本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
桑白皮為桑科植物桑Morus alba L.的干燥根皮，其味甘，性寒，歸肺經(jīng)，具有瀉肺平喘，利水消腫的功效。主治肺熱喘咳、水腫脹滿尿少。
陰虛證是指機(jī)體內(nèi)津液經(jīng)血等屬陰的物質(zhì)虧損，無以制陽，滋潤濡養(yǎng)功能減退所表現(xiàn)的癥候。臨床表現(xiàn)：形體消瘦，午后潮熱，五心煩熱，或骨蒸潮熱，顴紅盜汗，大便干結(jié)，尿少色黃，舌紅絳少苔，脈細(xì)數(shù)。腎陰虛水腫是由于腎陰虧竭，脾陰虛不能散精于肺，肺失清潤不能通調(diào)水道，下輸膀胱，水液不走正道，泛溢肌膚而致。
目前雖有治療腎陰虛水腫的多種藥物，但由于種種原因，其療效并不盡人意，而桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用至今未見有公開報(bào)導(dǎo)。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用，可有效解決腎陰虛水腫的治療用藥，實(shí)現(xiàn)桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用問題。
本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用，所述的桑白皮脂肪油是，將桑白皮制干，粉碎，加入桑白皮重量體積10倍的石油醚，在60-90℃下回流提取6h，得提取液，冷卻至室溫，過濾，回收濾液，水浴蒸發(fā)揮去石油醚，100℃下干燥1h，冷卻至室溫，即得桑白皮脂肪油。
該桑白皮脂肪油對(duì)腎功能和高脂血癥有改善作用，可有效用于制備治療腎陰虛水腫的藥物，是治療腎陰虛水腫藥物上的創(chuàng)新，有實(shí)際的臨床應(yīng)用價(jià)值，開拓了桑白皮的藥用價(jià)值，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益顯著。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合具體情況對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式作詳細(xì)說明。
本發(fā)明在具體實(shí)施中，本發(fā)明桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用，所述的桑白皮脂肪油是，將干燥至恒重的桑白皮10g粉碎，置于濾紙筒內(nèi)，放入索氏提取罐中，加入石油醚100mL，在60-90℃下回流提取6h，得提取液，冷卻至室溫，過濾，回收濾液，濾液置于蒸發(fā)皿中，水浴蒸發(fā)揮去石油醚，100℃下干燥1h，冷卻至室溫，即得桑白皮脂肪油。
本發(fā)明桑白皮脂肪油對(duì)腎功能和高脂血癥有改善作用，有腎陰虛水腫有明顯影響，能有效用于制備治療腎陰虛水腫藥物，實(shí)現(xiàn)桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用，并經(jīng)實(shí)驗(yàn)取得了非常好的有益技術(shù)效果，有關(guān)試驗(yàn)資料如下：
1實(shí)驗(yàn)材料
1.1藥物
桑白皮購于河南省順康醫(yī)藥有限責(zé)任公司中草藥31部，經(jīng)鑒定為桑科植物桑的干燥根皮。
1.2動(dòng)物
購于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，SD雄性大鼠體重200±20g。許可證號(hào)：SCXK(京)2012-0001。
1.3試劑
注射用鹽酸多柔比星(山西普德藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)02160103)；甲狀腺片(山東仁和制藥有限公司，批號(hào)014150105)；六味地黃丸(北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠，批號(hào)15031820)。
1.4儀器
iMark酶標(biāo)儀(Bio-Rad,USA)；EpochTM微孔板分光光度計(jì)(基因有限公司)；Centrifuge-5804R小型高速冷凍離心機(jī)(Eppendorf，Germany)；BioMate*3S型分光光度計(jì)(美國Thermo Fisher Scientific公司)；大鼠代謝籠裝置(江蘇蘇州馮氏實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司)。
2實(shí)驗(yàn)方法
2.1實(shí)驗(yàn)藥物：本發(fā)明桑白皮脂肪油。
2.2模型的建立
SD雄性大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周，首次尾靜脈注射阿霉素4mg.kg-1，8天后再次注射尾靜脈注射3.5mg.kg-1。同時(shí)給予150mg.kg-1體重的甲狀腺片21天。
2.3分組及給藥
將動(dòng)物分為空白組(NC)、模型組(M)、陽性組(LW)、桑白皮水煎總提物組(MC)、桑白皮脂肪油組(MC-FO)，CMC-Na組(CMC)。空白組(NC)、模型組(M)給予蒸餾水，陽性組(LW)給予六味地黃丸，MC組給予桑白皮水煎液濃縮物259mg/kg(相當(dāng)于原藥材1.4g/kg)，MC-FO組給予39.2mg/kg。將脂肪油加入0.5％CMC-Na溶液中，在磁力攪拌器上攪拌混勻，最終為淡黃色液體，并以給予CMC-Na溶液作為溶劑對(duì)照組。CMC組給予0.5％CMC-Na溶液，給藥體積為1.0mL/100g體重，連續(xù)灌胃四周。
2.4統(tǒng)計(jì)方法
采用SPSS17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析統(tǒng)計(jì)處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以表示，P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.1桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠cAMP、cGMP濃度的影響
與NC組相比，M組cAMP的濃度顯著性升高(P＜0.05)，cGMP的濃度極顯著性降低(P＜0.01)，給藥4周后MC-FO顯著性降低cAMP的濃度(P＜0.01)，而且有升高cGMP濃度的趨勢。見表1。
表1桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠cAMP、cGMP的影響(n＝6)
注：與NC相比*P<0.05,**P<0.01；與M組相比#P<0.05,##P<0.01
3.2桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠E2、T濃度的影響
與NC組相比，M組E2濃度顯著性升高(P＜0.01)，T的濃度顯著性降低(P＜0.01)。給藥4周后MC-FO能顯著性降低E2的濃度(P＜0.01)，而且能顯著性升高T的濃度(P＜0.01)。見表2。
表2桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠E2、T的影響(n＝6)
注：與NC相比*P<0.05,**P<0.01；與M組相比#P<0.05,##P<0.01
3.3桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠T3、T4濃度的影響
與NC組相比，M組大鼠的T3、T4濃度顯著性升高(P＜0.01)。給藥4周后MC-FO顯著性降低T3、T4濃度(P＜0.01)。見表3。
表3桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠T3、T4的影響(n＝6)
注：與NC相比*P<0.05,**P<0.01；與M組相比#P<0.05,##P<0.01
3.4桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠蛋白的影響
與NC組相比，M組尿蛋白顯著性升高(P＜0.01)，白蛋白顯著性降低(P＜0.05)，給藥4周后MC-FO對(duì)尿蛋白、白蛋白水平無影響。見表4。
表4桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠尿蛋白、白蛋白的影響(n＝6)
注：與NC相比*P<0.05,**P<0.01；與M組相比#P<0.05,##P<0.01
3.5桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠Cr、BUN的影響
與NC組相比，M組Cr、BUN均顯著性升高(P＜0.01或P＜0.05)，給藥4周后MC-FO能顯著性降低Cr、BUN的濃度(P＜0.01或P＜0.05)。見表5。
表5桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠Cr、BUN的影響(n＝6)
注：與NC相比*P<0.05,**P<0.01；與M組相比#P<0.05,##P<0.01
3.6桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠TG、TC的影響
與NC組相比，M組TG、TC均顯著性升高(P＜0.01)，給藥4周后MC-FO顯著性降低TG、TC的濃度(P＜0.01)。見表6。
表6桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠TG、TC的影響(n＝6)
注：與NC相比*P<0.05,**P<0.01；與M組相比#P<0.05,##P<0.01
4結(jié)論
本發(fā)明在實(shí)驗(yàn)中，選擇甲狀腺片和阿霉素來建立腎陰虛水腫模型。甲狀腺激素過量可致醫(yī)源性甲亢,使機(jī)體下丘腦一垂體一腎上腺軸、甲狀腺軸、性腺軸出現(xiàn)紊亂，表現(xiàn)出躁動(dòng),出汗多,怕熱等腎陰虛證臨床病理改變。實(shí)驗(yàn)過程中觀察到大鼠大便干結(jié)，難以捉持，被毛疏松無光澤，飲水量增多等現(xiàn)象，給藥后此現(xiàn)象有所改善。
美國生物學(xué)家曾提出細(xì)胞的“陰陽學(xué)說”，認(rèn)為cAMP與cGMP拮抗性作用與中醫(yī)的“陰陽”相類似。cAMP升高、cGMP降低則認(rèn)為是一種陰虛狀態(tài)。故實(shí)驗(yàn)結(jié)束后檢測了cAMP與cGMP的水平，發(fā)現(xiàn)本實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ徒M大鼠的cAMP與cGMP值的改變與本學(xué)說相符，給藥后其改善比較顯著。
下丘腦-垂體-靶腺軸(包括腎上腺、胸腺、性腺、甲狀腺)功能改變是腎陰虛證被廣泛承認(rèn)的主要病理變化。本實(shí)驗(yàn)檢測了反應(yīng)性腺功能的指標(biāo)T,E2，甲狀腺功能的指標(biāo)T3，T4。結(jié)果表明桑白皮脂肪油組分對(duì)其有顯著性改善。
阿霉素及其代謝產(chǎn)物直接損傷足細(xì)胞或使足細(xì)胞代謝紊亂及形態(tài)學(xué)的改變，使腎小球?yàn)V過膜的分子屏障和電荷屏障受損導(dǎo)致蛋白尿的發(fā)生，大量的蛋白尿?qū)е碌桶椎鞍籽Y。Cr、BUN是腎功能測定的常見指標(biāo)，血清肌酐Cr是由機(jī)體內(nèi)肌酸和磷酸肌酸產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，它是一種能夠更加靈敏的反應(yīng)腎小球?yàn)V過功能受損的血清標(biāo)志物。血清尿素氮BUN是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物，它的濃度與腎小球?yàn)V過率的變化有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)檢測了24h尿蛋白、白蛋白，肌酐、尿素氮的濃度來反映腎臟功能，結(jié)果顯示模型組尿蛋白、肌酐、尿素氮的濃度顯著升高，白蛋白顯著性降低，給藥后桑白皮脂肪油組分對(duì)尿蛋白、白蛋白的水平?jīng)]有顯著性改善，但能顯著性改善肌酐、尿素氮的水平。
水腫一般會(huì)有高脂血癥，但機(jī)理尚不清楚，一般認(rèn)為尿中蛋白大量丟失，低蛋白血癥所致的膠體滲透壓降低及(或)尿內(nèi)丟失一種調(diào)節(jié)因子而引起肝臟對(duì)膽固醇、甘油三酯及脂蛋白的合成增加。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示桑白皮脂肪油組分能顯著性降低甘油三酯、膽固醇的濃度，提示桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陽虛水腫模型大鼠的血脂有改善作用。
綜上所述桑白皮脂肪油組分對(duì)腎陰虛水腫模型大鼠的環(huán)核苷酸系統(tǒng)，性腺，甲狀腺功能，腎功能和高脂血癥有改善作用，有效用于制備治療腎陰虛水腫藥物，實(shí)現(xiàn)桑白皮脂肪油在制備治療腎陰虛水腫藥物中的應(yīng)用，是中藥上的創(chuàng)新，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益顯著。