍為30-150微米。復(fù)層可吸收生物膜的交聯(lián)首先進(jìn)行高溫真空交聯(lián)，將復(fù)層可吸收生物膜放置于真空干燥箱中進(jìn)行高溫真空交聯(lián)，條件為：溫度為95℃，時(shí)間為24小時(shí)。其次，低濃度的戊二醛作為交聯(lián)劑，其中，戊二醛的濃度為0.005％，溫度為10℃，時(shí)間為12小時(shí)。復(fù)層可吸收生物膜的滅菌將復(fù)層可吸收生物膜切割成不同規(guī)格，雙層包裝，利用環(huán)氧乙烷滅菌。以上對(duì)本發(fā)明所提供的一種復(fù)層可吸收生物膜的制備方法進(jìn)行了詳細(xì)介紹，本文中應(yīng)用了具體個(gè)例對(duì)本發(fā)明的原理及實(shí)施方式進(jìn)行了闡述，以上實(shí)施例的說(shuō)明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其核心思想；同時(shí)，對(duì)于本領(lǐng)域的一般技術(shù)人員，依據(jù)本發(fā)明的思想，在具體實(shí)施方式及應(yīng)用范圍上均會(huì)有改變之處，綜上所述，本說(shuō)明書(shū)內(nèi)容不應(yīng)理解為對(duì)本發(fā)明的限制。最后應(yīng)說(shuō)明的是：以上所述僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，盡管參照前述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的說(shuō)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，其依然可以對(duì)前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對(duì)其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換,凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)12