本發(fā)明涉及天然物中有效成分提取、天然化妝品領域，具體涉及的是一種蒲公英提取物在制備美白防曬化妝品的應用。

背景技術：

隨著環(huán)境污染加重和大氣層被破壞程度加深，太陽輻射中的紫外線對皮膚的影響日益嚴重，同時伴隨著我國經(jīng)濟社會的快速發(fā)展，人們對皮膚防曬美白的保健意識逐漸增強，美白防曬化妝品種類琳瑯滿目。

太陽光譜中的中長紫外波段uva(320～400nm)與uvb(280～320nm)會對人體健康產(chǎn)生危害，長期暴露于陽光下，輕者灼傷皮膚，使得皮層脫落、色素沉淀；重者其生理組織病變，易發(fā)展為皮膚癌。涂抹防曬化妝品是一種常見的防紫外線方式，通過化學或物理作用來吸收或屏蔽紫外線，防止或降低其對人體的傷害。好的防曬化妝品不僅防曬功效強，還應該有穩(wěn)定、持續(xù)的防曬時間，對化合物的抗uva和uvb能力的測定評價波長一般分別為365nm和300nm。

人類皮膚的膚色與皮膚細胞中存在的色素種類和數(shù)量密切相關，其中黑素對皮膚顏色影響最高，黑素細胞中的酪氨酸在酪氨酸酶的催化作用下生成多巴、多巴醌等并進一步形成黑色素。酪氨酸酶是一種廣泛存在于生物體內(nèi)的、催化黑色素合成的關鍵限速酶，與生物體的重要生理過程密切相關，其活性程度高低對人體色素沉積起主要作用，也是導致果蔬褐變的主要原因。因此，通過抑制酪氨酸酶活性進而控制人體黑色素的形成。通過抑制酪氨酸酶活性，提高皮膚美白度而廣泛應用于美白化妝品和醫(yī)藥領域。當前，國內(nèi)外用于化妝品的美白劑主要為曲酸、果酸、熊果苷、杜鵑醇、楊梅黃素、葛根素、黃芩黃素、鞣酸、山奈酚等，但由于這些物質(zhì)或細胞毒性強、細胞膜穿透性差、穩(wěn)定性弱或價格昂貴缺陷，迫使業(yè)內(nèi)人員轉(zhuǎn)向自然界尋找安全、穩(wěn)定高效的酪氨酸酶抑制劑。

蒲公英始載于《唐本草》，《圖經(jīng)本草》作仆公罌，《本草綱目》作地丁蒲公英屬taraxacumwebar.全世界約2000余種。我國有70種，1變種。其中以蒲公英t.mongo.1icum分布最廣，幾遍及全國多數(shù)地區(qū)。藥蒲公英t.officinalewigg分布于歐洲、北美，在我國新疆也有分布。蒲公英含有蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、微量元素及維生素等，有豐富的營養(yǎng)價值，可生吃、炒食、做湯，是藥食兼用的植物。蒲公英(taraxacummogonon，tm)是藥食同源的菊科多年生草本植物，被衛(wèi)生部列入既是食品又是藥品的名單，具有清熱解毒、消腫散結(jié)、利尿通淋、健胃消炎、保肝利膽等功效。

蒲公英葉作為蒲公英種植產(chǎn)業(yè)的副產(chǎn)物，不僅含有上述描述含有的營養(yǎng)物質(zhì)，同時也含有很多其他生物活性物質(zhì)，如酚酸和黃酮類等。黃酮類包括木樨草素、槲皮素、芹菜素和蕓香苷及其單糖類的衍生物，如木犀草素-7-β-d-葡萄糖苷，槲皮素-3-o-葡萄糖苷。蒲公英中酚酸包括綠原酸和咖啡酸等。黃酮類和酚酸類都具有抗炎、抗菌和抗病毒等作用。關于蒲公英提取物的應用，近幾年的國內(nèi)申請的專利發(fā)現(xiàn)，主要用于提高alp活性的蒲公英提取物及其應用(cn201510390969.9)，用于一種蒲公英提取物在制備降糖藥物中的應用(cn201410355668.8)，用于一種蒲公英提取物飼料添加劑及其制備方法(cn201010106830.4)；含有蒲公英、白芨提取物的化妝品復合添加劑及其制備工藝和在化妝品中的應用(cn03132343.x)以及蒲公英低刺激護膚香皂(cn201310149019.8)。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的提供蒲公英提取物在制備美白防曬化妝品的應用，為蒲公英化妝品的開發(fā)提供新的物質(zhì)基礎。

本發(fā)明所采取的技術方案包括如下：一種蒲公英提取物在美白防曬化妝品中的應用，所述的蒲公英提取物，以蒲公英為原料，用乙醇-水混合體系為提取溶劑，在超聲波輔助下進行提取，提取液經(jīng)干燥后獲得蒲公英提取物，能夠吸收太陽紫外線中的uva和uvb，能夠抑制酪氨酸酶。

以蒲公英為原料，用乙醇-水混合體系為提取溶劑，在超聲波輔助下進行提取，提取液經(jīng)干燥后獲得蒲公英提取物。

所述的蒲公英原料為摘除花朵，自然陰干的蒲公英。

所述的干燥包括減壓濃縮干燥或冷凍干燥。

乙醇-水混合體系中，乙醇所占體積比例為1～95％。

超聲波輔助提取中，超聲功率為200～1200w，超聲時間為1～60min。

有益效果

本發(fā)明蒲公英提取物不僅對酪氨酸酶具有抑制作用，而且可吸收太陽紫外線中的uva(365nm)和uvb(300nm)，可用于制備具有抑制酪氨酸酶活性和抗紫外線的美白防曬化妝品。

附圖說明

圖1為乙醇提取得到的蒲公英提取物的hplc圖譜。

圖2為50％乙醇-水提取得到的蒲公英提取物的hplc圖譜。

圖3為水提取得到的蒲公英提取物的hplc圖譜。

具體實施方式：

以下通過具體實施案例來對本發(fā)明進一步說明，但并非限制本發(fā)明。

一種蒲公英提取物在制備美白防曬化妝品的應用，包括以下步驟：

以蒲公英為原料，用乙醇-水混合體系為提取溶劑，在超聲波輔助下進行提取，提取液經(jīng)干燥后獲得蒲公英提取物。

所述的蒲公英原料為摘除花朵，自然陰干的蒲公英，加入乙醇-水混合體系為溶劑，經(jīng)超聲提取。提取液經(jīng)減壓濃縮干燥或冷凍干燥，獲得蒲公英提取物。

所述的酪氨酸酶抑制劑為對酪氨酸酶活性具有抑制作用的美白防曬化妝品。

乙醇-水混合體系中，乙醇所占體積比例為1～95％。

超聲波輔助提取中，超聲功率為200～1200w，超聲時間為1～60min。

一種美白防曬化妝品，該美白防曬化妝品包含有效含量的蒲公英提取物作為活性成分，所述的蒲公英提取物是通過以下方法制備的：以蒲公英為原料，用乙醇-水混合體系為提取溶劑，在超聲波輔助下進行提取，提取液經(jīng)減壓濃縮干燥或冷凍干燥后獲得蒲公英提取物。所述的抗紫外線為可吸收太陽光中uva(365nm)和uvb(300nm)的防曬化妝品。

本發(fā)明的hplc檢測:波長＝280nm；安捷倫eclipsexdb-c18(250*4.6mm，5μm)；柱溫：30℃；進樣量20μl；流動相：a:0.2％乙酸-水溶液；b:100％甲醇；梯度洗脫程序：初始開始：5％b；0-35min：30％b；35-70min：50％b；70-75min：80％b；75-80min：100％b。

實施例1

①蒲公英提取物的制備：

取自然陰干的蒲公英6g粉碎，加入120ml體積分數(shù)50％的乙醇-水于玻璃燒瓶中，在室溫下，超聲功率800w，提取30min，趁熱抽濾，收集液在45℃下再旋蒸濃縮，收集濃縮液，濃縮液通過真空冷凍干燥，獲得固體含量2.25g蒲公英提取物。

②蒲公英提取物的抑制酪氨酸酶活性和uv吸收能力評價：

將制備的蒲公英提取物溶解于dmso中，配置不同濃度梯度，1、0.5、0.25、0.125和0.0625mg/ml，再配置不同梯度濃度3.0、1.5、0.75、0.375和0.1875mg/ml曲酸作為陽性對照。分別在吸收波長365nm(uva)和300nm(uvb)下，測定其吸光度，再線性擬合獲得斜率k(表示單位濃度變化對應的吸光度的變化，也即抗uva和uvb能力，k值越大，抗uva和uvb能力越強，反之亦之)

酪氨酸酶抑制實驗，不同濃度的受試樣品溶解于10％dmso水溶液，各取100μl添加至96孔板中，再加入100μl135u/ml的酪氨酸酶(溶解于ph6.8pbs緩沖液中)。在25℃下經(jīng)預混合10min，100μll-dopa(0.5mm,pbsph6.8)添加至96孔板中。反應混合液于25℃下再孵化10min。生成的多巴色素在475nm下測定吸光值。曲酸作為陽性對照抑制率方程為：％inhibition＝{[(a-b)-(c-d)]/(a-b)}×100，其中，a為沒有加入底物的吸光值(也即預孵化后空白溶液的吸光值)；b為沒有加入底物和酪氨酸酶的吸光值(在預孵化前空白溶液的吸光值)；c為測試底物的吸光值(孵化后樣品溶液的吸光值)；d為沒有添加酪氨酸酶的測試底物的吸光值(孵化前樣品溶液的吸光值)。

結(jié)果如表1所示，就k值而言，蒲公英提取物的在300nm和365nm處的數(shù)值3.80和2.09均顯著大于曲酸2.09和0.33，蒲公英提取物較曲酸具有更強的抗紫外線能力。

酪氨酸酶活抑制實驗結(jié)果如表2所示，曲酸抑制酪氨酸酶的ic50為0.92mg/ml，而蒲公英提取物抑制酪氨酸酶的ic50位0.31mg/ml，。

綜上所述，本發(fā)明的蒲公英提取物不僅具有吸收太陽光中紫外線uva和uvb能效，還能顯著抑制酪氨酸酶。

表1蒲公英提取物抗紫外線能力(n＝3)

k為線性斜率，單位濃度對應的吸光度變化，反映物質(zhì)的抗紫外線能力。

表2蒲公英提取物抑制酪氨酸酶活能力(n＝3)

ic50為抑制50％酪氨酸酶活所需物質(zhì)的濃度。

根據(jù)圖1～3得到的蒲公英提取物的有效組分見下表：