本發(fā)明涉及一種苦豆子生物堿雙層栓劑及其制備方法，屬于醫(yī)藥領域。

背景技術：

婦科炎癥為女性生殖器官的炎癥反應，主要包括由各種原因引起的盆腔炎、附件炎、陰道炎、尿道炎等疾病，臨床表現(xiàn)為白帶異常、尿頻尿急、月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)期疼痛等。婦科炎癥往往容易反復發(fā)作，經(jīng)久不愈，甚至導致其他惡性疾病的發(fā)生，嚴重損害婦女的健康。

目前，臨床上主要采用抗菌消炎的藥物對婦科炎癥進行常規(guī)治療，如甲硝唑、克林霉素等廣譜抗生素。這類藥物雖然起效快，對控制急性病情效果較好，但易復發(fā)與產(chǎn)生耐藥性，病情一旦反復，往往表現(xiàn)為合并多種炎癥，免疫力持續(xù)下降，而且還會殃及卵巢，導致上行感染、病菌反復侵害，隨時都有惡變的可能。因此，開發(fā)天然、健康、廣譜、高效、無毒副作用的現(xiàn)代婦科外用藥品是目前婦科疾病研究的主要趨勢。

苦豆子(Sophora alopecuroides L)是我國地道的天然中藥，藥用其干燥全草及種子，民間用其根治療喉痛、咳嗽、痢疾和濕疹等?？喽棺拥幕瘜W成分主要是蛋白質(zhì)、多糖、有機酸、黃酮類和生物堿等，目前，作為藥品開發(fā)，國內(nèi)外研究的重點均在生物堿上；迄今，已經(jīng)從苦豆子中分離出包括苦參堿、氧化苦參堿等20余種生物堿?，F(xiàn)代研究表明，苦豆子生物堿的抗菌、抗炎作用顯著，對大腸桿菌、白色念珠菌、金黃色葡萄球菌、淋病奈瑟菌等多種細菌具有極好的殺滅作用。目前，已有報道將苦豆子生物堿制備成普通陰道栓劑，通過陰道局部給藥發(fā)揮作用，對于婦科炎癥療效顯著(劉靜等.苦豆子生物堿現(xiàn)代藥學研究進展[J].海峽藥學，2014，26(9)：1～4)。然而，上述苦豆子生物堿陰道栓是以水溶性基質(zhì)制備而成的單層栓，由于腔道中的液體量有限，其中的藥物成分釋放速度較慢，不利于發(fā)揮速釋作用。因此，亟需對苦豆子生物堿陰道栓的制劑處方進行改進，以提供一種釋藥行為更為合理的栓劑。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種苦豆子生物堿雙層栓劑及其制備方法。

本發(fā)明提供了一種苦豆子生物堿雙層栓劑的內(nèi)層栓，它是由下述重量配比的原輔料制備而成：苦豆子生物堿40～50份、聚乙二醇220～460份、甘油30～50份。

進一步地，所述的聚乙二醇由下述重量配比的組分組成：聚乙二醇40080～180份、聚乙二醇6000 140～280份。

進一步地，它是由下述重量配比的原輔料制備而成：苦豆子生物堿40.81份、聚乙二醇400 110份、聚乙二醇6000 210份、甘油40份。

進一步地，所述的苦豆子生物堿由苦豆子Sophora alopecuroides L.提取得到。

進一步地，所述的苦豆子生物堿中總堿含量為60.07％，氧化苦參堿的含量為31.65％。

本發(fā)明提供了一種苦豆子生物堿雙層栓劑，它是包含下述重量配比的原輔料制備而成：

內(nèi)層栓：如權利要求1～5任意一項所述的內(nèi)層栓；

外層栓：苦豆子生物堿15～20份、羊毛脂8～12份、混合脂肪酸甘油酯500～600份。

進一步地，它是包含下述重量配比的原輔料制備而成：

內(nèi)層栓：苦豆子生物堿40.81份、聚乙二醇400 110份、聚乙二醇6000210份、甘油40份；

外層栓：苦豆子生物堿17.49份、羊毛脂10份、混合脂肪酸甘油酯582份。

進一步地，它還包含表面活性劑、稀釋劑、吸收促進劑、潤滑劑、防腐劑、硬化劑、增稠劑、著色劑、抗氧劑中一種或兩種以上的輔料。

進一步地，所述的潤滑劑由下述重量配比的組分組成：軟肥皂1份、甘油1份、50～95％v/v乙醇水溶液5份。

本發(fā)明提供了一種所述苦豆子生物堿雙層栓劑的制備方法，包括如下步驟：

a、外層栓的制備：取羊毛脂于研缽中，加入苦豆子生物堿，研磨均勻，加入至熔融的混合脂肪酸甘油酯中，混合均勻，注入雙層栓模中；

b、內(nèi)層栓的制備：將聚乙二醇400、聚乙二醇6000、甘油與苦豆子生物堿混合均勻，加熱至熔融，注入雙層栓模中，凝固，即得。

進一步地，a步驟于60℃水溶加熱混合脂肪酸甘油酯至熔融；b步驟于水浴55℃加熱至熔融。

本發(fā)明提供了所述苦豆子生物堿雙層栓劑在制備治療和/或預防婦科炎癥的藥物中的用途。

本發(fā)明選擇混合脂肪酸甘油脂與藥物混勻制備外層，可使雙層栓更符合安全、穩(wěn)定、易于成型的要求。

本發(fā)明外層栓中添加羊毛脂可使藥物能夠均勻地混合在基質(zhì)中。

本發(fā)明依據(jù)苦豆子生物堿的理化性質(zhì)及陰道給藥特征，提供了一種苦豆子生物堿雙層栓。實驗結果表明，本發(fā)明采用特定的基質(zhì)種類、原輔料配比制備內(nèi)層栓，所得栓劑的藥物分散度、硬度、成形時間、融變時限等各項質(zhì)量指標均能達到藥典要求，質(zhì)量較好。相較于現(xiàn)有的同類產(chǎn)品，本發(fā)明具有以下顯著優(yōu)勢：

1、本發(fā)明提取得到的苦豆子生物堿中大部分為水溶性成分，因此，本發(fā)明選擇易于成型、成品外觀性狀較好的脂溶性基質(zhì)作為外層基質(zhì)，外層栓中的苦豆子生物堿在脂溶性基質(zhì)中分散成固體分散狀態(tài)，在陰道中能夠迅速釋放，從而可使部分藥物達到速釋效果。

2、相比于外層栓的速釋作用，本發(fā)明選擇以溶解和釋藥速度慢為特征的水溶型基質(zhì)制備內(nèi)層栓，能夠增加藥物在給藥部位的滯留時間，減緩吸收，更有利于藥效的長效發(fā)揮。

3、本發(fā)明選擇適宜的輔料種類及用量將苦豆子生物堿制備成雙層栓，可合理地調(diào)控釋藥速度以達到較好的治療效果：外層栓速釋，可有效地抑菌抗炎；外層熔化后，內(nèi)層栓再緩慢地釋放藥物，可發(fā)揮長效作用，從而更好地治愈婦科炎癥。

4、本發(fā)明的藥物組分采用天然植物中藥藥材為原料，不產(chǎn)生耐藥性；另外，將苦豆子生物堿制備成陰道雙層栓劑，可避免其苦寒傷胃的副作用。因此，本發(fā)明提供的雙層栓安全性更佳。

顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。

以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。

具體實施方式

本發(fā)明具體實施方式中使用的原料、設備均為已知產(chǎn)品，通過購買市售產(chǎn)品獲得。

混合脂肪酸甘油酯：批號150402，由成都瀘天化科森有限責任公司提供。

實施例1本發(fā)明苦豆子生物堿雙層栓劑的制備

苦豆子生物堿的提?。嚎喽棺哟址奂?2倍量水，60℃減壓動態(tài)提取3次，每次1小時，濾過，合并3次濾液，減壓濃縮至生藥濃度為1.0g/ml苦豆子濃縮液，加鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3,732型陽離子交換樹脂上樣，徑高比為10:1，靜態(tài)吸附2小時，用3.5V雙蒸水洗滌，再采用5BV20％氨水—乙醇溶液以2BV/h流速洗脫，收集洗脫液，濃縮，于60℃減壓干燥箱中干燥，即得苦豆子提取物。

苦豆子生物堿雙層栓劑的制備：取羊毛脂5g于研缽中，加入10g苦豆子生物總堿，研磨均勻；60℃水浴加熱400g混合脂肪酸甘油酯，將上述羊毛脂苦豆子生物堿的混合物加入其中，混合均勻并注入涂有潤滑劑(軟肥皂：甘油：95％乙醇的質(zhì)量比為1:1:5)的自制栓模(內(nèi)置固定的內(nèi)膜)中，每孔1.2g，作為雙層栓劑的外層；取100gPEG400、200gPEG6000、30g甘油與30g苦豆子生物堿，于水浴55℃加熱混合均勻；趁熱注入雙層栓模中，凝固后并刮平模口，啟模，制成重約2.0g的苦豆子生物堿。

實施例2本發(fā)明苦豆子生物堿雙層栓劑的制備

苦豆子生物堿的提?。嚎喽棺哟址奂?2倍量水，60℃減壓動態(tài)提取3次，每次1小時，濾過，合并3次濾液，減壓濃縮至生藥濃度為1.0g/ml苦豆子濃縮液，加鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3,732型陽離子交換樹脂上樣，徑高比為10:1，靜態(tài)吸附2小時，用3.5V雙蒸水洗滌，再采用5BV20％氨水—乙醇溶液以2BV/h流速洗脫，收集洗脫液，濃縮，于60℃減壓干燥箱中干燥，即得苦豆子提取物。

苦豆子雙層栓劑的制備：取羊毛脂10g于研缽中，加入15g苦豆子生物總堿，研磨均勻；60℃水浴加熱500g混合脂肪酸甘油酯，將上述羊毛脂苦豆子生物堿的混合物加入其中，混合均勻并注入涂有潤滑劑(軟肥皂：甘油：95％乙醇的質(zhì)量比為1:1:5)的自制栓模(內(nèi)置固定的內(nèi)膜)中，每孔1.2g，作為雙層栓劑的外層；取110gPEG400、210gPEG6000、40g甘油與40g苦豆子生物堿，于水浴55℃加熱混合均勻；趁熱注入雙層栓模中，凝固后并刮平?？?，啟模，制成重約2.0g的苦豆子生物堿。

實施例3本發(fā)明苦豆子生物堿雙層栓劑的制備

苦豆子生物堿的提?。嚎喽棺哟址奂?2倍量水，60℃減壓動態(tài)提取3次，每次1小時，濾過，合并3次濾液，減壓濃縮至生藥濃度為1.0g/ml苦豆子濃縮液，加鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3,732型陽離子交換樹脂上樣，徑高比為10:1，靜態(tài)吸附2小時，用3.5V雙蒸水洗滌，再采用5BV20％氨水—乙醇溶液以2BV/h流速洗脫，收集洗脫液，濃縮，于60℃減壓干燥箱中干燥，即得苦豆子提取物。

豆子雙層栓劑的制備：取羊毛脂15g于研缽中，加入20g苦豆子生物總堿，研磨均勻；60℃水浴加熱600g混合脂肪酸甘油酯，將上述羊毛脂苦豆子生物堿的混合物加入其中，混合均勻并注入涂有潤滑劑(軟肥皂：甘油：95％乙醇的質(zhì)量比為1:1:5)的自制栓模(內(nèi)置固定的內(nèi)膜)中，每孔1.2g，作為雙層栓劑的外層；取120gPEG400、220gPEG6000、50g甘油與50g苦豆子生物堿，于水浴55℃加熱混合均勻；趁熱注入雙層栓模中，凝固后并刮平?？?，啟模，制成重約2.0g的苦豆子生物堿。

以下通過實驗例證明本發(fā)明的有益效果。

1、外觀及硬度評價

將栓劑放置于白色光紙下，在日常光線下觀察顏色、表面光滑度；使用片劑硬度儀測定硬度。

2、成形時間

將已熔融基質(zhì)置于4℃冰箱放置，觀察成形所需時間。

3、融變時限

參考2010版中國藥典第一部附錄(ⅫB)項下融變時限檢查法，將栓劑放入金屬架的下層圓板上，依次用掛鉤固定各自的套筒，再將上述裝置分別浸入裝有4L的37℃水容器中，保持裝置上端與水面相差90mm。迅速計時，容器每隔10分鐘在溶液中翻轉裝置一次，觀察栓劑全部溶解所需時間。

以下實驗例中所述苦豆子生物堿，均根據(jù)實施例1制備得到。

實驗例1采用不同基質(zhì)制備的空白內(nèi)層栓質(zhì)量評價

1、聚乙二醇混合栓1：取PEG6000 5g和甘油1g置已知重量的蒸發(fā)皿中，水浴加熱熔化，再加入PEG400 4g水浴加熱并攪拌均勻，制成水溶性基質(zhì)(PEG400：PEG6000：甘油＝4：5：1)10g。趁熱注入已用液體石蠟涂好的2g子彈型栓模，待基質(zhì)完全冷卻即得聚乙二醇混合物栓1。

2、聚乙二醇混合栓2：取PEG4000 6g和PEG6000 3g置已知重量的蒸發(fā)皿中，水浴加熱熔化，再加入十六醇1g于水浴上加熱并攪拌均勻，制成水溶性基質(zhì)(PEG4000：PEG6000：十六醇＝6：3：1)10g。趁熱注入已用液體石蠟涂好的2g子彈型栓模，待基質(zhì)完全冷卻即得聚乙二醇混合物栓2。

3、甘油明膠栓：取甘油2g于已知重量的蒸發(fā)皿，用適量的蒸餾水，浸泡30min，待完全溶脹，除去多余的水分；再向其中加入甘油7g，在水浴上加熱使明膠緩慢溶解，繼續(xù)加熱揮干多余的水分，直至所需重量，制成甘油明膠基質(zhì)(甘油:明膠:水＝7:2:1)10g。趁熱注入已用液體石蠟涂好的2g子彈型栓模，待基質(zhì)完全冷卻后即得甘油明膠栓。

4、泊洛沙姆栓：取泊洛沙姆10g，置于已知重量的蒸發(fā)皿，在水浴上加熱使其熔化。趁熱注入已涂好液體石蠟的2g子彈型栓模中，待基質(zhì)冷卻后即得泊洛沙姆栓。

選用不同基質(zhì)已制備好的栓劑3粒，分別檢測融變時限，結果見表1。

表1采用不同基質(zhì)制備內(nèi)層栓的融變時限

實驗結果：泊洛沙姆栓較硬，甘油明膠栓具有一定的彈性，不宜成形，

這兩種基質(zhì)均不宜用于制備栓劑。聚乙二醇混合栓2外觀乳白色，硬度適中，但十六醇的加入使得融變時限延長至60min以上。聚乙二醇混合栓1外觀乳白色，硬度適中，成形時間短，融變時限在40min以下，且具有與藥物易于混合均勻的優(yōu)點，適宜作為藥物載體，填充雙層栓的內(nèi)層。

以上結果表明，以聚乙二醇和甘油制備混合基質(zhì)的外觀、硬度均符合藥典要求，適宜在本發(fā)明中作為內(nèi)層栓基質(zhì)使用；其中，以PEG400、PEG6000和甘油制備的栓劑融變時限在40min以下，且與藥物易于混合均勻，為最佳基質(zhì)。

實驗例2內(nèi)層栓中苦豆子生物堿的用量對栓劑質(zhì)量的影響

參考苦豆子總堿泡騰栓劑每枚含有70mg總堿，而本研究苦豆子藥材經(jīng)過提取純化后得到提取物中總堿的純度為60.1％，即每枚栓劑中外層和內(nèi)層共含有116.6mg苦豆子生物堿提取物，栓重為2.0g。

外層栓的制備：取1g羊毛脂于研缽中，加入部分藥物(用量見表2)研磨均勻，再加入已熔融的混合脂肪酸甘油酯58.2g(于55℃水浴加熱熔融)，混合均勻并注入涂有潤滑劑軟肥皂：甘油：95％乙醇(1：1：5)的自制雙層栓模(內(nèi)置固定的內(nèi)膜)中，每孔1.2g，作為雙層栓劑的外層。

內(nèi)層栓的制備：取PEG6000 21g、甘油4g、PEG400 11g，置已知重量的蒸發(fā)皿中水浴加熱熔化并攪拌均勻，加入剩余量藥物(用量見表2)，充分攪拌至混合均勻，趁熱注入雙層栓膜中，凝固后并刮平模口，啟模，制成雙層栓劑500枚。

以藥物分散度、硬度、成形時間及融變時限綜合評價，考察內(nèi)層栓中不同藥物用量對栓劑質(zhì)量的影響，結果見表2。

表2內(nèi)層栓中苦豆子生物堿的用量對栓劑質(zhì)量的影響

實驗結果：按照本發(fā)明內(nèi)層栓藥物用量配比制備雙層栓(即試驗組2)，結果所得栓劑的藥物分散度、硬度、成形時間、融變時限等質(zhì)量指標評價結果均較好，栓劑質(zhì)量最佳；若內(nèi)層栓藥物用量配比在本發(fā)明限定的范圍之外(即試驗組1、3)，則會出現(xiàn)藥物分散均勻度降低、栓劑硬度增大、融變時限延長等情況，栓劑質(zhì)量明顯下降。

以上結果表明，僅在采用本發(fā)明內(nèi)層栓藥物用量配比的條件下，能夠制備得到質(zhì)量較好的苦豆子生物堿雙層栓；其中，內(nèi)層：外層中苦豆子生物堿質(zhì)量比例為7：3時，所得雙層栓質(zhì)量最佳。

實驗例3內(nèi)層栓中輔料用量配比對栓劑質(zhì)量的影響

外層栓的制備：取1g羊毛脂于研缽中，加入1.749g苦豆子生物堿，研磨均勻，再加入已熔融的混合脂肪酸甘油酯58.2g(于55℃水浴加熱熔融)，混合均勻并注入涂有潤滑劑軟肥皂：甘油：95％乙醇(1：1：5)的自制雙層栓模(內(nèi)置固定的內(nèi)膜)中，每孔1.2g，作為雙層栓劑的外層。

內(nèi)層栓的制備：分別按表4所示用量取PEG6000、甘油、PEG400，置已知重量的蒸發(fā)皿中水浴加熱熔化并攪拌均勻，加入4.081g苦豆子生物堿，充分攪拌至混合均勻，趁熱注入雙層栓膜中，凝固后并刮平模口，啟模，制成雙層栓劑。

以500ml生理鹽水為釋放介質(zhì)，溫度(37±0.5℃)，轉速100r/min，分別于不同時間點(10min，30min，60min)取樣2ml(同時補充等溫等量的溶出介質(zhì))，以苦參堿為評價指標，采用高效液相色譜法(HPLC)測定，計算累積釋放度。

采用綜合評分法，先對10min，30min，60min 3個時間點的累積釋放度進行評分，再將評分結果進行加權相加后得出總分，最后對正交實驗結果進行分析。10min的累積釋藥量(D1)以30％為標準，計算公式為30％*D1；30min的累積釋藥量(D2)以60％為標準，計算公式為60％*D2；60min的累積釋藥量(D3)以90％為標準，計算公式為90％*D3。將各時間點的權重均定為1，綜合評分Y＝30％*D1+60％*D2+90％*D3，其中Dt為相應時間內(nèi)的累積釋放度，總分最低者為最優(yōu)，表明釋放量與所定標準量接近。

表3內(nèi)層處方優(yōu)化正交試驗因素水平表(g)

表4內(nèi)層處方優(yōu)化正交實驗結果

表5內(nèi)層處方優(yōu)化正交試驗方差分析

實驗結果：甘油用量為3～5g，PEG6000用量為14～28g，PEG400用量為8～18g，制備得到的苦豆子雙層栓外觀、硬度均符合藥典要求。

上述三種輔料的用量中，A、B因素對試驗結果有顯著性影響，由直觀分析可知，影響劑型成型及釋放效果的因素順序為A>B>C，即甘油>PEG6000>PEG400，由于因素C的偏差平方和小于誤差項因素D，故將其并入誤差項計算，PEG400無顯著性影響，可根據(jù)實際情況適當調(diào)整。經(jīng)試驗得出A2B2C2為最優(yōu)條件，即甘油：PEG6000：PEG400＝4：21：11。因此內(nèi)層栓劑處方的最佳處方為：甘油4g，PEG6000 21g，PEG400 11g。