本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，尤其涉及一種抗腫瘤用黃酮類提取物及其制造方法。
背景技術(shù)：
黃酮類化合物泛指兩個(gè)具有酚羥基的苯環(huán)（a-與b-環(huán)）通過(guò)中央三碳原子相互連結(jié)而成的一系列化合物，其基本母核為2-苯基色原酮。黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中常連接有酚羥基、甲氧基、甲基、異戊烯基等官能團(tuán)。此外，它還常與糖結(jié)合成苷。
黃酮的功效是多方面的，它是一種很強(qiáng)的抗氧劑，可有效清除體內(nèi)的氧自由基，如花青素可以抑制油脂性過(guò)氧化物的全階段溢出，這種阻止氧化的能力是維生素e的十倍以上，這種抗氧化作用可以阻止細(xì)胞的退化、衰老，也可阻止癌癥的發(fā)生。黃酮可以改善血液循環(huán)，可以降低膽固醇，向天果中的黃酮還含有一種paf抗凝因子，這些作用大大降低了心腦血管疾病的發(fā)病率，也可改善心腦血管疾病的癥狀。黃酮可以抑制炎性生物酶的滲出，可以增進(jìn)傷口愈合和止痛，櫟素由于具有強(qiáng)抗組織胺性，可以用于各類敏感癥。
在國(guó)內(nèi)已申請(qǐng)的相關(guān)專利中，專利《一種含異甘草黃酮醇的抗腫瘤藥物及其應(yīng)用》（申請(qǐng)?zhí)枺?01110377440.5，公開(kāi)日：2013-02-06）公開(kāi)了一種含異甘草黃酮醇的抗腫瘤藥物，其采用的是加熱醇提的方法，未采用超聲波輻助，提取效率較低，獲得產(chǎn)品純度較低；另外，由于只有一種有效成分，不能適用于很多情況，也沒(méi)有互補(bǔ)互促效應(yīng)，功能較局限。專利《過(guò)山蕨總黃酮在制備預(yù)防和治療腫瘤藥物方面的應(yīng)用》（申請(qǐng)?zhí)枺?01210486111.9，公開(kāi)日：2013-02-20）公開(kāi)了一種過(guò)山蕨總黃酮的新應(yīng)用，由于其沒(méi)有公開(kāi)制取步驟，實(shí)現(xiàn)困難。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷，本發(fā)明旨在提供一種適用范圍廣、有效成份多、有效成份功能互補(bǔ)互促、提取效率高、獲得產(chǎn)品純度高、易于實(shí)現(xiàn)的抗腫瘤用黃酮類提取物及其制造方法。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種抗腫瘤用黃酮類提取物的制造方法，包括以下步驟：
1）大豆異黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：大豆，將所述大豆去霉?fàn)€、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水大豆干切碎并磨制成粉，采用100-200目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的大豆干粉；
②將步驟①獲得的大豆干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂大豆干粉；
③將步驟②獲得的脫脂大豆干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)20-40倍的無(wú)水乙醇中；然后將加入了脫脂大豆干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂大豆干粉的無(wú)水乙醇加熱至50℃-70℃，然后以500w-600w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為20min-30min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
2）葛根總異黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：葛根，將所述葛根去霉?fàn)€、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水葛根干切碎并磨制成粉，采用50-80目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的葛根干粉；
②將步驟①獲得的葛根干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂葛根干粉；
③將步驟②獲得的脫脂葛根干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)10-15倍的無(wú)水乙醇中；然后將加入了脫脂葛根干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂葛根干粉的無(wú)水乙醇加熱至40℃-60℃，然后以700w-800w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為10min-15min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
3）淫羊藿黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：淫羊藿，將所述淫羊藿去霉?fàn)€、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水淫羊藿干切碎并磨制成粉，采用100-200目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的淫羊藿干粉；
②將步驟①獲得的淫羊藿干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂淫羊藿干粉；
③將步驟②獲得的脫脂淫羊藿干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)10-20倍的無(wú)水乙醇中；然后將加入了脫脂淫羊藿干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂淫羊藿干粉的無(wú)水乙醇加熱至40℃-60℃，然后以800w-1000w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為15min-20min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
4）紅車軸異黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：紅車軸，將所述紅車軸去除地上部分、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水紅車軸干切碎并磨制成粉，采用200-300目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的紅車軸干粉；
②將步驟①獲得的紅車軸干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂紅車軸干粉；
③將步驟②獲得的脫脂紅車軸干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)8-12倍的無(wú)水乙醇；然后將加入了脫脂紅車軸干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂紅車軸干粉的無(wú)水乙醇加熱至50℃-70℃，然后以800w-1000w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為15min-20min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
5）目標(biāo)黃酮類提取物的制取
將1）~4）獲得的各種黃酮類提取物按如下重量份均勻混合：大豆異黃酮30-40份、葛根總異黃酮25-30份、淫羊藿黃酮10-15份、紅車軸異黃酮10-15份，即獲得所需抗腫瘤用黃酮類提取物。
根據(jù)上述制造方法制造的抗腫瘤用黃酮類提取物，由如下重量份的成份組成：大豆異黃酮30-40份、葛根總異黃酮25-30份、淫羊藿黃酮10-15份、紅車軸異黃酮10-15份。
與現(xiàn)有技術(shù)比較，本發(fā)明由于采用了上述方案，具有以下優(yōu)點(diǎn)：采用了多種不同的黃酮類提取物，其中：大豆異黃酮能延緩女性衰老、改善更年期癥狀、骨質(zhì)疏松、血脂升高、乳腺癌、前列腺癌、心臟病、疏松癥、心血管疾病等；葛根總異黃酮有抗腫瘤、收縮平滑肌、增加冠血流量、抑制血小板凝集降血糖等；淫羊藿黃酮具有抗腫瘤、抗衰老、益精氣、堅(jiān)筋骨的作用；紅車軸異黃酮可以抗菌、抗炎、心血管作用、解痙、祛痰、抗癌、抑酶作用，抗氧化劑、利尿利膽，還用于治療肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化癥，治療saps，治療肝炎。本發(fā)明的四種有效成份除了具有共一性的提升抗腫瘤的能力，還分別具有增強(qiáng)免疫力、益氣堅(jiān)骨、增強(qiáng)能量、降血壓血脂、保護(hù)功能性器官、抗衰老、抗疲勞的作用，這些周邊功能的提供能為人體帶來(lái)更好的免疫力環(huán)境，使人體自身的免疫機(jī)能更能發(fā)揮其應(yīng)有的作用，由于經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)獲得的合理配比能獲得所有功效的最佳配比，因此本發(fā)明適用范圍廣、有效成份多、有效成份功能互補(bǔ)互促。由于采用的都是對(duì)黃酮類提取物親和的超聲醇提加樹(shù)附醇洗脫的方式進(jìn)行提取，且整個(gè)過(guò)程都在密閉、潔凈的環(huán)境下進(jìn)行，因此本發(fā)明的提取效率高、獲得產(chǎn)品純度高；由于公開(kāi)了整個(gè)工藝流程及配方，使本發(fā)明的產(chǎn)品制造方法易于實(shí)現(xiàn)。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1：
根據(jù)上述制造方法制造的抗腫瘤用黃酮類提取物，由如下重量份的成份組成：大豆異黃酮30-40份、葛根總異黃酮25-30份、淫羊藿黃酮10-15份、紅車軸異黃酮10-15份。
上述抗腫瘤用黃酮類提取物的制造方法，包括以下步驟：
1）大豆異黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：大豆，將所述大豆去霉?fàn)€、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水大豆干切碎并磨制成粉，采用100-200目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的大豆干粉；
②將步驟①獲得的大豆干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂大豆干粉；
③將步驟②獲得的脫脂大豆干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)20-40倍的無(wú)水乙醇中；然后將加入了脫脂大豆干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂大豆干粉的無(wú)水乙醇加熱至50℃-70℃，然后以500w-600w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為20min-30min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
2）葛根總異黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：葛根，將所述葛根去霉?fàn)€、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水葛根干切碎并磨制成粉，采用50-80目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的葛根干粉；
②將步驟①獲得的葛根干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂葛根干粉；
③將步驟②獲得的脫脂葛根干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)10-15倍的無(wú)水乙醇中；然后將加入了脫脂葛根干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂葛根干粉的無(wú)水乙醇加熱至40℃-60℃，然后以700w-800w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為10min-15min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
3）淫羊藿黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：淫羊藿，將所述淫羊藿去霉?fàn)€、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水淫羊藿干切碎并磨制成粉，采用100-200目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的淫羊藿干粉；
②將步驟①獲得的淫羊藿干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂淫羊藿干粉；
③將步驟②獲得的脫脂淫羊藿干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)10-20倍的無(wú)水乙醇中；然后將加入了脫脂淫羊藿干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂淫羊藿干粉的無(wú)水乙醇加熱至40℃-60℃，然后以800w-1000w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為15min-20min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
4）紅車軸異黃酮的提取
①準(zhǔn)備原材料：紅車軸，將所述紅車軸去除地上部分、洗凈后在40℃-60℃環(huán)境下烘烤，烘烤時(shí)間為2h-3h；烘烤結(jié)束后將脫水紅車軸干切碎并磨制成粉，采用200-300目的篩子過(guò)篩后，所篩出的即為作為原材料的紅車軸干粉；
②將步驟①獲得的紅車軸干粉置于索氏抽提器中采用石油醚為脫脂劑進(jìn)行脫脂處理后風(fēng)干，即獲得脫脂紅車軸干粉；
③將步驟②獲得的脫脂紅車軸干粉放入其質(zhì)量倍數(shù)8-12倍的無(wú)水乙醇；然后將加入了脫脂紅車軸干粉的無(wú)水乙醇放置于設(shè)置有加熱設(shè)備的超聲波振動(dòng)機(jī)內(nèi)；
④將加入了脫脂紅車軸干粉的無(wú)水乙醇加熱至50℃-70℃，然后以800w-1000w的功率進(jìn)行超聲波振動(dòng)提取，超聲波振動(dòng)提取時(shí)間為15min-20min；
⑤將步驟④獲得的提取液在密閉環(huán)境下自然干燥，至提取液體積剩余40-50%時(shí)將提取液取出并進(jìn)行濾除固態(tài)物處理，然后在剩余溶液中植入ab-8或x-5大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附提取，獲得待用樹(shù)脂；
⑥將步驟⑤獲得的待用樹(shù)脂采用純凈水清洗至洗凈，然后再采用無(wú)水乙醇進(jìn)行洗脫，將洗脫液在密閉環(huán)境下自然干燥，干結(jié)后即獲得所需大豆異黃酮；
5）目標(biāo)黃酮類提取物的制取
將1）~4）獲得的各種黃酮類提取物按如下重量份均勻混合：大豆異黃酮30-40份、葛根總異黃酮25-30份、淫羊藿黃酮10-15份、紅車軸異黃酮10-15份，即獲得所需抗腫瘤用黃酮類提取物。
本發(fā)明尤其適用于癌癥高危人群或處于癌癥早期的人群，由于不會(huì)產(chǎn)生抗藥性或其它副作用，本發(fā)明的抗腫瘤用黃酮類提取物適宜長(zhǎng)期服用調(diào)養(yǎng)。
對(duì)所公開(kāi)的實(shí)施例的上述說(shuō)明，僅為了使本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員能夠?qū)崿F(xiàn)或使用本發(fā)明。對(duì)這些實(shí)施例的多種修改對(duì)本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員來(lái)說(shuō)將是顯而易見(jiàn)的，本文中所定義的一般原理可以在不脫離本發(fā)明的精神或范圍的情況下，在其它實(shí)施例中實(shí)現(xiàn)。因此，本發(fā)明將不會(huì)被限制于本文所示的這些實(shí)施例，而是要符合與本文所公開(kāi)的原理和新穎特點(diǎn)相一致的最寬的范圍。