本發(fā)明涉及發(fā)中藥微生物發(fā)酵制劑，具體來(lái)說(shuō)是一種中藥微生物發(fā)酵制劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

心臟病是一類比較常見(jiàn)的循環(huán)系統(tǒng)疾病。循環(huán)系統(tǒng)由心臟、血管和調(diào)節(jié)血液循環(huán)的神經(jīng)體液組織構(gòu)成，循環(huán)系統(tǒng)疾病也成為心血管病，能顯著的影響患者的勞動(dòng)力。心臟病包括風(fēng)濕性心臟病、先天性心臟病、高血壓性心臟病、冠心病等各種心臟病。中醫(yī)認(rèn)為“心主血，肺主力”。近些年來(lái)心臟病發(fā)病比例越來(lái)越高，儼然成為危害全球健康的殺手之一。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種治療心臟病的發(fā)酵中藥制劑，主治心臟病，同時(shí)可治療因心臟病引發(fā)的并發(fā)癥。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：

一種中藥微生物發(fā)酵制劑：將側(cè)耳與中藥原料藥混合發(fā)酵所得，所述中藥原料藥按重量份數(shù)計(jì)：葛根10-100份，蠶蛹10-100份，三七10-100份，川穹10-100份，銀杏葉10-100份，丹參10-100份，西紅花10-100份，石菖蒲10-100份，地龍10-100份，黃芪10-100份，乳香6-60份，沒(méi)藥6-60份，當(dāng)歸6-60份，黑木耳6-60份，桃仁6-60份，澤瀉6-60份，槐花6-60份，木香6-60份，桂枝6-60份，赤芍6-60份，降香6-60份，毛冬青4-40份，郁金4-40份，牛膝4-40份，桑枝4-40份，蒲黃4-40份，琥珀4-40份，黃連2-20份，細(xì)草2-20份，朱砂2-20份，冰片2-20份，珍珠母2-20份，人工牛黃2-20份，人參2-20份，龍骨2-20份，麥冬2-20份，甘草2-20份，地黃2-20份，紅花2-20份，水蛭2-20份；側(cè)耳占中藥原料質(zhì)量的5％-10％；

所述側(cè)耳為pleurotussp.，已于2014年4月14日保藏在“中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心”，保藏編號(hào)為cgmccno.9060。

側(cè)耳已在cn105412739a(申請(qǐng)?zhí)?01410480058.0,申請(qǐng)日2014年09月18日)中公布。

本發(fā)明中藥原料藥按重量份數(shù)計(jì)優(yōu)選為：葛根50-100份，蠶蛹50-100份，三七50-100份，川穹50-100份，銀杏葉50-100份，丹參50-100份，西紅花50-100份，石菖蒲50-100份，地龍50-100份，黃芪50-100份，乳香30-60份，沒(méi)藥30-60份，當(dāng)歸30-60份，黑木耳30-60份，桃仁30-60份，澤瀉30-60份，槐花30-60份，木香30-60份，桂枝30-60份，赤芍30-60份，降香30-60份，毛冬青20-40份，郁金20-40份，牛膝20-40份，桑枝20-40份，蒲黃20-40份，琥珀20-40份，黃連10-20份，細(xì)草10-20份，朱砂10-20份，冰片10-20份，珍珠母10-20份，人工牛黃10-20份，人參10-20份，龍骨10-20份，麥冬10-20份，甘草10-20份，地黃10-20份，紅花10-20份，水蛭10-20份。

本發(fā)明中藥原料藥按重量計(jì)最優(yōu)選為：葛根100g，蠶蛹100g，三七100g，川穹100g，銀杏葉100g，丹參100g，西紅花100g，石菖蒲100g，地龍100g，黃芪100g，乳香60g，沒(méi)藥60g，當(dāng)歸60g，黑木耳60g，桃仁60g，澤瀉60g，槐花60g，木香60g，桂枝60g，赤芍60g，降香60g，毛冬青40g，郁金40g，牛膝40g，桑枝40g，蒲黃40g，琥珀40g，黃連20g，細(xì)草20g，朱砂20g，冰片20g，珍珠母20g，人工牛黃20g，人參20g，龍骨20g，麥冬20g，甘草20g，地黃20g，紅花20g，水蛭20g。

所述中藥微生物發(fā)酵制劑的制備方法為:

(1)按重量份數(shù)計(jì)，取葛根10-100份，蠶蛹10-100份，三七10-100份，川穹10-100份，銀杏葉10-100份，丹參10-100份，西紅花10-100份，石菖蒲10-100份，地龍10-100份，黃芪10-100份，乳香6-60份，沒(méi)藥6-60份，當(dāng)歸6-60份，黑木耳6-60份，桃仁6-60份，澤瀉6-60份，槐花6-60份，木香6-60份，桂枝6-60份，赤芍6-60份，降香6-60份，毛冬青4-40份，郁金4-40份，牛膝4-40份，桑枝4-40份，蒲黃4-40份，琥珀4-40份，黃連2-20份，細(xì)草2-20份，朱砂2-20份，冰片2-20份，珍珠母2-20份，人工牛黃2-20份，人參2-20份，龍骨2-20份，麥冬2-20份，甘草2-20份，地黃2-20份，紅花2-20份，水蛭2-20份的中藥原料藥混合，磨粉至數(shù)目大于100目,得到中藥混合細(xì)粉,待用；

(2)取步驟(1)的中藥原料藥與側(cè)耳混合發(fā)酵后,得到發(fā)酵物,將發(fā)酵物干燥、磨成細(xì)粉即得到中藥微生物發(fā)酵制劑；

所述步驟(2)側(cè)耳接種量為中藥原料的5％-10％，并在溫度為37-65℃、濕度為80％-98％條件下發(fā)酵1-7天，得到中藥微生物發(fā)酵制劑。

所述側(cè)耳(pleurotussp.)，已于2014年4月14日保藏在“中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心”，保藏編號(hào)為cgmccno.9060。

所述中藥微生物發(fā)酵制劑可制成散劑、片劑、丸劑、膠丸、膠囊劑、乳劑、糖漿或口服液。

所述中藥微生物發(fā)酵制劑的應(yīng)用：作為制備預(yù)防或治療治療心臟病、冠心病、心肌炎、高血壓性心臟病的藥物的應(yīng)用。

本發(fā)明的發(fā)酵中藥制劑是參照君臣佐使的中藥組方原則所設(shè)計(jì)的現(xiàn)代中藥。采用的原料藥的功效如下所示：

葛根中的葛根素能顯著增加缺血組織的血液供應(yīng)量，有b1受體阻斷作用，可明顯減慢心瘁，降低心肌氧耗量，能減輕心肌缺血，限制和縮小心肌梗塞范圍，抗快速心律失常，能降低膽固醇和血粘度，抑制血小板聚集，改善微循環(huán)。

川穹中的川穹嗪能擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈，增加冠狀動(dòng)脈血流量，改善心肌的血氧供應(yīng)，并降低心肌的耗氧量；川穹嗪可擴(kuò)張腦血管，降低血管阻力，顯著增加腦及肢體血流量，改善微循環(huán)。

丹參和三七結(jié)合用于治療冠心病、心絞痛等心血管疾病。研究表明，丹參和三七具有擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈血管、增加動(dòng)脈血流量、激活超氧化歧化酶等藥理功效。

上述中藥中葛根，蠶蛹，三七，川穹，銀杏葉，丹參，西紅花，石菖蒲，地龍，黃芪，作為主藥，其他藥物作為輔藥；主要和輔藥混合可更有效的提高各自成分的作用；同時(shí)可將輔藥中各類成分按照6:4:2的質(zhì)量比例混合，即輔藥1：輔藥2：輔藥3為6:4:2，其中輔藥1為乳香，沒(méi)藥，當(dāng)歸，黑木耳，桃仁，澤瀉，槐花，木香，桂枝，赤芍，降香；輔藥2為毛冬青，郁金，牛膝，桑枝，蒲黃，琥珀，；輔藥3為黃連，細(xì)草，朱砂，冰片，珍珠母，人工牛黃，人參，龍骨，麥冬，甘草，地黃，紅花，水蛭；將中藥按照10:6:4:2的科學(xué)配伍比例，可有效將各中藥成分間的相輔相成作用發(fā)揮極致，進(jìn)而再將微生物在其中進(jìn)行發(fā)酵，所得發(fā)酵物在經(jīng)側(cè)耳發(fā)酵后吸取中藥同時(shí)發(fā)酵產(chǎn)生的有益物質(zhì)能夠更好的作為預(yù)防或治療心臟病、冠心病、心肌炎、高血壓性心臟病,同時(shí)可治療因心臟病引發(fā)的并發(fā)癥,治療胸悶氣短,呼吸困難,全身水腫,四肢無(wú)力等癥狀。

本發(fā)明的有益效果在于:

1.本發(fā)明具有清熱,降火,排毒功效。葛根所含的黃酮類化合物有降血脂作用,能降低血清膽固醇,降低甘油三脂,安神活血化瘀,行氣止痛,固本培元,平衡氣血有很好功效。

2.本發(fā)明提供的治療心臟病的發(fā)酵中藥制劑，在治療、治愈心臟病方面有很好的效果，同時(shí)，對(duì)因心臟病引起的并發(fā)癥也有很好的療效，在治療心臟病的同時(shí)，治愈并發(fā)癥，可長(zhǎng)期單獨(dú)或者配合其他藥物使用，無(wú)毒副作用，對(duì)身體機(jī)能的恢復(fù)有很好的效果，配制方法操作簡(jiǎn)單，可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例用于進(jìn)一步詳細(xì)描述本發(fā)明，但不構(gòu)成對(duì)本發(fā)明的限制，本發(fā)明的具體數(shù)據(jù)絕非僅限于這些實(shí)施例。

一、藥物制備

實(shí)施例1

1.按重量數(shù)計(jì)，取葛根100g，蠶蛹100g，三七100g，川穹100g，銀杏葉100g，丹參100g，西紅花100g，石菖蒲100g，地龍100g，黃芪100g，乳香60g，沒(méi)藥60g，當(dāng)歸60g，黑木耳60g，桃仁60g，澤瀉60g，槐花60g，木香60g，桂枝60g，赤芍60g，降香60g，毛冬青40g，郁金40g，牛膝40g，桑枝40g，蒲黃40g，琥珀40g，黃連20g，細(xì)草20g，朱砂20g，冰片20g，珍珠母20g，人工牛黃20g，人參20g，龍骨20g，麥冬20g，甘草20g，地黃20g，紅花20g，水蛭20g的中藥原料混合粉碎，過(guò)100目篩，制成中藥混合細(xì)粉,待用。

2.側(cè)耳活化：采用接種環(huán)挑取側(cè)耳菌絲接于pda固體培養(yǎng)基,在20℃、培養(yǎng)120小時(shí)，得到側(cè)耳純培養(yǎng)單菌落。

3.將上述活化的側(cè)耳接種到步驟1中藥原料中，并在溫度為65℃、濕度為98％條件下發(fā)酵7天，得到發(fā)酵產(chǎn)物，活化的側(cè)耳占中藥原料質(zhì)量的10％。

4.上述發(fā)酵產(chǎn)物烘干、粉碎，過(guò)100目篩，所得細(xì)粉為中藥微生物發(fā)酵制劑。

所述側(cè)耳(pleurotussp.)，已于2014年4月14日保藏在“中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心”，保藏編號(hào)為cgmccno.9060，保藏單位地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)。

實(shí)施例2

1.按重量份數(shù)計(jì),取葛根10份，蠶蛹10份，三七10份，川穹10份，銀杏葉10份，丹參10份，西紅花10份，石菖蒲10份，地龍10份，黃芪10份，乳香6份，沒(méi)藥6份，當(dāng)歸6份，黑木耳6份，桃仁6份，澤瀉6份，槐花6份，木香6份，桂枝6份，赤芍6份，降香6份，毛冬青4份，郁金4份，牛膝4份g，桑枝4份g，蒲黃4份g，琥珀4份g，黃連2份g，細(xì)草2份g，朱砂2份g，冰片2份g，珍珠母2份g，人工牛黃2份g，人參2份g，龍骨2份g，麥冬2份g，甘草2份g，地黃2份g，紅花2份g，水蛭2份g，混合粉碎，過(guò)100目篩，混勻制成中藥混合細(xì)粉。

2.側(cè)耳活化：采用接種環(huán)挑取側(cè)耳菌絲接于pda固體培養(yǎng)基,在30℃、培養(yǎng)100小時(shí)，得到側(cè)耳純培養(yǎng)單菌落。

3.將上述活化的側(cè)耳接種到步驟1中藥原料中，并在溫度為60℃、濕度為98％條件下發(fā)酵7天，得到發(fā)酵產(chǎn)物，活化的側(cè)耳占中藥原料質(zhì)量的5％。

4.上述發(fā)酵產(chǎn)物烘干、粉碎，過(guò)100目篩，所得細(xì)粉為中藥微生物發(fā)酵制劑。

所述側(cè)耳(pleurotussp.)，已于2014年4月14日保藏在“中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心”，保藏編號(hào)為cgmccno.9060，保藏單位地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)。

實(shí)施例3

1.按重量數(shù)計(jì),取葛根50g，蠶蛹50g，三七50g，川穹50g，銀杏葉50g，丹參50g，西紅花50g，石菖蒲50g，地龍50g，黃芪50g，乳香30g，沒(méi)藥30g，當(dāng)歸30g，黑木耳30g，桃仁30g，澤瀉30g，槐花30g，木香30g，桂枝30g，赤芍30g，降香30g，毛冬青100g，郁金100g，牛膝100g，桑枝100g，蒲黃100g，琥珀100g，黃連10g，細(xì)草10g，朱砂10g，冰片10g，珍珠母10g，人工牛黃10g，人參10g，龍骨10g，麥冬10g，甘草10g，地黃10g，紅花10g，水蛭10g,混合粉碎，過(guò)100目篩，混勻制成中藥混合細(xì)粉。

2.側(cè)耳活化：采用接種環(huán)挑取側(cè)耳菌絲接于pda固體培養(yǎng)基,在35℃、培養(yǎng)70小時(shí)，得到側(cè)耳純培養(yǎng)單菌落。

3.將上述活化的側(cè)耳接種到步驟1中藥原料中，并在溫度為65℃、濕度為90％條件下發(fā)酵5天，得到發(fā)酵產(chǎn)物，活化的側(cè)耳占中藥原料質(zhì)量的8％。

4.上述發(fā)酵產(chǎn)物烘干、粉碎，過(guò)100目篩，所得細(xì)粉為中藥微生物發(fā)酵制劑。

所述側(cè)耳(pleurotussp.)，已于2014年4月14日保藏在“中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心”，保藏編號(hào)為cgmccno.9060，保藏單位地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)。

二、臨床前試驗(yàn)

急性毒性試驗(yàn)(小白鼠最大耐受量)：

觀察本實(shí)驗(yàn)提供的中藥微生物發(fā)酵制劑以小白鼠所能接受的最大劑量灌胃給藥產(chǎn)生的毒性反應(yīng)和死亡情況，測(cè)定小白鼠的最大耐受劑量，為臨床用藥的安全性體統(tǒng)動(dòng)物急性毒性實(shí)驗(yàn)參考。

受試藥物為上述實(shí)施例1制備的散劑，將其用蒸餾水配制成37.5％濃度(g/ml)供試驗(yàn)用。受試動(dòng)物為昆明種封閉群小白鼠，體重18-22g，由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：遼實(shí)條合字1號(hào)與遼實(shí)質(zhì)合字008。

(1)取小白鼠20只，雌雄各半，禁食不禁水17小時(shí)，稱體重；

(2)按劑量1ml/20gbw的容積24小時(shí)內(nèi)給藥兩次，間隔8小時(shí)，相當(dāng)每次劑量為18.75g/kg，日累積劑量為37.5g/kg，給藥后常規(guī)飼養(yǎng)，觀察7天；

結(jié)果受試動(dòng)物健康，未發(fā)現(xiàn)受試動(dòng)物死亡或由藥物中毒引起的異常變化。即表明本發(fā)明提供的制劑小白鼠灌胃給藥的最大耐受量大于或等于37.5g/kg·日，大于或等于臨床承認(rèn)每日試用量0.2g/kg·日的187.5倍，參照中藥急性毒性實(shí)驗(yàn)要求(中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部：新藥審批辦法《有關(guān)中藥部分的修訂和補(bǔ)充規(guī)定》，1992年9月1日起施行)，臨床試用4g/次，日服2-3次是安全的。

三、臨床療效

病例1：胡某，男，43歲，心臟病癥狀為心臟有雜音,心率失常,心慌氣短。服用本發(fā)明中藥治療2個(gè)月后，心慌氣短癥狀消失,后又連續(xù)治療3個(gè)月后癥狀基本消失，至今無(wú)復(fù)發(fā)。

病例2：宋某，女，59歲，患心臟病3年,服用本發(fā)明中藥治療3個(gè)月后見(jiàn)效，又連續(xù)治療6個(gè)月后身體逐漸康復(fù)，呼吸、活動(dòng)均有明顯改善。

病例3：李某，女，50歲,經(jīng)常感到胸悶,心慌,呼吸困難,服用本發(fā)明中藥后胸悶減輕,呼吸通暢,連續(xù)服用本發(fā)明的藥物后,到醫(yī)院檢測(cè)一切正常,隨訪至今沒(méi)有復(fù)發(fā)。

綜上所述，本發(fā)明所述發(fā)酵微生物中藥制劑對(duì)心臟病、心臟病、冠心病、心肌炎、高血壓性心臟病患者治愈率很高，效果非常明顯，且無(wú)毒副作用，用藥方便，安全可靠。