本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體地說，是一種苦參堿衍生物在制備預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

苦參堿是從豆科槐屬植物苦豆子、苦參等中分離得到的生物堿，廣泛存在于苦參(Sophora flavescens ait)的根、植株和果實中，屬于四環(huán)喹嗪啶類化合物，主要包括苦參堿、槐果堿和氧化苦參堿等，具有抗氧化、抗炎等多種藥理作用。近年來，苦參堿(matrine)因其在研究與臨床中表現(xiàn)出顯著的抗炎活性，受到研究者的極大關(guān)注。研究證實，苦參堿主要通過抑制NF-κB激活來發(fā)揮作用。Cui等(Cui,Zhang,Neuroprotection and underlying mechanisms of oxymatrine in cerebral ischemia of rats,Journal/Neurol Res,2011,33:319-324)報道在腦組織缺血性模型中，氧化苦參堿能夠明顯抑制NF-κB的激活，拮抗局部缺血，保護神經(jīng)組織。苦參堿在肝癌細胞也能抑制NF-κB(Luo,He,[Inhibitory effect of pyrrolidine dithiocarbamate combined with matrine on the growth of human hepatocellular carcinoma xenografts],Journal/Zhonghua Gan Zang Bing Za Zhi,2011,19:275-280)。Li等(Li,Zhang,Matrine inhibits the invasive properties of human osteosarcoma cells by downregulating the ERK-NF-kappaB pathway,Journal/Anticancer Drugs,2014,25:1035-1043)報道苦參堿通過降低基質(zhì)金屬蛋白酶-2，9的表達，p50和p65核心因子的轉(zhuǎn)錄，IκB-β磷酸化水平，抑骨肉瘤細胞體內(nèi)外增殖和體外細胞轉(zhuǎn)移。Zhang等(Zhang,Liu,Antiinflammatory effects of matrine in LPS-induced acute lung injury in mice,Journal/Eur J Pharm Sci,2011,44:573-579)報道，苦參堿能夠抑制NF-κB，抑制脂多糖誘導的肺損傷TNF-a,IL-6和HMGB1分子表達，減輕肺水腫和血管通透性。

天然苦參堿的生物利用度差，限制了其應(yīng)用。我們通過結(jié)構(gòu)修飾、活性測定構(gòu)效關(guān)系等手段進一步優(yōu)化其結(jié)構(gòu)，降低毒性、提高活性及生物利用度?；惫麎A與苦參堿在結(jié)構(gòu)上非常相似，存在α-β不飽和己內(nèi)酰胺。對它的雙鍵進行結(jié)構(gòu)修飾后可獲得一系列新型苦參堿衍生物。我們以槐果堿為原料，經(jīng)Lawesson’s試劑處理將其羰基氧原子轉(zhuǎn)換成硫原子，再通過加成反應(yīng)在13位引入一系列的含胺基團，制備得到13-甲氨基-18-硫代苦參堿M19。對其抗炎活性研究表明(Hu,Wang,Synthesis and in vitro inhibitory activity of matrine derivatives towards pro-inflammatory cytokines,Journal/Bioorg Med Chem Lett,2010,20:7537-7539,Xu,Hu,Bioactive compound reveals a novel function for ribosomal protein S5in hepatic stellate cell activation and hepatic fibrosis,Journal/Hepatology,2014,60:648-660)：M19能夠顯著抑制LPS誘導巨噬細胞激活并顯著抑制NF-κB的激活。

骨質(zhì)疏松癥(Osteoporosis,OP)是以骨量降低、骨組織顯微結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，以骨脆性增加、骨強度下降、易骨折為特征的一種慢性炎癥性疾病。骨吸收與骨形成的失衡是骨質(zhì)疏松的病理生理學基礎(chǔ)，由促骨形成的成骨細胞和促骨吸收的破骨細胞調(diào)控(Del Puente,Esposito,Physiopathology of Osteoporosis:From Risk Factors Analysis to Treatment,Journal/J Biol Regul Homeost Agents,2015,29:527-531)。研究表明，在慢性炎癥過程中轉(zhuǎn)錄因子NF-κB(nuclear factor-kappa B，NF-κB)大量激活，骨質(zhì)疏松的發(fā)生與細胞核因子κB的持續(xù)激活關(guān)系密切(Abu-Amer,NF-kappaB signaling and bone resorption,Journal/Osteoporos Int,2013,24:2377-2386)。NF-κB激活能夠顯著促進破骨細胞的分化、功能與存活。炎癥因子激活破骨細胞中的NF-κB轉(zhuǎn)錄因子，激活下游信號通路，引起相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄翻譯，最終導致破骨細胞分化、成熟與活化，引起骨吸收，造成骨質(zhì)疏松。研究證實，抑制NF-κB表達和轉(zhuǎn)錄活性后能夠顯著改善骨質(zhì)疏松情況(Yuan,Xu,Leonurine hydrochloride inhibits osteoclastogenesis and prevents osteoporosis associated with estrogen deficiency by inhibiting the NF-kappaB and PI3K/Akt signaling pathways,Journal/Bone,2015,75:128-137,Zhang,Liu,Histone Acetyltransferase GCN5Regulates Osteogenic Differentiation of Mesenchymal Stem Cells by Inhibiting NF-kappaB,Journal/J Bone Miner Res,2016,31:391-402,Yang,Blair,The Proteasome Inhibitor Carfilzomib Suppresses Parathyroid Hormone-induced Osteoclastogenesis through a RANKL-mediated Signaling Pathway,Journal/J Biol Chem,2015,290:16918-16928,Guan,Zhao,Epoxyeicosanoids suppress osteoclastogenesis and prevent ovariectomy-induced bone loss,Journal/FASEB J,2015,29:1092-1101)。

已有的文獻和診療指南報道，用于治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的藥物主要有：骨吸收抑制劑(包括雙膦酸鹽、雌激素療法和選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑)和骨形成促進劑(甲狀旁腺激素)。目前治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的治療藥物之間沒有存在相互通用的文獻報道和臨床實踐。

目前尚未有任何文獻報道苦參堿衍生物具有治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的作用。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種苦參堿衍生物的新用途，特別是在制備預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明在前期的實驗中，通過HE切片和Micro-CT結(jié)果證明苦參堿衍生物可明顯減輕小鼠去卵巢后的骨質(zhì)丟失，對肝腎功能無明顯影響。

本發(fā)明的第一方面，提供一種苦參堿衍生物在制備預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥藥物中的應(yīng)用，所述的苦參堿衍生物的結(jié)構(gòu)如通式I所示：

其中X是氧原子或硫原子；

其中Y選自i或ii或iii：

i.取代氧基，選自甲氧基，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基或芐氧基，優(yōu)選的是甲氧基；

ii.取代硫基，選自甲硫基，乙硫基，正丙硫基，正丁硫基，正戊硫基，正己硫基，苯硫基，芐硫基或?qū)妆搅蚧?，?yōu)選的是對甲苯硫基；

iii.氨基、取代氨基或環(huán)氨基，取代氨基為單取代或多取代，氨基的取代基選自飽和或不飽和烴基，飽和烴基為甲基、乙基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、正丁基、異丁基、正戊基、環(huán)戊基、正己基或環(huán)己基；不飽和烴基為烯丙基、炔丙基、芐基或取代芐基，取代芐基可位于苯環(huán)的鄰、間、對位，單取代或多取代，芐基的取代基選自(a)鹵素，F(xiàn)、Cl、Br、I；或(b)甲基、乙基、正丙基、異丙基；或(c)甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基；環(huán)氨基為哌啶基、四氫吡咯基和哌嗪基。

所述的苦參堿衍生物還可以是上述通式化合物藥學上可接受的鹽類，如鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、氫溴酸鹽、草酸鹽、檸檬酸鹽、甲磺酸鹽等。

本發(fā)明所述的苦參堿衍生物的制備方法可參考專利文獻CN101704817A。本發(fā)明合成的部分優(yōu)選化合物(具有以下通式)的化學結(jié)構(gòu)、產(chǎn)率、核磁和質(zhì)譜數(shù)據(jù)如表1所示。

表1部分優(yōu)選化合物的結(jié)構(gòu)、產(chǎn)率、質(zhì)譜和分子式

優(yōu)選的，所述的苦參堿衍生物為13-甲氨基-18-硫代苦參堿(M19)，其結(jié)構(gòu)式如下所示：

體內(nèi)動物實驗表明M19化合物對小鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的具有顯著的保護作用，實驗結(jié)果顯示M19能夠顯著抑制去卵巢小鼠骨量丟失，增加骨小梁數(shù)量，可用于制備抗骨質(zhì)疏松藥物。

優(yōu)選的，所述的預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥藥物為注射劑，給藥方式包括：靜脈、局部給藥等。

優(yōu)選的，所述的預(yù)防或治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥藥物除包含治療有效量的上述苦參堿衍生物，還含有常規(guī)藥用賦形劑、載體或稀釋劑。

本發(fā)明為苦參堿衍生物提供了一種新用途，也為絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防和治療提供了新的思路。

附圖說明

圖1.體外實驗中，M19抑制破骨細胞形成。A為M19的結(jié)構(gòu)。B為MTT實驗的結(jié)果。C為礦化結(jié)節(jié)的結(jié)果。D為從BMMC細胞中誘導出的TRAP陽性細胞的結(jié)果。E為從RAW264.7細胞中誘導出的TRAP陽性細胞的結(jié)果。*p＜0.05，**p＜0.01。

圖2.M19抑制破骨細胞發(fā)生相關(guān)標志物的表達。圖2為五組中TRAP，Cathepsin K，TRAF 6，MMP9和CTR的蛋白質(zhì)印跡結(jié)果和半定量分析結(jié)果。下圖為目的條帶掃描圖，上圖為光密度分析，Beta actin作為參照蛋白。數(shù)據(jù)表示為平均值±方差，實驗設(shè)置3次獨立的生物學重復(fù)。**p＜0.01，*p＜0.05，vs誘導組。①RW264.7細胞對照組；②RW264.7細胞M-CSF和Rankl誘導組；③M19低濃度處理且誘導組；④M19中濃度處理且誘導組；⑤M19高濃度處理且誘導組。

圖3.M19抑制破骨細胞形成中的NF-κB，MAPK和PI3K/Akt三個通路。A為p65以及激活的p65的免疫熒光圖片。B為核位置的熒光強度與整個細胞熒光強度的比值。C為NF-κB通路相關(guān)蛋白，p65，p50及IkBa蛋白磷酸化檢測結(jié)果。D為MAPK通路三組蛋白的磷酸化檢測結(jié)果。E為MAPK通路蛋白Rps5表達及PI3K和Akt蛋白磷酸化檢測結(jié)果。F為各組細胞內(nèi)NFATc1基因mRNA的半定量檢測結(jié)果。下圖為目的條帶掃描圖，上圖為光密度分析，蛋白和mRNA含量以Beta actin為內(nèi)參，磷酸化檢測則以總蛋白為參照。數(shù)據(jù)表示為平均值±方差，實驗設(shè)置3次獨立的生物學重復(fù)。①RW264.7細胞對照組；②RW264.7細胞M-CSF和Rankl誘導組；③M19高濃度處理且誘導組。**p＜0.01，*p＜0.05，vs誘導組。

圖4.在小鼠體內(nèi)實驗中，M19對小鼠去卵巢后骨量丟失具有明顯的抑制作用，對小鼠肝臟組織形態(tài)無明顯損害。A為6周后小鼠股骨遠端干骺端切片HE染色，顯示去卵巢組小鼠骨小梁數(shù)目較正常組明顯減少，給予M19后小鼠股骨遠端干骺端骨小梁面積明顯多于卵巢切除組。B為6周后小鼠股骨遠端Micro-CT二維和三維表現(xiàn)，顯示去卵巢組小鼠骨小梁數(shù)目較正常組明顯減少，給予M19后小鼠股骨遠端干骺端骨小梁數(shù)目明顯多于卵巢切除組。C為使用計算機軟件對骨小梁數(shù)量(Tb.N)、骨表面積和組織體積之比(BS/TV)、相對骨體積或骨體積分數(shù)(BV/TV)、骨小梁連接數(shù)(Tb.Pf)的分析結(jié)果，發(fā)現(xiàn)差異具有統(tǒng)計學意義。D為6周后小鼠血清中IL-6，TNF-α和TRAP的含量及統(tǒng)計結(jié)果。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明提供的具體實施方式作詳細說明。

實施例1.M19對C57小鼠去卵巢后骨質(zhì)丟失具有抑制作用

一、實驗材料：

苦參堿衍生物M19全稱為13-甲氨基-18-硫代苦參堿。合成方法：以槐果堿為原料，經(jīng)Lawesson’s試劑處理將其羰基氧原子轉(zhuǎn)換成硫原子，再通過加成反應(yīng)在13位引入一系列的含胺基團，制備得到13-甲氨基-18-硫代苦參堿M19。(Xu,Hu,Bioactive compound reveals a novel function for ribosomal protein S5in hepatic stellate cell activation and hepatic fibrosis,Journal/Hepatology,2014,60:648-660)。采用PBS將M19稀釋成不同濃度的藥物溶液。

二、實驗方法：

(一)動物實驗

1、6-8周雌性C57小鼠，購自第二軍醫(yī)大學實驗動物中心分組情況：將30只C57小鼠隨機分為3組，每組為10只，分別為假手術(shù)組、去卵巢組、M19干預(yù)組

去卵巢組：采用外科手術(shù)摘除小鼠雙側(cè)卵巢。

假手術(shù)組：除不切除小鼠卵巢外其余操作與去卵巢組相同。

M19干預(yù)組：切除小鼠雙側(cè)卵巢后每日一次腹腔注射給予小鼠2mg/10g的M19

2、飼養(yǎng)6周后處死小鼠，取小鼠的雙側(cè)股骨及血清。

(1)小鼠股骨使用多聚甲醛溶液進行固定、EDTA脫鈣后，石蠟包埋切片(4mm)，進行蘇木精-伊紅(HE staining)染色，顯微鏡下觀察小鼠股骨遠端干骺端并拍照。

(2)將固定的小鼠股骨行Micro-CT檢查，采用SKYSCAN 1176微型CT機對小鼠股骨遠端行Micro-CT掃描，構(gòu)建小鼠股骨遠端干骺端二維及三維圖像，并使用CT機自帶軟件對股骨骨小梁數(shù)量，骨表面積和組織體積之比，進行分析，相對骨體積，骨礦物質(zhì)密度，骨小梁連接數(shù)進行分析，獲得定量結(jié)果。

(3)取得的血清在4度條件下冷藏1小時后2500轉(zhuǎn)10min進行離心，取得上清液。對血清中IL-6，TNF-α和TRAP進行檢測。

(二)細胞實驗

1.首先進行M19的細胞毒性試驗，采用MTT試驗方法。MTT濃度為5mg/ml，將BMMCs細胞以10×10⁴/ml的密度接種于96孔板，每個孔100μl。經(jīng)過在37度，5％二氧化碳的條件下24小時的培養(yǎng)之后，加入M19，濃度梯度分別為1.2，3.7，11.1，33.3and 100μM。經(jīng)過48小時的培養(yǎng)后，加入MTT溶液等待2小時。在490nm吸光度下使用ELISA板讀數(shù)器計數(shù)細胞數(shù)目。

2.從C57小鼠骨髓中獲得骨髓干細胞，進行培養(yǎng)。培養(yǎng)液使用DMEM低糖培養(yǎng)基，雙抗，胎牛血清混合培養(yǎng)液。使用EDTA酶進行消化傳代。實驗分為兩組。在進行成骨細胞誘導的同時，一組不做干預(yù)，另一組給予5μM的M19，分別在7，14，21天觀察礦化結(jié)節(jié)形成情況，并拍照。

3.實驗分為5組。第一組為RW264.7細胞對照組；第二組為RW264.7細胞且使用M-CSF和RANKL誘導組；第三組為1μM M19處理且使用M-CSF和RANKL誘導組；第四組為2μM M19處理且使用M-CSF和RANKL誘導組；第五組為5μM M19處理且使用M-CSF和RANKL誘導組。處理時間為細胞誘導后第三天，細胞再經(jīng)4天誘導。細胞完成總計7天的誘導后，進行TRAP染色，觀察破骨細胞誘導的數(shù)量并計數(shù)進行統(tǒng)計學分析。相同方法，培養(yǎng)BMMCs細胞進行干預(yù)。

4.對3中得到的細胞進行western blot檢測，對TRAP，Cathepsin K，TRAF6，MMP9和CTR等破骨細胞生成指標進行分析，同時以β蛋白為標準，對上述指標進行半定量，得出統(tǒng)計學分析結(jié)果。

5.對3中得到的細胞使用免疫熒光對p65入核數(shù)目進行觀察，并計算的核位置的熒光強度與整個細胞熒光強度的比值。視野選擇隨機視野，每個視野中選取10個細胞，最終得出平均值進行分析。

6.實驗分為三組，分別為RAW264.7(對照組)，RAW264.7+RANKL+M-CSF(誘導組)和RAW264.7+M19+RANKL+M-CSF(M19處理且誘導組)，M19使用5μM，處理時間為細胞誘導后第三天，細胞再經(jīng)4天誘導。細胞完成總計7天的誘導后，收集細胞，提取細胞總蛋白，免疫印跡法分別檢測NF-κB通路，MAPK通路和Rps5/PI3K/Akt通路，同時，提取細胞Total RNA，RT-PCR檢測破骨關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子NFATc1mRNA含量。

三、實驗結(jié)果

圖1A為M19的化學結(jié)構(gòu)。圖1B為MTT實驗的結(jié)果。結(jié)果顯示，當M19的濃度為量為11.1μM時，對細胞基本無毒性，所以后續(xù)實驗最高選擇5μM為最高干預(yù)劑量。圖1C為礦化結(jié)節(jié)結(jié)果，結(jié)果表明M19不能增加礦化結(jié)節(jié)的量，從而表明M19對成骨作用沒有明顯的促進作用。圖1D為RAW264.7細胞的培養(yǎng)7天后進行TRAP染色的結(jié)果，圖1E為BMMCs細胞的培養(yǎng)7天后進行TRAP染色的結(jié)果。結(jié)果中顯示，當使用M-CSF和Rankl誘導后破骨細胞數(shù)量明顯增加(P<0.01)，而當使用M19進行干預(yù)后破骨細胞數(shù)量明顯減少，并且有計量依賴性，M19的濃度為5μM時破骨細胞數(shù)量最少(P<0.05)。結(jié)果說明，M19能抑制破骨細胞生成*P<0.05，**P<0.01。

圖2為破骨細胞生成指標進行檢測的結(jié)果，具體測量指標為TRAP,Cathepsin K,TRAF 6,MMP9和CTR。RW264.7細胞經(jīng)7天M-CSF(20ng/ml)和Rankl(50ng/ml)誘導，細胞中TRAP，Cathepsin K，TRAF6，MMP9和CTR各組蛋白表達均明顯增強，與對照組比較，差異顯著(P＜0.01)。細胞誘導的過程中加入M19(0.1，1和5μM)，可以明顯抑制各組蛋白上升趨勢，且藥物使用終濃度與蛋白表達的抑制程度呈梯度依賴，與誘導組比較，高劑量藥物處理組各組蛋白指標均明顯降低，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，這說明M19可以明顯抑制M-CSF和Rankl誘導的RW264.7細胞破骨分化。

圖3A為P65的免疫熒光結(jié)果。圖3B為p65激活即入核百分比。圖中顯示，當使用M-CSF和Rankl進行誘導后p65的入核比例明顯增多(P<0.01)，而同時使用M19進行干預(yù)時，結(jié)果顯示p65的激活顯著減少(P<0.01)。說明M19能夠一直p65的激活。圖3C顯示，與對照組相比較，誘導組細胞內(nèi)p65，p50和IκBa的磷酸化均明顯升高，組間差異顯著(P＜0.05)，5μM的M19處理，能夠明顯抑制胞內(nèi)p65，p50和IκBa的磷酸化，與誘導組比較，數(shù)據(jù)均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。MAPK通路檢測數(shù)據(jù)(圖3D)顯示，與對照組相比較，誘導組細胞內(nèi)ERK和JNK和均明顯升高，組間差異顯著(P＜0.05)，5μM的M19處理，能夠明顯抑制胞內(nèi)ERK和JNK磷酸化，與誘導組比較，數(shù)據(jù)均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，P38組間趨勢與上面兩組蛋白一致，但無組間統(tǒng)計學差異(P＞0.05.Rps5/PI3K/Akt通路檢測數(shù)據(jù)(圖3E)顯示，與對照組相比較，誘導組細胞內(nèi)Rps5，Akt和c-fos蛋白表達或者磷酸化均明顯升高，組間差異顯著(P＜0.05)，5μM的M19處理，能夠明顯抑制胞內(nèi)Akt和c-fos磷酸化，與誘導組比較，數(shù)據(jù)均有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，5uM的M19處理，能夠促進胞內(nèi)Rps5表達，與誘導組比較，數(shù)據(jù)有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)。NFATc1mRNA含量檢測數(shù)據(jù)表明，與對照組相比較，誘導組細胞內(nèi)NFATc1基因mRNA含量明顯高于對照組(P＜0.05)，M19亦表現(xiàn)出明顯的NFATc1轉(zhuǎn)錄抑制作用(P＜0.05，vs誘導組)。圖3F為上述三組細胞中的核轉(zhuǎn)錄因子NFATc1mRNA的含量。其結(jié)果跟上述有相同的趨勢。結(jié)果表明，M19通過抑制NF-κB通路，MAPK通路和Rps5/PI3K/Akt通路等3個通路，從而最終抑制骨關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子NFATc1的表達，從而發(fā)揮抑制破骨細胞生成，減少骨質(zhì)流失的作用。

圖4A為6周后小鼠股骨遠端干骺端切片HE染色。圖片顯示去卵巢組小鼠骨小梁數(shù)目較正常組明顯減少，骨小梁間距增大，表現(xiàn)為骨質(zhì)疏松；給予M19后小鼠股骨遠端干骺端骨小梁數(shù)目明顯多于卵巢切除組。骨小梁面積統(tǒng)計結(jié)果也顯示去卵巢后骨質(zhì)流失，給予M19后骨質(zhì)流失緩解。圖4B為6周后小鼠股骨遠端Micro-CT二維和三維結(jié)構(gòu)。圖片顯示去卵巢組小鼠骨小梁數(shù)目較正常組明顯減少，給予M19后小鼠股骨遠端干骺端骨小梁數(shù)目明顯多于卵巢切除組。圖4C為對股骨遠端使用計算機軟件分析，統(tǒng)計骨小梁數(shù)量(Tb.N)、骨表面積和組織體積之比(BS/TV)、相對骨體積或骨體積分數(shù)(BV/TV)、骨小梁連接數(shù)(Tb.Pf)和骨密度(BMD)后發(fā)現(xiàn)M19組小鼠顯著優(yōu)于去卵巢組小鼠，但不及假手術(shù)組，且差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。圖4D為血清學檢測結(jié)果。圖片中顯示，IL-6，TNF-α和TRAP等破骨指標在去卵巢組中明顯多于假手術(shù)組，給予M19干預(yù)后，其水平降低，說明M19干預(yù)的小鼠體內(nèi)破骨活性低于去卵巢組，表示M19干預(yù)后其骨質(zhì)流失減少。

四、結(jié)果討論

女性絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥屬于原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥，與雌激素水平降低后破骨細胞分化增多、成骨減少有關(guān)。去卵巢組小鼠模型人類絕經(jīng)，在去卵巢6周后表現(xiàn)出顯著的骨質(zhì)疏松表現(xiàn)，主要表現(xiàn)為骨小梁數(shù)量明顯減少、骨皮質(zhì)變薄等。目前研究表明，骨質(zhì)疏松癥的發(fā)生與骨骼的慢性炎癥有關(guān)。慢性炎癥使得破骨細胞過度激活，造成骨質(zhì)顯著丟失。

其中核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB與破骨細胞的過度激活有密切關(guān)聯(lián)。作為一種NF-κB激活的抑制劑，M19顯著減少了去卵巢后小鼠骨量的丟失，表現(xiàn)為骨小梁數(shù)目、骨表面積和組織體積之比、相對骨體積或骨體積分數(shù)和骨小梁連接數(shù)的增加。

以上已對本發(fā)明創(chuàng)造的較佳實施例進行了具體說明，但本發(fā)明創(chuàng)造并不限于所述實施例，熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不違背本發(fā)明創(chuàng)造精神的前提下還可做出種種的等同的變型或替換，這些等同的變型或替換均包含在本申請權(quán)利要求所限定的范圍內(nèi)。