本申請(qǐng)是申請(qǐng)日為2012年08月02日的題為“長(zhǎng)效生長(zhǎng)激素及其生產(chǎn)方法”的中國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?01280048492.0的分案申請(qǐng)。相關(guān)申請(qǐng)的引用本申請(qǐng)要求于2011年8月2日提交的美國(guó)申請(qǐng)序列號(hào)us13/195,931的優(yōu)先權(quán)，其為于2009年7月24日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)us12/509,188的延續(xù)部分，該us12/509,188是于2009年6月2日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)us12/476,916的延續(xù)部分，該us12/476,916是于2009年3月11日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)us12/401,746的延續(xù)部分，該us12/401,746是于2007年2月1日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)序列號(hào)us11/700,911的延續(xù)，該us11/700,911要求于2006年2月3日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)序列號(hào)us60/764,761的權(quán)益。所有這些申請(qǐng)?zhí)卮送ㄟ^引用將其整體并入本文。本發(fā)明公開了生長(zhǎng)激素蛋白以及編碼該生長(zhǎng)激素蛋白的多核苷酸在人類受試者中誘導(dǎo)體重減輕或身體脂肪減少的方法中、提高胰島素樣生長(zhǎng)因子(igf-1)水平的方法中以及降低生長(zhǎng)激素的給藥頻率的方法中的應(yīng)用，該生長(zhǎng)激素蛋白包含連接至所述生長(zhǎng)激素的絨毛膜促性腺激素的氨基末端羧基末端肽(ctp)和兩個(gè)羧基末端絨毛膜促性腺激素ctp。還公開了包含生長(zhǎng)激素和編碼本發(fā)明的生長(zhǎng)激素的多核苷酸的藥物組合物以及使用該藥物組合物的方法。
背景技術(shù)：
：：多肽在血液、肝臟或腎臟中容易變性或酶促降解。因此，多肽通常具有幾個(gè)小時(shí)的短的循環(huán)半衰期。因?yàn)樗鼈兊牡头€(wěn)定性，所以肽類藥物通常以持續(xù)的頻率進(jìn)行遞送以保持活性肽的有效血漿濃度。此外，由于肽類藥物通常通過輸液給予，頻繁注射肽類藥物給受試者帶來相當(dāng)?shù)牟贿m。因此，存在對(duì)可以延長(zhǎng)治療性多肽的半衰期并且同時(shí)保持其高藥理效力的技術(shù)的需要。此類所需的肽類藥物還應(yīng)當(dāng)滿足增強(qiáng)的血清穩(wěn)定性、高活性和當(dāng)注射至受試者體內(nèi)時(shí)誘導(dǎo)不期望的免疫反應(yīng)的概率低的要求。不利的藥代動(dòng)力學(xué)，如短的血清半衰期能夠阻礙許多反之有前途的候選藥物的藥物開發(fā)。血清半衰期是分子的經(jīng)驗(yàn)特征，并且必須為每個(gè)新的潛在藥物進(jìn)行實(shí)驗(yàn)來確定。例如，具有較低分子量的多肽藥物，因?yàn)樗璧慕o藥方案的成本或頻率，生理清除機(jī)制，如腎過濾可能使得維持治療水平的藥物變得不可行。相反地，在藥物或其代謝產(chǎn)物具有毒性副作用的情況下，長(zhǎng)的血清半衰期是不希望的。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中誘導(dǎo)體重減輕或減少身體脂肪的方法，包括向受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接到該生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在所述受試者中誘導(dǎo)體重減輕或減少身體脂肪。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中提高胰島素樣生長(zhǎng)因子(igf-1)水平的方法，包括向受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接到該生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而提高所述受試者中的igf-1水平。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在受試者中將胰島素樣生長(zhǎng)因子(igf-1)水平維持在正常治療范圍內(nèi)的方法，該方法包括向該受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接到所述生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在該受試者中將igf-1維持在正常治療水平范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中降低生長(zhǎng)激素的給藥頻率(dosingfrequency)的方法，包括將一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)連接到所述生長(zhǎng)激素的氨基末端并且將兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp連接到所述生長(zhǎng)激素的羧基末端的步驟，從而降低生長(zhǎng)激素的給藥頻率。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)或體重增加的方法，包括向所述受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接到該生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，其中所述受試者是兒童或青少年，從而在所述受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)或體重增加。附圖說明圖1是蛋白質(zhì)印跡(westernblot)，其說明hgh(seqidno:5)、hgh-ctp(seqidno:9)、hgh-ctp-ctp(seqidno:10)、ctp-hgh-ctp-ctp(seqidno:11)和tctp-hgh-ctp-ctp(seqidno:12)的分子量及同一性。使用單克隆抗-hgh抗體對(duì)pagesds凝膠進(jìn)行印跡和染色。該照片顯示，與商業(yè)化的hgh和野生型hgh一樣，抗-hgh抗體識(shí)別ctp修飾的hgh變異體。圖2是說明切除垂體的(hypophysectomized)大鼠在給予本發(fā)明的gh-ctp多肽(不同的mod)后體重增加的柱狀圖。圖3包括兩個(gè)圖象(1)ctp-hgh-ctp-ctppci-dhfr質(zhì)粒的譜圖和(2)ctp-hgh-ctp-ctp的結(jié)構(gòu)蛋白式。圖4a和圖4b是顯示在大鼠中靜脈內(nèi)(i.v.)或皮下(s.c.)給予單劑量的ctp-hgh-ctp-ctp或gh(n＝3-6每劑量/途徑)之后的平均血漿ctp-hgh-ctp-ctp或gh濃度(pg/ml)的曲線圖。圖5是顯示與每天gh注射(0.1mg/kg/天)相比，在切除垂體的大鼠中皮下給予單劑量的ctp-hgh-ctp-ctp(0.4mg/kg、0.8mg/kg和4mg/kg)(n＝10每劑量)之后的平均增量增重的曲線圖。圖6為顯示在單獨(dú)注射ctp-hgh-ctp-ctp后與大鼠體重增加相關(guān)聯(lián)的曲線下的面積的曲線圖。圖7為顯示與每天gh注射(0.1mg/kg/天)相比，在切除垂體的大鼠中每隔4天皮下給予各劑量的ctp-hgh-ctp-ctp(0.4mg/kg、0.8mg/kg和4mg/kg)(n＝10每劑量)之后的增量增重曲線。圖8為顯示在皮下注射ctp-hgh-ctp-ctp和商業(yè)化的hgh后，切除垂體的大鼠中的hgh血清濃度的曲線。將單劑量的ctp-hgh-ctp-ctp0.6mg/kg或1.8mg/kg和biotropin0.35mg/kg或1.05mg/kg皮下注射到切除垂體的大鼠中，以確定pk/pd曲線。使用特異性elisa試劑盒測(cè)量注射后的血清hgh。圖9為顯示在皮下注射ctp-hgh-ctp-ctp和商業(yè)化的hgh后，切除垂體的大鼠中igf-1血清水平的曲線圖。將單劑量的ctp-hgh-ctp-ctp0.6mg/kg或1.8mg/kg和biotropin0.35mg/kg或1.05mg/kg皮下注射到切除垂體的大鼠中，以確定pk/pd曲線。使用特異性elisa試劑盒(rochediagnostics)測(cè)量注射后的血清igf-1。具體實(shí)施方式在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供一種長(zhǎng)效生長(zhǎng)激素以及生產(chǎn)和使用該長(zhǎng)效生長(zhǎng)激素的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，長(zhǎng)效生長(zhǎng)激素包含羧基末端肽(ctp，也稱為ctp單元)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，長(zhǎng)效多肽包含人絨毛膜促性腺激素(hcg)的羧基末端肽(ctp)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp作為一種防止目的生長(zhǎng)激素或多肽的降解的防護(hù)劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp擴(kuò)展目的生長(zhǎng)激素或多肽的cmax。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp擴(kuò)展目的生長(zhǎng)激素或多肽的tmax。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp擴(kuò)展目的生長(zhǎng)激素或多肽的循環(huán)半衰期。在一些實(shí)施方式中，ctp增強(qiáng)目的生長(zhǎng)激素或多肽的效力。在其他實(shí)施方式中，本發(fā)明的工程化的目的生長(zhǎng)激素或多肽包含連接到氨基末端的單個(gè)ctp和串聯(lián)連接到羧基末端的兩個(gè)ctp肽，其在生物學(xué)活性方面至少與非ctp修飾的目的生長(zhǎng)激素或多肽等效。在其他實(shí)施方式中，本發(fā)明的工程化的目的生長(zhǎng)激素或多肽包含連接到氨基末端的單個(gè)ctp和串聯(lián)連接到羧基末端的兩個(gè)ctp肽，其在藥理學(xué)量度(如藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué))方面至少與非ctp修飾的目的生長(zhǎng)激素或多肽等效。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種多肽，其包含生長(zhǎng)激素以及連接到該生長(zhǎng)激素的氨基末端的至少一個(gè)ctp肽和連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的至少兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種多肽，其包含連接到生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽和連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在本文中術(shù)語“ctp肽”、“羧基末端肽”和“ctp序列”可互換地使用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，羧基末端肽是全長(zhǎng)ctp。在另一個(gè)實(shí)施方式中，羧基末端肽是截短的ctp。每種可能性都代表了本發(fā)明的單獨(dú)的實(shí)施方式。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在本文中“信號(hào)序列”和“信號(hào)肽”可互換地使用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)“序列”涉及多核苷酸時(shí)，其可以指代編碼部分(codingportion)。每種可能性都代表了本發(fā)明的單獨(dú)的實(shí)施方式。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種多肽，其由生長(zhǎng)激素、連接到該生長(zhǎng)激素的氨基末端的單個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽和連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽構(gòu)成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種多肽，其由生長(zhǎng)激素、連接到該生長(zhǎng)激素的氨基末端的單個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽、連接到該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽和連接到一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽的氨基末端的信號(hào)肽構(gòu)成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，與不具有ctp的相同生長(zhǎng)激素相比，包含本文所描述的ctp的生長(zhǎng)激素具有增強(qiáng)的體內(nèi)生物學(xué)活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，與不具有ctp的相同生長(zhǎng)激素相比，包含至少一個(gè)連接到其氨基末端的ctp和至少兩個(gè)連接到其羧基末端的ctp的生長(zhǎng)激素具有增強(qiáng)的體內(nèi)生物學(xué)活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，與不具有ctp的相同生長(zhǎng)激素相比，包含一個(gè)連接到其氨基末端的ctp和兩個(gè)連接到其羧基末端的ctp的生長(zhǎng)激素具有增強(qiáng)的體內(nèi)生物學(xué)活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是人類受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是寵物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是哺乳動(dòng)物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是農(nóng)畜。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是猴子。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是馬。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是牛。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是小鼠。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是大鼠。在一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是男性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，受試者是女性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文所描述的ctp-生長(zhǎng)激素-ctp-ctp的構(gòu)型包含通過肽鍵連接到至少一個(gè)ctp單元的生長(zhǎng)激素或其活性片段。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文所描述的ctp-生長(zhǎng)激素-ctp-ctp包含通過肽鍵連接到至少一個(gè)ctp單元的生長(zhǎng)激素或其活性片段，該至少一個(gè)ctp單元通過肽鍵連接到一個(gè)另外的ctp單元。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文所描述的多肽包含其生長(zhǎng)激素片段和ctp單元和/或通過肽鍵相互連接的其片段。在另一個(gè)實(shí)施方式中，一種核酸分子編碼本文所描述的包含生長(zhǎng)激素和/或其片段以及ctp單元和/或其片段的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，羧基末端肽(ctp)通過接頭(linker)連接到生長(zhǎng)激素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將ctp序列連接至生長(zhǎng)激素的接頭是共價(jià)鍵。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將ctp序列連接到生長(zhǎng)激素的接頭是肽鍵。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將ctp序列連接到生長(zhǎng)激素的接頭是被取代的肽鍵。在另一個(gè)實(shí)施方式中，羧基末端肽(ctp)序列包含選自由seqidno:1和seqidno:2所示的序列的氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，seqidno:1包含下列氨基酸(aa)序列：dprfqdsssskapppslpspsrlpgpsdtpilq(seqidno:1)。在另一個(gè)方式中，seqidno:2包含下列氨基酸(aa)序列：sssskapppslpspsrlpgpsdtpilpq(seqidno:2)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，羧基末端肽(ctp)序列是截短的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，截短的ctp包含下列氨基酸序列：sssskapppslp(seqidno:4)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的羧基末端肽(ctp)的肽包含來自天然人類絨毛膜促性腺激素肽的第112位～第145位氨基酸的氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp序列包含人類絨毛膜促性腺激素肽的第118位～第145位氨基酸的氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp序列還從人類絨毛膜促性腺激素肽的第112位～第118位中的任一位置開始并且在第145位終止。在一些實(shí)施方式中，ctp序列肽為28、29、30、31、32、33或34個(gè)氨基酸長(zhǎng)并且從基因庫(kù)保藏的ctp氨基酸序列的第112、113、114、115、116、117或118位開始。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp肽是在美國(guó)專利號(hào)中所描述的ctp肽，通過引用以其整體內(nèi)容并入本文。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp肽是絨毛膜促性腺激素ctp的變異體，其如美國(guó)專利號(hào)us5,712,122(通過引用以其整體內(nèi)容并入本文)中描述的通過1～5個(gè)保守氨基酸替換而與天然ctp不同。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp肽是絨毛膜促性腺激素ctp的變異體，其通過1個(gè)保守氨基酸替換而與天然ctp不同。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp肽是絨毛膜促性腺激素ctp的變異體，其通過2個(gè)保守氨基酸替換而與天然ctp不同。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp肽是絨毛膜促性腺激素ctp的變異體，其通過3個(gè)保守氨基酸替換而與天然ctp不同。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp肽是絨毛膜促性腺激素ctp的變異體，其通過4個(gè)保守氨基酸替換而與天然ctp不同。在另一個(gè)實(shí)施方式中，ctp肽是絨毛膜促性腺激素ctp的變異體，其通過5個(gè)保守氨基酸替換而與天然ctp不同。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽氨基酸序列與天然ctp氨基酸序列或其肽至少70％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽氨基酸序列與天然ctp氨基酸序列或其肽至少80％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽氨基酸序列與天然ctp氨基酸序列或其肽至少90％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽氨基酸序列與天然ctp氨基酸序列或其肽至少95％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽dna序列與天然人類ctpdna序列或其肽至少70％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽dna序列與天然人類ctpdna序列或其肽至少80％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽dna序列與天然人類ctpdna序列或其肽至少90％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp肽dna序列與天然人類ctpdna序列或其肽至少95％同源。在一個(gè)實(shí)施方式中，截短的ctp包含seqidno:4的最前的11個(gè)氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方式中，截短的ctp包含seqidno:4的最前的8個(gè)氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方式中，截短的ctp包含seqidno:4的最前的13個(gè)氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方式中，截短的ctp包含seqidno:4的最前的6個(gè)氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方式中，截短的ctp包含seqidno:4的最前的5個(gè)氨基酸。在一個(gè)實(shí)施方式中，絨毛膜促性腺激素ctp氨基酸序列中的至少一個(gè)是糖基化的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，絨毛膜促性腺激素ctp氨基酸序列兩者都是糖基化的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，絨毛膜促性腺激素ctp氨基酸序列中的2個(gè)是糖基化的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，絨毛膜促性腺激素ctp氨基酸序列中的2個(gè)以上是糖基化的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所有絨毛膜促性腺激素ctp氨基酸序列都是糖基化的。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp序列包含至少一個(gè)糖基化位點(diǎn)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp序列包含2個(gè)糖基化位點(diǎn)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp序列包含3個(gè)糖基化位點(diǎn)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp序列包含4個(gè)糖基化位點(diǎn)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少一個(gè)羧基末端肽(ctp)序列包含選自seqidno:1和seqidno:2所描述的序列的氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少一個(gè)羧基末端肽(ctp)是截短的。在一個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)術(shù)語“端(termini)”、“末端(terminal)”涉及蛋白質(zhì)或肽或其片段的羧基或氨基末端時(shí)，在本文中可以互換使用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，術(shù)語“c-末端(c-terminal)”、“羧基末端(carboxyterminal)”或“羧基末端(carboxylterminal)”在本文中可互換使用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，“n-末端(n-terminal)”和“氨基末端(aminoterminal)”在本文中可互換使用。每種可能性都代表了本發(fā)明的一個(gè)獨(dú)立的實(shí)施方式中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在生長(zhǎng)激素的氨基末端的ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端的ctp序列兩者都提供了防止生長(zhǎng)激素降解的增強(qiáng)防護(hù)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少一個(gè)在生長(zhǎng)激素的氨基末端的ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端中的兩個(gè)ctp單元提供了防止清除的增強(qiáng)防護(hù)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少一個(gè)在生長(zhǎng)激素的氨基末端的ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端中的兩個(gè)ctp單元提供了延長(zhǎng)的清除時(shí)間。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少一個(gè)在生長(zhǎng)激素的氨基末端的ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端中的兩個(gè)ctp單元增強(qiáng)了生長(zhǎng)激素的cmax。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少一個(gè)在生長(zhǎng)激素的氨基末端的ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端中的兩個(gè)ctp單元增強(qiáng)了生長(zhǎng)激素的tmax。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少一個(gè)在生長(zhǎng)激素的氨基末端的ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端中的兩個(gè)ctp單元增強(qiáng)了生長(zhǎng)激素的tl/2(半衰期)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在生長(zhǎng)激素的氨基末端和在生長(zhǎng)激素的羧基末端兩者上的ctp序列都延長(zhǎng)了該經(jīng)修飾的生長(zhǎng)激素的半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，至少在生長(zhǎng)激素的氨基末端的單個(gè)ctp序列和至少兩個(gè)在生長(zhǎng)激素的羧基末端的ctp序列為該經(jīng)修飾的生長(zhǎng)激素提供了延長(zhǎng)的半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在生長(zhǎng)激素的氨基末端的單個(gè)ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)ctp序列為該經(jīng)連接的(attached)生長(zhǎng)激素提供了延長(zhǎng)的半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在生長(zhǎng)激素的氨基末端的單個(gè)ctp序列和在生長(zhǎng)激素的羧基末端的串聯(lián)的兩個(gè)ctp序列為該經(jīng)修飾的生長(zhǎng)激素提供了延長(zhǎng)的半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在多肽的氨基末端的ctp序列、在生長(zhǎng)激素的羧基末端的ctp序列、和串聯(lián)地連接至在羧基末端的ctp序列的至少一個(gè)另外的ctp序列為生長(zhǎng)激素提供了防降解的增強(qiáng)防護(hù)。在一些實(shí)施方式中，在生長(zhǎng)激素氨基末端的ctp序列、在生長(zhǎng)激素的羧基末端的ctp序列、和串聯(lián)地連接至在羧基末端的ctp序列的至少一個(gè)另外的ctp序列延長(zhǎng)了生長(zhǎng)激素的半衰期。在一些實(shí)施方式中，在生長(zhǎng)激素氨基末端的ctp序列、在生長(zhǎng)激素的羧基末端的ctp序列、和串聯(lián)地連接至在羧基末端的ctp序列的至少一個(gè)另外的ctp序列增強(qiáng)了生長(zhǎng)激素的生物學(xué)活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素進(jìn)一步包含信號(hào)肽。在一些實(shí)施方式中，信號(hào)序列包括但不限于內(nèi)源信號(hào)序列。在一些實(shí)施方式中，信號(hào)序列包括但不限于任何已知的生長(zhǎng)激素或多種生長(zhǎng)激素的內(nèi)源信號(hào)序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的多肽和方法提供了另外具有信號(hào)肽的生長(zhǎng)激素，該信號(hào)肽包含以下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsa(seqidno:3)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以與未修飾的生長(zhǎng)激素相同的方式使用本發(fā)明的結(jié)合的生長(zhǎng)激素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的結(jié)合的生長(zhǎng)激素在活體內(nèi)具有增加的循環(huán)半衰期和血漿停留時(shí)間、降低的清除率和提高的臨床活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，由于本文中的結(jié)合的生長(zhǎng)激素的改良的性質(zhì)，較之未修飾的生長(zhǎng)激素，較低頻率給予這些結(jié)合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文所描述的結(jié)合生長(zhǎng)激素給予每周一次至每?jī)芍芤淮巍Ｔ诹硪粋€(gè)實(shí)施方式中，每?jī)芍芤淮沃撩咳芤淮谓o予本文所描述的結(jié)合的生長(zhǎng)激素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，每天一次至每周三次給予本文所描述的結(jié)合的生長(zhǎng)激素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，降低頻率的給予將帶來改善的患者依從性，從而提高治療效果并提高患者的生活質(zhì)量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，與連接至聚(乙二醇)的生長(zhǎng)激素的常規(guī)結(jié)合物相比，具有本發(fā)明的結(jié)合物的分子量和接頭結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)激素ctp結(jié)合物具有提高的效力、改善的穩(wěn)定性、提高的auc水平、提高的循環(huán)半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，與連接至聚(乙二醇)的生長(zhǎng)激素的常規(guī)結(jié)合物相比，具有本發(fā)明的結(jié)合物的分子量和接頭結(jié)構(gòu)的生長(zhǎng)激素ctp結(jié)合物具有提高的效力、改善的穩(wěn)定性、提高的auc水平、提高的循環(huán)半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，結(jié)合的生長(zhǎng)激素的治療有效量是體內(nèi)可測(cè)量的預(yù)期生物學(xué)活性所需的結(jié)合物的量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)而利用的生長(zhǎng)激素表現(xiàn)出提高的效力。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將ctp序列連接至生長(zhǎng)激素的氨基末端和羧基末端兩者獲得了延長(zhǎng)的體內(nèi)活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，根據(jù)所接受治療的病癥的確切類型、所治療的患者的病情以及組合物中的其他成分等因素來確定結(jié)合的生長(zhǎng)激素的治療有效量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，結(jié)合的生長(zhǎng)激素的治療有效量為0.01～10μg/kg體重，每周給予一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，結(jié)合的生長(zhǎng)激素的治療有效量為0.1～1μg/kg體重，每周給予一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以強(qiáng)有效于通過各種途徑向人類患者給予的方式來配制包含結(jié)合的生長(zhǎng)激素藥物組合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何生長(zhǎng)激素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素是人類生長(zhǎng)激素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以在基因庫(kù)數(shù)據(jù)庫(kù)中獲得生長(zhǎng)激素的核苷酸序列和/或氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素是同源物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，同源物也指其缺失、插入或替換(包括氨基酸替換)的變異體以及其具有生物學(xué)活性的多肽片段。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素是缺少外顯子2、3、4、或它們的任何組合的hgh的變異體。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素包含信號(hào)肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素包含信號(hào)切割位點(diǎn)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本發(fā)明的由ctp修飾的gh的多肽包含重組gh。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文所描述的生長(zhǎng)激素是生長(zhǎng)激素(gh)-樣細(xì)胞因子的超家族中的成員。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文所描述的生長(zhǎng)激素是人類生長(zhǎng)激素(hgh)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類生長(zhǎng)激素包含以下的氨基酸序列(genbank登錄號(hào)p01241)：matgsrtslllafgllclpwlqegsafptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgf(seqidno:5)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類生長(zhǎng)激素包含以下的氨基酸序列：mfptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgf(seqidno:6)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類生長(zhǎng)激素包含以下的氨基酸序列：mfptiplsrlfdnamlrahrlhqla(seqidno:7)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，hgh包含以下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsafptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkvqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgf(seqidno:8)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，hgh是其中hgh的第65位的谷氨酰胺被纈氨酸替換的替換變異體。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)aaa72260的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)aak69708的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)caa01435的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)caa01329的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)caa00380的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)aaa72555的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)np_000506.2的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)np_072053.1的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)np_072054.1的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)np_072055.1的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素包含登錄號(hào)np_072056.1的基因庫(kù)氨基酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼本文的生長(zhǎng)激素的核酸分子編碼本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的生長(zhǎng)激素的任何氨基酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼本文所描述的生長(zhǎng)激素的核酸分子編碼hgh。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼生長(zhǎng)激素的核酸分子包含登錄號(hào)nm_000515.3的基因庫(kù)核酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼生長(zhǎng)激素的核酸分子包含登錄號(hào)nm_022559.2的基因庫(kù)核酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼生長(zhǎng)激素的核酸分子包含登錄號(hào)nm_022560.2的基因庫(kù)核酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼生長(zhǎng)激素的核酸分子包含登錄號(hào)nm_022561.2的基因庫(kù)核酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼生長(zhǎng)激素的核酸分子包含登錄號(hào)nm_022562.2的基因庫(kù)核酸保藏序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本發(fā)明的生長(zhǎng)激素的多肽包含連接到生長(zhǎng)激素的羧基末端的一個(gè)ctp(hgh-ctp)并且具有如下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsafptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgfsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpq(seqidno:9)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本發(fā)明的生長(zhǎng)激素的多肽包含串聯(lián)地連接到生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)ctp(hgh-ctp-ctp)并且具有如下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsafptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgfsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpqsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpq(seqidno:10)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本發(fā)明的生長(zhǎng)激素的多肽包含串聯(lián)地連接到生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)ctp和連接到生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)ctp(ctp-hgh-ctp-ctp)并且具有如下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsasssskapppslpspsrlpgpsdtpilpqfptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgfsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpqsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpq(seqidno:11)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本發(fā)明的生長(zhǎng)激素的多肽包含串聯(lián)地連接到生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)ctp(其中該兩個(gè)ctp中的一個(gè)是截短的)和連接到生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)另外的ctp(tctp-hgh-ctp-ctp)并且具有如下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsasssskapppslpfptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgfsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpqsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpq(seqidno:12)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本發(fā)明的生長(zhǎng)激素的多肽包含連接到生長(zhǎng)激素的羧基末端的一個(gè)ctp和連接到生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)ctp(ctp-hgh-ctp)并且具有如下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsasssskapppslpspsrlpgpsdtpilpqfptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgfsssskapppslpspsrlpgpsdtpilpq(seqidno:13)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含生長(zhǎng)激素和一個(gè)ctp的多肽包含如下的氨基酸序列：matgsrtslllafgllclpwlqegsasssskapppslpspsrlpgpsdtpilpqfptiplsrlfdnamlrahrlhqlafdtyqefeeayipkeqkysflqnpqtslcfsesiptpsnreetqqksnlellrisllliqswlepvqflrsvfanslvygasdsnvydllkdleegiqtlmgrledgsprtgqifkqtyskfdtnshnddallknygllycfrkdmdkvetflrivqcrsvegscgf(seqidno:14)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼具有ctp-hgh-ctp的多肽的多核苷酸分子包含以下的核酸序列：tctagaggacatggccaccggcagcaggaccagcctgctgctggccttcggcctgctgtgcctgccatggctgcaggagggcagcgccagctcttcttctaaggctccacccccatctctgcccagccccagcagactgccgggccccagcgacacacccattctgccccagttccccaccatccccctgagcaggctgttcgacaacgccatgctgagggctcacaggctgcaccagctggcctttgacacctaccaggagttcgaggaagcctacatccccaaggagcagaagtacagcttcctgcagaacccccagacctccctgtgcttcagcgagagcatccccacccccagcaacagagaggagacccagcagaagagcaacctggagctgctgaggatctccctgctgctgatccagagctggctggagcccgtgcagttcctgagaagcgtgttcgccaacagcctggtgtacggcgccagcgacagcaacgtgtacgacctgctgaaggacctggaggagggcatccagaccctgatgggccggctggaggacggcagccccaggaccggccagatcttcaagcagacctacagcaagttcgacaccaacagccacaacgacgacgccctgctgaagaactacgggctgctgtactgcttcagaaaggacatggacaaggtggagaccttcctgaggatcgtgcagtgcagaagcgtggagggcagctgcggcttcagctccagcagcaaggcccctcccccgagcctgccctccccaagcaggctgcctgggccctccgacacaccaatcctgcctcagtgatgaaggtctggatgcggccgc(seqidno:15)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼具有ctp-hgh-ctp-ctp的多肽的多核苷酸分子包含以下的核酸序列：tctagaggacatggccaccggcagcaggaccagcctgctgctggccttcggcctgctgtgcctgccatggctgcaggagggcagcgccagctcttcttctaaggctccacccccatctctgcccagccccagcagactgccgggccccagcgacacacccattctgccccagttccccaccatccccctgagcaggctgttcgacaacgccatgctgagggctcacaggctgcaccagctggcctttgacacctaccaggagttcgaggaagcctacatccccaaggagcagaagtacagcttcctgcagaacccccagacctccctgtgcttcagcgagagcatccccacccccagcaacagagaggagacccagcagaagagcaacctggagctgctgaggatctccctgctgctgatccagagctggctggagcccgtgcagttcctgagaagcgtgttcgccaacagcctggtgtacggcgccagcgacagcaacgtgtacgacctgctgaaggacctggaggagggcatccagaccctgatgggccggctggaggacggcagccccaggaccggccagatcttcaagcagacctacagcaagttcgacaccaacagccacaacgacgacgccctgctgaagaactacgggctgctgtactgcttcagaaaggacatggacaaggtggagaccttcctgaggatcgtgcagtgcagaagcgtggagggcagctgcggcttcagctccagcagcaaggcccctcccccgagcctgccctccccaagcaggctgcctgggccctccgacacaccaatcctgccacagagcagctcctctaaggcccctcctccatccctgccatccccctcccggctgcctggcccctctgacacccctatcctgcctcagtgatgaaggtctggatgcggccgc(seqidno:16)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，編碼具有ctp-hgh-ctp-ctp的多肽的多核苷酸分子包含以下的核酸序列：tctagaggacatggccaccggcagcaggaccagcctgctgctggccttcggcctgctgtgcctgccatggctgcaggagggcagcgccagctcttcttctaaggctccacccccgagcctgcccttccccaccatccccctgagcaggctgttcgacaacgccatgctgagggctcacaggctgcaccagctggcctttgacacctaccaggagttcgaggaagcctacatccccaaggagcagaagtacagcttcctgcagaacccccagacctccctgtgcttcagcgagagcatccccacccccagcaacagagaggagacccagcagaagagcaacctggagctgctgaggatctccctgctgctgatccagagctggctggagcccgtgcagttcctgagaagcgtgttcgccaacagcctggtgtacggcgccagcgacagcaacgtgtacgacctgctgaaggacctggaggagggcatccagaccctgatgggccggctggaggacggcagccccaggaccggccagatcttcaagcagacctacagcaagttcgacaccaacagccacaacgacgacgccctgctgaagaactacgggctgctgtactgcttcagaaaggacatggacaaggtggagaccttcctgaggatcgtgcagtgcagaagcgtggagggcagctgcggcttcagctccagcagcaaggcccctcccccgagcctgccctccccaagcaggctgcctgggccctccgacacaccaatcctgccacagagcagctcctctaaggcccctcctccatccctgccatccccctcccggctgcctggcccctctgacacccctatcctgcctcagtgatgaaggtctggatgcggccgc(seqidno:17)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素與已知的生長(zhǎng)激素的序列是同源的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的生長(zhǎng)激素與本文所公開的生長(zhǎng)激素序列是同源的。在一些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的同源性還涵蓋其缺失、插入或替換(包括氨基酸替換)的變異體以及其具有生物學(xué)活性的多肽片段。在一個(gè)實(shí)施方式中，替換變異體是其中hgh的第65位的谷氨酰胺被纈氨酸替換的變異體[gellerforsetal.,jpharmbiomedanal1989,7:173-83]。在一個(gè)實(shí)施方式中，術(shù)語“人類生長(zhǎng)激素”(hgh)是指表現(xiàn)出hgh活性的多肽(即，刺激生長(zhǎng))，如以genbank登錄號(hào)p01241列出的多肽。在一個(gè)實(shí)施方式中，“人類生長(zhǎng)激素”(hgh)是指表現(xiàn)出hgh活性的多肽(例如，刺激生長(zhǎng))的以genbank登錄號(hào)p01241列出的多肽。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的hgh還指代同源物。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用生物技術(shù)信息國(guó)家中心(ncbi)的blastp軟件使用默認(rèn)參數(shù)所確定的，本發(fā)明的hgh氨基酸序列與genbank登錄號(hào)p01241所列出的hgh序列至少50％同源。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用生物技術(shù)信息國(guó)家中心(ncbi)的blastp軟件使用默認(rèn)參數(shù)所確定的，本發(fā)明的hgh氨基酸序列與genbank登錄號(hào)p01241所列出的hgh序列至少60％同源。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用生物技術(shù)信息國(guó)家中心(ncbi)的blastp軟件使用默認(rèn)參數(shù)所確定的，本發(fā)明的hgh氨基酸序列與genbank登錄號(hào)p01241所列出的hgh序列至少70％同源。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用生物技術(shù)信息國(guó)家中心(ncbi)的blastp軟件使用默認(rèn)參數(shù)所確定的，本發(fā)明的hgh氨基酸序列與genbank登錄號(hào)p01241所記載的hgh序列至少80％同源。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用生物技術(shù)信息國(guó)家中心(ncbi)的blastp軟件使用默認(rèn)參數(shù)所確定的，本發(fā)明的hgh氨基酸序列與genbank登錄號(hào)p01241所列出的hgh序列至少90％同源。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用生物技術(shù)信息國(guó)家中心(ncbi)的blastp軟件使用默認(rèn)參數(shù)所確定的，本發(fā)明的hgh氨基酸序列與genbank登錄號(hào)p01241所記載的hgh序列至少95％同源。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽結(jié)合脂肪細(xì)胞(adipocyte)并且刺激它們分解甘油三酯以及抑制它們攝取并累積循環(huán)脂質(zhì)的能力。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽發(fā)揮主要由胰島素樣生長(zhǎng)因子-i(igf-i)介導(dǎo)的間接作用(如實(shí)施例章節(jié)中所示的)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽通過刺激肝臟和其他組織分泌igf-i來刺激機(jī)體生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，igf-i刺激軟骨細(xì)胞的增殖，導(dǎo)致骨生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，igf-i刺激骨骼肌細(xì)胞的增殖，導(dǎo)致肌肉生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽誘導(dǎo)對(duì)蛋白質(zhì)、脂類和碳水化合物代謝的代謝作用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽具有直接效應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽通過誘導(dǎo)的igf-i而具有間接效應(yīng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽進(jìn)一步包含前導(dǎo)肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽包括ctp截短的構(gòu)建體。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽刺激組織中蛋白質(zhì)合成代謝。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽刺激氨基酸攝取、增強(qiáng)蛋白質(zhì)的合成并減少蛋白質(zhì)的氧化。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽刺激脂肪代謝。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽通過刺激脂肪細(xì)胞中甘油三酯的分解和氧化來刺激脂肪的利用。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽減少體內(nèi)脂肪。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽刺激碳水化合物代謝。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽將血糖維持在正常范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽包含抗胰島素活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽抑制胰島素在外周組織中刺激葡萄糖攝取和在肝臟中提高葡萄糖的合成的能力。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽刺激導(dǎo)致高胰島素血癥的胰島素分泌。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽用于補(bǔ)償在受試者中有限產(chǎn)生或沒有產(chǎn)生的生長(zhǎng)激素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽補(bǔ)償有限產(chǎn)生或沒有產(chǎn)生的生長(zhǎng)激素釋放激素(ghrh)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽補(bǔ)償生長(zhǎng)抑素的活性增加。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽補(bǔ)償有限產(chǎn)生或沒有產(chǎn)生的胃饑餓素。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽用于治療與下丘腦、垂體中或靶細(xì)胞中的病變相關(guān)的疾病。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽用于治療與靶細(xì)胞對(duì)激素的降低的反應(yīng)相關(guān)聯(lián)的疾病。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽用于治療患有嚴(yán)重生長(zhǎng)遲緩的兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽用于治療病理性身材矮小的兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽用于提高運(yùn)動(dòng)成績(jī)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的hgh的多肽用于治療衰老癥狀。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的包含由ctp修飾的hgh的多肽用于治療衰老的美容癥狀。在另一個(gè)實(shí)施方式中，使用gh治療gh缺乏的兒童引起生長(zhǎng)增強(qiáng)，而使用gh治療gh缺乏的成人時(shí)，引起瘦體質(zhì)量(leanbodymass)的增加并降低或減少體內(nèi)脂肪。在另一個(gè)實(shí)施方式中，用ctp修飾形式的gh的治療在兒童和成人中引起了這些效應(yīng)的增強(qiáng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)與每日接受相同劑量的商業(yè)化的未修飾的gh的gh-缺乏的兒童相比時(shí)，用ctp-修飾的hgh在gh-缺乏的兒童中的治療引起了生長(zhǎng)的增強(qiáng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)與每日接受相同劑量的商業(yè)化的未修飾的gh的兒童相比時(shí)，使用ctp-修飾的hgh在兒童中的治療引起了生長(zhǎng)的增強(qiáng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)與每日接受相同劑量的商業(yè)化的未修飾的gh的gh-缺乏的成人相比時(shí)，使用ctp-修飾的hgh在gh-缺乏的成人中的治療引起了瘦體質(zhì)量的增加和體內(nèi)脂肪的減少。在另一個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)與每日接受相同劑量的商業(yè)化的未修飾的gh的成人相比時(shí)，使用ctp-修飾的hgh在成人中的治療引起了瘦體質(zhì)量的增加和體內(nèi)脂肪的減少。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的包含由ctp修飾的hgh的多肽用于在雌性受試者中提高產(chǎn)奶量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp/牛gh結(jié)合物用于在乳牛中提高產(chǎn)奶量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp/動(dòng)物gh構(gòu)建體用于畜牧業(yè)技術(shù)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp/農(nóng)畜gh構(gòu)建體用于增強(qiáng)農(nóng)畜的生長(zhǎng)，例如但不局限于豬。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法提供包含由ctp修飾的hgh的多肽用于刺激肌肉生長(zhǎng)、增加心臟功能、刺激骨骼生長(zhǎng)、保持肌肉的完整性、平衡肌肉代謝、誘導(dǎo)肌肉積累、誘導(dǎo)從頭肌肉積累、增強(qiáng)骨骼負(fù)荷、治療與骨質(zhì)疏松癥有關(guān)的癥狀、治療消耗性疾病、增加脂肪分解、改善體液平衡、治療骨質(zhì)疏松癥、改善肺功能、提高免疫力、再生長(zhǎng)重要器官、不斷增加幸福感、恢復(fù)rem睡眠或它們的任何組合。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法提供包含由ctp修飾的hgh的多肽用于刺激肌肉生長(zhǎng)、增加心臟功能、刺激骨骼生長(zhǎng)、保持肌肉的完整性、平衡肌肉代謝、誘導(dǎo)肌肉積累、誘導(dǎo)從頭肌肉積累、增強(qiáng)骨骼負(fù)荷、治療與骨質(zhì)疏松癥有關(guān)的癥狀、治療消耗性疾病、增加脂肪分解、改善體液平衡、治療骨質(zhì)疏松癥、改善肺功能、提高免疫力、再生長(zhǎng)重要器官、不斷增加幸福感、恢復(fù)rem睡眠或它們的任何組合。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法提供用于治療消耗性疾病、aids、惡病質(zhì)(cachexia)或hgh缺乏癥的hgh，其另外地具有在n-末端的至少一個(gè)ctp氨基酸肽和在c-末端的至少一個(gè)ctp氨基酸肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法提供用于治療消耗性疾病、aids、惡病質(zhì)或hgh缺乏癥的多肽，其包含由ctp修飾的hgh。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的人類生長(zhǎng)激素多肽可以用來治療患有與生長(zhǎng)和體重相關(guān)的病癥的受試者，病癥如生長(zhǎng)缺乏癥、aids、消耗性疾病、衰老、hiv感染的受試者的免疫功能受損、分解代謝疾病、手術(shù)恢復(fù)、充血性心肌病、肝臟移植、肝切除后的肝再生、慢性腎功能衰竭、腎性骨營(yíng)養(yǎng)不良、骨質(zhì)疏松癥、軟骨發(fā)育不全/低軟骨形成癥、骨骼發(fā)育不良、慢性炎癥或營(yíng)養(yǎng)失調(diào)(例如克羅恩氏病)、短腸綜合征、幼年慢性關(guān)節(jié)炎、囊性纖維化、男性不育癥、x-連鎖低磷性佝僂病、唐氏綜合征(down'ssyndrome)、脊柱裂、努南綜合征(noonansyndrome)、肥胖癥、肌肉力量受損和纖維肌痛。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的人類生長(zhǎng)激素多肽可以用來治療患有多發(fā)性硬化癥的受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的人類生長(zhǎng)激素多肽可以用來促進(jìn)肥胖癥受試者的減肥。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的人類生長(zhǎng)激素多肽可以用來減少肥胖癥受試者的體內(nèi)脂肪。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的人類生長(zhǎng)激素多肽可以用來增強(qiáng)受試者的瘦體質(zhì)量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的人類生長(zhǎng)激素多肽可以用來治療患有心臟衰竭、潰瘍性結(jié)腸炎和燒傷的受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的人類生長(zhǎng)激素多肽可以用來建立肌肉(buildmusclemass)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法提供編碼本文所描述的gh蛋白質(zhì)的核酸序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法提供編碼包含由ctp修飾的hgh的多肽的核酸序列，該多肽用于刺激肌肉生長(zhǎng)、增加心臟功能、刺激骨骼生長(zhǎng)、保持肌肉的完整性、平衡肌肉代謝、誘導(dǎo)肌肉積累、誘導(dǎo)從頭肌肉積累、增強(qiáng)骨骼負(fù)荷、治療與骨質(zhì)疏松癥有關(guān)的癥狀、治療消耗性疾病、增加脂肪分解、改善體液平衡、治療骨質(zhì)疏松癥、改善肺功能、提高免疫力、再生長(zhǎng)重要器官、不斷增加幸福感、恢復(fù)rem睡眠或它們的任何組合。在一些實(shí)施方式中，根據(jù)本發(fā)明的教導(dǎo)利用人類生長(zhǎng)激素(hgh)。在一些實(shí)施方式中，連接至hgh的氨基和羧基末端兩者的ctp序列帶來增強(qiáng)的效力(圖2)。在一些實(shí)施方式中，連接至hgh的氨基和羧基末端兩者的ctp序列帶來延長(zhǎng)的體內(nèi)活性。在一些實(shí)施方式中，本文所使用的“多肽”或“蛋白質(zhì)”涵蓋了天然多肽(或者降解產(chǎn)物、人工合成的合成多肽或重組多肽)和肽模擬物(擬肽)(通常為人工合成的合成多肽)以及類肽和半類肽(為多肽的類似物)，在一些實(shí)施方式中，類肽和半類肽為多肽的類似物具有使得多肽在身體中更加穩(wěn)定或更加能夠穿透進(jìn)入細(xì)胞的修飾。在一此實(shí)施方式中，修飾包括但不限于n末端修飾、c末端修飾、多肽鍵修飾(包括但不限于ch2-nh、ch2-s、ch2-s＝o、o＝c-nh、ch2-o、ch2-ch2、s＝c-nh、ch＝ch或cf＝ch)、主鏈修飾以及殘基修飾。用于制備肽模擬物化合物的方法在本領(lǐng)域中眾所周知，并且例如在quantitativedrugdesign,c.a.ramsdengd.,chapter17.2,f.choplinpergamonpress(1992)中有具體描述，其如同在本文進(jìn)行了充分闡述一樣通過引用而并入。關(guān)于本方面的進(jìn)一步詳細(xì)說明如下文。在一些實(shí)施方式中，多肽中的多肽鍵(-co-nh-)被替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被n-甲基化鍵(-n(ch3)-co-)替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被酯鍵(-c(r)h-c-o-o-c(r)-n-)替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被酮亞甲基鍵(-co-ch2-)替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被α-氮雜鍵(-nh-n(r)-co-)替換，其中r為任何烷基，例如甲基，亞甲基氨基鍵(carbabonds)(-ch2-nh-)。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被羥基亞乙基鍵(-ch(oh)-ch2-)替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被硫代酰胺鍵(-cs-nh-)替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被烯屬雙鍵(-ch＝ch-)替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被反式酰胺鍵(retroamidebonds)(-nh-co-)替換。在一些實(shí)施方式中，多肽鍵被多肽衍生物(-n(r)-ch2-co-)替換，其中r為自然地存在于碳原子上的“正?！眰?cè)鏈。在一些實(shí)施方式中，這些修飾可以在沿著多肽鏈的任何鍵上發(fā)生并且甚至同時(shí)在多個(gè)鍵(2～3個(gè)鍵)上發(fā)生。在一些實(shí)施方式中，多肽的天然芳香族氨基酸(如trp、tyr和phe)被替換為合成的非天然酸，如苯基甘氨酸、tic、萘基丙氨酸(no1)、phe的環(huán)-甲基化衍生物、phe的鹵化衍生物或o-甲基-tyr。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的多肽包括一種或多種修飾的氨基酸、或一種或多種非氨基酸單體(例如，脂肪酸、復(fù)合碳水化合物等)。在一個(gè)實(shí)施方式中，“氨基酸”或“氨基酸”應(yīng)理解為包括20種天然存在的氨基酸；通常在活體內(nèi)在翻譯后修飾的那些氨基酸，包括例如羥脯氨酸、磷酸絲氨酸和磷酸蘇氨酸；以及其他非普通的氨基酸，包括但不限于2-氨基己二酸、羥基賴氨酸、鎖鏈素(isodesmosine)、正纈氨酸、正亮氨酸和鳥氨酸。在一個(gè)實(shí)施方式中，“氨基酸”包括d-氨基酸和l-氨基酸。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的多肽被用在其中需要多肽為可溶形式的治療中。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的多肽包括一種或多種非天然的或天然的極性氨基酸，包括但不限于絲氨酸和蘇氨酸，絲氨酸和蘇氨酸由于含有羥基的側(cè)鏈而能夠提高多肽的溶解性。在一些實(shí)施方式中，以線性形式利用本發(fā)明的包含由ctp修飾的hgh的多肽，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解，在環(huán)化不會(huì)嚴(yán)重干擾由ctp修飾的hgh的特性的情況下，也可以利用環(huán)化形式的生長(zhǎng)激素。在一些實(shí)施方式中，本發(fā)明的由ctp修飾的hgh是生化合成的，如通過使用標(biāo)準(zhǔn)的固相技術(shù)。在一些實(shí)施方式中，這些生化方法包括專屬固相合成(exclusivesolidphasesynthesis)、部分固相合成、片段縮合或經(jīng)典的溶液合成。在一些實(shí)施方式中，當(dāng)生長(zhǎng)激素相對(duì)較短(約5-15kda)和/或當(dāng)不能通過重組技術(shù)產(chǎn)生(即，不是由核酸序列編碼的)并由此涉及不同的化學(xué)品(chemistry)時(shí)，使用這些方法。在一些實(shí)施方式中，由ctp修飾的hgh的固相合成步驟為本領(lǐng)域技術(shù)人員的熟知并且由johnmorrowstewart和janisdillahayoung,solidphasepolypeptidesyntheses(2nded.,piercechemicalcompany,1984)做了進(jìn)一步的描述。在一些實(shí)施方式中，通過制備型高效液相色譜法來純化所合成的多肽[creightont.(1983)proteins,structuresandmolecularprinciples.whfreemanandco.n.y.]，并且可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的方法通過氨基酸測(cè)序來確認(rèn)其組成。在一些實(shí)施方式中，使用重組蛋白技術(shù)來生成本發(fā)明的由ctp修飾的hgh。在一些實(shí)施方式中，使用重組蛋白技術(shù)來生成相對(duì)較長(zhǎng)的多肽(例如，長(zhǎng)于18～25個(gè)氨基酸)。在一些實(shí)施方式中，使用重組蛋白技術(shù)來生成大量的本發(fā)明的由ctp修飾的hgh。在一些實(shí)施方式中，由bitteretal.,(1987)methodsinenzymol.153:516-544；studieretal.(1990)methodsinenzymol.185:60-89；brissonetal.(1984)nature310:511-514；takamatsuetal.(1987)emboj.6:307-311；coruzzietal.(1984)emboj.3:1671-1680和broglietal.,(1984)science224:838-843；gurleyetal.(1986)mol.cell.biol.6:559-565和weissbach&weissbach,1988,methodsforplantmolecularbiology,academicpress,ny,sectionviii,pp421-463所描述重組技術(shù)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，使用編碼本發(fā)明的多肽的多核苷酸來合成本發(fā)明的由ctp修飾的hgh。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將編碼本發(fā)明的由ctp修飾的hgh的多核苷酸連接到(ligateinto)表達(dá)載體中，該表達(dá)載體包含轉(zhuǎn)錄控制的順式調(diào)控序列(例如，啟動(dòng)子序列)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，順式調(diào)控序列適合于引導(dǎo)本發(fā)明的生長(zhǎng)激素的組成型表達(dá)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，順式調(diào)控序列適合于引導(dǎo)本發(fā)明的由ctp修飾的hgh的組織特異性表達(dá)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，順式調(diào)控序列適合于引導(dǎo)本發(fā)明的由ctp修飾的hgh的誘導(dǎo)型表達(dá)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，適合與本發(fā)明一起使用的組織特異性啟動(dòng)子包含在特定的細(xì)胞群中具有功能的序列，實(shí)例包括但不限于啟動(dòng)子，如肝特異性的啟動(dòng)子如白蛋白的啟動(dòng)子[pinkertetal.,(1987)genesdev.1:268-277]；淋巴特異性啟動(dòng)子[calameetal.,(1988)adv.immunol.43:235-275]；特別是t細(xì)胞受體[winotoetal.,(1989)emboj.8:729-733]和免疫球蛋白[banerjietal.(1983)cell33729-740]的啟動(dòng)子；神經(jīng)元特異性啟動(dòng)子，如神經(jīng)絲蛋白啟動(dòng)子[byrneetal.(1989)proc.natl.acad.sci.usa86:5473-5477]；胰腺特異性啟動(dòng)子[edlunchetal.(1985)science230:912-916]；或乳腺特異性啟動(dòng)子，如乳清啟動(dòng)子(美國(guó)專利號(hào)us4,873,316和歐洲專利申請(qǐng)公開號(hào)264,166)。適合于與本發(fā)明一起使用的誘導(dǎo)型啟動(dòng)子包括例如四環(huán)素誘導(dǎo)型啟動(dòng)子(srour,m.a.,etal.,2003.thromb.haemost.90:398-405)。在一個(gè)實(shí)施方式中，短語“多核苷酸”是指以rna序列、互補(bǔ)多核苷酸序列(cdna)、基因組核苷酸序列和/或復(fù)合多核苷酸序列(例如前述的組合)的形式分離并提供的單鏈或雙鏈核酸序列。在一個(gè)實(shí)施方式中，“互補(bǔ)多核苷酸序列”是指這樣的序列，其是使用逆轉(zhuǎn)錄酶或任何其他rna依賴性dna聚合酶逆轉(zhuǎn)錄信使rna產(chǎn)生的。在一個(gè)實(shí)施方式中，序列可以使用dna聚合酶在體內(nèi)或體外隨后進(jìn)行擴(kuò)增。在一個(gè)實(shí)施方式中，“基因組核苷酸序列”是指源自(分離自)染色體的序列，因此其代表了染色體的一個(gè)連續(xù)部分。在一個(gè)實(shí)施方式中，“復(fù)合多核苷酸序列”是指這樣的序列，其至少部分地互補(bǔ)并且至少部分地是基因組。在一個(gè)實(shí)施方式中，復(fù)合序列可以包括編碼本發(fā)明的多肽所需的一些外顯子序列(exonalsequence)以及插入在其間的一些內(nèi)含子序列(intronicsequence)。在一個(gè)實(shí)施方式中，內(nèi)含子序列可以是任何來源的，包括其他基因來源，并且典型地可包括保守的剪接信號(hào)序列。在一個(gè)實(shí)施方式中，內(nèi)含子序列包括順式作用的表達(dá)調(diào)控元件。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的多核苷酸是使用如實(shí)施例1中所描述的pcr技術(shù)或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何其他方法或步驟來制備的。在一個(gè)實(shí)施方式中，步驟包含兩個(gè)不同的dna序列的連接(參見例如，"currentprotocolsinmolecularbiology",eds.ausubeletal.,johnwiley&sons,1992)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的多核苷酸被插入到表達(dá)載體中(即核酸構(gòu)建體)以使重組多肽能夠表達(dá)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的表達(dá)載體包括另外的序列，其使得該載體適合于在原核生物中復(fù)制和整合。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的表達(dá)載體包括另外的序列，其使得該載體適合于在真核生物中復(fù)制和整合。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的表達(dá)載體包括穿梭載體，其使得該載體適合于在原核生物和真核生物中復(fù)制和整合。在另一個(gè)實(shí)施方式中，克隆載體包含轉(zhuǎn)錄和翻譯起始序列(例如，啟動(dòng)子和增強(qiáng)子)以及轉(zhuǎn)錄和翻譯終止子(例如，多聚腺苷酸化信號(hào))。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以使用各種原核細(xì)胞或真核細(xì)胞作為宿主表達(dá)系統(tǒng)以表達(dá)本發(fā)明的由ctp修飾的hgh。在一些實(shí)施方式中，這些包括但不限于微生物，例如用含有多肽編碼序列的重組噬菌體dna、質(zhì)粒dna或粘粒dna表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的細(xì)菌；用含有多肽編碼序列的重組酵母表達(dá)載體轉(zhuǎn)化的酵母；使用含有多肽編碼序列的重組病毒表達(dá)載體(例如花椰菜花葉病毒camv；煙草花葉病毒tmv)感染的或用含有多肽編碼序列的重組質(zhì)粒表達(dá)載體(例如ti質(zhì)粒)轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞系統(tǒng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，使用非細(xì)菌表達(dá)系統(tǒng)(例如哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)，如cho細(xì)胞)來表達(dá)本發(fā)明的生長(zhǎng)激素。在一個(gè)實(shí)施方式中，用來在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)本發(fā)明的多核苷酸的表達(dá)載體是包含cmv啟動(dòng)子和新霉素抗性基因的pci-dhfr載體。在實(shí)施例1中描述了根據(jù)一個(gè)實(shí)施方式的pci-dhfr載體的構(gòu)建。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在本發(fā)明的細(xì)菌系統(tǒng)中，取決于所表達(dá)的多肽的預(yù)期用途可以有利地選擇若干表達(dá)載體。在一個(gè)實(shí)施方式中，需要大量的多肽。在一個(gè)實(shí)施方式中，引導(dǎo)表達(dá)高水平的蛋白質(zhì)產(chǎn)物的載體可能作為與疏水性信號(hào)序列的融合體，該信號(hào)序列將所表達(dá)的產(chǎn)物導(dǎo)向至細(xì)菌的周質(zhì)或培養(yǎng)基中，其中蛋白質(zhì)產(chǎn)物如期望的容易地進(jìn)行純化。在一個(gè)實(shí)施方式中，以特異性切割位點(diǎn)工程化的特定融合蛋白有助于多肽的回收。在一個(gè)實(shí)施方式中，適合于此種操作的載體包括但不限于pet系列的大腸桿菌表達(dá)載體[studieretal.,methodsinenzymol.185:60-89(1990)]。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用了酵母表達(dá)系統(tǒng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，如美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)杣s5,932,447中所公開的，在酵母中可以使用許多個(gè)含有組成型或誘導(dǎo)型啟動(dòng)子的載體。在另一個(gè)實(shí)施方式中，使用促進(jìn)外源dna序列整合進(jìn)入到酵母染色體的載體。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的表達(dá)載體可以進(jìn)一步包括另外的多核苷酸序列，其允許例如從單一的mrna翻譯的幾種蛋白質(zhì)，例如內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)(ires)和用于啟動(dòng)子-嵌合多肽的基因組整合的序列。在另一個(gè)實(shí)施方式中，哺乳動(dòng)物表達(dá)載體包括但不限于pcdna3、pcdna3.1(+/-)、pgl3、pzeosv2(+/-)、psectag2、pdisplay、pef/myc/cyto、pcmv/myc/cyto、pcr3.1、psinrep5、dh26s、dhbb、pnmtl、pnmt41、pnmt81(這些可以獲自invitrogen)、pci(可以獲自promega)、pmbac、ppbac、pbk-rsv和pbk-cmv(這些可以獲自strategene)、ptres(可以獲自clontech)以及它們的衍生物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明使用了含有來自真核病毒(如逆轉(zhuǎn)錄病毒)的調(diào)控元件的表達(dá)載體。sv40載體包括psvt7和pmt2。在一些實(shí)施方式中，源自牛乳頭狀瘤病毒的載體包括pbv-lmtha，而源自埃-巴二氏病毒(epsteinbarvirus)的載體包括phebo和p2o5。其他示例性的載體包括pmsg、pav009/a+、pmto10/a+、pmamneo-5、桿狀病毒pdsve，以及在sv-40早期啟動(dòng)子、sv-40后期啟動(dòng)子、金屬硫蛋白啟動(dòng)子、鼠乳腺腫瘤病毒啟動(dòng)子、勞斯肉瘤病毒啟動(dòng)子、多角體蛋白啟動(dòng)子、或在真核細(xì)胞中顯示對(duì)于表達(dá)有效的其他啟動(dòng)子的引導(dǎo)下允許表達(dá)蛋白質(zhì)的任何其他載體。在另一個(gè)實(shí)施方式中，重組病毒載體對(duì)于在活體內(nèi)表達(dá)本發(fā)明的由ctp修飾的gh有用，因?yàn)樗鼈兲峁┝藘?yōu)勢(shì)如橫向感染和特異性靶向。在一個(gè)實(shí)施方式中，橫向感染是例如逆轉(zhuǎn)錄病毒的生命周期中所固有的，并且通過該過程單一感染的細(xì)胞產(chǎn)生許多子代病毒粒子，這些子代病毒粒子出芽并感染鄰近細(xì)胞。在另一個(gè)實(shí)施方式中，結(jié)果是大面積迅速地被感染，其中大部分最初不是被原始病毒顆粒感染的。在一個(gè)實(shí)施方式中，產(chǎn)生的病毒載體無法橫向擴(kuò)散。在另一個(gè)實(shí)施方式中，如果所需的目的是將指定的基因只引入到局部數(shù)量的靶細(xì)胞中，那么這種特性是有用的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以使用各種方法將本發(fā)明的表達(dá)載體引入到細(xì)胞中。此類方法通常描述于sambrooketal.,molecularcloning:alaboratorymanual,coldspringsharborlaboratory,newyork(1989,1992)；ausubeletal.,currentprotocolsinmolecularbiology,johnwileyandsons,baltimore,md.(1989)；changetal.,somaticgenetherapy,crcpress,annarbor,mich.(1995)；vegaetal.,genetargeting,crcpress,annarbormich.(1995)；vectors:asurveyofmolecularcloningvectorsandtheiruses,butterworths,bostonmass.(1988)和gilboaetat.[biotechniques4(6):504-512,1986]中，并且包括例如穩(wěn)定或瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、電穿孔以及使用重組病毒載體的感染。另外，對(duì)于正-負(fù)選擇方法，參見美國(guó)專利號(hào)us5,464,764和us5,487,992。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過病毒感染引入核酸相對(duì)于其他方法(如脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染和電穿孔)提供了多種優(yōu)勢(shì)，因?yàn)橥ㄟ^病毒的傳染性可以得到更高的轉(zhuǎn)染效率。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以理解的是，還可以由采用上文描述的任何合適的給予模式給予至個(gè)體中的核酸構(gòu)建體來表達(dá)本發(fā)明的由ctp修飾的gh(即體內(nèi)基因治療)。在一個(gè)實(shí)施方式中，通過合適的基因載體/方法(轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)導(dǎo)、同源重組等)以及所需的表達(dá)系統(tǒng)將核酸構(gòu)建體引入到適合的細(xì)胞中，然后將修飾的細(xì)胞在培養(yǎng)基中擴(kuò)增并返回到個(gè)體中(即離體基因治療)。在一個(gè)實(shí)施方式中，已經(jīng)在動(dòng)物模型中進(jìn)行了使用生長(zhǎng)激素的體內(nèi)基因治療。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用了植物表達(dá)載體。在一個(gè)實(shí)施方式中，由多個(gè)啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)多肽編碼序列的表達(dá)。在一些實(shí)施方式中，使用了病毒啟動(dòng)子如camv的35srna和19srna啟動(dòng)子[brissonetal.,nature310:511-514(1984)]，或tmv的外殼蛋白啟動(dòng)子[takamatsuetal,emboj.6:307-311(1987)]。在另一個(gè)實(shí)施方式中，使用了植物啟動(dòng)子，如，例如，rubisco的小亞單元[coruzzietal,emboj.3:1671-1680(1984)；和broglietal,science224:838-843(1984)]，或熱休克啟動(dòng)子，例如，大豆hspl7.5-e或hspl7.3-b[gurleyetal,mol.cell.biol.6:559-565(1986)]。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用ti質(zhì)粒、ri質(zhì)粒、植物病毒載體、直接dna轉(zhuǎn)化、微注射、電穿孔或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其他技術(shù)來將構(gòu)建體引入到植物細(xì)胞中。參見，例如，weissbach&weissbach[methodsforplantmolecularbiology,academicpress,ny,sectionviii,pp421-463(1988)]。本發(fā)明還可以使用本領(lǐng)域中眾所周知的其他表達(dá)系統(tǒng)，例如昆蟲和哺乳動(dòng)物宿主細(xì)胞系統(tǒng)?？梢岳斫獾氖牵撕杏糜谵D(zhuǎn)錄和翻譯所插入的編碼序列(編碼多肽)所需的必要元件之外，本發(fā)明的表達(dá)構(gòu)建體還可以包括工程化的序列以優(yōu)化所表達(dá)的多肽的穩(wěn)定性、生產(chǎn)、純化、產(chǎn)量或活性。在一些實(shí)施方式中，可以使用多種方法來將本發(fā)明的表達(dá)載體引入到宿主細(xì)胞系統(tǒng)中。在一些實(shí)施方式中，此類方法通常描述于sambrooketal.,molecularcloning:alaboratorymanual,coldspringsharborlaboratory,newyork(1989,1992)；ausubeletal.,currentprotocolsinmolecularbiology,johnwileyandsons,baltimore,md.(1989)；changetal.,somaticgenetherapy,crcpress,annarbor,mich.(1995)；vegaetal.,genetargeting,crcpress,annarbormich.(1995),vectors:asurveyofmolecularcloningvectorsandtheiruses,butterworths,bostonmass.(1988)和gilboaetat.[biotechniques4(6):504-512,1986]中，并且包括例如穩(wěn)定或瞬時(shí)轉(zhuǎn)染、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、電穿孔以及使用重組病毒載體的感染。另外，對(duì)于正-負(fù)選擇方法，參見美國(guó)專利號(hào)us5,464,764和us5,487,992。在一個(gè)實(shí)施方式中，在有效條件下培養(yǎng)轉(zhuǎn)化細(xì)胞，該有效條件允許表達(dá)大量的重組多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，有效培養(yǎng)條件包括但不限于允許蛋白質(zhì)生產(chǎn)的有效培養(yǎng)基、生物反應(yīng)器、溫度、ph和氧條件。在一個(gè)實(shí)施方式中，有效培養(yǎng)基是指在其中培養(yǎng)細(xì)胞以產(chǎn)生本發(fā)明的重組多肽的任何培養(yǎng)基。在另一個(gè)實(shí)施方式中，培養(yǎng)基典型地包括具有可同化的碳源、氮源和磷源、以及適當(dāng)?shù)柠}、礦物質(zhì)、金屬和其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如維生素)的水溶液。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的細(xì)胞可以培養(yǎng)于傳統(tǒng)的發(fā)酵生物反應(yīng)器、搖瓶、試管、微量滴定板和陪替氏平皿中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，培養(yǎng)是在適合于重組細(xì)胞的溫度、ph和氧含量下進(jìn)行的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，培養(yǎng)條件在本領(lǐng)域普通技術(shù)人員的專業(yè)知識(shí)范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，取決于用于生產(chǎn)的載體和宿主系統(tǒng)，所得到的本發(fā)明的生長(zhǎng)激素保留在該重組細(xì)胞中、分泌到發(fā)酵培養(yǎng)基中、分泌到兩個(gè)細(xì)胞膜之間的空間中(例如大腸桿菌的周質(zhì)空間)；或者保留在細(xì)胞或病毒膜的外表面。在一個(gè)實(shí)施方式中，在培養(yǎng)預(yù)定的時(shí)間之后，進(jìn)行重組多肽的回收。在一個(gè)實(shí)施方式中，本文中使用的短語“回收重組多肽”是指收集含有該多肽的全部發(fā)酵培養(yǎng)基并且并不意味著需要另外的分離或純化的步驟。在一個(gè)實(shí)施方式中，采用各種標(biāo)準(zhǔn)的蛋白質(zhì)純化技術(shù)來純化本發(fā)明的生長(zhǎng)激素，例如但不限于親和色譜法、離子交換色譜法、過濾、電泳、疏水相互作用色譜法、凝膠過濾色譜法、反相色譜法、刀豆蛋白a色譜法、色譜聚焦和微分溶解。在一個(gè)實(shí)施方式中，為了便于回收，可以將所表達(dá)的編碼序列進(jìn)行工程化以編碼本發(fā)明的多肽并且融合可裂解部分。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以設(shè)計(jì)融合蛋白質(zhì)使得可以通過親和色譜法容易地分離多肽；例如，通過固定在對(duì)可裂解部分特異的柱上。在一個(gè)實(shí)施方式中，將切割位點(diǎn)設(shè)計(jì)在該多肽與該可裂解部分之間，由此通過使用在該位點(diǎn)特異地切割融合蛋白質(zhì)的適合的酶或藥劑進(jìn)行處理，可以從色譜柱上釋放多肽[例如參見boothetal.,immunol.lett.19:65-70(1988)；和gardellaetal,j.biol.chem.265:15854-15859(1990)]。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的多肽是以“基本上純的(substantiallypure)”形式回收的。在一個(gè)實(shí)施方式中，短語“基本上純的”是指純度允許在本文所描述的應(yīng)用中有效使用蛋白質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方式中，也可以使用體外表達(dá)系統(tǒng)來合成本發(fā)明的多肽。在一個(gè)實(shí)施方式中，體外合成方法是本領(lǐng)域眾所周知的并且該系統(tǒng)的組分是可以商業(yè)購(gòu)的。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用重組dna技術(shù)來進(jìn)行由ctp修飾的gh的生產(chǎn)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，合成并純化了重組多肽；可以在體內(nèi)或體外測(cè)定它們的治療效力。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以使用各種測(cè)定方法來確定本發(fā)明的由ctp修飾的重組gh的結(jié)合活性。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明包含ctp-hgh-ctp-ctp多肽。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用重組dna技術(shù)方法來生產(chǎn)ctp-hgh-ctp-ctp，如實(shí)施例1所示。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp-hgh-ctp-ctp多肽的治療效力是在體內(nèi)測(cè)定的。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp-hgh-ctp-ctp多肽的治療效力是在體外測(cè)定的。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的重組hgh多肽的結(jié)合活性是使用預(yù)先用人生長(zhǎng)激素受體轉(zhuǎn)染的nb2(催乳激素依賴性大鼠淋巴瘤細(xì)胞系(ecacc細(xì)胞庫(kù)))或fcd-p1鼠細(xì)胞系來測(cè)量的。在一個(gè)實(shí)施方式中，hgh與這些受體的結(jié)合誘導(dǎo)細(xì)胞增殖，這在一個(gè)實(shí)施方式中通過作為hgh活性的函數(shù)的mtt細(xì)胞染色的水平來測(cè)量的。在一個(gè)實(shí)施方式中，通過測(cè)量經(jīng)治療的生長(zhǎng)激素缺乏癥的動(dòng)物中隨時(shí)間的體重增加來推斷體內(nèi)活性的。在一個(gè)實(shí)施方式中，發(fā)明提供了一種在受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)或體重增加的方法，包括向該受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至所述生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)或體重增加。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)的方法，包括向所述受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至所述生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至所述生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在所述受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述人類受試者是青少年。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述人類受試者是兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是gh-缺乏癥兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中誘導(dǎo)體重增加的方法，包括向所述受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至所述生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至所述生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在所述受試者中誘導(dǎo)體重增加。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述人類受試者是青少年。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述人類受試者是兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是gh-缺乏癥兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中誘導(dǎo)體重減輕或減少體內(nèi)脂肪的方法，包括向所述受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至所述生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至所述生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在所述受試者中誘導(dǎo)體重減輕或減少體內(nèi)脂肪。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者是肥胖者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者是超重者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是成人。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是gh-缺乏癥成人。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在受試者中減少脂肪沉積的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在受試者中增加肌肉質(zhì)量的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在受試者中促進(jìn)肌肉生長(zhǎng)的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是成人。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是gh-缺乏癥成人。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了提高肌肉與脂肪的比率的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種降低身體質(zhì)量指數(shù)(bmi)或克托萊指數(shù)(queteletindex)的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文提供了一種在受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)的方法，包括向受試者給予本文所描述的由ctp修飾的生長(zhǎng)激素。在一個(gè)實(shí)施方式中，將ctp-修飾的生長(zhǎng)激素直接給予至受試者，而在另一個(gè)實(shí)施方式中，將編碼所述ctp-修飾的生長(zhǎng)激素的多核苷酸給予到受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文提供了一種在受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)的方法，包括向受試者給予由已知賦形劑、已知載體(vehicle)和多肽構(gòu)成的組合物，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至該生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文提供了一種在受試者中誘導(dǎo)生長(zhǎng)的方法，包括向受試者給予由已知賦形劑、已知載體和多肽構(gòu)成的組合物，該多肽由生長(zhǎng)激素、連接至該生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽構(gòu)成。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過體重增加來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過身高增長(zhǎng)來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過體重增加來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過肌肉質(zhì)量增加來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過體重增加來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過骨骼質(zhì)量增加來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過體重增加來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過脂肪增加來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的任何已知量度來測(cè)量生長(zhǎng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，其中測(cè)量生長(zhǎng)的受試者是兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，其中測(cè)量生長(zhǎng)的受試者是gh-缺乏癥兒童。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～90微克在0.1～5ml的溶液中的劑量來給予本發(fā)明的包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的gh的多肽是以1～50微克于0.1～5ml的溶液中的劑量來給予的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～25微克在0.1～5ml的溶液中的劑量來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以50～90微克在0.1～5ml的溶液中的劑量來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以10～50微克在0.1～5ml的溶液中的劑量來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～90微克在0.1～5ml的溶液中的劑量，每周一次，通過肌內(nèi)(im)注射、皮下(sc)注射或靜脈內(nèi)(iv)注射來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～90微克在0.1～5ml的溶液中的劑量，每周兩次，通過肌內(nèi)(im)注射、皮下(sc)注射或靜脈內(nèi)(iv)注射來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～90微克在0.1～5ml的溶液中的劑量，每周三次，通過肌內(nèi)(im)注射、皮下(sc)注射或靜脈內(nèi)(iv)注射來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～90微克在0.1～5ml的溶液中的劑量，每?jī)芍芤淮?，通過肌內(nèi)(im)注射、皮下(sc)注射或靜脈內(nèi)(iv)注射來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～90微克于0.1～5ml的溶液中的劑量，每17天一次，通過肌內(nèi)(im)注射、皮下(sc)注射或靜脈內(nèi)(iv)注射來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以1～90微克于0.1～5ml的溶液中的劑量，每19天一次，通過肌內(nèi)(im)注射、皮下(sc)注射或靜脈內(nèi)(iv)注射來給予包含由ctp修飾的gh的多肽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，分子量低于50,000道爾頓(dalton)的蛋白質(zhì)藥物(如本發(fā)明的由ctp修飾的gh)一般來說在體內(nèi)是短命物種，具有幾個(gè)小時(shí)的短循環(huán)半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，皮下給予途徑一般提供了較慢的向循環(huán)的釋放。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp修飾的多肽延長(zhǎng)了分子量低于50,000道爾頓的蛋白質(zhì)藥物(例如gh)的半衰期。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的ctp修飾的多肽使得gh能夠在更長(zhǎng)的時(shí)間段內(nèi)發(fā)揮期有益效果。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的gh的ctp修飾多肽的免疫原性與分離的gh相等。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含由ctp修飾的gh的ctp修飾多肽的免疫原性可以與分離的gh相當(dāng)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，用ctp肽修飾本文所描述的gh降低了gh的免疫原性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含gh的ctp修飾多肽的活性與分離的gh肽相同。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含gh的ctp修飾多肽比分離的gh更具活性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含gh的ctp修飾多肽使得該生長(zhǎng)激素的防降解的防護(hù)能力最大化，并同時(shí)使得生物學(xué)活性的降低最小化。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將本發(fā)明的由ctp修飾的gh本身(perse)提供給個(gè)體。在一個(gè)實(shí)施方式中，將本發(fā)明的由ctp修飾的gh作為藥物組合物的一部分提供給個(gè)體，在該藥物組合物中，由ctp修飾的gh與藥學(xué)上可接受的載體混合。在另一個(gè)實(shí)施方式中，“藥物組合物”是指本文所描述的一種或多種活性成分與其他化學(xué)組分(如生理上適宜的載體和賦形劑)的制劑。藥物組合物的用途是便于將化合物給予至有機(jī)體。在另一個(gè)實(shí)施方式中，“活性成分”是指目的多肽序列，其提供出的生物學(xué)效應(yīng)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供組合制劑(combinedpreparation)。在一個(gè)實(shí)施方式中，“組合制劑”尤其限定一種“部分試劑盒(kitofparts)”，在這個(gè)意義上，如上限定的組合搭配(combinationpartner)可以單獨(dú)地或者通過使用與不同量的組合搭配的不同固定組合，即同時(shí)地、并行地、分別地或順序地給藥。在另一個(gè)實(shí)施方式中，部分試劑盒的各部分可以隨后例如同時(shí)地給予或按時(shí)間順序交錯(cuò)地給予，即在不同的時(shí)間點(diǎn)并且以相等或不同的時(shí)間間隔來給予部分試劑盒的任何部分。組合搭配的總量的比率可以施用在組合制劑中。組合制劑可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地做出改變，例如，為了應(yīng)對(duì)待治療的患者亞群的需要或單個(gè)患者的需要，這些不同的需要可能是由特定疾病、疾病的嚴(yán)重程度、年齡、性別或體重帶來的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可互換使用的短語“生理學(xué)上可接受的載體”和“藥學(xué)上可接受的載體”是指不會(huì)給生物體帶來顯著刺激且不會(huì)消除所施用的化合物的生物學(xué)活性和性質(zhì)的載體或稀釋劑。佐劑也包括在這些短語中。在一個(gè)實(shí)施方式中，包括于藥學(xué)上可接受的載體中的成分之一可以是例如聚乙二醇(peg)，其為一種在有機(jī)和水介質(zhì)中都具有寬范圍的溶解度的生物相容性聚合物(mutteretal.(1979))。在另一個(gè)實(shí)施方式中，“賦形劑”是指添加到藥物組合物中以進(jìn)一步便于給予活性成分的惰性物質(zhì)。在一個(gè)實(shí)施方式中，賦形劑包括碳酸鈣、磷酸鈣、各種糖類和各種類型的淀粉、纖維素衍生物、明膠、植物油和聚乙二醇。用于配制藥物和給予藥物的技術(shù)可以在最新版本的"remington'spharmaceuticalsciences,"mackpublishingco.,easton,pa中找到，通過引用將其并入本文。在另一個(gè)實(shí)施方式中，適合的給予途徑，例如包括口服、經(jīng)直腸、經(jīng)粘膜、經(jīng)鼻、經(jīng)腸或腸胃外遞送，該腸胃外遞送包括肌內(nèi)、皮下和髓內(nèi)注射以及鞘內(nèi)、直接心室內(nèi)、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)、鼻內(nèi)或眼內(nèi)注射。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以局部而非全身性的方式給予制劑，例如，通過將制劑直接注射到患者身體的特定區(qū)域中。本發(fā)明構(gòu)想了各種劑量范圍的實(shí)施方式。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的由ctp修飾的gh的劑量在0.005mg/天～100mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.005mg/天～5mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.01mg/天～50mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.1mg/天～20mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.1mg/天～10mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.01mg/天～5mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.001mg/天～0.01mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.001mg/天～0.1mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.1mg/天～5mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.5mg/天～50mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.2mg/天～15mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.8mg/天～65mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在1mg/天～50mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在5mg/天～10mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在8mg/天～15mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在10mg/天～20mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在20mg/天～40mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在60mg/天～120mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在12mg/天～40mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在40mg/天～60mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在50mg/天～l00mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在1mg/天～60mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在15mg/天～25mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在5mg/天～10mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在55mg/天～65mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在1mg/天～5mg/天的范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的由ctp修飾的gh的劑量在0.005mg/周～100mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.005mg/周～5mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.01mg/周～50mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.05mg/周～7.2mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.05mg/周～7.2mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.05mg/周～7.2mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.1mg/周～20mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.1mg/周～10mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.01mg/周～5mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.001mg/周～0.01mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.001mg/周～0.1mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.1mg/周～5mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.5mg/周～50mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.2mg/周～15mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.26mg/周～10.7mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在0.8mg/周～65mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在1～50mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在5mg/周～10mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在8mg/周～15mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在10mg/周～20mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在20mg/周～40mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在60mg/周～120mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在12mg/周～40mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在40mg/周～60mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在50～100mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在1mg/周～60mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在15mg/周～25mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在5mg/周～10mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在55mg/周～65mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量在1mg/周～5mg/周的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，提供給受試者的gh劑量是提供給來自同一受試者群體(例如兒童、老人、男人、女人、gh缺乏者、具體國(guó)籍等)的參考受試者的標(biāo)準(zhǔn)劑量的50％。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量是提供給來自特定受試者群體的受試者的劑量的30％。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量是提供給來自特定受試者群體的受試者的劑量的45％。在另一個(gè)實(shí)施方式中，該劑量是提供給來自特定受試者群體的受試者的劑量的100％。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/周～5mg/周。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為2mg/周。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為4mg/周。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1.2mg/周。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1.8mg/周。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量大約為本文中所描述的劑量。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1-5mg/給予。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為2mg/給予。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為4mg/給予。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1.2mg/給予。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1.8mg/給予。在一個(gè)實(shí)施方式中，組合物每周給予一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，組合物每?jī)芍芙o予一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，組合物每月給予一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，組合物每天給予一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將由ctp修飾的gh配制為鼻內(nèi)劑型。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將由ctp修飾的gh配制為注射劑型。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為0.0001mg至0.6mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為0.001mg至0.005mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為0.005mg至0.01mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為0.01mg至0.3mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為0.2mg至0.6mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為1微克至100微克的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為10微克至80微克的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為20微克至60微克的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為10微克至50微克的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為40微克至80微克的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為10微克至30微克的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為30微克至60微克的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為0.2mg至2mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為2mg至6mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為4mg至10mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，以范圍為5mg至15mg的劑量將由ctp修飾的gh給予受試者。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將由ctp修飾的gh注射到肌肉中(肌內(nèi)注射)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將由ctp修飾的gh注射于皮膚以下(皮下注射)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將由ctp修飾的gh注射到肌肉中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將由ctp修飾的gh注射于皮膚以下。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法包括提高在使用gh治療中的依從性，包括向需要其的受試者提供由ctp修飾的gh，由此提高在使用生長(zhǎng)激素治療中的依從性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法包括提高需要gh治療的患有慢性疾病的患者的依從性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法通過如上文所描述的使用ctp修飾gh從而能夠降低該gh的給藥頻率。在另一個(gè)實(shí)施方式中，術(shù)語“依從性”包含順從性(adherence)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的方法包括通過降低gh的給予頻率而提高需要gh治療的患者的依從性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，gh的給予頻率的降低是通過ctp修飾來實(shí)現(xiàn)的，該修飾使得ctp-修飾的gh更加穩(wěn)定。在另一個(gè)實(shí)施方式中，gh的給予頻率的降低是由于延長(zhǎng)了該生長(zhǎng)激素的t1/2而實(shí)現(xiàn)的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，gh的給予頻率的降低是由于延長(zhǎng)了該gh的清除時(shí)間而實(shí)現(xiàn)的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素的給予頻率的降低是由于增加了該生長(zhǎng)激素的auc量度而實(shí)現(xiàn)的。因此，在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種提高生長(zhǎng)激素的曲線下面積(auc)的方法，包括將一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽連接至該生長(zhǎng)激素的氨基末端和將兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽連接至該生長(zhǎng)激素的羧基末端的步驟，由此提高生長(zhǎng)激素的曲線下面積(auc).因此，在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種降低生長(zhǎng)激素的給藥頻率的方法，包括將一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽連接至該生長(zhǎng)激素的氨基末端和將兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽連接至該生長(zhǎng)激素的羧基末端的步驟，由此降低生長(zhǎng)激素的給藥頻率。因此，在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種提高在需要其的受試者中使用生長(zhǎng)激素治療中的依從性，包括向所述受試者提供多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至所述生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至所述生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽，從而提高在使用生長(zhǎng)激素治療中的依從性。在一個(gè)實(shí)施方式中，所述受試者是人類。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中提高胰島素樣生長(zhǎng)因子(igf-1)的水平的方法，包括向所述受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至所述生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至所述生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在所述受試者中提高igf-1水平。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在以下實(shí)施例6中提供了提高igf-1水平的方法。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在人類受試者中將胰島素樣生長(zhǎng)因子(igf-1)水平提高至所需的治療范圍的方法，包括向該受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至該生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至所述生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，從而在該受試者中將igf-1水平提高至所需的治療范圍。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是成人。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是gh-缺乏癥成人。在另一個(gè)實(shí)施方式中，人類受試者是正常成人。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在下文實(shí)施例9中提供了將igf-1水平提高至所需治療水平的方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明提供了一種在受試者中將胰島素樣生長(zhǎng)因子(igf-1)水平維持在正常治療范圍內(nèi)的方法，包括向該受試者給予治療有效量的多肽，該多肽包含生長(zhǎng)激素、連接至該生長(zhǎng)激素的氨基末端的一個(gè)絨毛膜促性腺激素羧基末端肽(ctp)、和連接至該生長(zhǎng)激素的羧基末端的兩個(gè)絨毛膜促性腺激素ctp，由此在該受試者中將igf-i水平維持在正常治療范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在下文實(shí)施例9中提供了將igf-1水平維持在正常治療水平內(nèi)的方法。在一個(gè)實(shí)施方式中，在人類受試者中提高igf-1水平可以在治療、預(yù)防或抑制1型糖尿病、2型糖尿病、肌萎縮側(cè)索硬化癥(als又名“盧伽雷氏病”)、嚴(yán)重?zé)齻蛷?qiáng)直性肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(mmd)中有效。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在人類受試者中將igf-1水平維持在正常治療范圍內(nèi)可以在治療、預(yù)防或抑制1型糖尿病、2型糖尿病、肌萎縮側(cè)索硬化癥(als又名“盧伽雷氏病”)、嚴(yán)重?zé)齻蛷?qiáng)直性肌營(yíng)養(yǎng)不良癥(mmd)中有效。在一個(gè)實(shí)施方式中，如下文中進(jìn)一步所提供的(參見實(shí)施例9)，將所需的治療范圍限定為在+/-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差之間，通過從在正常人群中預(yù)期的平均igf-1水平-2標(biāo)準(zhǔn)偏差，按年齡組別和性別分層。另外，為了觀察在正常范圍內(nèi)的患者的方差的目的，試驗(yàn)測(cè)量的igf-1水平處在+/-1.5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的窄范圍內(nèi)(參見下文實(shí)施例9)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予包含由ctp修飾的gh的多肽，每?jī)商煲淮巍Ｔ诹硪粋€(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每三天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每四天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每五天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每六天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每周一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每7～14天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每10～20天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每5～15天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，向受試者給予由ctp修飾的gh，每15～30天一次。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在50mg/天～500mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在50mg/天～150mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在100mg/天～200mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在150mg/天～250mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在200mg/天～300mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在250mg/天～400mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在300mg/天～500mg/天的范圍內(nèi)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量在350mg/天～500mg/天的范圍內(nèi)。在一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為20mg/天。在一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為30mg/天。在一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為40mg/天。在一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為50mg/天。在一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為0.01mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為0.1mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為0.530mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為0.05mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為50mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為20-70mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為5mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/天～90mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/2天～90mg/2天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/3天～90mg/3天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/4天～90mg/4天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/5天～90mg/5天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/6天～90mg/6天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/周～90mg/周。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/9天～90mg/9天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1mg/11天～90mg/11天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為1～90mg/14天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，生長(zhǎng)激素的劑量為10mg/天-50mg/天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/2天-50mg/2天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/3天-50mg/3天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/4天-50mg/4天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/5天-50mg/5天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/6天-50mg/6天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/周-50mg/周。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/9天-50mg/9天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/11天-50mg/11天。在另一個(gè)實(shí)施方式中，劑量為10mg/14天-50mg/14天。在一個(gè)實(shí)施方式中，口服給予包含單元?jiǎng)┬?，該單元?jiǎng)┬桶瑒?、膠囊劑、錠劑、咀嚼片、混懸劑、乳劑等。此類單元?jiǎng)┬桶踩矣行Я康乃璧谋景l(fā)明的生長(zhǎng)激素，其中的每一個(gè)在一個(gè)實(shí)施方式中為從約0.75mg/70kg或3.5mg/70kg至約280mg/70kg，或在另一個(gè)實(shí)施方式中，約0.5mg/70kg或10mg/70kg至約210mg/70kg。適合于口服給予用的單元?jiǎng)┬偷闹苿┑乃帉W(xué)上可接受的載體在本領(lǐng)域中眾所周知。在一些實(shí)施方式中，片劑典型地包含作為惰性稀釋劑的常規(guī)的藥學(xué)相容的佐劑，如碳酸鈣、碳酸鈉、甘露醇、乳糖和纖維素；粘合劑，如淀粉、明膠和蔗糖；崩解劑，如淀粉、藻酸和聯(lián)羧甲基纖維素；潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸和滑石粉。在一個(gè)實(shí)施方式中，助流劑(glidant)(如二氧化硅)可以用來提高粉末-混合物的流動(dòng)特性。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以為了外觀而添加著色劑，如fd&c染料。甜味劑和調(diào)味劑，如阿斯巴甜、糖精、薄荷醇、薄荷油以及水果香精，是有用于咀嚼片劑的佐劑。膠囊劑典型地包含一種或多種以上公開的固體稀釋劑。在一些實(shí)施方式中，載體組分的選擇取決于次要考慮，如口味、成本和儲(chǔ)存穩(wěn)定性，這對(duì)本發(fā)明的目的而言不是關(guān)鍵，并且可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地做出選擇。在一個(gè)實(shí)施方式中，口服劑型包含預(yù)定的釋放曲線(releaseprofile)。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的口服劑型包含延長(zhǎng)釋放的片劑、膠囊劑、錠劑或咀嚼片劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的口服劑型包含緩釋片劑、膠囊劑、錠劑或咀嚼片劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的口服劑型包含立即釋放的片劑、膠囊劑、錠劑或咀嚼片劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，是根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的藥物活性成分的所需釋放曲線來配制口服劑型。在一些實(shí)施方式中，口服組合物包含液體溶液劑、乳劑、混懸劑等。在一些實(shí)施方式中，適合于此類組合物的制劑的藥學(xué)上可接受的載體在本領(lǐng)域中是眾所周知的。在一些實(shí)施方式中，液體口服組合物包含約0.001％至約0.933％所需的一種或多種化合物，或在另一個(gè)實(shí)施方式中，為約0.01％約10％。在一些實(shí)施方式中，在本發(fā)明的方法中使用的組合物包括溶液劑或乳劑，這在一些實(shí)施方式中是包含安全且有效量的本發(fā)明的化合物和可選地用于局部經(jīng)鼻給予的其他化合物的水溶液劑或乳劑。在一些實(shí)施方式中，組合物包含約0.001％～約10.0％w/v的由ctp修飾的gh，更優(yōu)選為約00.1％～約2.0％，其用于通過鼻內(nèi)途徑全身遞送化合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物是通過靜脈內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)或肌內(nèi)注射液體制劑來給予的。在一些實(shí)施方式中，液體制劑包括溶液劑、混懸劑、分散劑、乳劑、油劑等。在一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物是靜脈內(nèi)給予的，并因此配制為適合于靜脈內(nèi)給予的形式。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物是動(dòng)脈內(nèi)給予的，并因此配制為適合于動(dòng)脈內(nèi)給予的形式。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物是肌內(nèi)給予的，并因此配制為適合于肌內(nèi)給予的形式。進(jìn)一步地，在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物局部地施用到身體表面，并因此配制為適合于局部給予的形式。適合的局部制劑包括凝膠劑、軟膏劑、霜?jiǎng)?、洗劑、滴劑等。?duì)于局部給予，將本發(fā)明的化合物與另外的適合的一種或多種治療劑組合、制備且應(yīng)用為處于具有或不具有藥物載體的生理學(xué)上可接受的稀釋劑中的溶液劑、混懸劑或乳劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的藥物組合物是通過本領(lǐng)域中眾所周知的工藝來制造的，例如通過常規(guī)的混合、溶解、制粒、制錠、磨細(xì)、乳化、包封、包埋或凍干工藝。在一個(gè)實(shí)施方式中，以常規(guī)方式使用一種或多種包含賦形劑和助劑的生理學(xué)上可接受的載體來配制根據(jù)本發(fā)明使用的藥物組合物，這有助于將活性成分加工成可藥用使用的制劑。在一個(gè)實(shí)施方式中，制劑取決于所選擇的給予途徑。在一個(gè)實(shí)施方式中，將本發(fā)明的可注射劑(injectable)配制為水溶液。在一個(gè)實(shí)施方式中，將本發(fā)明的可注射劑配制在生理相容性緩沖液如漢克氏溶液、林格氏溶液、或生理鹽水緩沖液中。在一些實(shí)施方式中，為了經(jīng)粘膜給予，在制劑中使用適合于待滲透屏障的滲透劑。此類滲透劑通常是本領(lǐng)域已知的。在一個(gè)實(shí)施方式中，配制本文所描述的制劑用于腸胃外給予，例如通過大劑量注射或連續(xù)輸注。在一些實(shí)施方式中，用于注射的制劑以單元?jiǎng)┬痛嬖?，例如安瓿劑或存在于具有可選加入的防腐劑的多劑量容器中。在一些實(shí)施方式中，組合物是處于油性或水性載體中的混懸劑、溶液劑或乳劑，并且含有配制用試劑如混懸劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。在一些實(shí)施方式中，組合物還包含防腐劑，如苯扎氯銨和硫柳汞等；螯合劑，如依地酸鈉(edetatesodium)等；緩沖劑，如磷酸鹽、檸檬酸鹽和醋酸鹽；張度劑，如氯化鈉、氯化鉀、甘油、甘露醇等；抗氧化劑，如抗壞血酸、乙酰半胱氨酸、焦亞硫酸鈉等；芳香劑；粘度調(diào)節(jié)劑，如聚合物，包括纖維素及其衍生物；和聚乙烯醇以及所需的用于調(diào)節(jié)這些含水組合物的ph的酸和堿。在一些實(shí)施方式中，組合物還包含局部麻醉劑或其他活性物質(zhì)。組合物可以作為噴霧劑、合劑(mist)、滴劑等使用。在一些實(shí)施方式中，用于腸胃外給予的藥物組合物包括水溶性形式的活性制劑的水溶液。此外，在一些實(shí)施方式中，活性成分的混懸劑被制備為適當(dāng)?shù)挠托曰蛩宰⑸浠鞈覄?。在一些?shí)施方式中，合適的親脂性溶劑或載體包括脂肪油(如芝麻油)或合成脂肪酸酯(如油酸乙酯、甘油三酯或脂質(zhì)體)。在一些實(shí)施方式中，水性注射混懸劑含有增加混懸劑的粘度的物質(zhì)，例如羧甲基纖維素鈉、山梨醇或葡聚糖。在另一個(gè)實(shí)施方式中，懸浮液劑還含有適合的穩(wěn)定劑或增加活性成分的溶解度的試劑以允許制備高濃縮溶液。在另一個(gè)實(shí)施方式中，活性化合物可以以囊泡遞送，特別是脂質(zhì)體(參見langer,science249:1527-1533(1990)；treatetal.,inliposomesinthetherapyofinfectiousdiseaseandcancer,lopez-beresteinandfidler(eds.),liss,newyork,pp.353-365(1989)；lopez-berestein,ibid.,pp.317-327；一般參見同前)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，配制在控釋系統(tǒng)中遞送的藥物組合物用于靜脈內(nèi)輸注、植入式滲透泵、透皮貼劑、脂質(zhì)體或其他的給予模式。在一個(gè)實(shí)施方式中，使用泵(參加langer,supra；sefton,crccrit.ref.biomed.eng.14:201(1987)；buchwaldetal.,surgery88:507(1980)；saudeketal.,n.engl.j.med.321:574(1989)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，可以使用聚合材料。在又另一個(gè)實(shí)施方式中，可以接近治療靶標(biāo)(即大腦)放置控釋系統(tǒng)，因而只需要全身劑量的一小部分(參見，例如，goodson,inmedicalapplicationsofcontrolledrelease,supra,vol.2,pp.115-138(1984)。langer通過綜述討論了其他的控釋系統(tǒng)(science249:1527-1533(1990)。在一些實(shí)施方式中，在使用前活性成分為用于與適合的載體(例如無菌、無熱原水基溶液)進(jìn)行組合的粉末形式。在一些實(shí)施方式中，配制組合物用于霧化給予和吸入給予。在另一個(gè)實(shí)施方式中，將組合物包含在具有隨附的霧化裝置的容器中。在一個(gè)實(shí)施方式中，將本發(fā)明的制劑配制為直腸組合物，如，例如使用常規(guī)栓劑基質(zhì)(如可可脂或其他甘油酯)的栓劑或保留灌腸劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，適合在本發(fā)明的上下文中使用的藥物組合物包括其中以有效于達(dá)到預(yù)定目的的量含有活性成分的組合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，治療有效量是指活性成分的量對(duì)于預(yù)防、緩解或改善疾病癥狀或延長(zhǎng)被治療的受試者的存活期有效。在一個(gè)實(shí)施方式中，治療有效量的確定完全處于本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)?？梢杂米魉帉W(xué)上可接受的載體或其組分的物質(zhì)的一些實(shí)例是糖類，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和馬鈴薯淀粉；纖維素及其衍生物，如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和甲基纖維素；粉狀黃蓍膠；麥芽糖(malt)；明膠；滑石粉；固體潤(rùn)滑劑，如硬脂酸和硬脂酸鎂；硫酸鈣；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄欖油、玉米油和可可(theobroma)油；多元醇，如丙二醇、丙三醇、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；藻酸；乳化劑，如tweentm牌乳化劑；潤(rùn)濕劑，如月桂基硫酸鈉；著色劑；調(diào)味劑；制片劑；穩(wěn)定劑；抗氧化劑；防腐劑；無熱原水；等滲鹽水；和磷酸鹽緩沖液。與化合物配合使用的藥學(xué)上可接受的載體的選擇基本上由化合物的給予方式來確定的。在一個(gè)實(shí)施方式中，如果本發(fā)明的化合物是用于注射地，那么藥學(xué)上可接受的載體是具有血液相容性助懸劑的無菌生理鹽水，其ph已調(diào)節(jié)至約7.4。另外，組合物進(jìn)一步包含粘合劑(例如阿拉伯膠、玉米淀粉、明膠、卡波姆、乙基纖維素、瓜爾膠、羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚維酮)、崩解劑(例如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、海藻酸、二氧化硅、聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聚維酮、瓜爾膠、淀粉羥基乙酸鈉)、各種ph和離子強(qiáng)度的緩沖劑(例如tris-hcl、乙酸鹽、磷酸鹽)、用以防止吸附于表面的添加劑如白蛋白或明膠、去垢劑(例如tween20、tween80、pluronicf68、膽汁酸鹽)、蛋白酶抑制劑、表面活性劑(例如月桂基硫酸鈉)、滲透促進(jìn)劑、增溶劑(例如甘油、聚甘油)、抗氧化劑(例如抗壞血酸、焦亞硫酸鈉、丁基羥基苯甲醚)、穩(wěn)定劑(例如羥丙基纖維素、羥丙基甲基纖維素)、增粘劑(例如卡波姆、膠態(tài)二氧化硅、乙基纖維素、瓜爾膠)、甜味劑(例如阿斯巴甜、檸檬酸)、防腐劑(例如硫柳汞、芐醇、對(duì)羥基苯甲酸酯)、潤(rùn)滑劑(例如硬脂酸、硬脂酸鎂、聚乙二醇、月桂基硫酸鈉)、流動(dòng)助劑(例如膠體二氧化硅)、增塑劑(例如鄰苯二甲酸二乙酯、檸檬酸三乙酯)、乳化劑(例如卡波姆、羥丙基纖維素、月桂基硫酸鈉)、聚合物涂層(例如泊洛沙姆或泊洛沙)、涂層和膜形成劑(例如乙基纖維素，丙烯酸酯，聚甲基丙烯酸酯)和/或佐劑。用于糖漿劑、酏劑、乳劑和混懸劑的載體的典型組分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液體蔗糖、山梨糖醇和水。對(duì)于混懸劑，典型的助懸劑包括甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉、纖維素(例如aviceltm,rc-591)、黃蓍膠和藻酸鈉；典型的潤(rùn)濕劑包括卵磷脂和聚氧化乙烯山梨糖醇(例如聚山梨酯80)。典型的防腐劑包括對(duì)羥基苯甲酸甲酯和苯甲酸鈉。在另一個(gè)實(shí)施方式中，口服的液體組合物還含有一種或多種以上公開的組分，如甜味劑、調(diào)味劑和著色劑。組合物還包括將活性材料摻入至聚合化合物(例如聚乳酸、聚乙醇酸、水凝膠等)的顆粒制劑內(nèi)或上，或者摻入到脂質(zhì)體、微乳劑、膠束、單層或多層囊泡、紅細(xì)胞血影或原生質(zhì)球上。此類組合物將影響物理狀態(tài)、溶解性、穩(wěn)定性、體內(nèi)的釋放速率和體內(nèi)清除的速率。本發(fā)明還包括的是用聚合物(例如泊洛沙姆或泊洛沙)包衣的顆粒組合物以及偶聯(lián)至靶向組織特異性受體、配體或抗原的抗體的化合物或者偶聯(lián)至組織特異性受體的配體的化合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過共價(jià)連接水溶性聚合物(例如聚乙二醇、聚乙二醇和聚丙二醇的共聚物、羧甲基纖維素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮或聚脯氨酸)來修飾化合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在靜脈內(nèi)注射后，經(jīng)修飾的化合物在血液中表現(xiàn)出比相應(yīng)未修飾的化合物顯著延長(zhǎng)的半衰期。在一個(gè)實(shí)施方式中，修飾還增加了化合物在水溶液中的溶解度、消除了聚集、增加了化合物的物理化學(xué)穩(wěn)定性并且極大地降低了化合物的免疫原性和反應(yīng)性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所需的體內(nèi)生物學(xué)活性是通過以比未修飾的化合物更低的頻率或以更低的劑量給予此類聚合物-化合物結(jié)合物(abduct)來實(shí)現(xiàn)的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，最初可以從體外測(cè)定來估算制劑的有效量或劑量。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以在動(dòng)物模型中配制劑量并且此類信息可以用來更加準(zhǔn)確地確定人類中有用的劑量。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以通過標(biāo)準(zhǔn)的制藥程序在體外、在細(xì)胞培養(yǎng)物或在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中確定本文所描述的活性成分的毒性和治療效力。在一個(gè)實(shí)施方式中，從這些體外和細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)定以及動(dòng)物研究中獲得的數(shù)值可以用來配制一系列在人類中使用的劑量。在一個(gè)實(shí)施方式中，劑量取決于所用的劑型和所利用的給予途徑而變化。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以由單獨(dú)的醫(yī)生鑒于患者的病情來選擇確切的制劑、給予途徑和劑量。[參見，例如，fingl,etal.,(1975)"thepharmacologicalbasisoftherapeutics",ch.1p.l]。在一個(gè)實(shí)施方式中，取決于待治療的病癥的嚴(yán)重程度和響應(yīng)性，給藥可以是單劑量或多劑量給予，療程持續(xù)數(shù)天至數(shù)周或直到實(shí)現(xiàn)了治愈生效或疾病狀態(tài)的緩解。在一個(gè)實(shí)施方式中，待給予的組合物的量當(dāng)然地將取決于受治療的受試者、痛苦的嚴(yán)重程度、給予方式、開處方的醫(yī)師的判斷等等。在一個(gè)實(shí)施方式中，還制備了包括本發(fā)明的制劑(配制在相容性藥物載體中)的組合物，并放置于適合的容器中，貼上用于治療指定病癥的標(biāo)簽。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過全身性給予來給予由ctp修飾的gh。在另一個(gè)實(shí)施方式中，本文所描述的生長(zhǎng)激素是通過靜脈內(nèi)、肌內(nèi)或皮下注射來給予的。在另一個(gè)實(shí)施方式中，由ctp修飾的gh是組合有復(fù)合有機(jī)賦形劑和穩(wěn)定劑(如非離子表面活性劑(即表面活性劑))、各種糖類、有機(jī)多元醇和/或人血清白蛋白的凍干(即冷卻干燥)制劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含凍干的ctp修飾的gh，其在注射用無菌水中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含如所描述的凍干的生長(zhǎng)激素，其在注射用無菌pbs中。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含如所描述的凍干的生長(zhǎng)激素，其在注射用無菌0.9％nacl。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含本文所述的由ctp修飾的gh以及復(fù)合載體，該復(fù)合載體如人血清白蛋白、多元醇、糖類、和陰離子表面活性穩(wěn)定劑。參見，例如wo89/10756(haraetal.-含多元醇與對(duì)羥基苯甲酸)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含本文所描述的生長(zhǎng)激素以及乳糖酸和乙酸/甘氨酸緩沖液。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含本文所描述的由ctp修飾的gh以及增加干擾素組合物在水中的溶解度的氨基酸(如精氨酸或谷氨酸)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含凍干的本文所描述的由ctp修飾的gh以及甘氨酸或人血清白蛋白(hsa)、緩沖劑(例如醋酸)和等滲劑(如nacl)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含凍干的本文所描述的由ctp修飾的gh以及磷酸鹽緩沖液、甘氨酸和has。在另一個(gè)實(shí)施方式中，當(dāng)放置于具有約4至7.2的ph的緩沖溶液中時(shí)，穩(wěn)定了包含本文的由ctp修飾的gh的藥物組合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，用氨基酸作為穩(wěn)定劑以及在一些情況下的鹽(如果該氨基酸不包含帶電側(cè)鏈)，穩(wěn)定了包含本文的由ctp修飾的gh的藥物組合物。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文的由ctp修飾的gh的藥物組合物是包含按重量計(jì)約0.3％至5％的穩(wěn)定劑的液體組合物，該穩(wěn)定劑是氨基酸。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物提供了劑量準(zhǔn)確度和產(chǎn)品安全性。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物提供了用于注射應(yīng)用的生物學(xué)活性的、穩(wěn)定的液體制劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，藥物組合物包含非凍干的本文所描述的由ctp修飾的gh。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物提供了在液體狀態(tài)下允許長(zhǎng)時(shí)間存儲(chǔ)的液體制劑，這方便了給予前的存儲(chǔ)和運(yùn)輸。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含固體脂質(zhì)作為基質(zhì)材料。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的可注射的藥物組合物包含固體脂質(zhì)作為基質(zhì)材料。在另一個(gè)實(shí)施方式中，根據(jù)speiser的描述(speiserandal.,pharm.res.8(1991)47-54)通過噴灑冷卻生產(chǎn)脂質(zhì)微粒，隨后產(chǎn)生為用于口服給予的脂質(zhì)納米團(tuán)粒(speiserep0167825(1990))。在另一個(gè)實(shí)施方式中，身體能夠良好的耐受所使用的脂質(zhì)(例如，由存在于用于腸胃外營(yíng)養(yǎng)的乳劑中的脂肪酸構(gòu)成的甘油酯)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物為脂質(zhì)體的形式(j.e.diederichsandal.,pharm./nd.56(1994)267-275)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含聚合物微粒。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的可注射的藥物組合物包含聚合物微粒。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含納米顆粒。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含脂質(zhì)體。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含脂質(zhì)乳劑。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含微球。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含脂質(zhì)納米顆粒。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含含有兩親性脂質(zhì)的脂質(zhì)納米顆粒。在另一個(gè)實(shí)施方式中，包含本文所描述的由ctp修飾的gh的藥物組合物包含含有藥物、脂質(zhì)基質(zhì)和表面活性劑的脂質(zhì)納米顆粒。在另一個(gè)實(shí)施方式中，所述脂質(zhì)基質(zhì)具有至少50％w/w的單甘油酯含量。在一個(gè)實(shí)施方式中，本發(fā)明的組合物存在于包裝或分配器裝置中，例如fda批準(zhǔn)的試劑盒，其包含一個(gè)或多個(gè)含有活性成分的單元?jiǎng)┬?。在一個(gè)實(shí)施方式中，包裝例如包括金屬或塑料箔，如泡罩包裝。在一個(gè)實(shí)施方式中，該包裝或分配器裝置伴隨有給予說明書。在一個(gè)實(shí)施方式中，該包裝或分配器裝置安置有由政府機(jī)構(gòu)規(guī)范制造、使用或銷售藥品所規(guī)定的格式的與容器相關(guān)的注意事項(xiàng)，該注意事項(xiàng)反映了組合物的形式或人類或獸醫(yī)行政管理的機(jī)構(gòu)的批準(zhǔn)。在一個(gè)實(shí)施方式中，此類注意事項(xiàng)是由美國(guó)食品和藥物管理局批準(zhǔn)的用于處方藥物的標(biāo)簽或經(jīng)批準(zhǔn)的產(chǎn)品插頁(yè)。在一個(gè)實(shí)施方式中，可以理解的是，可以將本發(fā)明的由ctp修飾的gh與另外的活性劑一起提供給個(gè)體，從而與以各個(gè)單獨(dú)的試劑的治療相比，達(dá)到提高的治療效果。在另一個(gè)實(shí)施方式中，采取措施(例如劑量和選擇互補(bǔ)劑)來應(yīng)對(duì)與聯(lián)合治療相關(guān)聯(lián)的不利的副作用。在研究了下面的實(shí)施例之后，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言，本發(fā)明的另外的目的、優(yōu)點(diǎn)和新穎特征都將變得顯而易見，這些實(shí)施例并不意在限制。另外，上文中描繪的以及以下權(quán)利要求章節(jié)中主張的本發(fā)明的各種實(shí)施方式和方面的每一個(gè)都能夠在下列實(shí)施例中找到實(shí)驗(yàn)性支持。實(shí)施例一般地，本文中使用的命名法以及本發(fā)明中采用的實(shí)驗(yàn)室程序包括分子、生物化學(xué)、微生物學(xué)和重組dna技術(shù)。在文獻(xiàn)中對(duì)此類技術(shù)進(jìn)行了充分的說明。參見，例如，"molecularcloning:alaboratorymanual",sambrooketal.,(1989)；"currentprotocolsinmolecularbiology",卷i-iiiausubel,r.m.,ed.(1994)；ausubeletal.,"currentprotocolsinmolecularbiology",johnwileyandsons,baltimore,maryland(1989)；perbal,"apracticalguidetomolecularcloning",johnwiley&sons,newyork(1988)；watsonetal.,"recombinantdna",scientificamericanbooks,newyork；birrenetal.(eds)"genomeanalysis:alaboratorymanualseries",vols.1-4,coldspringharborlaboratorypress,newyork(1998)；在美國(guó)專利號(hào)us4,666,828、us4,683,202、us4,801,531、us5,192,659和us5,272,057中描述的方法；"cellbiology:alaboratoryhandbook",卷i-iiicellis,j.e.,ed.(1994)；freshney,wiley-liss的"cultureofanimalcells-amanualofbasictechnique",n.y.(1994),第三版；"currentprotocolsinimmunology"卷i-iiicoliganj.e.,ed.(1994)；stitesetal.(eds),"basicandclinicalimmunology"(8thedition),appleton&lange,norwalk,ct(1994)；mishell和shiigi(eds),"selectedmethodsincellularimmunology",w.h.freemanandco.,newyork(1980)；可用的免疫測(cè)定在專利和科學(xué)文獻(xiàn)中有廣泛描述，參見，例如，美國(guó)專利號(hào)us3,791,932、us3,839,153、us3,850,752、us3,850,578、us3,853,987、us3,867,517、us3,879,262、us3,901,654、us3,935,074、us3,984,533、us3,996,345、us4,034,074、us4,098,876、us4,879,219、us5,011,771和us5,281,521；"oligonucleotidesynthesis"gait,m.j.,ed.(1984)；"nucleicacidhybridization"hames,b.d.,andhigginss.j.,eds.(1985)；"transcriptionandtranslation"hames,b.d.,andhigginss.j.,eds.(1984)；"animalcellculture"freshney,r.i.,ed.(1986)；"immobilizedcellsandenzymes"irlpress,(1986)；"apracticalguidetomolecularcloning"perbal,b.,(1984)和"methodsinenzymology"vol.1-317,academicpress；"pcrprotocols:aguidetomethodsandapplications",academicpress,sandiego,ca(1990)；marshaketal.,"strategiesforproteinpurificationandcharacterization-alaboratorycoursemanual"cshlpress(1996)；所有這些都通過引用并入。在本文檔中提供了其他一般的參考文獻(xiàn)。實(shí)施例1產(chǎn)生hgh構(gòu)建體材料與方法合成了四個(gè)hgh克隆(20kd蛋白質(zhì)的變異體)。將來自該四個(gè)變異體的含有hgh序列的xbai-noti片段連接到事先使用xbai-noti消化的真核表達(dá)載體pci-dhfr中。由該4個(gè)克隆(401-0、1、2、3和4)的制備dna。還由22kd蛋白質(zhì)合成了另一個(gè)部分hgh克隆(1-242bp)(0606114)。引物訂購(gòu)自sigma-genosys。用來產(chǎn)生本發(fā)明的由ctp多肽修飾的hgh的引物序列總結(jié)于下文表1中。表1構(gòu)建402-0-p69-l(hgh)(seqidno:5)：hgh為野生型重組人類生長(zhǎng)激素(無ctp)，制備它以在下述實(shí)驗(yàn)中用作對(duì)照。進(jìn)行了三個(gè)pcr反應(yīng)。使用引物25和引物32r以及0606114(hgh1-242bp的部分克隆)的質(zhì)粒dna作為模板進(jìn)行第一個(gè)反應(yīng)；作為該pcr擴(kuò)增的結(jié)果，形成了245bp的產(chǎn)物。使用引物33和引物4r以及401-0-p57-2的質(zhì)粒dna作為模板進(jìn)行第二個(gè)反應(yīng)；作為該pcr擴(kuò)增的結(jié)果，形成了542bp的產(chǎn)物。使用引物25和引物4r以及前兩個(gè)反應(yīng)的產(chǎn)物的混合物作為模板進(jìn)行最后一個(gè)反應(yīng)；作為該pcr擴(kuò)增的結(jié)果，形成了705bp的產(chǎn)物，并且將其連接至ta克隆載體(invitrogen，目錄k2000-01)中。將含有hgh-0序列的xbai－noti片段連接入真核表達(dá)載體pci-dhfr中。將該載體轉(zhuǎn)染入dg-44cho細(xì)胞中。在無蛋白質(zhì)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞。構(gòu)建402-l-p83-5(hgh-ctp)-seqidno:9和402-2-p72-3(hgh-ctpx2)-seqidno:10：hgh-ctp是重組人類生長(zhǎng)激素，其被融合至1個(gè)拷貝的人絨毛膜促性腺激素(ctp)的β鏈的c-末端肽。將hgh-ctp的ctp盒連接至c-末端(一個(gè)盒)。hgh-ctp-ctp為重組人類生長(zhǎng)激素，其被融合至2個(gè)拷貝的人絨毛膜促性腺激素(ctp)的β鏈的c-末端肽。將hgh-ctp-ctp的兩個(gè)ctp盒連接至c-末端(兩個(gè)盒)。以與構(gòu)建hgh-0相同的方式進(jìn)行hgh-ctp和hgh-ctp-ctp的構(gòu)建。在第二個(gè)pcr反應(yīng)中使用pci-dhfr-401-l-p20-l(hgh*-ctp)和pci-dhfr-401-2-p21-2(hgh*-ctpx2)作為模板。在dg-44cho細(xì)胞中表達(dá)hgh-ctp和hgh-ctp-ctp。在無蛋白質(zhì)的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)細(xì)胞。由于hgh具有22kd的mw，而每個(gè)“ctp盒”給總分子量貢獻(xiàn)8.5kd，所以hgh-ctp的分子量為～30.5kd(見圖1)。hgh-ctp-ctp的分子量為～39kd(見圖1)。構(gòu)建402-3-p81-4(ctp-hgh-ctp-ctp)-seqidno:11和402-4-p82-9(ctp*hgh-ctp-ctp)-seqidno:12：ctp-hgh-ctp-ctp是重組人類生長(zhǎng)激素，其被融合至3個(gè)拷貝的人絨毛膜促性腺激素(ctp)的β鏈的c-末端肽。ctp-hgh-ctp-ctp3個(gè)盒被連接到n-末端(一個(gè)盒)和c-末端(兩個(gè)盒)。tctp-hgh-ctp-ctp是重組人類生長(zhǎng)激素，其被融合至1個(gè)截短拷貝的和2個(gè)完整拷貝的人絨毛膜促性腺激素(ctp)的β鏈的c-末端肽。將tctp-hgh-ctp-ctp的該截短的ctp盒連接至n-末端并將兩個(gè)ctp盒連接至c-末端(兩個(gè)盒)。進(jìn)行三個(gè)pcr反應(yīng)。使用引物25和引物35r以及p401-3-pl2-5或401-4-p22-l的質(zhì)粒dna作為模板進(jìn)行第一反應(yīng)；作為該pcr擴(kuò)增的結(jié)果，形成了265bp或220bp的產(chǎn)物。使用引物34和引物37r以及ta-hgh-2-q65-l的質(zhì)粒dna作為模板進(jìn)行第二反應(yīng)；作為該pcr擴(kuò)增的結(jié)果，形成了695bp的產(chǎn)物。使用引物25和37r以及前兩個(gè)反應(yīng)的產(chǎn)物的混合物作為模板進(jìn)行最后一個(gè)反應(yīng)，作為該pcr擴(kuò)增的結(jié)果，形成了938bp或891bp的產(chǎn)物，并且將產(chǎn)物連接入ta克隆載體(invitrogen，目錄k2000-01)中。將含有hgh序列的xbai-noti片段連接入發(fā)明人的真核表達(dá)載體pci-dhfr中。在dg-44cho細(xì)胞中表達(dá)ctp-hgh-ctp-ctp和tctp-hgh-ctp-ctp。在無蛋白質(zhì)的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)細(xì)胞。ctp-hgh-ctp-ctp的分子量為～47.5kd(見圖1)且tctp-hgh-ctp-ctp的分子量為～43.25kd(見圖1)。構(gòu)建402-6-p95a-8(ctp-hgh-ctp)-seqidno:13：以與構(gòu)建hgh-3相同的方式進(jìn)行hgh-6的構(gòu)建。在第二pcr反應(yīng)中使用pci-dhfr-402-l-p83-5(hgh-ctp)作為模板。構(gòu)建402-5-p96-4(ctp-hgh)-seqidno:14：使用引物25和引物39r以及pci-dhfr-ctp-epo-ctp(402-6-p95a-8)的質(zhì)粒dna作為模板進(jìn)行pcr反應(yīng)；作為pcr擴(kuò)增的結(jié)果，形成了763bp的產(chǎn)物，并且連接入ta克隆載體(invitrogen，目錄k2000-01)中。將含有ctp-hgh序列的xbai-noti片段連接入發(fā)明人的真核表達(dá)載體pci-dhfr中，得到402-5-p96-4克隆。實(shí)施例2本發(fā)明的hgh-ctp多肽的體內(nèi)生物學(xué)活性測(cè)試進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)以測(cè)試與商業(yè)化的重組人類gh和hgh相比，hgh-ctp多肽的潛在的長(zhǎng)效生物學(xué)活性。材料與方法雌性切除垂體的大鼠(60-100g)接受每周皮下注射21.7μghgh-ctp多肽或每天一次5μg皮下注射對(duì)照商業(yè)化的rhgh。在治療之前、第一次注射的24小時(shí)后以及此后每隔一天直至第21天研究結(jié)束，對(duì)所有的動(dòng)物進(jìn)行稱重。每個(gè)點(diǎn)代表了該組的平均增重率((第0天的體重-最后一天的體重)/第0天的體重)。相對(duì)于每天一次注射商業(yè)化的hgh的體重，將平均體重增加歸一化。治療安排總結(jié)于表2中。表2結(jié)果結(jié)果總結(jié)于圖2中。這些結(jié)果顯示，與誘導(dǎo)100％體重增加的商業(yè)化的rhgh相比，ctp-hgh-ctp-ctp(seqidno:11)和tctp-hgh-ctp-ctp(seqidno:12)誘導(dǎo)超過120％的體重增加。結(jié)論與以5μg劑量每天一次給予13天注射相同累積劑量的商業(yè)化的rhgh相比，3周劑量(注射日：1、7和13)21.7g的ctp-hgh-ctp-ctp(seqidno:11)和tctp-hgh-ctp-ctp(seqidno:12)在切除垂體的大鼠中誘導(dǎo)的體重增加多出30％。實(shí)施例3ctp-修飾的gh的藥代動(dòng)力學(xué)研究在sprague-dawley大鼠中進(jìn)行單劑量的藥代動(dòng)力學(xué)研究。所有的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)都是按照動(dòng)物福利法、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和使用指南、并且在modigene,biotechnologygeneralltd的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物管理和使用委員會(huì)的監(jiān)督和批準(zhǔn)下進(jìn)行的。大鼠飼養(yǎng)于具有12-h光/暗周期的室中，一籠單只或一籠兩只?？蛇x地提供水(市政供應(yīng))和未經(jīng)認(rèn)證的嚙齒動(dòng)物食物。為了在大鼠中比較ctp-hgh-ctp-ctp和gh的藥代動(dòng)力學(xué)，使用四組sprague-dawley大鼠(270-290g)，每組3至6只雄性大鼠。將大鼠隨機(jī)分配到四個(gè)治療組(見表3)。單次皮下注射或靜脈注射gh(50μg/kg靜脈注射或皮下注射)或ctp-hgh-ctp-ctp(108μg/kg靜脈注射或皮下注射)向大鼠給予。除了在異氟烷麻醉下采集的給予前樣品之外，在未麻醉的動(dòng)物進(jìn)行采血。將血樣(約0.25ml)采集于edta-涂覆的微量容器中，以用于在表3所示出的時(shí)間點(diǎn)elisa分析ctp-hgh-ctp-ctp血漿濃度。在每次采樣后，將血體積替換為等體積的無菌0.9％鹽水。在離心和血漿收獲之前將樣品在冰上貯存上達(dá)至1h。在分析之前，將血漿樣品貯存在約-20℃下。表3.大鼠藥代動(dòng)力學(xué)研究的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)#3只大鼠每時(shí)間點(diǎn)。使用對(duì)于檢測(cè)人類生長(zhǎng)激素特異的商業(yè)化的夾心elisa試劑盒(rochediagnostics)來評(píng)價(jià)大鼠血漿樣品。這種試劑盒通過抗體夾心elisa形式檢測(cè)血漿中的人類生長(zhǎng)激素。首先使用這種試劑盒測(cè)量大鼠血漿中ctp-hgh-ctp-ctp的濃度。對(duì)于這些血漿樣品，使用ctp-hgh-ctp-ctp標(biāo)準(zhǔn)曲線(1.2-100ng/ml)并且大鼠血漿中的ctp-hgh-ctp-ctp濃度來自該曲線的內(nèi)插值。標(biāo)準(zhǔn)的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，包括清除率(cl或cl/f)、分布體積(vd或vd/f)、半衰期(t1/2)、血漿濃度-時(shí)間曲線下面積(auc)、觀察到的最大血漿濃度(cmax)和最大觀測(cè)血漿濃度的時(shí)間(tmax)，是使用建模程序winnonlin(pharsight,version3.1)通過非房室模型分析(noncompartmentalanalysis)由血漿白蛋白調(diào)理素(albutropin)或gh濃度/時(shí)間曲線來獲得的。將血漿ctp-hgh-ctp-ctp或gh濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)一地加權(quán)以用于該分析。對(duì)靜脈注射數(shù)據(jù)使用對(duì)數(shù)-線性梯形分析并且對(duì)皮下注射數(shù)據(jù)使用線性上/對(duì)數(shù)下梯形法來計(jì)算auc。單個(gè)地分析每個(gè)大鼠(除了皮下注射白蛋白調(diào)理素之外)或猴的血漿濃度分布，并且將藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)的平均值(s.e.m.)的均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差報(bào)告于表4和圖4a及圖4b中。ctp-hgh-ctp-ctp是275個(gè)氨基酸和上達(dá)至12個(gè)o-連接的糖的單鏈蛋白質(zhì)。該結(jié)構(gòu)由連接至三個(gè)拷貝的人絨毛膜促性腺激素(hcg)的β鏈的c-末端肽(ctp)的經(jīng)修飾的人類生長(zhǎng)激素(somatropin)構(gòu)成；一個(gè)拷貝在n-末端而兩個(gè)拷貝(串聯(lián)的)在c末端。人類生長(zhǎng)激素包含191個(gè)氨基酸。ctp包含28個(gè)氨基酸和4個(gè)o-連接的糖鏈。實(shí)施例4ctp-修飾的gh在sd大鼠中的藥代動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)了ctp-hgh-ctp-ctp的藥代動(dòng)力學(xué)并且與商業(yè)化的hgh(biotropin)的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行比較。表4.在sprague-dawley大鼠中單劑量靜脈注射和皮下注射給予ctp-hgh-ctp-ctp和gh(biotropin)后的平均藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析對(duì)血清樣品進(jìn)行分析以測(cè)定各樣品的具體濃度水平。使用winnonlin非房室模型分析處理濃度和時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)。所測(cè)定的參數(shù)包括：auc、mrt、tl/2、cmax和tmax。圖4a和圖4b顯示在大鼠中單劑量靜脈注射和皮下注射ctp-hgh-ctp-ctp或gh(n＝3～6每劑量/途徑)后，與gh濃度(pg/ml)相比，ctp-hgh-ctp-ctp血漿濃度具有更加優(yōu)異的藥代動(dòng)力學(xué)分布。在單次皮下注射50μg/kg之后，ctp-hgh-ctp-ctp在sd大鼠中的清除率顯著的低于ctp-hgh-ctp及biotropin的清除率。相應(yīng)計(jì)算的半衰期時(shí)間和auc為：biotropintl/21.7h，auc41小時(shí)*ng/mlctp-hgh-ctptl/28.5h，auc424小時(shí)*ng/mlctp-hgh-ctp-ctptl/29.0h，auc680小時(shí)*ng/ml結(jié)論：從6個(gè)其他變異體中選出ctp-hgh-ctp-ctp作為最終的候選物。ctp-hgh-ctp-ctp在生物學(xué)活性和藥代動(dòng)力學(xué)方面表現(xiàn)出優(yōu)異的性能。實(shí)施例5單劑量/重復(fù)劑量的ctp-修飾的gh的體重增加測(cè)定(wga)從crl實(shí)驗(yàn)室獲得了3-4周齡的切除垂體的(耳間法)雄性大鼠。在3周的手術(shù)后適應(yīng)期內(nèi)，每周兩次對(duì)大鼠進(jìn)行檢查和稱重，以排除由體重增加類似于假手術(shù)大鼠的體重增加而被視為具有不完全垂體切除的動(dòng)物。從研究中排除具有不完全垂體切除的那些大鼠。在實(shí)驗(yàn)時(shí)，切除垂體的大鼠的平均體重為70～90克。這是用于hgh的標(biāo)準(zhǔn)usp和ep生物測(cè)定。切除垂體的大鼠(摘除了腦垂體的大鼠)失去了它們?cè)黾芋w重的能力。向這些大鼠中注射hgh(和ctp-hgh-ctp-ctp)導(dǎo)致體重增加?；谘刂A(yù)定的時(shí)間段內(nèi)測(cè)量的體重增加以及所注射的hgh的量，確定了hgh(和ctp-hgh-ctp-ctp)的具體活性。3周時(shí)間內(nèi)，單劑量皮下注射0.4mg/kg、0.8mg/kg和4mg/kg或者每隔4天重復(fù)劑量皮下注射0.6mg/kg和1.8mg/kg給予大鼠。在第一次給藥之前，隨機(jī)地測(cè)定所有動(dòng)物的個(gè)體體重，然后在處死之前，每?jī)商旎蛟谒劳龅那闆r下在死亡時(shí)測(cè)定個(gè)體體重。單劑量和重復(fù)劑量的體重增加測(cè)定在圖5中示出在切除垂體的大鼠中，在不同劑量模式的ctp-hgh-ctp-ctp之后，整個(gè)身體生長(zhǎng)反應(yīng)的比較結(jié)果。結(jié)果表面，單次注射0.4mg/kg/天和0.8mg/kg/天劑量的hgh-ctp相當(dāng)于4個(gè)每天注射0.1mg/kg/天的biotropin。在2天后達(dá)到hgh-ctp的峰值。圖6進(jìn)一步表明，在大鼠中單注射ctp-hgh-ctp-ctp之后的曲線下的面積與體重增加相關(guān)。因此，集體數(shù)據(jù)表明體重增加與累積auc密切相關(guān)。如圖7所示，相隔4天給予的hgh-ctp構(gòu)建體促進(jìn)了與每天注射biotropin相同的體重增加。預(yù)期hgh在人體中的半衰期比在大鼠中好5倍——指示在單次注射10天后在人體中可能的峰效應(yīng)。這些結(jié)果支持人類中每周一次或兩周一次給予hgh-ctp構(gòu)建體ctp-hgh-ctp-ctp。實(shí)施例6ctp-修飾的gh的藥效學(xué)/藥代動(dòng)力學(xué)研究從crl實(shí)驗(yàn)室獲得了3-4周齡的切除垂體的(耳間法)雄性大鼠。在3周的手術(shù)后適應(yīng)期內(nèi)，每周兩次對(duì)大鼠進(jìn)行檢查和稱重，以排除由體重增加類似于假手術(shù)大鼠的體重增加而視為具有不完全垂體切除的動(dòng)物。從研究中排除具有不完全垂體切除的那些大鼠。在實(shí)驗(yàn)時(shí)，切除垂體和假手術(shù)的大鼠的平均體重分別為70和150g。用ctp-hgh-ctp-ctp、載體、人類生長(zhǎng)激素ctp-hgh-ctp-ctp或人類生長(zhǎng)激素(20μg/大鼠)單次皮下注射給予大鼠，以0.2ml/大鼠的注射體積皮下注射給予。gh的劑量為0.35μg/kg和1.05μg/kg，生長(zhǎng)激素的劑量與相應(yīng)0.6μg/kg和1.8μg/kg劑量的ctp-hgh-ctp-ctp中的gh的量是等摩爾的。治療組總結(jié)于表4中。在注射后，在表5中所描述的時(shí)間點(diǎn)獲得用于igf-1分析的血漿樣品。使用商業(yè)化的elisa(r&d系統(tǒng))分析樣品的igf-1濃度。每周給予ctp-修飾的hgh如同標(biāo)準(zhǔn)gh一樣，成功地將igf-1維持在正常范圍內(nèi)，并且其如同標(biāo)準(zhǔn)gh一樣維持了體重。表5.切除垂體的大鼠研究的治療安排對(duì)每組的平均血清濃度-時(shí)間曲線進(jìn)行非房室模型藥代動(dòng)力學(xué)分析。ctp-hgh-ctp-ctpcmax顯著地高于biotropincmax。ctp-hgh-ctp-ctp的終末半衰期比biotropin高6倍。表6.在切除垂體的大鼠中單次皮下注射ctp-hgh-ctp-ctp和biotropin后的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)估算值。auc0-t和auc0-∞非常相似，表明采樣時(shí)間足以表征藥代動(dòng)力學(xué)分布。ctp-hgh-ctp-ctp的auc比biotropin的auc高10倍。另外，cmax一般與劑量成正比，并且對(duì)于ctp-hgh-ctp-ctp，其比biotropin的cmax高兩倍。但是，如圖8所示，與biotroin的0.5小時(shí)相比，ctp-hgh-ctp-ctp的tmax為8小時(shí)。且終末半衰期似乎未隨劑量水平而變化。ctp-hgh-ctp-ctp的tl/2比biotropin長(zhǎng)6.8倍。gh的間接效應(yīng)是主要通過胰島素樣生長(zhǎng)因子-i(igf-1)來介導(dǎo)的，該igf-1為響應(yīng)于生長(zhǎng)激素由肝臟和其他組織來分泌的激素。生長(zhǎng)激素的大多數(shù)促生長(zhǎng)作用實(shí)際上是由于作用于其靶細(xì)胞的igf-1帶來的。因此，測(cè)量了ctp-hgh構(gòu)建體、ctp-hgh-ctp-ctp對(duì)垂體切除的大鼠中ifg-1血清水平的影響。圖9顯示了在皮下注射ctp-hgh-ctp-ctp和商業(yè)化的hgh后垂體切除的大鼠中ifg-1血清水平的結(jié)果。將單劑量的ctp-hgh-ctp-ctp0.6mg/kg或1.8mg/kg和biotropin0.35mg/kg或1.05mg/kg皮下注射到垂體切除的大鼠中，以測(cè)定pk/pd分布。使用特異性elisa試劑盒(rochediagnostics)測(cè)量注射后的血清igf-1。與在注射biotropin后相比，注射ctp-hgh-ctp-ctp后的igf-1的累積血清水平顯著更高。cmax一般與劑量成正比，并且對(duì)于ctp-hgh-ctp-ctp，cmax比biotropin的cmax高3-4倍。相比于biotropin的20-24小時(shí)，ctp-hgh-ctp-ctp的tmax為36-48小時(shí)。結(jié)論，更高的hgh水平和更長(zhǎng)時(shí)間的存在于血清中使得igf-1水平顯著增加。實(shí)施例7ctp-修飾的gh的碳水化合物含量和唾液酸含量基于prozyme試劑盒分析o-聚糖。從蛋白質(zhì)上化學(xué)地和酶學(xué)地裂解出o-聚糖，并且使用紙層析法與肽分離。通過連續(xù)酶消化(外-糖苷酶)進(jìn)行o-聚糖池的測(cè)序，隨后通過hplc分析與標(biāo)準(zhǔn)比較。糖分析與序列分析由ludgerltd.進(jìn)行糖分析(glycoprofiling)。兩個(gè)樣品(en648和rs0708)各取一式三份并且每份通過hplc分析三次。將en648和rs0708的一式三份300μg樣品和檸檬酸鹽/氯化鈉緩沖液的單個(gè)100μl樣品、加上陽性對(duì)照胎球蛋白(250μg)以及100μl水陰性對(duì)照通過離心進(jìn)行超濾，使用10,000da的分子量截留膜以用水替換緩沖液，然后在o-模式條件(在60℃下6h)進(jìn)行肼解。將釋放的聚糖再n-乙酰化并且通過ludgercleancex柱體進(jìn)行清理。然后使用2-氨基苯甲酰胺(2ab)標(biāo)記等分試樣的釋放的聚糖，使用ludgercleans柱體進(jìn)行清理并且通過ludgersep-n2hilic-hplc進(jìn)行分析。單糖含量中性單糖的分析要求將聚糖水解為它們的組成單糖組分。水解是由ludgerltd在完整糖蛋白樣品上進(jìn)行的。具體地，將50μg完整的糖蛋白進(jìn)行酸水解，2-ab(2-氨基苯甲酰胺)標(biāo)記并且在反相hplc柱上進(jìn)行運(yùn)行。這種方法水解存在于包含n和o連接類型的糖蛋白上的所有聚糖。唾液酸分析分析了兩個(gè)樣品(en648和rs0708)和緩沖液對(duì)照。唾液酸分析需要弱酸釋放單糖，隨后dmb熒光標(biāo)記和在ludgersep-rl柱上hplc分析。對(duì)每個(gè)分析，酸水解50μg完整的糖蛋白。ctp-hgh-ctp-ctp的糖分析表7.聚糖分析。結(jié)構(gòu)分配和峰的百分比面積基于hplc和酶陣列消化。單糖分析顯示ctp-hgh-ctp-ctp糖蛋白樣品主要包含o-連接類型的聚糖。主要的o-聚糖峰為唾液酸化的核心1(neu5acα2-3galβ1-3galnac)。主要的唾液酸是neu5ac并且有一些小峰顯示存在3-4％的二-乙?；耐僖核醤-乙?；?9-o-乙酰神經(jīng)氨酸(neu5,9ac2)和小于1％的n-羥乙酰神經(jīng)氨酸。還有少量的neu5acα2-6(galβ1-3)galnac。實(shí)施例8ctp-修飾的gh在恒河猴中的藥代動(dòng)力學(xué)/毒代動(dòng)力學(xué)分析為每只動(dòng)物產(chǎn)生血清濃度與時(shí)間的關(guān)系曲線。使用winnonlin專業(yè)版5.2.1(pharsightcorporation,mtviewca.)進(jìn)行非房室模型分析。估算的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)如下表8所示：表8：在恒河猴中單次皮下注射后，由非房室模型分析的ctp-hgh-ctp-ctp藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)(平均值±sd)的估算值。auc0-t和auc0-∞非常相似，表明采樣的持續(xù)時(shí)間足以表征藥代動(dòng)力學(xué)分布。cmax為與劑量成正比。在較高的劑量下，tmax較晚。在低劑量組中，所有動(dòng)物的tmax都在4小時(shí)，而在高劑量組中，在8或24小時(shí)。兩個(gè)劑量組的終末半衰期相似。auc與劑量大約成正比，與低劑量相比，較大成比例的auc在較高劑量下產(chǎn)生較低的cl/f和vz/f估算值。這不能說，在較高劑量下cl和vz較低或在較低劑量下f較低。在各組之間具有重疊，所以值得商榷的是，這表現(xiàn)出cl/f和vz/f有意義的差異。通過該模型估算的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)非常相似于來自非房室模型分析的那些。吸收和消除半衰期如下表9中所示：表9：在皮下注射后，來自恒河猴中藥代動(dòng)力學(xué)建模的ctp-hgh-ctp-ctp的吸收和消除半衰期(平均值±sd)的估算值這些數(shù)據(jù)表明各組之間的消除速率十分相似，其中，在較低劑量組中t1/2el稍長(zhǎng)。但是，與在皮下給予1.8mg/kg后相比，皮下給予90mg/kg后吸收緩慢超過5倍。如在非房室模型分析的情形相同，建模顯示在高劑量下tmax較晚。雖然補(bǔ)充gh對(duì)在兒童和成人中治療gh缺乏癥有效，但缺點(diǎn)在于較長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)每天注射限制了內(nèi)科醫(yī)生將期應(yīng)用在某些患者人群，并且增加了給藥錯(cuò)誤的風(fēng)險(xiǎn)、照顧者的數(shù)量、治療和非依從性的成本。尤其重要的是，在某些群體如身材矮小的兒童中(他們可能不理解不遵照規(guī)定的gh給藥方案的含意)，為實(shí)現(xiàn)由gh治療的最佳益處，依從性是必要的。尋找每天注射gh及隨后的依從性收益的更合適替代物的問題更是重要的，因?yàn)間h-缺乏癥兒童過渡到成人時(shí)，持續(xù)地需要gh治療。每天治療的需求主要是由于重組gh的短血漿半衰期所導(dǎo)致的，并由此導(dǎo)致開發(fā)了持續(xù)釋放形式的gh(reitereo.attirekm.,mashingtj.silvermanbl.kempsf.neolithrb.fordkm.和sangerp.amultimemberstudyoftheefficacyandsafetyofsustainedreleaseghinthetreatmentofnaivepediatricpatientswithghdeficiency.j.clin.endocrinol.metab.86(2001),pp.4700-4706.)。本文中所提供的重組人類生長(zhǎng)激素-ctp融合蛋白質(zhì)gh-ctp在大鼠中具有的藥代動(dòng)力學(xué)分布的持續(xù)時(shí)間比gh的要長(zhǎng)。如分別由生長(zhǎng)和血漿igf-1水平的升高所證明的，這種獨(dú)特的藥代動(dòng)力學(xué)分布允許間歇給予gh-ctp以在生長(zhǎng)激素缺乏的大鼠中實(shí)現(xiàn)藥效。當(dāng)皮下給予至大鼠中時(shí)，gh-ctp提供了比gh更加優(yōu)異的藥代動(dòng)力學(xué)分布。與gh相比，gh-ctp的血漿清除率具有巨大的差異。具體地，在皮下給藥后，血漿清除gh-ctp的速率比gh慢超過6倍。在皮下給予后，在大鼠中g(shù)h-ctp的終末半衰期和平均滯留時(shí)間約比gh的長(zhǎng)6倍。另外，在皮下給藥后，gh-ctp的cl/f比gh的低10倍。為了檢驗(yàn)在大鼠中的藥代動(dòng)力學(xué)優(yōu)勢(shì)是否可以轉(zhuǎn)換為藥效益處，在等摩爾的ctp-hgh-ctp-ctp和gh劑量水平下，以比每天較不頻繁的用藥方案在gh-缺乏的切除垂體的大鼠中測(cè)試了gh-ctp可能刺激生長(zhǎng)的可能性。單次皮下注射gh-ctp促進(jìn)的增量體重增加與4天連接注射gh的相等。另外，與gh相比，gh-ctp的每第四天給予安排顯示出增強(qiáng)的體重增加。藥效學(xué)上，相對(duì)于gh，gh-ctp在切除垂體的大鼠的長(zhǎng)循環(huán)時(shí)間產(chǎn)生在單次皮下注射后在血漿中測(cè)量的延長(zhǎng)的igf-1響應(yīng)。皮下給予單劑量的gh-ctp在切除垂體的大鼠中以劑量依賴性方式增加了循環(huán)的igf-1濃度。在最高的白蛋白調(diào)理素劑量下，在單次給予后，igf-1濃度被提高到基線以上長(zhǎng)達(dá)75小時(shí)。因此，相比于單劑量的gh，單劑量gh-ctp的增長(zhǎng)的循環(huán)時(shí)間產(chǎn)生實(shí)質(zhì)的藥效改善，提高了如下可能性：與標(biāo)準(zhǔn)gh治療方案相比，gh-ctp可以以降低的用藥頻率提供類似的生長(zhǎng)增強(qiáng)和身體脂肪的減少。在rhesus中90mg/kg以及在大鼠中180mg/kg單劑量的ctp修飾的hgh在兩個(gè)物種中都耐受性良好。大鼠和靈長(zhǎng)類動(dòng)物之間的異速生長(zhǎng)因子約為x2，這是基于蛋白質(zhì)在這些動(dòng)物中的預(yù)期清除率。與物種之間的治療性蛋白質(zhì)的半衰期增加(fda指南)用的業(yè)界公認(rèn)的外推模型一致。90mg/kg在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中所具有的pk分布稍微好于180mg/kgctp修飾的hgh在大鼠中。因此，異速生長(zhǎng)外推到人類支持每周一次或每2周一次注射。與商業(yè)化的gh重組產(chǎn)品相比，利用ctp-gh構(gòu)建體的本發(fā)明的思概念降低了用藥頻率。nutropin是批準(zhǔn)在兒科人群中使用的gh的緩釋制劑；但是與歷史對(duì)照相比已經(jīng)顯示，與使用gh治療的兒童(一年的生長(zhǎng)速率10.1±2.8cm/年)相比，提供nutropin的兒童的1年和2年生長(zhǎng)速率(一年生長(zhǎng)速率8.2+1.8cm/年)顯著更低(p<0.001)(silvermanbl.blethensl.reitereo.attiekm.neuwirthrb.和fordkm.along-actinghumangrowthhormone(nutropin):efficacyandsafetyfollowingtwoyearsoftreatmentinchildrenwithgrowthhormonedeficiency.j.pediatr.endocrinol.metab.15(2002),pp.715-722.)。皮下給予nutropin的局部效應(yīng)包括結(jié)節(jié)、紅斑、注射部位疼痛、頭痛和嘔吐。在大鼠和猴中的臨床前毒理學(xué)研究已經(jīng)顯示，與載體相比，皮下給予ctp-hgh-ctp-ctp未產(chǎn)生局部反應(yīng)?？紤]到醫(yī)藥需要較低頻率給予gh的形式，在本研究中ctp-hgh-ctp-ctp在大鼠中的藥理特性顯示，這種產(chǎn)品在毒理學(xué)和患者的依從性上也是有利的。ctp-hgh-ctp-ctp在大鼠中的持久活性支持其作為如下試劑的潛在效用，該試劑只需要間斷給予即可實(shí)現(xiàn)當(dāng)前每天給藥所實(shí)現(xiàn)的治療益處。實(shí)施例9長(zhǎng)效ctp-修飾型的人類生長(zhǎng)激素(hgh-ctp)在生長(zhǎng)激素缺乏癥的成人中高度有效－ii期臨床試驗(yàn)在當(dāng)前正接受每天注射生長(zhǎng)激素的患者中，每周一次或每月兩次注射hgh-ctp以進(jìn)行隨機(jī)、開放性、ii期臨床試驗(yàn)以評(píng)價(jià)hgh-ctp的安全性、耐受性、藥代動(dòng)力學(xué)和藥效學(xué)特性。試驗(yàn)在六個(gè)國(guó)家的多個(gè)站點(diǎn)進(jìn)行。試驗(yàn)中的三個(gè)主要同期群(cohort)接受單周劑量的hgh-ctp，其含有生長(zhǎng)激素缺乏癥成年患者以每天注射的形式在7天療程中接受的當(dāng)量累積商業(yè)化hgh劑量的30％、45％或100％(分別稱為“30％”、“45％”和“100％”同期群)。數(shù)據(jù)反映了來自39位患者的結(jié)果，每個(gè)同期群有13位，每個(gè)同期群包括2位女性。除了該三個(gè)主要同期群之外，將生長(zhǎng)激素缺乏癥成人納入實(shí)驗(yàn)性第四同期群，其在正式ii期臨床試驗(yàn)之外進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)性第四同期群中的患者每?jī)芍芤淮谓邮軉未巫⑸鋒gh-ctp，其含有生長(zhǎng)激素缺乏癥成人患者以每天注射的形式在兩周期間內(nèi)接受的累積商業(yè)化的劑量的50％。通過在7天的時(shí)間段內(nèi)(在研究當(dāng)中治療的最后一周期間內(nèi))每天測(cè)量的胰島素樣生長(zhǎng)因子1(igf-1)的水平處于所需的治療范圍內(nèi)來界定接受每周單次注射hgh-ctp的三個(gè)主要同期群的效力。所需的治療范圍限定為在正常人群中預(yù)期的平均igf-1水平+2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差至-2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差，按年齡組別和性別分層。另外，為了觀察患者在正常范圍內(nèi)的方差，該試驗(yàn)測(cè)量的igf-1水平處于+/-1.5個(gè)標(biāo)準(zhǔn)偏差的較窄的范圍內(nèi)。結(jié)果：表10含有在最后的治療一周中測(cè)量的，表達(dá)為與正常人群的平均igf-1水平的標(biāo)準(zhǔn)偏差的處于正常治療范圍內(nèi)(+/-2sd)的天數(shù)的平均百分比、處于較窄的正常治療范圍內(nèi)(+/-1.5sd)的天數(shù)的平均百分比、以及男性的igf-1的平均cmax(最高的濃度水平)。表10：人類ⅱ期臨床試驗(yàn)結(jié)果每周2mg的hgh-ctp，其含有成人患者通常會(huì)規(guī)定作為初始治療劑量的累積每周hgh劑量的50％，具有很高的可能性被定義為在成人iii期中作為男性和女性的初始劑量。沒有安全性問題和/或耐受性問題的證據(jù)，并且也沒有跡象顯示當(dāng)高劑量或者甚至高于正常范圍的水平使用hgh-ctp時(shí)在患者中誘導(dǎo)了過高水平的igf-1。雖然在本文中已經(jīng)說明和描述了本發(fā)明的某些特征，但是現(xiàn)有本領(lǐng)域普通技術(shù)人可以想到許多修改、替換、改變和等效物。因此，可以理解的是，隨附的權(quán)利要求意在涵蓋落入本發(fā)明的真正精神的所有此類修改和改變。序列表<110>普羅勒生物科技有限責(zé)任公司(prolorbiotechinc.)<120>長(zhǎng)效生長(zhǎng)激素及其生產(chǎn)方法(long-actinggrowthhormoneandmethodsofproducingsame)<130>p-9520-pc4<140>pct/us12/999999<141>2012-08-01<150>12/476,916<151>2009-06-02<150>13/195,931<151>2011-08-02<150>12/509,188<151>2009-07-24<150>12/476,916<151>2009-06-02<150>12/401,746<151>2009-03-11<150>11/700,910<151>2007-02-01<150>60/764,761<151>2006-02-03<160>26<170>patentinversion3.5<210>1<211>33<212>prt<213>人類(homosapiens)<400>1aspproargpheglnaspserserserserlysalaproproproser151015leuproserproserargleuproglyproseraspthrproileleu202530gln<210>2<211>28<212>prt<213>人類<400>2serserserserlysalaproproproserleuproserproserarg151015leuproglyproseraspthrproileleuprogln2025<210>3<211>26<212>prt<213>人類<400>3metalathrglyserargthrserleuleuleualapheglyleuleu151015cysleuprotrpleuglngluglyserala2025<210>4<211>12<212>prt<213>人類<400>4serserserserlysalaproproproserleupro1510<210>5<211>217<212>prt<213>人類<400>5metalathrglyserargthrserleuleuleualapheglyleuleu151015cysleuprotrpleuglngluglyseralapheprothrileproleu202530serargleupheaspasnalametleuargalahisargleuhisgln354045leualapheaspthrtyrglngluphegluglualatyrileprolys505560gluglnlystyrserpheleuglnasnproglnthrserleucysphe65707580sergluserileprothrproserasnargglugluthrglnglnlys859095serasnleugluleuleuargileserleuleuleuileglnsertrp100105110leugluprovalglnpheleuargservalphealaasnserleuval115120125tyrglyalaseraspserasnvaltyraspleuleulysaspleuglu130135140gluglyileglnthrleumetglyargleugluaspglyserproarg145150155160thrglyglnilephelysglnthrtyrserlyspheaspthrasnser165170175hisasnaspaspalaleuleulysasntyrglyleuleutyrcysphe180185190arglysaspmetasplysvalgluthrpheleuargilevalglncys195200205argservalgluglysercysglyphe210215<210>6<211>192<212>prt<213>人類<400>6metpheprothrileproleuserargleupheaspasnalametleu151015argalahisargleuhisglnleualapheaspthrtyrglngluphe202530gluglualatyrileprolysgluglnlystyrserpheleuglnasn354045proglnthrserleucysphesergluserileprothrproserasn505560argglugluthrglnglnlysserasnleugluleuleuargileser65707580leuleuleuileglnsertrpleugluprovalglnpheleuargser859095valphealaasnserleuvaltyrglyalaseraspserasnvaltyr100105110aspleuleulysaspleuglugluglyileglnthrleumetglyarg115120125leugluaspglyserproargthrglyglnilephelysglnthrtyr130135140serlyspheaspthrasnserhisasnaspaspalaleuleulysasn145150155160tyrglyleuleutyrcysphearglysaspmetasplysvalgluthr165170175pheleuargilevalglncysargservalgluglysercysglyphe180185190<210>7<211>25<212>prt<213>人類<400>7metpheprothrileproleuserargleupheaspasnalametleu151015argalahisargleuhisglnleuala2025<210>8<211>217<212>prt<213>人類<400>8metalathrglyserargthrserleuleuleualapheglyleuleu151015cysleuprotrpleuglngluglyseralapheprothrileproleu202530serargleupheaspasnalametleuargalahisargleuhisgln354045leualapheaspthrtyrglngluphegluglualatyrileprolys505560valglnlystyrserpheleuglnasnproglnthrserleucysphe65707580sergluserileprothrproserasnargglugluthrglnglnlys859095serasnleugluleuleuargileserleuleuleuileglnsertrp100105110leugluprovalglnpheleuargservalphealaasnserleuval115120125tyrglyalaseraspserasnvaltyraspleuleulysaspleuglu130135140gluglyileglnthrleumetglyargleugluaspglyserproarg145150155160thrglyglnilephelysglnthrtyrserlyspheaspthrasnser165170175hisasnaspaspalaleuleulysasntyrglyleuleutyrcysphe180185190arglysaspmetasplysvalgluthrpheleuargilevalglncys195200205argservalgluglysercysglyphe210215<210>9<211>245<212>prt<213>人類<400>9metalathrglyserargthrserleuleuleualapheglyleuleu151015cysleuprotrpleuglngluglyseralapheprothrileproleu202530serargleupheaspasnalametleuargalahisargleuhisgln354045leualapheaspthrtyrglngluphegluglualatyrileprolys505560gluglnlystyrserpheleuglnasnproglnthrserleucysphe65707580sergluserileprothrproserasnargglugluthrglnglnlys859095serasnleugluleuleuargileserleuleuleuileglnsertrp100105110leugluprovalglnpheleuargservalphealaasnserleuval115120125tyrglyalaseraspserasnvaltyraspleuleulysaspleuglu130135140gluglyileglnthrleumetglyargleugluaspglyserproarg145150155160thrglyglnilephelysglnthrtyrserlyspheaspthrasnser165170175hisasnaspaspalaleuleulysasntyrglyleuleutyrcysphe180185190arglysaspmetasplysvalgluthrpheleuargilevalglncys195200205argservalgluglysercysglypheserserserserlysalapro210215220proproserleuproserproserargleuproglyproseraspthr225230235240proileleuprogln245<210>10<211>273<212>prt<213>人類<400>10metalathrglyserargthrserleuleuleualapheglyleuleu151015cysleuprotrpleuglngluglyseralapheprothrileproleu202530serargleupheaspasnalametleuargalahisargleuhisgln354045leualapheaspthrtyrglngluphegluglualatyril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cacccattctgccccagttccccac180catccccctgagcaggctgttcgacaacgccatgctgagggctcacaggctgcaccagct240ggcctttgacacctaccaggagttcgaggaagcctacatccccaaggagcagaagtacag300cttcctgcagaacccccagacctccctgtgcttcagcgagagcatccccacccccagcaa360cagagaggagacccagcagaagagcaacctggagctgctgaggatctccctgctgctgat420ccagagctggctggagcccgtgcagttcctgagaagcgtgttcgccaacagcctggtgta480cggcgccagcgacagcaacgtgtacgacctgctgaaggacctggaggagggcatccagac540cctgatgggccggctggaggacggcagccccaggaccggccagatcttcaagcagaccta600cagcaagttcgacaccaacagccacaacgacgacgccctgctgaagaactacgggctgct660gtactgcttcagaaaggacatggacaaggtggagaccttcctgaggatcgtgcagtgcag720aagcgtggagggcagctgcggcttcagctccagcagcaaggcccctcccccgagcctgcc780ctccccaagcaggctgcctgggccctccgacacaccaatcctgcctcagtgatgaaggtc840tggatgcggccgc853<210>16<211>937<212>dna<213>人類<400>16tctagaggacatggccaccggcagcaggaccagcctgctgctggccttcggcctgctgtg60cctgccatggctgcaggagggcagcgccagctcttcttctaaggctccacccccatctct120gcccagccccagcagactgccgggccccagcgacacacccattctgccccagttccccac180catccccctgagcaggctgttcgacaacgccatgctgagggctcacaggctgcaccagct240ggcctttgacacctaccaggagttcgaggaagcctacatccccaaggagcagaagtacag300cttcctgcagaacccccagacctccctgtgcttcagcgagagcatccccacccccagcaa360cagagaggagacccagcagaagagcaacctggagctgctgaggatctccctgctgctgat420ccagagctggctggagcccgtgcagttcctgagaagcgtgttcgccaacagcctggtgta480cggcgccagcgacagcaacgtgtacgacctgctgaaggacctggaggagggcatccagac540cctgatgggccggctggaggacggcagccccaggaccggccagatcttcaagcagaccta600cagcaagttcgacaccaacagccacaacgacgacgccctgctgaagaactacgggctgct660gtactgcttcagaaaggacatggacaaggtggagaccttcctgaggatcgtgcagtgcag720aagcgtggagggcagctgcggcttcagctccagcagcaaggcccctcccccgagcctgcc780ctccccaagcaggctgcctgggccctccgacacaccaatcctgccacagagcagctcctc840taaggcccctcctccatccctgccatccccctcccggctgcctggcccctctgacacccc900tatcctgcctcagtgatgaaggtctggatgcggccgc937<210>17<211>889<212>dna<213>人類<400>17tctagaggacatggccaccggcagcaggaccagcctgctgctggccttcggcctgctgtg60cctgccatggctgcaggagggcagcgccagctcttcttctaaggctccacccccgagcct120gcccttccccaccatccccctgagcaggctgttcgacaacgccatgctgagggctcacag180gctgcaccagctggcctttgacacctaccaggagttcgaggaagcctacatccccaagga240gcagaagtacagcttcctgcagaacccccagacctccctgtgcttcagcgagagcatccc300cacccccagcaacagagaggagacccagcagaagagcaacctggagctgctgaggatctc360cctgctgctgatccagagctggctggagcccgtgcagttcctgagaagcgtgttcgccaa420cagcctggtgtacggcgccagcgacagcaacgtgtacgacctgctgaaggacctggagga480gggcatccagaccctgatgggccggctggaggacggcagccccaggaccggccagatctt540caagcagacctacagcaagttcgacaccaacagccacaacgacgacgccctgctgaagaa600ctacgggctgctgtactgcttcagaaaggacatggacaaggtggagaccttcctgaggat660cgtgcagtgcagaagcgtggagggcagctgcggcttcagctccagcagcaaggcccctcc720cccgagcctgccctccccaagcaggctgcctgggccctccgacacaccaatcctgccaca780gagcagctcctctaaggcccctcctccatccctgccatccccctcccggctgcctggccc840ctctgacacccctatcctgcctcagtgatgaaggtctggatgcggccgc889<210>18<211>19<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的xbai正向引物<400>18ctctagaggacatggccac19<210>19<211>24<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的反向引物<400>19acagggaggtctgggggttctgca24<210>20<211>26<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的正向引物<400>20tgcagaacccccagacctccctgtgc26<210>21<211>22<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的反向引物<400>21ccaaactcatcaatgtatctta22<210>22<211>19<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的xbai正向引物<400>22ctctagaggacatggccac19<210>23<211>25<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的反向引物<400>23cgaactcctggtaggtgtcaaaggc25<210>24<211>25<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的正向引物<400>24gcctttgacacctaccaggagttcg25<210>25<211>33<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的反向引物<400>25acgcggccgcatccagaccttcatcactgaggc33<210>26<211>34<212>dna<213>人工序列<220><223>用于hgh-ctp構(gòu)建體的反向引物<400>26gcggccgcggactcatcagaagccgcagctgccc34當(dāng)前第1頁(yè)12當(dāng)前第1頁(yè)12