本發(fā)明涉及藥食兩用原料的制備領(lǐng)域，具體涉及從顯齒蛇葡萄葉中提取黃酮類物質(zhì)的方法及其微膠囊制備方法。

背景技術(shù)：

消除老年斑是醫(yī)學(xué)美容事業(yè)的新課題。由于皮膚膚色變深變淺取決于黑色素細(xì)胞的密度和色素的生成量等因素，而黑色素的生成與體內(nèi)酪氨酸酶有關(guān)，也就是說降低酪氨酸酶的活性可以減少黑色素的生成。研究表明：各種黃酮類物質(zhì)結(jié)構(gòu)上的酚羥基可以消除過剩的氧自由基，抑制過氧化脂質(zhì)的生成和酪氨酸酶的活性，具有分解色斑的作用。此外黃酮類物質(zhì)可改善血管的彈性與滲透性，舒張血管，清除血管內(nèi)壁積存物，從而凈化血液，降低血液粘稠度，改善血液的循環(huán)狀態(tài)，增強(qiáng)血液的供氧能力，促進(jìn)皮下組織血液循環(huán)，使肌膚紅潤光澤，更加有營養(yǎng)，更有彈性。

黃酮類天然產(chǎn)物在人類健康中的作用是國際上過去十余年來天然藥物和健康產(chǎn)品研究開發(fā)的熱點之一，它具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗腫瘤、消炎抑菌等多種奇特功效。二氫楊梅系黃酮類化合物中的一員，其除具有黃酮類化合物的普通特性之外，在解毒、降低血脂和血糖水平，提高SOD活性，以及保肝護(hù)肝等方面具有特殊功效。而顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中總黃酮、二氫楊梅素含量極高，屬黃酮類化合物在植物中分布的特例。因此，可以將顯齒蛇葡萄作為集營養(yǎng)、保健、藥用功能于一體的資源加以開發(fā)利用，對于提高顯齒蛇葡萄的綜合利用率具有重要意義。

然而，現(xiàn)有技術(shù)中，對于顯齒蛇葡萄葉中黃酮的提取工藝，往往存在提取溫度高、提取工藝復(fù)雜、需要引入有機(jī)溶劑等。這樣存在幾點弊端：容易造成有效物質(zhì)發(fā)生化學(xué)變化、不利于產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用、成本高、不夠節(jié)能環(huán)保，而且提取率也并不太理想。

另外，顯齒蛇葡萄葉黃酮在貯存過程中，某些成分會發(fā)生有害變化。如何解決其在應(yīng)用過程中，避免有效成分損失，有效控制活性物質(zhì)釋放的技術(shù)，也是本領(lǐng)域亟待解決的技術(shù)問題之一；解決這一技術(shù)問題，有利于促進(jìn)顯齒蛇葡萄這一藥食同源植物的深度開發(fā)，且有助于我國天然資源的有效利用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明為彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供一種顯齒蛇葡萄葉黃酮的提取方法，該方法具有工藝簡單、無需有機(jī)溶劑、提取條件溫和、提取率高且工藝成本低等特點。

本發(fā)明為達(dá)到上述目的，采用的技術(shù)方案如下：

一種顯齒蛇葡萄葉黃酮的提取方法，包括如下步驟：

1)將顯齒蛇葡萄莖葉粉碎，過20-60目篩；

2)將過篩所得顯齒蛇葡萄莖葉樣品和水按照1:15-1:25的料液比混合，在常溫、140-160MPa壓力下進(jìn)行水浴浸提，浸提時間為20-30min，；

3)過濾，所得濾液進(jìn)行濃縮、干燥。優(yōu)選為真空濃縮、冷凍干燥

優(yōu)選的，步驟1)中，顯齒蛇葡萄莖葉粉碎后，過25-35目篩。

最為優(yōu)選的，包括如下步驟：

1)將顯齒蛇葡萄莖葉粉碎，過30目篩；

2)將過篩所得顯齒蛇葡萄莖葉樣品和水按照1:20的料液比混合，在常溫、150MPa壓力下進(jìn)行水浴浸提，浸提時間為25min；

3)過濾、真空濃縮、冷凍干燥。

本發(fā)明第二方面提供一種顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊的制備方法，包括如下步驟：

1)將殼聚糖和氯化鈣水溶液混合并進(jìn)行磁力攪拌，得殼聚糖-氯化鈣溶液；

2)包埋：將顯齒蛇葡萄葉黃酮加入海藻酸鈉水溶液中混勻，然后滴入至步驟1)的殼聚糖-氯化鈣溶液中，得包埋體系溶液，滴完后靜置；其中，所述顯齒蛇葡萄葉黃酮采用上文所述的方法制備；

3)分離微膠囊，水洗、真空干燥。

優(yōu)選的，步驟2)中，所述顯齒蛇葡萄葉黃酮與海藻酸鈉的質(zhì)量比為1:3.5-4.5，最優(yōu)選為1:4。

優(yōu)選的，海藻酸鈉在步驟2)的包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5-3％。

優(yōu)選的，殼聚糖在步驟2)的包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.6-1.2％。

優(yōu)選的，氯化鈣在步驟2)的包埋體系溶液的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.4-1.2％。

優(yōu)選的，步驟2)的包埋體系溶液的pH控制在5.5～6.5。

優(yōu)選的，步驟2)中，包埋體系溶液的溫度控制在55-65℃，靜置時間控制在15～30min。

本發(fā)明提供的技術(shù)方案具有如下有益效果：

1、本發(fā)明提供的提取方法，工藝簡單，無需高溫條件，也無需有機(jī)溶劑，工藝成本低；提取條件溫和，活性物質(zhì)不容易變質(zhì)，且提取率高，有效成分破壞少。

采用優(yōu)選條件的常溫高壓提取技術(shù)，將預(yù)處理過的顯齒蛇葡萄置于高壓設(shè)備中進(jìn)行高壓處理，使原料中的功效成分更多地溶解到水中，在高壓作用下，使有效成分從生物細(xì)胞中釋放出來，避免了有效成分因高溫而遭受破壞，同時也避免了無效物質(zhì)夾帶過多而造成提取產(chǎn)物質(zhì)量很差的矛盾問題。

2、本發(fā)明提供的提取方法，所需投入少，無需鍋爐及輔助設(shè)備的采購費用及場地費用，和回流提取比較，可節(jié)省投資18％。另外，該技術(shù)提取效率高，節(jié)省原材料，與回流提取比較，可節(jié)約20％的運(yùn)行成本以及30-40％的生產(chǎn)成本。

3、本發(fā)明提供的顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊的制備方法，制備過程簡單，避免了高溫、有機(jī)溶劑等有害的條件，利于保持被包埋物的活性。

4、本發(fā)明提供的顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊的制備方法，通過多種包埋劑協(xié)同作用，調(diào)節(jié)包埋物的釋放速度；殼聚糖是由甲殼素經(jīng)過脫乙酰基化而制成的直鏈多糖，其分子鏈上的伯氨基可與海藻酸鈉分子鏈上的羧基發(fā)生靜電相互作用，從而在海藻酸鈉微膠囊表面復(fù)合一層聚電解質(zhì)膜，這樣既提高了微膠囊的穩(wěn)定性和包埋率，又可調(diào)節(jié)包埋物生物釋放速度。

附圖說明

圖1水浸提率及總黃酮隨料液比的變化曲線；

圖2水浸提率及總黃酮隨時間的變化曲線；

圖3水浸提率及總黃酮隨粒度的變化曲線；

圖4海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響；

圖5殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響；

圖6氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響；

圖7在模擬胃液環(huán)境中的釋放曲線；

圖8在模擬小腸環(huán)境中的釋放曲線；

圖9顯齒蛇葡萄葉黃酮及VC對·OH抑制能力。

具體實施方式

下面結(jié)合附圖和具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步說明：

實施例中所用部分試驗材料和方法說明如下：

材料:海藻酸鈉、殼聚糖、氯化鈣，均為分析純。

儀器：Agilent 1260高效液相色譜系統(tǒng)，美國安捷倫公司；ME215S分析天平，德國賽多利斯公司；UV-2600紫外可見分光光度計，日本島津公司；EYELA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海愛朗儀器有限公司；SHZ-DA循環(huán)水式真空泵，上海和太設(shè)備有限公司；JN-02C型高壓均質(zhì)機(jī)，廣州聚能生物科技有限公司。

實施例1顯齒蛇葡萄葉黃酮的提取工藝研究

1、料液比對總黃酮量及水浸提率的影響

取顯齒蛇葡萄葉10.0g于500ml燒杯中，分別加入80、100、150、200、250ml蒸餾水，即為1：8，1：10，1：15，1：20，1：25的料液比，在25℃、150MPa壓力下進(jìn)行水浴浸提，浸提20min，取其濾液分別測定總黃酮和水浸提率。實驗結(jié)果見圖1。

由圖1可知，隨著料液比的增加，總黃酮的提取量也增加，但是其增幅隨著料液比的增大而慢慢變小，這就說明總黃酮的提取量已逐步接近平衡。顯然，隨著水溶劑的增加，提取物濃度被稀釋，溶劑的擴(kuò)散速度加快，所以總黃酮提取量隨料液比的增加而增加。由圖1還可以看出水浸提率的變化規(guī)律與總黃酮的變化規(guī)律相似，當(dāng)料液比達(dá)1：20時，總黃酮量無明顯增加。盡管水浸提率在料液比超過1：20時仍有增加的趨勢，但考慮能源消耗和浸提液的保存等因素，本實驗中料液比優(yōu)選用1：20。

2、時間對總黃酮量及水浸提率的影響

取顯齒蛇葡萄樣品10.0g于500ml燒杯中，以1：20料液比(g/ml)在25℃、150MPa壓力下水浴浸提10、15、20、25、30min，取其濾液分別測定總黃酮及水浸提率，其結(jié)果見圖2。

由圖2可知，總黃酮隨著時間的延長，浸出率增加，其增長幅度逐漸變小，特別是到了25min之后，總黃酮的浸出基本處于一條直線上了，這就表明總黃酮的提取已基本完全。水浸提也有相似的變化趨勢，時間是影響可溶性物質(zhì)提取的重要因素，時間增加，必然使顯齒蛇葡萄葉中的可溶性物質(zhì)充分溶出，但時間過長，會導(dǎo)致一些不可口的黃酮和一些植物色素等組分被溶出，同時也會使黃酮類物質(zhì)氧化。

3、粒度對總黃酮及水提取率的影響

將顯齒蛇葡萄葉樣品用植物組織搗碎機(jī)粉碎，分別通過20、30、40、50、60、120目篩。分別取不同粒度的樣品各10.0g于500mL燒杯中,按1:20的料液比加水，在25℃、150MPa壓力下水浴浸提20min，取其濾液分別測定其總黃酮及水浸提率。實驗結(jié)果見圖3。

由圖3可知，隨著樣品粒度的減小，樣品的總表面積增加，在浸提過程中與水的接觸面積亦隨之加大，樣品中可溶性成分更易于溶出?？傸S酮在粒度為30目之前是樣品中總黃酮隨著增加，而水浸提率亦是如此。在粒度達(dá)30目后，可溶性物質(zhì)的浸出率隨著粉碎粒度的增加基本不再變化。

4、正交實驗

采用L₉(3³)，做料液比、時間和粒度的三因素三水平的正交實驗，L₉(3³)正交試驗三水平三因素選擇表見下表1所示，正交實驗其他條件與實施例1第3點“粒度對總黃酮及水提取率的影響”相同，不再贅述。

表1 L₉(3³)正交試驗三水平三因素選擇表

正交試驗結(jié)果見下表2所示：

表2正交試驗結(jié)果

采用L₉(3³)，做料液比、時間和粒度的三因素三水平的正交實驗，結(jié)果表明最優(yōu)浸提方案為A₃B₂C₁,即料液比為1：25，浸提時間為25min，顯齒蛇葡萄葉粉碎粒度為30目，但考慮后續(xù)工序加工的能源損耗及其有效成分的損失等因素，因此適宜的料液比為1：20、浸提時間為25min。其影響的主次順序是料液比、樣葉粒度和浸提時間。

實施例2顯齒蛇葡萄葉黃酮的提取

采用實施例1優(yōu)選的較佳條件提取黃酮：

將顯齒蛇葡萄葉樣品用植物組織搗碎機(jī)粉碎，過30目篩，取10.0g粉碎過篩后樣品于500mL燒杯中，按照料液比1：20加入水，在25℃、150MPa壓力下常溫高壓水浴浸提25min，過濾得濾液，對濾液進(jìn)行真空濃縮、冷凍干燥。浸提率為44.27％，總黃酮量為43.01g/kg。

實施例3顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊制備工藝研究

微膠囊制備按照如下步驟進(jìn)行：取一定濃度的殼聚糖和CaCl₂水溶液100mL置于燒杯中，磁力攪拌。另取20mL含顯齒蛇葡萄葉黃酮(實施例2制備)的海藻酸鈉水溶液(顯齒蛇葡萄葉黃酮：海藻酸鈉＝1：4，質(zhì)量比)，以針頭勻速滴入殼聚糖-CaCl₂溶液中，得包埋體系溶液，滴完后靜置30min，分離微膠囊，水洗后真空干燥。

微膠囊載藥量與顯齒蛇葡萄葉黃酮包埋率的測定方法：取一定量已干燥的微膠囊(記為w)，置于0.2mol/L pH 7.4的磷酸緩沖液中，待微膠囊充分溶漲并大部分破裂后，劇烈攪拌，使微膠囊完成破裂，濾去不溶物，檢測緩沖液中總酚量(記為p)。

微膠囊載藥量(％)＝(p÷w)×100％

其中：顯齒蛇葡萄葉黃酮在微膠囊中的理論含量為制備一定量(w)微膠囊所用顯齒蛇葡萄葉黃酮的量。

1、海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

按照上文的微膠囊制備步驟進(jìn)行，其中，殼聚糖在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.6％,氯化鈣在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.8％、包埋體系溶液的pH 5.5，包埋溫度60℃和包埋時間20min的條件下。在這些條件下考察不同海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)對包埋效果的影響，結(jié)果見圖4。

由圖4可知，隨著海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，包埋率先增加后降低，當(dāng)海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5％時，包埋率達(dá)到最大值53.87％。這是因為海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)太低，海藻酸鈉/殼聚糖聚電解質(zhì)膜過薄，不能形成微膠囊，或形成的微膠囊機(jī)械強(qiáng)度低，不能有效地對芯材進(jìn)行包埋；海藻酸鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)過高，體系粘度大，擠出困難且擠出后易變形成餅狀物，包埋效果也很差。因此選擇海藻酸鈉質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.5％進(jìn)行后續(xù)試驗。

2、殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

按照上文的微膠囊制備步驟進(jìn)行，其中，海藻酸鈉在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2.5％、氯化鈣在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8％、包埋溫度60℃、包埋時間20min；在這些條件下考察不同殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)對包埋效率的影響，結(jié)果見圖5。

由圖5可知，當(dāng)殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1％時，包埋率達(dá)到最大值57.92％.。這是因為前期隨著殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，形成微膠囊的機(jī)會增加，包埋率也隨之增加；但當(dāng)殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過1％時，壁材量過高，壁材之間碰撞的機(jī)會增加，而壁材芯材之間碰撞的機(jī)會減少，故包埋率降低。因此選擇殼聚糖質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％進(jìn)行后續(xù)試驗。

3、氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響

按照上文的微膠囊制備步驟進(jìn)行，其中，海藻酸鈉在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.5％、殼聚糖在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)1％、包埋體系溶液的pH 5.5、包埋溫度60℃、包埋時間20min；在這些條件下考察不同氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)對包埋效果的影響，結(jié)果見圖6。

由圖6可知，當(dāng)氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8％時，包埋率達(dá)到最大量58％。這是由于前期隨著氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加，形成微膠囊的機(jī)會增加，包埋率也隨之增加；但當(dāng)氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)超過0.8％時，壁材量過量，壁材之間碰撞的機(jī)會增加，而壁材芯材之間碰撞的機(jī)會減少，故包埋率降低，因此選擇氯化鈣質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.8％進(jìn)行后續(xù)試驗。

4、pH值對微膠囊性能的影響

按照上文的微膠囊制備步驟進(jìn)行，其中，如下組分在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別是：2.5％海藻酸鈉，1.0％殼聚糖，0.8％的CaCl₂；在這些條件下考察包埋體系溶液分別在pH＝5.0與pH＝6.0時，對顯齒蛇葡萄葉黃酮提取物進(jìn)行包埋，pH對微膠囊性能的影響。

實驗結(jié)果見表3。

表3 pH值對顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊性能的影響

從表3的結(jié)果可以看出：pH值對殼聚糖、海藻酸鈉以及被包埋物質(zhì)所帶的電荷、空間構(gòu)象均有一定影響。殼聚糖的pKa為6.3，海藻酸鈉中古洛糖醛酸的pKa為3.5，甘露糖醛酸的pKa為4.0，在pH5.0時，殼聚糖的氨基和海藻酸鈉的羧基大部分離子化，這樣兩者通過靜電作用形成的聚電解質(zhì)膜較pH6.0時致密，對被包埋物質(zhì)的擴(kuò)散限制作用更強(qiáng)，因此包埋率較高，但在pH6.0時海藻酸鈉表面的帶電量更大，吸附的殼聚糖也更多，形成的聚電解質(zhì)膜較厚，由于在0.01mol/L的鹽酸溶液中，微膠囊表面的殼聚糖膜劑殼聚糖與海藻酸鈉的復(fù)合膜遭到一定程度的破壞，此時對緩釋起主要作用的是聚電解質(zhì)膜的厚度，因此pH6.0時，微膠囊對顯齒蛇葡萄葉黃酮的控釋效果較好。

實施例4微膠囊制備

采用實施例3優(yōu)選的較佳條件制備微膠囊：

配制殼聚糖-CaCl₂溶液：將殼聚糖和CaCl₂水溶液100mL置于燒杯中，磁力攪拌。

包埋：將20mL含顯齒蛇葡萄葉黃酮(實施例2制備)的海藻酸鈉水溶液(顯齒蛇葡萄葉黃酮：海藻酸鈉＝1：4，質(zhì)量比)，以針頭勻速滴入殼聚糖-CaCl₂溶液中，得包埋體系溶液，滴完后靜置30min，分離微膠囊，水洗后真空干燥。包埋溫度控制在60℃，包埋時間為20min。

其中，殼聚糖、CaCl₂、海藻酸鈉在包埋體系溶液中的質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別是1.0％、0.8％、2.5％。包埋體系溶液的pH為6.0。

實施例5釋放性能檢測

對實施例4制備的微膠囊進(jìn)行釋放性能檢測：

1、在模擬胃液環(huán)境中的釋放

在50mL胃液模擬液(含0.09mol/L NaCl和0.01mol/L HCl溶液，pH 2.0中)中加入4g已干燥的微膠囊，37℃，60r/min,在指定時間取樣，檢測總酚含量，計算釋放率。

實驗結(jié)果參見圖7。

2、在模擬腸液環(huán)境中的釋放

在上述胃液模擬液中處理一定時間的微膠囊，分離后水洗，加入50mL腸模擬液(含76.5mmol/L NaCl的29mmol/L pH 7.4磷酸緩沖液)，37℃，60r/min,在指定時間取樣，檢測總酚含量，計算釋放率

實驗結(jié)果參見圖8。

由圖7可見，在模擬胃液環(huán)境中停留2h后，微膠囊中酚類物質(zhì)的釋放率為65％，說明在酸性的條件下，微膠囊表面的殼聚糖膜以及海藻酸鈉與殼聚糖的復(fù)合膜被破壞，導(dǎo)致內(nèi)溶物釋放。此外，在酸性溶液中放置的時間越長，其表面上的復(fù)合膜就被破壞越嚴(yán)重，包埋物的擴(kuò)散就越強(qiáng)，進(jìn)而降低了微膠囊載模擬腸液環(huán)境中處理0.5h后，在模擬腸液環(huán)境中25min釋放52％；而若在模擬胃液環(huán)境中處理1h后，在模擬腸液環(huán)境中25min累積釋放率就達(dá)74％。

實施例6抗氧化性能測定

顯齒蛇葡萄葉黃酮清除自由基能力測定:利用羥自由基測定試劑盒進(jìn)行測定。

1、樣品溶液制備

取實施例2制備的顯齒蛇葡萄葉黃酮干粉0.1g,，配制0.01、0.02、0.03、0.04、0.05和0.06mg/mL六種不同濃度樣品溶液，待用。以同濃度VC作對照。

2、測定方法

根據(jù)表4建立自由基反應(yīng)體系。操作均在37℃水浴中進(jìn)行。隨后將反應(yīng)體系混勻，室溫下水平靜置20min，將96孔酶標(biāo)板空掃，記錄每個孔的吸光度值A(chǔ)₀作為空白，再分別取各反應(yīng)液200Μl至酶標(biāo)板中，于550nm處測吸光度A_X.所得樣液吸光度為A_S＝A_X-A_0..以VC作對照。進(jìn)行三次平行實驗，取平均值。

表4清除羥自由基反應(yīng)體系

Table3 The reaction system of eliminate·OH

所測樣對羥自由基抑制率M按照公式進(jìn)行計算

式中:AC—對照孔吸光度值；AU—測定孔吸光度值

3、測定結(jié)果

產(chǎn)生羥自由基的化學(xué)反應(yīng)屬FeSO4-H₂O₂體系最為常見，即Fenton體系。該體系反應(yīng)產(chǎn)生的·OH的量與H₂O₂的量成正相關(guān)。當(dāng)給予電子受體后，使用giess試劑顯色，會生成紅色物質(zhì)，其顏色深淺與·OH量成正比。依據(jù)以上原理，利用羥自由基測定試劑盒對顯齒蛇葡萄葉黃酮以及VC對羥自由基的抑制能力進(jìn)行測定，結(jié)果見圖9，顯齒蛇葡萄葉黃酮與VC對·OH的半數(shù)抑制濃度IC₅₀及黃酮含量。

由圖9可知，顯齒蛇葡萄葉黃酮對羥自由基具有一定的抑制作用。當(dāng)試驗濃度在0.01-0.05mg/mL之間時，顯齒蛇葡萄葉黃酮對羥自由基的抑制率隨著濃度的增加而呈上升趨勢，而且提取物抑制效果略強(qiáng)于VC。而當(dāng)濃度大于0.05mg/mL時，顯齒蛇葡萄葉黃酮對羥基自由基的抑制率反而降低。這可能是黃酮化合物在一定濃度下，會與FeSO4-H₂O₂體系中的鐵離子與氧發(fā)生自氧化反應(yīng)，生成過氧化物或超氧化物，對·OH的抑制能力下降。

由上述實驗可見，本發(fā)明提供的顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊制備方法簡單可行，是一種制備顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊的較好方法，而且該顯齒蛇葡萄葉黃酮微膠囊產(chǎn)品在模擬胃液和腸液環(huán)境中具有很好的釋放特性。對顯齒蛇葡萄葉黃酮進(jìn)行微膠囊化處理，既解決了其自身在穩(wěn)定性方面存在的缺憾，又使產(chǎn)品具有緩釋的優(yōu)點，為顯齒蛇黃酮作為天然活性成分發(fā)揮其多種生物活性開辟了一條新的途徑。

以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明做任何形式上的限制，故凡未脫離本發(fā)明技術(shù)方案的內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以上實施例所做的任何簡單修改、等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。