本發(fā)明涉及治療或預(yù)防口腔細(xì)菌感染的漱口液，具體涉及制霉菌素漱口液及其制備方法。
背景技術(shù)：
正常健康者口腔內(nèi)寄居著10余種正常菌和致病菌，菌群之間相互制約、相互依賴，維持相互間的平衡狀態(tài)。正?？谇籶H值為6.6～7.1，加上飲水、刷牙等活動對細(xì)菌起到清除作用。惡性血液病患者由于自身免疫能力低下，放化療等多種因素，定植在口腔內(nèi)的真菌(尤其是念珠菌)或咽部真菌感染后易進(jìn)入下呼吸道引起侵襲性肺部真菌感染。國內(nèi)外對侵襲性肺部真菌感染的預(yù)防研究絕大多數(shù)為抗真菌藥物口服或靜脈全身用藥預(yù)防研究，但對其預(yù)防效果評價不一致，同時存在不可避免的副作用、耐藥和花費(fèi)增加等問題。制霉菌素具有廣譜抗真菌作用，是膜滲透性增強(qiáng)劑，通過與真菌細(xì)胞膜的同醇類物質(zhì)結(jié)合，增加細(xì)胞通透性，使細(xì)胞內(nèi)容物及K+外移而抑制其生長，一般不易產(chǎn)生耐藥性，且費(fèi)用低。局部用藥不吸收，安全性好制霉菌素在光照、酸堿條件下都不穩(wěn)定，容易被破壞降解。
目前，醫(yī)院所用制霉菌素液須現(xiàn)配現(xiàn)用，一般要求在24h內(nèi)用完，這不但增加了醫(yī)務(wù)人員的工作量，而且在制霉菌素液的使用與保存上存在著較大局限性。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的在于提供一種溶解度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、抗菌效果好、易于制備和保存的制霉菌素漱口液及其制備方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成：
進(jìn)一步，所述漱口液由以下重量百分比的組分制成：
進(jìn)一步，所述漱口液由以下重量百分比的組分制成：
進(jìn)一步，所述漱口液由以下重量百分比的組分制成：
進(jìn)一步，所述漱口液由以下重量百分比的組分制成：
本發(fā)明還提供了所述制霉菌素漱口液的制備方法，包括以下步驟：
1)稱取磷酸吡哆醛，溶于純化水中，用碳酸鈉調(diào)pH至6-8，得到A液；
2)稱取制霉菌素，溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：
3)將A液和B液混合后凍干，得到凍干粉；
4)將尼泊金乙酯、薄荷醇與凍干粉溶于純化水中，過濾，分裝，得到制霉菌素漱口液。
本發(fā)明采用以上技術(shù)方案，以制霉菌素為主藥，以磷酸吡哆醛為助溶劑，以尼泊金乙酯為防腐劑，薄荷醇則用于增效、矯味，制備而成的制霉菌素漱口液用于預(yù)防與治療真菌感染，特別適用于預(yù)防與治療口腔及肺部念珠菌感染。其中，磷酸吡哆醛是水溶性的維生素，其化學(xué)結(jié)構(gòu)使其有增溶效果，增加了制霉菌素的水溶性。本發(fā)明成品為溶液，可直接使用，減輕了醫(yī)務(wù)人員工作量。另外本發(fā)明方法能夠提高制霉菌素溶解度、穩(wěn)定性與抗菌效果，是一款易于制備和保存的漱口液。
本發(fā)明中，防腐劑也可以選擇尼泊金甲酯或尼泊金丙酯，增效、矯味劑也可以選擇桉葉油素、水楊酸甲酯或百里香酚等，其用量進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。
具體實(shí)施方式
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成：
制霉菌素0.1-1％、磷酸吡哆醛0.1-1％、尼泊金乙酯0.1-0.3％、薄荷醇0.01-0.1％，余量為純化水，各組分總量之和為100％。
所述制霉菌素漱口液的制備方法如下：
1)稱取磷酸吡哆醛，溶于純化水中，用pH調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)pH至6-8，得到A液；
2)稱取制霉菌素，溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：
3)將A液和B液混合后凍干，得到凍干粉；
4)將尼泊金乙酯、薄荷醇與凍干粉溶于純化水中，過濾，分裝，得到制霉菌素漱口液。
實(shí)施例1
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法如下：將磷酸吡哆醛溶于純化水中，用碳酸鈉調(diào)節(jié)pH至7，得到A液；將制霉菌素溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：然后將A液和B液混合后凍干，得到凍干粉；最后，將尼泊金乙酯、薄荷醇與凍干粉溶于純化水中，過濾，分裝，得到制霉菌素漱口液。
實(shí)施例2
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法如下：將磷酸吡哆醛溶于純化水中，用碳酸鈉調(diào)節(jié)pH至8，得到A液；將制霉菌素溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：然后將A液和B液混合后凍干，得到凍干粉；最后，將尼泊金乙酯、薄荷醇與凍干粉溶于純化水中，過濾，分裝，得到制霉菌素漱口液。
實(shí)施例3
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法如下：將磷酸吡哆醛溶于純化水中，用碳酸鈉調(diào)節(jié)pH至6，得到A液；將制霉菌素溶于二甲基甲酰胺中，得到B液：然后將A液和B液混合后凍干，得到凍干粉；最后，將尼泊金乙酯、薄荷醇與凍干粉溶于純化水中，過濾，分裝，得到制霉菌素漱口液。
實(shí)施例4
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例5
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例2。
實(shí)施例6
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例3。
實(shí)施例7
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例8
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例9
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例10
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例11
一種制霉菌素漱口液，由以下重量百分比的組分制成(總量100％)：
所述制霉菌素漱口液的制備方法同實(shí)施例1。
實(shí)施例12刺激性試驗(yàn)
1急性眼刺激性試驗(yàn)
1.1材料：受試物為本發(fā)明產(chǎn)品(實(shí)施例1產(chǎn)品)，實(shí)驗(yàn)動物為健康成年白色家兔，體重為2-2.5kg。
1.2方法：選用健康成年白色家兔4只，體重為2-2.5kg，雌雄各半。左眼給該產(chǎn)品受試物，右眼給生理鹽水，分別給予0.1mL后觀察眼部反應(yīng)。在給藥后1、2、4、6、24、48和72h對眼部進(jìn)行檢查。
1.3評價：參照《化學(xué)藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》(國藥監(jiān)注[2005]106號)中的評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評分。
1.4結(jié)果：角膜和虹膜未見明顯刺激，與對照相比無明顯區(qū)別，刺激反應(yīng)平均值均為0；結(jié)膜輕度充血、水腫，有少量分泌物，結(jié)膜的以上癥狀在用藥48小時后基本消失。具體評分如下：
家兔眼刺激反應(yīng)綜合平均分值及刺激強(qiáng)度
由表可知，制霉菌素含漱液在各時間點(diǎn)眼刺激性綜合平均分值在0-3.9內(nèi)，即制霉菌素含漱液對家兔皮膚沒有刺激性。
1.5評價：根據(jù)眼刺激評價標(biāo)準(zhǔn)，表明受試物(本發(fā)明產(chǎn)品)對家兔眼睛無刺激性，符合眼刺激試驗(yàn)要求。
2、急性皮膚刺激性試驗(yàn)
2.1材料：受試物為本發(fā)明產(chǎn)品(實(shí)施例1產(chǎn)品)，實(shí)驗(yàn)動物為健康成年白色家兔，體重為2-2.5kg。
2.2方法：選用健康成年白色家兔8只，體重為2-2.5kg，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)前24h將家兔脊柱兩側(cè)脫毛，范圍為左右各3cm*3cm，去毛后24h檢查去毛皮膚。將家兔分為兩組，每組各四只，一組為皮膚無損傷，該組家兔做完好皮膚的刺激性試驗(yàn)；一組為皮膚有損傷，用滅菌針尖將去毛消毒皮膚劃破，見有滲血為度，此組家兔做破損皮膚的刺激性試驗(yàn)。采用同體自身左右對比，左側(cè)給予受試品0.5mL，右側(cè)給予等量生理鹽水作為對照。觀察時間設(shè)為14天，清除受試樣品后的1h、24h、48h、72h分別觀察受試部位的皮膚反應(yīng)。
2.3評價：參照《化學(xué)藥物刺激性、過敏性和溶血性研究技術(shù)指導(dǎo)原則》(國藥監(jiān)注[2005]106號)中的評分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評價
2.4結(jié)果：受試品對完整皮膚與損傷皮膚的平均反應(yīng)分值無明顯差異，具體評分如下：
家兔皮膚刺激性試驗(yàn)結(jié)果
2.5評價：根據(jù)皮膚刺激評價標(biāo)準(zhǔn)，表明受試物(本發(fā)明產(chǎn)品)對家兔完整皮膚與受損皮膚無刺激性，符合皮膚刺激試驗(yàn)要求。
實(shí)施例13抗菌試驗(yàn)(最小抑菌濃度的測定)
1材料：氟康唑，本發(fā)明漱口液(實(shí)施例1產(chǎn)品)；菌株ATCC90028，菌株ATCC6258。
2方法：制備菌懸液和藥物貯備液，在無菌有蓋藥敏板每行1-10號孔10級倍比稀釋分別加入藥液100μL，并加入白色念珠菌和克柔念珠菌菌液100μL，11號孔不加藥液，只加菌懸液及RPMI1640液體培養(yǎng)基各100μL，12號孔不加菌懸液只加200μL RPMI1640液體培養(yǎng)基，用氟康唑做質(zhì)量控制，放置35℃恒溫箱中孵育48h。每種菌株做一個復(fù)孔，整體試驗(yàn)平行操作3次。
3結(jié)果
3.1氟康唑?qū)TCC6258的MIC值為16.00-64.00μg/mL，對ATCC90028的MIC值為0.25-2.00μg/mL，此結(jié)果在NCCLS M27-A2的MIC值范圍。
3.2 2種藥物對ATCC6258和ATCC90028的MIC值取值范圍如下表所示。
表1 2種藥物對不同菌株的MIC范圍
實(shí)施例14穩(wěn)定性試驗(yàn)
采用經(jīng)典恒溫法考察制霉菌素漱口液的穩(wěn)定性。分別在55℃、60℃、65℃、70℃的溫度中做加速試驗(yàn)，建立lgC-t回歸方程，結(jié)果回歸方程線性關(guān)系良好，說明制霉菌素漱口液人分解變化過程符合一級動力學(xué)方程。結(jié)果如下：
經(jīng)典恒溫法試驗(yàn)結(jié)果
以lgK-1/T作直線回歸，表明線性關(guān)系良好，結(jié)果如下
不同溫度下制霉素含漱液反應(yīng)速度常數(shù)K值
根據(jù)Arrhenius規(guī)律推算制霉菌素漱口液有效期，在冷處貯藏即將T＝277(4℃)回歸方程lgK＝-4167.9/T+10.9135，得k4℃＝7.359×10-5,由此可得4℃的有效期t0.9＝0.1054/k4℃＝60d，即制霉菌素含漱液在冷處貯藏時，有效期預(yù)測為2個月。