本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及紅毛五加葉的新用途，尤其是紅毛五加葉在制備具有鎮(zhèn)痛作用的藥物中的用途。

背景技術(shù)：

紅毛五加Acanthopanax giraldii Harms為五加科五加屬的植物，是中國(guó)的特有植物。分布在中國(guó)大陸的湖北、河南、四川、青海、寧夏、甘肅、陜西等地，生長(zhǎng)于海拔1,300米至3,500米的地區(qū)，常生長(zhǎng)在灌木叢林中，目前開(kāi)展了人工引種栽培。藥用部位為樹(shù)皮，稱為紅毛五加皮，藥性辛、溫；具有祛風(fēng)濕，強(qiáng)筋骨，通關(guān)節(jié)的功效；用于痿證，足膝無(wú)力，風(fēng)濕痹痛。

《紅毛五加鎮(zhèn)痛解熱作用及毒性的實(shí)驗(yàn)觀察》[中國(guó)中藥雜志，1994年第19卷第1期]公開(kāi)了紅毛五加的根莖具有鎮(zhèn)痛作用。尤其是紅毛五加醇提液對(duì)化學(xué)刺激及物理刺激引起的疼痛有對(duì)抗作用；能明顯在降低家兔正常體溫并對(duì)蛋白胨引起的家兔人工發(fā)熱體溫有明顯降低作用，但是對(duì)霍亂病菌引起的家兔人工發(fā)熱體溫?zé)o降低作用；可顯著延長(zhǎng)小鼠在缺氧情況下的生存期。以上藥理作用為民間將紅毛五加用于治療風(fēng)濕腰腿痛提供了藥理依據(jù)。

尚未見(jiàn)以紅毛五加葉具有鎮(zhèn)痛作用的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明所解決的第一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供紅毛五加葉的新用途。

具體的，本發(fā)明所提供的紅毛五加葉的藥物新用途之一：紅毛五加葉或其提取物在制備具有鎮(zhèn)痛作用的藥物中的用途。

具體的，本發(fā)明所提供的紅毛五加葉的藥物新用途之二：紅毛五加葉或其提取物在制備具有抗疲勞作用的藥物中的用途。

具體的，本發(fā)明所提供的紅毛五加葉的藥物新用途之三：紅毛五加葉或其提取物在制備具有抗缺氧作用的藥物中的用途。

具體的，本發(fā)明所提供的紅毛五加葉的藥物新用途之四：紅毛五加葉或其提取物在制備具有抗炎作用的藥物中的用途。

發(fā)明人分別以小鼠游泳時(shí)間和小鼠在密閉環(huán)境中耐缺氧時(shí)間長(zhǎng)短作為觀察指標(biāo)，考察藥物對(duì)小鼠的抗疲勞和耐缺氧作用；分別以扭體反應(yīng)、耳廓腫脹度為觀察指標(biāo)，考察藥物對(duì)小鼠抗炎和鎮(zhèn)痛作用。試驗(yàn)結(jié)果顯示：紅毛五加葉具有鎮(zhèn)痛作用，但無(wú)量效關(guān)系，而且具有抗疲勞、抗缺氧、抗炎的趨勢(shì)。

上述用途中，所述藥物是以有效劑量的紅毛五加葉或其提取物為活性成分，按照藥學(xué)常規(guī)方法，加入藥學(xué)上的輔料制備而成的藥劑。具體的可以制成口服制劑或者注射劑，通過(guò)口服、肌肉注射、靜脈輸入或腹腔注射等方式給藥。

所述紅毛五加葉提取物為紅毛五加葉以水為溶媒所得提取物。

進(jìn)一步的，本發(fā)明紅毛五加葉提取物以水為溶媒，采用煎煮方式提取而得。

本發(fā)明所解決的第二個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供一種具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物，尤其主要活性成分為紅毛五加葉或其提取物，按照藥學(xué)常規(guī)方法制備而成的藥劑。制備時(shí)還可以加入藥學(xué)上的常規(guī)輔料制備?；钚猿煞诌€可以配加其他具有鎮(zhèn)痛作用的藥物增加協(xié)同增效的效果。藥劑每制劑單位含有紅毛五加葉或其提取物以原料藥計(jì)為2.5～10克，優(yōu)選2.5～7.5克。

所述常規(guī)輔料包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。

以紅毛五加葉或其提取物為活性成分制備的具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物可以制成口服劑、注射液等多種形式。上述各種劑型的藥物均可以按照藥學(xué)領(lǐng)域的常規(guī)方法制備。

本發(fā)明所解決的第三個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供上述具有鎮(zhèn)痛作用的藥物組合物的制備方法。包括：

方法一：將紅毛五加葉粉碎成細(xì)粉，混合即成散劑；或

方法二：將紅毛五加葉粉碎成細(xì)粉，裝膠囊即成膠囊劑；或

方法三：將紅毛五加葉粉碎成細(xì)粉，壓片即成片劑；或

方法四：將紅毛五加葉用水煎煮提取后，過(guò)濾得煎煮液；或

方法五：將紅毛五加葉用水煎煮提取后，過(guò)濾得煎煮液，干燥煎煮液；或

方法六：將紅毛五加葉用水煎煮提取后，濃縮提取液制成顆粒，即成顆粒劑；或

方法七：將紅毛五加葉用水煎煮提取后，濃縮提取液制成顆粒，裝膠囊即成膠囊劑；或

方法八：將紅毛五加葉用水煎煮提取后，濃縮提取液制成顆粒，壓片即成片劑；或

方法九：將紅毛五加葉用水煎煮提取后，制成水煎劑，或加常規(guī)輔料制成口服液、糖漿、合劑。

優(yōu)選的方法之一：包括如下步驟：

A、紅毛五加葉加水煎煮，過(guò)濾得煎煮液；

B、干燥煎煮液即得。

進(jìn)一步的，步驟B干燥煎煮液至含水量低于10％。

優(yōu)選的方法之一：包括如下步驟：

A、紅毛五加葉加水煎煮，過(guò)濾得煎煮液；

B、煎煮液按照藥學(xué)常規(guī)方法，加入藥學(xué)上的常規(guī)輔料制備而得。

具體的，可以制成口服制劑或者注射劑，可加入的常規(guī)輔料包括藥學(xué)領(lǐng)域常規(guī)的稀釋劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、濕潤(rùn)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、表面活性劑、吸附載體、潤(rùn)滑劑等。

綜上，本發(fā)明采用紅毛五加葉鎮(zhèn)痛作用顯著，為臨床鎮(zhèn)痛提供了一種全新的選擇。

附圖說(shuō)明

圖1紅毛五加各部位抗疲勞實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

注：*與空白組對(duì)照p<0.05，△與陽(yáng)性組對(duì)照p<0.05。

圖2紅毛五加耐缺氧實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

注：*與空白組對(duì)照p<0.05，△與陽(yáng)性組對(duì)照p<0.05。

圖3紅毛五加鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果(扭體潛伏期)。

圖4紅毛五加鎮(zhèn)痛作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果(扭體次數(shù))。

圖5紅毛五加抗炎作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

具體實(shí)施方式

以下通過(guò)實(shí)施例形式的具體實(shí)施方式，對(duì)本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明，說(shuō)明但不限制本發(fā)明。

1.受試藥物

紅毛五加葉、紅毛五加皮均為自采(產(chǎn)地：茂縣)，上述樣品經(jīng)成都中醫(yī)藥大學(xué)古銳教授鑒定，均來(lái)源于五加科五加屬紅毛五加Acanthopanax giraldii Harms。

紅毛五加皮、葉兩個(gè)部位水提取物，由成都中醫(yī)藥大學(xué)民族醫(yī)學(xué)院古銳教授提供。

1)紅毛五加皮水提物：取紅毛五加皮適量，加入6倍量水，分為2次煎煮，每次煎煮0.5小時(shí)，合并煎煮液，揮干，得紅毛五加皮干膏。

2)紅毛五加葉水提物：取紅毛五加葉適量，加入6倍量水，分為2次煎煮，每次煎煮0.5小時(shí)，合并煎煮液，揮干，得紅毛五加葉干膏。

2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地

SPF級(jí)KM種小鼠240只，由四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供。小鼠購(gòu)回飼養(yǎng)觀察3天，作藥前體重記錄。全價(jià)飼料，自由采食飲水。鼠用全價(jià)顆粒料由四川省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物專委會(huì)養(yǎng)殖場(chǎng)提供，營(yíng)養(yǎng)成分：符合GB14924.4中的規(guī)定。實(shí)驗(yàn)場(chǎng)地為成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥藥理動(dòng)物觀察室(川實(shí)動(dòng)管015號(hào))?？照{(diào)保持室溫18～24℃，相對(duì)濕度60～70％。，光照條件：12h/12h明暗交替，通風(fēng)情況：全新風(fēng)。

3.實(shí)驗(yàn)試藥

宇妥牌紅景天膠囊(四川宇妥藏藥藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào)：100901，規(guī)格0.4g/粒)。吲哚美辛腸溶片(山西太原藥業(yè)有限公司，批號(hào)：101001，規(guī)格：25mg/片)。

4.實(shí)驗(yàn)儀器

BP221S型電子天平(SARTORIUS，上海良平儀器儀表有限公司，d＝0.1mg)；不銹鋼電熱恒溫水箱DHW-600(北京國(guó)華醫(yī)療器械廠)；1ml一次性無(wú)菌注射器(江蘇康進(jìn)醫(yī)療器材有限公司，批號(hào)：20050609D42)。

5.統(tǒng)計(jì)方法

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間差異的顯著性檢驗(yàn)運(yùn)用spss 18.0軟件提供的單因素方差分析方法。

6.實(shí)驗(yàn)方法

6.1給藥劑量

紅毛五加皮、葉兩部位水提液：按紅毛五加皮臨床劑量分別配制成高劑量：4g/kg、低劑量：1g/kg兩個(gè)劑量組；紅景天膠囊按照等效劑量配制：2g/kg，吲哚美辛腸溶片按照等效劑量配制：10mg/kg。

共連續(xù)6天給藥，每天灌胃1次，灌胃溶劑：0.2ml/10g，對(duì)照組灌胃等體積溶媒。

6.2抗疲勞作用研究

6.2.1抗疲勞作用研究

KM種小鼠60只，SPF級(jí)，雌雄各半，體重22±2g；按體重隨機(jī)分成6組，分別灌胃蒸餾水，紅景天膠囊水溶液和各組藥物。末次給藥前禁食不禁水12h，末次給藥后30min，在小鼠尾根部束相當(dāng)于小鼠體重10％的重物，將小鼠放入水深11cm、室溫的水池中，記錄小鼠開(kāi)始游泳至體力耗竭時(shí)間(小鼠頭部沉入水中10s不能浮出水面為體力耗竭)。

6.2.2耐缺氧作用研究

KM種小鼠60只，SPF級(jí)，雌雄各半，體重24±2g；按體重隨機(jī)分成6組，分別灌胃蒸餾水，紅景天膠囊水溶液和各組藥物。末次給藥前禁食不禁水12h，末次給藥后30min，將小鼠放入盛有20g鈉石灰的250ml帶塞廣口瓶中，1只/瓶，將瓶蓋涂以凡士林密封計(jì)時(shí)，以停止呼吸為指標(biāo)觀察小鼠存活時(shí)間。

6.3鎮(zhèn)痛作用研究

KM種小鼠60只，SPF級(jí)，雄性，體重20±2g；按體重隨機(jī)分成6組，分別灌胃蒸餾水，吲哚美辛腸溶片溶液和各組藥物。連續(xù)灌胃4天，于末次給藥前禁食不禁水12h，末次給藥后30min，小鼠腹腔注射0.7％醋酸溶液0.2ml/只，分別以小鼠腹部凹陷，雙后肢伸展為扭體反應(yīng)指標(biāo)，觀察小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)的潛伏期(min)和15min內(nèi)扭體反應(yīng)的次數(shù)。

6.4抗炎作用研究

KM種小鼠60只，SPF級(jí)，雄性，體重20±2g；按體重隨機(jī)分成60組，分別灌胃蒸餾水，吲哚美辛腸溶片溶液和各組藥物。連續(xù)灌胃6天，于末次給藥前禁食不禁水12h，末次給藥后1h，將20μl二甲苯涂于小鼠右耳廓兩面致炎，左耳不涂作為對(duì)照，致炎后1h處死小鼠，剪下小鼠雙耳廓，用直徑5mm的打孔器在兩耳對(duì)稱位置取下左右耳片稱重，以左右耳片重量差為耳廓腫脹度表示藥物的抗炎效應(yīng)，同時(shí)計(jì)算平均抑制率，平均抑制率＝(給藥組腫脹度-對(duì)照組腫脹度)÷對(duì)照組腫脹度×100％

7.實(shí)驗(yàn)結(jié)果

7.1.抗疲勞、抗缺氧試驗(yàn)：結(jié)果見(jiàn)表1、圖1和圖2。

表1抗疲勞及耐缺氧實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：*與空白組對(duì)照p<0.05，△與陽(yáng)性組對(duì)照p<0.05。

結(jié)果表明：給藥后30min，紅毛五加皮高劑量組游泳時(shí)間較空白組明顯延長(zhǎng)(p<0.05)，其余各組與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異(p>0.05)。給藥后30min，紅景天陽(yáng)性組和紅毛五加皮高劑量組耐缺氧時(shí)間較空白組明顯延長(zhǎng)(p<0.05)，其余各組與空白對(duì)照組無(wú)顯著性差異(p>0.05)。紅毛五加葉高劑量具有耐缺氧作用。

7.2.鎮(zhèn)痛試驗(yàn)：結(jié)果見(jiàn)表2，圖3和圖4。

表2鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：*與空白組對(duì)照比較，p<0.05。

結(jié)果顯示：各提取部位均有鎮(zhèn)痛作用，各藥物組之間組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

7.3.抗炎試驗(yàn)：結(jié)果見(jiàn)表3和圖5。

表3抗炎實(shí)驗(yàn)結(jié)果

注：*與空白組對(duì)照比較，p<0.05。

結(jié)果顯示：各提取部位同時(shí)具有不同的抗炎作用，其中吲哚美辛陽(yáng)性組、紅毛五加皮高/低劑量組與空白組比較，腫脹度的減少具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。紅毛五加葉具有抗炎趨勢(shì)。

8、結(jié)論：紅毛五加葉藥效作用分析

藥理學(xué)研究證明，紅毛五加葉水提物具有明顯的鎮(zhèn)痛功效，并具有一定趨勢(shì)的抗缺氧、抗疲勞、抗炎效果。因此，紅毛五加葉以水煎煮或以水浸泡等以水為溶媒提取所得紅毛五加提取物均具有明顯的鎮(zhèn)痛功效，并具有一定趨勢(shì)的抗缺氧、抗疲勞、抗炎效果。因此也可以確定紅毛五加葉具有明顯的鎮(zhèn)痛功效，并具有一定趨勢(shì)的抗缺氧、抗疲勞、抗炎效果。