本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種治療兔瘟病的中藥注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
兔子是哺乳類兔形目、食草性脊椎動(dòng)物，兔子性格溫順、惹人喜愛(ài)、是一種很受歡迎的動(dòng)物。兔肉蛋白質(zhì)含量高，脂肪少，膽固醇含量低，肉質(zhì)細(xì)嫩味美，容易消化，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高。如果長(zhǎng)期吃兔肉，可預(yù)防冠心病、動(dòng)脈硬化等疾病，因此兔肉成為了國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)上的暢銷食品。我國(guó)食用兔肉、飼養(yǎng)兔子的歷史悠久。兔毛是高級(jí)紡織工業(yè)原料，制品輕軟美觀，吸濕性好，保溫率強(qiáng)。兔毛的制品只要有兔毛衫、兔毛背心、帽子、圍巾、披肩、婦女手套、滑雪衫等，兔皮質(zhì)地輕軟、可加工成褥子、服裝、帽子、皮領(lǐng)等制品，還可以做壁毯等工藝品。近年來(lái)，養(yǎng)兔經(jīng)濟(jì)效益非?？捎^，養(yǎng)兔產(chǎn)業(yè)也逐步擴(kuò)大。
兔瘟又稱兔病毒性出血癥，是養(yǎng)殖戶最大的風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，是兔瘟病毒感染引起的一種急性傳染病，對(duì)3月齡以上的青年和成年家兔危害很大，乳兔一般不發(fā)病。常在初春暴發(fā)流行，一旦發(fā)生，迅速波及全群，死亡率在95％以上。最急性型病兔只見(jiàn)突然倒地，尖叫抽筋而死。多數(shù)病兔體溫升高41℃以上，精神萎靡，食欲減退，呼吸急促，四肢呈游泳狀，有的發(fā)生驚厥，鼻中流出泡沫性血液，多在12—36小時(shí)內(nèi)抽搐而死。該病目前尚無(wú)特效藥物治療。只能接種兔瘟疫苗進(jìn)行預(yù)防，1-2月齡兔肌注1毫升，成年兔肌注2毫升兔瘟疫苗，即可有效預(yù)防該病發(fā)生。一旦有兔發(fā)病，立即隔離觀察，并對(duì)全群進(jìn)行“緊急預(yù)防接種兔瘟疫苗”，也能收到較好效果。但采用注射兔瘟疫苗或化學(xué)藥物治療，其又不能滿足現(xiàn)代人對(duì)兔肉產(chǎn)品綠色安全的需要。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為解決上述問(wèn)題，本發(fā)明針對(duì)兔瘟病理病癥的研究，通過(guò)中獸醫(yī)辨證施治和現(xiàn)代中藥制劑相結(jié)合，提出了一種治療兔瘟病的中藥注射液及其制備方法，該中藥注射液由香菇、防風(fēng)、黃芪、茯苓、白術(shù)、甘草、梔子提取制備而成，該中藥注射液用于治療兔瘟病療效顯著，見(jiàn)效快，能滿足實(shí)際規(guī)劃化生產(chǎn)的需要。
具體地：一種治療兔瘟病的中藥注射液，按重量份計(jì)，由香菇10-16份、防風(fēng)7-9份、黃芪22-26份、茯苓5-11份、白術(shù)6-8份、甘草13-17份、梔子8-12份制成；
更具體地：一種治療兔瘟病的中藥注射液，按重量份計(jì)，由香菇13份、防風(fēng)8份、黃芪24份、茯苓13份、白術(shù)7份、甘草15份、梔子10份制成；
本發(fā)明還提供了一種治療兔瘟病的中藥注射液的制備方法，包括以下步驟，
(1)取香菇10-16份、防風(fēng)7-9份、黃芪22-26份、茯苓5-11份、白術(shù)6-8份、甘草13-17份、梔子8-12份粉碎成40-60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6-10倍量75％-95％的乙醇浸泡30-40分鐘后超聲振蕩提取，時(shí)間20-40分鐘，頻率30-50hz，提取2-3次，合并提取液，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6-10倍量的水，攪拌，靜置，過(guò)濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10-20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，得到中藥提取物。
(2)將步驟(1)制得的中藥提取物加4-6倍量的水溶解，用無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0.5-2ml過(guò)柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1-5倍柱體積0.05-0.2％naoh溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到藥粉。
(3)稱取步驟(2)制得的藥粉加入攪拌裝置取注射用水100ml溶解，加0.5g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫50分鐘，0.45μm膜過(guò)濾，加入80ml注射液用水，加入氯化鉀0.03g、氯化鈣0.08g和氯化鈉0.149g，再補(bǔ)足注射液水制注射液為200ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7.5，加0.3g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫30分鐘，0.22μm膜過(guò)濾，灌裝，每支10ml，即為注射液制劑。
根據(jù)上述治療兔瘟病的中藥注射液的制備方法，所述的步驟(1)是取香菇13份、防風(fēng)8份、黃芪24份、茯苓13份、白術(shù)7份、甘草15份、梔子10份粉碎成50目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入8倍量85％的乙醇浸泡35分鐘后超聲振蕩提取，時(shí)間30分鐘，頻率40hz，提取3次，合并提取液，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過(guò)濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心15分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，得到中藥提取物。
根據(jù)上述治療兔瘟病的中藥注射液的制備方法，所述的步驟(2)是將步驟
(1)制得的中藥提取物加5倍量的水溶解，用無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0.1ml過(guò)柱，用3倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用3倍柱體積0.1％naoh溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到藥粉。
本發(fā)明所述的治療兔瘟病的中藥注射液在應(yīng)用時(shí)，是對(duì)病兔進(jìn)行靜脈注射，每次注射10ml，每日一次，連續(xù)注射3天即可治愈。
本發(fā)明的有益效果為：
(1)本發(fā)明通過(guò)中獸醫(yī)辯證施治，篩選出以香菇、防風(fēng)、黃芪、茯苓、白術(shù)、甘草、梔子的中藥配方，其用于治療兔瘟病顯著非常顯著，且無(wú)任何毒副作用，對(duì)兔的采食無(wú)明顯負(fù)面影響，提高兔的養(yǎng)殖成活率，有利于增加養(yǎng)兔戶的收益。
(2)本發(fā)明采用將中藥組方通過(guò)提取、過(guò)無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾、再過(guò)聚酰胺柱，將提取物制成注射液，其起效快，非常適宜兔瘟病情(發(fā)病突然、致死時(shí)間短)的控制。
本發(fā)明為進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的有益效果，還列舉了如下試驗(yàn)，旨在說(shuō)明本發(fā)明的，絕僅限本發(fā)明保護(hù)范圍:
試驗(yàn)例1：本發(fā)明治療兔瘟病中藥注射液藥效學(xué)考察：
于2016年12月，在銅仁市萬(wàn)山區(qū)令楊農(nóng)牧發(fā)展有限公司養(yǎng)殖場(chǎng)，臨床診斷為：兔瘟病，表現(xiàn)為：精神不振，被毛粗亂，迅速消瘦，體溫升高至41℃以上，食欲減退或廢絕，飲欲增加，死前突然興奮，尖叫幾聲便倒地死亡；選250只隨機(jī)分為5組，每組50只；
實(shí)驗(yàn)組1-5：分別給病兔靜脈注射本發(fā)明實(shí)施例1-5制得的中藥注射劑，每次注射10ml，一日1次，連續(xù)注射3天；
藥物對(duì)照組：給病兔灌胃給藥兔瘟康，每日每只0.2g，連續(xù)服用6日；
同等條件進(jìn)行正常飲食飲水，停藥觀察15天，試驗(yàn)結(jié)束后，統(tǒng)計(jì)治愈率及死亡率，統(tǒng)計(jì)方法：治愈率＝治愈病兔數(shù)/兔總數(shù)*100％；死亡率＝死亡兔數(shù)/兔總數(shù)*100％；試驗(yàn)結(jié)果如下表1：
表1：本發(fā)明制得的治療兔瘟病中藥注射液藥效學(xué)考察結(jié)果：
試驗(yàn)結(jié)果表明：本發(fā)明制得的中藥注射液用于治療兔瘟病，其治愈率與藥物對(duì)照組比較,其治愈率高于藥物對(duì)照組的76％；且試驗(yàn)組2-4治愈率顯著高于試驗(yàn)組1低組份配量組，而試驗(yàn)組5為高組份配量組，配量增加其藥效并未增加，因此，本發(fā)明治療兔瘟病中藥注射液配方優(yōu)選由香菇10-16份、防風(fēng)7-9份、黃芪22-26份、茯苓5-11份、白術(shù)6-8份、甘草13-17份、梔子8-12份；例外，試驗(yàn)表明本發(fā)明制得的治療兔瘟病中藥注射液，起效快，注射后15min，病兔情況即得到控制，對(duì)重癥病兔的急救，有積極的效果。
具體實(shí)施方式：
實(shí)施例1：治療兔瘟病的中藥注射液的制備(低組分)
(1)取香菇9g、防風(fēng)6g、黃芪21g、茯苓4g、白術(shù)5g、甘草12g、梔子7g粉碎成40目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6倍量75％的乙醇浸泡30分鐘后超聲振蕩提取，時(shí)間20分鐘，頻率30hz，提取2次，合并提取液，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6倍量的水，攪拌，靜置，過(guò)濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，得到中藥提取物。
(2)將步驟(1)制得的中藥提取物加4倍量的水溶解，用無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0.5ml過(guò)柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1倍柱體積0.05％naoh溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到藥粉。
(3)稱取步驟(2)制得的藥粉加入攪拌裝置取注射用水100ml溶解，加0.5g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫50分鐘，0.45μm膜過(guò)濾，加入80ml注射液用水，加入氯化鉀0.03g、氯化鈣0.08g和氯化鈉0.149g，再補(bǔ)足注射液水制注射液為200ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7.5，加0.3g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫30分鐘，0.22μm膜過(guò)濾，灌裝，每支10ml，即為注射液制劑。
實(shí)施例2：治療兔瘟病的中藥注射液的制備
(1)取香菇10g、防風(fēng)7g、黃芪22g、茯苓5g、白術(shù)6g、甘草13g、梔子8g粉碎成40目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入6倍量75％的乙醇浸泡30分鐘后超聲振蕩提取，時(shí)間20分鐘，頻率30hz，提取2次，合并提取液，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入6倍量的水，攪拌，靜置，過(guò)濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心10分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，得到中藥提取物。
(2)將步驟(1)制得的中藥提取物加4倍量的水溶解，用無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒0.5ml過(guò)柱，用1-5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1倍柱體積0.05％naoh溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到藥粉。
(3)稱取步驟(2)制得的藥粉加入攪拌裝置取注射用水100ml溶解，加0.5g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫50分鐘，0.45μm膜過(guò)濾，加入80ml注射液用水，加入氯化鉀0.03g、氯化鈣0.08g和氯化鈉0.149g，再補(bǔ)足注射液水制注射液為200ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7.5，加0.3g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫30分鐘，0.22μm膜過(guò)濾，灌裝，每支10ml，即為注射液制劑。
實(shí)施例3：治療兔瘟病的中藥注射液的制備
(1)取香菇13g、防風(fēng)8g、黃芪24g、茯苓8g、白術(shù)7g、甘草15g、梔子10g粉碎成50目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入8倍量85％的乙醇浸泡35分鐘后超聲振蕩提取，時(shí)間30分鐘，頻率40hz，提取3次，合并提取液，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入8倍量的水，攪拌，靜置，過(guò)濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心15分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，得到中藥提取物。
(2)將步驟(1)制得的中藥提取物加5倍量的水溶解，用無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒1ml過(guò)柱，用3倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用1-5倍柱體積0.1％naoh溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到藥粉。
(3)稱取步驟(2)制得的藥粉加入攪拌裝置取注射用水100ml溶解，加0.5g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫50分鐘，0.45μm膜過(guò)濾，加入80ml注射液用水，加入氯化鉀0.03g、氯化鈣0.08g和氯化鈉0.149g，再補(bǔ)足注射液水制注射液為200ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7.5，加0.3g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫30分鐘，0.22μm膜過(guò)濾，灌裝，每支10ml，即為注射液制劑。
實(shí)施例4：治療兔瘟病的中藥注射液的制備
(1)取香菇16g、防風(fēng)9g、黃芪26g、茯苓11g、白術(shù)8g、甘草17g、梔子12g粉碎成60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入10倍量95％的乙醇浸泡40分鐘后超聲振蕩提取，時(shí)間40分鐘，頻率50hz，提取3次，合并提取液，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入10倍量的水，攪拌，靜置，過(guò)濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，得到中藥提取物。
(2)將步驟(1)制得的中藥提取物加6倍量的水溶解，用無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒2ml過(guò)柱，用5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用5倍柱體積0.2％naoh溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到藥粉。
(3)稱取步驟(2)制得的藥粉加入攪拌裝置取注射用水100ml溶解，加0.5g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫50分鐘，0.45μm膜過(guò)濾，加入80ml注射液用水，加入氯化鉀0.03g、氯化鈣0.08g和氯化鈉0.149g，再補(bǔ)足注射液水制注射液為200ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7.5，加0.3g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫30分鐘，0.22μm膜過(guò)濾，灌裝，每支10ml，即為注射液制劑。
實(shí)施例5：治療兔瘟病的中藥注射液的制備(高組份)
(1)取香菇17g、防風(fēng)10g、黃芪27g、茯苓12g、白術(shù)9g、甘草18g、梔子13g粉碎成60目的粗粉，放入超聲振蕩器中，加入10倍量95％的乙醇浸泡40分鐘后超聲振蕩提取，時(shí)間40分鐘，頻率50hz，提取3次，合并提取液，靜置，過(guò)濾，濾液減壓濃縮成稠膏，加入10倍量的水，攪拌，靜置，過(guò)濾，濾液以10000轉(zhuǎn)/分以上的速度離心20分鐘，離心液減壓濃縮，干燥，得到中藥提取物。
(2)將步驟(1)制得的中藥提取物加6倍量的水溶解，用無(wú)機(jī)陶瓷膜進(jìn)行過(guò)濾，過(guò)濾后的藥液直接上聚酰胺柱，以每秒2ml過(guò)柱，用5倍柱體積去離子水洗脫，收集藥液，用5倍柱體積0.2％naoh溶液洗脫，收集洗脫液，濃縮，得到藥粉。
(3)稱取步驟(2)制得的藥粉加入攪拌裝置取注射用水100ml溶解，加0.5g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫50分鐘，0.45μm膜過(guò)濾，加入80ml注射液用水，加入氯化鉀0.03g、氯化鈣0.08g和氯化鈉0.149g，再補(bǔ)足注射液水制注射液為200ml，用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)ph值為7.5，加0.3g活性炭攪拌均勻，在75℃保溫30分鐘，0.22μm膜過(guò)濾，灌裝，每支10ml，即為注射液制劑。