(本申請是2012年2月24日遞交的發(fā)明名稱為“抗癌劑感受性的判定標記”的申請201280014973.x的分案申請)

本發(fā)明涉及為了判定作為對象的患者的癌對于抗癌劑是否具有治療反應性而使用的抗癌劑感受性判定標記及其應用。

背景技術(shù)：

抗癌劑中包括烷基化劑、鉑制劑、代謝拮抗劑、抗癌性抗生素、抗癌性植物生物堿等種類。這些抗癌劑中，根據(jù)癌的種類不同，有時顯示效果，有時不顯示效果。但是，已知即使是認為有效的種類的癌，也因各個患者而異有時顯示效果，有時不顯示效果。這種抗癌劑對于各個患者的癌是否顯示效果稱為抗癌劑感受性。

奧沙利鉑(sp-4-2)-[(1r，2r)-環(huán)己烷-1,2-二胺-κn，κn’][乙二酸(2-)-κo¹，κo²]鉑(iupac)是第3代鉑配位化合物類抗惡性腫瘤藥。據(jù)認為，其作用機理與先前的藥劑順鉑(cddp)和卡鉑(cbcda)同樣，通過與dna堿基形成交聯(lián)而導致dna合成抑制、蛋白合成抑制，但奧沙利鉑(l-ohp)即使對于cddp和cbcda無效的大腸癌而言也表現(xiàn)出抗腫瘤效果，表現(xiàn)出和以往的鉑配位化合物類抗惡性腫瘤藥不同的抗腫瘤譜。美國已經(jīng)在2004年1月承認其與氟尿嘧啶(5-fu)/左亞葉酸鹽(lv)的并用作為轉(zhuǎn)移性結(jié)腸-直腸癌的第一線治療藥物，在日本，在2005年4月在藥價中，也收載了對于不能切除治愈的晚期、復發(fā)的結(jié)腸-直腸癌，其與左亞葉酸鹽和氟尿嘧啶的靜脈內(nèi)持續(xù)給藥法的并用(folfox4法)。對于晚期復發(fā)大腸癌的治療而言，在二十世紀90年代前半葉之前一直采用的5-fu/lv療法的生存率是10～12個月，與此相對，加入了奧沙利鉑的folfox療法的生存期為19.5個月，達到幾乎2倍。另外，在2009年8月，同樣利用與5-fu/lv的靜脈內(nèi)持續(xù)給藥法的并用的“結(jié)腸癌的術(shù)后輔助化學療法”作為效能-效果得以追加，是能夠期待對大腸癌患者日益廣泛使用和有益性的藥劑。

但是，盡管如此，folfox療法對于晚期復發(fā)的大腸癌發(fā)揮的效率也僅為50％左右，換言之，意味著接受治療的患者中有半數(shù)得不到效果。另外，因奧沙利鉑的使用而導致中性粒細胞減少癥，此外，還呈現(xiàn)高頻率的末梢神經(jīng)損傷，盡管這些并不是致死的副作用，但都是導致難以繼續(xù)治療的因素。因此，如果在治療開始前能夠預測、診斷可以期待效果的患者(應答者)和不能期待效果的患者(非應答者)，就可實現(xiàn)有效性和安全性高的化學療法。而且，由于一般而言癌化學療法的治療過程需要經(jīng)過長期的時間，所以在治療過程中對于抗癌劑的感受性的經(jīng)時監(jiān)控能夠判定是否繼續(xù)治療，這不僅涉及減輕患者的負擔和副作用，而且從醫(yī)療經(jīng)濟的觀點出發(fā)也是有用的。確立一種用于預測在各個患者中的治療反應性、選擇適當?shù)闹委煹摹皞€體化醫(yī)療”的治療反應性預測生物標記是當務之急。

作為與奧沙利鉑的治療反應性關(guān)聯(lián)的因素，認為主要與下述1)～3)等相關(guān)，作為在以大腸癌患者為對象的奧沙利鉑與5-fu的并用療法中的治療反應性和預后預測因素，正在進行與1)～3)相關(guān)的臨床研究。

1)奧沙利鉑引起損傷的dna的切除、修復能力的增強

2)在細胞內(nèi)的奧沙利鉑(活性體)的失活(解毒)

3)奧沙利鉑的細胞內(nèi)積蓄量的降低

關(guān)于1)，對于在核苷酸切除修復(nucleotideexcisionrepair:ner)中發(fā)揮重要作用的切除修復交叉互補基因1(excisionrepaircross-complementinggroup1，ercc1)而言，有報告腫瘤內(nèi)ercc1的基因表達量是預后因素(非專利文獻1)，對于作為ercc1的單核苷酸多態(tài)性(snp)之一的c118t而言，有報告具有c/c純合子的患者比具有至少1個以上的t等位基因的患者具有更良好的生存率(非專利文獻2)。有報告在著色性干皮病基因d(xerodermapigmentosumd，xpd，也作為ercc2已知)中，伴有l(wèi)ys751gln的氨基酸突變的遺傳多態(tài)性與腫瘤縮小率和生存期相關(guān)(非專利文獻2、3)。有報告報告了x射線修復交叉互補基因1(x-rayrepaircross-complementinggroup1，xrcc1)的伴有arg399gln的氨基酸突變的遺傳多態(tài)性與腫瘤縮小效果的關(guān)系，其中，該x射線修復交叉互補基因1編碼據(jù)認為在堿基切除修復(baseexcisionrepair：ber)中與有效修復因暴露于烷基化劑等形成的dna單鏈切斷的蛋白質(zhì)相關(guān)(非專利文獻4)，但是有報告，根據(jù)以同一個患者為對象的后續(xù)分析，其對臨床預后沒有影響(非專利文獻2)。盡管據(jù)認為dna錯配修復(dnamismatchrepair：mmr)也參與對順鉑的感受性下降，但是有報告，在體外的研究中，mmr不參與由奧沙利鉑導致的dna損傷部位的修復(非專利文獻5)。

關(guān)于2)，谷胱苷肽硫轉(zhuǎn)移酶(glutathione-s-transferase，gst)是承擔解毒、代謝的第ⅱ相反應的酶之一，通過催化dna鉑加成物與谷胱苷肽形成抱合體而將藥劑失活。有報告在gst亞型中，gstp1在大腸癌中的表達量增高，伴隨ile105val的氨基酸突變的遺傳多態(tài)性與生存期相關(guān)(生存期中間值：ile/ile為7.9個月、ile/val為13.3個月、val/val為24.9個月)(非專利文獻6)。

關(guān)于3)，有報告在使用培養(yǎng)細胞進行的研究中，有機陽離子轉(zhuǎn)運體(octs)與奧沙利鉑向細胞內(nèi)輸送和感受性相關(guān)(非專利文獻7)，此外，也有報告atp7a、atp7b等與銅或重金屬的輸送相關(guān)的轉(zhuǎn)運體與感受性的相關(guān)(非專利文獻8、9)。但是，關(guān)于它們的表達與奧沙利鉑治療反應性的關(guān)聯(lián)，尚未進行臨床研究。

在以接受了folfox療法的晚期大腸癌患者為對象的最近的臨床研究中，報告了ercc1的遺傳多態(tài)性(asn118asn)和xpd的遺傳多態(tài)性(lys751gln)獨立地與無進展生存期(pfs)相關(guān)，但對于gstp1(ile105val)而言，沒有發(fā)現(xiàn)與pfs的關(guān)聯(lián)，而確認與奧沙利鉑誘發(fā)神經(jīng)毒性關(guān)聯(lián)的傾向(非專利文獻10)。

在體外研究中，關(guān)于鉑配位化合物類的先前藥劑順鉑的耐性相關(guān)因素有大量報告，關(guān)于奧沙利鉑，也報告了與fas/fasl、bcl-xl等凋亡相關(guān)因素的關(guān)聯(lián)(非專利文獻11、12)。但是，除了奧沙利鉑因癌種類而異而表現(xiàn)出與順鉑不同的治療反應性以外，癌細胞對于擔負奧沙利鉑的細胞損傷活性的鉑dna加成物的細胞應答幾乎尚未闡明，對于使用奧沙利鉑的化學療法能夠預測治療反應性的明確的生物標記尚未確立。

氟尿嘧啶為1957年開發(fā)的氟化嘧啶類抗癌劑，至今仍是作為消化器癌化學療法的基本的藥劑。進入癌細胞的氟尿嘧啶通過下述作用機理發(fā)揮殺細胞效果，即，主要通過活性代謝物一磷酸氟代脫氧尿苷(fluorodeoxyuridine-5’-monophosphate，fdump)引起胸苷酸合酶(thymidylatesynthase，ts)抑制，從而引起dna合成抑制，此外，通過作為相同的活性代謝物的5-氟尿苷三磷酸(5-fluorouridinetriphosphate，futp)引起rna功能抑制。

關(guān)于氟化嘧啶類抗癌劑的治療應答性的預測，目前為止進行了多項研究，特別是關(guān)于作為氟尿嘧啶的分解酶的二氫嘧啶脫氫酶(dihydropyrimidinedehydrogenase,dpd)和作為活性代謝物的靶酶的胸苷酸合成酶(thymidylatesynthase,ts)的報告較多。在高表達作為氟尿嘧啶異化代謝的限速酶的dpd的腫瘤中，報道了氟尿嘧啶耐性(非專利文獻13)，但是使用臨床檢體的驗證報告并不多。關(guān)于ts表達，報道了不依賴于酶活性、蛋白質(zhì)和rna水平等的測定法，其多寡能夠成為氟化嘧啶類抗癌劑的治療效果決定因素(非專利文獻14、15)。但是，在所有的報告中并不一定能得到一致的結(jié)果，另外，尚不知道在治療早期預測對于氟尿嘧啶的治療反應性的明確的生物標記。

現(xiàn)有技術(shù)文獻

非專利文獻

非專利文獻1：j.clin.oncol.19，4298-4304(2001)

非專利文獻2：br.j.cancer91，344-354(2004)

非專利文獻3：cancerres.61，8654-8658(2001)

非專利文獻4：anticancerres.21，3075-3079(2001)

非專利文獻5：cancerres.56，4881-4886(1996)

非專利文獻6：j.natl.cancerinst.94，936-942(2002)

非專利文獻7：cancerres.66，8847-8857(2006)

非專利文獻8：mol.pharmacol.66，25-32(2004)

非專利文獻9：clin.cancerres.10，4661-4669(2004)

非專利文獻10：j.clin.oncol.25，1247-1254(2007)

非專利文獻11：clin.cancerres.11，4770-4774(2005)

非專利文獻12：j.biol.chem.279，46113-46121(2004)

非專利文獻13：europeanjournalofcancer2004；40：939-950

非專利文獻14：cancertreatmentreviews2002；28：27-47

非專利文獻15：j.clin.oncol.2004；22：529-536

技術(shù)實現(xiàn)要素：

發(fā)明所要解決的課題

本發(fā)明的課題在于提供一種能夠判別各個患者的治療反應性的抗癌劑感受性判定標記以及利用該抗癌劑感受性判定標記的新的癌治療方法。

用于解決課題的方法

因此，本發(fā)明的發(fā)明人等培養(yǎng)10種人癌細胞株，對于它們的細胞內(nèi)代謝物使用毛細管電泳-飛行時間型質(zhì)譜儀(ce-tofms)進行抗癌劑感受性判定標記的探索，結(jié)果在對奧沙利鉑(也稱為l-ohp)的感受性低的細胞群和高的細胞群中，發(fā)現(xiàn)了確認細胞內(nèi)水平差異的代謝物，并發(fā)現(xiàn)該代謝物是n-乙酰氨基葡萄糖、氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(n-乙酰天冬氨酸、n-乙酰基-β-丙氨酸、天冬酰胺(asn)、精氨酸(arg)、鳥氨酸)、多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(亞精胺)、糖酵解系統(tǒng)上的物質(zhì)(3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖)。另外，本發(fā)明的發(fā)明人等培養(yǎng)人癌細胞株，對于l-ohp曝露后的細胞內(nèi)代謝變動使用ce-tofms進行網(wǎng)羅式分析，進行抗癌劑感受性判定標記的探索，結(jié)果發(fā)現(xiàn)了確認在l-ohp高感受性細胞中l(wèi)-ohp曝露后細胞內(nèi)水平的顯著上升的峰，并發(fā)現(xiàn)該峰為氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(β-丙氨酸(β-ala)、天冬酰胺、谷氨酸(glu)、arg、賴氨酸(lys)、n⁶-乙?；嚢彼帷-乙?；?β-丙氨酸、n-乙酰基鳥氨酸、γ-glu-cys、β-ala-lys、glu-glu、s-乳酰谷胱甘肽、尸胺、半胱磺酸、反式肉桂酸、s-腺苷高半胱氨酸)、多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、精胺、亞精胺、n-乙酰腐胺)、核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(dtmp、cmp、ump、gmp、cdp、udp、dctp、ctp、utp、gtp、nadp⁺、atp和/或dgtp、鳥苷)、磷酸戊糖途徑上的物質(zhì)(2,3-二磷酸甘油酸、丙酮酸)、tca循環(huán)上的物質(zhì)(蘋果酸)、月桂酸、6-磷酸葡萄糖酸。此外，在l-ohp低感受性細胞中發(fā)現(xiàn)了確認l-ohp曝露后細胞內(nèi)水平的顯著上升的峰，并發(fā)現(xiàn)該峰為氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(谷胱甘肽(gsh))、丁酸、4-甲基吡唑。另外，在l-ohp高感受性細胞中發(fā)現(xiàn)了確認l-ohp曝露后細胞內(nèi)水平的顯著降低的峰，并發(fā)現(xiàn)該峰為核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(imp)。

另外，同樣地對于氟尿嘧啶(也稱為5-fu)，培養(yǎng)人癌細胞株，對于5-fu曝露后的細胞內(nèi)代謝變動使用ce-tofms進行網(wǎng)羅式分析，進行抗癌劑感受性判定標記的探索，結(jié)果在5-fu高感受性細胞中發(fā)現(xiàn)了確認5-fu曝露后細胞內(nèi)水平顯著上升的峰，并發(fā)現(xiàn)該峰為氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(天冬酰胺酸(asp)、鳥氨酸、n-乙?；B氨酸、β-ala-lys、glu-glu、2-氨基己二酸、γ-氨基丁酸、s-腺苷高半胱氨酸)、核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(鳥苷、cmp、ump、1-甲基腺苷、udp、ctp)、磷酸戊糖途徑上的物質(zhì)(7-磷酸景天庚酮糖)、糖酵解系統(tǒng)上的物質(zhì)(磷酸二羥丙酮、丙酮酸)、tca循環(huán)上的物質(zhì)(蘋果酸)、多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(n¹-乙酰精胺)、異丁胺、乙醇酸。另外，在5-fu低感受性細胞中發(fā)現(xiàn)了確認5-fu曝露后細胞內(nèi)顯著上升的峰，并發(fā)現(xiàn)該峰為氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(絲氨酸(ser)、谷胱甘肽(gsh))、核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(腺苷)。另外，在5-fu高感受性細胞中發(fā)現(xiàn)了確認5-fu曝露后細胞內(nèi)顯著降低的峰，并發(fā)現(xiàn)該峰為氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(3-甲基組氨酸、尸胺)、磷酸戊糖途徑上的物質(zhì)(prpp)、4-甲基吡唑。另外，在5-fu低感受性細胞中發(fā)現(xiàn)了確認5-fu曝露后細胞內(nèi)顯著降低的峰，并發(fā)現(xiàn)該峰為氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(半胱氨酸-谷胱甘肽)、糖酵解系統(tǒng)上的物質(zhì)(2,3-二磷酸甘油酸)、多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(n-乙酰腐胺、n⁸-乙酰亞精胺、腐胺、亞精胺)、6-磷酸葡萄糖酸、nadh、nad⁺。

基于上述認識進一步進行研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當將來自癌患者的生物體試樣中的這些代謝物的濃度作為指標，就能夠判定該癌患者的癌是否具有對于抗癌劑的感受性，另外，當將這些代謝物的濃度或變動作為指標，就能夠進行抗癌劑感受性增強劑的篩選，此外，當并用該抗癌劑感受性增強劑和作為感受性增強對象的抗癌劑，則該抗癌劑的治療效果就飛躍性地提高，從而完成了本發(fā)明。

即，本發(fā)明提供抗癌劑感受性判定標記，其包含選自n-乙酰氨基葡萄糖、氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)、核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)、磷酸戊糖途徑上的物質(zhì)、糖酵解系統(tǒng)上的物質(zhì)、tca循環(huán)上的物質(zhì)、多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)、和月桂酸、6-磷酸葡萄糖酸、丁酸、4-甲基吡唑、異丁胺、乙醇酸、nadh、nad⁺以及這些物質(zhì)參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)中的1種以上的物質(zhì)。

另外，本發(fā)明提供選自l-ohp、5-fu以及它們的鹽的抗癌劑的感受性判定標記，該抗癌劑感受性判定標記包括選自asn、γ-glu-cys、谷胱甘肽(gsh)、s-腺苷高半胱氨酸、asp、γ-氨基丁酸、1-甲基腺苷、精胺、亞精胺和這些物質(zhì)參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)中1種以上的物質(zhì)。

另外，本發(fā)明提供抗癌劑感受性的判定方法，其特征在于，測定檢體中的上述物質(zhì)。

另外，本發(fā)明提供用于實施抗癌劑感受性的判定方法的試劑盒，其特征在于，包括用于測定檢體中的上述物質(zhì)的操作說明書。

此外，本發(fā)明提供抗癌劑感受性增強劑的篩選方法，其以上述物質(zhì)的表達變動為指標。

而且，本發(fā)明提供利用上述的篩選方法得到的抗癌劑感受性增強劑。

此外，本發(fā)明提供癌治療用組合物，其含有上述抗癌劑感受性增強劑和作為感受性增強對象的抗癌劑的組合。

發(fā)明的效果

如果使用本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記，就能夠在抗癌劑給藥前或抗癌劑給藥開始后早期且準確地判定各個患者的抗癌劑治療反應性，從而能夠選擇治療效果更高的抗癌劑，作為其結(jié)果，能夠防止不能期待治療效果的抗癌劑的繼續(xù)給藥所導致的癌進展、副作用增大，還能夠期待減輕患者的負擔，減少醫(yī)療費。而且，如果使用該標記，就能夠篩選增強抗癌劑感受性的藥劑，如果將作為其對象的抗癌劑與抗癌劑感受性增強劑并用，就能夠飛躍性地提高癌治療效果。本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記的測定試劑作為抗癌劑感受性判定試劑是有用的。

附圖說明

圖1是表示10種人大腸癌細胞株對于l-ohp的感受性的圖。

圖2是表示l-ohp低感受性細胞和高感受性細胞的穩(wěn)定狀態(tài)(藥劑處理前)中的n-乙酰氨基葡萄糖、精氨酸、天冬酰胺、3-磷酸甘油酸、n-乙?；?β-丙氨酸、n-乙酰天冬氨酸、1,6-二磷酸果糖的細胞內(nèi)水平的圖。

圖3是表示dld-1、hct116中l(wèi)-ohp曝露后的腐胺的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化的圖。

圖4是表示dld-1、hct116中l(wèi)-ohp曝露后的n¹-乙酰精胺的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化的圖。

圖5是表示dld-1、hct116中l(wèi)-ohp曝露后的n⁸-乙酰亞精胺的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化的圖。

圖6是表示dld-1、hct116中l(wèi)-ohp曝露后的精胺的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化的圖。

圖7是表示dld-1、hct116中l(wèi)-ohp曝露后的天冬酰胺的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化的圖。

圖8是表示dld-1、hct116中l(wèi)-ohp曝露后的β-丙氨酸的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化的圖。

圖9是表示dld-1、hct116在l-ohp曝露24小時后的核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)的變動的圖。

圖10是表示l-ohp低感受性細胞和高感受性細胞的穩(wěn)定狀態(tài)(藥劑處理前)中多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)的細胞內(nèi)水平、和dld-1、hct116中l(wèi)-ohp曝露后的多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化的圖。

圖11是表示圖10的觀察方法的圖。

圖12是表示dld-1、hct116在l-ohp曝露24小時后的各代謝物質(zhì)的變動的圖。

圖13是表示dld-1、hct116在5-fu曝露24小時后的各代謝物質(zhì)的變動的圖。

具體實施方式

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記選自下述物質(zhì)：n-乙酰氨基葡萄糖、氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)、核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)、磷酸戊糖途徑上的物質(zhì)、糖酵解系統(tǒng)上的物質(zhì)、tca循環(huán)上的物質(zhì)、多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)、月桂酸、6-磷酸葡萄糖酸、丁酸、4-甲基吡唑、異丁胺、乙醇酸、nadh、nad⁺和這些物質(zhì)參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)。另外，包括使這些物質(zhì)的濃度變動的代謝系統(tǒng)上的所有物質(zhì)，作為該物質(zhì)，可以列舉使向這些物質(zhì)的代謝增強的物質(zhì)、抑制向這些物質(zhì)的代謝的物質(zhì)、促進從這些物質(zhì)的代謝的物質(zhì)、抑制從這些物質(zhì)的代謝的物質(zhì)等。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為n-乙酰氨基葡萄糖或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為n-乙酰氨基葡萄糖代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在n-乙酰氨基葡萄糖之外，還包括在代謝系統(tǒng)中使n-乙酰氨基葡萄糖的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向n-乙酰氨基葡萄糖的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從n-乙酰氨基葡萄糖的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選n-乙酰氨基葡萄糖。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為氨基酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為氨基酸代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，包括使氨基酸代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向氨基酸代謝系統(tǒng)物質(zhì)的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從氨基酸代謝系統(tǒng)物質(zhì)的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選arg、asn、n-乙?；?β-丙氨酸、n-乙酰天冬氨酸、β-丙氨酸、鳥氨酸、glu、lys、n⁶-乙?；嚢彼帷-乙?；B氨酸、γ-glu-cys、β-ala-lys、谷胱甘肽(gsh)、glu-glu、s-乳酰谷胱甘肽、尸胺、半胱磺酸、反式肉桂酸、s-腺苷高半胱氨酸。另外，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選asp、鳥氨酸、n-乙?；B氨酸、β-ala-lys、glu-glu、2-氨基己二酸、γ-氨基丁酸(gaba)、s-腺苷高半胱氨酸、ser、谷胱甘肽(gsh)、3-甲基組氨酸、尸胺、半胱氨酸-谷胱甘肽。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為核酸代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為核酸代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，包括使核酸代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向核酸代謝系統(tǒng)物質(zhì)的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從核酸代謝系統(tǒng)物質(zhì)的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，優(yōu)選鳥苷、dtmp、cmp、ump、imp、gmp、cdp、udp、dctp、ctp、utp、gtp、nadp⁺、atp和/或dgtp，特別優(yōu)選ump、udp。另外，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選鳥苷、cmp、ump、1-甲基腺苷、udp、ctp、腺苷。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為磷酸戊糖途徑上的物質(zhì)(也稱為磷酸戊糖途徑上物質(zhì))，作為該物質(zhì)，包括使磷酸戊糖途徑上物質(zhì)的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向磷酸戊糖途徑上物質(zhì)的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從磷酸戊糖途徑上物質(zhì)的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選2,3-二磷酸甘油酸、丙酮酸。另外，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選7-磷酸景天庚酮糖、prpp。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為糖酵解系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為糖酵解系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，包括使糖酵解系統(tǒng)物質(zhì)的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向糖酵解系統(tǒng)物質(zhì)的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從糖酵解系統(tǒng)物質(zhì)的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖。另外，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選磷酸二羥丙酮、2,3-二磷酸甘油酸、丙酮酸。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為tca循環(huán)上的物質(zhì)(也稱為tca循環(huán)上物質(zhì))，作為該物質(zhì)，包括使tca循環(huán)上物質(zhì)的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向tca循環(huán)上物質(zhì)的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從tca循環(huán)上物質(zhì)的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選蘋果酸。另外，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選蘋果酸。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為多胺代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為多胺代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，包括使多胺代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向多胺代謝系統(tǒng)物質(zhì)的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從多胺代謝系統(tǒng)物質(zhì)的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、精胺、亞精胺、n-乙酰腐胺。另外，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、亞精胺、n-乙酰腐胺。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為月桂酸或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為月桂酸代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在月桂酸以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使月桂酸的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向月桂酸的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從月桂酸的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選月桂酸。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為6-磷酸葡萄糖酸或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為6-磷酸葡萄糖酸代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在6-磷酸葡萄糖酸以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使6-磷酸葡萄糖酸的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向6-磷酸葡萄糖酸的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從6-磷酸葡萄糖酸的代謝的物質(zhì)等。它們之中，l-ohp感受性判定標記和5-fu感受性判定標記都特別優(yōu)選6-磷酸葡萄糖酸。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為丁酸或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為丁酸代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在丁酸以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使丁酸的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向丁酸的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從丁酸的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為l-ohp感受性判定標記，特別優(yōu)選丁酸。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為4-甲基吡唑或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為4-甲基吡唑代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在4-甲基吡唑以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使4-甲基吡唑的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向4-甲基吡唑的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從4-甲基吡唑的代謝的物質(zhì)等。它們之中，l-ohp感受性判定標記和5-fu感受性判定標記都特別優(yōu)選4-甲基吡唑。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為異丁胺或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為異丁胺代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在異丁胺以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使異丁胺的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向異丁胺的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從異丁胺的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選異丁胺。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為乙醇酸或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為乙醇酸代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在乙醇酸以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使乙醇酸的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向乙醇酸的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從乙醇酸的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選乙醇酸。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為nadh或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為nadh代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在nadh以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使nadh的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向nadh的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從nadh的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選nadh。

本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記之一，為nad⁺或其參與的代謝系統(tǒng)上的物質(zhì)(也稱為nad⁺代謝系統(tǒng)物質(zhì))，作為該物質(zhì)，在nad⁺以外，還包括在代謝系統(tǒng)中使nad⁺的濃度變動的所有物質(zhì)，可以列舉使向nad⁺的代謝增強的物質(zhì)或抑制的物質(zhì)、促進或抑制從nad⁺的代謝的物質(zhì)等。它們之中，作為5-fu感受性判定標記，特別優(yōu)選nad⁺。

prpp、nad⁺、nadh、nadp⁺為在各種代謝中參與的物質(zhì)，也已知是核酸代謝系統(tǒng)物質(zhì)之一。

上述的抗癌劑感受性判定標記之中，天冬酰胺、精胺、亞精胺、谷胱甘肽(gsh)、γ-氨基丁酸(gaba)、1-甲基腺苷、γ-glu-cys、天冬酰胺酸、s-腺苷高半胱氨酸被本發(fā)明的發(fā)明人等確認是依立替康、sn-38或它們的鹽的感受性判定標記，但新發(fā)現(xiàn)了天冬酰胺、精胺、亞精胺、谷胱甘肽(gsh)、γ-glu-cys、s-腺苷高半胱氨酸能夠作為包含奧沙利鉑(l-ohp)和/或其鹽的抗癌劑的感受性判定標記。另外，天冬酰胺酸、亞精胺、谷胱甘肽(gsh)、gaba、1-甲基腺苷、s-腺苷高半胱氨酸被新發(fā)現(xiàn)能夠作為包含5-fu的抗癌劑的感受性判定標記。此外，精胺、亞精胺為在各種代謝路徑上存在的物質(zhì)，也已知是多胺代謝系統(tǒng)物質(zhì)之一。

β-丙氨酸、glu、lys、n⁶-乙酰基賴氨酸、n-乙酰基鳥氨酸、γ-glu-cys、β-ala-lys、glu-glu、s-乳酰谷胱甘肽、尸胺、半胱磺酸、反式肉桂酸、s-腺苷高半胱氨酸、腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、精胺、n-乙酰腐胺、dtmp、cmp、ump、gmp、cdp、udp、dctp、ctp、utp、gtp、nadp⁺、atp和/或dgtp、鳥苷、2,3-二磷酸甘油酸、丙酮酸、蘋果酸、月桂酸、6-磷酸葡萄糖酸，如后述的實施例所示，l-ohp曝露后，在作為l-ohp高感受性的hct116中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著上升。另一方面，在作為l-ohp低感受性的dld-1中，沒有觀察到像hct116那樣的細胞內(nèi)水平的顯著的變動，或者細胞內(nèi)水平相比于對照組降低。因此，這些物質(zhì)特別是可用作l-ohp等的抗癌劑感受性判定標記。

谷胱甘肽(gsh)、丁酸、4-甲基吡唑，如后述的實施例所示，l-ohp曝露后，在作為低感受性的dld-1中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著上升，但在作為高感受性的hct116中，沒有觀察到像dld-1那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動，或者細胞內(nèi)水平相比于對照組降低。因此，這些物質(zhì)特別是可用作l-ohp等的抗癌劑感受性判定標記。

imp，如后述的實施例所示，l-ohp曝露后，在作為l-ohp高感受性的hct116中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著降低，但在作為l-ohp低感受性的dld-1中，細胞內(nèi)水平相比于對照組上升。因此，imp特別是可用作l-ohp等的抗癌劑感受性判定標記。

n-乙酰天冬氨酸，如后述的實施例所示，使用10種人癌細胞株進行研究，結(jié)果在l-ohp高感受性細胞中，細胞內(nèi)水平高，在l-ohp低感受性細胞中，細胞內(nèi)水平低。因此，n-乙酰天冬氨酸特別是可用作l-ohp等的抗癌劑感受性判定標記。

n-乙酰氨基葡萄糖、3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖、鳥氨酸，如后述的實施例所示，使用10種人癌細胞株進行研究，結(jié)果在l-ohp低感受性細胞中，細胞內(nèi)水平高，在l-ohp高感受性細胞中，細胞內(nèi)水平低。因此，n-乙酰氨基葡萄糖、3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖、鳥氨酸特別是可用作l-ohp等的抗癌劑感受性判定標記。

天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸，如后述的實施例所示，使用10種人癌細胞株進行研究，結(jié)果在l-ohp高感受性細胞中，細胞內(nèi)水平高，在l-ohp低感受性細胞中，細胞內(nèi)水平低。另外，l-ohp曝露后，在作為l-ohp高感受性的hct116中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著上升，但在作為l-ohp低感受性的dld-1中沒有觀察到像作為高感受性細胞的hct116那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動。因此，天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸特別是可用作l-ohp等的抗癌劑感受性判定標記。

精氨酸、亞精胺，如后述的實施例所示，使用10種人癌細胞株進行研究，結(jié)果在l-ohp低感受性細胞中，細胞內(nèi)水平高，在l-ohp高感受性細胞中，細胞內(nèi)水平低。另外，l-ohp曝露后，在作為l-ohp高感受性的hct116中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著上升，但在作為l-ohp低感受性的dld-1中沒有觀察到像作為高感受性細胞的hct116那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動，或者細胞內(nèi)水平相比于對照組降低。因此，精氨酸、亞精胺特別是可用作l-ohp等的抗癌劑感受性判定標記。

asp、鳥氨酸、n-乙?；B氨酸、β-ala-lys、glu-glu、2-氨基己二酸、γ-氨基丁酸、s-腺苷高半胱氨酸、鳥苷、cmp、ump、1-甲基腺苷、udp、ctp、7-磷酸景天庚酮糖、磷酸二羥丙酮、丙酮酸、蘋果酸、n¹-乙酰精胺、異丁胺、乙醇酸，如后述的實施例所示，5-fu曝露后，在作為高感受性的hct116中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著上升。另一方面，在作為低感受性的dld-1中，沒有觀察到像hct116那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動，或者細胞內(nèi)水平相比于對照組降低。因此，這些物質(zhì)特別是可用作5-fu等的感受性判定標記。

ser、谷胱甘肽(gsh)、腺苷，如后述的實施例所示，5-fu曝露后，在作為低感受性的dld-1中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著上升，但在作為高感受性的hct116中沒有觀察到像dld-1那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動，或者細胞內(nèi)水平相比于對照組降低。因此，這些物質(zhì)特別是可用作5-fu等的感受性判定標記。

3-甲基組氨酸、尸胺、prpp、4-甲基吡唑，如后述的實施例所示，5-fu曝露后，在作為高感受性的hct116中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著降低，但在作為低感受性的dld-1中，沒有觀察到像hct116那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動，或者細胞內(nèi)水平相比于對照組上升。因此，這些物質(zhì)特別是可用作5-fu等的感受性判定標記。

半胱氨酸-谷胱甘肽、2,3-二磷酸甘油酸、n-乙酰腐胺、n⁸-乙酰亞精胺、腐胺、亞精胺、6-磷酸葡萄糖酸、nadh、nad⁺，如后述的實施例所示，5-fu曝露后，在作為低感受性的dld-1中觀察到細胞內(nèi)水平的顯著降低，但在作為高感受性的hct116中沒有觀察到像dld-1那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動。因此，這些物質(zhì)特別是可用作5-fu等的感受性判定標記。

作為本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記的對象的抗癌劑，沒有特別限定，例如可以列舉奧沙利鉑(l-ohp)、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)、異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)、噻替哌(thiotepa)、美法侖(melphalan)、白消安(busulfan)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)、達卡巴嗪(dacarbazine)、丙卡巴肼(procarbazine)、替莫唑胺(temozolomide)、順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、奈達鉑(nedaplatin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、培美曲塞(pemetrexed)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、替加氟/尿嘧啶(tegaful/uracil)、脫氧氟尿苷(doxifluridine)、替加氟/吉美拉西/奧替拉西(tegaful/gimeracil/oteracil)、卡培他濱(capecitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、依諾他濱(enocitabine)、吉西他濱(gemcitabine)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)、氟達拉濱(fuludarabin)、噴司他汀(pentostatin)、克拉屈濱(cladribine)、羥基脲(hydroxyurea)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、佐柔比星(daunorubicin)、依達比星(idarubicine)、吡柔比星(pirarubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、氨柔比星(amurubicin)、放線菌素d(actinomycind)、博來霉素(bleomycine)、派來霉素(pepleomycin)、絲裂霉素c(mytomycinc)、阿柔比星(aclarubicin)、凈司他丁(zinostatin)、長春新堿(vincristine)、長春地辛(vindesine)、長春堿(vinblastine)、長春瑞濱(vinorelbine)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、依立替康(irinotecan)、依立替康活性代謝物(sn-38)、托泊替康(nogitecan，topotecan)、依托泊苷(etoposide)、潑尼松龍(prednisolone)、地塞米松(dexamethasone)、他莫昔芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、甲羥孕酮(medroxyprogesterone)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)、來曲唑(letrozole)、利妥昔(rituximab)、伊馬替尼(imatinib)、吉非替尼(gefitinib)、吉姆單抗奧佐米星(gemtuzumabozogamicin)、硼替佐米(bortezomib)、厄洛替尼(erlotinib)、西妥昔單抗(cetuximab)、貝伐單抗(bevacizumab)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、達沙替尼(dasatinib)、帕尼單抗(panitumumab)、門冬酰胺酶(asparaginase)、維甲酸(tretinoin)、三氧化二砷(arsenictrioxide)、亞葉酸(folinate)、左亞葉酸(levofolinate)、或它們的鹽、或它們的活性代謝物等。其中，優(yōu)選鉑配位化合物類抗癌劑、氟化嘧啶類抗癌劑，特別優(yōu)選奧沙利鉑、氟尿嘧啶或它們的鹽。

作為本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記的對象的抗癌劑，可以列舉奧沙利鉑或其鹽、氟尿嘧啶或其鹽，但在體內(nèi)被代謝轉(zhuǎn)化為奧沙利鉑或氟尿嘧啶的抗癌劑也與奧沙利鉑、氟尿嘧啶同樣為本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記的對象。具體而言，由于已知替加氟(tegaful)、卡培他濱(capecitabine)在體內(nèi)被代謝而轉(zhuǎn)化為氟尿嘧啶，所以代替氟尿嘧啶，替加氟和卡培他濱也是本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記的對象。

在使用本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記判定抗癌劑感受性時，測定檢體中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)即可。在這里，作為檢體，可以列舉來自患有癌的被檢驗者(癌患者)的生物體試樣，例如，可以列舉血液、血清、血漿、尿、腫瘤組織-細胞、腹水、胸水、腦脊液、便、痰等，但特別優(yōu)選血清。

另外，作為本發(fā)明對象的癌，可以列舉以喉癌為代表的唇、口腔和喉癌、以食道癌、胃癌、結(jié)腸-直腸癌等為代表的消化器官癌、以肺癌為代表的呼吸器官和胸腔內(nèi)臟器癌、骨骼及關(guān)節(jié)軟骨癌、皮膚的惡性黑色素瘤、鱗狀細胞癌及其它皮膚癌、以間皮瘤為代表的間皮和軟組織癌、以乳腺癌、子宮癌，卵巢癌為代表的女性性器官癌、以前列腺癌為代表的男性性器官癌、以膀胱癌為代表的尿路癌、以腦腫瘤為代表的眼、腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)癌、甲狀腺和其它內(nèi)分泌腺癌，以非何杰金氏淋巴瘤和淋巴細胞性白血病為代表的淋巴組織、造血組織和關(guān)聯(lián)組織癌、以及以這些癌為原發(fā)病灶的轉(zhuǎn)移組織的癌等，特別是對非小細胞肺癌、小細胞肺癌、宮頸癌、卵巢癌、胃癌、結(jié)腸-直腸癌、鱗狀細胞癌、惡性淋巴瘤能夠適合地利用。

檢體中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的測定方法根據(jù)被測定對象物質(zhì)而適當確定即可，例如能夠利用ce-tofms、氣相色譜-質(zhì)譜(gaschromatography-massspectrometry：gc-ms)等各種質(zhì)量分析裝置、hplc、免疫學測定法、生化學測定法等測定。

關(guān)于β-丙氨酸、glu、lys、n⁶-乙?；嚢彼帷-乙?；B氨酸、γ-glu-cys、β-ala-lys、glu-glu、s-乳酰谷胱甘肽、尸胺、半胱磺酸、反式肉桂酸、s-腺苷高半胱氨酸、腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、精胺、n-乙酰腐胺、dtmp、cmp、ump、gmp、cdp、udp、dctp、ctp、utp、gtp、nadp⁺、atp和/或dgtp、鳥苷、2,3-二磷酸甘油酸、丙酮酸、蘋果酸、月桂酸、6-磷酸葡萄糖酸，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前以及給藥后的癌患者的生物體試樣中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果與抗癌劑給藥前相比，給藥后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度上升，或者在規(guī)定的基準以上，則能夠判定該癌為抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者低于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于谷胱甘肽(gsh)、丁酸、4-甲基吡唑，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果與抗癌劑給藥前相比，給藥后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度上升，或者高于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性，如果在抗癌劑給藥前后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者在規(guī)定的基準以下，則能夠判定該癌為抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于imp，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果與抗癌劑給藥前相比，給藥后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度降低，或者在規(guī)定的基準以下，則能夠判定該癌具有抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者高于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于n-乙酰天冬氨酸，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，為了判定對于抗癌劑的感受性，在抗癌劑給藥前或者給藥后初期階段，這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度具有判斷為低于規(guī)定的標準濃度的濃度的情況下，能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于n-乙酰氨基葡萄糖、3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖、鳥氨酸，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，為了判定對于抗癌劑的感受性，在抗癌劑給藥前或者給藥后初期階段，在這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度具有判斷為高于規(guī)定的標準濃度的濃度的情況下，能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果相比于抗癌劑給藥前，給藥后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度上升，或者在規(guī)定的基準以上，則能夠判定該癌具有抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者低于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

另外，在抗癌劑給藥前或者給藥后初期的階段，這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度具有判斷為低于規(guī)定的標準濃度的濃度的情況下，能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于精氨酸、亞精胺，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果相比于抗癌劑給藥前，給藥后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度上升，或者在規(guī)定的基準以上，則能夠判定該癌具有抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者低于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

另外，在抗癌劑給藥前或者給藥后初期的階段，這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度具有判斷為高于規(guī)定的標準濃度的濃度的情況下，能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于asp、鳥氨酸、n-乙酰基鳥氨酸、β-ala-lys、glu-glu、2-氨基己二酸、γ-氨基丁酸、s-腺苷高半胱氨酸、鳥苷、cmp、ump、1-甲基腺苷、udp、ctp、7-磷酸景天庚酮糖、磷酸二羥丙酮、丙酮酸、蘋果酸、n¹-acetylspermine、異丁胺、乙醇酸，在作為對象的抗癌劑為5-fu時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果相比于抗癌劑給藥前，給藥后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度上升，或者在規(guī)定的基準以上，則能夠判定該癌具有抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者低于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于ser、谷胱甘肽(gsh)、腺苷，在作為對象的抗癌劑為5-fu時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，相比于抗癌劑給藥前，給藥后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度上升，或者高于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者在規(guī)定的基準以下，則能夠判定該癌具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于3-甲基組氨酸、尸胺、prpp、4-甲基吡唑，在作為對象的抗癌劑為5-fu時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果相比于抗癌劑給藥前，給藥后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度降低，或者在規(guī)定的基準以下，則能夠判定該癌具有抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者高于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

關(guān)于半胱氨酸-谷胱甘肽、2,3-二磷酸甘油酸、n-乙酰腐胺、n⁸-乙酰亞精胺、腐胺、亞精胺、6-磷酸葡萄糖酸、nadh、nad⁺，在作為對象的抗癌劑為5-fu時，為了判定對于抗癌劑的感受性，測定來自抗癌劑給藥前和給藥后的癌患者的生物體試樣中這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)濃度，如果相比于抗癌劑給藥前，給藥后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度降低，或者低于規(guī)定的基準，則能夠判定該癌不具有抗癌劑感受性，如果抗癌劑給藥前后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的濃度沒有變化，或者在規(guī)定的基準以上，則能夠判定該癌具有抗癌劑感受性。

在對于作為對象的抗癌劑不具有感受性時，無法期待其藥效，在持續(xù)將這樣的無法期待藥效的抗癌劑給藥的情況下，會有癌的惡化、副作用增大的危險。這樣，本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記不僅對于抗癌劑治療反應性的判定具有很大貢獻，而且對于防止伴隨不能期待藥效的抗癌劑的繼續(xù)給藥帶來的副作用增大也有很大貢獻。

為了實施本發(fā)明的抗癌劑感受性的判定方法，優(yōu)選使用包含用于檢測檢體中的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的操作說明書的試劑盒。該試劑盒中包括這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)測定試劑、測定試劑的使用方法和用于判定抗癌劑感受性有無的基準等。該基準中包括這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的標準濃度或標準比、判斷為高的濃度或比、判斷為低的濃度或比、影響測定結(jié)果的要素及其影響的程度等，這些濃度能夠?qū)γ總€作為對象的抗癌劑進行設(shè)定。使用該基準，能夠如上所述進行判定。

在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，當將抗癌劑曝露后的β-丙氨酸、glu、lys、n⁶-乙?；嚢彼?、n-乙?；B氨酸、γ-glu-cys、β-ala-lys、glu-glu、s-乳酰谷胱甘肽、尸胺、半胱磺酸、反式肉桂酸、s-腺苷高半胱氨酸、腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、精胺、n-乙酰腐胺、dtmp、cmp、ump、gmp、cdp、udp、dctp、ctp、utp、gtp、nadp⁺、atp和/或dgtp、鳥苷、2,3-二磷酸甘油酸、丙酮酸、蘋果酸、月桂酸、6-磷酸葡萄糖酸的表達變動、具體而言將變動的促進或濃度的上升作為指標，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，促進這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)在抗癌劑曝露后的變動或使其濃度上升的物質(zhì)增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，促進抗癌劑曝露后細胞內(nèi)這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的變動或使其濃度上升的物質(zhì)為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，促進荷瘤動物在抗癌劑曝露后這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的變動或使其濃度上升的物質(zhì)為增強該抗癌劑的感受性增強的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，當以抗癌劑曝露后的谷胱甘肽(gsh)、丁酸、4-甲基吡唑的表達變動的有無作為指標，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，減小谷胱甘肽(gsh)、丁酸、4-甲基吡唑在抗癌劑曝露后的變動的物質(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，減小抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的谷胱甘肽(gsh)、丁酸、4-甲基吡唑的變動的物質(zhì)為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，減小荷瘤動物的抗癌劑曝露后的谷胱甘肽(gsh)、丁酸、4-甲基吡唑的變動的物質(zhì)為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，當將抗癌劑曝露后的imp的表達變動、具體而言將變動的促進或濃度的降低作為指標，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，促進imp在抗癌劑曝露后的變動或使?jié)舛冉档偷奈镔|(zhì)增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，促進抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的imp的變動或使?jié)舛冉档偷奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，促進荷瘤動物在抗癌劑曝露后的imp的變動或使?jié)舛冉档偷奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，當將抗癌劑曝露后的n-乙酰天冬氨酸的表達變動、具體而言將濃度的上升作為指標時，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，使n-乙酰天冬氨酸在抗癌劑曝露前的濃度上升的物質(zhì)增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，在抗癌劑曝露前將各種癌細胞株用某種物質(zhì)處理時，使細胞內(nèi)的n-乙酰天冬氨酸的濃度上升的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，使荷瘤動物在抗癌劑曝露前的n-乙酰天冬氨酸的濃度上升的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，如果將抗癌劑曝露后的n-乙酰氨基葡萄糖、3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖、鳥氨酸的表達變動、具體而言將濃度的降低作為指標時，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，使n-乙酰氨基葡萄糖、3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖、鳥氨酸在抗癌劑曝露前的濃度降低的物質(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，在抗癌劑曝露前將各種癌細胞株用某種物質(zhì)處理時，使細胞內(nèi)的n-乙酰氨基葡萄糖、3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖、鳥氨酸的濃度降低的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，使荷瘤動物在抗癌劑曝露前的n-乙酰氨基葡萄糖、3-磷酸甘油酸、1,6-二磷酸果糖、鳥氨酸的濃度降低的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，當將抗癌劑曝露后的天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸的表達變動、具體而言將變動的促進或濃度的上升作為指標時，能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，使天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸在抗癌劑曝露前的濃度上升的物質(zhì)、促進抗癌劑曝露后的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，在抗癌劑曝露前將各種癌細胞株用某種物質(zhì)處理時，使細胞內(nèi)的天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸的濃度上升的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invitro中，促進各種癌細胞株在抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，使荷瘤動物在抗癌劑曝露前的天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸的濃度上升的物質(zhì)、促進抗癌劑曝露后的天冬酰胺、n-乙?；?β-丙氨酸的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為l-ohp時，當將抗癌劑曝露后的精氨酸、亞精胺的表達變動作為指標時，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，使精氨酸、亞精胺在抗癌劑曝露前的濃度降低的物質(zhì)、促進抗癌劑曝露后的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，在抗癌劑曝露前將各種癌細胞株用某種物質(zhì)處理時，使細胞內(nèi)的精氨酸、亞精胺的濃度降低的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invitro中，促進各種癌細胞株在抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的精氨酸、亞精胺的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，使荷瘤動物在抗癌劑曝露前的精氨酸、亞精胺的濃度降低的物質(zhì)、促進抗癌劑曝露后的精氨酸、亞精胺的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

在作為對象的抗癌劑為5-fu時，當將抗癌劑曝露后的asp、鳥氨酸、n-乙酰基鳥氨酸、β-ala-lys、glu-glu、2-氨基己二酸、γ-氨基丁酸、s-腺苷高半胱氨酸、鳥苷、cmp、ump、1-甲基腺苷、udp、ctp、7-磷酸景天庚酮糖、磷酸二羥丙酮、丙酮酸、蘋果酸、n¹-乙酰精胺、異丁胺、乙醇酸的表達變動、具體而言將變動的促進或濃度的上升作為指標時，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，促進這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)在抗癌劑曝露后的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，促進抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，促進荷瘤動物在抗癌劑曝露后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的變動或使?jié)舛壬仙奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為5-fu時，當將抗癌劑曝露后的ser、谷胱甘肽(gsh)、腺苷的表達變動的有無作為指標時，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，減小ser、谷胱甘肽(gsh)、腺苷在抗癌劑曝露后的變動的物質(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，減小抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的ser、谷胱甘肽(gsh)、腺苷的變動的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，減小荷瘤動物在抗癌劑曝露后的ser、谷胱甘肽(gsh)、腺苷的變動的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為5-fu時，當將抗癌劑曝露后的3-甲基組氨酸、尸胺、prpp、4-甲基吡唑的表達變動、具體而言，將變動的促進或濃度的降低作為指標時，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，促進3-甲基組氨酸、尸胺、prpp、4-甲基吡唑在抗癌劑曝露后的變動或使?jié)舛冉档偷奈镔|(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，促進抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的3-甲基組氨酸、尸胺、prpp、4-甲基吡唑的變動或使?jié)舛冉档偷奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，促進荷瘤動物在抗癌劑曝露后的3-甲基組氨酸、尸胺、prpp、4-甲基吡唑的變動或使?jié)舛冉档偷奈镔|(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，在作為對象的抗癌劑為5-fu時，當將抗癌劑曝露后的半胱氨酸-谷胱甘肽、2,3-二磷酸甘油酸、n-乙酰腐胺、n⁸-乙酰亞精胺、腐胺、亞精胺、6-磷酸葡萄糖酸、nadh、nad⁺的表達變動的有無作為指標，就能夠篩選抗癌劑感受性增強劑。即，在invitro或invivo中，減小這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)在抗癌劑曝露后的變動的物質(zhì)，增強抗癌劑感受性。例如，在invitro中，減小抗癌劑曝露后的細胞內(nèi)的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的變動的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。另外，在invivo中，減小荷瘤動物在抗癌劑曝露后的這些代謝系統(tǒng)物質(zhì)的變動的物質(zhì)，為增強該抗癌劑的感受性的物質(zhì)(抗癌劑感受性增強劑)。

另外，當將本發(fā)明的抗癌劑感受性判定標記作為指標時，就能夠篩選抗癌劑。即，在invitro或invivo中，當某種物質(zhì)使抗癌劑感受性判定標記的濃度變動時，該物質(zhì)就為抗癌劑。例如，在invitro中，如果比較使各種癌細胞株在某種物質(zhì)中曝露后、曝露前，抗癌劑感受性判定標記的濃度變動，則該物質(zhì)為抗癌劑。另外，對荷瘤動物將某種物質(zhì)給藥后，如果抗癌劑感受性判定標記的濃度變動，則該物質(zhì)為抗癌劑。如果為能夠期待藥效的抗癌劑，則抗癌劑感受性判定標記的濃度變動早于腫瘤的縮小或者細胞殺傷效果出現(xiàn)，因此，通過以抗癌劑感受性判定標記作為指標進行篩選，以較短時間的研究就能夠判定該物質(zhì)是否可作為抗癌劑使用。從削減抗癌劑的開發(fā)所需的勞力和費用的方面出發(fā)，也能夠期待很大的效果。

當并用這樣得到的抗癌劑感受性增強劑和作為感受性增強對象的抗癌劑時，該抗癌劑的治療效果飛躍性提高。作為組合抗癌劑感受性增強劑和作為感受性增強對象的抗癌劑的方式，既可以是包含這些成分兩者的一個組合物，也可以是分別各個制劑的組合。另外，這些成分也可以是分別的給藥途徑。作為這里使用的作為對象的抗癌劑，與上述同樣，可以列舉奧沙利鉑、環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide)、異環(huán)磷酰胺(ifosfamide)、噻替哌(thiotepa)、美法侖(melphalan)、白消安(busulfan)、尼莫司汀(nimustine)、雷莫司汀(ranimustine)、達卡巴嗪(dacarbazine)、丙卡巴肼(procarbazine)、替莫唑胺(temozolomide)、順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、奈達鉑(nedaplatin)、甲氨蝶呤(methotrexate)、培美曲塞(pemetrexed)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、替加氟/尿嘧啶(tegaful/uracil)、脫氧氟尿苷(doxifluridine)、替加氟/吉美拉西/奧替拉西(tegaful/gimeracil/oteracil)、卡培他濱(capecitabine)、阿糖胞苷(cytarabine)、依諾他濱(enocitabine)、吉西他濱(gemcitabine)、6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine)、氟達拉濱(fuludarabin)、噴司他汀(pentostatin)、克拉屈濱(cladribine)、羥基脲(hydroxyurea)、多柔比星(doxorubicin)、表柔比星(epirubicin)、佐柔比星(daunorubicin)、依達比星(idarubicine)、吡柔比星(pirarubicin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、氨柔比星(amurubicin)、放線菌素d(actinomycind)、博來霉素(bleomycine)、派來霉素(pepleomycin)、絲裂霉素c(mytomycinc)、阿柔比星(aclarubicin)、凈司他丁(zinostatin)、長春新堿(vincristine)、長春地辛(vindesine)、長春堿(vinblastine)、長春瑞濱(vinorelbine)、紫杉醇(paclitaxel)、多西紫杉醇(docetaxel)、依立替康(irinotecan)、依立替康活性代謝物(sn-38)、托泊替康(nogitecan，topotecan)、依托泊苷(etoposide)、潑尼松龍(prednisolone)、地塞米松(dexamethasone)、他莫昔芬(tamoxifen)、托瑞米芬(toremifene)、甲羥孕酮(medroxyprogesterone)、阿那曲唑(anastrozole)、依西美坦(exemestane)、來曲唑(letrozole)、利妥昔(rituximab)、伊馬替尼(imatinib)、吉非替尼(gefitinib)、吉姆單抗奧佐米星(gemtuzumabozogamicin)、硼替佐米(bortezomib)、厄洛替尼(erlotinib)、西妥昔單抗(cetuximab)、貝伐單抗(bevacizumab)、舒尼替尼(sunitinib)、索拉非尼(sorafenib)、達沙替尼(dasatinib)、帕尼單抗(panitumumab)、門冬酰胺酶(asparaginase)、維甲酸(tretinoin)、三氧化二砷(arsenictrioxide)、亞葉酸(folinate)、左亞葉酸(levofolinate)、或它們的鹽、或它們的活性代謝物等。其中，優(yōu)選鉑配位化合物類抗癌劑、氟化嘧啶類抗癌劑，特別優(yōu)選奧沙利鉑、氟尿嘧啶或它們的鹽。

實施例

接著，列舉實施例，進一步詳細地說明本發(fā)明。

實施例1

(1)方法

(a)使用細胞

使用10種人大腸癌細胞株(dld-1、hct15、hct116、ht29、lovo、ls174t、sw480、sw620、sw1116、widr)。hct116、ht29從株式會社益力多本社獲得，dld-1、lovo、sw480、sw1116、widr從大日本住友制藥株式會社獲得，hct15、ls174t從東北大學加齡醫(yī)學研究所醫(yī)用細胞資源中心獲得，sw620從住商醫(yī)藥國際株式會社(summitpharmaceuticalsinternationalcorporation)獲得。

(b)藥劑

l-ohp原末從株式會社益力多本社獲得。

(c)對于l-ohp的感受性的評價

對于各細胞，用mtsassay(celltiter96^tmaqueousonesolutioncellproliferationassay，promega)評價在0～1000μmol/l的l-ohp中曝露48小時后的細胞存活率，算出ic50值(相對于l-ohp未處理，將細胞數(shù)抑制50％的l-ohp濃度)，作為各細胞的l-ohp感受性的指標。

(d)細胞內(nèi)代謝物的采集

對于穩(wěn)定狀態(tài)的各細胞，除去培養(yǎng)基，在冰上用5％甘露醇(4℃)清洗細胞后，立刻添加甲醇(4℃，含有內(nèi)部標準物質(zhì))，由此使酶失活，在－80℃保存。此外，分別準備代謝物提取用的細胞和細胞數(shù)計算用的細胞，進行同樣的處理后進行細胞計數(shù)，用于細胞數(shù)校正。

(e)代謝組(metabolome)樣品的制備

在－80℃保存甲醇溶液中，加入氯仿和miliq水，進行液―液提取，除去夾雜成分。采集含有代謝物的水―甲醇層，使用截止分子量5000da的離心超濾過濾器進行除蛋白后，將濾液減壓干燥，在－80℃保存。在即將測定前用miliq水使其溶解，用于代謝組測定。

(f)代謝組測定

細胞內(nèi)代謝物的網(wǎng)羅式測定使用agilenttechnologies公司的毛細管電泳―飛行時間型質(zhì)譜儀(ce-tofms)進行。以陽離子模式或陰離子模式，將m/z＝50～1000的代謝物一次性進行定量分析。

(g)細胞內(nèi)代謝物量和l-ohp感受性的關(guān)系

關(guān)于通過ce-tofms從各細胞樣品檢測出的峰，對于通過與已知m/z和移動時間的約500個標準品數(shù)據(jù)的對照而鑒定出的代謝物，研究10種人大腸癌細胞中的細胞內(nèi)水平與各自的細胞的l-ohp感受性的關(guān)系。

(2)結(jié)果

(a)10種人大腸癌細胞株的l-ohp感受性的評價

對于10種人大腸癌細胞株(dld-1、hct15、hct116、ht29、lovo、ls174t、sw480、sw620、sw1116、widr)的l-ohp感受性，以通過mts試驗算出的ic50作為指標進行評價。sw480(0.65±0.07μm)、lovo(0.72±0.12μm)和hct116(0.89±0.33μm)顯示高感受性，sw1116(26.42±4.12μm)、ht29(23.92±9.29μm)、widr(17.30±5.24μm)和dld-1(16.95±6.31μm)顯示低感受性(圖1)。

(b)細胞內(nèi)代謝物量和l-ohp感受性的關(guān)系

從10種人大腸癌細胞中提取細胞內(nèi)代謝物，用ce-tofms一次性分析。對于從各樣品檢測出的數(shù)千個峰，與約500個標準品數(shù)據(jù)對照，著眼于在任何一種細胞中都確認檢出并得以鑒定的代謝物。根據(jù)mts試驗的結(jié)果，將10種人大腸癌細胞分成l-ohp感受性較高的上位5種(hct15、hct116、lovo、sw480、sw620)和下位5種(dld-1、ht29、ls174t、sw1116、widr)的2組，比較研究兩組間的細胞內(nèi)代謝物量的差異。其結(jié)果，作為在l-ohp高感受性組和低感受性組之間其細胞內(nèi)水平的差異大的代謝物，得到了n-乙酰氨基葡萄糖(p＝0.0108)、精氨酸(p＝0.0263)、天冬酰胺(p＝0.0794)、3-磷酸甘油酸(p＝0.0201)、n-乙?；?β-丙氨酸(p＝0.0392)、n-乙酰天冬氨酸(p＝0.0529)、1,6-二磷酸果糖(p＝0.1071)(圖2)。

實施例2

(1)方法

(a)使用細胞

實施例1中使用的細胞之中，使用2種人大腸癌細胞株(hct116、dld-1)。這些細胞使用含有10％胎牛血清(invitrogen公司)的doulbecco’smodifiedeagle’smedium(dmem)，用culturedish(組織培養(yǎng)皿)(iwaki)在37℃、5％co2的條件下進行培養(yǎng)。

(b)藥劑

l-ohp原末從株式會社益力多本社獲得。另外，5-fu原末從sigma-aldrich日本株式會社獲得。

(c)l-ohp的曝露和細胞內(nèi)代謝物的采集

對于兩種細胞，通過更換為含有10μmol/l的l-ohp的培養(yǎng)基開始抗癌劑曝露(將使用不含l-ohp的培養(yǎng)基的作為對照組)。在曝露0hr、4hr、12hr、24hr、48hr后，在冰上用5％甘露醇(4℃)清洗細胞，然后立即添加甲醇(4℃，含有內(nèi)部標準物質(zhì))，由此使酶失活，在－80℃保存。此外，分別準備細胞數(shù)計算用的細胞和代謝物提取用的細胞，進行同樣的處理后，進行細胞計數(shù)，用于細胞數(shù)校正。

(d)5-fu的曝露和細胞內(nèi)代謝物的采集

對于兩種細胞，通過更換為包含100μmol/l的5-fu的培養(yǎng)基開始抗癌劑曝露(以不含5-fu的培養(yǎng)基作為對照組)。曝露0hr、4hr、12hr、24hr、48hr后，在冰上用5％甘露醇(4℃)清洗細胞，然后立刻添加甲醇(4℃，含有內(nèi)部標準物質(zhì)含有)，由此使酶失活，在－80℃保存。此外，分別準備細胞數(shù)計算用的細胞和代謝物提取用的細胞，進行同樣的處理后，用于細胞數(shù)校正。

(e)代謝組樣品的制備

在－80℃保存甲醇溶液中，加入氯仿和miliq水，進行液―液提取，除去夾雜成分。采集含有代謝物的水―甲醇層，使用截止分子量5000da的離心超濾過濾器進行除蛋白后，將濾液減壓干燥，在－80℃保存。在即將測定前用miliq水使其溶解，用于代謝組測定。

(f)代謝組測定

細胞內(nèi)代謝物的網(wǎng)羅式測定使用agilenttechnologies公司的毛細管電泳―飛行時間型質(zhì)譜儀(ce-tofms)進行。陽離子性代謝物的網(wǎng)羅式測定中，以毛細管的出口為陰極的方式施加電壓，另外，在陰離子性代謝物的網(wǎng)羅式測定中，以毛細管的出口為陽極的方式施加電壓，一次性對m/z＝50～1000的代謝物進行定量分析。

(2)結(jié)果

使對于l-ohp的感受性不同的2種人大腸癌細胞(高感受性：hct116；低感受性：dld-1)暴露0、4、12、24、48小時的10μml-ohp，提取細胞內(nèi)代謝物后，用ce-tofms對陽離子、陰離子和核苷酸性代謝物進行了一次性分析。對于確認檢出并得以鑒定的約170個代謝物，分析l-ohp曝露后的細胞內(nèi)水平的經(jīng)時變化，結(jié)果，在l-ohp曝露后在低感受性細胞(dld-1)中沒有觀察到大的變動，在高感受性細胞(hct116)中，作為細胞內(nèi)水平大幅上升的代謝物，發(fā)現(xiàn)了腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、精胺、天冬酰胺、β-丙氨酸(圖3～8)。

在l-ohp曝露后的經(jīng)時的變化中，兩種細胞間的差別大的代謝物中，對于β-丙氨酸，特別是在曝露24小時的時刻以后確認了在hct116中的細胞內(nèi)水平的上升。由于β-丙氨酸已知是核酸代謝的分解物，因此用l-ohp高感受性細胞(hct116)和低感受性細胞(dld-1)對l-ohp24小時曝露后的核酸代謝的變動和與核酸代謝關(guān)系密切的代謝物的變動進行比較分析。其結(jié)果，明確了在l-ohp高感受性細胞中，核酸代謝途徑上的多個代謝物的細胞內(nèi)水平上升(圖9)。特別是dtmp、cmp、ump、gmp、cdp、udp、dctp、ctp、utp、gtp、nadp⁺、atp和/或dgtp在hct116中確認了細胞內(nèi)水平的顯著上升，在dld-1中，沒有觀察到像hct116那樣的細胞內(nèi)水平的顯著變動，或者與對照組相比，細胞內(nèi)水平降低。關(guān)于這些代謝物，在兩種細胞中比較24小時l-ohp曝露后的相對于對照組的細胞內(nèi)水平的變動時，其比率(hct116/dld-1)均為1.2以上。

另一方面，imp在dld-1中觀察到l-ohp曝露后細胞內(nèi)水平的顯著上升，但在hct116中，細胞內(nèi)水平降低，在兩細胞中比較24小時l-ohp曝露后的相對于對照組的細胞內(nèi)水平的變動時，其比率(hct116/dld-1)為0.26，極低。

以上述的比率小于0.8、或1.2以上作為基準，篩選核酸代謝上的物質(zhì)，結(jié)果，作為抗癌劑感受性判定標記，發(fā)現(xiàn)了dtmp、cmp、ump、imp、gmp、cdp、udp、dctp、ctp、utp、gtp、nadp⁺、atp和/或dgtp。

在l-ohp曝露后的經(jīng)時變化中兩種細胞間差大的代謝物，腐胺、n¹-乙酰精胺、n⁸-乙酰亞精胺、精胺和在實施例1中發(fā)現(xiàn)的精氨酸屬于多胺代謝途徑，因此，在實施例1、2中得到的數(shù)據(jù)中，著眼于與多胺途徑相關(guān)的代謝物的數(shù)據(jù)。其結(jié)果，作為在l-ohp高感受性組和低感受性組之間其細胞內(nèi)水平的差異大的代謝物，得到了鳥氨酸、亞精胺(圖10)。此外，在圖11中，表示了圖10的圖表的觀察方法。

此外，用l-ohp高感受性細胞(hct116)和低感受性細胞(dld-1)對l-ohp曝露24小時后的其他代謝物的變動進行比較分析。其結(jié)果，作為在l-ohp高感受性細胞中觀察到l-ohp曝露后細胞內(nèi)水平的顯著上升的代謝物，發(fā)現(xiàn)了glu、arg、lys、n⁶-乙?；嚢彼帷-乙?；?β-丙氨酸、n-乙酰基鳥氨酸、γ-glu-cys、β-ala-lys、glu-glu、s-乳酰谷胱甘肽、尸胺、半胱磺酸、反式肉桂酸、s-腺苷高半胱氨酸、亞精胺、n-乙酰腐胺、鳥苷、2,3-二磷酸甘油酸、丙酮酸、蘋果酸、月桂酸、6-磷酸葡萄糖酸。另外，作為在l-ohp低感受性細胞中沒有觀察到l-ohp曝露后細胞內(nèi)水平的顯著上升的代謝物，發(fā)現(xiàn)了谷胱甘肽(gsh)、丁酸、4-甲基吡唑(圖12)。

對于5-fu感受性不同的2種人大腸癌細胞(高感受性：hct-116；低感受性：dld-1)，著眼于5-fu曝露24小時后的細胞內(nèi)代謝組數(shù)據(jù)，選出5-fu曝露后觀察到變動的代謝物(圖13)。其結(jié)果，作為在5-fu高感受性細胞中觀察到5-fu曝露后細胞內(nèi)水平的顯著上升的代謝物，發(fā)現(xiàn)了asp、鳥氨酸、n-乙?；B氨酸、β-ala-lys、glu-glu、2-氨基己二酸、γ-氨基丁酸、s-腺苷高半胱氨酸、鳥苷、cmp、ump、1-甲基腺苷、udp、ctp、7-磷酸景天庚酮糖、磷酸二羥丙酮、丙酮酸、蘋果酸、n¹-乙酰精胺、異丁胺、乙醇酸。另外，作為在5-fu低感受性細胞中觀察到5-fu曝露后細胞內(nèi)水平顯著上升的代謝物，發(fā)現(xiàn)了ser、谷胱甘肽(gsh)、腺苷。另外，作為在5-fu高感受性細胞中觀察到5-fu曝露后細胞內(nèi)水平的顯著降低的代謝物，發(fā)現(xiàn)了3-甲基組氨酸、尸胺、prpp、4-甲基吡唑。此外，作為在5-fu低感受性細胞中確認了5-fu曝露后細胞內(nèi)水平顯著降低的代謝物，發(fā)現(xiàn)了半胱氨酸-谷胱甘肽、2,3-二磷酸甘油酸、n-乙酰腐胺、n⁸-乙酰亞精胺、腐胺、亞精胺、6-磷酸葡萄糖酸、nadh、nad⁺。