本發(fā)明涉及中醫(yī)中藥學(xué)和納米
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑及制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：目前，缺鐵性貧血(irondeficiencyanemia，IDA)是指體內(nèi)鐵的儲(chǔ)存不能滿足正常紅細(xì)胞生成的需要而發(fā)生的貧血，是由于鐵攝入量不足、吸收量減少、需要量增加、鐵利用障礙或丟失過(guò)多所至。缺鐵性貧血對(duì)身體危害極大，缺鐵可顯著降低小兒的智力和動(dòng)作發(fā)育，使人的免疫功能、體力、耐力下降；流行性病學(xué)調(diào)查顯示母親貧血與低體重兒、早產(chǎn)兒和產(chǎn)期嬰兒的死亡率相關(guān)；鐵缺乏對(duì)消化道、毛發(fā)、指甲、皮膚也有損害?？傊?，缺鐵性貧血是當(dāng)代世界上最嚴(yán)重的四大營(yíng)養(yǎng)性疾病之一，嚴(yán)重影響人類(lèi)的健康。根據(jù)世界衛(wèi)生組織2008年發(fā)表的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，全球有20多億人患有鐵缺乏癥，缺鐵位于嚴(yán)重影響人類(lèi)健康危險(xiǎn)因素中的第九位。發(fā)達(dá)國(guó)家鐵缺乏發(fā)病率為1％～20％，而發(fā)展中國(guó)家鐵缺乏高達(dá)30％～40％，其高危人群為婦女、兒童和嬰幼兒。在中國(guó)，2005年的營(yíng)養(yǎng)監(jiān)測(cè)表明，中國(guó)有2億多人患有鐵缺乏癥，5歲以下兒童貧血的發(fā)病率在12.3％～26.7％，育齡婦女貧血的患病率達(dá)到35.0％，成年男子貧血的患病率亦在10％左右。更嚴(yán)重的是，近十年來(lái)，我國(guó)城鎮(zhèn)居民貧血發(fā)生率每年以10％～1％的速度增長(zhǎng)；而那些過(guò)度追求減肥瘦身和排毒而導(dǎo)致的飲食不均衡、營(yíng)養(yǎng)攝入不足、代謝機(jī)能紊亂或減弱增加了新的貧血人群。因此，改善鐵營(yíng)養(yǎng)狀況，是世界也是我國(guó)迫切需要解決的公共衛(wèi)生問(wèn)題。缺鐵性貧血是世界上最常見(jiàn)的營(yíng)養(yǎng)缺乏癥，也是我國(guó)亟需重視的居民健康問(wèn)題，對(duì)于生活在貧困地區(qū)的人群更是如此?？诜F劑是缺鐵性貧血的首選治療方案，但其可能導(dǎo)致腹瀉等并發(fā)癥，且療效得不到保證，因此，選擇更加有效且副作用更小的補(bǔ)鐵制劑對(duì)于鐵缺乏或缺鐵性貧血患者的治療和預(yù)后都有極大的意義。而補(bǔ)鐵劑是一類(lèi)治療缺鐵性貧血的主要藥物，用鐵制劑治療缺鐵性貧血已有多年的歷史。目前使用的補(bǔ)血鐵劑主要有硫酸亞鐵、有機(jī)酸亞鐵鹽類(lèi)等，但普遍存在人體吸收率低、有異味、副作用強(qiáng)等缺點(diǎn)，補(bǔ)鐵效果不太理想。通過(guò)食物鐵強(qiáng)化來(lái)改善缺鐵性貧血是全球營(yíng)養(yǎng)界公認(rèn)的經(jīng)濟(jì)、易行、有效的途徑，具有巨大的潛力。食物強(qiáng)化鐵有葡萄糖酸亞鐵、乙二胺四乙酸鐵鈉(NaFeEDTA)及生物鐵等。蛋白質(zhì)家族中的乳鐵蛋白、卵轉(zhuǎn)鐵蛋白、血紅蛋白等是天然的優(yōu)良的補(bǔ)血鐵劑，具有生物利用率高、易被消化吸收、不刺激腸胃、性質(zhì)穩(wěn)定等特點(diǎn)，但其制備工藝要求高，價(jià)格不菲。碳水化合物包被的納米鐵顆粒作為一種新型的補(bǔ)鐵劑，已經(jīng)被美國(guó)FDA批準(zhǔn)，用于缺鐵性貧血的臨床治療。[LuM,CohenMH,RievesD,PazdurR.Fdareport:Ferumoxytolforintravenousirontherapyinadultpatientswithchronickidneydisease.AmJHematol.2010；85:315–319.SpinowitzBS,KauszAT,BaptistaJ,NobleSD,SothinathanR,BernardoMV,BrennerL,PereiraBJ.Ferumoxytolfortreatingirondeficiencyanemiainckd.JAmSocNephrol.2008；19:1599–1605.]黃芪(Astragalusmembranaceus)和當(dāng)歸(AngelicaSinensisDiels，ASD)是臨床上常用的中藥補(bǔ)血藥，對(duì)缺鐵性貧血有很好的治療效果，具有促進(jìn)鐵吸收，調(diào)節(jié)鐵代謝，促進(jìn)骨髓造血功能等多種效應(yīng)。已經(jīng)有研究證實(shí)，黃芪多糖和當(dāng)歸多糖是其改善缺鐵性貧血的有效成分。因而，將黃芪多糖和當(dāng)歸多糖修飾到磁性納米顆粒的表面，制備黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被超順磁性納米顆粒，將具有補(bǔ)充鐵元素、調(diào)節(jié)鐵代謝等多重功效，提高缺鐵性貧血的治療效果。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的提供一種生物吸收利用率高，補(bǔ)鐵效果比較明顯，無(wú)毒副作用，且原料來(lái)源易得，制備方法科學(xué)合理，藥理作用及機(jī)理明確的黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑及制備方法和用途。本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑，以水相Fe3O4超順磁性納米顆粒為核、以及包覆在所述水相Fe3O4超順磁性納米顆粒核表面的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖；其中，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的質(zhì)量百分比為25％-58％，黃芪多糖的質(zhì)量百分比為4％-72％，當(dāng)歸多糖的質(zhì)量百分比為5％-62％。進(jìn)一步，所述水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的核粒徑為5-30nm。進(jìn)一步，所述黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖46.7％，當(dāng)歸多糖28.3％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒25％。進(jìn)一步，所述黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖26.6％，當(dāng)歸多糖48.4％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒25％。進(jìn)一步，所述黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖26.3％，當(dāng)歸多糖26.7％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒47％。進(jìn)一步，所述黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖15％，當(dāng)歸多糖37％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒58％。進(jìn)一步，所述黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖50％，當(dāng)歸多糖10％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒40％。本發(fā)明的另一目的是提供上述黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的制備方法，該方法具體包括以下步驟：步驟(1)制備油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒；步驟(2)用含有羧基的極性小分子對(duì)步驟(1)制備得到的油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒表面進(jìn)行改性，將極性小分子通過(guò)羧基與所述納米顆粒表面的金屬離子配位，使Fe3O4超順磁性納米顆粒從油相轉(zhuǎn)變?yōu)樗?，使其能夠均勻穩(wěn)定懸浮于水相溶液中；步驟(3)采用酶-Sevag交聯(lián)法和乙醇沉淀方法將多糖含量為30％的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖進(jìn)行充分提純，去除黃芪多糖和當(dāng)歸多糖中的蛋白質(zhì)、植物色素和其它雜質(zhì)，使黃芪多糖和當(dāng)歸多糖中的多糖成分的含量高于90％，備用；步驟(4)將經(jīng)步驟3提純后的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖加入到步驟2制備得到的含有水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的水相溶液中，超聲波處理15-25分鐘，然后加熱至80-90℃，回流反應(yīng)時(shí)間為1-3小時(shí)，即得到黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒，然后加入藥學(xué)上可接受的輔料或捕助性成分制備而成藥學(xué)制劑的補(bǔ)鐵劑。進(jìn)一步，所述藥學(xué)制劑包括片劑、膠囊、顆粒劑、丸劑、散劑、口服液和膏劑。經(jīng)一步，所述含有羧基的極性小分子為檬酸鈉、檸檬酸、琥珀酸、蘋(píng)果酸、異檸檬酸、a-酮戊二酸、草酰乙酸、丙酮酸、乳酸、延胡索酸、順烏頭酸、甘油、6-磷酸葡萄糖、6-磷酸果糖或2，6-二磷酸果糖。進(jìn)一步，所述的黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑應(yīng)用于防治缺鐵性貧血中。本發(fā)明中，用于提取黃芪多糖的原料藥黃芪為豆科植物蒙古黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.var.mongho-licus(Bge.)Hsiao或膜莢黃芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.的干燥根。本品性溫味甘，歸肺脾兩經(jīng)，具有補(bǔ)氣固表，利尿托毒，排膿斂瘡等功效。本發(fā)明所述中藥有效部位組合物中，用于提取當(dāng)歸多糖的原料藥當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸Angelicasinensis(Oliv.)Diels的干燥根。本品性溫味辛、甘，歸心、肝、肺三經(jīng)，具有補(bǔ)血，活血，調(diào)經(jīng)止痛，潤(rùn)燥滑腸等功效。黃芪和當(dāng)歸中醫(yī)經(jīng)典方劑當(dāng)歸補(bǔ)血湯的成分，常用于血虛諸證的治療，臨床上對(duì)缺鐵性貧血有很好的治療效果。對(duì)黃芪多糖、當(dāng)歸多糖聯(lián)合應(yīng)用治療缺鐵性貧血的研究已有文獻(xiàn)報(bào)道，涉及的內(nèi)容為：(1)黃芪、當(dāng)歸原藥材聯(lián)合使用具有抗小鼠、大鼠缺鐵性貧血的作用；(2)黃芪和當(dāng)歸混合物的提取物具有改善大鼠、小鼠缺鐵性貧血的作用；(3)當(dāng)歸補(bǔ)血湯提取物具有改善大鼠、小鼠缺鐵性貧血的作用；(4)黃芪和當(dāng)歸混合提取物與鐵或鐵納米顆粒形成復(fù)合物具有改善動(dòng)物缺鐵性貧血的作用。但到目前為止，尚未見(jiàn)關(guān)于黃芪多糖、當(dāng)歸多糖和超順磁性納米鐵顆粒不同比例復(fù)合物對(duì)缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ透深A(yù)作用的研究報(bào)道。本發(fā)明人采用缺鐵飲食誘導(dǎo)的小鼠缺鐵性貧血模型，系統(tǒng)研究了本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒治療缺鐵性貧血的作用及其機(jī)理。結(jié)果顯示，本發(fā)明中藥有效部位組合物能顯著提高缺鐵性貧血小鼠外周血紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量。這表明，本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒具有顯著的治療缺鐵性貧血的作用，可以用于缺鐵性貧血的治療。該實(shí)驗(yàn)結(jié)果還提示，本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒的治療缺鐵性貧血的作用可能與其調(diào)節(jié)鐵代謝有關(guān)。本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒原料來(lái)源易得，制備方法科學(xué)合理，藥理作用及機(jī)理明確，對(duì)缺鐵性貧血能起到標(biāo)本兼治的良好效果，使用本發(fā)明的補(bǔ)鐵劑日補(bǔ)鐵量1mg/kg體重的劑量下(低于2mg/kg體重)即有很好的補(bǔ)鐵效果，能夠減輕機(jī)體的鐵負(fù)載，防止鐵中毒的發(fā)生，具有廣闊的應(yīng)用前景。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說(shuō)明,但不以任何方式對(duì)本發(fā)明加以限制,基于本發(fā)明教導(dǎo)所作的任何變換或替換,均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明一種黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑，以水相Fe3O4超順磁性納米顆粒為核、以及包覆在所述水相Fe3O4超順磁性納米顆粒核表面的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖；其中，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的質(zhì)量百分比為25％-58％，黃芪多糖的質(zhì)量百分比為4％-72％，當(dāng)歸多糖的質(zhì)量百分比為5％-62％，所述水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的核粒徑為5-30nm。實(shí)施例1：該補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖46.7％，當(dāng)歸多糖28.3％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒25％。步驟(1)制備油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒；步驟(2)用含有羧基的極性小分子對(duì)油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒表面進(jìn)行改性，將極性小分子通過(guò)羧基與納米顆粒表面的金屬離子配位，使Fe3O4納米顆粒從油相轉(zhuǎn)變?yōu)樗?，使其能夠均勻穩(wěn)定懸浮于水相溶液中；步驟(3)采用酶-Sevag交聯(lián)法和乙醇沉淀方法將多糖含量為30％的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖充分提純，去除蛋白質(zhì)、植物色素和其它雜質(zhì)，使黃芪多糖和當(dāng)歸多糖中的多糖成分的含量高于90％，備用；步驟(4)將經(jīng)步驟3提純后的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖加入到步驟2制備得到的含有水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的水相溶液中，超聲波處理15分鐘，然后加熱至80℃，回流反應(yīng)時(shí)間為1小時(shí)，即得到黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒，然后加入藥學(xué)上可接受的輔料或捕助性成分制備而成藥學(xué)制劑的補(bǔ)鐵劑。實(shí)施例2：該補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖26.6％，當(dāng)歸多糖48.4％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒25％。步驟(1)制備油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒；步驟(2)用含有羧基的極性小分子對(duì)油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒表面進(jìn)行改性，將極性小分子通過(guò)羧基與納米顆粒表面的金屬離子配位，使Fe3O4納米顆粒從油相轉(zhuǎn)變?yōu)樗?，使其能夠均勻穩(wěn)定懸浮于水相溶液中；步驟(3)采用酶-Sevag交聯(lián)法和乙醇沉淀方法將多糖含量為30％的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖充分提純，去除蛋白質(zhì)、植物色素和其它雜質(zhì)，使黃芪多糖和當(dāng)歸多糖中的多糖成分的含量高于90％，備用；步驟(4)將經(jīng)步驟3提純后的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖加入到步驟2制備得到的含有水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的水相溶液中，超聲波處理25分鐘，然后加熱至90℃，回流反應(yīng)時(shí)間為3小時(shí)，即得到黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒，然后加入藥學(xué)上可接受的輔料或捕助性成分制備而成藥學(xué)制劑的補(bǔ)鐵劑。實(shí)施例3：該補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖26.3％，當(dāng)歸多糖26.7％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒47％。步驟(1)制備油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒；步驟(2)用含有羧基的極性小分子對(duì)油相的Fe3O4超順磁性納米顆粒表面進(jìn)行改性，將極性小分子通過(guò)羧基與納米顆粒表面的金屬離子配位，使Fe3O4納米顆粒從油相轉(zhuǎn)變?yōu)樗?，使其能夠均勻穩(wěn)定懸浮于水相溶液中；步驟(3)采用酶-Sevag交聯(lián)法和乙醇沉淀方法將多糖含量為30％的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖充分提純，去除蛋白質(zhì)、植物色素和其它雜質(zhì)，使黃芪多糖和當(dāng)歸多糖中的多糖成分的含量高于90％，備用；步驟(4)將經(jīng)步驟3提純后的黃芪多糖和當(dāng)歸多糖加入到步驟2制備得到的含有水相Fe3O4超順磁性納米顆粒的水相溶液中，超聲波處理20分鐘，然后加熱至85℃，回流反應(yīng)時(shí)間為1.5小時(shí)，即得到黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒，然后加入藥學(xué)上可接受的輔料或捕助性成分制備而成藥學(xué)制劑的補(bǔ)鐵劑。實(shí)施例4：黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖26.3％，當(dāng)歸多糖26.7％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒47％。實(shí)施例5：黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖15％，當(dāng)歸多糖37％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒58％。實(shí)施例6：黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物補(bǔ)鐵劑的各個(gè)組分的質(zhì)量百分比為：黃芪多糖50％，當(dāng)歸多糖10％，水相Fe3O4超順磁性納米顆粒40％。采用本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)小鼠缺鐵性貧血的治療作用。1.供試樣品本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒1：簡(jiǎn)稱(chēng)“顆粒1”，按本發(fā)明實(shí)施例2制備；本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒2：簡(jiǎn)稱(chēng)“顆粒2”，按本發(fā)明實(shí)施例2制備；本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒3：簡(jiǎn)稱(chēng)“顆粒3”，按本發(fā)明實(shí)施例2制備；對(duì)照藥物硫酸亞鐵片：上海黃海制藥有限公司提供，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H31021752。2.實(shí)驗(yàn)儀器與試劑：全自動(dòng)血液分析儀(美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特公司)；B204-N型電子天平(瑞士Mettler公司)。小鼠低鐵飼料，北京科澳協(xié)力飼料有限公司提供；血清鐵測(cè)定試劑盒，南京建成生物工程研究所提供；血清鐵調(diào)素ELISA試劑盒，武漢華美生物工程有限公司提供。3.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物ICR小鼠,雄性，體重18-20g,斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司提供。4.實(shí)驗(yàn)方法4.1、造模及給藥SD大鼠60只,隨機(jī)分為6組,即正常對(duì)照組、模型組、顆粒1組(8mg/kg)、顆粒2組(8mg/kg)、顆粒3組(8mg/kg)和陽(yáng)性對(duì)照藥硫酸亞鐵組(5.43mg/kg),每組10只。模型組與各治療組小鼠采用低鐵飼料復(fù)制小鼠缺鐵性貧血模型,具體操作步驟如下:在實(shí)驗(yàn)環(huán)境下適應(yīng)3d后，飼予低鐵飼料及去離子水，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格避免鐵污染。第4周對(duì)所有實(shí)驗(yàn)大鼠采尾血測(cè)定血紅蛋白(Hb)含量，選擇血紅蛋白低于100g/L的大鼠進(jìn)行貧血恢復(fù)實(shí)驗(yàn)。血紅蛋白低于100g/L的大鼠根據(jù)體重和血紅蛋白水平隨機(jī)分為5組，包括模型組、硫酸亞鐵組、顆粒1組、顆粒2組、顆粒3組、每組10只。各組在恢復(fù)貧血實(shí)驗(yàn)期間繼續(xù)給予低鐵飼料和去離子水。貧血模型對(duì)照組每天灌胃給予去離子水溶液，硫酸亞鐵對(duì)照組每天給予5.43/(kg·d)硫酸亞鐵溶液，顆粒1組每天給予顆粒1懸濁液8mg/(kg·d)，顆粒2組每天給予顆粒2懸濁液8mg/(kg·d)，顆粒3組每天給予顆粒3懸濁液8mg/(kg·d)。30天后取材，測(cè)定以下指標(biāo)：4.2取末梢血，用全自動(dòng)血液分析儀測(cè)定紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量。4.3腹主動(dòng)脈取血，室溫靜置4h，4℃300轉(zhuǎn)/分鐘×5分鐘離心分離血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作檢測(cè)血清鐵含量。4.4腹主動(dòng)脈取血，室溫靜置4h，4℃300轉(zhuǎn)/分鐘×5分鐘離心分離血清，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作檢測(cè)血清鐵調(diào)素含量。5實(shí)驗(yàn)結(jié)果5.1本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)外周血紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量的影響外周血紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量是缺鐵性貧血的診斷指標(biāo)，也是評(píng)價(jià)治療效果的重要指標(biāo)。模型組大鼠外周血紅細(xì)胞數(shù)量顯著低于正常對(duì)照組，且血紅蛋白含量小于100g/L，表明造模成功。顆粒1組、顆粒2組、顆粒3組和硫酸亞鐵組大鼠的外周血紅細(xì)胞數(shù)和血紅蛋白含量均升高，表明顆粒1、顆粒2、顆粒3和硫酸亞鐵這4種藥物對(duì)缺鐵性貧血均有治療效果，其中以顆粒2組的效果最好。結(jié)果見(jiàn)表1。表1黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)外周血紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量的影響由上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可見(jiàn),本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒能明顯改善缺鐵性貧血模型大鼠的貧血狀況。5.2本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)血清鐵的影響鐵在體內(nèi)多以結(jié)合鐵的形式存在，且主要存在于血紅蛋白和鐵蛋白中，并廣泛參與機(jī)體的代謝過(guò)程。各治療組均能提高缺鐵性貧血模型大鼠血清鐵含量，而且顆粒1組、顆粒2組和顆粒3組的血清鐵含量均高于硫酸亞鐵組。但顆粒2組和顆粒3組大鼠的鐵攝入量是1mg/kg，僅為硫酸亞鐵組的1/2，這表明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒中的鐵更容易被吸收。結(jié)果見(jiàn)表2。表2黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)外周血紅細(xì)胞數(shù)量和血紅蛋白含量的影響組別劑量(mg/kg)血清鐵含量(μg/L)正常對(duì)照組--24.4±1.63模型組--13.9±1.46顆粒1組424.9±4.37顆粒2組426.8±4.02顆粒3組423.7±3.15硫酸亞鐵組5.4323.5±6.785.3本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)血清鐵調(diào)素含量的影響健康人體中參與代謝的鐵每天僅有12mg通過(guò)膳食攝入，而約20mg是通過(guò)肝、脾及骨髓中的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)對(duì)衰老的紅細(xì)胞的吞噬作用循環(huán)利用。體內(nèi)鐵的營(yíng)養(yǎng)狀況會(huì)直接影響肝細(xì)胞合成和分泌鐵調(diào)素，鐵調(diào)素可以在十二指腸上皮細(xì)胞、肝細(xì)胞等細(xì)胞中直接結(jié)合膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白。當(dāng)體內(nèi)鐵含量下降時(shí)，鐵調(diào)素合成分泌受到抑制，鐵調(diào)素與膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白結(jié)合減少，膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白降解吸收被抑制，從而促進(jìn)鐵從細(xì)胞釋放到血漿促進(jìn)鐵的重復(fù)利用；當(dāng)體內(nèi)鐵含量增加時(shí)則反之。鐵調(diào)素蛋白水平可以直接反映體內(nèi)鐵的營(yíng)養(yǎng)狀況，而且其異常表達(dá)會(huì)導(dǎo)致鐵代謝和吸收紊亂。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與正常對(duì)照組相比，模型組血清鐵調(diào)素含量下降。提示貧血狀態(tài)下機(jī)體通過(guò)減少鐵調(diào)素分泌來(lái)促進(jìn)鐵的吸收。與模型組相比，各治療組血清鐵調(diào)素均有不同程度的上升，提示表明其除了通過(guò)提高體內(nèi)鐵含量補(bǔ)鐵外，也可能通過(guò)加速衰老的紅細(xì)胞中鐵的循環(huán)利用，起到更好的補(bǔ)鐵效果。表3黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)血清鐵調(diào)素含量的影響組別劑量(mg/kg)血清鐵調(diào)素含量(μg/L)正常對(duì)照組--8.18±0.76模型組--7.62±0.51顆粒1組49.33±0.78顆粒2組410.82±0.96顆粒3組48.79±1.16硫酸亞鐵組5.438.63±0.796、結(jié)論血液學(xué)結(jié)果表明，黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒改善缺鐵性貧血可能的作用機(jī)制是有效增加體內(nèi)結(jié)合鐵的水平，促進(jìn)紅細(xì)胞的生成，而不僅僅是提高體內(nèi)游離鐵的水平。黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒上調(diào)鐵調(diào)素的表達(dá)，則表明其除了通過(guò)提高體內(nèi)鐵含量補(bǔ)鐵外，也可能通過(guò)加速衰老的紅細(xì)胞中鐵的循環(huán)利用，起到更好的補(bǔ)鐵效果。黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒對(duì)缺鐵性貧血患者的治療作用1病例資料病例來(lái)源于門(mén)診患者,共94例,隨機(jī)分為治療組和對(duì)照組。治療組48例中,男19例,女29例,年齡17-72歲,平均43歲,病程4個(gè)月-25年,平均13.5年,其中輕度貧血27例,中度貧血21例；對(duì)照組46例,其中男16例,女30例,年齡16-73歲,平均42.4歲,病程5個(gè)月-23年,平均12.7年,其中輕度貧血24例,中度貧血22例.每1例服藥前后填寫(xiě)預(yù)先設(shè)計(jì)的觀察表格,兩組患者年齡、性別、病因、病程、貧血程度等經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,無(wú)顯著性差異(P>0.05)。具有可比性。2參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》(張之南.血液病診斷療效標(biāo)準(zhǔn)[M].天津:天津科學(xué)出版社,1999.9-14)中的缺鐵性貧血的診斷標(biāo)準(zhǔn)擬定。貧血分級(jí)標(biāo)準(zhǔn):以血紅蛋白多少為標(biāo)準(zhǔn),輕度:Hb男91-120g/L,女81-105g/L；中度:Hb男61-90g/L,女61-81g/L。3排除標(biāo)準(zhǔn)：重度貧血患者:Hb男31-60g/L,女41-60g/L；患者有貧血癥狀而無(wú)鐵缺乏者；合并心血管、腦血管、肝、腎、及造血系統(tǒng)其他嚴(yán)重原發(fā)性疾病、精神病患者；原發(fā)病尚未控制,持續(xù)出血所致貧血；兩周內(nèi)接受過(guò)輸血治療或1個(gè)月內(nèi)接受鐵劑治療者。4治療方法：治療組給予本發(fā)明黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒2(簡(jiǎn)稱(chēng)“顆粒2”，按本發(fā)明實(shí)施例2制備)0.16g，每天3次(相當(dāng)于Fe0.16g/日),飯后服。對(duì)照組口服硫酸亞鐵(廣西桂林南藥股份有限公司),每次0.3g，每天3次(相當(dāng)于Fe0.33/日),飯后服。治療期間停用其他補(bǔ)血藥物。兩組均以1個(gè)月為1療程。5療效觀察及指標(biāo)及檢測(cè)方法:兩組均于治療前后檢測(cè)血紅蛋白(Hb),紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均血紅蛋白(MCH)、紅細(xì)胞平均血紅蛋白濃度(MCHC)。療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)參照《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》分為治愈、顯效、有效和無(wú)效4級(jí)。臨床治愈:Hb男>120g/L,女>105g/L,臨床癥狀消失,血清鐵,總鐵結(jié)合力等恢復(fù)正常；顯效:臨床癥狀明顯好轉(zhuǎn),貧血嚴(yán)重分級(jí)轉(zhuǎn)為輕度,改善2級(jí)以上；有效:臨床癥狀好轉(zhuǎn),貧血嚴(yán)重度改善1級(jí)；無(wú)效:臨床癥狀及貧血嚴(yán)重度分級(jí)無(wú)改善。6統(tǒng)計(jì)方法計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn),計(jì)量資料用t檢驗(yàn),等級(jí)資料用Ridit分析。7結(jié)果7.1臨床療效比較治療組療效優(yōu)于對(duì)照組(P<0.05)。見(jiàn)表4。表4兩組療效比較注:兩組總有效率比較,P<0.05。7.2兩組治療前后HbMCVMCHMCHC等指標(biāo)比較，見(jiàn)表5。表5兩組治療前后觀察指標(biāo)變化比較(x±s)7.3不良反應(yīng)治療組未見(jiàn)不良反應(yīng)，對(duì)照組14例出現(xiàn)不同程度胃腸反應(yīng),作對(duì)癥處理后,癥狀緩解。8結(jié)論黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒治療缺鐵性貧血的效果優(yōu)于硫酸亞鐵，在改善各項(xiàng)血液指標(biāo)方面均優(yōu)于硫酸亞鐵,日補(bǔ)鐵量?jī)H為常規(guī)補(bǔ)鐵量的50％即可達(dá)到很好的治療效果。且未見(jiàn)任何不良反應(yīng)，值得臨床推廣使用。實(shí)施例6：膠囊劑黃芪多糖-當(dāng)歸多糖組合物包被的超順磁性納米鐵顆粒32％淀粉68％將上述本發(fā)明中藥組合物與淀粉混合后,填充入硬明膠膠囊中,即得。實(shí)施例7：口服液將上述本發(fā)明中藥組合物、檸檬酸、蔗糖和蒸餾水?dāng)嚢杌靹?裝入口服液瓶中,即得。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3