本發(fā)明涉及治療消化道病變領(lǐng)域，具體地指一種L-巖藻糖在消化道病變的藥品和保健品中應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：消化道病變(GastrointestinalLesions，疾病編碼：K92.902，拼音碼：XHDBB)是人類疾病譜的重要組成部分，包含功能性胃腸病、炎性腸病等多種疾病，因其高發(fā)病率和對(duì)生活質(zhì)量嚴(yán)重破壞成為長(zhǎng)期威脅各國(guó)人類健康的嚴(yán)峻問題。其中，消化道病變后所致的腸道功能改變、炎癥上調(diào)和體重下降造成不少患者生活質(zhì)量下降和乃至致殘致死的主要原因。大量研究發(fā)現(xiàn)，消化道病變后的腸道功能改變、炎癥上調(diào)和體重下降是涉及機(jī)體免疫、胃腸動(dòng)力、腸道菌群等多因素的調(diào)控影響，且對(duì)上述多因素平衡的破壞會(huì)加重病情而適當(dāng)調(diào)控可以有利于上述因素間的平衡，而平衡的恢復(fù)則是改善患者長(zhǎng)期預(yù)后決定性因素。如今，對(duì)消化道病變及其相關(guān)腸道功能改變、炎癥上調(diào)和體重下降相應(yīng)治療療效尚不理想。既往傳統(tǒng)治療相對(duì)局限，如使用鹽酸洛哌丁胺等止瀉藥針對(duì)腹瀉，氫化可的松等糖皮質(zhì)激素處理自身免疫紊亂，枯草桿菌.腸球菌二聯(lián)活菌腸溶膠囊等腸道菌制劑治療腸道菌群紊亂，其具有副作用大，患者用藥多，醫(yī)從性差等弊端。而腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)是治療消化道病變愈加收到重視的治療手段。研究證明，腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)在除了營(yíng)養(yǎng)支持作用外，還有助于腸道粘膜細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的完整性，保持胃腸道菌群的穩(wěn)態(tài)，防止細(xì)菌易位的發(fā)生。另一方面，腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)使?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)代謝更加符合生理，有利于內(nèi)臟的蛋白質(zhì)的合成和代謝調(diào)節(jié)；腸內(nèi)營(yíng)養(yǎng)還可參與機(jī)體調(diào)控免疫與生理功能，減少器官功能障礙的發(fā)生。同時(shí)，通過大量的循證醫(yī)學(xué)證據(jù)進(jìn)一步顯示了它們?cè)谙啦∽兣R床治療中的應(yīng)用。但其中各種組分的在營(yíng)養(yǎng)作用外的藥理作用多不明確。L-巖藻糖作為食物中(尤其是海藻)中多見的單糖，其對(duì)消化道病變的藥用價(jià)值并未明確。目前研究認(rèn)為其與腸道穩(wěn)態(tài)的維持關(guān)系密切，如東京大學(xué)和芝加哥大學(xué)的研究者發(fā)現(xiàn)當(dāng)發(fā)生全身炎癥反應(yīng)時(shí)機(jī)體會(huì)上調(diào)腸上皮巖藻糖表達(dá)來支持共生菌的生存以維持腸道穩(wěn)態(tài)。而巖藻糖本身作為人乳寡糖(HMO)的組成成分之一，其大劑量口服的安全性亦得到了驗(yàn)證。此外，另一研究則提示其具有抑制致病菌粘附及毒力的作用。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供了一種L-巖藻糖在消化道病變的藥品中應(yīng)用，其解決了現(xiàn)有治療在改善消化道病變長(zhǎng)期預(yù)后中高副作用，低功效的缺陷。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供的一種L-巖藻糖在治療消化道病變的藥品和保健品中應(yīng)用。L-巖藻糖(L-Fucose，化學(xué)式C6H12O5)為一種脫氧己糖。它常見于在哺乳動(dòng)物、昆蟲和植物細(xì)胞表面的N型-連接聚糖和哺乳動(dòng)物腸道黏液和上皮中的O型-連接聚糖，是巖藻基聚糖多糖的基本亞單位。L-巖藻糖可通過稱為α-巖藻糖苷酶的酶從含有巖藻糖的聚合物中釋放。L-巖藻糖作為腸道上皮與黏液糖基化的重要組成部分，其對(duì)腸道菌群和免疫的調(diào)控作用已被多項(xiàng)高質(zhì)量研究所報(bào)道，例如，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)L-巖藻糖基化可減少抗體與天然殺傷細(xì)胞Fc受體結(jié)合，從而減低抗原依賴性細(xì)胞毒性，由此可通過調(diào)節(jié)核心巖藻糖基化酶(FUT8)影響機(jī)體細(xì)胞殺傷能力。遺憾的是，盡管實(shí)驗(yàn)室內(nèi)涌現(xiàn)出大量涉及巖藻糖影響消化道病變的證據(jù)，其在臨床的作用除去作為疾病觀察指標(biāo)外，在治療消化道病變方面的作用并無報(bào)道。L-巖藻糖應(yīng)用于消化道病變的治療。首先，實(shí)驗(yàn)組通過腸道病變動(dòng)物模型明確了L-巖藻糖可使其獲得顯著的長(zhǎng)期預(yù)后獲益。其次，在免疫調(diào)控方面L-巖藻糖可通過DC細(xì)胞調(diào)控腸系膜淋巴結(jié)Treg細(xì)胞活化，抑制結(jié)腸Th1和Th17分化的潛能。另一方面，L-巖藻糖可能通過對(duì)腸道菌群的調(diào)節(jié)，抑制膽汁酸的生成減輕炎癥反應(yīng)。最后，我們明確了L-巖藻糖通過nNOS途徑抑制腸道肌肉收縮痙攣的作用，可最終減輕腹痛腹瀉的癥狀。綜上所述，L-巖藻糖通過調(diào)節(jié)機(jī)體DC細(xì)胞免疫應(yīng)答調(diào)控腸道Treg細(xì)胞活化，調(diào)節(jié)腸道菌群膽汁酸生成，同時(shí)L-巖藻糖可以通過調(diào)節(jié)nNOS抑制腸道肌肉收縮痙攣。本發(fā)明還提供了一種治療消化道病變的藥物或保健品制劑，所述制劑包括L-巖藻糖。其中，藥物或保健品制劑為口服制劑?？诜苿槠瑒?、膠囊劑或顆粒劑。本發(fā)明的有益效果在于：在消化道病變發(fā)生時(shí)，本發(fā)明的L-巖藻糖通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫，腸道菌群和肌肉生理，進(jìn)而減少炎癥損傷和腹瀉等病情，最終降低消化道病變相關(guān)的臨床不良事件(體重過輕，死亡)的發(fā)生率。附圖說明圖1為L(zhǎng)-巖藻糖干預(yù)DSS慢性結(jié)腸炎小鼠體重變化的趨勢(shì)圖；圖2為L(zhǎng)-巖藻糖干預(yù)DSS急性結(jié)腸炎小鼠的體重變化的趨勢(shì)圖，圖2A為各組小鼠疾病活動(dòng)指數(shù)圖，圖2B為各組小鼠體重變化率圖，圖2C為各組小鼠結(jié)腸長(zhǎng)度對(duì)比圖，圖2D為各組小鼠結(jié)腸病理改變圖；圖3為L(zhǎng)-巖藻糖對(duì)樹突狀細(xì)胞調(diào)控情況圖，圖3A為L(zhǎng)-巖藻糖干預(yù)DSS誘導(dǎo)急性結(jié)腸炎小鼠，對(duì)結(jié)腸和腸系膜淋巴結(jié)中DC亞型的調(diào)控圖，圖3B為L(zhǎng)-巖藻糖直接干預(yù)DC2.4細(xì)胞，可激活其下游不同效應(yīng)因子表達(dá)的變化圖；圖4為L(zhǎng)-巖藻糖對(duì)腸道菌群代謝的作用圖，圖4A為L(zhǎng)-巖藻糖干預(yù)急性DSS誘導(dǎo)腸炎小鼠回腸腸內(nèi)容物pH值，圖4B為回腸內(nèi)容物代謝產(chǎn)物液相色譜-質(zhì)譜分析圖；圖5為L(zhǎng)-巖藻糖對(duì)離體結(jié)腸平滑肌條的自發(fā)性收縮的影響圖圖5A為蔗糖對(duì)照作用于大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖5B為L(zhǎng)-巖藻糖作用于大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖5C為L(zhǎng)-巖藻糖作用于大鼠近端結(jié)腸縱行肌平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖5D為L(zhǎng)-巖藻糖糖作用于人結(jié)腸縱行肌平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖5E為L(zhǎng)-巖藻糖(蔗糖對(duì)照)對(duì)人及大鼠結(jié)腸平滑肌條的影響圖；圖6為痙攣狀態(tài)下L-巖藻糖對(duì)大鼠結(jié)腸平滑肌條的影響圖；圖6A為(蔗糖對(duì)照)Ach刺激后對(duì)大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌條的影響圖(L-巖藻糖)，圖6B為蔗糖對(duì)照Ach刺激后對(duì)大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌條的影響圖(蔗糖對(duì)照)；圖7為L(zhǎng)-巖藻糖抑制離體結(jié)腸縱行肌自發(fā)性收縮的機(jī)制圖，圖7A為大鼠結(jié)腸縱行肌條給予不同濃度巖藻糖平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖7B為大鼠結(jié)腸縱行肌條給予TTX阻斷后，再給予不同濃度巖藻糖平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖7C為大鼠結(jié)腸縱行肌條給予L-NAME阻斷后，再給予不同濃度巖藻糖平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖7D為大鼠結(jié)腸縱行肌條給予SMT阻斷后，再給予不同濃度巖藻糖平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖7E為大鼠結(jié)腸縱行肌條給予DMSO對(duì)照孵育后，再給予不同濃度巖藻糖平滑肌收縮活動(dòng)圖，圖7F為大鼠結(jié)腸縱行肌條給予7-NI阻斷后，再給予不同濃度巖藻糖平滑肌收縮活動(dòng)圖。具體實(shí)施方式為了更好地解釋本發(fā)明，以下結(jié)合具體實(shí)施例進(jìn)一步闡明本發(fā)明的主要內(nèi)容，但本發(fā)明的內(nèi)容不僅僅局限于以下實(shí)施例。名字簡(jiǎn)寫簡(jiǎn)寫中文全稱FUC巖藻糖FGID功能性胃腸病DSS硫酸葡聚糖鈉FL巖藻糖基乳糖TTX河豚毒素L-NAMEN-硝基-L-精氨酸甲酯鹽酸鹽SMTS-甲基異硫脲7-NI7-硝基吲唑NOS一氧化氮合酶nNOS神經(jīng)元一氧化氮合酶iNOS誘導(dǎo)型一氧化氮合酶eNOS內(nèi)皮一氧化氮合酶DAI疾病活動(dòng)指數(shù)實(shí)施例1DSS誘導(dǎo)腸炎模型建立及干預(yù)分組1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象150只6-8周齡的CD57雄性小鼠體重20-22g，購(gòu)于湖北省疾病控制與預(yù)防中心，依照2011年美國(guó)國(guó)家科學(xué)院頒布之《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)和使用指南》，飼養(yǎng)動(dòng)物于華中科技大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房；2.模型分組對(duì)照組：?jiǎn)渭兩睇}水灌胃，不做處理，共10只。單純巖藻糖干預(yù)組：?jiǎn)渭兘o予L-巖藻糖灌胃處理，共10只。DSS模型組：按DSS誘導(dǎo)腸炎模型標(biāo)準(zhǔn)造模，生理鹽水灌胃，共20只。DSS模型巖藻糖干預(yù)組：按DSS誘導(dǎo)腸炎模型標(biāo)準(zhǔn)造模，給予L-巖藻糖灌胃處理，共20只3.給藥劑量、頻率及途徑劑量：L-巖藻糖1mmol/kg、DSS質(zhì)量分?jǐn)?shù)2.5％；頻率：DSS加入飲用水自由飲用7天，同時(shí)給予灌胃給藥，之后休息3周，再行下輪給藥，總計(jì)3輪途徑：DSS口服，L-巖藻糖灌胃實(shí)施例2L-巖藻糖對(duì)小鼠體重的影響1.材料：L-巖藻糖購(gòu)置于美國(guó)Sigma-Aldrich公司，灌胃前溶于PBS等滲緩沖液中動(dòng)物及分組：6-8周齡的CD57雄性小鼠，分為對(duì)照組；DSS模型組；DSS模型L-巖藻糖干預(yù)組三組2.試劑及儀器：小動(dòng)物灌胃器械(上海醫(yī)療器械廠，中國(guó))3.方法：1)DSS誘導(dǎo)急性腸炎模型：于造模每天記錄各組小鼠的DAI變化和體重變化至7天，統(tǒng)計(jì)并繪制DAI評(píng)分及體重變化曲線2)DSS誘導(dǎo)慢性腸炎模型：于造模每天記錄各組小鼠的體重變化至3輪完成，統(tǒng)計(jì)并繪制體重變化曲線4.結(jié)果：如圖1所示，對(duì)于慢性DSS誘導(dǎo)腸炎組，L-巖藻糖干預(yù)組體重在恢復(fù)后期顯著高于DSS組而與對(duì)照組無顯著差異；同時(shí)對(duì)于急性DSS誘導(dǎo)腸炎模型，如圖2所示，L-巖藻糖干預(yù)組于DSS組無論在體重，DAI評(píng)分，病理上無顯著差異。這表明L-巖藻糖可于消化道病變緩解期的表現(xiàn)出保護(hù)作用，而這種作用并非由于其對(duì)機(jī)體的直接營(yíng)養(yǎng)而產(chǎn)生，而是經(jīng)由相對(duì)間接的長(zhǎng)期的方式改善DSS誘導(dǎo)性腸炎小鼠的機(jī)體狀況，從而說明L-巖藻糖對(duì)炎性腸病具有治療作用。實(shí)施例3L-巖藻糖對(duì)免疫系統(tǒng)的影響1.材料：L-巖藻糖購(gòu)置于美國(guó)Sigma-Aldrich公司，灌胃前溶于PBS等滲緩沖液中2.動(dòng)物及分組：6-8周齡的CD57雄性小鼠，分為對(duì)照組；DSS模型組；DSS模型巖藻糖干預(yù)組三組3.試劑及儀器：PBS、Percoll分離液、臺(tái)酚藍(lán)、抗CD103、CD11b抗體等；容聲冰箱BCD-575WYM(容聲公司，中國(guó))、ThermoForma-86℃冰箱(Thermo公司，美國(guó))、低溫、高速離心機(jī)(Eppendorf公司，德國(guó))4.方法：(1)斷椎法處死小鼠，75％酒精浸泡3min，取全部小腸標(biāo)本，滅菌PBS溶液中充分漂洗。(2)剪成0.5cm左右的片狀，置入含1mmol/LDTT、1mmol/LEDTA、1％抗生素(Penicillin+Streptomycin)和5％小牛血清的滅菌PBS溶液40ml中，37℃孵育20min，輕微振蕩，去除上皮組織和黏液，重復(fù)此步驟2次。(3)取出組織置于滅菌PBS中充分漂洗，剪碎后置于1mg/ml膠原酶Ⅳ(也可以用膠原酶D)溶液40ml中，37℃水浴孵育60min。(4)先后以200目及400目濾網(wǎng)過濾后，300×g，離心10min；棄上清，以含1％抗生素(Penicillin+Streptomycin)、5％小牛血清的RPMI1640全培養(yǎng)基4ml懸浮細(xì)胞。(5)配置75％percoll溶液及40％percoll溶液各2ml，并分層置入玻璃試管中，在其上層加入細(xì)胞懸液，離心(2000rpm,20min,20℃)獲取單個(gè)核細(xì)胞，懸浮于含5％小牛血清的RPMI1640全培養(yǎng)基。(6)細(xì)胞計(jì)數(shù)后，離心(300g，10min)，棄上清。以MACSBuffer重新懸浮細(xì)胞(80ulbuffer/107cell)，加入CD11c磁珠抗體(20ul/107cell)，充分混勻后，4～8℃孵育15min，分選。與CD11b和CD103熒光抗體孵育，離心，溶于流式緩沖液，流式儀檢測(cè)。5.結(jié)果：如圖3所示，DSS模型導(dǎo)致的腸系膜淋巴結(jié)歸巢的調(diào)控Treg的DC亞型比例下降，L-巖藻糖可改善這一下降，指示L-巖藻糖可能具有通過DC細(xì)胞調(diào)控腸系膜淋巴結(jié)Treg活化，抑制結(jié)腸Th1和Th17分化的潛能。實(shí)施例4L-巖藻糖對(duì)腸道菌群的影響1.材料：L-巖藻糖購(gòu)置于美國(guó)Sigma-Aldrich公司2.動(dòng)物及分組：6-8周齡的CD57雄性小鼠，DSS模型組；DSS模型巖藻糖干預(yù)組二組3.試劑及儀器：PBS,色譜級(jí)乙腈，甲醇，異丙醇，甲酸購(gòu)自CNW公司；容聲冰箱BCD-575WYM(容聲公司，中國(guó))、ThermoForma-86℃冰箱(Thermo公司，美國(guó))、低溫、高速離心機(jī)(Eppendorf公司，德國(guó))4.方法：(1)取50mg樣本，勻漿加入1ml甲醇，震蕩30s，勻漿2min，冰浴超生30min，12000rpm，4℃離心10min，取200微升于進(jìn)樣小瓶中待測(cè)(2)色譜條件：儀器：ACQUITYTMUPLC系統(tǒng)色譜柱：WatersACQUITYUPLCHSST3柱(2.1mm×100mm，1.8μm)；柱溫：40℃流動(dòng)相：A：水(V/V)(含0.1％甲酸)，流動(dòng)相B：乙腈(含0.1％甲酸)流速：0.3mL/min進(jìn)樣量：4μL(3)質(zhì)譜條件：ESI源，掃描方式:ESI+、ESI-模式，毛細(xì)管電壓:1.4kV和1.3kV，錐孔電壓:40V和23V，離子源溫度:120℃，脫溶劑氣溫度:350℃，錐孔氣流量:50L/h，脫溶劑氣流量:600L/h，碰撞能量(10-40V)，離子能量:1V，每0.2s采集1次圖譜；準(zhǔn)確質(zhì)量測(cè)定采用蘆丁溶液為鎖定質(zhì)量溶液。質(zhì)量掃描范圍:50-1500m/z。5.結(jié)果：如圖4所示，DSS組PH值高于Control組和巖藻糖干預(yù)組。腸道內(nèi)容物PH值與腸道內(nèi)部代謝產(chǎn)物密切相關(guān)故經(jīng)由液質(zhì)聯(lián)合質(zhì)譜分析法對(duì)其代謝產(chǎn)物進(jìn)行了初步的檢測(cè)。色譜結(jié)果顯示巖藻糖組和DSS組代謝產(chǎn)物存在差異。質(zhì)譜檢測(cè)?；蛆Z去氧膽酸，膽紅素等物質(zhì)在DSS組中的豐度遠(yuǎn)高于巖藻糖干預(yù)組，而L-糞膽，D-尿膽素等物質(zhì)在巖藻糖組中的豐度則遠(yuǎn)高于DSS組。因相關(guān)的腸道內(nèi)膽汁酸代謝和膽紅素代謝與腸道菌群代謝關(guān)系密切，本實(shí)驗(yàn)認(rèn)為L(zhǎng)-巖藻糖可能通過調(diào)節(jié)腸道菌群影響機(jī)體功能。實(shí)施例5L-巖藻糖對(duì)離體結(jié)腸平滑肌條的自發(fā)性收縮的影響1.材料：巖藻糖購(gòu)置于美國(guó)Sigma-Aldrich公司2.動(dòng)物：SD雄性大鼠購(gòu)置于湖北省疾病控制與預(yù)防中心，行SPF級(jí)飼養(yǎng)3.試劑及儀器：5600露點(diǎn)滲透壓儀；器官浴槽系統(tǒng)(OrganBath)4.方法：(1)露點(diǎn)滲透壓儀測(cè)定各濃度蔗糖對(duì)照組與巖藻糖實(shí)驗(yàn)組滲透壓。(2)離體平滑肌條實(shí)驗(yàn)檢測(cè)L-Fucose對(duì)SD雄性大鼠近端及遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌、遠(yuǎn)端結(jié)腸環(huán)行肌及人結(jié)腸縱行肌的自發(fā)性收縮的影響。(3)通過離體平滑肌條實(shí)驗(yàn)檢測(cè)L-Fucose在SD雄性大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌痙攣狀態(tài)時(shí)(給予AchChloride10-5M)對(duì)其自發(fā)性收縮的影響；5.結(jié)果：如圖5～6所示，(1)離體平滑肌條體外實(shí)驗(yàn)顯示：L-fucose在0.25％-1.5％濃度梯度下，對(duì)大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌的自發(fā)性收縮有明顯抑制作用，且隨著濃度增加抑制作用逐漸增強(qiáng)(p＜0.05)；且各濃度點(diǎn)均顯著大于相應(yīng)濃度蔗糖滲透壓對(duì)照組，在1.5％濃度時(shí)抑制作用ΔAUC％為27.75±3.22％vs12.21±0.83％(p＜0.05)；L-fucose同樣能抑制大鼠近端結(jié)腸縱行肌、大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸環(huán)行肌以及人結(jié)腸縱行肌的自發(fā)性收縮，各濃度對(duì)大鼠不同結(jié)腸肌條(遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌、近端結(jié)腸縱行肌、遠(yuǎn)端結(jié)腸環(huán)行肌)抑制作用并無差異(p＞0.05)；(2)離體大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌平衡后給予10-5MACHChloride刺激待其自發(fā)性收縮穩(wěn)定后，再給予L-Fucose，與蔗糖對(duì)照組相比濃度在0.5％時(shí)對(duì)肌條自發(fā)性收縮的影響無差異，當(dāng)濃度在1％及1.5％時(shí)與對(duì)照組相比均能顯著抑制肌條收縮(p＜0.05)。以上表明L-fucose與蔗糖滲透壓對(duì)照相比能顯著抑制大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌的自發(fā)性收縮，且具有濃度依賴性；且其亦能抑制大鼠近端結(jié)腸縱行肌、遠(yuǎn)端結(jié)腸環(huán)行肌以及人結(jié)腸縱行肌的自發(fā)性收縮；大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌條在外源性Ach作用下處于痙攣狀態(tài)時(shí)，L-Fucose亦能抑制其自發(fā)性收縮活動(dòng)。表1L-巖藻糖(蔗糖對(duì)照)對(duì)人及大鼠結(jié)腸平滑肌條的影響注：AUC％用Mean±SEM％表示n＝肌條數(shù)。表2Ach作用后L-巖藻糖對(duì)大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸縱行肌條的影響注：AUC％用Mean±SEM％表示n＝肌條數(shù)實(shí)施例6L-巖藻糖對(duì)離體結(jié)腸縱行肌自發(fā)性收縮的影響1.材料：L-巖藻糖購(gòu)置于美國(guó)Sigma-Aldrich公司2.動(dòng)物及分組：SD雄性大鼠購(gòu)置于湖北省疾病控制與預(yù)防中心，行SPF級(jí)飼養(yǎng)3.試劑及儀器：器官浴槽(OrganBath)4.方法：通過給予離體平滑肌條神經(jīng)鈉通道阻滯劑TTX及多種一氧化氮合成酶(NOS)抑制劑L-NAME、SMT及7-NI孵育后，再給予L-Fucose觀察其作用效果變化。5.結(jié)果：如圖7所示，離體大鼠結(jié)腸縱行肌給予10-5g/L河豚毒素TTX，10-4M總NOS抑制劑L-NAME孵育20min以上，再給予不同濃度(0.5％、1.0％、1.5％)L-Fucose，與對(duì)照組相比L-Fucose對(duì)肌條自發(fā)性收縮的抑制能力顯著降低(p＜0.05)；而給予iNOS抑制劑10-3MSMT孵育后與對(duì)照組相比并未減弱L-Fucose抑制肌條收縮的能力(p＞0.05)；給予10-5MnNOS抑制劑7-NI孵育后亦能降低L-Fucose對(duì)肌條自發(fā)性收縮的抑制作用。以上表明L-Fucose抑制肌條收縮的作用可能為腸神經(jīng)(ENS)依賴性，并且其可能通過誘導(dǎo)神經(jīng)型一氧化氮合成酶nNOS合成NO來抑制平滑肌收縮，促進(jìn)舒張作用。表3兩種抑制劑對(duì)巖藻糖作用的影響注：AUC％用Mean±SEM％表示n＝肌條數(shù)綜上所述：實(shí)施例2～4共同說明L-巖藻糖對(duì)減輕機(jī)體免疫反應(yīng)具有顯著效果，并且其對(duì)菌群具有調(diào)控作用，減少初級(jí)膽汁酸等有害代謝產(chǎn)物生成，其對(duì)炎性腸病的改善作用，從而治療炎性腸??；實(shí)施例5～6說明L-巖藻糖對(duì)腸道平滑肌收縮的抑制作用，說明了其對(duì)以腸道功能改變、炎癥上調(diào)和體重下降為表現(xiàn)的炎性腸病和功能性胃腸病的治療作用。其它未詳細(xì)說明的部分均為現(xiàn)有技術(shù)。盡管上述實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做出了詳盡的描述，但它僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部實(shí)施例，人們還可以根據(jù)本實(shí)施例在不經(jīng)創(chuàng)造性前提下獲得其他實(shí)施例，這些實(shí)施例都屬于本發(fā)明保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3