本發(fā)明屬于有機(jī)合成、超分子化學(xué)及納米材料技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種具有1,4-二氫吡啶(dhp)單元的兩親分子vno的一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡、制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

藥物傳輸系統(tǒng)(dds)對(duì)于疾病的治療具有十分重要的意義。設(shè)計(jì)一種藥物傳輸系統(tǒng)的時(shí)候尤其需要考慮兩個(gè)因素：系統(tǒng)類型，以及實(shí)現(xiàn)藥物控制釋放的響應(yīng)機(jī)制。系統(tǒng)類型通常包括樹枝狀分子，膠束，囊泡，凝膠等。其中，囊泡由于具有水相內(nèi)腔和酯質(zhì)雙分子層，因此同時(shí)具有負(fù)載親水性或疏水性藥物的能力，這使囊泡成為一種極有潛力的藥物傳輸系統(tǒng)。而實(shí)現(xiàn)藥物控制釋放的響應(yīng)機(jī)制主要包括ph、酶、氧化還原反應(yīng)、溫度、磁場(chǎng)以及光照等。

一氧化氮是自然界已發(fā)現(xiàn)的最小的分子之一。最初，一氧化氮作為一種環(huán)境污染物而受到人們的關(guān)注。但是，在隨后的研究中科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，一氧化氮在生物體內(nèi)以一種信使分子的形式廣泛參與了很多生理活動(dòng)并對(duì)免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)和心腦血管系統(tǒng)產(chǎn)生影響。因此，一氧化氮與多種疾病相關(guān)，例如帕金森病、高血壓、心臟病等。值得一提的是，近年來的研究表明癌癥與一氧化氮濃度的升高也密切相關(guān)。將對(duì)一氧化氮的研究與疾病治療相結(jié)合，是現(xiàn)今一個(gè)研究熱點(diǎn)。

綜上，一氧化氮響應(yīng)的囊泡型藥物載體的研究具有重要意義，它可以為相關(guān)疾病的診斷和治療提供一種新的途徑，甚至可能會(huì)起到無法替代的作用。目前尚未發(fā)現(xiàn)有相關(guān)的專利發(fā)明被報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的是解決至少上述問題或缺陷，并提供至少后面將說明的優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一種以1,4-二氫吡啶(dhp)為響應(yīng)開關(guān)的兩親分子vno，該分子可以在緩沖溶液中通過自主裝形成包載藥物的囊泡，并且可以在一氧化氮刺激下實(shí)現(xiàn)包載藥物的釋放，該載藥囊泡具有很好的生物相容性。

本發(fā)明還有一個(gè)目的是提供一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡的合成方法，以及該一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡在親水性或疏水性藥物的包載及控制釋放中的應(yīng)用。

為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，提供了一種一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡，其構(gòu)成成分為含有1,4-二氫吡啶單元的兩親分子vno，所述兩親分子vno的結(jié)構(gòu)式如下：

優(yōu)選的是，其中，所述兩親分子vno由以下制備方法制備，其合成路線如下：

所述制備方法的具體步驟包括：

步驟i、按比例稱取式1化合物、對(duì)羥基苯乙醇以及催化劑于無水溶劑中，堿性條件下反應(yīng)5小時(shí)后，柱層析分離得到式2化合物；

步驟ii、將所述步驟i得到的式2化合物和氧化劑于無水溶劑中，將式2化合物中的羥基氧化為醛基后，產(chǎn)物與乙酰乙酸十六酯、濃氨水溶于溶劑中，在氬氣氣氛下反應(yīng)20小時(shí)后，柱層析分離得到式3化合物；

步驟iii、將所述步驟ii得到的式3化合物于無水溶劑中，加入三氟乙酸酸去除羥基保護(hù)基團(tuán)叔丁基二甲基硅基tbs，反應(yīng)30分鐘后，減壓蒸餾除去溶劑，加入碳酸氫鈉去除殘余的三氟乙酸，柱層析分離得到式4化合物；

步驟iv、稱取所述步驟iii得到的式4化合物和堿于無水溶劑中，滴加2-氯-2-氧-1,3,2-二氧磷雜環(huán)戊烷，反應(yīng)30分鐘后，抽濾，濾液旋干得到的粗產(chǎn)物與三甲胺在密封條件下反應(yīng)15小時(shí)后，抽濾，洗滌，得到兩親分子vno。

優(yōu)選的是，其中，在所述步驟i中，催化劑為碘化鉀，堿為碳酸鉀。

優(yōu)選的是，其中，在所述步驟ii中，所述氧化劑為戴斯-馬丁氧化劑。

優(yōu)選的是，其中，在所述步驟iv中，所述堿為咪唑。

本發(fā)明的目的還可以進(jìn)一步由一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡的制備方法來實(shí)現(xiàn)，該方法如下步驟：將兩親分子vno溶于有機(jī)溶劑后，旋干，得到脂質(zhì)薄膜，向所述脂質(zhì)薄膜中加入含有水溶性藥物的pbs緩沖溶液，渦流震蕩、超聲驅(qū)動(dòng)以及擠壓的外力誘導(dǎo)下通過自組裝形成一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡，并通過葡聚糖凝膠柱除去未利用的水溶性藥物；其中，pbs緩沖溶液的ph為7.4,摩爾濃度為50mm。

優(yōu)選的是，其中，有機(jī)溶劑為二氯甲烷，水溶性藥物為200mm的羧基熒光素，渦流震蕩時(shí)間為2分鐘，超聲驅(qū)動(dòng)的時(shí)間為10分鐘，溫度為50℃；擠壓選用的濾膜孔徑為100nm，擠壓次數(shù)為20次。

優(yōu)選的是，其中，形成的一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡的粒徑分布范圍為90～200nm。

為了實(shí)現(xiàn)根據(jù)本發(fā)明的這些目的和其它優(yōu)點(diǎn)，還提供了一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡在親水性或疏水性藥物的包載及控制釋放中的應(yīng)用。

優(yōu)選的是，其中，控制釋放的應(yīng)用是在一氧化氮刺激下實(shí)現(xiàn)的，實(shí)現(xiàn)控制釋放的方法包括：向載藥囊泡的水溶液中加入飽和一氧化氮溶液后，載藥囊泡破裂釋放包載藥物；或者刺激raw264.7細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)源型一氧化氮后，通過內(nèi)吞作用進(jìn)入細(xì)胞的載藥囊泡破裂釋放包載藥物。

本發(fā)明至少包括以下有益效果：

1、通過漢奇反應(yīng)合成了兩親分子vno的基本骨架，該反應(yīng)操作簡(jiǎn)單，且可以根據(jù)具體需求預(yù)先對(duì)各單體模塊進(jìn)行修飾，最后組合得到一系列具有不同性能的兩親分子，合成方法可拓展性強(qiáng)；

2、兩親分子具有1,4-二氫吡啶(dhp)單元，該結(jié)構(gòu)對(duì)一氧化氮的響應(yīng)具有很好的專一性和靈敏度，從而賦予載藥囊泡很強(qiáng)的控制釋放能力；

3、通過本發(fā)明提供的方法制備的載藥囊泡粒徑在90-200nm之間，平均粒徑約為138nm，該粒徑的囊泡易于被細(xì)胞內(nèi)吞從而使負(fù)載藥物在細(xì)胞內(nèi)釋放；

4、該兩親分子及其代謝產(chǎn)物毒性很小，具有很好的生物相容性，因而具有較大的實(shí)際應(yīng)用潛力。

本發(fā)明的其它優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將部分通過下面的說明體現(xiàn)，部分還將通過對(duì)本發(fā)明的研究和實(shí)踐而為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解。

附圖說明

圖1為本發(fā)明的兩親分子vno臨界膠束濃度測(cè)定曲線示意圖；

圖2為本發(fā)明實(shí)施例中一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡粒徑分布；

圖3為本發(fā)明實(shí)施例中一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡透射電鏡圖

圖4為本發(fā)明實(shí)施中的載藥囊泡的藥物完全釋放曲線示意圖；

圖5為本發(fā)明實(shí)施中的載藥囊泡在不同當(dāng)量一氧化氮作用下的藥物釋放量隨時(shí)間變化曲線示意圖；

圖6為本發(fā)明實(shí)施中的載藥囊泡與不同當(dāng)量一氧化氮作用后的釋放曲線示意圖；

圖7為本發(fā)明實(shí)施中兩親分子vno的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果示意圖；

圖8為本發(fā)明實(shí)施中的載藥囊泡被細(xì)胞內(nèi)吞后的表達(dá)照片圖(熒光/明場(chǎng))。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的詳細(xì)說明，以令本領(lǐng)域技術(shù)人員參照說明書文字能夠據(jù)以實(shí)施。

應(yīng)當(dāng)理解，本文所使用的諸如“具有”、“包含”以及“包括”術(shù)語并不配出一個(gè)或多個(gè)其它元件或其組合的存在或添加。

<實(shí)例1>

一種一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡，其構(gòu)成成分為含有1,4-二氫吡啶單元的兩親分子vno，所述兩親分子vno的結(jié)構(gòu)式如下：

上述兩親分子vno由以下制備方法制備，其合成路線如下：

所述制備方法的具體步驟包括：

步驟i、將化合物1(26.7g,100mmol)、對(duì)羥基苯乙醇(13.8g,100mmol)、碳酸鉀(48g,400mmol)和碘化鉀(1.7g,10mmol)加入到300ml乙腈中，加入少量4a分子篩，加熱回流5h以上，tlc跟蹤至反應(yīng)完全。冷卻至室溫，抽濾，濾渣用100ml乙腈洗滌。合并濾液，旋蒸除去溶劑，粗產(chǎn)品以乙酸乙酯/石油醚＝1/4為流動(dòng)相，硅膠柱分離，得到25.6g無色油狀液體式2化合物(產(chǎn)率79％)；

步驟ii、將式2化合物(16.2g,50mmol)溶于100ml二氯甲烷中，將戴斯馬丁氧化劑(dmp,23.3g,55mmol)分批逐次加入到溶液中，全部加完后室溫?cái)嚢?h.以硅膠作為助濾劑抽濾，并用100ml二氯甲烷洗滌硅膠。旋蒸除去溶劑，得到14.2g淡黃色油狀液體；

將此淡黃色油狀液體和式1化合物(14.4g,44mmol)加入到200ml乙醇中，滴加20ml25％濃氨水。氮?dú)獗Ｗo(hù)下回流20h。冷卻至室溫，旋蒸除去溶劑，粗產(chǎn)品以乙酸乙酯/石油醚＝1/6為流動(dòng)相，硅膠柱分離，得到14.9g白色固體式3化合物(產(chǎn)率35％)；

步驟iii、將式3化合物(9.4g,10mmol)溶解在50ml二氯甲烷中，滴加三氟乙酸(1.4g,12mmol)，室溫?cái)嚢?.5h，然后向母液中加入30ml飽和碳酸氫鈉溶液，充分震蕩后分液，水相用乙酸乙酯萃取(50ml×2次)。合并有機(jī)相，無水硫酸鈉干燥，旋蒸除去溶劑，粗產(chǎn)品以乙酸乙酯/石油醚＝1/3為流動(dòng)相，硅膠柱分離，得到7.6g白色固體式4化合物，產(chǎn)率93％；

步驟iv、將式4化合物(4.1g,5mmol)和咪唑(340mg,5mmol)溶于15ml甲苯中，冰浴下加入2-氯-2-氧-1,3,2-二氧磷雜環(huán)戊烷(710mg,5mmol)。加完后逐漸升至室溫，攪拌0.5h。過濾除去不溶物，濾渣用5ml甲苯洗滌。合并濾液，旋蒸除去溶劑，得到4.3g白色固體；

將此白色固體加到20ml耐壓瓶中，加入10ml三甲胺溶液(2m乙腈溶液，20mmol)。封閉后加熱至80℃反應(yīng)15h。反應(yīng)體系在冰水浴中冷卻，析出固體。抽濾，固體用10ml乙腈洗滌，干燥，得到5.2g白色固體即兩親分子vno，產(chǎn)率88％。

式2化合物的結(jié)構(gòu)式及表征如下：

¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ7.07(d,j＝8.5hz,2h),6.79(d,j＝8.6hz,2h),3.91(t,j＝6.5hz,2h),3.77(t,j＝6.5hz,2h),3.62(t,j＝6.3hz,2h),2.75(t,j＝6.5hz,2h),1.78(tt,j＝8.6,6.3hz,2h),1.68–1.57(m,2h),0.84(s,9h),0.00(s,6h).¹³cnmr(100mhz,cdcl3)151.67,130.52,129.9,114.54,67.76,63.67,62.83,38.33,29.37,26.0,25.91,18.33,-5.25；esi-ms:m/zc18h32o3sina[m+na]⁺,calcd.347.2,found347.3.

式3化合物的結(jié)構(gòu)式及表征如下：

mp.46～48℃,¹hnmr(400mhz,meodδ6.79(d,j＝8.5hz,2h),6.63(d,j＝8.6hz,2h),4.03(t,j＝5.8hz,1h),3.95–3.77(m,6h),3.63(t,j＝6.2hz,2h),2.36(d,j＝5.8hz,2h),2.11(s,5h),1.79–1.68(m,2h),1.60(dq,j＝9.8,6.4hz,2h),1.52(p,j＝6.4hz,4h),1.20(s,48h),0.83(d,j＝7.6hz,15h),0.00(s,6h).¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ167.89,157.36,145.43,145.40,131.18,130.94,113.33,101.64,67.78,63.74,63.01,62.85,41.16,35.42,32.81,31.92,29.71,29.69,29.66,29.64,29.61,29.60,29.44,29.41,29.36,28.77,26.20,25.98,25.94,25.75,22.68,19.09,18.32,14.11,-5.31.esi-ms:m/zc58h103no6sina[m+h]⁺,calcd.938.7627,found.938.7620.

式4化合物的結(jié)構(gòu)式及表征如下：

mp.83～84℃,¹hnmr(400mhz,cdcl3)δ6.89(d,j＝8.5hz,2h),6.71(d,j＝8.5hz,2h),5.24(s,1h),4.18(t,j＝5.0hz,1h),4.03(ddt,j＝18.9,16.4,6.4hz,6h),3.71(t,j＝6.2hz,2h),2.52(d,j＝5.0hz,2h),2.14(s,5h),1.92–1.80(m,2h),1.74(dq,j＝9.4,6.8,6.3hz,2h),1.63(p,j＝6.8hz,4h),1.25(s,48h),0.88(t,j＝6.7hz,6h).¹³cnmr(101mhz,cdcl3)δ167.92,156.98,145.59,131.43,131.05,113.45,101.43,67.75,63.76,62.58,41.08,35.39,31.92,29.71,29.66,29.64,29.53,29.36,28.79,26.20,25.79,22.69,19.05,14.12.esi-ms:m/zc52h89no6na[m+h]⁺,calcd.824.6762,found.824.6757.

兩親分子vno的結(jié)構(gòu)式及表征如下：

mp.46～48℃,¹hnmr(400mhz,meod)δ6.86(d,j＝8.3hz,1h),6.72(d,j＝8.4hz,1h),4.26(s,1h),4.14(t,j＝5.4hz,1h),4.09–3.81(m,4h),3.70–3.57(m,1h),3.22(s,3h),2.45(d,j＝5.5hz,1h),2.16(s,2h),1.92–1.74(m,2h),1.62(q,j＝6.7hz,2h),1.29(s,21h),0.90(t,j＝6.7hz,3h).¹³cnmr(101mhz,thf-d8)δ167.50,157.66,147.58,131.53,131.26,113.34,99.70,67.62,64.89,63.04,59.49,53.91,41.23,35.60,32.19,30.03,30.01,29.94,29.75,29.64,29.30,27.75,26.59,26.12,22.88,17.85,13.79,0.00.

除以上表征外，通過芘熒光法測(cè)定兩親分子vno的臨界膠束濃度為18mg/l。測(cè)定曲線如圖1所示。

<實(shí)例2>

由實(shí)施例1中兩親分子vno制備一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡的方法：

以兩親分子vno在pbs緩沖溶液(50mm，ph7.4)中制備載藥囊泡的方法，所述方法具體如下：

稱取兩親分子vno(5.0mg,5μmol)于50ml圓底燒瓶中，加入10ml二氯甲烷使之溶解。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑后，得到一層附著于燒瓶內(nèi)壁的脂質(zhì)薄膜。向瓶中加入1ml羧基熒光素溶液(cf，200mm，溶解于pbs緩沖溶液中，并加入1滴5mnaoh溶液助溶)。將圓底燒杯渦流震蕩2分鐘，使薄膜脫落。然后50℃水浴中超聲10分鐘，得到大單室囊泡。將此溶液通過100nm孔徑的濾膜反復(fù)擠壓20次以上，使囊泡的粒徑基本分布在預(yù)期范圍(90-200納米)，最后，以pbs緩沖液為流動(dòng)相，通過葡聚糖凝膠柱去除游離的羧基熒光素。得到的脂質(zhì)體懸液用pbs緩沖液定容至500ml備用。兩親分子vno濃度為10μm。

包裹羧基熒光素(模擬藥)的囊泡通過動(dòng)態(tài)光散射實(shí)驗(yàn)(dls，圖2)和透射電子顯微鏡拍照(tem，圖3)表征。dls結(jié)果顯示粒徑分布在90-200nm的較窄范圍，平均粒徑約138nm；從tem照片獲得的結(jié)果與dls基本相符。少量囊泡顯示出較小的尺寸(數(shù)十納米)，可能是tem拍照過程中，囊泡在真空環(huán)境下失水造成的。

<實(shí)例3>

載藥囊泡的藥物體外釋放：

以490nm為激發(fā)波長，測(cè)定載藥囊泡儲(chǔ)備液在加入tritonx-100(0.5％)前后的熒光光譜，如圖4所示。以加入tritonx-100后脂質(zhì)體儲(chǔ)備液發(fā)射光譜在520nm處熒光強(qiáng)度為模擬藥完全釋放后的熒光強(qiáng)度。

向載藥囊泡儲(chǔ)備液中加入不同當(dāng)量的一氧化氮儲(chǔ)備液，體系熒光發(fā)射光譜在520nm處熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的曲線如圖5所示。從圖中可以看出：1)熒光強(qiáng)度在反應(yīng)進(jìn)行20min時(shí)基本不再變化，標(biāo)志反應(yīng)已進(jìn)行完全，載藥囊泡不再釋放模擬藥；2)當(dāng)加入3當(dāng)量一氧化氮時(shí)，熒光強(qiáng)度已接近可達(dá)到的最大值，標(biāo)志3當(dāng)量一氧化氮可以使模擬藥基本釋放完全；3)在不加入一氧化氮時(shí)，熒光強(qiáng)度基本沒有變化，說明載藥囊泡具有較好的穩(wěn)定性。載藥囊泡與不同當(dāng)量一氧化氮反應(yīng)完全的熒光譜圖如圖6所示。

<實(shí)例4>

兩親分子vno及其代謝產(chǎn)物的細(xì)胞毒性分析：

為了測(cè)定兩親分子vno及其代謝產(chǎn)物的生物相容性，我們利用四種細(xì)胞hela，a549，hek293t以及raw264.7通過mtt法測(cè)定其細(xì)胞毒性。細(xì)胞在每孔10⁴數(shù)量級(jí)的96孔板中進(jìn)行種植培養(yǎng)。生長環(huán)境為含有5％二氧化碳的空氣氣氛，溫度為37℃。在對(duì)數(shù)級(jí)增長階段進(jìn)行收割，然后將細(xì)胞分組，分別用5μm,10μm,20μm,40μm,60μm,80μm,100μm濃度的vno及其代謝產(chǎn)物與細(xì)胞作用，培養(yǎng)12小時(shí)后，加入mtt的pbs溶液(20μl,5mg/ml)，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)。除去殘留的培養(yǎng)基，向每組中加入100μldmso，通過酶標(biāo)儀在490nm處對(duì)每組細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)。

各實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞毒性分析見圖7。其中，圖7a為raw264.7細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，圖7b為a549細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，圖7c為hek293t細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，圖7d為hela細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果，由細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)可見，即使在較高濃度下，細(xì)胞存活性依然很高，可以達(dá)到80％以上，說明兩親分子vno及其與一氧化氮的代謝產(chǎn)物細(xì)胞毒性均很低，具有很好的生物相容性。

<實(shí)例5>

載藥囊泡的藥物細(xì)胞內(nèi)釋放：

為了測(cè)定由兩親分子vno制備的載藥囊泡在細(xì)胞內(nèi)的刺激釋放效果，選取生長良好的小鼠巨噬細(xì)胞raw264.7進(jìn)行模擬藥的細(xì)胞內(nèi)釋放實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞在含有5％二氧化碳的空氣氣氛，溫度為37℃的環(huán)境下培養(yǎng)24h，然后分為以下四組：

1)對(duì)照組；

2)加入脂多糖(lps，1μg/ml)作用4小時(shí)，刺激誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(inos)產(chǎn)生內(nèi)源型一氧化氮；

3)加入lps(1μg/ml)，同時(shí)加入n^g-甲基-l-精氨酸(l-nma，2mm)作用4小時(shí)，阻斷內(nèi)源型一氧化氮產(chǎn)生；

4)加入一氧化氮儲(chǔ)備液(30μl)作用10分鐘，作為外源型一氧化氮。

然后向上述4組中分別加入脂質(zhì)體儲(chǔ)備液(10μm)，繼續(xù)作用20分鐘。無論細(xì)胞中有內(nèi)源型或外源型一氧化氮，都可以在綠色通道下觀察到較強(qiáng)的熒光。而當(dāng)無外界刺激產(chǎn)生一氧化氮，或者產(chǎn)生一氧化氮的過程被阻斷時(shí)，只能觀察到微弱的熒光，如圖8所示。其中8a～8d為熒光照片，8e～8h為明場(chǎng)照片。通過此實(shí)驗(yàn)說明：1)該載藥囊泡容易通過細(xì)胞內(nèi)吞作用，將模擬藥物運(yùn)輸?shù)郊?xì)胞中；2)載藥囊泡可以與細(xì)胞內(nèi)的一氧化氮發(fā)生反應(yīng)，達(dá)到控制釋放模擬藥物的目的。

綜上所述，本發(fā)明提供的一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡由兩親分子vno在pbs緩沖溶液中形成，兩親分子vno的合成方法簡(jiǎn)單，且拓展性強(qiáng)。一氧化氮響應(yīng)的載藥囊泡具有很好的一氧化氮響應(yīng)性，在藥物負(fù)載和控制釋放領(lǐng)域有很好的應(yīng)用前景。

盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用。它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域。對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改。因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的圖例。