本發(fā)明涉及藥物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種前列地爾注射液。
背景技術(shù)：
：前列地爾，又稱前列腺素e1(pge1)，是一種活性極強(qiáng)的生理活性物質(zhì)，具有抑制血小板聚集、血栓素a2生成、動(dòng)脈粥樣脂質(zhì)斑塊形成及免疫復(fù)合物的作用，并能擴(kuò)張外周和冠脈血管的藥理作用，主要用于治療慢性動(dòng)脈閉塞癥(血栓閉塞性脈管炎、閉塞性動(dòng)脈硬化癥等)引起的四治潰瘍及微小血管循環(huán)障礙引起的四肢靜息疼痛，改善心腦血管微循環(huán)障礙及慢性肝炎的輔助治療。目前上市的前列地爾制劑有前列地爾粉針(環(huán)糊精包合物)和前列地爾注射液(脂肪乳制劑)。游離的前列地爾在臨床使用過程中存在較大的刺激性，如引起局部疼痛、腫脹感、嚴(yán)重的出現(xiàn)發(fā)紅和沿靜脈走向出現(xiàn)紅線。因此前列地爾注射液采用了脂微球載藥技術(shù)以減少游離前列地爾的刺激性。脂微球是一種以脂肪油為軟基質(zhì)，磷脂為乳化劑微粒體分散體系，其制備方法是將藥物溶于脂肪油中，以精制卵磷脂為乳化劑，經(jīng)高壓均質(zhì)成o/w型載藥脂肪乳。其中，磷脂作為乳化劑對(duì)前列地爾注射液的穩(wěn)定性有顯著的影響。專利cn101511367b提供了一種穩(wěn)定的前列腺素(即前列地爾)脂肪乳劑，其使用含有磷脂酰膽堿pc和磷脂酰甘油pg的磷脂，其中pc與pg之比為95:5～99.7:0.3，優(yōu)選為97:3～99.5:0.5，該脂肪乳劑的磷脂中實(shí)質(zhì)上不含磷脂酰乙醇胺pe。該專利制備的前列地爾注射液能夠在5℃條件下貯存2年，保證前列地爾的殘留率和平均粒徑符合要求。cn201410246450.9提供了一種穩(wěn)定的前列地爾組合物，包含前列地爾，注射用油，磷脂酰膽堿，磷脂酰肌醇，不含磷脂酰乙醇胺，其重量配比如下，前列地爾的重量為1份，注射用油的重量為5000～30000份，磷脂酰膽堿的重量為1200-4000份，磷脂酰肌醇的重量為12-48份，所制備的產(chǎn)品具有更好的安全性和穩(wěn)定性。cn201410664852.0一種前列地爾組合物，包含前列地爾，注射用油，蛋黃卵磷脂，前列地爾的重量為1份，注射用油的重量為2000～20000份，蛋黃卵磷脂的重量為1200～3600份，所述蛋黃卵磷脂中磷脂酰膽堿的含量在96％以上，磷脂酰肌醇的含量為0.3～1.0％，且不含磷脂酰乙醇胺。綜上所述，現(xiàn)有技術(shù)在解決前列地爾注射液穩(wěn)定性問題時(shí)，均對(duì)于磷脂規(guī)定了不含磷脂酰乙醇胺pe。對(duì)于前列地爾注射液，除了藥物本身的穩(wěn)定性，其中還含有10％油脂成分，其在制備及滅菌過程中可能會(huì)氧化分解成醛、酮、酸等，由于醛酮類物質(zhì)具有一定的毒性，會(huì)引起臨床用藥的安全隱患，因此要對(duì)脂肪乳注射液中的甲氧基苯胺值進(jìn)行控制。磷脂中的組分如何影響甲氧基苯胺值，現(xiàn)有技術(shù)中沒有給出相關(guān)的技術(shù)啟示。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺陷，提供一種甲氧基苯胺值較低的前列地爾注射液，出人意料的是，本發(fā)明提供的前列地爾注射液在保存中使用高效液相色譜進(jìn)行含量檢測(cè)時(shí)，其未知輔料峰能夠保持在較低水平。本發(fā)明提供一種前列地爾注射液，含有前列地爾，磷脂，注射用油，注射用水，其中，所述磷脂含有以下組分：占磷脂重量百分比為96.71％-99.90％w/w的磷脂酰膽堿，占磷脂重量百分比為0.10％-3.00％w/w的磷脂酰乙醇胺，占磷脂重量百分比小于0.30％w/w的磷脂酰甘油。上述前列地爾注射液中，所述的磷脂酰膽堿占磷脂重量百分比為97.75-98.90％w/w，磷脂酰乙醇胺占磷脂重量百分比為1.00-2.00％w/w，磷脂酰甘油占磷脂的重量百分比為0.10-0.25％w/w。上述前列地爾注射液中，前列地爾的濃度為5μg/ml，磷脂的濃度為6-18mg/ml，注射用油的濃度為100-300mg/ml。所述的磷脂酰膽堿選自天然來源的磷脂酰膽堿及其鹽，合成的磷脂酰膽堿及其鹽或其組合；所述合成的磷脂酰膽堿選自二硬脂?；字Ｄ憠A，二油?；字Ｄ憠A，二棕櫚酰基磷脂酰膽堿，二肉豆蔻酰基磷脂酰膽堿，二癸?；字Ｄ憠A，二月桂?；字Ｄ憠A，二芥?；字Ｄ憠A，1-硬脂?；?2-油?；字Ｄ憠A，1-棕櫚酰基-2-油?；字Ｄ憠A，1-肉豆蔻?；?2-油酰基磷脂酰膽堿，1-硬脂?；?2-棕櫚酰基磷脂酰膽堿，1-硬脂酰基-2-肉豆蔻?；字Ｄ憠A，1-棕櫚?；?2-硬脂?；字Ｄ憠A，1-棕櫚?；?2-肉豆蔻?；字Ｄ憠A，1-肉豆蔻?；?2-硬脂?；字Ｄ憠A，1-肉豆蔻?；?2-棕櫚酰基磷脂酰膽堿或其組合。所述的磷脂酰甘油選自天然來源的磷脂酰甘油及其鹽，合成的磷脂酰甘油及其鹽或者其組合；所述合成的磷脂酰甘油選自二硬脂?；字８视?，二油酰基磷脂酰甘油，二棕櫚?；字８视?，二肉豆蔻酰基磷脂酰甘油，1-棕櫚?；?2-油酰基磷脂酰甘油，二芥酰磷脂酰甘油，二月桂酰磷脂酰甘油或其組合。所述的磷脂酰乙醇胺選自所述磷脂酰乙醇胺為天然來源的磷脂酰乙醇胺及其鹽，合成的磷脂酰乙醇胺及其鹽或它們的任意組合；所述合成的磷脂酰乙醇胺選自二硬脂?；字Ｒ掖及?，二油?；字Ｒ掖及?，二棕櫚?；字Ｒ掖及?，二肉豆蔻?；字Ｒ掖及?，二芥酰磷脂酰乙醇胺，二月桂酰磷脂酰乙醇胺或其組合。所述的注射用油選自精制大豆油、紅花油、棉籽油、橄欖油、椰子油、蓖麻油、魚油、中鏈甘油單酯、中鏈甘油雙酯、中鏈甘油三酯、油酸乙酯、乙?；瘑胃视王?、丙二醇雙酯、亞油酸甘油酯、聚乙二醇月桂酸甘油酯或其組合。上述前列地爾注射液中還包含等滲調(diào)節(jié)劑，所述等滲調(diào)節(jié)劑選自甘油、葡萄糖、甘露糖醇或其組合。上述前列地爾注射液中還包含ph調(diào)節(jié)劑，所述的ph調(diào)節(jié)劑選自氫氧化鈉、鹽酸、磷酸、磷酸鹽、枸櫞酸、枸櫞酸鹽、醋酸、醋酸鹽或其組合。一種制備上述前列地爾注射液的制備方法，包含以下步驟：(1)水相的制備：將甘油加入處方量注射用水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。本發(fā)明意外的發(fā)現(xiàn)，與現(xiàn)有技術(shù)的啟示相反，磷脂中含有少量的磷脂酰乙醇胺，不僅不會(huì)影響前列地爾的穩(wěn)定性，而且有助于降低產(chǎn)品的甲氧基苯胺值，更意外的發(fā)現(xiàn)，有助于降低輔料產(chǎn)生的雜質(zhì)峰，可以更好的控制前列地爾注射液產(chǎn)品的質(zhì)量。附圖說明圖1：測(cè)試?yán)?中使用的自動(dòng)預(yù)處理裝置。具體實(shí)施方式對(duì)比例1處方用量前列地爾5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.946g，磷脂酰甘油0.054g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。對(duì)比例2處方用量前列地爾5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.325g，磷脂酰乙醇胺0.63g，磷脂酰甘油0.045g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。對(duì)比例3處方用量前列地爾5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.766g，磷脂酰乙醇胺0.18g，磷脂酰甘油0.054g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。實(shí)施例1處方用量前列地爾5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.937g，磷脂酰乙醇胺0.018g，磷脂酰甘油0.045g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。實(shí)施例2處方用量前列地爾5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.775g，磷脂酰乙醇胺0.18g，磷脂酰甘油0.045g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。實(shí)施例3上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.595g，磷脂酰乙醇胺0.36g，磷脂酰甘油0.045g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。實(shí)施例4處方用量前列地爾5mg磷脂18g大豆油100g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.415g，磷脂酰乙醇胺0.54g，磷脂酰甘油0.045g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。將對(duì)比例1-3以及實(shí)施例1-4的樣品分別置于40℃條件下7天，按照測(cè)試?yán)?和測(cè)試?yán)?的方法及指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)。測(cè)試?yán)?甲氧基苯胺值的測(cè)定按照《脂肪乳注射液(c14-c24)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》(征求意見稿)中收載方法進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)方法：避光快速操作。精密量取本品10ml(v)，置250ml圓底燒瓶中，加入無水乙醇20ml，在60℃水浴真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至幾近無液體；再加無水乙醇20ml，重復(fù)操作兩次。殘?jiān)卯惐?異辛烷(20:80)溶液溶解，全量轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，用異丙醇-異辛烷(20:80)溶液稀釋至刻度，搖勻，取12ml準(zhǔn)確加入2.0g無水硫酸鈉除去殘余的痕量水分。溶液以15000rpm的速率離心3分鐘，取上清液作為供試品溶液。照紫外-可見分光光度計(jì)(中國(guó)藥典2010年版二部附錄ⅳa)，在350nm波長(zhǎng)處，以異丙醇-異辛烷(20:80)溶液作為空白，測(cè)定供試品溶液的吸光度(a1)。精密量取供試品溶液與異丙醇-異辛烷(20:80)溶液各5ml，分別置一具塞試管中，各精密加入0.25％的4-甲氧基苯胺冰醋酸溶液(臨用新制)1ml，密閉振搖，避光準(zhǔn)確放置10分鐘。以異丙醇-異辛烷(20:80)溶液管溶液作空白，在350nm波長(zhǎng)處測(cè)定供試品溶液管的吸光度(a2)。按下式計(jì)算。計(jì)算公式：v：供試品的取樣量(ml)1.2：加入4-甲氧基苯胺的冰醋酸溶液后的溶液稀釋因子檢測(cè)結(jié)果如下表所示：根據(jù)上述檢測(cè)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明實(shí)施例1-4的甲氧基苯胺值在40℃保存7天時(shí)甲氧基苯胺值能夠保持在1.0以下，而對(duì)比例1和對(duì)比例3的甲氧基苯胺值超過1.0。對(duì)比例2的甲氧基苯胺值雖然能夠滿足要求，但是其前列地爾的降解明顯要大于實(shí)施例1-4。因此可見本發(fā)明制備的前列地爾脂肪乳不僅能夠保證有效成分前列地爾的穩(wěn)定，并且能夠得到甲氧基苯胺值較低的脂肪乳劑，具有更好的安全性和穩(wěn)定性。測(cè)試?yán)?對(duì)實(shí)施例1-4和對(duì)比例1-3制備的前列地爾注射液進(jìn)行高效液相檢測(cè)。檢測(cè)方法如下：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.0067mol/l磷酸鹽緩沖液(ph為6.3)(取磷酸二氫鉀9.07g，加水使溶解，制成1000ml，另取無水磷酸氫二鈉9.46g，加水使溶解，制成1000ml，將后者加到前者中，直至ph為6.3，取此液100ml加水至1000ml，搖勻，即得)-乙腈(3:1)為流動(dòng)相；調(diào)節(jié)流速使前列地爾約15min出峰；柱后反應(yīng)液為1mol/l氫氧化鉀溶液，流速為1.0ml/min，柱后反應(yīng)管為聚四氟乙烯管柱溫60℃；檢測(cè)波長(zhǎng)278nm。理論板數(shù)按前列地爾峰計(jì)算應(yīng)不低于5000，前列地爾與前列腺素a1的分離度應(yīng)大于10，前列腺素a1與內(nèi)標(biāo)的分離度應(yīng)大于2.0。內(nèi)標(biāo)溶液的制備取α-萘酚約62.5mg，精密稱定，置25ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，精密量取3ml，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為內(nèi)標(biāo)溶液。對(duì)照品溶液的制備取前列地爾對(duì)照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品貯備液，精密量取對(duì)照品貯備液5ml，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，精密量取1ml，再精密加入1ml內(nèi)標(biāo)溶液，作為對(duì)照品溶液。供試品溶液的制備精密量取本品1ml，再精密加入1ml的內(nèi)標(biāo)溶液，搖勻，作為供試品溶液。(配制后2小時(shí)內(nèi)使用)測(cè)定法精密量取供試品溶液和對(duì)照品溶液各20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按內(nèi)標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。自動(dòng)預(yù)處理裝置：由一個(gè)預(yù)處理柱，一個(gè)沖洗預(yù)處理柱的泵，兩個(gè)六通閥組成預(yù)處理柱：c18柱長(zhǎng)3cm×4mm；5μm預(yù)處理柱沖洗液：無水乙醇沖洗流速：2ml/min流路工作狀態(tài)：如下表所示*1)內(nèi)標(biāo)完全洗脫之后*2)*1)0.1min后使用上述方法對(duì)實(shí)施例1-4和對(duì)比例1-3所制備的前列地爾注射液進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)在28min會(huì)出現(xiàn)一未知輔料峰(前列地爾保留時(shí)間為13min)，在40℃條件下保存7天后，該峰的峰面積會(huì)增大。下表記錄了按照面積歸一化法進(jìn)行計(jì)算時(shí)，28min出現(xiàn)的未知輔料峰的％面積。根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，在40℃儲(chǔ)存7天后，對(duì)比例1-3所制備的前列地爾注射液28min的未知輔料峰的％峰面積顯著增加，而本發(fā)明實(shí)施例1-4所制備的前列地爾注射液28min未知輔料峰的％峰面積增加較小。實(shí)施例5處方用量前列地爾5mg磷脂6g橄欖油100g中鏈甘油三酯100g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿5.82g，磷脂酰乙醇胺0.18g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入橄欖油和中鏈甘油三酯中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。經(jīng)檢測(cè)，實(shí)施例5所制得的前列地爾注射液各項(xiàng)指標(biāo)均符合要求。實(shí)施例6上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿11.605g，磷脂酰乙醇胺0.36g，磷脂酰甘油0.035g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。經(jīng)檢測(cè)，實(shí)施例6所制得的前列地爾注射液各項(xiàng)指標(biāo)均符合要求。實(shí)施例7處方用量前列地爾5mg磷脂15g大豆油300g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿14.985g，磷脂酰乙醇胺0.015g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。經(jīng)檢測(cè)，實(shí)施例7所制得的前列地爾注射液各項(xiàng)指標(biāo)均符合要求。實(shí)施例8處方用量前列地爾5mg磷脂18g大豆油200g甘油22.1g0.1mnaoh適量上述處方中磷脂包含磷脂酰膽堿17.955g，磷脂酰乙醇胺0.027g，磷脂酰甘油0.018g。制備方法：(1)水相的制備：將甘油加入水中，攪拌使其溶解，作為水相；(2)油相的制備：將磷脂、前列地爾加入大豆油中，攪拌使其溶解，作為油相；(3)將油相加入水相中，使總量為1000ml，高速剪切分散，形成初乳；(4)將初乳高壓勻化，得精乳；(5)灌裝，滅菌即得。經(jīng)檢測(cè)，實(shí)施例8所制得的前列地爾注射液各項(xiàng)指標(biāo)均符合要求。上述內(nèi)容詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式。但是，本發(fā)明并不限于上述實(shí)施方式中的具體細(xì)節(jié)，在本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思范圍內(nèi)，可以對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行多種簡(jiǎn)單變型，這些簡(jiǎn)單變型均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。另外需要說明的是，在上述具體實(shí)施方式中所描述的各個(gè)具體技術(shù)特征，在不矛盾的情況下，可以通過任何方式進(jìn)行組合。為了避免不必要的重復(fù)，本發(fā)明對(duì)各種可能的組合方式不再另行說明。此外，本發(fā)明的各種不同的實(shí)施方式之間也可以進(jìn)行任意組合，只要不違背本發(fā)明的思想，其同樣應(yīng)當(dāng)視為本發(fā)明所公開的內(nèi)容。當(dāng)前第1頁(yè)12