本發(fā)明涉及中醫(yī)藥及生物科技領(lǐng)域。尤其是一種利用九香蟲(chóng)制備九香蟲(chóng)活性肽的制備方法。
背景技術(shù):
九香蟲(chóng)是藥用歷史悠久的中藥材,屬半翅目蝽科昆蟲(chóng),其性咸、溫,氣香走竄,理氣止痛,溫中壯陽(yáng)。本草綱目記載主治:膈脘滯氣,脾腎虧損。我國(guó)分布廣泛也是比較古老的有翅藥食兩用昆蟲(chóng)?,F(xiàn)代藥理研究及臨床使用證明,九香蟲(chóng)具有良好的抗腫瘤活性,常用于治療肝癌、胃癌、食道癌以及婦科腫瘤等。并具有增強(qiáng)免疫、組織修復(fù)、抗菌、改善微循環(huán)等藥理活性,特別是抗消化系統(tǒng)腫瘤方面作用比較突出。由此可見(jiàn)九香蟲(chóng)具有許多獨(dú)特的藥用價(jià)值,值得進(jìn)行深入研究和開(kāi)發(fā)利用。
活性肽是一千多種肽的總稱。它在人體的生長(zhǎng)發(fā)育,新陳代謝,疾病以及衰老、死亡的過(guò)程中起著關(guān)鍵的作用?;钚噪氖侨梭w中最重要的活性物質(zhì),正是因?yàn)樗隗w內(nèi)分泌量的增多或減少,才使人類(lèi)有了幼年、童年、成年、老年直到死亡的周期。而服用活性肽便打破了生命的這一周期,從而達(dá)到延長(zhǎng)生命、有效緩解衰老、恢復(fù)身體機(jī)能的神奇效果。肽在生物體內(nèi)作為載體和運(yùn)輸工具,將人們平常所食的營(yíng)養(yǎng)輸送到人體各部位,充分發(fā)揮其功能;肽在生物體內(nèi)作為神經(jīng)遞質(zhì)傳遞信息;肽具有極強(qiáng)的活性和多樣性,可全面調(diào)節(jié)人體生理功能,增強(qiáng)機(jī)體生理活性;肽不僅能提供人體生長(zhǎng)發(fā)育所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而且具有特殊的生物學(xué)功能,可防治血栓、高血脂、高血壓,延緩衰老,抗疲勞,提高機(jī)體免疫力,促進(jìn)人體對(duì)蛋白質(zhì)、維生素、氨基酸、鈣、鐵、鋅、硒、鎂、銅等多種對(duì)人體有益微量元素的吸收;有些小肽具有原食品蛋白質(zhì)或其他組成氨基酸所沒(méi)有的重要生理功能。生物活性肽中有些分子量較小的小肽,與氨基酸運(yùn)輸功能相比具有吸收迅速、低耗和不飽和的特點(diǎn)。因此如何將具有理氣止痛,溫中壯陽(yáng)功效和具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫、組織修復(fù)、抗菌、改善微循環(huán)等藥理活性作用的九香蟲(chóng)做成功能和吸收更好的活性肽,更好地達(dá)到中醫(yī)藥治未病的目的,真正實(shí)現(xiàn)中藥現(xiàn)代化,已成為中醫(yī)藥及生物科技領(lǐng)域亟待解決的課題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
為了克服現(xiàn)有技術(shù)中九香蟲(chóng)活性物質(zhì)提取過(guò)程中的原料浪費(fèi)和人體吸收利用率低的不足,本發(fā)明提供了一種九香蟲(chóng)活性肽的制備方法,該九香蟲(chóng)活性肽中富含生物活性肽,具有理氣止痛,溫中壯陽(yáng)功效并具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫、組織修復(fù)、抗菌、改善微循環(huán)等藥理活性,并且易于消化吸收,營(yíng)養(yǎng)豐富機(jī)體利用率高。該九香蟲(chóng)活性肽的制備方法工藝嚴(yán)謹(jǐn)合理、可操作性強(qiáng),易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種九香蟲(chóng)活性肽的制備方法,其特殊之處在于:
1、選取九香蟲(chóng)干品粉碎,放入蒸煮鍋內(nèi)加入其重量5-15倍的水煮20-60分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,然后將煮好的九香蟲(chóng)漿用組織破碎機(jī)破碎制得九香蟲(chóng)勻漿;如用九香蟲(chóng)鮮品作活性肽,可將九香蟲(chóng)鮮品置沸水中燙一下,加入其重量3-10倍的水直接過(guò)組織破碎機(jī)破碎制得九香蟲(chóng)勻漿,再放入蒸煮鍋內(nèi)燒開(kāi)煮10-40分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,即得九香蟲(chóng)鮮品勻漿;
2、將上述制備的九香蟲(chóng)勻漿加入九香蟲(chóng)重量的1-5%的蛋白水解酶,在溫度45-60攝氏度之間溫度條件下酶解4-8小時(shí)后,加入九香蟲(chóng)重量0.5%-1%的酵母粉攪拌均勻,溫度控制在攝氏30-50之間進(jìn)行脫腥處理,1-2小時(shí)后將溫度調(diào)至攝氏85度以上水浴5-15分鐘進(jìn)行滅酶,制得九香蟲(chóng)酶解液;
3、將上述制備的九香蟲(chóng)酶解液用高速離心機(jī)進(jìn)行液渣分離,離心速度調(diào)至9500-14000轉(zhuǎn)之間,制得九香蟲(chóng)離心酶解液;
4、將上述制備的九香蟲(chóng)離心酶解液放不銹鋼桶進(jìn)蒸汽滅菌柜在攝氏100-120度之間蒸汽高壓滅菌15-40分鐘;
5、將上述制備的九香蟲(chóng)酶解液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾器濾得分子量5000道爾頓以下的九香蟲(chóng)活性肽液;
6、將上述制備的九香蟲(chóng)活性肽液按凍干工藝規(guī)范灌裝至西林瓶上凍干機(jī)真空冷凍干燥,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽瓶裝凍干粉成品;將上述制備的九香蟲(chóng)活性肽液加純凈水按口服液生產(chǎn)工藝規(guī)范灌裝至口服液瓶,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽口服液成品;將上述制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥制備成粉末狀顆粒,按膠囊生產(chǎn)工藝規(guī)范罐裝成膠囊,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽膠囊成品。
本發(fā)明所述的蛋白水解酶為角蛋白酶、胰蛋白酶、復(fù)合蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一種或兩種以上的組合。
本發(fā)明選用九香蟲(chóng)干、鮮成蟲(chóng)為原料,通過(guò)控制酶解生成活性肽溶液,經(jīng)滅酶、脫腥、離心、滅菌、超濾后灌裝成口服液劑型、噴霧干燥或冷凍干燥罐裝成膠囊劑型和瓶裝凍干粉劑型,其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和吸收利用率以及食用安全性大大提高,并具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫、組織修復(fù)、抗菌、改善微循環(huán)等藥理活性,該九香蟲(chóng)活性肽的制備方法工藝嚴(yán)謹(jǐn)合理、可操作性強(qiáng),易于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明
實(shí)施例一、1、九香蟲(chóng)活性肽液的制備:選取當(dāng)年干燥凈九香蟲(chóng)15kg進(jìn)行粉碎處理,放入蒸煮鍋內(nèi)加入其重量10倍的水煮40分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,然后將煮好的九香蟲(chóng)漿過(guò)組織破碎機(jī)破碎制得九香蟲(chóng)干品勻漿;選取干凈鮮九香蟲(chóng)成蟲(chóng)30kg用沸水燙死,加入其重量5倍的水過(guò)組織破碎機(jī)破碎勻漿,然后放入蒸煮鍋內(nèi)煮30分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,制得九香蟲(chóng)鮮品勻漿;
2、將步驟1處理好的九香蟲(chóng)勻漿調(diào)PH7,加入胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行多酶酶解,酶組成比為1:1:1,酶用量為每克九香蟲(chóng)添加6000個(gè)酶活單位(u),溫度控制在攝氏55度酶解6小時(shí)后加入九香蟲(chóng)重量0.8%的酵母粉攪拌均勻,溫度控制在攝氏35度進(jìn)行脫腥處理,1.5小時(shí)后沸水熱浴滅酶15分鐘,即得九香蟲(chóng)酶解活性肽液;
3、將步驟2處理好的九香蟲(chóng)酶解活性肽液用高速離心機(jī)進(jìn)行液渣分離,離心速度調(diào)至12000rpm左右,制得九香蟲(chóng)活性肽液;
4、將步驟3制備的九香蟲(chóng)活性肽液放不銹鋼桶進(jìn)蒸汽滅菌柜在攝氏105度蒸汽高壓滅菌35分鐘;
5、將步驟4制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾器濾得分子量5000道爾頓以下的九香蟲(chóng)活性肽液;
6、將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液按凍干工藝規(guī)范灌裝至西林瓶上凍干機(jī)真空冷凍干燥,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽瓶裝凍干粉成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液加純凈水按口服液生產(chǎn)工藝規(guī)范灌裝至口服液瓶,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽口服液成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥制備成粉末狀顆粒,按膠囊生產(chǎn)工藝規(guī)范罐裝成膠囊,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽膠囊成品。
實(shí)施例二 、1、九香蟲(chóng)活性肽液的制備:選取當(dāng)年干燥凈九香蟲(chóng)20kg進(jìn)行粉碎處理,放入蒸煮鍋內(nèi)加入其重量12倍的水煮50分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,然后將煮好的九香蟲(chóng)漿過(guò)組織破碎機(jī)破碎制得美洲大蠊干品勻漿;選取干凈鮮九香蟲(chóng)成蟲(chóng)25kg用沸水燙死,加入其重量6倍的水過(guò)組織破碎機(jī)破碎勻漿,然后放入蒸煮鍋內(nèi)煮40分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,制得九香蟲(chóng)鮮品勻漿;
2、將步驟1處理好的九香蟲(chóng)勻漿調(diào)PH6.5,加入胰蛋白酶、復(fù)合蛋白酶、木瓜蛋白酶進(jìn)行多酶酶解,酶組成比為1:1:1,酶用量為每克九香蟲(chóng)添加10000個(gè)酶活單位(u),溫度控制在攝氏50度酶解5.5小時(shí)后加入九香蟲(chóng)重量1%的酵母粉攪拌均勻,溫度控制在攝氏36度進(jìn)行脫腥處理,2小時(shí)后沸水熱浴滅酶13分鐘,即得九香蟲(chóng)酶解活性肽液;
3、將步驟2處理好的九香蟲(chóng)酶解活性肽液用高速離心機(jī)進(jìn)行液渣分離,離心速度調(diào)至11500rpm左右,制得九香蟲(chóng)活性肽液;
4、將步驟3制備的九香蟲(chóng)活性肽液放不銹鋼桶進(jìn)蒸汽滅菌柜在攝氏115度蒸汽高壓滅菌30分鐘;
5、將步驟4制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾器濾得分子量5000道爾頓以下的九香蟲(chóng)活性肽液;
6、將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液按凍干工藝規(guī)范灌裝至西林瓶上凍干機(jī)真空冷凍干燥,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽瓶裝凍干粉成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液加純凈水按口服液生產(chǎn)工藝規(guī)范灌裝至口服液瓶,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽口服液成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥制備成粉末狀顆粒,按膠囊生產(chǎn)工藝規(guī)范罐裝成膠囊,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽膠囊成品。
實(shí)施例三、1、九香蟲(chóng)活性肽液的制備:選取當(dāng)年干燥凈九香蟲(chóng)25kg進(jìn)行粉碎處理,放入蒸煮鍋內(nèi)加入其重量8倍的水煮55分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,然后將煮好的九香蟲(chóng)漿過(guò)組織破碎機(jī)破碎制得九香蟲(chóng)干品勻漿;選取干凈鮮九香蟲(chóng)成蟲(chóng)30kg用沸水燙死,加入其重量5倍的水過(guò)組織破碎機(jī)破碎勻漿,然后放入蒸煮鍋內(nèi)煮45分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,制得九香蟲(chóng)鮮品勻漿;
2、將步驟1處理好的九香蟲(chóng)勻漿調(diào)PH6.5,加入角蛋白酶、復(fù)合蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行多酶酶解,酶組成比為1:1:1,酶用量為每克九香蟲(chóng)添加8000個(gè)酶活單位(u),溫度控制在攝氏52度酶解5小時(shí)后加入九香蟲(chóng)重量0.6%的酵母粉攪拌均勻,溫度控制在攝氏38度進(jìn)行脫腥處理,2小時(shí)后沸水熱浴滅酶10分鐘,即得九香蟲(chóng)酶解活性肽液;
3、將步驟2處理好的九香蟲(chóng)酶解活性肽液用高速離心機(jī)進(jìn)行液渣分離,離心速度調(diào)至13000rpm左右,制得九香蟲(chóng)活性肽液;
4、將步驟3制備的美洲大蠊九香蟲(chóng)活性肽液放不銹鋼桶進(jìn)蒸汽滅菌柜在攝氏110度蒸汽高壓滅菌30分鐘;
5、將步驟4制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾器濾得分子量5000道爾頓以下的九香蟲(chóng)活性肽液;
6、將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液按凍干工藝規(guī)范灌裝至西林瓶上凍干機(jī)真空冷凍干燥,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽瓶裝凍干粉成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液加純凈水按口服液生產(chǎn)工藝規(guī)范灌裝至口服液瓶,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽口服液成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥制備成粉末狀顆粒,按膠囊生產(chǎn)工藝規(guī)范罐裝成膠囊,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽膠囊成品。
實(shí)施例四、1、九香蟲(chóng)活性肽液的制備:選取當(dāng)年干燥凈九香蟲(chóng)30kg進(jìn)行粉碎處理,放入蒸煮鍋內(nèi)加入其重量9倍的水煮45分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,然后將煮好的九香蟲(chóng)漿過(guò)組織破碎機(jī)破碎制得九香蟲(chóng)干品勻漿;選取干凈鮮九香蟲(chóng)成蟲(chóng)35kg用沸水燙死,加入其重量7倍的水過(guò)組織破碎機(jī)破碎勻漿,然后放入蒸煮鍋內(nèi)煮45分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,制得九香蟲(chóng)鮮品勻漿;
2、將步驟1處理好的九香蟲(chóng)勻漿調(diào)PH6.5,加入胰蛋白酶、中性蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶進(jìn)行多酶酶解,酶組成比為1:1:1,酶用量為每克九香蟲(chóng)添加8500個(gè)酶活單位(u),溫度控制在攝氏54度酶解6.5小時(shí)后加入九香蟲(chóng)重量0.7%的酵母粉攪拌均勻,溫度控制在攝氏38度進(jìn)行脫腥處理,2小時(shí)后沸水熱浴滅酶13分鐘,即得九香蟲(chóng)酶解活性肽液;
3、將步驟2處理好的九香蟲(chóng)酶解活性肽液用高速離心機(jī)進(jìn)行液渣分離,離心速度調(diào)至13500rpm左右,制得九香蟲(chóng)活性肽液;
4、將步驟3制備的九香蟲(chóng)活性肽液放不銹鋼桶進(jìn)蒸汽滅菌柜在攝氏110度蒸汽高壓滅菌35分鐘;
5、將步驟4制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾器濾得分子量5000道爾頓以下的九香蟲(chóng)活性肽液;
6、將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液按凍干工藝規(guī)范灌裝至西林瓶上凍干機(jī)真空冷凍干燥,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽瓶裝凍干粉成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液加純凈水按口服液生產(chǎn)工藝規(guī)范灌裝至口服液瓶,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽口服液成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥制備成粉末狀顆粒,按膠囊生產(chǎn)工藝規(guī)范罐裝成膠囊,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽膠囊成品。
實(shí)施例五、1、九香蟲(chóng)活性肽液的制備:選取當(dāng)年干燥凈九香蟲(chóng)15kg進(jìn)行粉碎處理,放入蒸煮鍋內(nèi)加入其重量15倍的水煮45分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,然后將煮好的九香蟲(chóng)漿過(guò)組織破碎機(jī)破碎制得九香蟲(chóng)干品勻漿;選取干凈鮮九香蟲(chóng)成蟲(chóng)15kg用沸水燙死,加入其重量10倍的水過(guò)組織破碎機(jī)破碎勻漿,然后放入蒸煮鍋內(nèi)煮45分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,制得九香蟲(chóng)鮮品勻漿;
2、將步驟1處理好的九香蟲(chóng)勻漿調(diào)PH7,加入胰蛋白酶、木瓜蛋白酶進(jìn)行雙酶酶解,酶組成比為1:1,酶用量為每克美洲大蠊添加10000個(gè)酶活單位(u),溫度控制在攝氏54度酶解7小時(shí)后加入九香蟲(chóng)重量0.9%的酵母粉攪拌均勻,溫度控制在攝氏38度進(jìn)行脫腥處理,2小時(shí)后沸水熱浴滅酶14分鐘,即得九香蟲(chóng)酶解活性肽液;
3、將步驟2處理好的九香蟲(chóng)酶解活性肽液用高速離心機(jī)進(jìn)行液渣分離,離心速度調(diào)至11500rpm左右,制得九香蟲(chóng)活性肽液;
4、將步驟3制備的九香蟲(chóng)活性肽液放不銹鋼桶進(jìn)蒸汽滅菌柜在攝氏120度蒸汽高壓滅菌20分鐘;
5、將步驟4制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾器濾得分子量5000道爾頓以下的九香蟲(chóng)活性肽液;
6、將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液按凍干工藝規(guī)范灌裝至西林瓶上凍干機(jī)真空冷凍干燥,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽瓶裝凍干粉成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液加純凈水按口服液生產(chǎn)工藝規(guī)范灌裝至口服液瓶,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽口服液成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥制備成粉末狀顆粒,按膠囊生產(chǎn)工藝規(guī)范罐裝成膠囊,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽膠囊成品。
實(shí)施例六、1、九香蟲(chóng)活性肽液的制備:選取當(dāng)年干燥凈九香蟲(chóng)35kg進(jìn)行粉碎處理,放入蒸煮鍋內(nèi)加入其重量11倍的水煮45分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,然后將煮好的九香蟲(chóng)漿過(guò)組織破碎機(jī)破碎制得九香蟲(chóng)干品勻漿;選取干凈鮮九香蟲(chóng)成蟲(chóng)40kg用沸水燙死,加入其重量8倍的水過(guò)組織破碎機(jī)破碎勻漿,然后放入蒸煮鍋內(nèi)煮45分鐘,靜置放涼將上層脂肪收取棄用,制得九香蟲(chóng)鮮品勻漿;
2、將步驟1處理好的九香蟲(chóng)勻漿調(diào)PH7,加入風(fēng)味蛋白酶、木瓜蛋白酶進(jìn)行雙酶酶解,酶組成比為1:1,酶用量為每克九香蟲(chóng)添加9500個(gè)酶活單位(u),溫度控制在攝氏54度酶解7小時(shí)后加入九香蟲(chóng)重量0.9%的酵母粉攪拌均勻,溫度控制在攝氏38度進(jìn)行脫腥處理,2小時(shí)后沸水熱浴滅酶14分鐘,即得九香蟲(chóng)酶解活性肽液;
3、將步驟2處理好的九香蟲(chóng)酶解活性肽液用高速離心機(jī)進(jìn)行液渣分離,離心速度調(diào)至13500rpm左右,制得九香蟲(chóng)活性肽液;
4、將步驟3制備的九香蟲(chóng)活性肽液放不銹鋼桶進(jìn)蒸汽滅菌柜在攝氏120度蒸汽高壓滅菌30分鐘;
5、將步驟4制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)過(guò)超濾膜過(guò)濾器濾得分子量5000道爾頓以下的九香蟲(chóng)活性肽液;
6、將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液按凍干工藝規(guī)范灌裝至西林瓶上凍干機(jī)真空冷凍干燥,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽瓶裝凍干粉成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液加純凈水按口服液生產(chǎn)工藝規(guī)范灌裝至口服液瓶,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽口服液成品;將步驟5制備的九香蟲(chóng)活性肽液經(jīng)冷凍干燥或噴霧干燥制備成粉末狀顆粒,按膠囊生產(chǎn)工藝規(guī)范罐裝成膠囊,即得本發(fā)明九香蟲(chóng)活性肽膠囊成品。