本發(fā)明涉及水楊酸甲酯糖苷類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽新的藥理作用，以及水楊酸甲酯糖苷類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備預(yù)防和治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥疾病藥物中的應(yīng)用；屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。

技術(shù)背景

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemiclupuserythematosus,sle)是一種以自身抗體的產(chǎn)生和免疫復(fù)合物的沉積為主要病理特征的自身免疫性結(jié)締組織疾病，是一種難以治愈的慢性疾病，嚴(yán)重危害著人類的健康。系統(tǒng)性紅斑狼瘡臨床表現(xiàn)為全身性的組織損傷，最顯著的即所謂的面部皮疹(蝴蝶斑)。除了皮膚，系統(tǒng)性紅斑狼瘡?fù)ǔ＿€影響著幾乎所有重要的組織(如關(guān)節(jié))和器官(如心、肝、腦、腎和肺)，血液系統(tǒng)和中樞神經(jīng)系統(tǒng)往往也是機(jī)體主要受累的部分。據(jù)美國(guó)狼瘡基金會(huì)估計(jì)，全美患有系統(tǒng)性紅斑狼瘡的病人不低于150萬(wàn)，每年新增病例多達(dá)1.6萬(wàn)。在中國(guó)和世界范圍內(nèi)，也大約有100和500萬(wàn)人飽受著系統(tǒng)性紅斑狼瘡的折磨。系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種耗費(fèi)大量醫(yī)療資源的慢性疾病。在美國(guó)，系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的年度人均治療總費(fèi)用(住院、門診和藥房)已高達(dá)29,232美元，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他非系統(tǒng)性紅斑狼瘡的慢性疾病患者所產(chǎn)生的費(fèi)用。

臨床上系統(tǒng)性紅斑狼瘡常用藥物主要包括非甾體抗炎藥、抗瘧藥、糖皮質(zhì)激素、免疫抑制劑及生物制劑。這些藥物僅能夠在一定程度上緩解癥狀，無(wú)法徹底治愈疾病，同時(shí)又具有毒副作用大、不良反應(yīng)多的缺點(diǎn)。

因此，對(duì)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡治療藥物的研究不僅具有巨大的社會(huì)效益，而且可以明顯減輕國(guó)家和家庭的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，是十分緊迫和必要的。

在中國(guó)發(fā)明專利申請(qǐng)(發(fā)明名稱：“水楊酸甲酯糖苷類化合物，其合成方法與用途”，申請(qǐng)?zhí)枺?00910082224.0；公開(kāi)號(hào)cn101863934a；公開(kāi)日2010-10-20)中公開(kāi)了一類水楊酸甲酯糖苷類化合物，公開(kāi)了這類化合物在制備解熱、消炎和鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。沒(méi)有公開(kāi)其在制備預(yù)防和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供水楊酸甲酯糖苷類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備預(yù)防和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥產(chǎn)品中的應(yīng)用。

為解決以上技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了如下技術(shù)方案：

本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面是提供了如通式(1)所示的水楊酸甲酯糖苷類化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備預(yù)防和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥產(chǎn)品中的應(yīng)用；

r選自單糖、單糖組成的二糖或三糖，其中所述的單糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖；更進(jìn)一步的，所述的二糖包括乳糖、麥芽糖、蔗糖。

其中，所述的預(yù)防和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥選自免疫功能失調(diào)、狼瘡關(guān)節(jié)炎、狼瘡性腎炎、狼瘡性脾臟損傷；所述的產(chǎn)品包括藥品、食品、保健品。

本發(fā)明技術(shù)方案第二方面是提供了一種藥物組合物在制備預(yù)防和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥產(chǎn)品中的應(yīng)用，其特征在于，含有治療有效劑量的通式(i)所示的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或輔料，

r選自單糖、單糖組成的二糖或三糖，其中所述的單糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖；進(jìn)一步的，所述的二糖包括乳糖、麥芽糖、蔗糖。

其中，所述的預(yù)防和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥選自免疫功能失調(diào)、狼瘡關(guān)節(jié)炎、狼瘡性腎炎、狼瘡性脾臟損傷；所述的產(chǎn)品包括藥品、食品、保健品。

進(jìn)一步的，本發(fā)明技術(shù)方案第二方面所述的藥物組合物還包括與其他活性物質(zhì)以任何比例合用制成的藥物組合物。

更進(jìn)一步的，以上所述的藥物組合物選自如下的劑型：溶液、混懸液、凍干粉針、乳劑、丸劑、膠囊、粉末、緩釋制劑、控制釋放制劑、持續(xù)釋放制劑及微粒體給藥系統(tǒng)。

本發(fā)明第二方面所述的藥物組合物，以用已知的方法配制，使用幾種途徑對(duì)受試者施用，包括但不限于腸胃外、經(jīng)口、局部、皮內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、靜脈、鼻內(nèi)途徑。

本發(fā)明中水楊酸甲酯糖苷類化合物可通過(guò)已知方法制備得到。

本發(fā)明的水楊酸甲酯糖苷類化合物的藥物組合物任選的可以通過(guò)任何常規(guī)方法用一種或多種藥學(xué)可接受的載體和/或賦形劑來(lái)配制。因此，水楊酸甲酯糖苷類化合物和它藥學(xué)可接受的鹽可特別配制為例如吸入或吹入(通過(guò)口或鼻)或經(jīng)口、含化、腸胃外或直腸給藥。

水楊酸甲酯糖苷類化合物的藥物組合物也可以采用溶液、混懸液、乳劑、丸劑、膠囊、粉末、控制釋放或持續(xù)釋放制劑。這些制劑將含有治療有效量的水楊酸甲酯糖苷類化合物，優(yōu)選為純化形式，以及適量的載體，以提供對(duì)患者適當(dāng)給藥的形式。

有益技術(shù)效果：

本發(fā)明通過(guò)腹腔注射降植烷(pristane)建立小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡模型，在造模后的第1個(gè)月對(duì)成模小鼠進(jìn)行篩查，剔除模型未成功小鼠，并將模型成功小鼠進(jìn)行隨機(jī)分組，在制備模型后的第45天開(kāi)始進(jìn)行藥物干預(yù)。整個(gè)實(shí)驗(yàn)期間，每隔一個(gè)月均對(duì)狼瘡小鼠血清中dna等自身抗體的表達(dá)水平進(jìn)行動(dòng)態(tài)的測(cè)定，同時(shí)也對(duì)狼瘡小鼠關(guān)節(jié)炎樣病理進(jìn)程進(jìn)行有效的監(jiān)控。在制備模型后的第6個(gè)月，收集小鼠血清和主要的內(nèi)臟器官，從脾臟損傷和腎功能損傷等層面評(píng)估dl0309對(duì)狼瘡小鼠病理進(jìn)程的有效緩解和治療作用。通過(guò)以上實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)水楊酸甲酯糖苷類化合物具有降低狼瘡小鼠體內(nèi)自身抗體和炎癥因子的表達(dá)水平、改善免疫功能的作用；具有減緩狼瘡關(guān)節(jié)炎樣病理進(jìn)程的作用；具有降低狼瘡小鼠腎臟組織中免疫復(fù)合物沉積、改善狼瘡小鼠腎功能的作用；具有保護(hù)狼瘡小鼠脾臟功能的作用，可應(yīng)用于制備預(yù)防、緩解和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其免疫功能失調(diào)、狼瘡關(guān)節(jié)炎、狼瘡性腎炎、狼瘡性脾臟損傷等并發(fā)癥的產(chǎn)品。

而且本發(fā)明的藥物水楊酸甲酯糖苷類化合物為中國(guó)民間傳統(tǒng)中草藥滇白珠中提取分離的單體化合物，具有毒性低、提取工藝簡(jiǎn)單、合成路線成熟等優(yōu)點(diǎn)；其原材料資源廣闊，且容易大量制備，具有很好的應(yīng)用和開(kāi)發(fā)前景。

附圖說(shuō)明

圖1.dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠體內(nèi)自身dna抗體表達(dá)的影響(a：igg型dna自身抗體；b：igm型dna自身抗體)。

圖2.dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠體內(nèi)自身sm抗體表達(dá)的影響(a：igg型sm自身抗體；b：igm型sm自身抗體)。

圖3.dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠體內(nèi)自身組蛋白抗體表達(dá)的影響(a：igg型組蛋白自身抗體；b：igm型組蛋白自身抗體)。

圖4.dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠體內(nèi)il-6(a)和總igg(b)表達(dá)的影響。

圖5.dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠后足體積的影響。

圖6.x-光造影下觀察dl0309對(duì)狼瘡小鼠后肢關(guān)節(jié)畸形和腫脹的有效改善作用。

圖7.dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠腎功能的改善作用(a：血清中肌酐的含量；b：尿液樣本中總蛋白與肌酐的比值)。

圖8.腎臟組織病理學(xué)檢測(cè)(h&e染色)(a-對(duì)照組；b-模型組；c-模型組；d-阿司匹林組；e-潑尼松組；f-低劑量組；g-中劑量組；h-高劑量組)。

圖9.腎臟組織病理學(xué)檢測(cè)(pas染色)(a-對(duì)照組；b-模型組；c-模型組；d-阿司匹林組；e-潑尼松組；f-低劑量組；g-中劑量組；h-高劑量組)。

圖10.腎臟組織中總igg復(fù)合物的沉積。

圖11.腎臟組織中c3補(bǔ)體復(fù)合物的沉積。

圖12.dl0309對(duì)狼瘡小鼠脾指數(shù)的影響。

圖13.脾臟組織病理學(xué)檢測(cè)(h&e染色)(a-對(duì)照組；b-模型組；c-模型組；d-dl0309低劑量組；e-dl0309中劑量組；f-dl0309高劑量組；g-阿司匹林組；h-潑尼松組)

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合本發(fā)明進(jìn)一步說(shuō)明水楊酸甲酯糖苷類化合物在體內(nèi)預(yù)防、緩解和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥的藥理作用與藥物用途。

下述實(shí)施例更詳細(xì)地舉例說(shuō)明本發(fā)明，并不是對(duì)本發(fā)明的任何限制。

實(shí)驗(yàn)例1：由降植烷(pristane)誘導(dǎo)的系統(tǒng)性紅斑狼瘡小鼠模型是一種經(jīng)典的、廣為認(rèn)可的小鼠模型，常用來(lái)評(píng)估抗狼瘡藥物的藥理作用。小鼠的飼養(yǎng)、分組和給藥情況如下：近交系balb/c雌性小鼠(spf級(jí)，7～8周齡)購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司(合格證號(hào)：scxk(京)2012-0001；序號(hào)：11400700048526)。balb/c小鼠自造模前1周開(kāi)始，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束(造模后6個(gè)月)前，一直飼養(yǎng)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心屏障系統(tǒng)，5～7只/籠。飼養(yǎng)條件為：25℃恒溫、50％相對(duì)濕度、常規(guī)飼料與自由飲水、以及12h光照/黑暗交替循環(huán)。

在造模后的第1個(gè)月，依據(jù)體內(nèi)自身抗體的表達(dá)水平對(duì)成模小鼠進(jìn)行篩查，并將成模小鼠進(jìn)行隨機(jī)分組，12只/組。分別為對(duì)照組、模型組、dl0309低劑量組(200mg/kg體重)、dl0309中劑量組(400mg/kg體重)、dl0309高劑量組(800mg/kg體重)、陽(yáng)性藥阿司匹林組(303mg/kg體重)和陽(yáng)性藥潑尼松組(5mg/kg體重)。在造模后的第45天開(kāi)始，按照上述劑量進(jìn)行口服給藥，1次/天。給藥體積均為0.2ml/10g體重。其中對(duì)照組和模型組均同步給予等體積的cmc-na溶液。

(一)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠體內(nèi)自身dna抗體表達(dá)的影響。

在造模后的第1，2，…6個(gè)月，通過(guò)剪尾取血，并將血清和血細(xì)胞進(jìn)行分離。采用elisa法對(duì)血清樣本中dna、sm、組蛋白抗體水平進(jìn)行測(cè)定。繪制各組血清樣本中自身dna、sm、組蛋白抗體的相對(duì)表達(dá)水平隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)曲線(見(jiàn)圖1、圖2和圖3)，狼瘡模型小鼠血清中igg和igm兩種形式的上述自身抗體的表達(dá)水平均顯著升高(*p<0.05或**p<0.01)；中、高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林與潑尼松均可以降低狼瘡小鼠體內(nèi)dna-igg/igm、sm-igg/igm及組蛋白-igg/igm等自身抗體表達(dá)水平的升高，與模型組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(^#p<0.05，^##p<0.01或^###p<0.001)，說(shuō)明口服給予化合物dl0309能夠有效抑制狼瘡小鼠體內(nèi)自身抗體的生成。

(二)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠血清中炎癥細(xì)胞因子il-6水平的影響。

在造模后的第2個(gè)月(也即進(jìn)行藥物干預(yù)后的第15天)，測(cè)定各組小鼠血清中il-6的表達(dá)水平(見(jiàn)圖4a)。il-6這一重要的炎癥介質(zhì)在狼瘡模型小鼠血清中被檢測(cè)到明顯的高表達(dá)(**p<0.01)；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林與潑尼松可以顯著降低狼瘡小鼠血清中il-6的表達(dá)水平(^#p<0.05或^##p<0.01)，說(shuō)明口服給予化合物dl0309能夠有效抑制狼瘡小鼠體內(nèi)炎癥細(xì)胞因子的表達(dá)。

(三)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠血清中總igg水平的影響。

在造模后的第1，2，…6個(gè)月，通過(guò)elisa測(cè)定各組小鼠血清中總igg的含量(見(jiàn)圖4b)。狼瘡小鼠血清中總igg的含量隨著時(shí)間的推移逐步的升高，在造模后的第2個(gè)月開(kāi)始與對(duì)照組相比呈現(xiàn)出顯著性差異(**p<0.01)；中、高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林與潑尼松可以顯著降低狼瘡小鼠血清中總igg的表達(dá)水平(^#p<0.05或^##p<0.01)。

(四)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠足腫脹程度的影響。

在造模后的第6個(gè)月，由獨(dú)立實(shí)驗(yàn)人員將小鼠后足相同位置劃線，將小鼠后足浸于測(cè)量杯液體中，并使劃線部位與液面持平，采用小動(dòng)物足趾容積測(cè)定儀測(cè)量并記錄小鼠后足體積(見(jiàn)圖5)。狼瘡小鼠后足的平均體積相對(duì)于對(duì)照組顯著升高(**p<0.01)；中、高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林與潑尼松可以顯著降低狼瘡小鼠后足的體積(^#p<0.05或^##p<0.01)，說(shuō)明口服給予化合物dl0309能夠有效抑制狼瘡小鼠后足腫脹程度。

(五)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠關(guān)節(jié)炎樣病理進(jìn)程的影響。

在造模后的第6個(gè)月，將小鼠后肢置于x-光下進(jìn)行觀察。狼瘡模型小鼠后足在x-光下可見(jiàn)明顯的畸形，同時(shí)也可觀察到腳踝處明顯的腫脹；而中、高劑量的dl0309組，陽(yáng)性藥阿司匹林與潑尼松組均未觀察到明顯的此類現(xiàn)象(見(jiàn)圖6)，說(shuō)明口服給予化合物dl0309能夠有效緩解狼瘡小鼠關(guān)節(jié)炎樣病理進(jìn)程。

(六)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠血清中肌酐含量的影響。

在造模后的第6個(gè)月，收集小鼠血清，用sod酶法測(cè)定血清中肌酐含量(見(jiàn)圖7a)。狼瘡模型小鼠血清中肌酐含量明顯升高；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林與潑尼松可以有效降低血清中肌酐含量。

(七)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠尿液中總蛋白含量的影響。

在造模后的第6個(gè)月，收集小鼠尿液，用sod酶法測(cè)定尿液中肌酐含量，用bca法測(cè)定尿液中總蛋白含量。通過(guò)計(jì)算二者比值(見(jiàn)圖7b)，可見(jiàn)狼瘡模型小鼠尿液中單位肌酐中總蛋白的含量顯著升高；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林與潑尼松可以有效降低單位肌酐中總蛋白的含量。

(八)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠腎臟病理改變的影響。

在造模后的第6個(gè)月，收集各組小鼠腎臟，進(jìn)行病理檢查。經(jīng)h&e染色(見(jiàn)圖8)，鏡下觀察可見(jiàn)狼瘡模型小鼠腎臟組織中有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，腎小球系膜變寬，毛細(xì)血管壁增厚，呈現(xiàn)出典型的腎小球腎炎特征；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林和潑尼松能夠明顯的改善狼瘡小鼠這一病理改變。經(jīng)pas染色(見(jiàn)圖9)，鏡下觀察可見(jiàn)正常小鼠腎小球內(nèi)毛細(xì)血管袢薄而清晰，狼瘡病變的腎小球內(nèi)毛細(xì)血管袢明顯增厚，腎小球腫脹致使腎小囊狹窄，同時(shí)可見(jiàn)基底膜紊亂，腎小管增厚等病理改變；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林和潑尼松能夠明顯的改善狼瘡小鼠這一病理改變。上述實(shí)驗(yàn)從病理學(xué)角度證實(shí)了dl0309對(duì)狼瘡小鼠腎臟損傷的保護(hù)作用。

(九)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠腎組織中免疫復(fù)合物沉積的影響。

在造模后的第6個(gè)月，收集各組小鼠腎臟，進(jìn)行間接免疫熒光染色。在200倍熒光顯微鏡下觀察(見(jiàn)圖10)，狼瘡模型小鼠腎臟組織尤其是腎小球部位可被激發(fā)出強(qiáng)烈的紅色熒光，說(shuō)明腎小球部位沉積了大量的總igg復(fù)合物；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林和潑尼松能夠明顯的降低狼瘡小鼠腎組織中總igg復(fù)合物的沉積。在400倍激光共聚焦顯微鏡下觀察(見(jiàn)圖11)，狼瘡模型小鼠腎小球可被激發(fā)出強(qiáng)烈的綠色熒光，說(shuō)明腎小球部位沉積了大量的c3補(bǔ)體復(fù)合物；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林和潑尼松能夠明顯的降低狼瘡小鼠腎組織中c3補(bǔ)體復(fù)合物的沉積。上述實(shí)驗(yàn)證實(shí)了dl0309能夠降低狼瘡小鼠腎組織中免疫復(fù)合物的沉積，也進(jìn)一步解釋了dl0309保護(hù)狼瘡小鼠腎功能的機(jī)制。

(十)檢測(cè)dl0309對(duì)pristane誘導(dǎo)的狼瘡小鼠脾指數(shù)、脾臟病理改變的影響。

在造模后的第6個(gè)月，收集小鼠脾臟，以脾臟重量比體重計(jì)算各組小鼠的脾指數(shù)(見(jiàn)圖12)。狼瘡模型小鼠脾指數(shù)相較于對(duì)照組升高了將近一倍(**p<0.01)；高劑量的dl0309，陽(yáng)性藥阿司匹林和潑尼松能夠顯著降低狼瘡小鼠脾指數(shù)的升高(^#p<0.05或^##p<0.01)，說(shuō)明dl0309能夠?qū)钳徯∈蟮钠⑴K起到明顯的保護(hù)作用。通過(guò)組織病理學(xué)檢查也進(jìn)一步證實(shí)了上述結(jié)論。鏡下觀察可見(jiàn)(圖13)，狼瘡模型小鼠脾組織中細(xì)胞異常增生，脾臟白髓結(jié)構(gòu)呈結(jié)節(jié)狀增生和擴(kuò)大；陽(yáng)性藥阿司匹林和潑尼松及dl0309能夠明顯的改善這一病理改變。

整體動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，水楊酸甲酯糖苷類化合物具有降低狼瘡小鼠體內(nèi)自身抗體和炎癥因子的表達(dá)水平、改善免疫功能的作用；具有減緩狼瘡關(guān)節(jié)炎樣病理進(jìn)程的作用；具有降低狼瘡小鼠腎臟組織中免疫復(fù)合物沉積、改善狼瘡小鼠腎功能的作用；具有保護(hù)狼瘡小鼠脾臟功能的作用。

綜上所述，水楊酸甲酯糖苷類化合物具有預(yù)防、緩解和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其并發(fā)癥的作用，水楊酸甲酯糖苷類化合物為中國(guó)民間傳統(tǒng)中草藥滇白珠中提取分離的單體化合物，具有毒性低、提取工藝簡(jiǎn)單、合成路線成熟等優(yōu)點(diǎn)；其原材料資源廣闊，且容易大量制備，具有很好的應(yīng)用和開(kāi)發(fā)前景，可應(yīng)用于制備預(yù)防、緩解和/或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡及其免疫功能失調(diào)、狼瘡關(guān)節(jié)炎、狼瘡性腎炎、狼瘡性脾臟損傷等并發(fā)癥的產(chǎn)品。