本發(fā)明屬于中藥制劑技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，涉及一種蒲地藍口服液及制備方法和用途。

背景技術(shù)：

蒲地藍由蒲公英、板藍根、地丁、黃芩四味中藥組成，功效為清熱解毒、抗炎消腫。

蒲公英全草含蒲公英甾醇，膽堿，菊糖，咖啡酸，果膠，蒲公英醇，β-香樹脂醇，豆甾醇，β-谷甾醇，蒲公英賽醇，蒲公英素，蒲公英苦素和維生素a、b、c等。其中，蒲公英的有效成分包括咖啡酸和菊苣酸。

板藍根含靛藍，靛玉紅，蒽醌類，β-谷甾醇，γ-谷甾醇以及多種氨基酸：精氨酸，谷氨酸，酪氨酸，脯氨酸，纈氨酸，γ-氨基丁酸。還含黑芥子甙，靛甙，色胺酮，1-硫氰酸-2-羥基丁-3-烯，表告伊春，腺甙，棕櫚酸，蔗糖和含有12％氨基酸的蛋白多糖。

苦地丁為罌粟科植物地丁紫堇的全草。全草含多種生物堿：消旋的和右旋的紫董醇靈堿，乙酰紫堇醇靈堿，四氫黃連堿，原阿片堿，右旋異紫堇醇靈堿，四氫刻葉紫堇明堿，二氫血根堿，乙酰異紫堇醇靈堿，11-表紫堇醇靈堿，紫堇文堿，比枯枯靈堿，12-羥基紫堇醇靈堿，斯氏紫堇堿，碎葉紫堇堿，大棗堿，去甲大棗堿，異波爾定堿，右旋地丁紫堇堿，右旋13-表紫堇醇靈堿。

黃芩主要含黃酮類化合物：黃芩苷為黃芩的主要有效成分，分子式為c21h18o11，分子量為446.35，為黃色結(jié)晶，熔點223℃或淡黃色針晶(甲醇)。

已有蒲地藍消炎片收載于《中華人民共和國藥品標準中藥成方制劑第三冊》，蒲地藍口服液收載于《中華人民共和國藥典》2015版一部。基于這四種中藥的獨特優(yōu)點，目前市面上多有蒲地藍口服液、消炎片、消炎膠囊等劑型，使用后副作用小，安全性高。例如中國專利申請?zhí)枮?006100837064的專利申請文件公開了一種消炎藥物及其制備方法，涉及蒲地藍口服液及其制備方法；中國專利申請?zhí)枮?005101080080的專利申請文件公開了蒲地藍消炎顆粒的制備方法及該方法制備的蒲地藍消炎顆粒；中國專利申請?zhí)枮?015104294371的專利申請文件公開了蒲地藍消炎片的制備方法。

市售蒲地藍在臨床上使用，雖然療效確切，但療效發(fā)揮緩慢，主要是因為市售蒲地藍中的有效成分濃度低，藥效還有待進一步提高。雖然通過濃縮可以提高蒲地藍口服液中的有效成分含量，但是同樣會增加其中的雜質(zhì)含量，帶來一定的副作用。

《中國藥典》2015版第四部規(guī)定：口服液系指原料藥物溶解于適宜溶劑中制成的供口服的澄清液體制劑。單劑量灌裝的合劑也可稱“口服液”。除另有規(guī)定外，含蔗糖量一般不高于20％(g/ml)。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

1.要解決的問題

針對現(xiàn)有的蒲地藍中藥存在有效成分低、口感差的問題，本發(fā)明提供一種蒲地藍口服液及制備方法和用途，有效掩蓋藥物不良氣味，制成口服液劑型。本發(fā)明改善了提取方式，使提取時間大大縮短，主要有效成分的含量顯著提高，減少服藥劑量。通過用合理的工藝方法提取四味藥物，最大限度保持和提純藥物活性成分，從而開發(fā)療效更強的藥物，是本發(fā)明主旨之一。本發(fā)明在有效成分含量以及藥物療效方面，比較市售蒲地藍口服液，具有優(yōu)異效果。

2.技術(shù)方案

為了解決上述問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

一種蒲地藍口服液，包括苦地丁、板藍根、蒲公英和黃芩的提取物，還包括蔗糖，所述的提取物由苦地丁1～3重量份，板藍根2～4重量份，蒲公英6～9重量份和黃芩2～4重量份經(jīng)提取濃縮得到；加入蔗糖，使制劑中蔗糖含量為10％～20％(g/ml)，提取物中有效成分包括黃芩苷，口服液中黃芩苷的含量大于10mg/ml；雜質(zhì)含量不超過7％。

更進一步地，提取物中有效成分還包括菊苣酸和咖啡酸，口服液中菊苣酸的含量大于1mg/ml，咖啡酸的含量大于0.1mg/ml。

更進一步地，所述的雜質(zhì)包括蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、色素、原兒茶酸、槲皮素、木犀草素等。

更進一步地，還包括芳香劑和防腐劑，芳香劑的質(zhì)量含量為0.2％～1％，防腐劑的質(zhì)量含量為0.01％～0.5％，其中芳香劑包括杏仁香精、草莓香精、甜橙香精、荔枝香精、蘋果香精、牛奶香精、芒果香精、檸檬香精、巧克力香精，桔子香精中的一種或幾種，防腐劑包括山梨酸、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉、乳酸鈉、羥苯甲酸乙酯、檸檬酸鈉中的一種或幾種。

更進一步地，還包括甜味劑，質(zhì)量含量為0.2％～25％，甜味劑為常用的可食用添加劑，包括高倍甜味劑和低倍甜味劑，高倍甜味劑為阿斯巴甜、甜菊糖苷、安賽蜜、甜蜜素、三氯蔗糖中的一種或幾種；低倍甜味劑為山梨醇、木糖醇、果糖、蜂蜜、麥芽糖、淀粉糖、乳糖、蔗糖中的一種或幾種。

本發(fā)明的口服液制劑中還可以包括鹽、糊精、麥芽糊精、甘油、cmc-na中的一種或幾種，含量為3％～10％。

上述的一種蒲地藍口服液的制備方法，包括如下步驟：

<1>制備苦地丁、板藍根和蒲公英的提取物，包括如下步驟：

<a>蒲公英和板藍根用15～20倍水煎煮提取，提取兩次，每次1-2h，加入明膠1-5％，靜置，過濾取上清；

<b>苦地丁用15～20倍水煎煮兩次，每次1-2h；

<c>將步驟<a>和步驟<b>的提取液混合，濃縮，加入殼聚糖至0.1-2％，調(diào)節(jié)ph至1-2，靜置，過濾；

<2>制備黃岑的提取物，包括如下步驟：

<d>黃芩用乙醇提取得到醇提取物；

<e>所得到的醇提取物加入明膠至1-5％，過濾，濾液加入殼聚糖0.1-2％，調(diào)ph至1-2，析出物即為黃芩提取物，所述的黃芩提取物為黃芩苷；

<3>將苦地丁、板藍根和蒲公英的提取物與黃岑的提取物混合，濃縮至比重為0.7～1.3(g/ml)，加入蔗糖使制劑中蔗糖含量為10％～20％(g/ml)。

更進一步地，所述步驟<d>中用8～10倍50％～70％的乙醇水溶液于40-60℃條件下超聲波提取得醇提取物。

上述的一種蒲地藍口服液的用途，具有清熱解毒或抗炎消腫的藥物。

更進一步地，用于制備治療腮腺炎、咽炎、扁桃體炎或癤腫的藥物。

上述的蒲地藍口服液在用于制備兒童型清熱解毒或抗炎消腫的藥物中的應用。

3.有益效果

相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：

(1)本發(fā)明的蒲地藍口服液為復方中藥安全性高，效果顯著；本方中，黃芩具有清熱燥濕、瀉火清毒的功效；蒲公英具有清熱解毒，清肝明目的功效；苦地丁具有清熱解毒，活血消腫的功效；板藍根具有清熱解毒、涼血利咽的功效，四藥匹配，具有良好的清熱解毒、抗病毒及抗菌作用的功效；

(2)本發(fā)明克服蒲地藍中藥口感差的不足，通過添加有矯味作用的輔料，改善了口味，有效掩蓋藥物不良氣味，制成口服液劑型，使服藥不是難事；克服已有蒲地藍片劑和膠囊劑等非水溶性劑型吸收差、口服液劑型有效成分含量低的缺陷，提供一種便于吸收、有效成分高的劑型；

(3)市售蒲地藍在臨床上使用，雖然療效確切，但療效發(fā)揮緩慢，藥效還有待進一步提高。本發(fā)明的蒲地藍口服液消炎活性提高，炎癥抑制率增強，用本發(fā)明的提取方法，使提取時間大大減少，有效成分顯著提高，其有效成分包括黃芩苷、菊苣酸、咖啡酸，本發(fā)明提取物中黃芩苷的含量大于10mg/ml，菊苣酸的含量大于1mg/ml，咖啡酸的含量大于0.1mg/ml，本方法黃芩直接選擇乙醇水溶液提取，在節(jié)約時間的同時，有效成分的提取率也大大增加，本發(fā)明的蒲地藍口服液與市售蒲地藍口服液相比，抗炎效果好，炎癥抑制率增強；比較于單純通過濃縮來提高有效物質(zhì)的含量，本方法不存在導致雜質(zhì)含量增大，藥物副作用增加等缺點；

(4)本方法采用乙醇水溶液提取黃芩苷，得到的黃芩苷的含量高，再通過加酸沉淀的方法，可以有效的除去雜質(zhì)成分，得到純度較高的黃芩苷；采用蒲公英和板藍根共同提取的方法，可以提高有效成分菊苣酸的含量；

(5)本發(fā)明蒲地藍口服液中的有效成分包括黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、芹菜素、菊苣酸、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、腺苷、表告依春等，這些均為該制劑的主要活性成分；除有效成分外，其余為該制劑的雜質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、色素、原兒茶酸、槲皮素、木犀草素等；本發(fā)明試驗中采用高效液相色譜儀對有效成分含量進行測定，采用考馬斯亮藍染色法和紫外分光光度計等對雜質(zhì)含量測定，雜質(zhì)含量不超過7％；

(6)現(xiàn)有的蒲地藍提取方法在提取之后進行醇沉這一步，雖然會提高藥品的澄清度，但有效成分會減少，而本發(fā)明中提供的提取方法則不存在這樣的問題，選用一定濃度的醇溶液，不僅可以增加提取率，還能抑制鞣質(zhì)等高分子雜質(zhì)的溶出，便于過濾純化。藥品澄清度高，而且有效成分含量高，使得提取的成本大大降低；

(7)對于制備方法而言，市售蒲地藍口服液采用水提、酸沉、過濾、堿溶的方法提取黃芩苷，蒲地藍消炎片、消炎膠囊、消炎顆粒等采用一半磨粉，另一半醇提的方法提取黃芩苷，這些方法缺點在于：其一，黃芩苷提取時若選用一定濃度的醇溶液，不僅可以增加提取率，還能抑制鞣質(zhì)等高分子雜質(zhì)的溶出，便于過濾純化，所以，比較水提方法，選擇醇提可增加提取率；其二，磨粉的黃芩原藥料不能完全溶于水，只適合片劑、膠囊劑等固體劑型，如果將原料粉碎進行提取，雖然可以增加黃芩苷的提取率，但同時也很容易造成提取罐過濾系統(tǒng)的堵塞等問題的出現(xiàn)；

(8)本發(fā)明改善了提取方式，使提取時間大大縮短，主要有效成分的含量顯著提高，減少服藥劑量；

(9)本發(fā)明的蒲地藍口服液劑型，相比較現(xiàn)有的蒲地藍制劑，尤其適合兒童服用。

附圖說明

圖1為本發(fā)明黃芩苷的標準曲線示意圖；

圖2為本發(fā)明菊苣酸的標準曲線示意圖；

圖3為本發(fā)明咖啡酸的標準曲線示意圖；

圖4為本發(fā)明中小鼠耳部腫脹程度的變化結(jié)果圖。

圖5為本發(fā)明蒲地藍口服液的液相圖譜，圖中，1代表腺苷；2代表表告依春；3代表咖啡酸；4代表菊苣酸；5代表黃芩苷；

圖6為市售蒲地藍口服液的液相圖譜，圖中，1代表腺苷；2代表表告依春；3代表咖啡酸；4代表菊苣酸；5代表黃芩苷。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明做進一步的說明，以下所述，僅是對本發(fā)明的較佳實施例而已，并非對本發(fā)明做其他形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以變更為同等變化的等效實施例。凡是未脫離本發(fā)明方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實質(zhì)對以下實施例所做的任何簡單修飾或等同變化，均落在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。

實施例1

黃芩提取工藝的研究

按表1-1、1-2、1-3試驗表進行試驗，以hplc的黃芩苷的峰高和峰面積為指標來比較最優(yōu)提取工藝。

一.實驗方法

按表1-1、1-2、1-3、1-4試驗表進行試驗，每組均為稱取黃芩10g，加乙醇回流提取，合并提取液，回收乙醇，濃縮，hplc進行檢測，分別對提取溫度、提取所用乙醇濃度、提取醇量、提取時間、ph、加入明膠量、加入殼聚糖量等條件進行對比優(yōu)化。

二.實驗過程

1.儀器與試藥：高效液相色譜儀(安捷倫公司)；甲醇為色譜純，水為up水，其它試藥均為分析純。

2.色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為甲醇-水-磷酸(44:56:0.2)；檢測波長為280nm，流速為0.8ml/min。

3.藥材溶液的制備：精密量取本品1ml，置于50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。精密量取5ml，置于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

4.測定法：分別精密吸取對照品溶液和各組供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，在上述色譜條件下進行測定，即得。

三.實驗結(jié)果

1.提取溫度和提取所用乙醇濃度試驗

表1-1提取溫度和提取所用乙醇濃度試驗

由以上試驗可以看出，對于峰面積和峰高分析：提取溫度p>0.05，沒有顯著性差異；提取方式p>0.05，沒有顯著性差異。由于提取溫度和提取乙醇濃度均無顯著性差異，所以，用50％～70％的乙醇水溶液于40-60℃條件下超聲波提取得醇提取物。

2.提取醇量和提取時間試驗

表1-2提取醇量和提取時間試驗

由以上試驗可以看出，對于峰面積和峰高分析：提取醇量p>0.05，沒有顯著性差異；提取時間p<0.05，有顯著性差異。所用提取醇量選擇8～10倍乙醇，提取時間為2h。

3.ph，加入明膠量，加入殼聚糖量試驗

表1-3ph，加入明膠量，加入殼聚糖量試驗

由表格對比得：ph在1～2對峰面積的影響不大，沒有顯著性差異；加入明膠在1-5％范圍內(nèi)對峰面積影響不大，沒有顯著性差異；加入殼聚糖在0.1-2％范圍對峰面積影響不大，沒有顯著性差異。所以，選擇條件為：加入明膠至1-5％，過濾，濾液加入殼聚糖0.1-2％，調(diào)ph至1-2，析出物即為黃芩提取物。

四.黃芩工藝確定

黃芩2～4份，用8～10倍50％～70％的乙醇水溶液于40-60℃條件下超聲波提取得醇提取物，每次2小時，合并濾液，過濾，濃縮，加入明膠至1-5％，過濾，濾液加入殼聚糖0.1-2％，調(diào)ph至1-2，析出物即為黃芩提取物。

蒲公英、地丁、板藍根提取工藝的研究

按表2-1、2-2試驗表進行試驗，以hplc的菊苣酸的峰高和峰面積為指標來比較最優(yōu)提取工藝。

一.實驗方法

按表2-1、2-2試驗表進行試驗，每組均為稱取蒲公英12.5g、板藍根4.7g、苦地丁3.125g，加水回流提取，合并提取液，濃縮，hplc進行檢測。

二.實驗過程

1.儀器與試藥：高效液相色譜儀(安捷倫公司)；乙腈為色譜純，水為up水，其它試藥均為分析純。

2.色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；流動相為乙腈-水-磷酸(15:85:0.2)；檢測波長為326nm，流速為0.8ml/min。

3.藥材溶液的制備：精密量取本品1ml，置20ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻，即得。

4.測定法：分別精密吸取對照品溶液和各組供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，在上述色譜條件下進行測定，即得。

三.實驗結(jié)果

1.提取水量和提取時間試驗

表2-1提取水量和提取時間試驗

由以上試驗可以看出，對于峰面積和峰高分析：提取水量p>0.05，無顯著性差異；提取時間p>0.05，無顯著性差異。由于提取水量和提取時間均無顯著性差異，所以蒲公英6～9份與板藍根2～4份混合用15～20倍水煎煮提取，提取兩次，每次1-2h，地丁1～3份用15～20倍水煎煮兩次，每次1-2h，兩者混合，過濾，濃縮。

2.加入明膠，加入殼聚糖，所調(diào)的ph試驗

表2-2加入明膠，加入殼聚糖，所調(diào)的ph試驗

由表格對比得：加入明膠在0.1-2％范圍對峰面積影響不大，沒有顯著性差異；ph在1～2對峰面積的影響不大，沒有顯著性差異；加入殼聚糖在0.1-2％范圍對峰面積影響不大，沒有顯著性差異。所以，選擇條件為：蒲公英和板藍根提取后加入明膠1-5％，靜置，過濾取上清；兩種提取液混合后濃縮，加入殼聚糖0.1-2％，調(diào)ph至1-2，靜置，過濾。

四.蒲公英、地丁、板藍根提取工藝確定

蒲公英6～9份與板藍根2～4份混合用15～20倍水煎煮提取，提取兩次，每次1-2h，加入明膠1-5％，靜置，過濾取上清；地丁1～3份用15～20倍水煎煮兩次，每次1-2h，兩者混合，過濾，濃縮，加入殼聚糖至0.1-2％，調(diào)節(jié)ph至1-2，靜置，過濾。

hplc測定蒲地藍中有效成分黃芩苷、菊苣酸、咖啡酸的含量

一.實驗過程

1.儀器與試藥：高效液相色譜儀(安捷倫公司)；乙腈、甲醇為色譜純，水為up水，其它試藥均為分析純。

2.色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；

黃芩苷的檢測條件為：流動相甲醇-水-三氟乙酸(44:56:0.2)；檢測波長為280nm，流速為0.8ml/min，柱溫為30℃，進樣量20μl。

菊苣酸的檢測條件為：流動相乙腈-水-三氟乙酸(22:78:0.2)；檢測波長為326nm，流速為0.8ml/min，柱溫為30℃，進樣量20μl。

咖啡酸的檢測條件為：流動相乙腈-水-三氟乙酸(9:91:0.2)；檢測波長為323nm，流速為0.8ml/min，柱溫為30℃，進樣量20μl。

3.對照品溶液的制備：

精密稱取黃芩苷標準品適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度為0.32mg/ml的對照品儲備液，梯度稀釋。黃芩苷標準溶液待配濃度：0mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.08mg/ml、0.16mg/ml、0.32mg/ml。

精密稱取菊苣酸標準品適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度為0.32mg/ml的對照品儲備液，梯度稀釋。菊苣酸標準溶液待配濃度：0mg/ml、0.0025mg/ml、0.005mg/ml、0.01mg/ml、0.02mg/ml、0.04mg/ml、0.08mg/ml、0.16mg/ml、0.32mg/ml。

精密稱取咖啡酸標準品適量，加甲醇制成質(zhì)量濃度為0.1mg/ml的對照品儲備液，梯度稀釋?？Х人針藴嗜芤捍錆舛龋?mg/ml、0.0015625mg/ml、0.003125mg/ml、0.00625mg/ml、0.0125mg/ml、0.025mg/ml、0.05mg/ml、0.1mg/ml。

4.藥材溶液的制備：比較本方法提取的蒲地藍與市售蒲地藍口服液及它們有效成分的含量測定。

測定黃芩苷藥材溶液的制備：精密量取1ml，置于50ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。精密量取5ml，置于10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

測定菊苣酸藥材溶液的制備：精密量取1ml，置20ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻，即得。

測定咖啡酸藥材溶液的制備：精密量取1ml，置20ml量瓶中，加70％乙醇至刻度，搖勻，即得。

5.測定法：分別精密吸取各標準品溶液和各組供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，在上述色譜條件下進行測定，即得。以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得回歸方程。

二.結(jié)果

1.黃芩苷含量計算

如圖1為黃芩苷標準曲線：y＝63447x+96.002(r²＝0.9994)，代入標準曲線得，本方法提取的蒲地藍含黃芩苷的量為0.15mg/ml，即每1ml本方法提取的蒲地藍并制成口服液后含黃芩苷13.8mg/ml，口服液中黃芩苷的含量大于10mg/ml。收載于《中華人民共和國藥典》2015版一部的蒲地藍口服液要求：每1ml含黃芩苷不低于6.0mg。與之比較，有效成分黃芩苷的含量大大增加。

2.菊苣酸含量計算

如圖2為菊苣酸標準曲線：y＝106854x-520.11(r²＝0.9927)，代入標準曲線得市售蒲地藍口服液中菊苣酸的含量為0.01mg/ml，本方法提取的蒲地藍口服液含菊苣酸的量為0.08mg/ml，即每1ml市售蒲地藍口服液含菊苣酸0.32mg/ml，每1ml本方法提取的蒲地藍口服液含菊苣酸1.64mg/ml。

3.咖啡酸含量計算

如圖3為咖啡酸標準曲線：y＝111154x+57.693(r²＝0.9998)，代入標準曲線得市售蒲地藍口服液中咖啡酸的含量為0.002mg/ml，本方法提取的蒲地藍口服液含咖啡酸的量為0.011mg/ml，即每1ml市售蒲地藍口服液含咖啡酸0.038mg/ml，每1ml本方法提取的蒲地藍口服液含咖啡酸0.212mg/ml。

實施例2

抗小白鼠急性炎癥藥理實驗研究

一.試驗材料

動物：24只icr小鼠，雄性，體重在25g左右

藥物：所制的口服液

二.試驗方法

健康小鼠24只，隨機分3組，每組8只：空白對照、購買市售蒲地藍口服液、本實驗室所制蒲地藍口服液。

造成急性炎癥模型前6h和1h分別給藥一次，每次空白對照組和給藥組小白鼠分別灌胃0.21ml/10g體重生理鹽水和相應藥液。

實驗小白鼠分別于給藥后1h，先測定小鼠右耳廓的厚度，然后在右耳廓滴入0.07ml二甲苯，每隔15min用游標卡尺測定小鼠耳朵腫脹程度，以滴入二甲苯后耳朵的厚度減去滴入前耳朵的厚度的差值作為炎性腫脹度指標，并以空白對照組炎癥腫脹度為基準，計算各給藥組炎癥抑制率。

三.試驗結(jié)果

圖4為用游標卡尺測定小鼠耳部腫脹程度的變化；表5-1為本發(fā)明口服液對二甲苯致小白鼠耳部急性炎癥的炎性腫脹度指標及各給藥組15min和30min的炎癥抑制率。由圖4和表5-1可知，對二甲苯所致小白鼠耳部急性炎癥，本發(fā)明口服液有明顯的抗炎效果，與空白對照組相比，有顯著性差異，并且與市售蒲地藍口服液相比，炎癥抑制率增強。

表5-1本發(fā)明口服液對二甲苯致小白鼠耳部急性炎癥的炎性腫脹度指標及各給藥組炎癥抑制率

注：同空白對照組相比，t檢驗，*p<0.05，**p<0.01，n＝8

實施例3

蒲地藍口服液

蒲公英100g，地丁25g，板藍根37.6g，黃芩37.6g，蔗糖40g。

<1>蒲公英100g，板藍根37.6g混合加15倍水煎煮兩次，加入明膠1％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，取上清。

<2>地丁25g加15倍水煎煮兩次，冷卻至室溫，過濾。

<3>提取液<1>與<2>兩者混合，過濾，濃縮至密度為1.1，加入殼聚糖至0.1％，調(diào)節(jié)ph至2，靜置，過濾，除去沉淀。

<4>黃芩37.6g用8倍量50％乙醇，于40℃超聲波提取醇提兩次，每次2h，提取液過濾除雜，濾液中加入明膠1％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，過濾取上清，濾液加入殼聚糖2％，鹽酸調(diào)ph至2，靜置12h，析出物即為黃芩提取物。

<5>將黃芩提取物加入<3>所得濃縮液中，混合均勻，定容至200ml，得到中藥提取物濃縮液。

<6>將中藥濃縮液中加入40g的蔗糖，加熱使其溶解，攪拌混勻，滅菌30min，即得。

實施例4

蒲地藍口服液

蒲公英75g，地丁12.5g，板藍根25g，黃芩25g，蔗糖30g。

<1>蒲公英75g，板藍根25g混合加20倍水煎煮兩次，加入明膠5％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，取上清。

<2>地丁12.5g加20倍水煎煮兩次，冷卻至室溫，過濾。

<3>提取液<1>與<2>兩者混合，過濾，濃縮至密度為0.9，加入殼聚糖至0.1％，調(diào)節(jié)ph至2，靜置，過濾，除去沉淀。

<4>黃芩25g用10倍量60％乙醇，于60℃超聲波提取醇提兩次，每次2h，提取液過濾除雜，加入明膠5％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，過濾取上清，濾液加入殼聚糖0.1％，鹽酸調(diào)ph至1，靜置12h，析出物即為黃芩提取物。

<5>將黃芩提取物加入<3>所得濃縮液中，混合均勻，定容至250ml，得到中藥提取物濃縮液。

<6>將中藥濃縮液中加入30g的蔗糖，加熱使其溶解，攪拌混勻，滅菌30min，即得。

實施例5

蒲地藍口服液

蒲公英112.5g，地丁37.5g，板藍根50g，黃芩50g，蔗糖20g。

<1>蒲公英112.5g，板藍根50g混合加15倍水煎煮兩次，加入明膠3％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，取上清。

<2>地丁37.5g加15倍水煎煮兩次，冷卻至室溫，過濾。

<3>提取液<1>與<2>兩者混合，過濾，濃縮至密度為1.1，加入殼聚糖至1％，調(diào)節(jié)ph至1，靜置，過濾，除去沉淀。

<4>黃芩50g用8倍量50％乙醇，于60℃超聲波提取醇提兩次，每次2h，提取液過濾除雜，加入明膠5％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，過濾取上清，濾液加入殼聚糖0.1％，鹽酸調(diào)ph至1，靜置12h，析出物即為黃芩提取物。

<5>將所提黃芩苷加入<3>所得濃縮液中，混合均勻，定容至200ml，得到中藥提取物濃縮液。

<6>將中藥濃縮液中加入20g的蔗糖，加熱使其溶解，攪拌混勻，滅菌30min，即得。

實施例6

蒲地藍口服液

蒲公英75g，地丁12.5g，板藍根25g，黃芩25g，蔗糖40g，蘋果香精1g，山梨醇1g，檸檬酸鈉0.4g。

<1>蒲公英75g，板藍根25g混合加20倍水煎煮兩次，加入明膠3％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，取上清。

<2>地丁12.5g加20倍水煎煮兩次，冷卻至室溫，過濾。

<3>提取液<1>與<2>兩者混合，過濾，濃縮至密度為1.0。

<4>黃芩25g用10倍量70％乙醇，于40℃超聲波提取醇提兩次，每次2h，提取液過濾除雜，加入明膠5％，攪拌1h，至其完全溶解，靜置，過濾取上清，濾液加入殼聚糖2％，鹽酸調(diào)ph至1，靜置12h，析出物即為黃芩提取物。

<5>將黃芩提取物加入<1>所得濃縮液中，混合均勻，定容至200ml，得到中藥提取物濃縮液。

<6>將中藥濃縮液中加入40g的蔗糖，加熱使其溶解，加入蘋果香精1g，山梨醇1g，檸檬酸鈉0.4g，攪拌混勻，滅菌30min，即得。

本實施例中的蘋果香精可以用杏仁香精、草莓香精、甜橙香精等常用芳香劑替換，芳香劑在糖漿劑中的質(zhì)量含量范圍在0.2％～1％之間均可。蔗糖和山梨醇可以用常用的可食用高倍甜味劑或低倍甜味劑替換，高倍甜味劑可以為阿斯巴甜、甜菊糖苷等，低倍甜味劑可以為麥芽糖、木糖醇、蜂蜜等，當糖漿劑中的甜味劑為高倍甜味劑時，甜味劑在糖漿劑中的質(zhì)量含量低，例如，可以是0.2％；當糖漿劑中的甜味劑為低倍甜味劑時，甜味劑在糖漿劑中的質(zhì)量含量高，例如，可以是25％。檸檬酸鈉作為防腐劑可以采用常用的山梨酸、山梨酸鉀、脫氫乙酸鈉等替換，質(zhì)量含量范圍在0.01％～0.5％之間均可。

實施例8

本發(fā)明蒲地藍雜質(zhì)研究

本發(fā)明蒲地藍口服液中的有效成分有黃芩苷、黃芩素、漢黃芩素、芹菜素、菊苣酸、咖啡酸、綠原酸、阿魏酸、紫堇靈、乙酰紫堇靈、腺苷、表告依春等，均為該制劑的主要活性成分。除有效成分外，其余為該制劑的雜質(zhì)，包括蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、色素、原兒茶酸、槲皮素、木犀草素等。

本發(fā)明試驗中采用高效液相色譜儀對有效成分含量進行測定，由各個峰的峰高和峰面積可以看出有效成分及雜質(zhì)的含量多少。步驟同實施例2。

圖5為本發(fā)明蒲地藍口服液的液相圖譜。其中有效成分，例如：峰4為菊苣酸，峰面積為5953.59，峰高為123.85，此峰占總峰面積的9.50％；峰5為黃芩苷，峰面積為39159.10，峰高為613.21，此峰占總峰面積的62.45％。

圖6為市售蒲地藍口服液的液相圖譜。其中有效成分，例如：峰4為菊苣酸，峰面積為1527.84，峰高為31.93，此峰占總峰面積的4.28％；峰5為黃芩苷，峰面積為2.6358.00，峰高為406.33，此峰占總峰面積的53.97％。

對比兩張圖可以看出，本發(fā)明有效成分含量高。

并且，由考馬斯亮藍染色法和紫外分光光度計等對雜質(zhì)含量測定的結(jié)果得到，本發(fā)明蛋白雜質(zhì)含量為220ug/ml左右，市售蒲地藍蛋白雜質(zhì)含量為300ug/ml左右。

結(jié)合液相圖譜和紫外分光光度計等對雜質(zhì)含量測定的結(jié)果得出，本發(fā)明測定出的雜質(zhì)含量不超過7％。

已經(jīng)根據(jù)優(yōu)選實施例對本發(fā)明作了描述。應當理解的是前面的描述和實施例僅僅為了舉例說明本發(fā)明而已。在不偏離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以設(shè)計出本發(fā)明的多種替換方案和改進方案，其均應被理解為在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。