本發(fā)明涉及納米藥物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種金納米熱放療藥物載體及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

納米材料作為一種新型材料，既具有一般宏觀物質(zhì)的性質(zhì)，又具有一些微觀粒子，如原子、分子等特有的特性，尤其在超導(dǎo)、電磁、光學(xué)、化學(xué)、催化、標(biāo)記、表面增強、生物免疫等方面呈現(xiàn)出優(yōu)良的物理化學(xué)特性，故受到眾多研究領(lǐng)域的極大關(guān)注。納米材料作為目前新材料研究領(lǐng)域中最富有活力，對未來經(jīng)濟和社會發(fā)展有著十分重要影響的研究對象，也是納米科技中的重要組成部分。

納米金是指直徑在0.5-250nm的金超微粒子，具有量子效應(yīng)、表面效應(yīng)和宏觀量子效應(yīng)。納米金在生物電化學(xué)傳感器、光學(xué)及電化學(xué)探針、DNA修復(fù)與檢測、催化劑、生物組織修復(fù)、藥物傳遞及表面增強拉曼散射等各方面都有著極其廣泛的應(yīng)用。在醫(yī)藥領(lǐng)域中，納米金已經(jīng)廣泛用于疾病診斷，藥物檢測，細(xì)胞成像等方面。納米金自身具有一定生物活性，同時具有光熱效應(yīng)，也可以作為載體負(fù)載藥物，以上3種方式均可開發(fā)新的藥物，用于疾病的治療研究。納米金已經(jīng)用于艾滋病、腫瘤、帕金森病等疾病的治療研究中。

雙硫侖(DSF)，分子式是：C₁₀H₂₀N₂S₄，是一種戒酒藥物，服用該藥后即使飲用少量的酒，身體也會產(chǎn)生嚴(yán)重不適，而達(dá)到戒酒的目的。1948年，雅各布森(Jacobsen)等發(fā)現(xiàn)雙硫侖被人體微量吸收后，可引起面部潮紅、頭痛、腹痛、出汗、心悸、呼吸困難等癥狀，服藥者在飲酒后癥狀更加明顯，便將這種表現(xiàn)命名為“雙硫侖樣反應(yīng)”。后來，雙硫侖被開發(fā)成戒酒藥，使嗜酒者產(chǎn)生對酒精的厭惡而戒除酒癮，因此又被稱為戒酒硫。它能夠有效抑制乙醛脫氫酶的活性，阻斷乙醛的氧化代謝，造成乙醛在體內(nèi)聚積，乙醛是毒性物質(zhì)，當(dāng)體內(nèi)乙醛濃度升高時，可與體內(nèi)一些蛋白質(zhì)、磷脂、核酸等呈共價鍵結(jié)合，破壞這些物質(zhì)失活，引起機體的多種不適，從而促使患者建立對飲酒的厭惡反射，達(dá)到戒酒的目的。研究人員近年來發(fā)現(xiàn)DSF除有戒酒作用外還有抗腫瘤作用。DSF能在體內(nèi)外殺傷多種腫瘤細(xì)胞，包括直腸癌、黑色素瘤、腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌及前列腺癌。DSF能誘導(dǎo)多種黑色素瘤細(xì)胞系的凋亡，并且證實黑色素瘤細(xì)胞要比正常的黑素細(xì)胞對DSF敏感性強，指出DSF能增加細(xì)胞內(nèi)銅的攝入，誘導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞的凋亡。

二乙基二硫代氨基甲酸，分子式為(C₂H₅)₂NCSSH，是一種常見的化工原料，可用于二硫侖的制備。常見的二乙基二硫代氨基甲酸鹽有二乙基二硫代氨基甲酸二乙銨鹽(分子式為(C₂H₅)₂NCS₂[H₂N(C₂H₅)₂])，二乙基二硫代氨基甲酸鈉(分子式為(C₂H₅)₂NCSSNa)，在化學(xué)反應(yīng)中可替代二乙基二硫代氨基甲酸使用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的目的是提供一種金納米熱放療藥物載體及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明將金納米顆粒與含硫鍵抗腫瘤藥物反應(yīng)，生成基于金-硫鍵的納米藥物載體，合成方法簡單，所制備的金納米熱放療藥物載體可選擇性聯(lián)合熱治療和放射治療，對腫瘤細(xì)胞具有較強的殺傷作用。

在一方面，本發(fā)明提供了一種金納米熱放療藥物載體，包括金納米顆粒、包裹在金納米顆粒外的含硫鍵抗腫瘤藥物層，以及包覆在含硫鍵抗腫瘤藥物層外的親水性巰基化合物層，金納米顆粒與含硫鍵抗腫瘤藥物層通過共價鍵偶聯(lián)；其中，藥物載體中，金納米顆粒的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80-99.98％，含硫鍵抗腫瘤藥物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01-15％，親水性巰基化合物的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01-19.99％。

進一步地，金納米顆粒呈十二面體、立方體、球形、棒狀或不規(guī)則多面體結(jié)構(gòu)。

進一步地，含硫鍵抗腫瘤藥物為雙硫侖、二乙基二硫代氨基甲酸和二乙基二硫代氨基甲酸鹽中的一種或幾種。

進一步地，金納米顆粒與含硫鍵抗腫瘤藥物層通過二乙基二硫代氨基甲酸鍵共價偶聯(lián)。

進一步地，親水性巰基化合物層通過巰基與金納米顆粒相互連接，由于聚合物鏈較長，其會包覆在含硫鍵抗腫瘤藥物層外，進而穩(wěn)定所制備的金納米熱放療藥物載體。

進一步地，親水性巰基化合物為巰基乙醇、巰基聚乙二醇500(SH-PEG500)、巰基聚乙二醇2000(SH-PEG2000)、巰基聚乙二醇5000(SH-PEG5000)和巰基聚乙二醇10000(SH-PEG10000)中的一種或幾種。

在另一方面，本發(fā)明還提供了一種金納米熱放療藥物載體的制備方法，包括以下步驟：

將含硫鍵抗腫瘤藥物與金納米顆粒在溶劑中混合，在20-50℃下反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后離心后除去未反應(yīng)物，然后向其中加入親水性巰基化合物，離心后，得到金納米熱放療藥物載體，其中溶劑為極性有機溶劑與水的混合溶劑。

進一步地，含硫鍵抗腫瘤藥物為雙硫侖和/或二乙基二硫代氨基甲酸(舒非侖)。優(yōu)選地，含硫鍵抗腫瘤藥物為雙硫侖；雙硫侖的化學(xué)結(jié)構(gòu)含有二硫鍵，易與金納米顆粒結(jié)合并且其作為一種臨床藥物已經(jīng)用于腫瘤方面的研究。

進一步地，金納米顆粒呈十二面體、立方體、球形、棒狀或不規(guī)則多面體結(jié)構(gòu)。優(yōu)選地，金納米顆粒的為棒狀(納米金棒)。

進一步地，親水性巰基化合物為巰基乙醇、巰基聚乙二醇500(SH-PEG500)、巰基聚乙二醇2000(SH-PEG2000)、巰基聚乙二醇5000(SH-PEG5000)和巰基聚乙二醇10000(SH-PEG10000)中的一種或幾種。

進一步地，溶劑中含硫鍵抗腫瘤藥物的濃度為0.1-10mg/mL；優(yōu)選1mg/mL。

進一步地，溶劑中金納米顆粒的濃度為0.1-10mg/mL，優(yōu)選0.2mg/mL。

進一步地，溶劑中親水性巰基化合物的濃度為1-10mg/mL，優(yōu)選1mg/mL。加入過量的親水性巰基化合物以形成穩(wěn)定的金納米熱放療藥物載體。

進一步地，在20-50℃下超聲混合3-6h；優(yōu)選地，在50℃下超聲3h；有助于含硫鍵抗腫瘤藥物與金納米顆粒更好的結(jié)合。

進一步地，含硫鍵抗腫瘤藥物、金納米顆粒以及含硫鍵抗腫瘤藥物的反應(yīng)，可以進行一次或在離心后重復(fù)進行1-3次，重復(fù)進行時，可以加入不同的含硫鍵抗腫瘤藥物或巰基化合物。

進一步地，極性有機溶劑為二甲亞砜、N,N-二甲基甲酰胺、N-甲基吡咯烷酮、乙醇、甲醇、異丙醇和丙酮中的一種或幾種。優(yōu)選地，有機溶劑為二甲亞砜。

進一步地，極性有機溶劑與水的體積比為1:1-1:5。優(yōu)選地，極性有機溶劑與水的體積比為1:1。

進一步地，含硫鍵抗腫瘤藥物與金納米顆粒的質(zhì)量比為0.01:1-100:1。優(yōu)選地，含硫鍵抗腫瘤藥物與金納米顆粒的質(zhì)量比為0.1:1-5:1。

進一步地，親水性巰基化合物與金納米顆粒的質(zhì)量比為0.1:1-100:1。

在又一方面，本發(fā)明還要求保護上述金納米熱放療藥物載體作為抗腫瘤藥物的應(yīng)用。

進一步地，金納米熱放療藥物載體在激光和/或X射線照射下應(yīng)用。

進一步地，腫瘤為三陰性乳腺癌、膠質(zhì)瘤、宮頸癌和鼻咽癌細(xì)胞中的一種或幾種。

進一步地，激光的波長為500-900nm。優(yōu)選地，激光的波長為780nm。

進一步地，X射線的能量為4MeV或6MeV。

借由上述方案，本發(fā)明至少具有以下優(yōu)點：

與純藥物相比，金納米熱放療藥物載體一方面可以提高藥物對病變部位的靶向性，提高治療效果，同時降低毒副效應(yīng)；另一方面具有藥物緩釋效應(yīng)，且其中的親水性化合物合物能夠延長藥物在體內(nèi)的循環(huán)時間，增強治療效果。

本發(fā)明藥物載體中的金納米顆粒聯(lián)合光熱治療，一方面實現(xiàn)化學(xué)藥物治療功能，另一方面通過金納米顆粒將光轉(zhuǎn)化為熱，使淺表腫瘤細(xì)胞溫度上升，從而實現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的精確治療。

X射線對生物組織有破壞作用，尤其是對于分裂較旺盛的細(xì)胞，其破壞能力更強；藥物載體聯(lián)合X射線治療惡性腫瘤，不僅可以通過精準(zhǔn)放療實現(xiàn)腫瘤的精確的定位、設(shè)計和治療，還可以聯(lián)合金納米顆粒的被動靶向作用，實現(xiàn)高效殺滅腫瘤，同時減少對正常組織的損傷。

光熱療對淺表腫瘤治療的療效顯著，X射線組織穿透能力強，對深層腫瘤的治療效果顯著，因此將本發(fā)明的藥物載體聯(lián)合熱療和放射治療，可以優(yōu)勢互補，在維持藥物治療的同時，提高對各種層次腫瘤的殺傷率，同時降低毒副作用。

上述說明僅是本發(fā)明技術(shù)方案的概述，為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段，并可依照說明書的內(nèi)容予以實施，以下以本發(fā)明的較佳實施例并配合附圖詳細(xì)說明如后。

附圖說明

圖1圖示了不同濃度的金納米顆粒、金納米熱放療藥物載體和純藥物對細(xì)胞存活率的影響；

圖2圖示了不同激光能量密度對細(xì)胞存活率的影響；

圖3圖示了不同照射劑量對細(xì)胞存活率的影響；

圖4圖示了不同治療方法處理后細(xì)胞的存活比率。

具體實施方式

下面結(jié)合附圖和實施例，對本發(fā)明的具體實施方式作進一步詳細(xì)描述。以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。

實施例1

本發(fā)明的一種金納米熱放療藥物載體，包括金納米顆粒、包裹在金納米顆粒外的雙硫侖層，以及包覆在雙硫侖外的巰基乙醇，金納米顆粒與雙硫侖通過共價鍵偶聯(lián)；其中，藥物載體中，金納米顆粒的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80％，雙硫侖的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.01％，巰基乙醇的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為19.99％。其中，金納米顆粒的結(jié)構(gòu)為十二面體。

實施例2

本發(fā)明的一種金納米熱放療藥物載體，包括金納米顆粒、包裹在金納米顆粒外的二乙基二硫代氨基甲酸層，以及包覆在二乙基二硫代氨基甲酸外的巰基聚乙二醇500，金納米顆粒與二乙基二硫代氨基甲酸層通過共價鍵偶聯(lián)；其中，藥物載體中，金納米顆粒的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為85％，二乙基二硫代氨基甲酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1％，巰基聚乙二醇500的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為14％。其中，金納米顆粒的結(jié)構(gòu)為不規(guī)則多面體。

實施例3

本發(fā)明的一種金納米熱放療藥物載體，包括金納米顆粒、包裹在金納米顆粒外的二乙基二硫代氨基甲酸層，以及包覆在二乙基二硫代氨基甲酸外的巰基聚乙二醇2000，金納米顆粒與二乙基二硫代氨基甲酸層通過共價鍵偶聯(lián)；其中，藥物載體中，金納米顆粒的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為80％，二乙基二硫代氨基甲酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15％，巰基聚乙二醇2000的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5％。其中，金納米顆粒的結(jié)構(gòu)為棒狀。

實施例4

本發(fā)明的一種金納米熱放療藥物載體的制備方法如下：

首先采用傳統(tǒng)的晶種生長法制備球形金納米顆粒，具體方法如下：

將0.6mL濃度為1％的HAuCl₄加入40mL預(yù)冷的三蒸水中，再加入0.2mL0.2mol/L的K₂CO₃溶液，在不斷攪拌下，快速加入新鮮配置的0.01mol/L的NaBH₄水溶液2mL，攪拌5min后溶液由藍(lán)紫色變?yōu)榫萍t色，繼續(xù)攪拌30min，獲得球形金納米顆粒，在10000rpm離心，純水洗滌三次，于4℃下冷藏備用。

將10μL 0.1mg/mL的二乙基二硫代氨基甲酸鈉藥物與100μL 1mg/mL金納米顆粒在二甲基亞砜和水(1:1)的混合溶劑中混合，采用三氟乙酸調(diào)整溶液pH值到5.0，50℃超聲3h，超聲時注意控制溫度，有助于藥物與金納米顆粒更好的結(jié)合，然后在室溫下反應(yīng)24h。反應(yīng)結(jié)束后，高速離心反應(yīng)液，除去未反應(yīng)物，用0.1mM巰基乙醇溶液洗滌2次，純水洗滌3次，制得穩(wěn)定的金納米熱放療藥物載體。其中含有金99.98％，藥物0.01％，巰基乙醇0.01％。

實施例5

本發(fā)明的一種金納米熱放療藥物載體的制備方法如下：

首先制備金納米顆粒種子，繼而再制備金棒：向30mL 0.05mol/L CTAB中加入40μL 0.01mol/L的AgNO₃溶液，振蕩1min。再向其中加入0.8mL 0.02mol/L的HAuCl₄溶液，輕輕搖勻。然后再迅速加入0.3mL 0.1mol/L的AA(抗壞血酸)溶液，劇烈振蕩至溶液變?yōu)闊o色。最后加入0.3mL上述實施例4制備的金納米顆粒，輕輕振蕩2min后，靜置3h，讓金納米顆粒生長成金納米棒。離心(10000rpm 12min)洗滌金納米棒兩次后，將純化后的金納米棒分散在超純水中備用。

將1000μL 10mg/mL的雙硫侖藥物與10μL 10mg/mL金納米顆粒在丙酮和水(1:1)的混合溶劑中混合，50℃超聲3h，超聲時注意控制溫度，有助于藥物與金納米顆粒更好的結(jié)合，然后在室溫下反應(yīng)24h。反應(yīng)結(jié)束后，高速離心反應(yīng)液，除去未反應(yīng)物，得到載藥金棒顆粒。

再將1000μL 10mg/mL的雙硫侖藥物與10μL 10mg/mL上述載藥金棒顆粒在N,N-二甲基甲酰胺和水(1:1)的混合溶劑中混合，50℃超聲3h，在室溫下反應(yīng)24h，高速離心洗滌除去未反應(yīng)物，此為重復(fù)進行反應(yīng)一次。

繼續(xù)再將1000μL 10mg/mL的雙硫侖藥物與10μL 10mg/mL載藥金棒顆粒在甲醇和水(1:1)的混合溶劑中混合，50℃超聲3h，在室溫下反應(yīng)24h。反應(yīng)結(jié)束后，高速離心洗滌除去未反應(yīng)物，此為再重復(fù)進行反應(yīng)一次。

然后加入100μL 10mg/mL的巰基聚乙二醇2000，形成穩(wěn)定的金納米熱放療藥物載體。所加入的巰基聚乙二醇需要過量，以使金納米熱放療藥物載體處于相對穩(wěn)定的狀態(tài)，繼續(xù)高速離心三次除去未反應(yīng)物。所制金棒納米藥物載體中含有金80％，藥物15％，巰基聚乙二醇2000 5％。

實施例6

本發(fā)明的一種金納米熱放療藥物載體的制備方法如下：

首先制備金納米顆粒，繼而再制備納米金十二面體：于試管中加入雙十烷基二甲基溴化銨(DDAB，1.0mL，0.01M)、HAuCl₄(5.0mL 1mM)，AgNO₃(100μL，0.01M)，最后加入抗壞血酸(100μL，0.1M)，倒置搖勻，溶液從橙黃色變?yōu)闊o色，即得到生長溶液。該生長溶液中加入0.3mL已制好的種子溶液，在30℃水浴中靜置過夜反應(yīng)。樣品在10000rpm離心10min，去除上清液后用去離子水分散，離心/分散步驟重復(fù)三次以除去多余的表面活性劑，洗滌后的樣品分散在去離子水中，備存。

將10μL 1mg/mL的雙硫侖藥物與1000μL 0.2mg/mL納米金十二面體在N-甲基吡咯烷酮和水(1:1)的混合溶劑中混合，50℃超聲3h，超聲時注意控制溫度，有助于藥物與金納米顆粒更好的結(jié)合，然后在室溫下反應(yīng)24h。

反應(yīng)結(jié)束后，高速離心反應(yīng)液，除去未反應(yīng)物，然后加入100μL 1mg/mL的巰基聚乙二醇5000，形成穩(wěn)定的金納米熱放療藥物載體，繼續(xù)高速離心三次除去未反應(yīng)物，得到金納米熱放療藥物載體。

繼而再加入100μL 1mg/mL的巰基聚乙二醇5000，形成穩(wěn)定的金納米熱放療藥物載體，繼續(xù)高速離心三次除去未反應(yīng)物，得到金納米熱放療藥物載體，此為重復(fù)進行反應(yīng)一次。

繼而再加入100μL 1mg/mL的巰基聚乙二醇5000，形成穩(wěn)定的金納米熱放療藥物載體，繼續(xù)高速離心三次除去未反應(yīng)物，得到金納米熱放療藥物載體，此為再重復(fù)進行反應(yīng)一次。

最終所制備的金棒納米藥物載體中含有金80％，藥物0.01％，巰基聚乙二醇5000 19.99％。

實施例7

設(shè)置各組分別為金納米顆粒組(圖1中Au)、金納米熱放療藥物載體組(圖1中Au-DSF)、藥物組(圖1中DSF)。將處于對數(shù)生長期的MCF-7膠質(zhì)瘤細(xì)胞，胰酶消化，接種1×10⁶個細(xì)胞在60mm培養(yǎng)皿，第二天待其完全貼壁后，將細(xì)胞用PBS洗滌兩次，更換新鮮完全培養(yǎng)基，向培養(yǎng)液加入濃度分別為0mg/mL到20mg/mL的各組分，繼續(xù)培養(yǎng)24h后利用MTT細(xì)胞生存分析法檢測。

如圖1所示，結(jié)果表明金納米顆粒組未有顯著增加的細(xì)胞毒性；藥物在0.1mg/mL以上時，能明顯殺傷腫瘤細(xì)胞；0.1mg/mL納米金藥物載體對腫瘤細(xì)胞的存活率為80％，20mg/mL納米金藥物載體對腫瘤細(xì)胞的存活率為20％。納米金藥物載體濃度在0.1-20mg/mL間時，各組的細(xì)胞存活率具有顯著性差異，證明金納米熱放療藥物載體能有效殺傷腫瘤細(xì)胞。

實施例8

設(shè)置各組分別為激光照射組(圖2中Laser)，激光照射聯(lián)合納米金顆粒組(圖2中Au+Laser)，激光照射聯(lián)合納米金藥物載體組(圖2中Au-DSF+Laser)。處于對數(shù)生長期的宮頸癌細(xì)胞，胰酶消化，接種1×10⁶個宮頸癌細(xì)胞在60mm培養(yǎng)皿，第二天待其完全貼壁后，將細(xì)胞用PBS洗滌兩次，更換新鮮完全培養(yǎng)基，采用波長780nm的激光分別照射0W/cm²到2W/cm²，照射時間為5min。繼續(xù)培養(yǎng)24h后利用MTT細(xì)胞生存分析法檢測。

如圖2所示，結(jié)果表明激光照射組未有顯著差異；0.25W/cm²激光照射聯(lián)合納米金顆粒組腫瘤細(xì)胞存活率為80％，激光照射聯(lián)合納米金藥物載體組腫瘤細(xì)胞存活率為70％；2W/cm²激光照射聯(lián)合納米金顆粒組腫瘤細(xì)胞存活率為20％，激光照射聯(lián)合納米金藥物載體組腫瘤細(xì)胞存活率為10％。激光照射聯(lián)合納米金藥物載體組照射激光能量密度在0.25W/cm至2W/cm²之間時，各組細(xì)胞的存活率具有顯著差異，證明激光照射聯(lián)合金納米顆粒具有明顯的熱效應(yīng)，且金納米熱放療藥物載體能有效殺滅腫瘤細(xì)胞。

實施例9

設(shè)置各組分別為X射線照射組(圖3中X-ray)，X射線照射聯(lián)合納米金顆粒組(圖3中X-ray+Au)，X射線照射聯(lián)合納米金藥物載體組(圖3中X-ray+Au-DSF)。處于對數(shù)生長期的鼻咽癌細(xì)胞，胰酶消化，接種1×10⁶個細(xì)胞在60mm培養(yǎng)皿，第二天待其完全貼壁后，將細(xì)胞用PBS洗滌兩次，更換新鮮完全培養(yǎng)基，采用6MeV X射線直線加速器分別照射0Gy，2Gy，4Gy，6Gy，8Gy，照射5min，繼續(xù)培養(yǎng)24h后利用MTT細(xì)胞生存分析法檢測。

如圖3所示，結(jié)果表明X射線照射對照組在照射劑量為2Gy-4Gy之間時，腫瘤細(xì)胞存活率具有差異，但并不顯著。X射線照射聯(lián)合納米金顆粒組在照射劑量為2Gy時腫瘤細(xì)胞存活率為80％，X射線照射聯(lián)合納米金顆粒組在照射劑量為8Gy時腫瘤細(xì)胞存活率為30％；X射線照射聯(lián)合納米金藥物載體組在照射劑量為2Gy時腫瘤細(xì)胞存活率為70％，X射線照射聯(lián)合納米金藥物載體組在照射劑量為8Gy時腫瘤細(xì)胞存活率為20％。X射線照射聯(lián)合納米金藥物載體組在照射劑量為2Gy-8Gy之間時，腫瘤細(xì)胞存活率出現(xiàn)顯著差異，證明X射線照射聯(lián)合納米金藥物載體能有效治療腫瘤細(xì)胞。

實施例10

設(shè)置各組分別為純納米金棒組、納米金藥物載體組、納米金藥物載體聯(lián)合放療組、納米金藥物載體聯(lián)合光熱療組、納米金藥物載體聯(lián)合放療和光熱療組。以三陰性乳腺癌細(xì)胞為細(xì)胞模型，利用MTT細(xì)胞生存分析法檢測細(xì)胞存活率，其中熱療參數(shù)為0.5W/cm²，5min；X射線參數(shù)為4Gy，5min。

如圖4所示，圖4中橫坐標(biāo)從左到右分別代表納米金顆粒組、納米金藥物載體組、納米金藥物載體聯(lián)合X射線照射組、納米金藥物載體結(jié)合光熱療組、納米金藥物載體聯(lián)合放療和熱療組。從圖中可看出，納米金藥物載體聯(lián)合放療、光熱療的效果最好，腫瘤細(xì)胞死亡率為70％。納米金藥物載體與放療或熱療的聯(lián)合治療要比單獨治療的效果好，腫瘤細(xì)胞死亡率為50％左右，而且這兩種聯(lián)合治療效果相似。單獨納米金顆粒對細(xì)胞的治療效果最差，腫瘤細(xì)胞死亡率為2％，載藥納米金棒的細(xì)胞殺傷率略有增強，腫瘤細(xì)胞死亡率為18％。綜上所述，聯(lián)合熱療和放射治療的效果最佳。

以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式，并不用于限制本發(fā)明，應(yīng)當(dāng)指出，對于本技術(shù)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明技術(shù)原理的前提下，還可以做出若干改進和變型，如在制備過程中不加入親水性巰基化合物，或者選用其他二乙基二硫代氨基甲酸的衍生物代替本發(fā)明使用的藥物，這些改進和變型也應(yīng)視為本發(fā)明的保護范圍。