本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及γ-氨基丁酸在制備肝臟保護藥物制劑中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

海洋可食性魚類營養(yǎng)豐富，味道鮮美，而且還有很多保健功能，具有重要食用價值和經(jīng)濟價值。隨著現(xiàn)代分離技術(shù)和生物技術(shù)的發(fā)展使人們對魚類資源的利用不再局限于海水養(yǎng)殖業(yè)，其研究內(nèi)容涉及生態(tài)、養(yǎng)殖、醫(yī)藥、毒理、遺傳和分子生物學(xué)等諸多領(lǐng)域。對低值魚類資源進行高值化開發(fā)利用，為人類提供理想的海洋食品及海洋藥物，并創(chuàng)造出宏觀的經(jīng)濟效益，將有助于推動我國海洋產(chǎn)業(yè)的迅速發(fā)展。

肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著吸收營養(yǎng)、代謝、清除毒素、去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用。當(dāng)今社會中，熬夜、酗酒、服藥、感染和空氣污染等一些列不良的生活習(xí)慣或疾病侵襲，會促進肝細(xì)胞凋亡，使肝臟功能受損。對于老年人來說，人衰老不只表現(xiàn)在外部體態(tài)容貌上，身體各內(nèi)臟器官都會發(fā)生變化，其中肝臟改變亦很明顯。首先肝血流量要減少。男過25歲，肝臟循環(huán)血流量平均每年下降0.3％～1.5％。女過20歲以后，60歲時的肝內(nèi)血流量約比20歲時減少40％～50％。其實，研究表明，人在60歲后，肝細(xì)胞數(shù)量隨年齡增長而銳減。肝臟趨向硬變，重量明顯下降，90歲老年人肝臟的平均重量只有30歲左右青年人肝重的51.8％。

血液是護肝養(yǎng)肝的基礎(chǔ)，血流量的減少使肝內(nèi)血液循環(huán)功能下降，肝臟吸收營養(yǎng)、代謝和清除毒素的能力也相應(yīng)減退。由此可見，保肝護肝的關(guān)鍵是加強肝細(xì)胞的抗氧化性能，抑制其細(xì)胞凋亡，促進肝臟的血液循環(huán)。

γ-氨基丁酸(γ-Aminobutiric acid,GABA)是哺乳動物、甲殼類動物、昆蟲和某些寄生蠕蟲神經(jīng)系統(tǒng)中重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)。少數(shù)植物中含有這種非蛋白質(zhì)氨基酸。GABA參與多種代謝活動，具有抗氧化、降血壓、改善睡眠、抗焦慮、改善脂質(zhì)代謝、降低體重、防止動脈硬化等功效，因此受到越來越多的科學(xué)工作者的關(guān)注。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供γ-氨基丁酸在制備肝臟保護藥物制劑中的應(yīng)用。

本發(fā)明實現(xiàn)目的的方案如下：

γ-氨基丁酸(GABA)在制備肝臟保護藥物制劑中的應(yīng)用。

優(yōu)選的；γ-氨基丁酸(GABA)在制備保護氟離子誘導(dǎo)所致肝臟損傷藥物中的應(yīng)用。

優(yōu)選的；所述GABA的制備方法：以低值魚類或其加工廢料為原料，經(jīng)具有谷氨酸脫羧酶活性的微生物進行發(fā)酵，所得發(fā)酵物分離提純即得。

具體是：

1)將原料低值魚類或其加工廢料磨成勻漿，向勻漿中添加勻漿質(zhì)量5-10倍體積(w/v)蒸餾水，配制成勻漿液，再向勻漿液中加入勻漿液體積的0-5wt％葡萄糖(v/w)，調(diào)節(jié)溶液pH值4.5-6.0，獲得微生物培養(yǎng)液。培養(yǎng)液滅菌后冷卻，而后接種具有谷氨酸脫羧酶活性的微生物，置于30℃-40℃條件下培養(yǎng)24-72小時，即得到富含具有谷氨酸脫羧酶活性微生物的菌懸液(溶液A)；

2)調(diào)節(jié)溶液A的pH值為5.5-6.5，加入溶液A體積的0.5％-2wt％谷氨酸鈉(v/w)，配成富含谷氨酸鈉的培養(yǎng)液(溶液B)，溶液B置于35℃-40℃條件下培養(yǎng)72-120小時，即得到富含GABA的發(fā)酵液；

3)富含GABA的發(fā)酵液去菌體、去油脂：將步驟2)獲得發(fā)酵液以2000-5000r/min的速度，離心5-20分鐘，取上層液體置于高壓滅菌鍋中，進一步滅菌，得無菌體發(fā)酵液，無菌體發(fā)酵液經(jīng)索氏提取法去油脂后，得到無菌體、無油脂的發(fā)酵液；

4)無菌體、無油脂發(fā)酵液脫色：采用活性炭或SD300樹脂脫色得無色透明發(fā)酵液，待用；

5)無色透明發(fā)酵液中GABA的分離純化：將步驟4)獲得無色透明發(fā)酵液上預(yù)處理過的732樹脂(氫型)交換柱，以2-5mL/min的流速充分進行交換吸附，吸附后經(jīng)去離子水洗滌至pH6.0，用100-200ml 0.1-0.2mol/L堿性溶液洗，再用1-2mol/L堿性溶液以2-5mL/min的流速進行洗脫；洗脫過程中用茚三酮丙酮溶液進行顯色，收集茚三酮反應(yīng)呈藍色，pH6.0左右的流出液，以高效液相色譜法檢測每管流出液中GABA含量，將GABA含量較高的流出液合并，減壓濃縮，即為分離純化后的GABA。

優(yōu)選的；所述步驟4)采用活性炭對無菌體、無油脂發(fā)酵液脫色處理是向無菌體、無油脂發(fā)酵液中添加0.5％-5％(w/v)的活性炭，于60-90℃水浴10-30分鐘，趁熱真空抽濾，得無色透明發(fā)酵液；

SD300樹脂脫色對無菌體、無油脂發(fā)酵液脫色處理是向無菌體、無油脂發(fā)酵液中添加5％-10％SD300樹脂，20-30℃，搖床100rpm脫色3小時，抽濾得無色透明發(fā)酵液。

優(yōu)選的；步驟5)所述減壓濃縮到1/20-1/10體積后，得到分離純化后的GABA濃縮液，利用高效液相色譜法檢測濃縮液中GABA的純度。

優(yōu)選的；步驟5)所述堿性溶液為氫氧化鈉溶液或氨水。

肝臟受損模型，喂食以氟化鈉造模的肝臟損傷模型小鼠濃度為0.1-2.0g/L分離純化的GABA 5-20天，通過肝細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、肝臟組織丙二醛、谷胱甘肽還原酶水平的變化以及肝臟脫碘酶DⅠmRNA表達量的變化情況，表明GABA具有明顯的保護肝臟作用。

檢測分離純化的GABA保護肝臟能力：

1)以氟化鈉建立肝臟受損小鼠模型；

2)喂食模型小鼠濃度為0.1-2.0g/L分離純化的GABA 5-20天；

3)通過肝細(xì)胞細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、肝臟組織丙二醛、谷胱甘肽還原酶水平的變化以及肝臟脫碘酶DⅠmRNA表達量的變化情況，表明GABA具有明顯的肝臟保護作用。

本發(fā)明的優(yōu)點：

1)衛(wèi)生部2009年第十二號令食品級GABA生產(chǎn)工藝：以L-谷氨酸鈉為底物經(jīng)安全菌株發(fā)酵、加熱殺菌、冷卻、活性炭處理、過濾、噴霧干燥等步驟生產(chǎn)而成。目前生產(chǎn)線普遍以20％純度批量生產(chǎn)食品級GABA，本發(fā)明分離純化所得GABA為安全菌株生物轉(zhuǎn)化L-谷氨酸鈉制得，純度為60％以上，其純度遠(yuǎn)高于目前市面所售食品級GABA純度。

2)本發(fā)明提供了GABA的新用途，GABA對肝臟的保護作用從多個方面得以實現(xiàn)：(1)GABA對肝臟細(xì)胞具有顯著的營養(yǎng)、保護作用；(2)GABA的抗氧化性能對肝細(xì)胞的非正常凋亡起到抑制作用；(3)肝臟是甲狀腺激素代謝的主要場所，GABA能顯著改善肝臟內(nèi)脫碘酶DⅠmRNA的表達量，使其趨近于正常水平，對維持肝臟正常功能起到了關(guān)鍵作用。

3)本發(fā)明獲得的GABA是從低值魚類或其加工廢棄物發(fā)酵液中分離純化所得GABA，具有無毒性，易吸收的顯著特點。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實施例提供的肝細(xì)胞在顯微鏡40倍物鏡下的顯微結(jié)構(gòu)圖，其中(a)正常組肝臟顯微結(jié)構(gòu)；(b)陰性對照組肝臟顯微結(jié)構(gòu)；(c)陽性對照組肝臟顯微結(jié)構(gòu)；(d)分離純化GABA組肝臟顯微結(jié)構(gòu)；

圖2為高效液相色譜法檢測分離純化GABA的純度。

具體實施方式

以下實施例是對本發(fā)明的進一步說明，而不是對本發(fā)明的限制。

實施例1

1.新鮮紅娘魚用粉碎機磨成勻漿后，添加紅娘魚勻漿質(zhì)量10體積的(w/v)蒸餾水，配制成勻漿液，再向勻漿液中加入勻漿液體積的1wt％葡萄糖(v/w)，調(diào)節(jié)溶液pH值為5.5，配制成微生物培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基經(jīng)121℃，滅菌15分鐘。冷卻后按1％接種量(v/v)接種乳酸鏈球菌，置于30℃條件下發(fā)酵培養(yǎng)1天，得到富含乳酸鏈球菌的菌懸液。

2.將富含乳酸鏈球菌的菌懸液pH值調(diào)制6.0，并向菌懸液中添加菌懸液體積的1wt％谷氨酸鈉(v/w)，置于37℃恒溫箱，靜置培養(yǎng)72小時，得到GABA含量為4.8g/L的紅娘魚發(fā)酵液。

所述乳酸鏈球菌購買于中國普通微生物菌種保藏管理中心，北京，編號為bio-52538。

3.對富含GABA的紅娘魚發(fā)酵液中的GABA進行分離提純。

1)富含GABA的紅娘魚發(fā)酵液去菌體、去油脂：將步驟2獲得發(fā)酵液以4000r/min的速度離心10分鐘，取上層液體高壓滅菌，得無菌體發(fā)酵液。無菌發(fā)酵液經(jīng)索氏提取法去除油脂后，得到無菌體、無油脂發(fā)酵液。

2)無菌體、無油脂發(fā)酵液脫色：以SD300樹脂進行脫色處理，具體是向上述獲得無菌體、無油脂發(fā)酵液中添加5％SD300樹脂(w/v)，25℃，搖床100rpm，脫色3小時，抽濾得無色透明發(fā)酵液。

3)無色透明發(fā)酵液中GABA的分離純化：將上述無色透明液上預(yù)處理過的732樹脂(氫型)交換柱，以3mL/min的流速，讓其充分進行交換吸附。吸附完畢后用去離子水洗滌至pH6.0。先用150ml 0.1mol/L氫氧化鈉洗，再用1mol/L氫氧化鈉以3mL/min的流速進行洗脫。在洗脫過程中不斷用茚三酮丙酮溶液進行顯色測試，并用pH試紙檢測pH的變化。當(dāng)茚三酮反應(yīng)呈藍色，pH6.0左右時，保留流出液，直至茚三酮藍色反應(yīng)消失為止，以高效液相色譜法檢測收集管中GABA含量，合并GABA含量較高的收集管中的流出液(GABA水溶液pH值約為6，且與茚三酮反應(yīng)呈藍色，由此可判斷流出液pH值為6，且與茚三酮反應(yīng)呈藍色，其內(nèi)所含的氨基酸為GABA)，經(jīng)減壓濃縮至1/20體積，得分離提純GABA濃縮液。

實施例2

1.紅娘魚內(nèi)臟(加工廢棄物)，添加其5倍體積(w/v)蒸餾水，配成溶液，向溶液中添加溶液體積的2.0wt％葡萄糖(v/w)，調(diào)節(jié)pH值為5.0，配制成微生物培養(yǎng)液。該培養(yǎng)液經(jīng)121℃，滅菌20分鐘。冷卻后按1％接種量(v/v)接種鳥腸球菌，置于37℃條件下發(fā)酵培養(yǎng)36小時，得到富含鳥腸球菌的菌懸液。

2.向富含鳥腸球菌的菌懸液中添加菌懸液體積的2wt％谷氨酸鈉(v/w)，調(diào)節(jié)pH值為5.5，配成富含谷氨酸鈉培養(yǎng)液。該培養(yǎng)液置于37℃恒溫箱中靜置培養(yǎng)96小時，獲得GABA含量為5.7g/L的紅娘魚內(nèi)臟發(fā)酵液。

所述鳥腸球菌購買于中國普通微生物菌種保藏管理中心，北京，編號為CGMCC9184。

3.對富含GABA的紅娘魚內(nèi)臟發(fā)酵液中的GABA進行分離提純。

1)富含GABA的紅娘魚內(nèi)臟發(fā)酵液去菌體、去油脂：3000r/min，離心15分鐘，取上層液體高溫高壓滅菌，得無菌體發(fā)酵液。無菌體發(fā)酵液經(jīng)索氏提取法去除油脂，得無菌體、無油脂發(fā)酵液。

2)無菌體、無油脂發(fā)酵液脫色：SD300樹脂進行脫色處理，具體向上述獲得的無菌體、無油脂發(fā)酵液中添加10％SD300樹脂(w/v)，25℃，搖床100rpm，脫色4小時，抽濾得無色透明發(fā)酵液。

3)無色透明發(fā)酵液中GABA的分離純化：將上述無色透明液上預(yù)處理過的732樹脂(氫型)交換柱，流速取3mL/min，讓其充分進行交換吸附。吸附完畢后用去離子水洗滌至pH6.0。先用150ml 0.1mol/L氨水洗，再用1mol/L氨水以3mL/min的流速進行洗脫。在洗脫過程中不斷用茚三酮丙酮溶液進行顯色測試，并用pH試紙檢測pH的變化。當(dāng)茚三酮反應(yīng)呈藍色，pH6.0左右時，保留流出液，以高效液相色譜法檢測收集管中GABA含量，合并GABA含量較高的收集管中的流出液(GABA水溶液pH值約為6，且與茚三酮反應(yīng)呈藍色，由此可判斷流出液pH值為6，且與茚三酮反應(yīng)呈藍色，其內(nèi)含有GABA)，經(jīng)減壓濃縮至1/10體積，得分離提純GABA濃縮液。

實施例3

1.鳀魚水煮濃縮廢棄液，添加該廢棄液5倍體積的(v/v)蒸餾水,配制成稀釋液，再向稀釋液中加入稀釋液體積的1wt％葡萄糖(v/w)，調(diào)節(jié)pH值為6.0，配制成微生物培養(yǎng)液。該培養(yǎng)液經(jīng)121℃，滅菌20分鐘。冷卻后按1％接種量(v/v)接種短乳桿菌，置于37℃條件下發(fā)酵培養(yǎng)24小時，得到富含短乳桿菌的菌懸液。

2.向富含短乳桿菌的菌懸液中添加菌懸液體積的1.5wt％谷氨酸鈉(v/w)，調(diào)節(jié)pH值為6.5，配成富含谷氨酸鈉培養(yǎng)液。該培養(yǎng)液置于37℃恒溫箱中靜置培養(yǎng)100小時，獲得GABA含量為5.81g/L的鳀魚水煮廢棄液發(fā)酵液。

所述短乳桿菌購買于中國普通微生物菌種保藏管理中心，北京，編號為CGMCC1.2028。

3.對富含GABA的鳀魚水煮廢棄液發(fā)酵液中的GABA進行分離提純。

1)富含GABA的鳀魚水煮廢棄液發(fā)酵液去菌體、去油脂：5000r/min，離心10分鐘，取上層液體高溫高壓進一步滅菌，得無菌體發(fā)酵液。無菌體發(fā)酵液經(jīng)索氏提取法去除油脂，得無菌體、無油脂發(fā)酵液。

2)無菌體、無油脂發(fā)酵液活性炭脫色：無菌體、無油脂發(fā)酵液中添加1.5％活性炭(w/v)，80℃，脫色30分鐘，抽濾得無色透明發(fā)酵液。

3)無色透明發(fā)酵液中GABA的分離純化：將上述無色透明發(fā)酵液上預(yù)處理過的732樹脂(氫型)交換柱，流速取3mL/min，讓其充分進行交換吸附。吸附完畢后用去離子水洗滌至pH6.0。先用150ml 0.1mol/L氨水洗，再用1mol/L氨水以3mL/min的流速進行洗脫。在洗脫過程中不斷用茚三酮丙酮溶液進行顯色測試，并用pH試紙檢測pH的變化。當(dāng)茚三酮反應(yīng)呈藍色，pH6.0左右時，保留流出液，以高效液相色譜法檢測收集管中GABA含量，合并GABA含量較高的收集管中的流出液(GABA水溶液pH值約為6，且與茚三酮反應(yīng)呈藍色，由此可判斷流出液pH值為6，且與茚三酮反應(yīng)呈藍色，其內(nèi)含有GABA)。經(jīng)減壓濃縮至1/10體積，得分離提純GABA濃縮液。

將上述實施例1、2和3分離提純的GABA濃縮液合并，采用高效液相色譜法檢測GABA的純度，結(jié)果如圖2所示，其中GABA的含量為63％，其他可檢測出的氨基酸的含量為：Ala丙氨酸2％、Gly甘氨酸8％、Arg精氨酸5％。丙氨酸、甘氨酸、精氨酸均為人體內(nèi)常見氨基酸，其含量較低，均在安全攝入范圍之內(nèi)，不會對人體或受試動物產(chǎn)生不良生理影響。

實施例4

利用上述合并的分離提純的GABA濃縮液作為制備肝臟保護藥物制劑中的應(yīng)用，其保護肝臟作用的試驗及其效果如下：

分離提純GABA的抗甲減試驗：

實驗動物：120只昆明種雄性小鼠18-22g/只。

動物模型：100只小鼠喂食0.1g/L NaF 30天，創(chuàng)建肝臟受損模型小鼠。

藥物配制：將上述實施例1、2和3分離提純的GABA濃縮液合并，然后向合并液中添加純凈水配制成GABA含量為0.1g/L，0.5g/L，1.0g/L的溶液。

實驗分組：20只正常組(健康小鼠每日喂食純凈水)；20只陰性對照組(肝臟受損小鼠每日喂食純凈水)；20只陽性對照組(甲減小鼠每日喂食澳洲swisse護肝片，服用劑量參照服用說明書)；20只低劑量分離提純GABA組(肝臟受損小鼠每日喂食GABA含量為0.1g/L溶液)；20只中劑量分離提純GABA組(肝臟受損小鼠每日喂食GABA含量為0.5/L溶液)；20只高劑量分離提純GABA組(肝臟受損小鼠每日喂食GABA含量為1.0g/L溶液)。

實驗方法：肝臟受損小鼠喂食純凈水，澳洲swisse護肝片，不同濃度分離提純GABA溶液14天后取肝臟組織檢測肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)，肝臟組織丙二醛、谷胱甘肽還原酶水平的變化以及肝臟脫碘酶DⅠmRNA表達量的變化情況。丙二醛檢測試劑盒(南京建成生物工程有限公司，檢測方法參考說明書)檢測肝臟組織丙二醛含量變化；谷胱甘肽還原酶檢測試劑盒(南京建成生物工程有限公司，檢測方法參考說明書)檢測肝臟組織谷胱甘肽還原酶含量變化；肝臟脫碘酶DⅠmRNA表達量檢測采用實時熒光定量PCR法(由上海生物工程股份有限公司代為檢測)；肝臟細(xì)胞結(jié)構(gòu)觀察采用常規(guī)切片HE染色，顯微鏡下鏡檢。

檢測指標(biāo)：肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化情況，肝臟組織丙二醛、谷胱甘肽還原酶水平的變化以及肝臟脫碘酶DⅠmRNA表達量的變化情況。

(1)肝細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)變化結(jié)果如圖1所示：正常組肝細(xì)胞排列緊密，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央，細(xì)胞膜界限清晰；陰性對照組肝細(xì)胞密度變小，排列松散，細(xì)胞膜界限不清晰；陽性對照組和喂食1g/L分離提純GABA組的肝臟損傷現(xiàn)象有明顯改善，肝細(xì)胞密度高于陰性對照組，且細(xì)胞膜界限清晰，細(xì)胞核位于細(xì)胞中央。因此高濃度GABA(1g/L)對NaF誘導(dǎo)的肝臟損傷具有明顯的改善作用，使肝細(xì)胞組織結(jié)構(gòu)趨于正?；?，且與陽性對照組之間無明顯差異。

(2)肝臟脫碘酶DⅠmRNA表達量的變化結(jié)果顯示：喂食1g/L分離提純GABA組小鼠Dio1表達量得到顯著恢復(fù)，接近于正常組數(shù)值，顯著高于陰性對照組，且與陽性對照組無顯著性差異，結(jié)果如表1所示；喂食0.1g/L和0.5g/L分離提純GABA組小鼠Dio1表達量與陰性對照組無顯著性差異，證明低值魚或其加工廢棄物發(fā)酵液中分離提純的GABA在高濃度(1g/L)下對脫碘酶DⅠ的合成有明顯的促進作用，能保障肝臟甲狀腺激素代謝作用的正常發(fā)揮。

表1肝臟脫碘酶DⅠ基因Dio1相對定量結(jié)果

*1.正常組小鼠每日喂食純凈水；2.陰性對照組為肝臟受損模型小鼠每日喂食純凈水；3.陽性對照組為肝臟受損模型小鼠每日喂食澳洲swisse護肝片(服用劑量參照說明書)；4.分離提純GABA組為甲減模型小鼠每日喂食1g/L分離提純所得GABA。

(3)丙二醛是膜脂過氧化最重要的產(chǎn)物之一，它的產(chǎn)生還能加劇膜的損傷因此在組織臟器衰老生理和抗性生理研究中丙二醛含量是一個常用指標(biāo)，可通過丙二醛了解膜脂過氧化的程度，以間接測定膜系統(tǒng)受損程度以及組織臟器的抗逆性。服用1g/L分離提純的GABA后，肝臟組織中的丙二醛含量要明顯低于陰性對照組，且與正常組和陽性對照組之間無顯著性差異，結(jié)果如表2所示；服用0.1g/L和0.5g/L分離提純GABA組小鼠肝臟組織中的丙二醛含量與陰性對照組之間無顯著性差異，證明分離提純的GABA在高濃度(1g/L)下對被氟離子損害的肝臟組織具有保護作用，可降低肝細(xì)胞膜系統(tǒng)受損程度，提升肝組織的抗逆性。

表2 GABA對肝臟組織勻漿中丙二醛含量的影響

*正常組小鼠每日喂食純凈水；陰性對照組為肝臟受損模型小鼠每日喂食純凈水；陽性對照組為肝臟受損模型小鼠每日喂食澳洲swisse護肝片(服用劑量參照說明書)；分離提純GABA組為甲減模型小鼠每日喂食1g/L分離提純所得GABA。

(4)谷胱甘肽是一種重要的細(xì)胞抗氧化劑。缺失谷胱甘肽還原酶會使細(xì)胞對氧化劑更為敏感。服用1g/L分離純化的GABA后，肝臟組織中的谷胱甘肽還原酶含量要明顯高于陰性對照組，雖然稍低于正常組和陽性對照組，但統(tǒng)計學(xué)之間無顯著性差異，結(jié)果如表3所示；喂食0.1g/L和0.5g/L分離提純GABA組小鼠肝臟組織中的谷胱甘肽還原酶含量與陰性對照組之間無顯著性差異。證明分離提純的GABA在高濃度(1g/L)下對被氟離子損害的肝臟組織具有保護作用，可降低肝細(xì)胞對氧化劑的敏感性，提升肝組織的抗逆性。

表3 GABA對肝臟組織中谷胱甘肽還原酶含量的影響

*正常組小鼠每日喂食純凈水；陰性對照組為肝臟受損模型小鼠每日喂食純凈水；陽性對照組為肝臟受損模型小鼠每日喂食澳洲swisse護肝片(服用劑量參照說明書)；分離提純GABA組為甲減模型小鼠每日喂食1g/L分離提純所得GABA。

由上述試驗結(jié)果顯示，低值魚或其加工廢棄物生物轉(zhuǎn)化的GABA具有顯著的保護肝臟作用。