本發(fā)明涉及一種生物醫(yī)藥口服劑及其制備方法，特別是涉及一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

隨著生物技術(shù)的迅猛發(fā)展，蛋白多肽類藥物在人類疾病治療中的作用日益突出。盡管此類藥物上市種類和使用頻率在不斷增加，但是受限于其較大的分子尺寸，很難從腸道上皮細(xì)胞滲透吸收（吸收屏障），胃腸道消化酶極易破壞其結(jié)構(gòu)使其失去活性（酶屏障），導(dǎo)致口服生物利用度很低，所以臨床給藥途徑一般只能注射給藥，如治療糖尿病的首選藥胰島素，這給患者帶來了極大的痛苦和不便。

近年來，各國學(xué)者一直致力于克服大分子口服的吸收屏障和酶屏障，通常的研究策略有應(yīng)用吸收促進(jìn)劑、酶抑制劑、生物粘附材料以及聚合物材料作為藥物載體制成的納米粒、脂質(zhì)體、水凝膠、微囊等。這些手段在一定程度上促進(jìn)了胰島素的口服吸收，但程度較為有限。這主要是因為大多數(shù)人忽視了腸道內(nèi)另一重要的生物屏障粘液層。粘液層其實也屬于吸收屏障和酶屏障的范疇，將其單獨討論，是因為腸道粘液層往往是導(dǎo)致口服給藥系統(tǒng)生物利用度低的關(guān)鍵因素。粘液層可以阻止大部分的藥物載體接近上皮細(xì)胞，傳統(tǒng)的生物粘附材料雖然可以延長藥物在腸道的滯留時間，但大部分載體都被粘液層所捕獲，導(dǎo)致藥物在到達(dá)吸收部位前釋放，在消化酶的作用下發(fā)生降解而導(dǎo)致生物利用度降低。因此，如果藥物載體可以減少與粘液層的作用而快速擴(kuò)散至上皮細(xì)胞，就可以減少藥物的擴(kuò)散距離和降解損失，這對生物大分子藥物口服給藥系統(tǒng)的設(shè)計來說意義重大。

justinhanes等（adv.mater.24(2012)3887-3894；angew.chem.int.ed.50(2011)2597-2600.）發(fā)現(xiàn)一種對粘液具有穿透能力的納米藥物載體（mucus-penetratingparticles，mpp），該載體可以快速穿過粘液層屏障，直達(dá)粘膜部位吸收，研究者設(shè)計了一種在聚合物載體（plga、pcl等）表面軛合低分子量的peg的方法，發(fā)現(xiàn)納米粒子軛合peg后在粘液層中的擴(kuò)散速度提高了約1000倍，特別是對于較大粒子（直徑200-500nm）而言，其擴(kuò)散系數(shù)僅比在水中低4-6倍。peg包衣后，僅有0.5%的納米粒子殘留在粘液層中，而未包衣粒子，則分別有32%（200nm）和45%（500nm）滯留在粘液層。這不僅可以有效地減少粘液層對納米載體的清除和滯留，而且可以使藥物更接近于吸收部位，降低藥物被酶降解的幾率。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑及其制備方法，本發(fā)明以介孔二氧化硅泡沫為載體材料，對其表面進(jìn)行peg修飾，以到達(dá)穿透粘液層的目的。納米藥物載體裝入腸溶膠囊可以保證現(xiàn)胰島素在腸道中的釋放，免受胃酸及消化酶破壞，吸收促進(jìn)劑可以打開腸道緊密連接，或幫助藥物通過細(xì)胞旁路吸收。同時克服了胰島素口服的吸收屏障、酶屏障和粘液屏障，能夠大幅度提高藥物的口服生物利用度。

本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑，所述口服劑包括載體材料和載體材料包載的藥物，其中載體材料為經(jīng)甲氧基聚乙二醇（mpeg）修飾的介孔二氧化硅泡沫（mpeg-mcf）；藥物為胰島素和吸收促進(jìn)劑組成的復(fù)合物；吸收促進(jìn)劑為膽酸鹽、脂肪酸鹽或細(xì)胞穿膜肽中的一種或幾種；介孔二氧化硅泡沫（mcf）以聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物（p123）作為模板劑，以正硅酸乙酯（teos）作為硅源，以1,3,5-三甲基苯（tmb）為擴(kuò)孔劑合成所得，其孔徑在2-50nm，平均粒徑不超過1000nm；經(jīng)peg修飾的介孔二氧化硅泡沫（mpeg-mcf）經(jīng)單甲氧基聚乙二醇衍生物的末端羥基與3-(三乙氧基甲硅烷基)丙基琥珀酸酐（tespic）中的異氰酸基發(fā)生反應(yīng)后再共價連接到mcf上；吸收促進(jìn)劑為膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、癸酸鈉、細(xì)胞穿膜肽tat（氨基酸序列g(shù)rkkrrqrrrppq）和penetratin（氨基酸序列rqikiwfqnrrmkwkk）中的一種或幾種。

所述的一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑及其制備方法，所述的單甲氧基聚乙二醇衍生物的分子量為1000～20000。

一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑制備方法，所述方法包括以下步驟：首先將胰島素和吸收促進(jìn)劑溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg-mcf真空活化12h后，按照比例分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥6～24h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心或過濾方式將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥后，以顆粒形式填裝入腸溶膠囊即得。

所述的一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑制備方法，所述胰島素與所述的吸收促進(jìn)劑的摩爾比為1:1～50；所述的胰島素與載體材料mpeg-mcf的質(zhì)量比為1:1～20。

所述的一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑制備方法，所述真空活化溫度為室溫，真空度為5～50pa。

所述的一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑制備方法，所述冷凍干燥時，納米藥物載體中需加入凍干保護(hù)劑，凍干保護(hù)劑為葡萄糖、海藻糖、甘露醇中的一種或幾種。

所述的一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服劑制備方法，所述凍干保護(hù)劑用量為2～10%。

本發(fā)明的優(yōu)點與效果是：

本發(fā)明以介孔二氧化硅泡沫為載體材料，對其表面進(jìn)行peg修飾，以到達(dá)穿透粘液層的目的。納米藥物載體裝入腸溶膠囊可以保證現(xiàn)胰島素在腸道中的釋放，免受胃酸及消化酶破壞，吸收促進(jìn)劑可以打開腸道緊密連接，或幫助藥物通過細(xì)胞旁路吸收。同時克服了胰島素口服的吸收屏障、酶屏障和粘液屏障，能夠大幅度提高藥物的口服生物利用度。

附圖說明

圖1為本發(fā)明中實施例一制備的mpeg-mcf載體的掃描電鏡照片；

圖2為本發(fā)明中實施例一制備的mpeg-mcf載體的透射電鏡照片；

圖3為本發(fā)明中實施例一制備的mpeg-mcf載體中mpeg分子量對胰島素體外釋放的影響。

具體實施方式

下面結(jié)合實施例對本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。

本發(fā)明包括載體材料和所述載體材料包載的藥物，其中載體材料為經(jīng)甲氧基聚乙二醇（mpeg）修飾的介孔二氧化硅泡沫（mpeg-mcf）；藥物為胰島素和吸收促進(jìn)劑組成的復(fù)合物；所述的吸收促進(jìn)劑為膽酸鹽、脂肪酸鹽或細(xì)胞穿膜肽中的一種或幾種。介孔二氧化硅泡沫（mcf）是以聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物（p123）作為模板劑，以正硅酸乙酯（teos）作為硅源，以1,3,5-三甲基苯（tmb）為擴(kuò)孔劑合成所得，其孔徑在2-50nm，平均粒徑不超過1000nm。優(yōu)選的，經(jīng)peg修飾的介孔二氧化硅泡沫（mpeg-mcf）是經(jīng)單甲氧基聚乙二醇衍生物的末端羥基與3-(三乙氧基甲硅烷基)丙基琥珀酸酐（tespic）中的異氰酸基發(fā)生反應(yīng)后再共價連接到mcf上，所述的單甲氧基聚乙二醇衍生物的分子量為1000～20000。優(yōu)選的，吸收促進(jìn)劑為膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、癸酸鈉、細(xì)胞穿膜肽tat（氨基酸序列g(shù)rkkrrqrrrppq）和penetratin（氨基酸序列rqikiwfqnrrmkwkk）中的一種或幾種。

本發(fā)明還提供了一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服制劑的制備方法，包括以下步驟：

首先將胰島素和吸收促進(jìn)劑溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg-mcf真空活化12h后，按照一定比例分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥6～24h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心或過濾方式將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥后，以顆粒形式填裝入腸溶膠囊即得。胰島素與所述的吸收促進(jìn)劑的摩爾比為1:1～50；胰島素與載體材料mpeg-mcf的質(zhì)量比為1:1～20。真空活化溫度為室溫，真空度為5～50pa。冷凍干燥時，納米藥物載體中需加入凍干保護(hù)劑，所述的凍干保護(hù)劑為葡萄糖、海藻糖、甘露醇中的一種或幾種，用量為2～10%。

下面進(jìn)一步說明：

本發(fā)明提供了一種具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服制劑，包括載體材料和所述載體材料包載的藥物，其中載體材料為經(jīng)甲氧基聚乙二醇（mpeg）修飾的介孔二氧化硅泡沫（mpeg-mcf）；藥物為胰島素和吸收促進(jìn)劑組成的復(fù)合物；吸收促進(jìn)劑為膽酸鹽、脂肪酸鹽或細(xì)胞穿膜肽中的一種或幾種。

按照本發(fā)明，首先制備載體材料mcf，再進(jìn)行peg修飾。

介孔二氧化硅泡沫（mcf）作為口服蛋白類載體材料具有載藥量高、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、生物相容性好等特點，到達(dá)腸道后能夠較好的控制藥物的釋放，從而更好地發(fā)揮藥效。

mcf是以聚環(huán)氧乙烷-聚環(huán)氧丙烷-聚環(huán)氧乙烷三嵌段共聚物（p123）作為模板劑，以正硅酸乙酯（teos）作為硅源，以1,3,5-三甲基苯（tmb）為擴(kuò)孔劑合成所得，優(yōu)選按照以下方法制備：

在室溫條件下，取適量表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）和tmb，其中，所述p123和ctab的摩爾比為1:1～10，更優(yōu)選為1:1～5；所述的p123與tmb的摩爾比為1:2～50，更優(yōu)選為1:10～30?；旌弦豪^續(xù)攪拌一段時間后加入適量的teos，然后攪拌24h，其中，所述的p123與teos的摩爾比為1:10～100，更優(yōu)選為1:30～80。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。通過調(diào)節(jié)p123和tmb的用量及其他反應(yīng)條件可以獲得孔徑在5-30nm間可調(diào)的，平均粒徑不超過1000nm的介孔二氧化硅納米材料。

經(jīng)peg修飾的介孔二氧化硅泡沫（mpeg-mcf）的合成，具體包括以下步驟：

mpeg-mcf的合成通過兩步反應(yīng)過程：（1）通過mpeg的末端羥基與3-(三乙氧基甲硅烷基)丙基琥珀酸酐（tespic）中的異氰酸基發(fā)生反應(yīng)合成peg化的硅烷（mpegxk–silanes）；（2）mpegxk–silanes通過硅醇基共價連接到mcf的表面。具體步驟如下：

（1）取完全干燥的mpeg適量，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，優(yōu)選在60-80℃，更優(yōu)選在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入適量的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。其中，所述的mpeg與tespic加入的摩爾比為1:0.5～2，更優(yōu)選為1:1。

（2）取適量mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes適量溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。其中，所述的mcf與mpegxk-silanes的加入質(zhì)量比為1：1～10，更優(yōu)選為1:2～5。

本發(fā)明所用藥物為胰島素，指任何天然存在的或重組的胰島素，例如，胰島素類似物和衍生物。可以使用來自任何合適物種的胰島素，諸如人、豬、牛、狗、羊。在優(yōu)選的實施方案中，胰島素是豬胰島素。

本發(fā)明對所述吸收促進(jìn)劑為膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、癸酸鈉、細(xì)胞穿膜肽tat和penetratin中的一種或幾種。吸收促進(jìn)劑的來源沒有特殊限制，均可以從市場上購得。

具有腸道粘液穿透能力的胰島素口服制劑的制備方法，包括以下步驟：

首先將胰島素和膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、癸酸鈉、細(xì)胞穿膜肽tat和penetratin中的一種或幾種溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg-mcf真空活化12h后，按照一定比例分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥6～24h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心或過濾方式將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥后，以顆粒形式填裝入腸溶膠囊即得。

所述的胰島素與所述的吸收促進(jìn)劑的摩爾比為1:1～50；所述的胰島素與載體材料mpeg-mcf的質(zhì)量比為1:1～20。

所述的真空活化溫度為室溫，真空度為5～50pa。

所述的冷凍干燥時，納米藥物載體中需加入凍干保護(hù)劑，所述的凍干保護(hù)劑為葡萄糖、海藻糖、甘露醇中的一種或幾種，用量為2～10%。

為了進(jìn)一步說明本發(fā)明，以下結(jié)合實施例對本發(fā)明提供的口服制劑及其制備方法進(jìn)行詳細(xì)描述。

實施例1

（1）載體材料合成

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.02mol和tmb0.1mol。混合液繼續(xù)攪拌一段時間后加入0.3mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.05mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取50mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes300mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。對mpeg2000-mcf進(jìn)行掃描電鏡和透射電鏡觀察，結(jié)果見圖1和2。

通過掃描電鏡我們可以觀察到載體的介觀結(jié)構(gòu)，呈珊瑚狀的結(jié)構(gòu)存在，這與文獻(xiàn)中所報道是一致的。透射電鏡照片顯示，載體的骨架結(jié)構(gòu)規(guī)整，具有三維互通立方結(jié)構(gòu)，孔徑較大的球形孔之間由孔徑較小的窗口孔相互鏈接。其平均粒徑在500nm左右，經(jīng)bet法測定平均孔徑約15.6nm。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和膽酸鈉20mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf真空活化12h后，各取80mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

通過hplc法對藥物在不同分子量mpeg修飾的載體中的體外釋放度進(jìn)行測定，結(jié)果見圖3，發(fā)現(xiàn)mpeg的修飾與否及分子量對胰島素的體外釋放影響較小。

實施例2

（1）載體材料合成

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.03mol和tmb0.12mol?；旌弦豪^續(xù)攪拌一段時間后加入0.25mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.1mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取100mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes500mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和膽酸鈉20mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg5000-mcf真空活化12h后，取100mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以5%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

實施例3

（1）載體材料合成

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.01mol和tmb0.05mol。混合液繼續(xù)攪拌一段時間后加入0.2mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.05mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取50mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes400mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和脫氧膽酸鈉15mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg2000-mcf真空活化12h后，取100mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

實施例4

（1）載體材料合成

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.02mol和tmb0.08mol?；旌弦豪^續(xù)攪拌一段時間后加入0.2mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.2mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取80mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes300mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和癸酸鈉20mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg2000-mcf真空活化12h后，取80mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

實施例5

（1）載體材料合成

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.04mol和tmb0.16mol?；旌弦豪^續(xù)攪拌一段時間后加入0.4mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.05mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取100mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes500mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和癸酸鈉20mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg10000-mcf真空活化12h后，取200mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

實施例6

（1）載體材料合成

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.02mol和tmb0.1mol。混合液繼續(xù)攪拌一段時間后加入0.2mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.1mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取100mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes400mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和細(xì)胞穿膜肽tat20mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg2000-mcf真空活化12h后，取100mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

實施例7

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.03mol和tmb0.12mol?；旌弦豪^續(xù)攪拌一段時間后加入0.2mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.05mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取100mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes300mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和細(xì)胞穿膜肽tat40mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg2000-mcf真空活化12h后，取100mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

實施例8

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.02mol和tmb0.16mol?；旌弦豪^續(xù)攪拌一段時間后加入0.3mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.05mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取100mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes500mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和細(xì)胞穿膜肽penetratin20mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg2000-mcf真空活化12h后，取120mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。

實施例9

在室溫條件下，取0.004mol的表面活性劑p123溶于2mol/l的鹽酸溶液（80ml）中，攪拌溶解后，加入十六烷基三甲基溴化銨（ctab）0.012mol和tmb0.1mol。混合液繼續(xù)攪拌一段時間后加入0.2mol的teos，攪拌24h。然后將反應(yīng)液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯反應(yīng)罐中，于100℃下晶化24h，經(jīng)過過濾洗滌后于120℃干燥12h，最后550℃焙燒5h，得到產(chǎn)物mcf。

取完全干燥的mpeg0.05mol，溶于無水吡啶中，氮氣保護(hù)，在70℃下劇烈攪拌。其中，所述的mpeg的分子量優(yōu)選為2000、5000、10000道爾頓。6h后，加入0.1mol的tespic，反應(yīng)24h，真空干燥除去溶劑，得到的粗品用80ml正已烷溶解，加入40ml乙醇在0℃重結(jié)晶提純，室溫下真空干燥6h，得到mpegxk-silanes（xk=2000、5000、10000）。取100mg的mcf溶于30mlph4.0的鹽酸乙醇水溶液中（乙醇與水體積比1:2）（溶液a），取mpegxk-silanes400mg溶于30ml的乙醇（溶液b），將溶液b滴加入溶液a中，攪拌12h，將上述反應(yīng)體系凍干，即得mpeg-mcf（mpeg2000-mcf、mpeg5000-mcf和mpeg10000-mcf）。

（2）載藥

首先取胰島素10mg和細(xì)胞穿膜肽penetratin40mg溶于ph7.4的磷酸鹽緩沖液中制備藥物溶液，然后將合成的mpeg5000-mcf真空活化12h后，取100mg分散于藥物溶液中，在室溫下吸附載藥12h，待達(dá)到吸附平衡后，采用離心法將載藥的mpeg-mcf從溶液中分離出來，冷凍干燥，以2%海藻糖為凍干保護(hù)劑，然后將凍干物填裝入腸溶膠囊即得。